放线菌的实训报告
实验四放线菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别
实验四放线菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别一、实验目的：1.了解放线菌和酵母菌的形态特征。
2.学习区分细胞的死活状态。
二、实验原理：1.放线菌的形态特征：放线菌属于细菌的一种，具有很大的细胞大小差异，通常为革兰氏阳性菌。
放线菌的形态特征包括菌落形态、细胞形态、颜色、菌丝特征等。
放线菌的菌落形态多呈现出有规则的褶皱或丝状结构。
2.酵母菌的形态特征：酵母菌属于真菌的一种，单细胞有丝分裂生殖的真菌。
酵母菌的形态特征包括细胞形态、菌落形态、颜色等。
酵母菌的细胞呈球形或卵圆形，常以单细胞或成链形式存在。
3.死活细胞鉴别：通过酵母菌培养基中的亚甲基蓝染色来判断细胞的存活状态，活细胞吸收染料颜色比较浅，死细胞吸收染料颜色比较深。
三、实验材料与方法：1.材料：-放线菌菌种：已提前分离培养好的放线菌-放线菌培养基：含有葡萄糖、酵母提取物、氨基酸、无机盐等-培养皿、显微镜、镰刀、牛津杯、显微镜载玻片-无菌移液器、无菌吸管、火焰灭菌器-酵母菌培养基：含有葡萄糖、酵母提取物、氨基酸、无机盐等-亚甲基蓝染液：浓度为1%2.方法：a.取一小块放线菌菌落，用镰刀切下悬浮于牛津杯中的放线菌菌落。
b.用无菌吸管将放线菌菌液吸入无菌移液器中，将移液器染上菌液的一侧略吹气，使菌液沾附在显微镜载玻片上。
c.让菌液干燥后，用显微镜在高倍镜下观察放线菌的细胞形态和菌落特征。
d.取一小块酵母菌菌落，用镰刀切下悬浮于牛津杯中的酵母菌菌落。
e.用无菌吸管将酵母菌菌液吸入无菌移液器中，将移液器染上菌液的一侧略吹气，使菌液沾附在显微镜载玻片上。
f.将带有酵母菌菌液的显微镜载玻片倾斜，滴入一滴亚甲基蓝染液，静置5分钟。
g.用显微镜在高倍镜下观察染色后的酵母菌细胞，根据染色程度判断细胞的存活状态。
四、实验结果与分析：通过观察放线菌的细胞形态和菌落特征，可以发现放线菌的形态特征是不规则的菌落结构，内部有菌丝状结构。
放线菌的细胞形态多样，有圆形或椭圆形细胞。
微生实验报告 2012.10.24 实验三 放线菌的形态观察
微生实验报告姓名：王晶晖专业年级：2011级生物技术学号：040312011032实验六放线菌的形态观察一、实验目的（1）用玻璃纸琼脂透析培养法及斜插片培养法观察放线菌的自然生长形态；（2）用染色法观察放线菌菌丝体二、实验原理放线菌是一类主要呈丝状生长和以孢子形式进行繁殖的革兰式阳性细菌，放线菌大多数能形成菌丝体，紧贴培养基表面或渗入培养基生长的叫基内菌丝，基内菌丝生长到一定阶段还向空气中生长出气生菌丝，气生菌丝可进一步分化产生孢子丝和孢子。
孢子丝依种类的不同，有直形、波曲、螺旋形。
放线菌的孢子有球形、椭球形、杆状或柱状等。
放线菌自然生长的个体形态观察多用玻璃纸琼脂透析培养法。
玻璃纸具有半透膜特性，其透光性与载玻片基本相同，采用玻璃纸琼脂平板透析培养法，能使放线菌生长在玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取小片，贴放在载玻片上，用显微镜镜检可观察到自然生长的放线菌个体形态。
采用斜插片培养法也能观察放线菌的个体形态。
将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。
观察时，轻轻取出盖玻片，置于玻片上直接镜检，可以观察到放线菌自然生长状态下的形态特征。
三、实验器材1．菌种：培养5~7d的5406放线菌（细黄链霉菌）（Streptomyces microflavus）的斜面菌种与平板培养物，小单孢菌（Micromonos）斜面菌种。
2．培养基：高氏一号琼脂培养基。
3．试剂及器材：无菌平皿，玻璃纸，9mL无菌水若干只，酒精灯，火柴，接种铲，接种环，镊子，玻璃涂布棒，1mL无菌吸管，剪刀，载玻片，石炭酸复红染色液，双层瓶，显微镜。
四、实验方法（一）玻璃纸培养法1．将玻璃纸剪成培养皿大小，用旧报纸隔层叠好后灭菌。
