适配体

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适配体

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Aptamers•适配体(aptamer)是指利用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术,从人工合成的寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶分子特异结合的短单链DNA和RNA分子。

筛选得到的适配体可以与DNA,RNA,蛋白质或其它靶分子结合,影响这些靶分子的性质,从而起到改变与靶分子相关的生物学功能的效果。

•1.高亲和性•2.高特异性支持RNA为生命起源的三个假说:一、如果我们能找到完全或者主要依赖RNA进行生命活动的生物;二、如果在现存生物的基因组里找到负责基本生命活动的功能性RNA的"痕迹";三、如果我们能够从随机RNA序列库中筛选到能够完成基本生命活动的RNA序列。

1、Tuerk C, Gold L. 1990. Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: RNA ligands to bacteriophage T4 DNA polymerase.Science 249:505–102、Ellington AD, Szostak JW. 1990. In vitro selection of RNA molecules that bind specific ligands.Nature 346:818–221.Ellington和Szostak创造了适配体(aptamer)这个名词,以指代从SELEX技术中针对靶标系统进化出的核酸配体。

2.Tuerk和Gold描述了提出并命名了SELEX技术。

S ystematic E volution ofL igands by E xponentiale nrichment指数富集的配体系统进化技术——基本流程:1.设计并人工合成单链寡核苷酸文库2.文库与靶分子结合3.将与靶分子结合的适配子分离出来4.扩增分离出的适配子成次级文库5.再与靶分子结合进行下一次筛选6.克隆、测序适配体抗体体外体内靶分子范围极广靶分子具有免疫原性不易产生免疫反应易产生免疫反应适配体siRNA靶分子存于胞内靶分子存于胞内或胞外通过碱基互补作用多种作用力形式表现症状:痢疾、呕吐和腹部疼痛据报道10 -1000000个菌体细胞就可引起食物中毒引起的食物中毒事件的沙门氏菌前3 位依次为:肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)鸭沙门氏菌(S. anatum)沙门氏菌属属于肠杆菌科(Enterbac teriaceal)•Kaccffmamn-White Scheme 系统根据体细胞,鞭毛和荚膜抗原的差异把沙门氏菌分为不同血清群或血清型•根据发酵不同糖的能力,抗生素抵抗力,噬菌体类型和质粒特征来划分应用传统的检测方法整个过程需要48-72h利用快速检测技术与富集培养基技术(SELEX)相结合能使整个过程所需时间减少•以活的肠炎沙门氏菌作为产生分子探针的靶标,建立一个单链DNA文库。

核酸适配体 结合力

核酸适配体 结合力

核酸适配体(Aptamer)是一种能够高特异性、高亲和力地识别并结合靶标物质的功能核酸。

这种结合力是通过指数富集配体系统进化(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX)技术筛选获得的。

在筛选过程中,可通过对筛选体系中靶标分子和对照分子的选择,从而获得只识别靶标分子而不识别其他分子的特异性较高的核酸适配体。

核酸适配体的结合力可以与抗体相媲美,因此有“化学抗体”之称。

此外,由于核酸适配体变性复性可逆,所以也能被反复使用,且保存及运输也更加方便。

这些特性使得核酸适配体在医学等领域有广泛的应用,例如用于区分肿瘤细胞和正常细胞、高转移性的肿瘤细胞和低转移性肿瘤细胞等。

以上信息仅供参考,建议咨询生物科学或医学领域的专家或查阅相关文献,以获取更全面和准确的信息。

适配体的应用及其在口腔领域的研究进展

适配体的应用及其在口腔领域的研究进展

适配体的应用及其在口腔领域的研究进展近年来,有关适配体在生物医学领域的研究迅速发展。

适配体是一种通过指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)在DNA或RNA 文库中筛选得到单链DNA或RNA,能够与小分子、蛋白质和细胞等靶标特异性结合。

