各种缓冲液的配制方法-
常见缓冲液配制方法

常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂,主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内,有利于提高反应效率。
缓冲液有许多种,其配制方
法也多种多样。
下面将介绍常见缓冲液的配制方法,包括常用缓冲液的配
制方法,复合缓冲液的配制方法,以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。
二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液,可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。
比如,将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合,可以
得到一种磷酸缓冲液,其碱度为pH7.0。
同样,如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液,可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合,以得
到其pH值为2.12的缓冲液。
2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液,可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。
比如,将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合,可以
得到一种碳酸缓冲液,其碱度为pH7.0。
同样,如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液,可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合,以得到其pH值为2.12的缓冲液。
3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。
各种缓冲液的配制方法_

各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O,分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O,分子量=294.12;0.1mol/L溶液含29.4 g/LNaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L(1)醋酸盐溶液的配制:醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节pH值至4.6,再加水稀释至100ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml,即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)](在此,C(HAc)指醋酸的浓度,C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5(1.8乘10的-5次方),PKa=-lgKa=4.75,将PH=5.5代入,可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L,或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L,则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
最全 常见缓冲溶液配制办法

常见缓冲溶液配制方法乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7):取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L 氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0):取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1):?取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0):?取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g,氯化钠5.8g,乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9.0。
乌洛托品缓冲液:取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml。
巴比妥缓冲液(pH7.4):取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4,滤过。
巴比妥缓冲液(pH8.6):取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml。
巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8):取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8,再用水稀释至500ml。
甲酸钠缓冲液(pH3.3):取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25~3.30。
邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6):?取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml,混匀。
枸橼酸盐缓冲液:取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20%乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20%乙醇稀释至100ml。
各种缓冲液的配制方法

1.甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L)X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI,再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = 75.07,0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L)X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl,再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23,0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = 14.98,0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05,0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = 210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH 值有变化,再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
②5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L )柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O :分子量210.14,0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O :分子量294.12,0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
6.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L ) Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09,0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。
7.磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(0.2)Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05,0.2 mol/L 溶液为85.61克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22,0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03,0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。
各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法缓冲液(Buffer)在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用,它可以维持溶液的稳定性,调节pH值,同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法:- 配制0.1 M Tris缓冲液(pH 7.4):a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane)粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器,并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器,加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌,使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4,直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法:-配制10×PBS缓冲液:a.在1L去离子水中加入80gNaCl,2gKCl,14.4gNa2HPO4,2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液:a.取10×PBS缓冲液100mL,用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法:-配制50×TAE缓冲液:a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base,57.1 mL 0.5 M EDTA,100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液:a.取50×TAE缓冲液20mL,用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。
配制方法如下:- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。
-根据所需pH值,按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。
2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。
配制方法如下:- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。
-具体配制时,根据所需pH值,按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。
3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。
配制方法如下:- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。
- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。
-具体配制时,根据所需pH值,按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。
4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。
配制方法如下:- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。
-根据所需pH值,按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。
5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。
配制方法如下:- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。
-根据所需pH值,按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。
以上是一些常见的缓冲溶液配制方法,具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。
在配制缓冲溶液时,一定要注意使用高纯度的试剂,并按照配制方法进行准确的实验操作。
各种缓冲液的配制方法_

