放线菌

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放线菌

放线菌

孢子丝的形状及排列方式随菌种而 异,有直形、波曲、螺旋状等之分,常 被作为对放线菌进行分类的依据。

有的放线菌只有基内菌丝,没有气生菌
丝或气生菌丝不发达; 如诺卡氏菌、小 单孢菌。
二、放线菌的繁殖——无性繁殖
分生孢子
产生孢子 繁殖方式 孢子囊孢子
菌丝断裂
细菌的芽孢是休眠体,而放线菌的孢 子是繁殖体。
A:诺尔斯氏链霉菌;
B:皮疽诺卡氏菌;
C:酒红指孢囊菌;
D:游动放线菌;
E:小单胞菌; F:皱双孢马杜拉放 线菌
四、放线菌的分布特点及与人类的关系 放线菌分布广泛,主要生活于中性 或偏碱性、有机质丰富的土壤中,多为 腐生,少数为寄生。其代谢产物使土壤 具有特殊的泥腥味。
放线菌与人类关系密切: 产生抗生素 —— 从微生物中发现的抗生素70% 是由放线菌产生的; ◆ 产生维生素、酶制剂等 ◆ 弗兰克氏放线菌与非豆科植物共生固氮 ◆ 少数寄生型放线菌可引起人、动植物病 害。

五、几种常见的放线菌
1、链霉菌属
有发达的基内 菌丝和气生菌丝。 产生的抗生素有: 诺卡氏菌属 只有基内菌丝,无 气生菌丝或气生菌丝不 发达。 以菌丝断裂进行繁殖。 利福霉素由该属菌产生。
3、小单孢菌属 只有基内菌丝,无 气生菌丝。 基内菌丝产生许多分支, 在分支顶端产生一个孢子。 庆大霉素由该属菌产生。
第二节 放 线 菌
放线菌是一类呈丝状生长、主要以 孢子繁殖、陆生性强的原核微生物。
因菌落呈放射状而得名。
一、放线菌的形态结构 菌体呈分支丝状体(菌丝)。 在营养生长阶段菌丝大多无隔膜,为单 细胞多核微生物。 菌丝粗1μm,菌丝细胞的结构与细菌基 本相同,革兰氏染色阳性。
放线菌菌丝分为: 1、基内菌丝: 也称营养菌丝,生长于培养基内,主 要功能是吸收营养物质。 2、气生菌丝: 3、孢子丝: 孢子丝发育到一定阶段可产生孢子。 孢子常呈现不同的颜色。

放线菌详细介绍

放线菌详细介绍
(一)菌丝
根据形态和功能不同可分为: 基内菌丝(营养菌丝) 气生菌丝 孢子丝
一、放线菌的形态特征
(一)菌丝
1. 基内菌丝 •培养基内匍匐生长的菌丝,无隔, 约 0.2-0.8μm。 •通常会产生水溶性或脂溶性色素. •功能:吸收营养,所以又称营养菌 丝。
一、放线菌的形态特征
2. 气生菌丝 •由营养菌丝长出培养基外,伸向空 间的菌丝。略粗于基丝0.5-1.2μm, 也有色素产生。 •功能:气生菌丝生长到一定阶段可 分 化出繁殖结构,即孢子丝。
1.双层单位膜包围的 细胞器;其中含脂 类、蛋白质、少量 RNA和环状DNA。
2.其DNA可自主复制, 不受核DNA控制。决 定线粒体的某些遗 传性状。
3.生物氧化中心。
酵母菌的细胞结构与功能
(3)内质网:
是分布在整个细胞中的由膜构 成的管道和网状结构。在细胞 中和核膜或细胞膜相连在一起。 根据表面结构分为: 粗糙型内质网:膜外附着有核 糖体。 光滑型内质网:表面没有附着 的颗粒。 内质网功能: 起物质传递的作用,另外还有 合成脂类和脂蛋白
二、放线菌的繁殖方式
1.分生孢子(conidiospores):
•在气生菌丝顶端形 成成串或单个孢子, 菌丝分裂形成。
二、放线菌的繁殖方式
2、孢囊孢子
在气生菌丝顶端 或基内菌丝顶端膨 大或盘卷缠绕形成 孢子囊,在孢子囊 内形成孢囊孢子。
孢囊:菌丝细胞在不 同平面反复分裂,形 成孢囊孢子.有的孢囊 孢子可以丛毛运动。
酵母细胞壁结构
酵母菌的细胞结构与功能
2、细胞膜
酵母细胞膜是双磷脂 层构造,其间镶嵌着 蛋白质和甾醇。 酵母菌的细胞膜与原 核生物的基本相同。 但有的酵母菌如酿酒 酵母中含有固醇类 (甾醇),这在原核生 物是罕见的。

