培养条件对人参黑斑病菌生长发育的影响
苦参内生真菌菌株的杀菌活性筛选
苦参内生真菌菌株的杀菌活性筛选摘要：从药用植物苦参的茎、叶中分离得到10种内生真菌，并对这几种内生真菌杀菌活性进行筛选，获得高拮抗性菌株。
关键词：苦参；内生真菌；杀菌活性中图分类号：r282.71 文献标识码：a1实验材料与方法1.1实验材料1.1.1 待测菌株分离得到的苦参内生真菌纯化培养2周后使用（表1）。
1.1.2 测试菌人参黑斑病原菌（alternaria panax whetz.），简称rs-hb 人参疫病病原菌（phytophthora cactorum schroet.），简称rs-yb人参灰霉病原菌（botrytis cirerea），简称rs-hm人参立枯病原菌（rhizoctonia solani kuhn），简称rs-lk 新月弯孢霉（curvularia lunata），简称新月弯毛霉（mucor mucedo（l.）brefeld），1.1.3 培养基真菌培养基：pda固体培养基，马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水l000mlph值自然。
1.2 实验方法两点对峙培养法[1] 用记号笔在9cm直径的pda平板背面标记两点，使其分布在同一直径上各距培养皿边缘1.5cm处，分别切取25℃恒温培养7日龄，菌块直径均为1cm的內生菌和病原菌菌丝块，接种于标记的两个点上，于27℃恒温培养箱中培养，逐日观察记测。
上述处理均设3个重复，并以接內生真菌菌块和pda组织块，接病原菌菌块和pda组织块作对照[2]。
每日测量内生真菌菌落指向病原菌的趋向半径和病原菌菌落指向内生真菌的趋向半径，二者对照半径。
当两菌落相交后，观察并记录两菌落间相互抑制，侵入和占领对方营养空间的过程。
并按下述公式计算抑制率和抑制效果：2 结果和讨论2.1对峙培养结果采用两点法对分离获得的植物内生真菌与供试病原菌进行对峙培养。
苦参内生真菌对供试病原菌的抑菌效果见表2、表3、表4、表5、表6、表7、表8。
由表2可看出，苦参内生真菌在与供试病原菌人参黑斑病原菌的对峙培养中，有5株内生真菌的相对抑菌效果达到了1.00以上，证明这5株内生真菌对人参黑斑病原菌的生长有抑制作用[3]。
人参病虫害防治
人参病虫害防治人参，被誉为“百草之王”，是一种具有极高价值的中药材。
然而，在种植过程中，人参容易受到各种病虫害的侵袭，这不仅影响了人参的产量和品质，还可能对种植者的经济效益造成严重影响。
因此，进行人参病虫害防治是种植过程中的重要环节。
一、常见的人参病虫害1、根腐病：这是一种由真菌引起的病害，会使人参的根部腐烂，严重影响人参的生长和产量。
2、疫病：这是一种细菌性病害，会使人参的叶片和根部产生脓状物，导致人参植株死亡。
3、锈病：由真菌引起，会使人参的叶片产生黄色或橙色的锈状物，影响叶片的光合作用。
4、蚜虫病：这是一种虫害，蚜虫会吸取人参的汁液，影响人参的生长和产量。
5、地下虫害：如地老虎、蝼蛄等，它们会咬食人参的根部，导致植株死亡。
二、人参病虫害防治措施1、合理轮作：避免在同一地块上连续种植人参，可以选择其他中药材或农作物进行轮作，以降低病虫害的发生率。
2、精选种子和种苗：选择无病无虫的种子和种苗，从源头上保证人参的健康生长。
3、科学施肥：多施有机肥，少施化肥，以增强人参的抗病能力。
4、药剂防治：根据病虫害种类选择合适的药剂进行防治。