疾病的早期诊断与治疗是治愈疾病的关键,然而某些疾病可能表现出非特异性症状,导致假阴性延误治疗时机,增加治疗失败的风险。

此外,个性化的精准治疗对疾病治疗至关重要。

由于具有高特异性、低免疫原性和低成本等特点,适配体已在药物递送、疾病的诊断和治疗等方面有了广泛的应用。

本文将就适配体的特点和其在口腔医学中的应用作一综述。

1.适配体的发展和特点1.1适配体的发现与筛选自20世纪80年代Cech等发现RNA具有催化作用以来,研究者们对核酸识别并作用于特定位点的功能探索也随之兴起。

1990年,Tuerk在研究T4噬菌体DNA聚合酶(gp43)与编码mRNA间的相互作用时发现,gp43在与该mRNA5'端一个8个核苷酸的发夹结构及Shine-Dalgarno序列结合时,可以抑制该mRNA转录的开始以进行自我调节。

为探究这一相互作用,Tuerk开发了SELEX技术,即通过构建一个随机的RNA文库,利用硝酸纤维素膜筛选出与gp43有亲和力的RNA序列,对其进行扩增并进行下一轮筛选,如此往复,最终获得2个能特异性结合gp43的RNA序列。

同年,Ellington等通过类似方法,开发出能与对应靶标特异性结合的核酸片段,并将这种片段命名为“aptamer(适配体)”。

适配体在与靶标结合时,会形成茎、环、发夹、突起、假结和G-四链体等结构,通过氢键、范德华力、碱基堆积力、静电作用和疏水相互作用等与靶标形成一个稳定的复合物结构。

随着技术进步,SELEX技术也不断得到革新和发展。

as1411适配体结构式

as1411适配体结构式

as1411适配体结构式
答案:AS1411适配体的结构式是:胆固醇-T碱基-AS1411。

在这个结构式中,T碱基的数量可以是5到13个。

分析:
AS1411适配体是一种具有特殊结构的分子,它由胆固醇、T碱基和AS1411序列组成。

其中,胆固醇作为适配体的核心部分,提供了适配体在细胞膜上的锚定作用,使得适配体能够有效地与细胞表面受体结合。

T碱基作为适配体的识别部分,能够特异识别并结合DNA分子中的AS1411序列,从而实现对DNA分子的调控作用。

AS1411适配体的结构式是:胆固醇-T碱基-AS1411。

在这个结构式中,T碱基的数量可以是5到13个,而每个T碱基可以识别并结合DNA分子中的一个AS1411序列。

因此,AS1411适配体可以与DNA分子中的多个AS1411序列结合,实现对DNA分子的调控作用。

此外,AS1411适配体还具有高度的亲和性和特异性,能够有效地与细胞表面受体结合,从而实现对细胞的调控作用。

因此,AS1411适配体在生物医学领域具有广泛的应用前景,包括肿瘤治疗、基因治疗等领域。

适配体

适配体

Aptamers•适配体(aptamer)是指利用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术,从人工合成的寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶分子特异结合的短单链DNA和RNA分子。

筛选得到的适配体可以与DNA,RNA,蛋白质或其它靶分子结合,影响这些靶分子的性质,从而起到改变与靶分子相关的生物学功能的效果。

•1.高亲和性•2.高特异性支持RNA为生命起源的三个假说:一、如果我们能找到完全或者主要依赖RNA进行生命活动的生物;二、如果在现存生物的基因组里找到负责基本生命活动的功能性RNA的"痕迹";三、如果我们能够从随机RNA序列库中筛选到能够完成基本生命活动的RNA序列。

1、Tuerk C, Gold L. 1990. Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: RNA ligands to bacteriophage T4 DNA polymerase.Science 249:505–102、Ellington AD, Szostak JW. 1990. In vitro selection of RNA molecules that bind specific ligands.Nature 346:818–221.Ellington和Szostak创造了适配体(aptamer)这个名词,以指代从SELEX技术中针对靶标系统进化出的核酸配体。