放线菌的概念

放线菌的概念

放线菌的概念放线菌(Actinobacteria)是细菌界中的一个重要类群,它们属于革兰氏阳性菌,通常具有分枝杆状的菌丝和分枝状的孢子体,因此得名“放线菌”。

放线菌广泛分布于自然界中,主要存在于土壤、水体、植物及动物体内等环境中。

它们是一类非常重要的微生物资源,具有巨大的应用潜力。

放线菌是许多药物的重要来源,被誉为“微生物的黄金矿井”。

已有超过70%的广谱抗生素、40%的抗肿瘤药物以及多种抗寄生虫、抗痨和免疫抑制剂等药物,都是由放线菌产生的。

放线菌的菌丝通常为分枝杆状,菌丝之间对角交织,形成复杂的菌丝网络。

这种特殊的菌丝结构使放线菌对外界环境和共生体有更广泛的适应性。

与此同时,放线菌的菌丝表面覆盖有黏液层,形成了一种粘附能力强的结构,能够黏附于植物根部和其他微生物表面,与它们形成复合体,发挥共生作用。

放线菌生命周期通常包括孢子体阶段和菌丝体阶段。

放线菌的孢子体通常是通过产生分枝状的孢子来繁殖的,这些孢子具有很强的耐受力,可以在极端的环境条件下存活很长时间。

当环境条件适宜时,孢子体会发芽生长为菌丝体,菌丝体通过不断延伸分枝,形成一个庞大的菌丝网络。

菌丝体生长阶段是放线菌进行代谢活动和产生各种代谢产物的主要阶段。

在菌丝体的一些末端会出现一些特殊的培养体,如分枝芽膨大,形成一种“分枝型”的生长类型,这种类型被认为是放线菌产生细胞内二次代谢产物的重要时期。

放线菌具有极强的代谢途径多样性,拥有一个庞大的基因组,其中包含了大量的代谢途径相关基因。

放线菌的这种多样性使其能够合成许多特殊的二次代谢产物,如抗菌素、生物活性化合物和酶等。

放线菌常常通过激活特定的基因表达来产生这些代谢产物。

此外,放线菌的基因组还具有一些调控模块的特征,这些模块能够调控菌丝的生长与分化、激活代谢途径等,使其具有更强的适应性。

放线菌对人类社会的影响远不止于药物产生。

放线菌参与了许多生物地质和生态学过程,如土壤有机质分解、养分循环等。

放线菌还参与了微生物间的相互作用,与其他微生物形成共生体,在共生体内发挥重要的生物防御作用。

放线菌

放线菌

三、放线菌的主要的繁殖方式是产生分生孢子。 四、放线菌的主要特征是产生抗生素。
作业: 1.放线菌的菌丝按形态和功能不同可分为哪
几种? 2.放线菌的主要的繁殖方式是哪种? 3.放线菌的主要特征是什么? 思考题:放线菌的菌落有哪些主要特征?
二、放线菌的繁殖 方式:
1.产生分生孢子。通过横隔方式形成。
气生菌丝顶端先波曲成为孢子丝,然后 形成横隔,细胞壁加厚并收缩,分别成 一个一个的细胞。
2.菌丝断裂(不产生孢子的)。
放线菌的繁殖过程
1-孢子萌发 4-孢子丝
2-基内菌丝体 3-气生菌丝体 5-孢子丝分化成为孢子
放线菌的生活史
本节要点
放线菌的菌落
2、放线菌的菌落形态
群体特征:形成菌落 菌落特征:
(1)由菌丝体构成。质地致密、菌落较小, 不延伸。 (2)表面状态平坦或干燥多皱,边缘有辐 射状生长的菌丝。 (3)基内菌丝与培养基紧密结合,不易用 接种针挑起;孢子丝产生大量孢子时, 菌落呈絮状、粉状或颗粒状,易挑起。 (4)菌丝和孢子常含有色素,菌落正面和 背面呈现不同色泽。 (5)液体中静置培养形成斑、膜、沉淀; 振荡培养成球状颗粒。。
(1)菌丝
① 基内菌丝 在培养基内匍匐生长的菌丝。 特点:无隔膜、较细,颜色较淡,会产生黄、橙、
红、紫、蓝、绿、黑、褐色等的色素。
功能:吸收营养物质和排泄代谢产物,所以又称营
养菌丝。
(1)菌丝
② 气生菌丝 •由营养菌丝长出培养基外, 伸向空间的、较粗和颜色较
深菌丝。略粗于基内菌丝,
有的也产生色素。
一、放线菌放线菌是一类具有丝状分枝细胞和无性 孢子的革兰氏阳性原核微生物,由于菌落呈放射状而 得名。其菌丝按形态和功能不同可分为:基内菌丝 (营养菌丝)、气生菌丝、孢子丝(繁殖菌丝)。 二、放线菌的菌落特征

什么是放线菌

什么是放线菌

什么是放线菌
什么是放线菌1、放线菌(Actinobacillus)是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强大的原核生物。

