实验常用试剂,缓冲液的配制方法

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分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.常见试剂配制方法:(1)磷酸盐缓冲液(PBS)的配制方法:-配制PBS需要使用NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4等化学品。

-以10倍浓度配制PBS的浓缩溶液,然后稀释为需要的浓度。

-例如,1倍浓度的PBS可以通过将1升的10倍浓度PBS溶液加入9升蒸馏水来制备。

(2) 神经元无血清培养基(Neurobasal Medium)的配制方法:- 配制Neurobasal Medium需要使用神经元培养基基本成分及其他补充物质。

-根据制造商提供的配方,按照相应比例将各种化学品溶解在无菌蒸馏水中。

-配制好的培养基可以用于维持和培养神经元体外培养。

(3) 洗涤缓冲液(Washing Buffer)的配制方法:-配制洗涤缓冲液需要使用磷酸盐缓冲液(PBS)及其他添加剂。

- 将PBS溶液中加入适当浓度的Tween-20或者Tris-HCl来制备洗涤缓冲液。

-根据实验需求,可以调整洗涤缓冲液的成分和浓度。

(4) 乙醇(Ethanol)溶液的配制方法:-配制乙醇溶液常用的浓度有70%和100%。

- 70%的乙醇溶液可以通过将70ml无菌蒸馏水加入30ml无水乙醇中配制得到。

-100%的乙醇溶液可以直接使用无水乙醇。

2.常见缓冲液配制方法:(1) Tris/Tricine缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Tricine缓冲液需要使用Tris(三羟甲基氨基甲烷)和Tricine(三甘胺酸)等化学品。

- 根据实验要求,在一定PH范围内,按照不同比例混合Tris和Tricine,溶解于适量的蒸馏水中。

(2) 氯化钾缓冲液(KCl Buffer)的配制方法:- 配制KCl Buffer需要使用KCl和其他添加剂。

-将适量的KCl和其他缓冲液成分溶解在蒸馏水中。

-根据实验要求,调整KCl的浓度和缓冲液的PH值。

(3) Tris/Acetate缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Acetate缓冲液需要使用Tris和乙酸等化学品。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂的配制方法2×SDS gel-loading buffer10×PBS10×SDS-PAGE电泳液10×转膜液细胞裂解液□组分浓度 50mM Tris-HCl(pH6.8),100mM DTT,2%SDS,0.1%Bromophenol blue,10%Glycerol□配制量 10ml□配制方法 DTT 0.1572g,Bromophenol blue 0.01g,Tris-HCl(1M pH6.8) 500ul,10% SDS 2ml,Glycerol 1ml,超纯水定容至10ml。

分装后于4度保存。

□组分浓度 NaCl 8%,KCl 0.2%,Na2HPO4.12H2O 2.9%g,KH2PO4 0.2%g□配制量 1L□配制方法称取NaCl 80.0g,KCl 2.0g,Na2HPO4.12H2O29.0g,KH2PO4 2.0g,超纯水定容至1L。

□组分浓度 Tris 250mM,甘氨酸 2M,SDS 1%□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g,甘氨酸 144.0g,SDS 10.0g,超纯水定容至1L。

□组分浓度 Tris 250mM,甘氨酸 2M□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g,甘氨酸 144.0g,超纯水定容至1L。

注意:1×转膜液的配制为100ml 10×转膜液,200ml甲醇定容至1L。

□组分浓度 NaCl 150mM,NP-40 0.5%,Tris-HCl 10mM,PMSF 0.1mM, aprotimin 2ug/ml, NaN3 0.02%□配制量 100ml□配制方法称取17mgPMSF溶于1ml甲醇,2mg aprotimin溶于10ml水配制成200ug/ml的储存液备用;称取NaCl 0.88g,NaN3 20mg,加入NP-40 0.5ml,Tris-HCl(1M pH7.2) 1ml,溶有PMSF的甲醇1ml,aprotimin储存液1ml,混匀溶解后超纯水定容至100ml。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。

pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。

将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中,调节pH值至7.4,溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。

2、二氧化碳水。

将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液(NaHCO3,0.5mol/L)加入1L水中,经过气泡交换,可制得CO2水。

3、磷酸盐缓冲液。

将200mL磷酸盐溶液(K2HPO4,0.5mol/L)加入800mL水中,调节pH值至7.2,搅拌均匀,即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。

4、EDTA标准溶液。

将25.0g EDTA·4Na(C10H14N2O8Na2)加入
1000mL水中,热溶解,调节pH值至7.0,搅拌均匀,得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。

5、肌酐标准溶液。

将10.0g肌酐(C10H13N3O8)=14.2H2O)加入
1000mL的水中,搅拌,调节pH值至7.4,搅拌均匀,即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。

