各种缓冲液配制方法
各种缓冲液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）24Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
②687·H2柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
7．磷酸盐缓冲液24·2H 2Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。
24·2H 2KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃）C HOCH2NH2 分子量=121.14;0. 1M 溶液为12.114克/升。
Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
247·H 2硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
247·10H 2硼酸H 2BO 3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根）247·10H 214．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+22·10H 2。
常见缓冲液配制方法
常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。
缓冲液有许多种，其配制方
法也多种多样。
下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配
制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。
二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。
比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以
得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得
到其pH值为2.12的缓冲液。
2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。
比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以
得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。
3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。
各种缓冲液的配制方法_
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/LNaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液（Buffer）在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用，它可以维持溶液的稳定性，调节pH值，同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法：- 配制0.1 M Tris缓冲液（pH 7.4）：a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器，并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器，加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌，使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4，直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法：-配制10×PBS缓冲液：a.在1L去离子水中加入80gNaCl，2gKCl，14.4gNa2HPO4，2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液：a.取10×PBS缓冲液100mL，用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法：-配制50×TAE缓冲液：a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base，57.1 mL 0.5 M EDTA，100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液：a.取50×TAE缓冲液20mL，用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。
2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。
3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。
4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。
配制方法如下：- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。
5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。
以上是一些常见的缓冲溶液配制方法，具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。
在配制缓冲溶液时，一定要注意使用高纯度的试剂，并按照配制方法进行准确的实验操作。
常见缓冲液的配制