2.Tuerk和Gold描述了提出并命名了SELEX技术。

S ystematic E volution ofL igands by E xponentiale nrichment指数富集的配体系统进化技术——基本流程:1.设计并人工合成单链寡核苷酸文库2.文库与靶分子结合3.将与靶分子结合的适配子分离出来4.扩增分离出的适配子成次级文库5.再与靶分子结合进行下一次筛选6.克隆、测序适配体抗体体外体内靶分子范围极广靶分子具有免疫原性不易产生免疫反应易产生免疫反应适配体siRNA靶分子存于胞内靶分子存于胞内或胞外通过碱基互补作用多种作用力形式表现症状:痢疾、呕吐和腹部疼痛据报道10 -1000000个菌体细胞就可引起食物中毒引起的食物中毒事件的沙门氏菌前3 位依次为:肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)鸭沙门氏菌(S. anatum)沙门氏菌属属于肠杆菌科(Enterbac teriaceal)•Kaccffmamn-White Scheme 系统根据体细胞,鞭毛和荚膜抗原的差异把沙门氏菌分为不同血清群或血清型•根据发酵不同糖的能力,抗生素抵抗力,噬菌体类型和质粒特征来划分应用传统的检测方法整个过程需要48-72h利用快速检测技术与富集培养基技术(SELEX)相结合能使整个过程所需时间减少•以活的肠炎沙门氏菌作为产生分子探针的靶标,建立一个单链DNA文库。

