简述细胞培养一般步骤
简述菌种扩繁和培养的工艺流程
简述菌种扩繁和培养的工艺流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢!本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!菌种扩繁和培养是微生物学研究和应用的基础工作，也是微生物发酵工业生产的前提。
细胞培养实验指导
第五章 细胞培养实验实验一 普通光学显微镜的结构和使用【实验目的】1.熟悉显微镜的结构和各部件性能。
2.掌握低倍镜、高倍镜的正确使用方法，熟悉油镜的使用方法。
【实验内容】1.显微镜成像原理（图1—1）标本（F1）置于聚光器与物镜之间，目镜、物镜、聚光器各自相当于一个凸透镜。
平行的光线自反射镜折射入聚光器，经聚光器集聚增强，照射在标本上。
标本的像经物镜放大成像于F 2处，像是倒像。
目镜将此例像进一步放大，并成像于人眼的视网膜上(F 3)（正像）。
2.显微镜的结构1）机械部分（1）镜座：显微镜的基座。
起稳定和支持整个镜身的作用。
有的显微镜在镜座内装有照明光源等构造（图1—2）。
（2）镜臂：支持镜筒和镜台。
镜筒直立式光镜在镜臂和镜柱之间有一可活图1-2 光学显微镜结构示意图1.目镜2.镜筒3.物镜转换器4.物镜5.透光孔6.聚光器7.光圈8.反光镜 9.粗调节器10.细调节器 11.镜臂 12.移片器 13.载物台 14.倾斜关节 15.镜柱 16.镜座 17.照明 图1-1显微镜成像原理动的关节叫倾斜关节，可使镜臂作适当倾斜，便于观察。
镜筒倾斜式显微镜由于镜臂和镜柱连为一体，故无此关节。
（3）镜筒：位于镜臂前方的圆筒，上端安装目镜，下端装有旋转盘。
根据镜筒的数目，光镜可分为单筒式和双筒式两类。
（4）载物台：在镜筒下方，方形或圆形．放玻片标本用。
载物台中央有一圆形通光孔，两旁备有一压片夹。
有的载物台上装有标本移动器，移动器上装有弹簧夹，用于固定标本片。
移动器的一侧有两个旋钮，转动旋钮可使玻片前后左右移动。
（5）物镜转换器：圆盘状，在镜筒下方，其上装有3—4个放大倍数不同的物镜。
旋转物镜转换器可更换物镜。
（6）聚焦调节器；为调节焦距之用。
大旋钮为粗调节器，转动粗调节钮可使镜筒(或载物台)升降，调节焦距。
旋转一周可使镜筒(或戴物台)升降10mm。
一般用于低倍镜调焦。
小旋钮为细调节器，转动细调节钮可使镜筒(或超物台)缓慢升降，每旋转一周约使镜筒(或载物台)升降0.1mm。
细胞真题
一名词解释(3’X10)杂交瘤，荧光原位杂交，孔膜区，Genome，受体，Cytokine，细胞程序性死亡，Meiosis，内吞，ECM二填空(每空1分，40空，都是基础知识，部分题目不全)1 内质网的两种类型_____和_____.2 神经系统由_____和_____两类细胞组成。
3 染色质分为_____和_____两种，_____的嗜碱性更强。
4 叶绿体的长轴范围为_____微米，短轴范围为_____微米。
5 线粒体的结构：_____、_____、_____、_____.为_____自主性细胞器。
6 高尔基体的功能是_____的合成，加工与转运，列举高尔基体中的三种酶_____、_____、_____.7 植物细胞在受到高温，_____，_____，_____时细胞膜易损伤。
8 干细胞的分类三问答(10’X5)1 物质通过细胞质膜运输的三种方式?2 举例说明干细胞的特点以及其应用。
3 动物细胞和植物细胞的区别。
4 细胞减数分裂的过程?5 举例说明细胞增殖调控与肿瘤发生的关系。
四论述(15‘X2)1 设计细胞生物学实验，研究一个新基因的功能(限800字以内)。
2 通过了解细胞生物学的发展过程，谈谈你对生命科学研究的认识和体会(限800字以内)。
一、名词解释（每题3 分）1. 染色体端粒2. 细胞周期3. 光合作用原初反应4. 溶酶体5. 原癌基因6. 核小体7. 线粒体半自主性8. 肌醇磷脂信号通路9. 细胞质基质10.分子伴侣二、填空（每空 1 分）1. 在粗面内质网上合成的____，除进行糖基化修饰外，还可进行____、_____和_______等修饰作用，以使新生多肽链折叠成正确的三维结构。
2. 在膜泡和细胞器的胞内运输中，微管为运输物质提供轨道和方向，而运输的动力则来自________ .3. 磷脂合成是在光面内质网的____面上进行的，合成的磷脂向其他细胞部位转移的方式主要是____和____ .4. 线粒体中ATP 的合成是在___上进行的，ATP 合成所需能量的直接来源是__ .5. 在细胞骨架系统中较为稳定的一种骨架纤维是____，其主要组成为____ .6. 按功能来分类，细胞连接结构可分为____、____和____ .7. 组蛋白是构成____核生物染色体的基本结构蛋白，富含带____电荷的Arg 和____等碱性氨基酸，等电点一般在pH____以上，属于碱性蛋白。
简述植物组织培养无菌操作技术等一般流程
