PBS缓冲液的配制方法

P B S缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是常用配方，供大家参考。

用于细胞培养的PBS需含有氯化钾

称取8g NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至，最后加蒸馏水定容至1L，灭菌即可。PBS缓冲液

称取NaCl8g，KCl0.2g，Na2HPO412H2O3.63g,KH2PO40.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至，加水定容至1L，常温保存备用。一般免疫组化用PBS，主要用来清洗，都只包含Na2HPO412H2O（磷酸氢二钠）和NaH2PO42H2O（磷酸二氢钠）两种组分，母液的配制：？

0.2MNa2HPO4：称取71.6gNa2HPO4-12H2O，溶于1000ml水

0.2MNaH2PO4：称取31.2gNaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水

各种浓度PB(pH=的配制：

先配0.2MPB(pH=，100ml)：取19mlL的NaH2PO4，81mlL的Na2HPO4,即可。

然后只需将0.2MPB(pH=按相应比例适当稀释即可，如：

0.1MPB（PH=）：取500ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。

0.01MPB（PH=）：取50ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。

0.02MPB（PH=）：取100mlMPB，加水稀释至1000ml即可。？

若需要NaCL的话，加入NaCL至%（g/100ml）即可。？

另：其它各种另PH值的0.2MPB（100ml)配方：pH0.2MNaH2PO4（ml）0.2MNa2HPO4（ml）

？

928？

9010

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8515

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5149

4555

3862

3367

2872

2377

19ml81ml

1684

1387

？

？

793

关于磷酸缓冲溶液的一些问答

PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是

1.磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、

2.磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及

3.磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），

其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。

如无特殊说明，生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液（phosp hate buffered solution）。

无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）

（L PH ）

NaCl

KCl

Na2HPO4

（如为Na2HPO4·12H2O，则为）

KH2PO4

将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。常用的都是第二种。

问题1：磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered sodium），为什么用第三种或第一种呢:

这么多年以来我都以为PBS就是磷酸盐缓冲溶液，其他两种说法的英语名称常见到，不过我一直都以为他们是差不多的东西。不同的汉语翻译倒是第一次听说。

我们公司用的PBS有很多种，抗体组用的中和PBS配方就比较简单，没有K+离子，只起到缓冲PH的作用；Na2HPO4+ KH2PO4按照不同比例混匀，可以得到不同PH的缓冲液，用于不同目的，这个在分子生物学中用得很多；用于活细胞或者细菌处理的，为了保持渗透压，会加入其他的溶液，最常见的就是NaCl 和KCl调节离子浓度。以上是个人的理解，欢迎批评。:

问题2：既然抗体组的PBS是起到缓冲PH的作用，那加入80G的N ACL作用是什么需要平衡渗透压吗还有加入K离子的是不是因为细胞上NA-K泵的原因啊，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊

我觉得之所以这么配，其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢了，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊

问题3：不加NACL会怎么样啊多省钱啊

在中和磷酸盐缓冲液中，NaCl的主要作用应当是保持一定的离子浓度，以维持抗体的活性。在离子浓度过高或过低的情况下，蛋白质都会变性，抗体当然不例外。

ps:哺乳类需用生理盐水浓度是%。称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。

鸟类需用的生理盐水浓度是%。称取0.75克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。

两栖类需用的生理盐水浓度是%。称取0.65克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。[/size][/font]