适配体 筛选 材料 新方法

适配体 筛选 材料 新方法

适配体筛选材料新方法以适配体筛选材料新方法为标题,本文将介绍一种新的适配体筛选材料的方法。

这种方法可以提高筛选效率,减少材料浪费,并且可以应用于多种不同的适配体筛选领域。

我们需要了解适配体筛选材料的背景和重要性。

适配体是指具有特定结构和功能的分子,可以与特定的目标分子相互作用。

适配体筛选材料是一种利用适配体与目标分子之间的相互作用来筛选出具有特定功能的材料的方法。

适配体筛选材料在药物研发、催化剂设计、纳米材料制备等领域具有重要的应用价值。

传统的适配体筛选材料方法主要依赖实验室合成大量的材料,并通过试错的方法来筛选出具有特定功能的材料。

这种方法存在耗时、耗能、耗材的问题,并且筛选效率很低。

因此,研究人员一直在寻找一种更高效、更准确的适配体筛选材料方法。

近年来,随着计算机技术的发展和材料模拟方法的成熟,基于计算模拟的适配体筛选材料方法逐渐受到关注。

这种方法通过建立适配体与目标分子之间的相互作用模型,并利用计算机模拟方法来预测适配体与目标分子之间的相互作用能力。

然后,根据预测结果,选择具有潜在适配能力的材料进行实验验证。

与传统方法相比,基于计算模拟的适配体筛选材料方法具有以下优点:该方法可以节省大量的实验材料和实验时间。

通过计算机模拟,可以预测出具有潜在适配能力的材料,减少了实验室合成材料的数量和时间成本。

该方法可以提高筛选效率和准确性。

通过计算模拟,可以预测适配体与目标分子之间的相互作用能力,从而筛选出具有特定功能的材料。

这种预测结果可以指导实验设计,提高筛选效率和准确性。

基于计算模拟的适配体筛选材料方法还具有灵活性和可重复性。

通过调整计算模拟的参数和方法,可以适应不同的适配体筛选需求。

而且,该方法可以重复使用,可以在不同的适配体筛选项目中应用。

总结起来,基于计算模拟的适配体筛选材料方法是一种高效、准确、灵活和可重复的筛选方法。

该方法的应用可以提高适配体筛选材料的效率,减少材料浪费,并且可以应用于多种不同的适配体筛选领域。

适配体 粒径

适配体 粒径

适配体粒径
适配体(Adapter)是在生物实验中使用的一种分子或化合物,用于连接或适配不同的实验物质或系统,以促进其相互作用、反应或检测。

适配体在实验中起到桥梁的作用,使不同的实验组分能够有效地结合在一起。

粒径(Particle Size)是指颗粒或微粒的尺寸或直径。

在生物学研究或材料科学中,粒径通常是通过测量颗粒的尺寸来描述的。

在免疫学、细胞生物学和生物化学等领域中,适配体的粒径和形状对其功能和应用具有重要影响。

以下是一些典型的适配体粒径和其应用示例:
1.微米级适配体:通常,微米级适配体指的是直径在1-100
微米范围内的颗粒。

例如,微米级的磁性微珠适配体常用
于生物分离、免疫沉淀和细胞捕获等应用。

2.纳米级适配体:纳米级适配体指的是直径在1-100纳米范
围内的颗粒。

纳米级适配体常用于纳米药物传递、细胞内
标记、纳米生物传感等领域。

例如,金纳米颗粒适配体可
用于表面增强拉曼光谱(Surface-Enhanced Raman
Spectroscopy,SERS)以及药物载体等应用。

3.分子级适配体:分子级适配体通常是指小分子化合物或特
异的抗体分子。

它们的尺寸通常在纳米级别以下。

例如,
荧光染料适配体可以与特定蛋白质结合以进行免疫染色和
细胞成像。

需要根据实验的需要和目的选择合适的适配体粒径。

适配体的粒径和形状可以影响其穿透力、固定性、检测灵敏度、细胞毒性等特性,因此在设计和选择适配体时需要综合考虑实验要求和材料特性等因素。

适配体

适配体

适配体的类型:
★反义核苷酸链 ★随机核苷酸链
反义核苷酸链
通常包含15-20个核苷酸,其碱基组成与 它们的靶序列是互补的。但是在实际应用中, 存在反义寡核苷酸容易被核酸酶降解、对特 定靶位点的识别不够好、有一定毒性等问题, 所以要对适配体中的核苷酸进行了各种各样 的化学修饰。修饰位点一般在碱基、磷酸骨 架等。★
前景与展望
正是基于寡核苷酸适配体的高特异性、高亲和 力、易体外合成及修饰等特性,寡核苷酸适配体可作 为配基应用于靶分子的分离;其高特异性和高亲和力 地与靶分子结合特性使其可应用于靶分子的捕获;适 配体还被用作分子信标定量检测靶分子。适配体在 分析化学,在蛋白质组研究、临床医学、药物研发及 基因调控等领域已经成为重要的研究工具。随着寡 核苷酸适配体的研究进展,以及在多学科之间的广泛 渗透,其在许多领域将具有更广泛的应用前景。
通过筛选获得的特异识别肿瘤细胞的适配 体,本身就可在不需要知道正常细胞和肿瘤细 胞之间的差异成分的情况下,直接用于肿瘤的 诊断和导向治疗。而这些适配体所特异结合 的蛋白质或其它成分正是正常细胞和肿瘤细 胞之间的差异成份,因此只要能够将这些差异 成分进行纯化、鉴定和检测,新的分子标志物 就有可能被发现,它们有可能成为新的特异性 肿瘤标志物。
亲和介质筛选:一些具有亲和表面的介
质也用于适配体的筛选,如琼脂糖、纤维素及 具有亲和表面的小珠或小柱等。利用这些亲 和介质可以筛选一些小分子物质,如金属、毒 素的适配体。 ★
CE-SELEX
毛细管电泳为基础的SELEX技
术(CE-SELEX),在众多改进的适配体筛选方法 中发展较快。该方法最显著的特点是整个筛 选过程只需要4个循环。
SELEX技术大致可以分为以下几步:
①建立寡核苷酸库。 ②适配体的筛选、分离和EX筛选技术
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适配体(Aptamer) 是一种经体外筛选技术得到的寡核苷酸序列,与相应的配体有严格的识别能力和高度的亲和力,大小一般约6~40 kDa。