常见缓冲液的配制附溶液配制方法：pH7.2 0.01mol/L PBSKH2PO40.38gNa2HPO4 1.02g(或Na2HPO4·12H2O2.58g) NaCl8.0g蒸馏水加至1000mLpH7.4 PBS/TNaCl8.0gKH2PO40.2gNa2HPO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) 2.89g（或2.16g）KCl0.2g吐温200.5mL蒸馏水加至1000mLpH9.6碳酸盐缓冲液Na2CO3 1.59gNaHCO3 2.93g蒸馏水加至1000mL0.075mol/L氯化钾低渗液氯化钾0.559g，蒸馏水100ml甲醇冰醋酸（3:1）固定液甲醇3份冰醋（乙）酸1份姬姆萨染液Giemsa原液1ml1/15mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml2.3% 柠檬酸钠溶液柠檬酸钠（Na C H O ·2H O）2.3g蒸馏水100ml明胶显影液明胶粉0.2g三蒸水10ml甲酸0.1ml1% 醋酸冰醋（乙）酸1ml蒸馏水99mlH"o"33342-若丹明123染液H"o"33342（Hoechst 33342）0.25μg 若丹明123（Rhodamine 123）1.0μg PBS 1mlDPH贮备液DPH（1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg）四氢呋喃10mlDPH工作液(2×10-6mol/L)DPH贮备液0.1mlPBS 100mlFDA贮备液二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA) 5.0mg丙酮1mlFDA工作液FDA贮备液0.1mlPBS 100mlM-缓冲液（pH7.2）咪唑50mmol/L 3.404g氯化钾50mmol/L 3.7g氯化镁（MgCl ·6H O）0.5mol/L 101.65mgEGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L 380.35mg EDTA(乙二胺四乙酸) 0.1mmol/L 29.22mg疏基乙醇1mmol 0.07ml4mol/L甘油292ml蒸馏水加至1000ml1% TritonX-100液Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）1mlM-缓冲液99ml3% 戊二醛液戊二醛25% 3mlPBS 液（pH7.2）97ml0.2% 考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）0.2g 甲醇46.5ml冰醋（乙）酸7ml蒸馏水46.5ml生理盐水(0.85%氯化钠)氯化钠8.5g三蒸水1000ml0.25mol/L蔗糖水溶液（含0.003mol/L氯华钙）蔗糖85.5g无水氯华钙0.33g蒸馏水1000ml0.17mol/L氯化铵液氯化铵4.574g蒸馏水500ml0.17mol/L硝酸钠液硝酸钠7.224g 蒸馏水500ml0.12mol/L硫酸钠液硫酸钠（Na SO ·H O）19.333g蒸馏水500ml0.12mol/L草酸铵液草酸铵（（NH ）C o ·H O）8.527g蒸馏水500ml0.17mol/L醋酸铵液醋酸铵6.552g蒸馏水500ml0.32mol/L葡萄糖液葡萄糖28.83g蒸馏水500ml0.32mol/L甘油液甘油（C H (OH) ·1.26g/ml) 11.7ml蒸馏水500ml0.32mol/L乙醇液无水乙醇9.33ml蒸馏水500ml0.32mol/L丙醇液正丙醇（比重0.803）11.976ml蒸馏水500ml化学名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid 中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。
46种缓冲液配制
46种缓冲液配制1.乙醇－醋酸铵缓冲液取5mol/L醋酸溶液，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调剂pH值至，用水稀释至1000ml，即得。
2.三羟甲基氨基甲烷缓冲液取三羟甲基氨基甲烷,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调剂pH值至,即得。
3.三羟甲基氨基甲烷缓冲液取氯化钙,加L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调剂pH值至，加水稀释至100m l，即得。
4.三羟甲基氨基甲烷缓冲液取三羟甲基氨基甲烷,加盐酸赖氨酸、氯化钠、乙二胺四醋酸二钠，再加水溶解使成1000ml，调剂pH值至，即得。
5.乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液，再用水稀释至250ml,即得。
6.巴比妥缓冲液取巴比妥钠,加水使溶解并稀释至400ml，用2mo l/L盐酸溶液调剂pH值至，滤过，即得。
7.巴比妥缓冲液取巴比妥与巴比妥钠,加水使溶解成2000ml，即得。
8.巴比妥－氯化钠缓冲液取巴比妥钠,加氯化钠及水适量使溶解,另取明胶加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用L盐酸溶液调剂pH值至，再用水稀释至500ml，即得。
9.甲酸钠缓冲液取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调剂pH值至～,即得。
10.邻苯二甲酸盐缓冲液取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调剂pH值至,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
11.枸橼酸盐缓冲液取枸橼酸,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml，即得。
12.枸橼酸盐缓冲液取％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调剂pH值至，即得。
13.枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保留。
各种缓冲液配制方法
各种缓冲液配制方法缓冲液是一种用于调节溶液的pH值的溶液，常用于实验室中的生物化学和分子生物学实验中。
根据所需的pH范围和实验目的，可以使用不同的缓冲液配制方法。