对于根腐病，可以使用甲基硫菌灵、敌克松等药剂进行防治；对于疫病，可以使用农用链霉素、可杀得等药剂进行防治；对于锈病，可以使用三唑酮、戊唑醇等药剂进行防治；对于蚜虫病，可以使用吡虫啉、啶虫脒等药剂进行防治；对于地下虫害，可以使用辛硫磷、地芬宁等药剂进行防治。
5、生物防治：利用天敌昆虫、病原微生物、农用抗生素等生物制剂来控制人参病虫害。
如使用苏云金杆菌、阿维菌素等生物农药来防治病虫害。
6、加强田间管理：定期清理田间杂草和病残体，合理修剪人参叶片，保持田间的通风透光性，以降低病虫害的发生率。
7、建立病虫害监测体系：定期对人参生长情况进行检查，及时发现并处理病虫害问题。
如果发现病虫害，需要及时采取措施进行防治，防止病虫害扩散。
进行人参病虫害防治需要从多个方面入手，包括合理轮作、精选种子和种苗、科学施肥、药剂防治、生物防治、加强田间管理和建立病虫害监测体系等。
微生物实验 环境条件对微生物生长的影响
B. S
2人一组，每组每1一浓度1块培养皿，3种菌接在同一皿上 人一组，每组每1一浓度1块培养皿，
三、实验方法
4．微生物对几种抗生素的敏感性
E. c 氯 卡
红 庆
(1)制平板——牛肉膏蛋白胨培养基，做标记； (1)制平板——牛肉膏蛋白胨培养基，做标记； 制平板——牛肉膏蛋白胨培养基 (2)涂布接种： (2)涂布接种：E. coli 或 B. subtilis 或 盐杆菌 涂布接种 制菌悬液——取0.2ml涂布均匀——接纸碟 制菌悬液——取0.2ml涂布均匀——接纸碟 —— 涂布均匀—— (3)将各培养皿置于 ℃下培养48h 48h。 (3)将各培养皿置于28℃下培养48h。 将各培养皿置于 (4)取出观察各菌的生长情况， (4)取出观察各菌的生长情况，确定每种微生物 取出观察各菌的生长情况 对几种抗生素的敏感性。 对几种抗生素的敏感性。 每人1块培养皿， 每人1块培养皿，选1种菌涂布接种，然后加4种抗生素 种菌涂布接种，然后加4
B. S
三、实验方法
2．pH对微生物生长的影响 pH对微生物生长的影响
H. h E. c
(1)制平板——牛肉膏蛋白胨培养基, (1)制平板——牛肉膏蛋白胨培养基, 制平板——牛肉膏蛋白胨培养基 分别标上pH5.0 、pH7.0、 pH9.0标记 分别标上 、 标记
B. S
pH5.0
(2)划线接种——E. (2)划线接种—— coli、B. subtilis、盐杆菌。 划线接种—— 、盐杆菌。 (3)将各培养皿置于 ℃下培养48h 48h。 (3)将各培养皿置于28℃下培养48h。 将各培养皿置于 (4)取出观察各菌的生长情况， (4)取出观察各菌的生长情况，确定每种微生物的最佳 取出观察各菌的生长情况 生长pH。 生长pH。 pH 2人一组，每组每pH一块培养皿，3种菌接在同一皿上 人一组，每组每pH一块培养皿， pH一块培养皿
人参果常见病害及防治和治疗办法
叶片向上卷曲，表面出现明亮的黄色或黄绿色相间的条纹。
线虫病
• 根结线虫病：根部形成大小不等的根结，根系发育不良， 地上部生长缓慢，植株矮小。
03 病害防治技术
农业防治
选用抗病品种
针对当地病害发生情况，选择抗病性较强的人参果品种。
合理轮作
避免连作，减少病原菌的积累和扩散。
加强田间管理
及时清除病残体，合理施肥浇水，增强植株抗病能力。
科学合理使用农药
农药选择
根据病害种类选择合适的农药，并注意使用剂量和浓度，避免滥用和过量使用。
施药时间
选择在病害发生初期或发病高峰前进行施药，以控制病害的蔓延。
提高栽培技术和管理水平
栽培技术
采用先进的栽培技术，如合理密植、修 剪枝条等，提高人参果的抗病能力。
VS
管理水平
加强水肥管理，合理搭配氮、磷、钾等营 养元素，增强树势，提高人参果的抵抗力 。
