PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。
我们实验室的配方：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：磷酸二氢钾〔KH2PO4，MW136.09〕1.361g，加双蒸水至100ml。
B液：mol/L磷酸氢二钠：酸酸氢二钠〔Na2HPO4.2H2O，MW177.99〕1.78g，加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠〔Na2HPO4.12H2O，MW358.14〕3.58g，加双蒸水至100ml。
pH －－A液〔ml〕－－B液〔ml〕一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O〔磷酸氢二钠〕NaH2PO4•2H2O〔磷酸二氢钠〕Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L 即可PBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl ，Na2HPO4•12H2O , KH2PO4 ，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是我的总结：母液的配制：Na2HPO4：称取 Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水NaH2PO4：称取 NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 PB (pH=7.4，100ml)：取19ml NaH2PO4， 81ml 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将 PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：PB〔PH=7.4〕：取 500ml PB，加水稀释至 1000ml 即可。
PB 〔PH=7.4〕：取50ml PB，加水稀释至 1000ml 即可。
PB 〔PH=7.4〕：取100ml M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液的配制方法在免疫组化和细胞培养中，常用到PBS缓冲液。
以下是我们实验室的配方，供大家参考：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾将1.361g磷酸二氢钾(KH2PO4，分子量136.09)加入100ml双蒸水中。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠将1.78g酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O，分子量177.99)加入100ml双蒸水中。
或者将3.58g酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O，分子量358.14)加入100ml双蒸水中。
pH值。
A液(ml)。
B液(ml)5.60.9.50.0.255.91.9.00.1.006.24.8.00.2.006.47.7.00.3.006.64.6.00.4.006.81.5.00.5.006.98.4.00.6.007.17.3.00.7.007.38.2.00.8.007.73.1.00.9.008.04.0.50.9.50免疫组化常用的PBS只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）、NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）和NaCl。
用于细胞培养的PBS需要含有氯化钾。
配方如下：取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4，溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L，浓度为0.01M。
PBS缓冲液的配方如下：取8g NaCl、0.2g KCl、3.63g Na2HPO4•12H2O和0.24gKH2PO4，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调节pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一，但不同实验室的配方可能不同。
以下是我的总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml水。
0.2M NaH2PO4：取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水。
不同浓度的PBS(pH=7.4)的配制：先配制0.2M PBS(pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4即可。
PBS缓冲液配制
PBS缓冲液配制0.01M 磷酸盐缓冲液〔PBS〕配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至，最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌〔至少20分钟〕，保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是，通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话，那么需要在配置的时候分别参加100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl 8.0g ； KCl 0.2g ； Na2HPO4 1.44g ； KH2PO4 0.24g ；加蒸馏水至 1000ml，调节pH 到〔用Na2HPO4或KH2PO4调节〕。
用于免疫反响时可参加 0.1%叠氮钠〔〕;当试剂中含有辣根过氧化物酶时，严禁使用叠氮钠，可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液配方PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变〔我亲自测过偏酸〕。
所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl，，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至，加水定容至1L，常温保存备用。
PBST缓冲液取300μl Tween-20 参加PBS 100ml中，混匀后即刻使用。
PBS缓冲液的配制
PBS缓冲液的配制PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是总结：母液的制： 0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol... PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4，81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各种另PH值的0.2M PB（100ml)配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml） 0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 62 7.1 33 67 7.2 28 72 7.3 23 77 7.4 19ml 81ml 7.5 16 84 7.6 13 87 7.7 10.5 0.5 7.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。
我们实验室的配方：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。
pH －－A液（ml）－－B液（ml）5.60 －－9.50 －－0.255.91 －－9.00 －－1.006.24 －－8.00 －－2.006.47 －－7.00 －－3.006.64 －－6.00 －－4.006.81 －－5.00 －－5.006.98 －－4.00 －－6.007.17 －－3.00 －－7.007.38 －－2.00 －－8.007.73 －－1.00 －－9.008.04 －－0.50 －－9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是我的总结：母液的配制： 0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。
我们实验室的配方：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。
