全自动组织切片染色机在常规染色中应用

全自动组织切片染色机在常规染色中应用

摘要】近年来，随着医学的发展，病理工作量不断增大，传统手工染色已不能

适应临床工作的需要。随着科学技术的发展，全自动染色机被引入病理科。目

的为提高染色质量，更好发挥染色机的作用，本科在使用全自动染色机过程中，对染色程序的设置、染液的选择和更换、仪器的特点、如何使用和保养进行探讨。方法石蜡切片入SAKURA Tissue-Tek DRS 2000全自动染色机进行HE染色。结

果切片染色鲜艳、均匀、胞核、胞质着色良好、对比清晰，结果稳定。结论仪

器的正确使用和日常的保养很重要。使用染色机切片的染色效率明显提高，染色

质量显著改善，还减轻工作强度和改善工作环境。使染色有统一的步骤，达到了

染色的标准化和规范化。SAKURA Tissue-Tek DRS 2000全自动染色机具有体积小巧，操作简单，处理能力强大，编程灵活，环保等特点。

【关键词】染色机石蜡切片 HE染色操作应用

近年来,随着医学的发展,病理工作量增大,传统的手工染色因费时、费力且染

色量小,适应不了临床的需要。全自动组织切片染色机的使用，带来了高效、安全、省时和良好的处理效果, 我科自2006年将 SAKURA Tissue-Tek DRS 2000全自动组织切片染色机应用于常规染色以来, 切片的染色效率明显提高, 染色质量显著改观。

1 材料与方法

1.1 仪器与设备日本SAKURA Tissue-Tek DRS 2000自动染片机和附带的染色篮。

1.2 试剂改良Harris苏木素，0.5%醇溶性酸化伊红, 80%乙醇，95%乙醇，无

水乙醇，TO，0.3%盐酸乙醇，0.2%碳酸锂促蓝液。

2 方法

2.1 程序的编辑新机需将常用染色程序染色时间及所需试剂输入染色机,并根

据监视器上的提示和工作中的经验完成程序编辑,在相应试剂槽内加入试剂。

2.2 染色程序,常规石蜡切片HE染色

石蜡切片经75℃烤片30min，放入染色篮置于染色机中，进行自动染色，步骤：（a）暖风烘片5min;（b）脱蜡入水：TO（1）TO（2）TO（3）各5min→95%乙醇（1）2min，→95%乙醇（2）1min，→ 80%乙醇1min →水洗1 min→蒸馏水

20S; (c)苏木精—伊红染色：Harris苏木素2min→水洗1 min→0.3%盐酸乙醇液分化

2S→水洗1 min →0.2%碳酸锂促蓝液1 min→ 水洗1 min →80%乙醇10S→0. 5%伊红3S→水洗1 min ;(d)脱水：80%乙醇12S → 95%乙醇（1）12S→95%乙醇（2）12S→

无水乙醇（1）12S→无水乙醇（2）12S。

注：1）烘片和脱蜡时间根据室温的高低而增减

2）每一步的时间根据染液的新旧和室温的高低做相应调整

3 结果

石蜡切片HE染色鲜艳、均匀,胞核、胞质着色良好、对比清晰。

4 体会

在几年的工作中,我们通过实践摸索,主要经验及体会如下：

4.1染液的选择（1）改良的Harris苏木精染液：传统Harris苏木精染液中采

用1g苏木精，200ml蒸馏水配20g硫酸铝钾，硫酸铝钾处于过饱和状态，将之减

为15g,黄氧化汞由原来0.5g减少为0.25g，改良后的染液，沉淀少、无氧化膜产生，适用于在染色机中使用；（2）切片经蒸馏水洗涤后进苏木素染液，可除去

切片水洗时所带的杂质，有利于维持苏木素染液的PH值，延长染液的使用时间；（3）沉淀酸化伊红酒精液经过酸化沉淀后去掉染料中对染色有影响的纳离子成分，加快对组织切片的染色，分化时不易脱色，颜色清晰艳丽，与蓝色的细胞核