二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液(Na2HPO4)加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液(Ca(H2PO4)2)中,搅拌均匀,即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。

2、弱碱缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液(NaH2PO4)
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液(Ca(HCO3)2)中,搅拌均匀,即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。

3、弱盐缓冲液。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多,根据实验需求,可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。

以下是一些常见的试剂和缓冲液配方,以及其用途和制备方法。

1. 磷酸缓冲液(Phosphate buffer)磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中,用于控制溶液的pH值,适用于酸性和碱性条件下。

常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。

2. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution)氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一,通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。

可以制备不同浓度的氯化钠溶液,常见的配方为0.9%氯化钠溶液(生理盐水)。

3. 碳酸氢盐缓冲液(Bicarbonate buffer)碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中,用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。

一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。

4. Tris缓冲液(Tris buffer)Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液,可以调节到不同的pH值。

常见的配方为50 mM Tris缓冲液(pH 7.4),需要用Tris(三氯甲烷磺酸,Tris-HCl)和盐酸来制备。

5. PBS缓冲液(Phosphate-buffered saline)PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液,具有稳定pH值和离子浓度的特点。

常见的配方为10mMPBS缓冲液(pH7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。

6. 甘氨酸缓冲液(Glycine buffer)甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中,用作电泳缓冲液和传递缓冲液。

常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液(pH8.3),需要用甘氨酸和盐酸来制备。

7. BSA溶液(Bovine serum albumin solution)BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质,用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

实验室常用试剂缓冲液配制

实验室常用试剂缓冲液配制

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物化学缓冲液,用于洗涤和稀释生物化学试样。

配方:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.42g-KH2PO4:0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.4、用1M(摩尔浓度)盐酸或1M氢氧化钠进行调节。

2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基,适用于大多数细菌和酵母菌的培养。

配方:- 水解酪蛋白(tryptone):10 g- 酵母粉(yeast extract):5 g-NaCl:10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。

可以选择添加洗涤剂Tween-20(0.1%)以提高溶解度。

SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。

配方:-NaCl:175.3g- Na3Citrate·2H2O:88.2 g-EDTA:37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC(二硫酰二甲酯)处理,增强其功能。

4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。

配方:-甲醛:37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中,制备所需浓度的甲醛溶液。

5. β-羟丁酸钠(β-Hydroxybutyrate)溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂,用于生物化学实验中。

配方:-β-羟丁酸钠:1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。

这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方,实验室试剂和缓冲液种类丰富多样,具体使用取决于研究目的和实验要求。

在进行实验之前,建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书,并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。

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实验常用试剂、缓冲液的配制方法
Ampicillin(氨卡青霉素)100mg/ml
□组份浓度100mg/ml Ampicillin
□配制量50mL
□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。

2.加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3.用0.22μm滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

Kan(卡那霉素)50mg/ml
□组分浓度50mg/ml卡那霉素
□配制量50mL
□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。

2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50mL。

3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml
□组份浓度24mg/L IPTG
□配制量50mL
□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。

2.加入40mL 灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

X- Gal 20mg/m
□组份浓度20mg/L X-Gal
□配制量50mL
□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。

2.加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解,
定容至50mL。

3.小份分装(1mL/份)后,-20℃避光保存。

LB培养基
□组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl
□配制量1L
□配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中
Tryptone(胰化蛋白胨)10g
Yeast Extract(酵母提取物)5g
NaCl(氯化钠)10g
2.加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。

3.滴加5N NaOH(约0.2mL),调节pH值至7.2-7.3。

4.加去离子水定容至1L。

5.高温高压灭菌后,4℃保存。

注:1. LB固体培养基每100ml LB培养基加入1.5g琼脂粉。

2. 5N NaOH新配后溶液加入需要重新测定。

3.待培养基温度降至50℃时,以手不烫为准,按比例加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。

50×TAE Buffer (pH8.5)
□组份浓度 2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA
□配制量100m L
□配制方法 1.称量下列试剂,置于200mL烧杯中。

Tris 24.2 g
Na2EDTA·2H2O 3.72 g
2.向烧杯中加入约80 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.加入5.71 ml的冰乙酸,充分搅拌。

4.加去离子水将溶液定容至100mL后,室温保存。

注:1xTAE的稀释(如500ml1xTAE即10mL 50xTAE稀释于490mL的去离子水)。

1%琼脂糖凝胶(核酸电泳用)
□组份浓度1%琼脂糖凝胶
□配制量100m L
□配制方法 1.称量1g琼脂糖置于200mL锥形瓶中。

2.加入100ml1×TAE Buffer,摇动混匀。

3.放入微波炉加热2min至琼脂糖完全溶化。

4.插入梳子,等温度降下来,倒胶。

1.M Tris-HCl
□组份浓度 1 M Tris-HCl(pH6.8)
□配制量100mL
□配置方法 1.称量12.11gTris 置于200mL 烧杯中。