增强植物抗性
通过使用生物肥料等措施，可以促进植物的生长和抗病能力的提高， 从而减少病原菌的侵染和繁殖。
05 防治与治疗的注 意事项
定期检查与预防
定期检查
定期对人参果进行检查，及时发现并记录可能出现的病害症状，如叶片黄化、落 花落果等。
预防措施
采取科学合理的农业措施，如轮作、加强田间管理等，以预防病害的发生。
湿度控制
湿度是影响病原菌生长的重要因素之一。在干燥的环境中，病原菌容易 繁殖，因此可以通过增加湿度或控制湿度来抑制病原菌的生长。
化学治疗
1 2 3
药剂防治
使用化学药剂是防治病害的常用方法之一。可以 选择针对特定病害的药剂，并在适当的时间使用 ，以达到防治效果。
消毒杀菌
人参种植土壤的要求
人参种植土壤的要求人参是一种重要的药用植物，种植人参需要特定的土壤环境。
为了确保人参能够健康生长和发育，种植人参的土壤要求有以下几个方面。
人参对土壤的pH值要求较为严格，一般在5.5-6.5之间。
过酸或过碱的土壤都不适合人参的生长，需要通过调节土壤的酸碱度来满足人参的生长需求。
可以通过施加石灰或硫酸等物质来调整土壤的pH值，以使其适合人参的种植。
人参对土壤的质地要求较高。
人参喜欢生长在疏松、肥沃的土壤中，这样有利于根系的生长和发育。
因此，在种植人参时，需要选择质地疏松、排水性良好的土壤，以便根系能够顺利生长并吸收养分。
同时，土壤中应含有适量的有机质，有机质可以提供充足的养分供应，促进人参的生长。
人参对土壤的通气性也有一定要求。
土壤通气性差会导致土壤中积水，根系易受到病菌的侵害，影响人参的生长和产量。
为了改善土壤的通气性，可以通过增加有机质的含量、合理施用有机肥料、进行土壤松土等方式来提高土壤的通气性。
人参对土壤中的水分要求较高。
人参生长期间需要充足的水分供应，但又不能过多，以免造成积水。
因此，在种植人参时，应合理控制灌溉水量，避免土壤过湿或过干。
一般来说，人参的生长期需保持适度湿润的土壤状态，以满足其生长发育的需要。
人参对土壤中的营养元素需求较高。
种植人参时，需要在土壤中添加适量的有机肥料和矿质肥料，以满足人参的养分需求。
有机肥料可以提供丰富的有机质和微量元素，而矿质肥料则可以提供人参所需的主要营养元素，如氮、磷、钾等。
合理施肥有助于提高人参的生长速度和产量。
种植人参的土壤要求包括pH值适宜、质地疏松、通气性良好、保持适度湿润以及富含养分等。
只有提供了合适的土壤环境，才能够保证人参的健康生长和高产。
因此，在进行人参种植时，务必要认真考虑土壤的要求，并采取相应的措施来满足这些要求，以获得较好的种植效果。
黑色人参种植技术
黑色人参种植技术黑色人参是一种珍贵的药材，它在中医中被广泛应用于强身健体、调理气血等方面。
黑色人参种植技术是指种植黑色人参的相关技术、方法和管理措施。
以下是关于黑色人参种植技术的详细回答。
首先，黑色人参的选择与培植。
黑色人参是通过对传统人参进行人工培育改良而得到的品种。
在选择黑色人参种子时，要选择具有较好的品质和疗效的优良品种。
可以从专业人参种植基地或者合作社购买种苗。
其次，黑色人参的种植环境。
黑色人参适宜生长在高海拔的山地或者山谷地带。
种植的土壤要求疏松肥沃，排水性良好。
同时，要选择阳光充足、温度适宜的地方进行种植。
第三，黑色人参的种植方式。
黑色人参的种植方式可以采用直播或者分株种植。
直播种植是指将种子直接播种在土壤中，然后进行适当的灌溉和管理；分株种植是指将已经发芽的黑色人参种子进行人工分株后再进行种植。
第四，黑色人参的灌溉与施肥。
