常见缓冲液配制
常见缓冲液配制方法
常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。
缓冲液有许多种，其配制方
法也多种多样。
下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配
制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。
二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。
比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以
得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得
到其pH值为2.12的缓冲液。
2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。
比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以
得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。
同样，如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。
3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。
常用缓冲液的配制方法
1N
40.00
碳酸钠Na2CO3
106.00
1N
53.00
磷酸氢二钠Na2HPO4.12H2O
358.20
1N
358.20
磷酸二氢钾KH2PO4
136.10
1/15M
9.08
重铬酸钾K2Cr2O7
294.20
0.1N
4.9035
碘化钾KI
166.00
0.5N
83.00
高锰酸钾KMO4
158.00
GR.
ACS.
PA.
XЦ.
CP.
PUSS.
Puriss.
ЦДA.
LR.
EP.
Ц.
p.
pure
用途
纯度最高,杂质含量最少的试剂。适用于最精确分析及研究工作
纯度较高，杂质含量较低。适用于精确的微量分析工作，为分析实验室广泛使用
质量略低于二级试剂，适用于一般的微量分析实验，包括要求不高的工业分析和快速分析
4.2
2.65
7.35
5.4
8.60
1.40
4.4
3.70
6.30
5.6
9.10
0.90
4.6
4.90
5.10
5.8
9.40
0.60
(三)巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃)
PH
0.04M巴比妥钠溶液ml
0.2N盐酸
(毫升)
PH
0.04M巴比妥钠溶液ml
0.2N盐酸
(毫升)
6.8
100
18.4
8.4
100
0.1N
3.16
醋酸钠NaC2H3O2
82.04
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1.氯化钾-盐酸缓冲液(0・2mol/L)邻苯二甲酸氢钾：分子量=204.23,0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L 4.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)pH0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)2.2 0.40 10.60 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85Na2HPO4分子量=141.98,0.2mol/L溶液为28.40g/L。
Na2HPO4・2H2O分子量=178.05,0.2mol/L溶液含35.61g/L。
C6H8O7•H2O分子量=210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。
5.使用时可以向每升混合液中加入1g酚，若最后p H值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
6•柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0・1mol/L)柠檬酸C6H8O7・H2O：分子量210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。
常见缓冲液配制大全
常见缓冲液配制大全缓冲液乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。
乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。
巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。
巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。
巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。
甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L 氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。
邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液（Buffer）在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用，它可以维持溶液的稳定性，调节pH值，同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法：- 配制0.1 M Tris缓冲液（pH 7.4）：a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器，并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器，加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌，使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4，直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法：-配制10×PBS缓冲液：a.在1L去离子水中加入80gNaCl，2gKCl，14.4gNa2HPO4，2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液：a.取10×PBS缓冲液100mL，用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法：-配制50×TAE缓冲液：a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base，57.1 mL 0.5 M EDTA，100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液：a.取50×TAE缓冲液20mL，用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。
2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。
3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。
配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。
-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。
4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。
配制方法如下：- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。
5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。
配制方法如下：- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。
-根据所需pH值，按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。
以上是一些常见的缓冲溶液配制方法，具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。
在配制缓冲溶液时，一定要注意使用高纯度的试剂，并按照配制方法进行准确的实验操作。
常见缓冲液的配制