2.加入约80mL 的去离子水,充分搅拌溶解。

3.加入11mL的浓盐酸。

4.定容至100mL,室温保存。

1.5M Tris-HCl
□组份浓度 1.5 M Tris-HCl(pH8.8)
□配制量100L
□配置方法 1.称取18.17gTris置于200mL烧杯中。

2. 加入约80mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至100mL。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH 值。

5 N NaOH
□组份浓度5N NaOH
□配制量100mL
□配置方法 1. 量取80mL 去离子水置于100~200mL 塑料烧杯中
2. 称取20g NaOH 逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌以放热。

3. 待NaOH完全溶解后,定容至100mL。

4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。

注:NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂。

2.5 N HCl
□组份浓度 2.5 N HCl
□配制量100mL
□配置方法 1.在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸
(11.6N),均匀混合。

2.室温保存。

25xPB Buffer
□组份浓度25xPB Buffer
□配制量100mL
□配制方法 1. 称量下列试剂,置于100 ML烧杯中。

Na2HPO4 (磷酸氢二钠) 2.74g
NaH2PO4(磷酸二氢钠)0.79g
2. 向烧杯中加入约80 ML去离子水,充分搅拌溶解。

3. 定容至100 ML。

1xPBS Buffer
□组份浓度1xPBS Buffer
□配制量100mL
□配制方法 1. 称量8.5g Nacl置于100 ML烧杯中。

2. 向烧杯中加入40 ML 25xPB Buffer搅拌溶解。

3. 滴加5N NaoH调节PH值至7.2,将溶液定容至1L.
4. 高温灭菌后,室温保存。

注:PBST的配制:1L 1xPBS加1ml吐温-20。

10%(W/V)过硫酸铵
□组分浓度10%(W/V)过硫酸铵
□配制量10mL
□配制方法 1.称取1g过硫酸铵;
2.加入10ml的去离子水后搅拌溶解,
3.贮存于4℃。

注:10%过硫酸铵最好现配现用,配好的溶液在4℃保存可使用2周左右,过期会失去催化效果。

10%(W/V)SDS
□组份浓度10%(W/V)
□配制量100mL
□配制方法 1.称量10gSDS 置于100~200mL 烧杯中,加入约80mL的去离子水,
68℃加热溶解。

2.滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2 。

3.将溶液定容至100mL后,室温保存
5X Tris-Glycine Buffer
□组分浓度0.125M Tris,1.25M Glycine,0.5% (W/V)SDS
□配制量1L
□配制方法 1.称取下列试剂,置于1L的烧杯中
Tris 15.1g
Glycine 94g
SDS 5.0g
2.加入约800ml的去离子水,搅拌溶解。

3.加入去离子水定容至1L后,室温保存。

注:1X Tris-Glycine Buffer(500ml即量取100ml稀释于400ml去离子水中)。

考马斯亮蓝R-250染色液
□组份浓度0.1%(W/V)考马斯亮蓝R-250,25%(V/V)异丙醇,10%(V/V)
冰醋酸
□配制量1L
□配置方法 1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。

2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中,搅拌溶解。

3.加入100mL的冰乙醋酸,均匀搅拌。

4.加入650mL的去离子水,均匀搅拌。

5.用滤纸去除颗粒物质后,室温保存。

考马斯亮蓝染色脱色液
□组份浓度10%(V/V)醋酸,5%(V/V)乙醇
□配制量1L
□配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。

醋酸100mL
乙醇50mL
dH2O 850mL
2.充分混合后使用。

膜转移缓冲液(Western杂交用)
□组份浓度39 mM Glycine,48 mM Tris,0.037%(W/V)SDS,20%(V/V)甲醇
□配制量 1 L
□配制方法 1.称量下列试剂,置于l L烧杯中。

Glycine 2.9 g
Tris 5.8 g
SDS 0.37 g
2.向烧杯中加入约600 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.加去离子水将溶液定溶至800 ml。

4.加入200 ml的甲醇,室温保存。

封闭缓冲液(Western杂交用)
□组份浓度5%(W/V)脱脂奶粉/PBST Buffer
□配制量100 mL
□配制方法 1.称0.5g脱脂奶粉加入到10ml PBST Buffer中,搅拌溶解。

2.4℃保存待用(本封闭液应该现配现用)。

100mM EDTA(PH8.0)
□组份浓度100mM EDTA
□配制量100mL
□配制方法 1.称取37.524gNa2EDTA·2H2O,置于200mL烧杯里。

2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌。

3.用NaOH调节PH值至8.0(让EDTA完全溶解)。

4.加去离子水将溶液定容至100ml。

5.高压灭菌后,室温保存。

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