因在固体培养基上呈辐射状生长而得名。

2、大多数有发达的分枝菌丝。

菌丝纤细,宽度近于杆状细菌,约0.5~1微米。

3、可分为:营养菌丝,又称基内菌丝,主要功能是吸收营养物质,有的可产生不同的色素,是菌种鉴定的重要依据;气生菌丝,叠生于营养菌丝上,又称二级菌丝。

繁殖方式
1、放线菌主要通过形成无性孢子的方式进行繁殖,也可借菌体分裂片段繁殖。

放线菌长到一定阶段,一部分气生菌丝形成孢子丝,孢子丝成熟便分化形成许多孢子,称为分生孢子。

2、孢子的产生有以下几种方式。

凝聚分裂形成凝聚孢子。

其过程是孢子丝孢壁内的原生质围绕核物质,从顶端向基部逐渐凝聚成一串体积相等或大小相似的小段,然后小段收缩,并在每段外面产生新的孢子壁而成为圆形或椭圆形的孢子。

孢子成熟后,孢子丝壁破裂释放出孢子。

多数放线菌按此方式形成孢子,如链霉菌孢子的形成多属此类型。

对些种方式现已提出了异议。

后来证实仅有横隔分裂。

3、横隔分裂形成横隔孢子。

其过程是单细胞孢子丝长到一定阶段,首先在其中产生横隔膜,然后,在横隔膜处断裂形成孢子,称横隔孢子,也称节孢子或粉孢子。

一般呈圆柱形或杆状,体积基本相等,大小相似,约0.7~0.8x1~2.5微米。

诺卡氏菌属按此方式形成孢子。

4、有些放线菌首先在菌丝上形成孢子囊(sporangium),在孢子囊内。

放线菌

放线菌
ospora 基丝较细,0.3~0.6µ,基丝不断裂,一般无气丝, 在基丝上长出孢子梗,上面着生单个孢子,菌 落较小,不少种产生抗生素,如庆大霉素, Rifamycin • 孢囊链霉菌属 Streptosporanium 气丝的孢子丝盘卷成球形孢囊,其内形成孢囊 孢子,孢囊孢子无鞭毛,产生不少抗生素,如 抗肿瘤药物多霉菌素。
放线菌孢子的形态学特征
链霉菌的生活史
四、放线菌与细菌的比较
五、放线菌的分类
• 分类依据 在经典分类法中以形态特征为主, 以生理生化特征为辅 • 分类系统 Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology 细菌界,厚壁菌门,放线细菌组,放线细 菌纲,放线菌目
孢子丝sporogeneous mycelium :由气生 孢子丝 菌丝分枝部分分化的具有形成分生孢子 能力的繁殖菌丝,有直、波曲,螺旋、 轮生等形状。其形状和着生方式是放线 菌分类鉴定的依据。孢子丝发育到一定 阶段,其顶端形成分生孢子,分生孢子 的颜色和形状也是分类的重要的分类依 据。