常见缓冲液的配制附溶液配制方法：pH7.2 0.01mol/L PBSKH2PO40.38gNa2HPO4 1.02g(或Na2HPO4·12H2O2.58g) NaCl8.0g蒸馏水加至1000mLpH7.4 PBS/TNaCl8.0gKH2PO40.2gNa2HPO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) 2.89g（或2.16g）KCl0.2g吐温200.5mL蒸馏水加至1000mLpH9.6碳酸盐缓冲液Na2CO3 1.59gNaHCO3 2.93g蒸馏水加至1000mL0.075mol/L氯化钾低渗液氯化钾0.559g，蒸馏水100ml甲醇冰醋酸（3:1）固定液甲醇3份冰醋（乙）酸1份姬姆萨染液Giemsa原液1ml1/15mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml2.3% 柠檬酸钠溶液柠檬酸钠（Na C H O ·2H O）2.3g蒸馏水100ml明胶显影液明胶粉0.2g三蒸水10ml甲酸0.1ml1% 醋酸冰醋（乙）酸1ml蒸馏水99mlH"o"33342-若丹明123染液H"o"33342（Hoechst 33342）0.25μg 若丹明123（Rhodamine 123）1.0μg PBS 1mlDPH贮备液DPH（1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg）四氢呋喃10mlDPH工作液(2×10-6mol/L)DPH贮备液0.1mlPBS 100mlFDA贮备液二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA) 5.0mg丙酮1mlFDA工作液FDA贮备液0.1mlPBS 100mlM-缓冲液（pH7.2）咪唑50mmol/L 3.404g氯化钾50mmol/L 3.7g氯化镁（MgCl ·6H O）0.5mol/L 101.65mgEGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L 380.35mg EDTA(乙二胺四乙酸) 0.1mmol/L 29.22mg疏基乙醇1mmol 0.07ml4mol/L甘油292ml蒸馏水加至1000ml1% TritonX-100液Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）1mlM-缓冲液99ml3% 戊二醛液戊二醛25% 3mlPBS 液（pH7.2）97ml0.2% 考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）0.2g 甲醇46.5ml冰醋（乙）酸7ml蒸馏水46.5ml生理盐水(0.85%氯化钠)氯化钠8.5g三蒸水1000ml0.25mol/L蔗糖水溶液（含0.003mol/L氯华钙）蔗糖85.5g无水氯华钙0.33g蒸馏水1000ml0.17mol/L氯化铵液氯化铵4.574g蒸馏水500ml0.17mol/L硝酸钠液硝酸钠7.224g 蒸馏水500ml0.12mol/L硫酸钠液硫酸钠（Na SO ·H O）19.333g蒸馏水500ml0.12mol/L草酸铵液草酸铵（（NH ）C o ·H O）8.527g蒸馏水500ml0.17mol/L醋酸铵液醋酸铵6.552g蒸馏水500ml0.32mol/L葡萄糖液葡萄糖28.83g蒸馏水500ml0.32mol/L甘油液甘油（C H (OH) ·1.26g/ml) 11.7ml蒸馏水500ml0.32mol/L乙醇液无水乙醇9.33ml蒸馏水500ml0.32mol/L丙醇液正丙醇（比重0.803）11.976ml蒸馏水500ml化学名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid 中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。
缓冲溶液及其配制方法
缓冲溶液及其配制方法
以下是一些常见的缓冲溶液及其配制方法：
1.甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25mL，加酚酞
指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75mL，用水稀释至200mL，调节pH值至
3.25～3.30即可。
2.邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加
水900mL，搅拌使溶解，用氢氧化钠试液（必要时用稀盐酸）调节pH值至5.6，加水稀释至1000mL，混匀即可。
3.氨-氯化铵缓冲液(pH8.0)：取氯化铵1.07g，加水使溶解成
100mL，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0即可。
4.氨-氯化铵缓冲液(pH10.0)：取氯化铵
5.4g，加水20mL溶
解后，加浓氯溶液35mL，再加水稀释至100mL即可。
5.硼砂-碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)：取无水碳酸钠5.30g，
加水使溶解成1000mL；另取硼砂 1.91g，加水使溶解成100mL。
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常用缓冲溶液的配制
（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）
X毫升0.2 mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。
甘氨酸分子量＝75.07。
0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。
（二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）
X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至20毫升。
邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。
0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。
（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
（四）柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液
① 使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
（五）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）
柠檬酸：C6H8O7·H2O分子量＝210.14 ；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41
g/L。
（六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L）
NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。
冰乙酸11.8 mL 稀释至1 L（需标定）。
（七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）
X 毫升 0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。
（八）磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L）
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。
NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。
（九）巴比妥纳-盐酸缓冲液
巴比妥钠分子量＝206.18；0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。
（十）Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L）
50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升。
Tris分子量＝121.14 ；0.1 mol/L溶液为12.114 g/L。
Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
（十一）、硼酸-硼砂缓冲液 (0.2 mol/L硼酸根)
硼砂：Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43；0.05 mol/L溶液（等于0.2 mol/L 硼酸根）含19.07 g/L。
硼酸：H3BO3分子量＝61.84；0.2 mol/L的溶液为12.37 g/L。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
（十二）甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）
X毫升0.2 mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2 mol/L NaOH加水稀释至200毫升。
甘氨酸分子量＝75.07；0.2 mol/L溶液含15.01 g/L
（十三）硼砂-氢氧化纳缓冲液（0.05 mol/L硼酸根）
X毫升0.05 mol/L硼砂＋Y毫升0.2 mol/L NaOH加水稀释至200毫升。
硼砂Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43；0.05 mol/L硼砂溶液（等于0.2 mol/L硼酸根）为19.07 g/L。
（十四）碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1 mol/L）(此缓冲液在Ca2＋、Mg2＋存在时不得使用).
Na2CO3·10H2O分子量＝286.2； 0.1 mol/L溶液为28.62 g/L。
NaHCO3分子量＝84.0； 0.1 mol/L溶液为8.40 g/L。
pH 2.5乳酸-乳酸钠缓冲液 (0.05mol)
A 液: 称取80%～90%乳酸10.6g,加蒸馏水稀释定容至1000mL。
B 液: 称取70%乳酸钠16g,加水稀释定容至1000mL。
取A 液16mL与B 液1mL混合稀释一倍即成。