黑色人参对水分的需求较大，应保持土壤湿润，但要避免过度浇水。
施肥方面，可选择有机肥或者配制专用的人参肥料，适量施入土壤中，以满足黑色人参的养分需求。
第五，黑色人参的病虫害防治。
黑色人参容易受到多种病虫害的侵袭，影响其生长和产量。
因此，在种植黑色人参过程中，要及时发现并采取相应的防治措施。
可以使用生物防治、物理防治和化学防治相结合的方法，定期对黑色人参进行病虫害的防治。
第六，黑色人参的采摘与加工。
黑色人参一般在生长3至5年后才可采摘，采摘时要避免损伤黑色人参的根茎。
采摘后，可以进行晒干或者烘干处理，以保证黑色人参的质量和保存期限。
总结来说，黑色人参种植技术涉及到黑色人参的选择与培植、种植环境的选定、种植方式、灌溉与施肥、病虫害防治以及采摘与加工等方面。
合理运用种植技术和管理措施，能够提高黑色人参的产量和质量，并满足人们对黑色人参的需求。
如何种植人参
如何种植人参人参喜阴凉，叶片无气孔和栅栏组织，无法保留水分，温度高于32度叶片会灼伤，郁闭度0.7-0.8。
通常3年开花，5-6年结果，花期5-6月，果期6-9月。
下面是店铺精心为你整理的种植人参的技术，一起来看看。
种植人参的技术1、人参对生长环境条件的要求人参是一种喜冷凉、湿润而耐荫的药用植物, 既怕积水, 又不耐干旱, 忌强光直射, 对生长环境条件要求比较严格。
(1) 土壤：人参对土壤的要求是腐殖丰富、土层深厚、质地疏松、渗水性强、排水良好的沙壤, 森林腐殖土最好, 中性或微酸性土壤较好, 但碱性土壤不宜种植。
(2) 水分：人参对水分要求比较严格, 既喜水又怕涝。
水分过大, 当土壤湿度超过60%, 就会造成土壤中的空气不足, 使人参根系呼吸受到影响, 易染病害和烂根。
水分过小, 当土壤湿度低于30%以下时, 会造成人参根系水分扩散, 使人参须根干枯, 导致产量下降。
人参发育期要求土壤水分适宜, 春季出苗期土壤湿度保持在40%左右, 夏季生长期保持在45%—50%, 秋季保持在40%—50%为宜, 全年生长发育期湿度范围以40%—50%为好。
(3) 光照：人参是喜阴植物, 喜散射弱光, 怕直射阳光。
光照过强, 植物矮小, 叶片厚而色黄。
光照过弱, 植株细高, 叶片薄而浓绿, 生长不正常。
所以, 在人参栽培时, 应进行遮荫, 调节透光度, 避免强光直射, 利用散射光和折射光。
(4) 温度：人参怕高温, 耐严寒。
在人参生长发育期间, 以平均气温在15—20℃为宜, 温度高于30℃或低于是10℃时, 人参处于休眠状态。
冬季在—40℃的严寒也可安全越冬。
人参更新芽在春季地温于10℃以上即可萌芽生长, 但最怕早春的“缓阳冻”(即气温忽高忽低, 地表一冻一化现象) , 易引起冻害和根皮破坏(“破肚子”) 。
播种后出苗期要求温度在10℃以上, 1—2年生的要求稳定在12℃以上, 生长期最适宜的温度20—25℃, 在36℃以上的烈日下, 叶子焦枯; 低于—6℃, 茎秆会失去生长机能。
人参发根的诱导及其适宜培养条件的研究
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人参发根的诱导及其适宜培养条件的研究
长速度快、 次生代谢产物含量高以及生化特性不易 改变的特点， 已成为继植物细胞培养后的又一新的
［$， #］ 。 生产植物有效成分的培养系统
