第二章 微生物学经典技术

第二章微生物学经典技术

一、名词解释

1、纯培养

2、无菌技术

3、分辨率（力)（Resolution，R)

二、填空题

1、与获得纯培养物相关的技术包括：____、_____和_____。

2、固体培养基分离纯培养物由于稀释方法的差异和接种平板的方式差异而分为以下几种方法：____、____、____、____。

3、影响微生物菌种稳定性的因素有____、____、____。

4、能够提高光学显微镜分辨率的措施主要有：________、________、________。

5、细菌染色法根据染色过程中使用染色液的种类数不同分为________和________，根据染色的对象不同分为________和________。

6、利用物理学方法来实现消毒或灭菌的方法主要包括：________、________、________、________。

三、选择题

1、纯培养是指含有（）的培养物。

A.一种微生物；

B.一种营养物质；

C.一种代谢产物

2、利用固体平板获得纯培养，可采用( )：

A.平板划线分离法；

B.稀释涂布平板法；

C.稀释倾注平板法；

D.都可以

3、下列物质除( )外，可在冷冻法保藏菌种时作为保护剂，提高培养物的存活率。

A.水；

B.甘油；

C.脱脂牛奶；

D.糊精

4、沙土管菌种保藏方法可用于保藏( )。

A.细菌芽孢和真菌孢子；

B.细菌营养细胞；

C.真菌菌丝；

D.放线菌菌丝

5、多数专业的菌种保藏机构的主要微生物保存手段( )。

A.传代培养保存；

B.沙土管保藏；

C.冷冻真空干燥保藏；

D.纸片保藏

6、常用的测量细菌大小的单位是( )。

A.毫米；

B.微米；

C.纳米

7、常用的测量病毒大小的单位是( )。

A.毫米；

B.微米；

C.纳米

8、显微镜的分辨率可通过( )参数计算获得。

A.显微镜工作距离；

B.光波波长和数值孔径；

C.物镜放大倍数；

D.目镜放大倍数

9、暗视野显微镜通过特殊的( )而产生不进入视野的斜射光线。

A.物镜；

B.聚光镜；

C.目镜；

D.反光镜。

10、抗酸染色法主要应用于临床上( )的鉴别：

A.大肠杆菌；

B.结核分支杆菌；

C.枝原体；

D.痢疾杆菌。

11、细菌的鞭毛可通过( )方法观察。

A.染色和光学显微镜；

B.电子显微镜；

C.暗视野显微镜；

D.上述方法都可能

12、相差显微镜配备有特殊的光学装置( )，能将光的相位差转变为肉眼可以察觉的振幅差（明暗差）。

A.环状光阑和相差板；

B.遮光板；

C.反光板；

D.滤色系统发出紫外光

13、观察细菌活的菌体特征，常用的显微制片方法是( )

A.压滴法；

B.埋片法；

C.小培养法；

D.涂片固定染色法

14、革兰氏染色法中，确保染色结果可信性的关键操作步骤是( )：

A.大肠杆菌作对照；

B.金黄色葡萄球菌作对照；

C.酒精脱色时间；

D.以上三个方面。

四、是非题

1、单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，称为菌落，一个菌落就是一个克隆。( )

2、不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征（形状、颜色等），可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。( )

3、稀释摇管法主要用于好氧微生物的分离。( )

4、沙土管法和滤纸片法可以直接用于微生物营养细胞的保藏。( )

5、目镜放大倍数越高，显微镜的分辨率越大。( )

6、相差显微镜常常用来观察活细菌的运动性，其聚光器上有中央遮光板。( )

7、不含氮物质但含有其它营养要素的培养基可用以分离固氮菌。( )

8、不含碳物质但含有其它营养要素的培养基可用以分离自养菌。( )

9、二元培养物是由两种微生物组成的混合培养物。( )

10、香柏油的折射率比空气小，所以使用香柏油能提高分辨率。( )

11、在进行菌种分离纯化时，通过划线得到的单菌落，是由一个细胞繁殖而成。( )

12、对于同种样品，涂布平板法和倾注平板培养法检测到样品中的微生物数目不同。( )

13、扫描隧道显微镜(STM) 只适合于观察具有一定程度导电性的样品，对于半导体的观测的效果较差，对于绝缘体则根本无法直接观察。( )

14、原子力显微镜（AFM）不能用于不具导电性或导电能力较差的样品的观察。( )

五、简答题

1、微生物常用的分离方法有那些？其各自的操作要点是什么？

2、常用的微生物的保藏技术有那些？各有什么优缺点？

3、菌种保藏的原则有那些？

4、普通光学显微镜的工作原理是什么？为什么油镜可以提高分辨率，改善观察效果？使用油镜时的注意事项包括那些？

5、利用普通光学显微镜对微生物进行显微观察时，常用的制片和观察方法包括那些？

六、论述题

1、为什么说Koch等建立的微生物纯培养技术是微生物学建立与发展的基石？一般可用哪些方法获得微生物的纯培养？

2、微生物的最显著特征就是个体微小，通常只能通过显微镜进行观察。试列举在显微观察中（光镜和电镜）通过改变样品的反差以改善观察效果的技术及方法。