• 形状:直形、波曲、螺旋等; • 着生:丛生、单轮生、双轮生
A
B
从土壤中分离的放线菌
三、放线菌的繁殖
1. 菌丝断裂:液体培养 菌丝断裂: 2. 孢子繁殖 分生孢子conidia: 分生孢子 • 由孢子丝成熟分化形成的分生孢子 横隔的形成方式: 细胞膜内陷 细胞壁和细胞膜同时内陷
Nocardia sp.
Streptomyces sp.

着生在孢子梗上的分生孢子 Micromonospora Microbispora Microtetraspora Micropolyspora
• 个体形态与构造 细胞构造: 细胞构造:基本同细菌,但无荚膜,芽孢,鞭 毛等特殊结构,细胞壁在化学组成及结构上几 乎与G+菌相同。 菌丝体: 菌丝体:菌丝体由基内菌丝,气生菌丝和孢子 丝组成。

第二节 放线菌

第二节 放线菌
特 征 细 菌 支 原 体
0.2-0.25
立克次氏体
0.2-0.5
衣 原 体
0.2-0.3


直径( μ m)
0.5-0.2
<0.25
可见性 过滤性
革兰氏染色 细胞壁 繁殖方式 培养方法 核酸种类 核糖体 产生 ATP 系统
光学显微镜 不能过滤
阳性或阴性 有坚韧的细胞壁 二均分裂 人工培养基 DNA 和 RNA 有 有
生的一类原核生物。
过去误认为“大病毒”,但它们的生物学特性更接近细菌而不同 于病毒。
在宿主细胞内观察到的 衣原体微菌落(microcolony)
2、特性
1)细胞结构与细菌类似;
具有类似的细胞壁,细胞壁内也含有胞壁酸、二氨基庚二酸; 2)细胞呈球形或椭圆形,能通过细菌滤器; 70S核糖体也是由30S和50S二个亚基组成。 3)专性活细胞内寄生;
Cncnc-micro
放线菌孢子丝形态
二、繁殖:(无性)
放线菌的繁殖
无性孢子(主要)
菌丝片段
分生孢子 分生孢子
孢囊孢子 孢囊孢子
横隔分裂
孢子 形态
1、分生孢子
细菌的芽孢是休眠体,而放线菌的孢子是繁殖体
放 线 菌 孢 子
横隔分裂方式形成孢子
2. 孢囊孢子(sporangiospore) 有的放线菌由菌丝盘卷形成孢囊,其间产 生横隔,产生孢子。孢囊成熟后,释放出孢囊 孢子。孢囊可以在气生菌丝上,也可在基内菌 丝上形成。
衣原体有一定的代谢活性,能进行有限的大分子合成,但缺 4)在宿主细胞内生长繁殖具有独特的生活周期,即存在原体和 乏产生能量的系统,必须依赖宿主获得ATP,因此又被称为 始体两种形态。 “能量寄生型生物”。