中国农业科学院生物技术研究所贾士荣先生赠送， 在 R7S 固体培养基上暗培养和 #T 保存， 定期取出 活化。感染外植体前， 将活化的 B# 菌株转入 R7S 液体培养基中 !1T 、 备 22" ,C89A 摇床上培养过夜， 用。 !"# 外植体的准备 （吉参 2 号人参品种） 人参 取生长健壮的 ! 年生 根 2"" 余株， 用肥皂水洗净， P"U 酒精及 "L2U 氯化 汞消毒， 无菌水冲洗 $ 次， 将参根切成 ! Q $88 的薄 片， 置于无激素的 *D 固体培养基上预培养 2 Q !@。 !"$ 发根的诱导、 灭菌及在固体培养基上生长特性 利用无菌注射器将培养过夜的微量菌液直接滴 加在上述预培养的根片上， 在 !6T 下暗培养诱导发 根。计算发根诱导率 （产生发根的外植体数 C 总外植 体数） 、 发根诱导密度 （发根总数 C 产生发根的外植体 数） 。将 长 至 2-8 左 右 的 小 发 根 切 下， 接于含有 6""8<CI 羧苄青霉素的 *D 基本培养基上进行灭菌 处理。每隔 6 Q P 天转移 2 次， 直至无细菌生长。将
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典 籍《 神农 百 草经 》 已把人 参列 为上 品 ， 就 具有 大补 元气 ， 神益 智 ， 津 固脱 ， 安 生 调补 五脏 ， 强精 通脉 ， 延缓 衰老 等 功 效． 我 国近年 来 人参 产量 不是很 高 ， 但 因为在人 参 的栽 培 和 生长 过程 中经 常遭 到 病 害 的威 胁 ， 而影 响 从
１ ３ 温度 对 人参黑 斑病 菌菌 丝 生长及 分 生孢子 萌 发的 影响 ．
取 培养 ５ｄ的人参 黑斑 病 菌菌饼 （ 径 ５ｍｍ） 接 种 于 Ｐ 直 ， ＤＡ 培 养基 平 板 中央 ， 别 置 于 ５、 Ｏ １ 、 ０ 分 １ 、５２ 、 ２ 、Ｏ和 ３ ５３ ５℃的恒 温箱 中培 养 ， 每隔 ２ｄ测 菌落 直径 ， 同时记 录分 生孢子 形 成时 间 ， 复 ５次． 重 配 置 １ 葡萄糖 液制 作人 参黑 斑病 菌孢 子 悬浮 液 ， 在 凹玻 片上 ， 滴 分别 置 于 ５ １ 、５ ２ ２ 、０ ３ 、０ １ 、Ｏ、 ５ ３ 、 ５℃ 的
有 关培 养条 件对 人参 黑 斑病 菌菌 丝生 长 、 生孢 子形 成 以及 分生孢 子 萌发 等方 面 的研究 报道 ， 分 为此进 行 了这 方 面 的研究 ， 旨在 为人参 黑斑 病发 病规 律 的研究 和 病害 防治 提供 理论 依据 ．
１ 材 料 与 方 法
１ １ 病菌 来 源 ．
值 为 ５ ６ 对 碳 源 的利 用 以蔗 糖 和麦 芽 糖 最 佳 ， 次 为 葡 萄糖 和 果 糖 ； 源 以 蛋 白胨 最 佳 ， 次 为 牛 肉膏 、 ～ ． 其 氮 其 酵母
汁 、 氨 酸 ， 铵 ； 同 的 培 养 基 以 Ｐ Ａ 培 养 基 培 养 的 菌 丝 生 长 最 快 ， 落 浓 密 ． 菌 菌 丝 的 致 死 温 度 为 丙 硝 不 Ｄ 茵 病 ６ ５℃ ， 生 孢 子 的致 死 温 度 为 ５ 分 Ｏ℃ ．
用 自然 发 生黑斑 病 的病株 ， Ｐ 在 ＤＡ平 板培 养基 （ ５℃ ） 采 用 常规 方 法 分 离病 菌 ， 获 得 纯培 养 ， 时 ２ 上 并 同
测 其致 病力 ． １ ２ 培养 基对 人参 黑 斑病菌 菌 丝生长 、 孢 的影响 ． 产
选用 Ｐ ＤＡ 培养 基 ， 参 叶培 养 基 ， 参 根 培 养 基 ， ＮＡＹ 培 养 基 ［ ， 人 人 Ｓ ６ 清水 洋菜 培 养 基 等 ５种 固体 培 养 ］ 基． 直径 ５ｍｍ 的人 参 黑斑病 菌 菌片接 种 于培 养基 中央 ， 于 ２ 置 ５℃恒 温箱 中培 养 ９ｄ 第 ３ 开始 每隔 ２ｄ测 ， 天 菌 落直 径 ， 记 录分 生孢 子形成 时 间 ， 复 ５次 ． 并 重