单链寡核苷酸,特别是RNA 的一些二级结构,如发夹、茎环、假节、凸环、G-四聚体等,可使核酸分子形成多种三维结构,成为适配体与靶物质特定区域结合的基础,二者之间的结合主要通过“假碱基对”的堆积作用、氢键作用、静电作用和形状匹配等产生高特异性的结合力。

适配体具有高特异性、靶分子广、易于体外合成和修饰等优点,已经在基础研究、临床诊断和治疗中显示了广阔的应用前景。

1核酸适配体的特点
1.1适配体的大小
大多数情况下,应用的适配体应尽可能的小,以使成本更低,可以更容易和靶标结合等。

因为功能RNA 折叠能力是有限的,适配体的最小长度通常比可控的空间序列大,而且,从体外筛选过程最初得到的适配体约50 个碱基,包括用于扩增和转录的两侧固定序列区和中间随机序列。

重组缺失分析、印记和体外合成法可以用于确定绑定于靶标所需的最短核苷酸的大小。

1.2适配体的靶标物质
大量的体外筛选已经表明筛选出的适配体可以特异地结合任何靶标,包括小的离子、核苷酸(例如ATP)、肽、大的糖蛋白(例如CD4)、病毒粒子、细胞、甚至组织适配体结合靶标有一定的特点:适配体绑定蛋白质的位点有一定的偏嗜性
1.3适配体的亲和力适配体和靶标的亲和力变化范围很大,一般和小分子的亲和力相对比较低,适配体与典型核酸分子结合的亲和力在纳摩尔范围,与核蛋白结合的亲和力约为 2 nmol;免疫球蛋白家族所包括的蛋白质筛选出的适配体亲和力在2~40 nmol 之间。

1.4适配体的特异性
研究发现与靶标有高亲和力的适配体多数可以表现为高特异性,可以区别有相似酶活性的不同酶类,然而,适配体也只是在一定程度上具有特异性,有时也可以非特异地识别非靶标物质。

例如辅酶A 的适配体也能够识别AMP
2核酸适配体的应用
2.1核酸适配体在病毒方面的应用
SELEX 技术发展至今,已针对广泛类型的病毒靶分子如逆转录酶、解螺旋酶、核衣壳蛋白和调节因子等筛选出了各自的适体。

在多种病毒病研究中显示适配体能够识别和结合到病毒的特定部位上,适配体可以作为功能阻断剂直接影响病毒的复制、翻译中特定步骤,从而中断疾病发生;适配体也可以特异性的识别被病毒感染的细胞,从而用于诊断。

2.2核酸适配体在细菌方面的应用
适配体检测抗原是近年来发展起来的新技术,将一个适配体末端交联到固相载体上作为捕获分子,去捕获待测标本中的靶物质,另一个适配体的5′端标有相应的指示剂,如荧光素、生物素、放射性同位素或胶体金等标记转化为检测分子,当检测分子与相应的待测标本结合后就会产生信号,以达到检测的目的。

现在研究认为细菌是一个含有多种成分的复合物,以整个细菌作为靶分子进行筛选就可以在未知细菌的内部结构、功能的情况下筛选出与其特异性结合的一组适配体,与单个适配体相比,一组特异性的适配体必定能提高检出的敏感性和特异性;更重要的是组合应用能够提高适配体的通用性
在细菌治疗方面的应用:虽然SELEX 技术的研究应用依然在初级阶段,但是适配子作为直接蛋白配体、抑制剂以及临床疾病的治疗药物已展现出潜在的应用前景,SELEX 技术出现8 年后就已经有应用于临床试验的产品。

适配体可以直接结合于靶物质表位,使病原不能和机体结合而使疾病得到控制。

因此在理论上,适配体可以被用于治疗任何由有害基因的表达而引起的疾病,例如细菌感染、病毒感染、炎性疾病等。

此外,适配体可以作为分子探针用于很多疾病的诊断,例如通过筛选出特异性的适配体,可以用于肿瘤的诊断。

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