放线菌名词解释

放线菌名词解释

放线菌名词解释放线菌是一类广泛存在于环境中的细菌,其特征为形成分枝状的菌丝。

放线菌包括细菌界中的放线菌门(Actinobacteria)和高等细菌门(Cyanobacteria)中的一些细菌。

放线菌的数量众多,约有550属、7000多种。

它们在土壤、水体、海洋、林地、植物等各种环境中都有分布。

放线菌对环境非常重要,它们分解土壤有机物质、参与植物生长和养分循环,还能产生大量的生物活性物质,具有重要的经济和科学价值。

放线菌的特点是形成分枝状的丝状菌落。

它们的形态多样,有的菌丝有颜色,有的无色;有的菌丝细长,有的短粗;有的菌丝支离破碎,有的菌丝密集;有的产生分生孢子,有的不产生分生孢子。

放线菌对环境和人类有重要的影响。

首先,放线菌在土壤中起着重要的生态功能。

它们分解有机物质,形成土壤有机质,促进土壤肥力增加。

放线菌还与植物共生,帮助植物吸收养分,增强植物的抵抗力,促进植物生长。

其次,放线菌能产生多种生物活性物质,如抗生素、酶、调节生长因子等。

抗生素是放线菌最重要的代表性产物之一,它们的发现和利用对医学和农业做出了巨大贡献。

放线菌还能产生酶,用于生物工程和工业生产。

另外,放线菌还能分解有机污染物,对环境的修复也起到了重要的作用。

然而,放线菌也有一些负面的效应。

例如,一些菌株能够引起人畜的疾病,造成危害。

此外,放线菌中有一部分菌株可能存在的毒性需要引起注意。

综上所述,放线菌是一类广泛存在于环境中的细菌,其特点是形成分枝状的菌丝。

它们在生态学、医学和工业上有着重要的作用。

当前,放线菌的研究还在不断深入,我们相信在未来对放线菌的研究和应用会取得更大的突破。

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土壤中放线菌的提取与分离环境科学与工程学院环工13实验班杨健3130206323【摘要】:放线菌是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强大的原核生物。

因在固体培养基上呈辐射状生长而得名。

大多数有发达的分枝菌丝。

菌丝纤细,宽度近于杆状细菌,约0.5~1微米。

可分为:营养菌丝,又称基质菌丝,主要功能是吸收营养物质,有的可产生不同的色素,是菌种鉴定的重要依据;气生菌丝,叠生于营养菌丝上,又称二级菌丝。

放线菌[1] 是一群革兰氏阳性、含量( >55% ) 的细菌。

放线菌因菌落呈放线状而的得名。

它是一个原核生物类群,在自然界中分布很广,主要以孢子繁殖,其次是断裂生殖。

与一般细菌一样,多为腐生,少数寄生。

从土壤中提取放线菌主要用高氏一号培养基进行培养。

【关键词】:原核微生物,高氏一号,革兰氏阳性,孢子等。

【Abstrat】:Actinomycetes is a kind of main assumes the hypha growth and to spore reproductive land was more powerful prokaryotes. Named after the deep in radiating growth on solid medium. Most have developed branch hyphae. Hyphae slender, width to rod-shaped bacteria, about 0.5 ~ 1 micron. Can be divided into: vegetative hyphae, also known as the substrate mycelium, main function is to absorb nutrients, some can produce different colors, is important basis of species identification; Aerial hyphae, fold, was born in the vegetative hyphae, also known as secondary hyphae. Actinomycetes [1] is a group of gram positive bacteria, content (> 55%). Actinomycetes by colony is put a line of its name. It is a prokaryotic organisms, is widely distributed in nature, mainly by spore reproduction, followed by rupture of reproduction. As the common bacteria, and more for saprophytic, a few stray. Extracted from the soil actinomycetes mainly use high's number one medium for culture.【Key words】: procaryote microbiology, coates, number one gram positive, spores, etc.引言放线菌在自然界分布广泛,主要以孢子或菌丝状态存在于土壤、空气和水中,尤其是含水量低、有机物丰富、呈中性或微碱性的土壤中数量最多。