以下是一些常见的缓冲液配制方法：1.磷酸盐缓冲液（PBS）磷酸盐缓冲液是一种常见的生物学实验中使用的缓冲液。
它的制备方法如下：-取一个容器，加入8克氯化钠（NaCl），0.2克磷酸二氢钠（NaH2PO4），和1.44克磷酸氢二钠（Na2HPO4）。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液适用于pH 7-9范围内的实验。
制备方法如下：- 取一个容器，加入121.14克Tris（羟甲基氨基甲烷）。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
3.醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液适用于pH3-5范围内的实验。
制备方法如下：-取一个容器，加入20毫升醋酸钠三水合物（NaC2H3O2·3H2O）。
-加入6毫升醋酸。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
4.磷酸缓冲液磷酸缓冲液适用于pH2-8范围内的实验。
制备方法如下：-取一个容器，加入0.126克磷酸二氢钾（KH2PO4）。
-加入0.680克磷酸二氢钠（Na2HPO4）。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
5.碳酸氢盐缓冲液（HEPES缓冲液）HEPES缓冲液适用于pH6-8范围内的实验。
-取一个容器，加入10克HEPES。
-加入适量的去离子水，搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。
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不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液六十一秒的常用缓冲溶液的配制&缓冲溶液原理（2007年6月16日更新）（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）甘氨酸分子量＝75.07。
0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。
（二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。
0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。
（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
①使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。
（六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L）NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。
冰乙酸11.8 mL稀释至1 L（需标定）。
（七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）X 毫升0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。
（八）磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L）Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。
NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。
（九）巴比妥纳-盐酸缓冲液巴比妥钠分子量＝206.18；0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。
（十）Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L）50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100Tris分子量＝121.14 ；0.1 mol/L溶液为12.114 g/L。
Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
（十一）、硼酸-硼砂缓冲液(0.2 mol/L硼酸根)硼砂：Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43；0.05 mol/L溶液（等于0.2 mol/L硼酸根）含19.07 g/L。
硼酸：H3BO3分子量＝61.84；0.2 mol/L的溶液为12.37 g/L。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
（十二）甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）甘氨酸分子量＝75.07；0.2 mol/L溶液含15.01 g/L（十三）硼砂-氢氧化纳缓冲液（0.05 mol/L硼酸根）硼砂Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43；0.05 mol/L硼砂溶液（等于0.2 mol/L硼酸根）为19.07Na2CO3·10H2O分子量＝286.2；0.1 mol/L溶液为28.62 g/L。
NaHCO3分子量＝84.0；0.1 mol/L溶液为8.40 g/L。
============================（2007年6月16日更新）==================================缓冲溶液的理论知识：一、缓冲溶液与缓冲作用原理（一）缓冲作用与缓冲溶液纯水在25℃时PH值为7.0，但只要与空气接触一段时间，因为吸收二氧化碳而使PH 值降到5.5左右。
1滴浓盐酸（约12.4mol·L-1）加入1升纯水中，可使[H＋]增加5000倍左右（由1.0×10-7增至5×10-4mol·L-1），若将1滴氢氧化钠溶液（12.4mol·L-1）加到1升纯水中，PH变化也有3个单位。
可见纯水的PH值因加入少量的强酸或强碱而发生很大变化。
