实验四温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响

1、实验器材：
(1)恒三温、水试浴剂锅 和(2器)试材管 (3)烧杯 (4)量筒 (5)玻璃棒 (6)白磁板
(7)铁三角架 (8)酒精灯 (10 )试管夹 (11)试管架 (12)秒表
2、实验试剂 (1) 0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液 (2) KI-I2 (4) 1%NaCl 6) 1%Na2SO4 (7) 0.1%淀粉溶 (8) 唾液淀粉酶
(5) 1%CuSO4
四、操作步骤 （一）温度对酶活性的影响
取3支试管，编号，按下加入试剂，摇匀后，将1号、3号试管放入37℃恒温 水浴中，2号试管放入冰水中。10 min后取出，将2号管内液体分为两半，用 碘化钾-碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录结果 ，将2号管剩下的一半溶液故入37℃水浴中继续保温10 min后，再用碘液实 验，结果如何?
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2
34
— ——
1.0 — —
— — 1.0
— 1.0 —
1.5 1.5 1.5
五、注意事项 1、本实验中的保温时间分别是5min或10min，但不同的唾液淀 粉 酶的活性是不同的，如果没能得到理想的颜色梯度，则需要 根据先前的现象结果适当调整酶浓度或反应时间。 2应、后加才入能酶得液到后理务想必的剂 i 充颜分色摇梯匀度，变保化证结酶果与。淀粉溶液充分混匀，反
因此大多数酶都有一个最 适温度(即 酶促反应速度最 快时的环境温度)
酶的最适温度不是一个常 数，它与作用时间长短有 关。
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（二）激活剂对酶反应的影响
激活剂大部分是一些无机离子和小分子有机物。这些物质可与酶 分子上的氨基酸侧链基团结合，可能是酶活性部位的组成部分， 也可能作为辅酶或辅基的一个组成部分起作用。
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一、实验目的 1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶 最适温度的方法。 2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应 速度的原理和方法。
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二、实验原理 （一）温度对酶活性的影响
一方面是温度升高,酶促反 应速度加快。 另一方面,温度升高,也将导 致酶活性降低甚至丧失。
一般情况下，一种激活剂对某种酶是激活剂，而对另一种酶则起
抑制作用；
剂
i
对于同一种酶，不同] 激活剂浓度会产生不同的作用。
（三）抑制剂对酶反应的影响 抑制剂能与酶分子上某些必须基团结合,使酶的活性中心的化学 性质发生改变，导致酶活力下降或丧失。酶的抑制剂一般具备两 个特点： 1、在化学结构上与被抑制的底物分子的过渡状态相似。 2、能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的 复合体。 2020/7/22
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管号
1
2
3
淀粉溶液（ml）
1.5
1.5
1.5
稀释唾液（ml）
1
1
－
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煮沸的稀释唾（ml）
－
－
1
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(二) 激活剂和抑制剂对酶活性的影响
试剂
管号
1
1%NaCl（ ml）
1.0
1%CuSO4 （ ml — ）
蒸馏水（ ml ） —
1%Na2SO4 （ ml — ）
0.1%淀粉 （ ml 1.5