放线菌只是形态上的分类,属于细菌界放线菌门。

土壤特有的泥腥味,主要是放线菌的代谢产物所致。

本次实验所取的放线菌都来自于土壤,用高氏一号培养基进行对土壤放线菌的分离和培养。

一、高氏一号合成培养基的制备高氏一号琼脂培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g,硝酸钾1g,氯化钠0.5g,K2HPO4 •3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O 0.5g,FeSO4•7H2O 0.01g,琼脂20g,水1000ml,pH7.2~7.4 ,重铬酸钾50-75ug/ml(150ug/ml为宜)。

1、称量和溶化按配方先称取可溶性淀粉,放入小烧杯中,并用少量冷水将淀粉调成糊状,再加入少于所需水量的沸水中,继续加热,使可溶性淀粉完全溶化。

然后再称取其他各成分,并依次溶化,对微量成分FeSO4 .7 H2 O可先配成高浓度的贮备液,按比例换算后再加入。

待所有试剂完全溶解后,补充水分到所需的总体积。

配制固体培养基时,将称好的琼脂放入已溶的试剂中,在加热融化,最后补充所损失的水分。

2、调pH 用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸,用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。

反之,用1mol/LHCI进行调节。

3、分装和加塞将配制的培养基分装入试管内,在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。

4、包扎加塞后,将全部试管用麻绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,其外再用一根麻绳扎好。

用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

5、灭菌将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压蒸汽灭菌。

6、搁置斜面将灭菌的试管培养基冷却至500C左右,将试管口端搁在玻璃棒上。

斜面的斜度要适当,使斜面的长度约为管长 1/3。

7、无菌检查将灭菌培养基放入370C的培养箱中培养24~28h,以检查灭菌是否彻底。

配制时,先用冷水,将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000ml。

112℃灭菌20分钟。

二、土壤中放线菌的分离(1)待测样液的制备选定取样点(最好是有机质含量高的菜地),按对角交叉(五点法)取样。

先除去表层约2cm的土壤,将铲子插入土中数次,然后取2~10cm处的土壤。

盛土的容器应是无菌的。

将5点样品约1kg充分混匀,除去碎石、植物残根等,土样取回后应尽快投入实验。

称土样1g于盛有99mL无菌水或无菌生理盐水并装有玻璃珠的三角瓶中,振荡10~20min,使土样中的菌体、芽孢或孢子均匀分散,此即为10-2浓度的菌悬液,静置30s。

另取装有9ml无菌水的试管3支,编号10-3、10-4、10-5。

用无菌吸管无菌操作取10-2浓度的土壤悬液1ml并加入编号10-3的无菌试管中,并吹吸吸管2~3次,使与9ml水混匀,即为10-3浓度的土壤稀释液。

依此类推,直到稀释至10-5的试管中(每个稀释度换1支无菌吸管)。

稀释过程需在无菌室或无菌操作条件下进行。

(2)稀释倒平板法分离土壤中放线菌取2支1毫升移液管分别从10-5、10-4菌悬液中吸取1毫升菌悬液,分别注入编号10-5、10-4的培养皿内。

将温度为45~50℃的高氏一号培养基倒入上述各培养皿内,轻轻旋转使菌悬液充分混合均匀,凝固后,将培养皿倒扣放置在温暖处(28℃左右),每天观察培养基表面有无微生物菌落。

(4)平板划线法分离土壤中放线菌取一培养皿置于实验台上,左手将培养皿打开稍许,向培养皿内注入熔化的营养固体培养基10~12毫升,轻轻转动培养皿,使其中的培养基分布均匀,平放桌上,使其凝成平板。

然后在皿底用蜡笔划分A、B、C、D几个区。

每组两个平板培养基。

将培养皿底部用姆指和无名指固定成倾斜状态,在火焰旁将培养皿稍微打开。

在此同时,用环状接种针在火焰旁取少许10-2浓度的土壤稀释液,迅速送入培养皿内,在平板培养基的一边,作第1次平行划线6~7条,转动培养皿约70°角,用烧过冷却的接种针,通过第1次划线部分作第2次平行划线,然后再用同样方法,作第3次平行划线。