简述植物组织培养无菌操作技术等一般流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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动物细胞培养实验2
实验题目：动物细胞培养教师：XXX实验类型：综合学时：26(参考)内容：一、实验目的通过本实验了解原代细胞与传代细胞培养的基本方法以及在细胞培养过程中严格的操作程序。
初步掌握无菌操作的基本原则，认识无菌操作在细胞培养中的重要性。
二、实验原理原代细胞培养是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官，经体外培养后，直到第一次传代为止。
这种培养，首先用无菌操作的方法，从动物体内取出所需的组织（或器官）经消化，分散成为单个游离的细胞，在人工培养下，使其不断的生长及繁殖。
细胞培养是一种操作繁琐而又要求十分严谨的实验技术。
要使细胞能在体外生长期生长，必须满足两个基本要求：一是供给细胞存活所必需的条件，如适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖及其有关的生长因子、氧气、适宜的温度，注意外环境酸碱度与渗透压的调节。
二是严格控制无菌操作。
三、试剂与器材1.材料出生后2-3天的乳鼠2.试剂平衡盐液－Hank液细胞消化液 0.5%水解乳蛋白-Hank液犊牛血清碳酸氢钠 1万单位/ml青、链霉素 3%谷氨酰胺磷酸盐缓冲液3.实验器材镊子解剖刀剪眼科剪眼科镊纱布块玻璃漏斗量筒记号笔试管试剂瓶三角瓶移液管培养皿培养瓶吸管橡皮头显微镜血细胞计数板计数器酒精灯酒精棉球试管架试管解剖板碘酒棉球口罩二氧化碳培养箱超净工作台灭菌锅倒置显微镜四、实验内容原代培养：取肾→消化分散组织→计数与稀释→分装培养→观察。
传代培养：配置培养液→消化细胞→细胞计数→培养观察。
培养细胞冷冻保存。
五、关键步骤及注意事项1. 注意无菌操作，及时更换培养液。
六、思考题1. 简述细胞传代培养的操作程序注意事项？2. 细胞培养获得成功的关键要素是什么？3. 简述体外培养细胞的形态特征及其生长阶段。
动物细胞与组织培养
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
传代培养
动物细胞生长特性：
细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，
称为细胞贴壁。 要求：
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂 增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
细胞贴壁过程
3.有关概念:
注意： ①概念理解：原代培养、传代培养、细胞株 、 细胞系 ②胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项 ③动物细胞培养和植物组织培养的区别
思考与探究：
如何用细胞培养技术，为烧伤病 人植皮？
取该患者的皮肤进行 细胞培养,获得足量的细 胞后再移植
课堂反馈练习
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 --------------------（A ）
多细胞动物和人体的细胞 都生活在内环境中，根据你所 学的知识，认为体外培养细胞 应该模拟内环境的哪些内容呢？
动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、必须的营养物质 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、 嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。）
3、适宜的温度 36.5+（-）0.5度
包权
人书友圈7.三端同步
动物细胞培养
1、概念（人教版） 动物细胞培养就是从动物机体中取出
相关的组织，将它分散成单个细胞，然后， 放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和 繁殖。
讨论
1、动物细胞培养的原理是什么？
2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并 解释原因。
3、组织分散成单个细胞的方法是什么？ 其理论依据是什么？
D．培养至50代后继续传代的细胞是细胞株
简述植物组织培养无菌操作技术等一般流程