然而，1滴浓盐酸加入到1升HOAc-NaOAc混合溶液或NaH2PO4-Na2HPO4混合溶液中，[H+]的增加不到百分之一（从1.00×10-7增至1.01×10-7mol·L-1）,PH值没有明显变化.这种能对抗外来少量强酸\强碱或稍加稀释不引起溶液PH值发生明显变化的作用叫做缓冲作用;具有缓冲作用的溶液,叫做缓冲溶液。
（二）缓冲溶液的组成缓冲溶液由足够浓度的共轭酸碱对组成。
其中，能对抗外来强碱的称为共轭酸，能对抗外来强酸的称为共轭碱，这一对共轭酸碱通常称为缓冲对、缓冲剂或缓冲系，常见的缓冲对主要有三种类型。
1．弱酸及其对应的盐例如，HOAc-NaOAc（实际上是OAc-）；H2CO3-NaHCO3；H2C8H4O4-KHC8H4O4（邻苯二甲酸-邻苯二甲酸氢钾）；H3BO3-Na2B4O7（四硼酸钠水解后产生H2BO-3）。
2．多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐，例如，NaHCO3-Na2CO3；NaH2PO4-Na2HPO4；NaH2C5HO7（柠檬酸二氢钠）-Na2HC6H5O7；KHC8H4O4-K2C8H4O4。
3．弱碱及其对应的盐例如NH3-NH+4CL-；RNH2-RNH+3A-（伯胺及其盐）；Tris-TrisH+A-（三羟甲基烷及其盐）。
（三）缓冲溶液的作用原理现以HOAc-NaOAc缓冲溶液为例，说明缓冲溶液之所以能抵抗少量强酸或强碱使PH 稳定的原理。
醋酸是弱酸，在溶液中的离解度很小，溶液中主要以HOAc分子形式存在，OAc-的浓度很低。
醋酸钠是强电解质，在溶液中全部离解成Na+和OAc-，由于同离子效应，加入NaOAc后使HOAc离解平衡向左移动，使HOAc的离解度减小，[HOAc]增大。
所以，在HOAc-NaOAc混合溶液中，存在着大量的HOAc和OAc-。
其中HOAc主要来自共轭酸HOAc，OAc-主要来自NaOAc。
这个溶液有一定的[H+]，即有一定的PH值。
在HOAc-NaOAc缓冲溶液中，存在着如下的化学平衡：在缓冲溶液中加入少量强酸（如HCL），则增加了溶液的[H+]。
假设不发生其他反应，溶液的PH值应该减小。
但是由于[H+]增加，抗酸成分即共轭碱OAc-与增加的H+结合成HOAc，破坏了HOAc原有的离解平衡，使平衡左移即向生成共轭碱HOAc分子的方向移动，直至建立新的平衡。
因为加入H+较少，溶液中OAc-浓度较大，所以加入的H+绝大部分转变成弱酸HOAc，因此溶液的PH值不发生明显的降低。
在缓冲溶液中加入少量强碱（如NaOH），则增加了溶液中OH-的浓度。
假设不发生其他反应，溶液的PH值应该增大。
但由于溶液中的H+立即加入的OH-结合成更难离解的H2O，这就破坏了HOAc原有的离解平衡，促使HOAc的离解平衡向右移动，即不断向生成H+和OAc-的方向移动，直至加入的OH-绝大部分转变成H2O，建立新的平衡为止。
因为加入的OH－少，溶液中抗碱成分即共轭酸HOAc的浓度较大，因此溶液的PH值不发生明显升高。
在溶液稍加稀释时，其中[H+]虽然降低了，但[OAc-]同时降低了，同离子效应减弱，促使HOAc的离解度增加，所产生的H+可维持溶液的PH值不发生明显的变化。
所以，溶液具有抗酸、抗碱和抗稀释作用。
多元酸的酸式盐及其对应的次级盐的作用原理与前面讨论的相似。
例如，在NaH2PO4-Na2HPO4溶液中存在着离解平衡：HPO2-4是抗酸成分，通过平衡移能对抗外加酸的影响。
H2PO2-4是抗碱成分，通过平衡右移能对抗外加碱的影响。
弱碱及其对应盐的缓冲作用原理，例如，NH3-NH4CL（即NH3-NH+4）溶液中，NH3能对抗外加酸的影响是抗酸成分，NH+4能对抗外加碱的影响是抗碱成分。
前者通过下述平衡向右移动而抗酸，后者通过平衡向左移动而抗碱，从而使溶液的PH值稳定。
二、缓冲溶液PH的计算（一）亨德森方程式在缓冲溶液例如HOAc－NaOAc溶液中，有以下的离解平衡：等式两边各取负对数，则即HOAc的离解度比较小，由于溶液中大量的OAc-对HOAc所产生的同离子效应，使HOAc的离解度变得更小。
因此上式中的[HOAc]可以看作等于HOAc的总浓度[共轭酸]（即缓冲溶液中共轭酸的浓度）。
同时，在溶液中NaOAc全部离解，可以认为溶液中[OAc-]等于NaOAc的总浓度[共轭碱]（即配制的缓冲溶液中共轭碱的浓度）。
将[共轭酸]和[共轭碱]代入上式，则得（3-11)上式称为亨德森-哈塞尔巴赫方程式，简称为亨德森（Henderson）方程式。
它表明缓冲溶液的PH值决定于共轭酸的离解常数Ka和组成缓冲溶液的共轭碱与共轭酸浓度的比值。
对于一定的共轭酸，PKa为定值，所以缓冲溶液的PH就决定于两者浓度的比值即缓冲比。
当缓冲溶液加水稀释时，由于共轭碱和共轭酸的浓度受到同等程度的稀释，缓冲比是不变的；在一定的稀释度范围内，缓冲溶液的PH值实际上也几乎不变。
式(3-11)中的浓度项指的是混合溶液中共轭酸碱的浓度,而不是混合前的浓度.若混合前共轭酸的量浓度是c酸,体积是V酸,共轭碱的量浓度是c碱,体积是V碱,则式(3-11)可改写成：（3-12）若两种溶液的量浓度相等，则（3-13）若是等体积的两溶液相混合，则（3-14）以上几种形式都称为亨德森方程式，可用以计算各种组成类型缓冲溶液的PH近似值。
当用于弱酸及其对应的盐组成的缓冲溶液的PH值时，PKa即弱酸的离解常数负对数（见书后附表），[共轭碱]即[弱酸盐]。
当用于多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐组成缓冲溶液的PH值时，共轭酸即酸式盐，pKa即该酸式盐负离子的离解常数的负对数，共轭碱即该酸式盐的次级盐。
例如，NaHCO3－Na2CO3缓冲溶液的PH值：（3-15）式中PKa即H2CO3的PKa2。
同样，NaH2PO4－Na2HPO4缓冲溶液的PH值：（3-16）式中PKa为H3PO4的PKa2。
弱碱和它的共轭酸缓冲溶液的PH值也可根据式（3-11）计算。
（二）缓冲溶液PH值计算举例例5 0.1mol.L-1的HOAc500mL与0.2mol.L-1的NaOAc250mL配成缓冲溶液，计算溶液的pH值。
解：把所给条件代入式（3-11），由书后附表查得HOAc的pKa=4.75，则得：例6 将0.3mol.L-1HOAc溶液10mL与0.1mol.L-1NaOH溶液10mL混合后制成缓冲溶液，试计算这个溶液的pH值（2.5℃时，HOAc时pKa=4.75)。