划线时,接种针应与平板表面成30°角左右。

不要使接种针碰到培养皿边缘,也不要将培养基划破。

(5)培养接种完毕,将平皿放入28℃恒温箱培养7天,观察平皿上放线菌(主要是链霉菌)菌落。

(6)挑菌落待三种方法的平板长出菌落后,鉴定微生物类群,并根据镜检结果,判断是否已分离到了纯菌种。

如果菌种很纯,则可转移到斜面培养基上进一步培养。

转种至斜面,菌种用牛皮纸包好,置4℃冰箱中保存。

三、观察放线菌的菌落肉眼可见菌落,绘制菌落形态图,与标准放线菌菌落特征“干燥或较干燥,小而紧密,不透明,和培养基牢固结合,颜色多样,菌落正反面颜色一般不同”作比较。

四、放线菌的简单染色(1)涂片取干净的载玻片于实验台上,在正面边角做记号,并滴一滴无菌蒸馏水于载玻片的中央,灼烧接种环,待冷却后从斜面挑取少量菌种与玻片上的水滴混匀后,在载玻片上涂布成一均匀的薄层,涂布面不宜过大。

(2)干燥干燥过程最好在空气中自然晾干,为了加速干燥,也可以在微小火焰上方烘干。

烘干后再在火焰上方快速通过3~4次,使菌体完全固定在载玻片上。

不宜在高温下长时间烤干,否则急速失水会使菌体变形。

(3)染色滴加草酸铵结晶紫染色液染色1~2min,染色液量以盖满菌膜为宜。

(4)水洗倾去染液。

斜置载玻片,用水冲去多余染液,直至流出的水呈无色为止。

(5)干燥用微热烘干或自然晾干。

(6)镜检按显微镜的操作步骤观察菌体形态,及时记录,并进行形态图的绘制。

五、观察放线菌个体形态严格按照光学显微镜的操作方法,依低倍、高倍及油镜的次序逐个观察放线菌.六、实验结果分析在分离土壤放线菌时,应为放线菌生长提供适宜环境,并且抑制其他菌落生长,即向培养基中加入抗生素和其他抑菌剂。

一般使用放线菌酮(50 mg/L)、海松素(50 mg/L)等抑制真菌。

但抑制细菌较困难,因为放线菌对一些抗菌素的反应与细菌相近,抑制剂重铬酸钾、青霉素对土壤真菌、细菌都有明显抑制作用,且不影响放线菌的正常生长,因此重铬酸钾、青霉素可作为选择性分离放线菌的抑制剂[11~12],试验表明,重铬酸钾的适宜浓度为50 mg/L,而青霉素的适宜浓度为1 mg/L。

放线菌是革兰氏阳性菌,革兰氏染色后显蓝紫色。

由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色。

最后在显微镜下观察放线菌呈放线状,有大量菌丝。

参考文献[1]微生物实验指导高等教育出版社[2]环境工程微生物学第三版[3] 《放线菌分离培养基筛选及杂菌抑制方法研究》司美茹、薛泉宏[4] 《微生物教程》高等教育出版社周德庆[5] 《微生物学实验教程》高等教育出版社周德庆[6] 徐成勇,袁野,黎丹辉.选择性分离放线菌[J].无锡轻工大学学报. 1999(02)[7] 范丽霞,郑继平,杨先会.土样自然风干时间对放线菌分离的影响[J].海南医学院学报, 2010 (3)[8] 杨宇容.徐丽华.放线菌分离方法的研究[J]. 微生物学通报.1995(2)[9] 安荣.慕小倩等.土壤放线菌分离中抑制剂的应用研究[J].西北农业学报.2002(1)[10] 郑雅楠.杨宇等.土壤放线菌分离方法研究[J].安徽农业科学.2006(6)[11] 宗兆锋.郭小芳.诱捕分离土壤中的生防放线菌J].西北农林科技大学学报(自然科学版)2004(11)[12] 司美茹.薛泉宏.放线菌分离培养基筛选及杂菌抑制方法研究[J].微生物学通报2004(2)。

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