简述植物组织培养无菌操作技术等一般流程Plant tissue culture is a technique used to propagateplants in a controlled, sterile environment. It involvesthe aseptic culture of plant cells, tissues, or organs in vitro to form whole plants. The general procedure for plant tissue culture can be summarized as follows.Firstly, the selection and preparation of explants are essential. Explants can be any part of a plant such as leaf, stem, or root. They should be healthy, disease-free, and taken from actively growing plants. The explants are then washed thoroughly with sterilizing agents to remove any contaminants.（植物组织培养是一种在受控无菌环境中繁殖植物的技术。
它涉及将植物细胞、组织或器官在体外进行无菌培养以形成整株植物。
植物组织培养的一般步骤可以总结如下。
选择和准备外源体是非常重要的。
外源体可以是植物的任何部分，如叶子、茎或根。
外源体应该健康、没有病虫害，并且来自长势活跃的植株。
然后，需要使用消毒剂彻底清洗外源体，以去除任何污染物。
）After the explants have been cleaned, they are surface sterilized using chemicals like ethanol or bleach. This step is crucial as it eliminates any microorganisms present on the surface that could contaminate the culture.（外源体清洗干净后，需要使用乙醇或漂白剂等化学物质对其进行表面消毒。
高中生物 新人教版 选择性必修3 动物细胞培养 教案
第1课时动物细胞培养新课标核心素养1.概述动物细胞培养需要的基本条件。
2.简述动物细胞培养的基本操作过程。
3.说出干细胞的分类及作用。
1.生命观念：构建动物细胞培养的流程图，认同动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
2.社会责任：理性客观地分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险。
知识点(一)动物细胞培养的条件1．概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
2．条件(1)营养条件①常用培养基的类型：液体培养基。
②成分：糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等。
(2)无菌无毒的环境①需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。
②培养液还需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
(3)温度、pH和渗透压①哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5_℃为宜。
②多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
③渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。
(4)气体环境：动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2①O2是细胞代谢所必需的。
②CO2的主要作用是维持培养液的pH。
(1)动物细胞培养是一个在适宜的条件下，细胞增殖和分化的过程(×)(2)将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基(√)(3)在进行细胞培养时，通常采用培养皿或打开培养瓶盖的方式以获取新陈代谢所必需的O2(×)(4)将动物细胞置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养(×)1．(生命观念)为什么探究动物细胞培养时，要在培养基中加入血清、血浆等天然成分？提示：血清和血浆中含有多种维持细胞正常代谢和生长的物质，如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等，人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚。
2．(科学思维)动物细胞培养需要控制什么样的气体环境？各自起什么作用？提示：95%空气加5%CO2。
细胞培养基本技术
医学实验中心 闾宏伟
主要内容
细胞培养的基本概念 细胞培养的基本条件 细胞培养用液的配制 细胞培养的基本方法 培养细胞活力测定 细胞冻存和复苏 细胞培养的污染和检测
一、基本概念