2．将放线菌斜面菌种制成103/mL的孢子悬液。
3．将高氏一号琼脂培养基融化后在火焰旁倒入无菌培养皿内，每皿倒入15mL左右，待培养基凝固后，在无菌操作下用镊子将无菌玻璃纸覆盖在琼脂平板上即制成玻璃纸琼脂平板培养基。
放线杆菌实验报告
一、实验背景猪传染性胸膜肺炎（PCP）是由猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）引起的一种猪呼吸道疾病，具有高度的传染性和致死性。
该病在全世界范围内广泛流行，给养猪业造成了巨大的经济损失。
APP的主要致病因子包括荚膜多糖、脂多糖、外膜蛋白、转铁结合蛋白和溶血毒素（Apx）。
其中，溶血毒素Apx在APP的致病过程中起着重要作用。
本研究旨在提取纯化APP溶血毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ，并研究其对小鼠的致病性和免疫原性，为研制有效的疫苗提供理论依据。
二、实验材料1. 实验动物：SPF级昆明小鼠，体重18-22g。
2. 菌株：猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）血清10型、血清7型、血清3型。
3. 试剂：DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、质粒提取试剂盒、DNA连接试剂盒、限制性内切酶、DNA聚合酶、Taq酶、琼脂糖、琼脂糖凝胶回收试剂盒、DNA marker、蛋白marker、SDS-PAGE凝胶制备试剂盒、Western blot试剂、抗体等。
4. 仪器：PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、离心机、超净工作台、孵育箱、培养箱、显微镜等。
三、实验方法1. APP溶血毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ的提取与纯化（1）分别将APP血清10型、血清7型、血清3型接种于LB液体培养基，37℃培养过夜。
（2）收集菌液，12,000r/min离心10min，弃上清，收集菌体。
（3）将菌体用PBS缓冲液重悬，加入溶菌酶，37℃水浴处理1h。
（4）12,000r/min离心10min，收集上清液。
（5）对上清液进行Sephadex G-50凝胶柱层析，收集ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ峰。
（6）对ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ峰进行透析，去除盐分。
（7）对透析后的ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ进行SDS-PAGE电泳，鉴定纯度。
2. APP溶血毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ对小鼠的致病性研究（1）将小鼠分为A、B、C三组，每组10只。
（2）A组：正常小鼠。
土壤中放线菌的分离和纯化实验（精选5篇）
土壤中放线菌的分离和纯化实验（精选5篇）第一篇：土壤中放线菌的分离和纯化实验土壤中放线菌的分离和纯化实验一、实验目的1、制作MS培养基的方法，掌握母液的保存方法。
2、掌握培养基的灭菌方法。
掌握外植体的消毒和超净工作台的使用。
4、掌握放线菌的分离纯化及染色的基本流程；5、掌握高氏一号培养基的配制方法；6、复习分离纯化放线菌的基本操作技术、培养方学会使用高压蒸汽灭菌锅。
7、培养微生物实验的设计思路和动手能力。