对比突出；[1]（4）0.3%盐酸酒精分化液，使用低浓度的分化液利于控制，以防

止切片分化过度；（5）0.2%饱和碳酸锂水溶液替代0.5% (v%v)氨水溶液处理切片,减少药液挥发，延长使用时间，再用流水充分水洗蓝化，有利切片长期保存。（6）采用TO 型生物制片透明剂代替二甲苯进行脱蜡，减少环境污染，长时间观察, 染色效果与用二甲苯差异小，对诊断无影响。

4.2 质量控制 HE切片质量的好坏直接影响到诊断的准确性，而染色是HE切

片制作中的重要一步，为此，我们在每日染色工作结束后，随机抽取活检和手术

标本的切片各10例镜下观察，结果作为试剂染色时间调整和染液更换的指标，

根据本科具体情况苏木精500ml染片约4500张更换，伊红每周顾虑后添加至

500ml，约4000张更换，TO、梯度酒精每周更换降级使用。

4.3 注意事项（1）熟悉界面中英文单词的意思，便于正确操作；(2)使用前打

开水龙头并检查供排水软管，用后关闭水龙头；（3）批量染色时，要选择confirm连续工作方式，每染完一蓝，取出切片后，记住选择confirm; (4)每日常规清洁机器，定期清洗水槽, 防止进、出水水口堵塞, 影响冲洗效果；（5）染色过

程中不得打开防护罩，如需打开，应先按中止键再依据显示屏提示进行操作；（6）为减少试剂的挥发, 减少环境污染，每天在所有染色程序结束后, 用试剂槽

盖盖好试剂, 下次使用时再打开；(7）定期更换炭滤器，以免滤过效果下降，炭滤

器烤干后可再次使用; (8）动作异常时先切断电源，保持装置四周的空气流通，远

离焰火，不得拆卸、改装，不要用湿手操作各种按键。

SAKURA Tissue-Tek DRS 2000全自动组织切片染色机有如下特点：（1）体积

小巧，双层设计，能有效利用实验室的空间。（2）界面简单、操作方便电脑监

视器可显示开始时间、预计结束时间，并以图形显示染色进行情况等信息。如发

现染色程序选择错误时，还可以随时终止。（3）处理功能强大采用连续处理方式，在实施染色的过程中，可随时追加组织切片进行染色，每篮可染40张切片，可连续追加11篮，从而大幅度提高了单位时间的处理能力。工作结束有提示音，染色的同时可进行其他工作，提高工作效率。（4）染色性能高、效果稳定能设

定每个药液槽是否振动、振动幅度和次数，同时置换促进机能和溢流水洗方式，

提高清洗效果。使用相同的染色程序，同一批次的组织切片，不同的人员操作也

不会出现明显的结果差异，利于室间质控。（5）液滴分离通过对染色篮从药液

槽中提起时速度的增减可以防止切片上的药液被带入下一个槽或移动时液滴。此外，染色篮外形设计和所用材质都不易附着液滴。（6）灵活编程可根据需要设

定程序开始槽、结束槽，对无需烘烤脱蜡的切片，从水洗进入苏木素染液开始；

如只需细胞核着色，蓝化水洗后终止染色。（7）环保自动染片机在相对密闭的

空间中工作,并配有炭滤器,可减少化学试剂对工作环境的污染及对工作人员的危害。

传统的组织切片染色多为人工处理, 操作繁琐，工作量大，制作周期较长，不

能大批量处理切片，无法适应现代医学病理技术的快速发展。近年来随着科学技

术的发展，自动染色机被引入了病理科，因其独特的以人为本的智能化设计理念，周到而完善的处理程序，保证了切片染色质量的高效性、稳定性，还减轻工作强

度和改善工作环境。工作效率明显提高，使染色有统一的步骤,克服了人工操作一

些不利因素对染色的影响，达到了染色的标准化和规范化。