pH －－ A液（ml）－－ B液（ml）5.60 －－ 9.50 －－ 0.255.91 －－ 9.00 －－ 1.006.24 －－ 8.00 －－ 2.006.47 －－7.00 －－ 3.006.64 －－ 6.00 －－ 4.006.81 －－ 5.00 －－ 5.006.98 －－ 4.00 －－ 6.007.17 －－ 3.00 －－ 7.007.38 －－ 2.00 －－ 8.007.73 －－ 1.00 －－ 9.008.04 －－ 0.50 －－ 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）Nacl 用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是我的总结：母液的配制： 0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。
我们实验室的配方：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。
pH －－ A液（ml）－－ B液（ml）5.60 －－ 9.50 －－ 0.255.91 －－ 9.00 －－ 1.006.24 －－ 8.00 －－ 2.006.47 －－7.00 －－ 3.006.64 －－ 6.00 －－ 4.006.81 －－ 5.00 －－ 5.006.98 －－ 4.00 －－ 6.007.17 －－ 3.00 －－ 7.007.38 －－ 2.00 －－ 8.007.73 －－ 1.00 －－ 9.008.04 －－ 0.50 －－ 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是我的总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。
我们实验室的配方：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。
pH－－A液（ml）－－B液（ml）5.60－－9.50－－55.91－－9.00－－1.006.24－－8.00－－2.006.47－－7.00－－3.006.64－－6.00－－4.006.81－－5.00－－5.006.98－－4.00－－6.007.17－－3.00－－07.38－－2.00－－8.007.73－－1.00－－9.008.04－－0.50－－9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl0.2g，Na2HPO4•12H2O3.63g, KH2PO40.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是我的总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml水0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水各种浓度PB(pH= 7.4)的配制：先配0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml0.2mol/L的NaH2PO4，81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。
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PBS缓冲液配方
不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是常用配方，供大家参考。
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L，灭菌即可。
0.01M PBS缓冲液
称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml 双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
一般免疫组化用PBS，主要用来清洗，都只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）和NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）两种组分，母液的配制：
0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制：
先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：
0.1M PB（PH=7.4）：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCL 的话，加入 NaCL 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml） 0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.5 6.5
5.8 92 8
5.9 90 10
6.0 8
7.7 12.3
6.1 85 15
6.2 81.5 18.5
6.3 7
7.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 3
7.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51 49
6.9 45 55
7.0 38 62
7.1 33 67
7.2 28 72
7.3 23 77
7.4 19ml 81ml
7.5 16 84
7.6 13 87
7.7 10.5 0.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7 93
8.0 5.3 94.7
关于磷酸缓冲溶液的一些问答
PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是
1.磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、
2.磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及
3.磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），
其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。
如无特殊说明，生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffe red solution）。
无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）
（0.15Mol/L PH 7.2）
NaCl 8.0g
KCl 0.2g
Na2HPO4 1.15g
（如为Na2HPO4·12H2O，则为2.89g）
KH2PO4 0.2g
将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10mi n~15min，存在4℃冰箱中备用。
此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。
常用的都是第二种。
问题1：磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered sodium），为什么用第三种或第一种呢:
这么多年以来我都以为PBS就是磷酸盐缓冲溶液，其他两种说法的英语名称常见到，不过我一直都以为他们是差不多的东西。
不同的汉语翻译倒是第一次听说。
我们公司用的PBS有很多种，抗体组用的中和PBS配方就比较简单，没有K+离子，只起到缓冲PH的作用；Na2HPO4+ KH2PO4 按照不同比例混匀，可以得到不同PH的缓冲液，用于不同目的，这个在分子生物学中用得很多；用于活细胞或者细菌处理的，为了保持渗透压，会加入其他的溶液，最常见的就是NaCl 和KCl调节离子浓度。
以上是个人的理解，欢迎批评。
: 问题2：既然抗体组的PBS是起到缓冲PH的作用，那加入80G的NACL作用是什么？需要平衡渗透压吗？还有加入K离子的是不是因为细胞上NA-K泵的原因啊，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊？
我觉得之所以这么配，其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢了，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊？
问题3：不加NACL会怎么样啊？多省钱啊
在中和磷酸盐缓冲液中，NaCl的主要作用应当是保持一定的离子浓度，以维持抗体的活性。
在离子浓度过高或过低的情况下，蛋白质都会变性，抗体当然不例外。
ps:哺乳类需用生理盐水浓度是0.9%。
称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。
鸟类需用的生理盐水浓度是0.75%。
称取0.75克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。
两栖类需用的生理盐水浓度是0.65%。
称取0.65克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。
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