不 同温 度下 培养 ． 、 、 、０ １ ４ ６ ８ １ 、２ｈ后镜 检 ， 每次 镜检 ５ ０个孢 子． ０ １ ４ ｐ 值对 人 参黑斑 病 菌菌 丝生长 及孢 子 萌发 的影 响 ． Ｈ
Ｐ Ａ 培 养基用 ０ １ ｌ Ｉ ０ １ ＯＨ 调 ｐ 值 为 ５ ６ ７ ８ ９ １ ， 后将 直径 ５ｍｌ 的人参 黑斑 病 Ｄ ． ｔＣ 和 ． Ｎａ Ｎ Ｎ Ｈ 、 、 、 、 、０ 然 Ｔ ｌ 菌 菌饼 接种 于培 养基 中 央 ， 于 ２ 置 ５℃恒 温箱 中培 养 ９ｄ 第 ３天 开 始每 ２ｄ测 菌落 直 径 ， 记 录 分生 孢 子形 ， 并
第３ ３卷
第 ２期
延
边
大
学
农
学
学
报
Ｖ ｏ ．３ Ｎ ｏ １ ３ ．２
２ｌ Ｏ １年 ６月
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｒｃ ｌｕ ａ ｃｅ ｃ ｎ ｉｎ Ｕ ｎｖ ｒ ｉ ｏ ｒ ａ ｆＡｇ ｉｕｔ ｒ ｌ ｉｎ ｅ Ｙａ ｂａ ｉｅ ｓｔ Ｓ ｙ
Ｊｎ ０ １ ｕ ．２ １
培 养 条 件对 人 参 黑 斑 病 菌 生长 发 育 的影 响
人 参 的产 Βιβλιοθήκη ． 人 参 病害 种类 繁多 ， 我 国有 ２ 在 Ｏ多种 ， 中人 参黑 斑病 是人 参地 上部 发生 最为 普遍 的一 种病 害 ， 其 主要 危 害叶 片 、 和果 实 ， 茎 也可 危害根 ［ ． ３ 常年发 病 率为 ２ ～３ ， 重 时达 １ ０ ， ］ Ｏ Ｏ 严 ０ 造成人 参早 期 落叶 、 株提 前 植 枯萎 、 不能 结 实及参 根减 产 ３ ～８ ［ ］ 有关 人 参黑 斑病 的病 原及 其化 学 防治 已有 报道 ［６， 目前 尚无 ０ Ｏ ４ ． ５Ｊ但 Ｉ
关 键词 ： 参黑斑病 菌； 养条件 ； 人 培 菌丝 ； 生 孢 子 分
中图分类号 ： ５７５ ￥ ６ ． １ 文献标识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ４ ９ ９ ２ １ ）２ ０ ４ 一 Ｏ １ ０ —７ ９ （ ０ １ ０ － １ ７ ６
人参 （ ａ ａ ｉｓｎ ． Ｍｅ ） 名 贵 的 中药 材 ， 五 加 科 多 年 生 宿根 草 本 植 物［ ． 国最早 的药 学 Ｐ ｎ ｘ ｇｎ ｅｇ Ｃ Ａ． ｙ 是 属 １ 中 ］
收 稿 日期 ： ０ １ ０ 一 ｉ 基 金 项 目 ： 林 省 教 育 厅项 目（ ０ １０ — ６ １ １０ ２ ； 边 大 学 科 技 发 展 计 划 项 目（ ０ ８ ２ ２１— ４ ０ 吉 ２ １ ８ ０ １０ ０ ０ ） 延 ２００）
作 者 简 介 ： 熙英 （９ ３ ）男 （ 李 １６ 一 ， 朝鲜 族 ） 吉林 和龙 人 ， 边 大 学 长 白山生 物 资源 与 功 能分 子 教 育 部 重点 实 验 室 教授 ， 士 ． ， 延 博
李 熙英 李烨。 ，
（． 边 大 学 长 白 山生 物 资 源 与 功 能 分 子 教育 部 重 点 实 验 室 ；． 边 大 学农 学 院 ： 林 延 吉 １３ ０ ） １延 ２延 吉 ３ ０ ２
摘 要 ：人参 黑 斑 病 菌 （ ｔｒａ ｉ ａ ａ ｈｔ） Ａｌ ｎ ｒａｐ ｎ ｘ Ｗ ｅｚ 菌丝 生 长 、 孢 及 分 生 孢 子 萌 发 最 适 温 度 为 ２ ｅ 产 ５℃ ， 适 宜 ｐ 最 Ｈ