各种缓冲液的配制方法_
一、磷酸缓冲液的配制方法
1.准备:蒸馏水或纯净水、磷酸二铵,滴定级别不低于AR级;
2.计算配制用量:根据实验要求,计算出所需磷酸二铵的总量,用m1表示(单位:克);
3.将磷酸二铵加入蒸馏水或纯净水中,用称取出适量的磷酸二铵,用m2表示(单位:克),加入搅拌槽中,充分搅拌均匀,然后加入剩余的磷酸二铵(m3=m1-m2,单位:克),继续搅拌;
4.检查温度:温度应大于室温;
5.检查pH值:用pH计测量溶液的pH值,调整到与实验要求相符的值;
6.搅拌均匀,过滤,储存,可使用或直接投放使用;
二、碳酸缓冲液的配制方法
1.准备:蒸馏水或纯净水、碳酸氢钠,滴定级别不低于AR级;
2.计算配制用量:根据实验要求,计算出所需碳酸氢钠的总量,用m1表示(单位:克);
3.将碳酸氢钠加入蒸馏水或纯净水中,用称取出适量的碳酸氢钠,用m2表示(单位:克),加入搅拌槽中,充分搅拌均匀,然后加入剩余的碳酸氢钠(m3=m1-m2,单位:克),继续搅拌;
4.检查温度:温度应大于室温;
5.检查pH值:用pH计测量溶液的pH值。
各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度(pH值)的溶液,它可以稳定溶液的pH值,满足实验的需要。
不同实验需要使用不同pH值的缓冲液,因此配制方法也会有所不同。
下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液:磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液,在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。
配制方法:-0.2M磷酸盐酸(pH2.5):用稀磷酸(H3PO4)溶液调节酸度至所需pH值。
-0.2M磷酸盐盐(pH2.5):用0.2M磷酸钠(Na2HPO4)溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体,按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。
2.乙酸缓冲液:乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。
配制方法:-0.1M乙酸酸(pH3.6):用浓烧碱(CH3COOH)溶液调节酸度至所需pH值。
-0.1M乙酸盐(pH3.6):用0.1M乙酸钠(CH3COONa)溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体,按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。
3.碳酸氢盐缓冲液:碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。
配制方法:-0.1M碳酸酸(pH6.0):用稀碳酸(H2CO3)溶液调节酸度至所需pH 值。
-0.1M碳酸盐(pH6.0):用0.1M碳酸氢钠(NaHCO3)溶液调节碱度至所需pH值。
-混合上述两种液体,按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。
4. Tris缓冲液:Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液,在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。
配制方法:- 0.1 M Tris酸(pH 8.0):用三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液调节酸度至所需pH值。
- 0.1 M Tris盐(pH 8.0):用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。
- 混合上述两种液体,按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。
配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液,然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
各种缓冲液的配制方法24Na2HP6 2H2O,分子量=178.05 0.2mol∕L 溶液含35.61g∕L柠檬酸.H2O,分子量=210.14 0.1mol∕L 溶液含21.01g∕L柠檬酸.H2O,分子量=210.14 0.1mol∕L 溶液含21.01g∕L 柠檬酸钠.2HO,分子量=294.12; 0.1mol∕L溶液(1)醋酸盐溶液的配制:醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml ,再加水稀释至250ml,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60〜80ml ,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml ,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml ,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节PH值至4.6,再加水稀释至100ml,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml ,即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAC)K在此,C(HAC指醋酸的浓度,C(NaAC指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5 (1.8乘10的-5次方),PKa=-IgKa=4.75,将PH=5.5代入,可得C(NaAC)/C(HAc)=5.6通常我们配制时会使C(HAC)=0.1mol∕L,或是C(HAC)=0.2mol/L 等。
若是配制C(HAC)=0.1mol/L,则C(NaAC)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000∕17.5=5.7mL。
将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。
当然若想配制其它的浓度,也可照公式计算即可,通常缓冲溶液不能配的太稀,否则缓冲能力要下降,太浓的话又浪费试剂。
于水中,稀释至 500ml 。
22 NaH 2PO . 2 H 2O ,分子量=156.03, NaH 2PO 4 . H 2O,分子量=138.03, Na 2HPC 4 .12 H 2O,,分子量=358.22,磷酸盐缓冲液(PBS 配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4 PH 7.2)PBS 缓冲液(pH7.2 〜7.4): NaCl 137mmol∕L , KCl 2.7mmol∕L , Na2HPO4 4.3mmol∕L , KH2PO4 1.4mmol∕L称 7.9g NaCl , 0.2g KCI, 0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和 1.8g K2HPO4,溶于 800 ml 蒸馏 水中,用HCl 调节溶液的PH 值至7.4 ,最后加蒸馏水定容至 1 L 。
保存于4C 冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度 0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4 :称取 71.6g Na2HPO4-12H2O ,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4 :称取 31.2g NaH2PO4-2H2O ,溶于 1000ml 水 各种浓度PB(PH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4, 100ml):取 19ml 0.2mol∕L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol∕L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.2mol/L 溶液含 31.21g∕L 0.2mol∕L 溶液含 27.6g∕L 0.2mol∕L 溶液含 71.64g∕L0.1M PB ( PH=7.4):取500ml 0.2M PB ,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB ,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB ,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9% (g/100ml )即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB (100ml)配方:PH 0.2M NaH2PO4 (ml) 0.2M Na2HPO4 (ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M磷酸盐缓冲液(PBS配制方法称取8g NaC k 0.2g KC L 1.44g Na2HPO4 和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl 调节溶液的PH值至7.4 ,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf∕in2(1034 × 105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4C冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS 如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g, KCl 0.2g, Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g 溶于900ml 双蒸水中,用盐酸调PH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBST缓冲液取300 μ l TWeen-20加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。
现用现配。
如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,PH在6.5左右,明显偏酸。
不能用盐酸调。
虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法。
十倍稀释以后,PH自动升高到所需要的值。
不需要其它任何处理。
这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次~PH8.0的PBS配方详细1. NaCl 137mmol∕L, KCl2.7mmol∕L, Na2HPO4 4.3mmol∕L , KH2PO4 1.4mmol∕L2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 滴加浓盐酸将PH值调节至8.0 ,然后加入去离子水将溶液定容至 1 L O4. 咼温咼压火菌后,室温保存。
注意:上述PBS BUffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充 1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
0.05mol∕L PBS(≡酸缓冲液PhOSPhate BUffer Solution,PBS的配制:甲液:0.05mol∕L Na2HPO4溶液:称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸馏水至1000ml ; 乙液:0.05mol∕L KH2P04溶液:称取磷酸二氢钾,9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1。
将甲乙液分装在棕色瓶内,于4C冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需PH的缓冲液,见下表:PH 甲液ml 乙液ml5.29 2.5 97.55.59 5.0 95.05.91 10.0 90.06.24 20.0 80.06.47 30.0 70.06.64 40.0 60.06.81 50.0 50.06.98 60.0 40.07.17 70.0 30.07.38 80.0 20.07.73 90.0 10.08.04 95.0 5.0你要配制pH=6.8的PBS可用甲、乙液各50ml混合即可。
硼砂Na2B46∙IOH2O,分子量=381.43,0.05mol∕L 溶液=0.2mol∕L 硼砂含19.07g∕L 硼酸,分子量=61.84,0.2mol∕L溶液含12.37g∕L硼砂易失去结晶水,必须在带塞得瓶中保存;硼砂溶液也可以用半中和的硼酸溶液代替苯二甲酸氢钾-盐酸缓冲液溶于水中,稀释至500ml。