二、实验材料高压蒸汽锅、培养瓶、石斛的愈伤组织、超净工作台，酒精灯、酒精棉球、镊子、电子天平、称量纸、烧杯、量筒、显微镜、三角锥形瓶、无菌培养皿、接种环、酒精灯、分析天平；接种环、载玻片、盖玻片、玻璃珠、移液枪、剪刀三、实验原理植物组织培养即植物无菌培养技术，又称离体培养，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等）、组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）第 1 页或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的学科。
四、实验步骤1、配制MS培养基8L，称取马铃薯1600g、香蕉400g、蔗糖240g、活性炭8半勺、琼脂80g、配制母液。
2、配制培养液时应注意：①在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制；为防止母液被微生物污染，有机母液放在冰箱里4℃保存；②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；③量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上，量取1种，划掉1种，以免出错。
溶化琼脂用粗天平分别称取琼脂9 g、蔗糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸馏水750 mL，用电炉加热，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体呈半透明状。
实验五放线菌、霉菌及真菌的形态观察
对实验结果的理解与思考
• 通过本次实验，我们观察到了放线菌、霉菌及真菌的形态特征， 了解了它们在形态学上的差异。这些微生物在自然界中广泛分 布，对环境和生物体产生重要影响。例如，某些放线菌可以产 生抗生素，对人类医疗和农业具有重要意义；而某些霉菌可以 引起食品和物品的霉变，对人类生活造成困扰。因此，对微生 物形态学的深入了解有助于我们更好地认识和利用这些微生物 资源。
放线菌
放线菌是一种呈辐射状排列的细菌，其菌落形态通常为圆形或不规则形，表面粗糙、干燥 ，颜色多样。放线菌的细胞壁厚，呈革兰氏阳性。
霉菌
霉菌的菌落形态通常为绒毛状、絮状或蜘蛛网状，颜色多样，包括白色、灰色、褐色等。 霉菌的菌丝体非常发达，且具有分支。
真菌
真菌的形态多种多样，包括酵母、霉菌和大型真菌。真菌的菌落形态通常为圆形或椭圆形 ，表面光滑、湿润，颜色多样。真菌细胞壁薄，呈革兰氏阳性或阴性。
04 结果分析
放线菌形态分析
01
02
放线菌的形态多样，包 括链状、球状和杆状等。
放线菌的菌落形态也较 为多样，有的呈圆形， 有的呈不规则形状。
03
放线菌的菌落表面粗糙 或光滑，颜色各异，有 的呈白色，有的呈黄色 或橙色。
04
放线菌的细胞壁通常较 厚，具有分枝的菌丝， 有利于在各种环境中的 生存和繁殖。
03 实验步骤
样品采集与制备
样品采集
从不同环境（土壤、水体、空气 等）中采集放线菌、霉菌及真菌 的样本。
样品制备
将采集的样本进行分离、纯化， 制备成适合显微镜观察的样品。
显微镜观察
显微镜选择
选择适合观察放线菌、霉菌及真菌的 显微镜，如光学显微镜或电子显微镜 。
观察方法
将制备好的样品放置在显微镜下，观 察放线菌、霉菌及真菌的形态特征， 如菌丝、孢子等。
放线菌的培养与观察 实验报告
放线菌的培养和形态观察摘要本实验目的是学习并掌握放线菌的培养方法，初步了解放线菌的形态特征。
以青色链霉菌（Streptomyces glaucus）和弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)为实验材料，利用高氏I号培养基进行培养，采用插片法制片，用高倍镜观察其菌丝及孢子丝形态。
【1】青色链霉菌（S.glaucus）的菌落呈青灰色，菌丝颜色较浅，孢子丝螺旋形；弗氏链霉菌(S.fradiae)菌落呈暗黄色，菌丝颜色较浅，孢子丝较菌丝粗且直。
关键词放线菌观察插片法菌丝孢子丝引言放线菌是能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌，其菌丝（包括基内菌丝和气生菌丝）及孢子丝有着各种不同的形态，以孢子进行繁殖。