细胞培养(cell culture)：在体外条件下，模 拟体内的生理环境，用培养液维持细胞生 长与增殖的技术。 组织培养 (Tissue culture)：把活体的一小 片组织（O.5～1立方毫米）置于底物上孵 育，细胞自其周围移出并生长。 器官培养 (Organ culture)：将活体中整个 器官或一部分器官取出，置于体外生存、 生长并同时保持其一定的结构和功能特征。
血清解冻步骤
逐步解冻法
–20℃ 或–70℃至4℃冰箱溶解一天，至室 温下全溶后再分装，一般用50 ml无菌离心管可 分装40～45 ml。
勿直接由–20℃至37℃解冻，因温度改变 太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
无机盐
CaCl2 、KCl 、MgSO4、 NaCl 、 NaHCO3 、NaH2PO4 对调节细胞渗透压、某些酶的活性 及溶液的酸碱度都是必须的。
酶液等均采用滤过法除菌。
安装滤膜时注意：滤膜光滑一面是正面，要朝
上，否则起不到过滤的作用。
CO2培养箱
CO2培养箱设定的条件为37℃，5％CO2 使用CO2培养箱应注意的问题：
。
①用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖微松，
以保证通气。 ②保持培养箱内空气干净，定期消毒擦拭。 ③箱内蒸馏水槽中定期更换灭菌蒸馏水3000 毫升，以保持箱内湿度。
抗生素溶液
通常是青霉素和链霉素联合使用，俗称“双抗 溶液”。
细胞培养试题及答案
细胞培养试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 细胞培养中常用的细胞类型是：A. 原代细胞B. 次代细胞C. 传代细胞D. 所有以上答案：D2. 在细胞培养过程中，以下哪项是必需的？A. 血清B. 抗生素C. 胰蛋白酶D. 所有以上答案：D3. 细胞培养基中通常不包含以下哪种成分？A. 氨基酸B. 葡萄糖C. 维生素D. 抗生素答案：D4. 细胞培养中，细胞贴壁生长的表面通常需要进行哪种处理？A. 酸处理B. 碱处理C. 胰蛋白酶处理D. 胶原蛋白包被答案：D5. 细胞传代时，常用的细胞分离方法是什么？A. 机械剪切B. 胰蛋白酶消化C. 化学溶解D. 物理震荡答案：B6. 细胞培养的无菌操作中，以下哪项是不必要的？A. 使用无菌操作台B. 使用无菌培养基C. 使用无菌移液器D. 使用非无菌的培养皿答案：D7. 细胞培养中，细胞的形态变化可能是由于什么原因？A. 细胞老化B. 细胞污染C. 培养基成分不足D. 所有以上答案：D8. 细胞培养中，细胞的倍增时间通常是多少？A. 10分钟B. 10小时C. 10天D. 10个月答案：B9. 细胞培养中，细胞的传代次数过多可能导致什么后果？A. 细胞生长速度加快B. 细胞形态改变C. 细胞遗传稳定性下降D. 细胞死亡答案：C10. 细胞培养中，细胞的冻存通常使用哪种溶液？A. 磷酸盐缓冲液B. 无菌水C. 冷冻保护剂D. 细胞培养基答案：C二、填空题（每题2分，共20分）1. 细胞培养的基本原则是______、无菌和______。
答案：无菌、无毒2. 细胞培养基中通常含有的营养成分包括______、______和______。
答案：氨基酸、维生素、无机盐3. 细胞培养中，细胞的传代次数过多可能导致______下降。
答案：遗传稳定性4. 细胞培养中，常用的细胞冻存液是______%的DMSO溶液。
答案：5-105. 细胞培养中，细胞的形态变化可能是由于______污染。
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简述细胞培养一般步骤
细胞培养是指将细胞从生物体中分离出来，在适宜的培养基上进行体外培养的过程。
下面是细胞培养的一般步骤：
1. 细胞分离：将组织或器官中的细胞分离出来。
可以通过机械分离、酶消化、离心等方法进行。
2. 细胞计数：使用显微镜和计数板等工具，对分离出的细胞进行计数，以确定细胞的浓度。
3. 培养基准备：准备含有适当营养物质的培养基，以提供细胞所需的生长条件。
培养基通常包含生长因子、氨基酸、维生素、糖类、盐类等。
4. 细胞接种：将分离出的细胞加入到培养基中，使其悬浮或附着在培养器皿表面。
细胞接种密度通常根据细胞类型和实验需求进行调整。
5. 细胞培养：将培养器皿放置在恒温培养箱中，提供适当的温度、湿度和氧气等环境条件，以促进细胞的生长和繁殖。
培养过程中需要定期观察细胞的形态和生长情况。
6. 培养基更换：根据细胞的生长速度和代谢需求，定期更换培养基，以保持细胞的健康状态。
7. 细胞传代：当细胞密度达到一定程度时，需要将细胞分为若干个新的培养器皿中，以避免细胞过度拥挤和营养不足。
传代时需要用酶或其他方法将细胞从培养器皿中剥离。
8. 实验操作：根据实验需要，可以在细胞培养的基础上进行各
种实验操作，如药物筛选、基因转染、细胞凋亡检测等。
细胞培养的步骤可以根据具体实验的要求进行调整和优化，但以上步骤是细胞培养的一般过程。