实验主要是观察其菌丝与孢子丝，为了保证菌丝与孢子丝的完整，实验采用插片法培养放线菌。
菌丝与孢子丝之间的区别比较明显，很容易区分，观察时需要注意的是它们的形态与位置关系。
1 材料和方法1.1材料1.1.1菌种青色链霉菌（S. glaucus），弗氏链霉菌（S. fradiae）。
1.1.2培养基髙氏I号培养基:可溶性淀粉2g KNO3 0.1g K2HPO4 0.05g MgSO4• 7H2O0.05g NaCl 0.05g FeSO4• 7H2O0.001g（母液）琼脂 2g 蒸馏水 100mL pH 7.2～7.41.1.3仪器和其他用品平板培养皿，盖玻片，镊子，酒精灯，显微镜，擦镜纸，接种环等。
1.2方法【1】1.2.1 配制培养基按配方配制100ml高氏I号培养基，并与培养皿一起高温灭菌30min。
1.2.2制作培养基平板1.2.3接种无菌操作分别在青色链霉菌和弗氏链霉菌高氏Ⅰ号培养基上挑取菌种在制备的高氏Ⅰ号培养基平板上密集划线接种。
1.2.4插片无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45°角插入平板琼脂接种线上。
1.2.5 培养将平板倒置，于28℃培养7d。
1.2.6 菌落形态观察。
实验六 放线菌形态的观察
实验六放线菌形态的观察摘要：对弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)进行有效的观察.实验利用高氏（Gause）一号培养基对放线菌在28℃下进行培养，并通过插片法，在普通光学显微镜下完成了对放线菌自然状态下的观察，观察到了基内菌丝以及孢子丝等结构。
关键词：放线菌插片法孢子丝链霉菌前言：放线菌与人类的生产和生活关系极为密切，目前广泛应用的抗生素约70%是各种放线菌所产生。
一些种类的放线菌还能产生各种酶制剂，此外，放线菌还可用于甾体转化、烃类发酵、石油脱蜡和污水处理等方面。
而链霉菌属（Streptomyces）是最高等的放线菌，有发育良好的分枝菌丝。
已知放线菌所产抗生素的90％都由本属产生。
放线菌是属于一类具有分支状菌丝体的细菌，革兰染色为阳性。
大多数有发达的分枝菌丝。
菌丝纤细，宽度近于杆状细菌，约0.5～1微米。
可分为营养菌丝，气生菌丝，孢子丝三种，孢子丝的形状和排列方式因种而异。
孢子丝的形态、孢子的排列以及形状都是放线菌重要的分类学指标。
培养放线菌则使用的是高氏（Gause）一号培养基。
这种培养基属于合成培养基，对于其中的成分，我们能够精确地掌握。
实验中采用插片法来观察放线菌自然状态下的基内菌丝和孢子丝等结构。
本次试验就是将以这些为基础，培养和观察青色链霉菌（S.glaucus)与弗氏链霉菌(S. fradiae)，加深对放线菌的认识和理解。
一、实验目的1、学习放线菌的观察方法——插片法；2、了解放线菌的基本形态。
二、实验原理放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
常见放线菌大多能形成菌丝体，菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子菌丝组成。
紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝（简称“基丝”），基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝（简称“气丝”），并进一步分化产生孢子丝及孢子。
有的放线菌只产生基丝而无气丝。
为避免破环细胞及菌丝体形态，通常采用插片法和玻璃纸法并结合菌丝体简单染色进行观察。
山东大学微生物实验报告放线菌形态观察
实验六：放线菌的形态观察姓名:戈奕文学号：201005140022系别：2010生物基地组别：周一下午第一组试验日期：2012年11月5日同组成员：孟亚平宋宁褚鹏程【摘要】配制高氏I号培养基用来培养青色链霉菌和弗式链霉菌，本实验运用插片法观察放线菌的形态，初步地了解放线菌的基本结构和形态。
更直观的了解，基内菌丝、气生菌丝以及气生菌丝分化而成的孢子丝以及孢子。
【关键词】青色链霉菌（Streptomyces glaucus）弗氏链霉菌（Streptomyces microflavus）高氏I号培养基插片法【前言】放线菌（actinomycetes）是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
广泛存在于自然界中，土壤中最多，主要以孢子繁殖，至今发现的共有五六十属，它与人类的关系极为密切，根据1978年的统计，在当时已发现的5128种抗生素中，有3165种为各种放线菌所产生，链霉菌属又占放线菌中的首位（占放线菌产生的抗生素中的87.5％）；有的放线菌还可用于生产维生素、酶制剂等；少数会引起人类、动物、植物的疾病。
链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其孢子丝的形态多样，而且性状较稳定，是对它们进行分类、鉴定的重要指示。
因此学习如何培养和观察它们不仅对科学研究有很大的意义，对实际生活应用也有很大的帮助。
本实验采用合成培养基进行培养，采用插片法取菌观察，不仅可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的放线菌形态，除此之外还可以采用玻璃纸法、印片法进行观察。
链霉菌属（Streptomyces）共约1，000多种，它们具有发育良好的菌丝体，也是实验中选取它们观察的重要原因。
一、实验目的1、掌握放线菌观察方法——插片法;2、了解放线菌的基本形态。
二、实验原理1．高氏I号培养基高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。
此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。
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放线菌的实训报告
放线菌实训报告
一、实训目的：
本次实训旨在了解放线菌的基本特征和培养方法，培养并观察放线菌的形态特征，掌握放线菌筛选的基本技巧，并进行放线菌的鉴定和分离。
二、实训材料和设备：
实验材料：放线菌培养基、放线菌菌种、蒸馏水、琼脂平板。
实验设备：培养箱、无菌工作台、显微镜。
三、实训步骤：
1.消毒操作：接种前用75%酒精对培养箱和显微镜进行消毒处理，以保证实验环境的无菌。
2.制备放线菌培养基：按照装瓶要求，取适量的放线菌培养基粉末，加入适量的蒸馏水，搅拌均匀后煮沸5-10分钟，灭菌后并倒入培养瓶中。
3.接种放线菌菌种：取一支含有放线菌菌种的接种环，沾取适量的菌种，均匀划线于琼脂平板上。
4.培养放线菌：将接种好的琼脂平板放入培养箱中，在适宜的
温度下进行培养，观察并记录菌落的形状、颜色等特征。
5.放线菌的分离：当菌落生长到一定程度后，用显微镜观察菌落上的单个细菌，用无菌的锥形瓶将单个菌落转移到新的琼脂平板上，分离出纯系的放线菌。
6.放线菌的鉴定：分离纯系的放线菌后，用显微镜观察菌落的形态特征，并测定其生理和生化特性，辅以其他鉴定方法，如抗生素敏感性试验等，以确定其分类地位。
四、实训结果：
通过本次实训，我们培养出了放线菌菌落，观察到它们的形态特征，如菌落的形状、颜色、质地等。
经过放线菌的分离和鉴定，我们确定了放线菌的分类地位，进一步深入了解了放线菌的基本特征。
五、实训体会：
本次实训让我们对放线菌有了更深入的了解，通过亲自操作，我们掌握了放线菌的培养方法和分离技巧，提高了实验操作能力。
放线菌作为一类重要的微生物资源，在药物和生物工程等领域有着广泛的应用前景，通过学习和实验，我们对其应用和潜力有了更深刻的认识。
六、实验总结：
本次实训通过培养、观察、分离和鉴定放线菌，加深了我们对
放线菌的认识，并掌握了放线菌培养的基本技巧。
实验中，我们要严格遵守操作规程，保持实验环境的无菌，并且要仔细观察菌落的形态变化，及时记录实验数据。
实训的目的是培养我们的实验技能和科学精神，我们需要对实验结果进行合理的分析和总结，以完善我们的实验能力。