小球藻的培养和保存技术新

小球藻的培养和保存技术

如何培养和保存小球藻，是繁殖小丑鱼的另一个关键。小球藻可以买成品的，也不贵。也可以自己培养，但比较麻烦。

下面是用小球藻培育和保存的经验。

一、小球藻种的获得

小球藻种可以从活体小球藻种液获得。初次可以从渔友那取得种液，也可从淘宝商家购买，一般一套（小球藻、小球藻、营养液）100元左右。

二、小球藻的有关知识

小球藻属于绿藻门，绿藻纲，绿球藻目，卵囊藻科，小球藻属，繁殖时，每个细胞形成2、4、8或16个似亲孢子，似亲孢子经母细胞壁破裂释放。小球藻细胞内含有丰富的叶绿素，光合作用非常强，是其他植物的几十倍。其含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质、食物纤维、核酸及叶绿素等，特别是含有令人注目的生物活性物质糖蛋白、多糖体以及高达13％的核酸等物质。

小球藻的直径只有3～8微米，必须用600倍以上的显微镜才能看见，且形状呈圆球形，所以被称为小球藻（绿藻）。小球藻可以生息在淡海水中，它借助阳光、水和二氧化碳，以每隔20

小时分裂出4个细胞的旺盛繁殖能力，不停地将太阳能量转化生成蕴涵多种营养成分的藻体，并在增值中释放出大量的氧气。它的光合能力高于其他植物10倍以上，繁殖能力比陆地上的高等植物强100倍以上。

小球藻生于热带、温带淡水和海水中，以细胞分裂进行无性繁殖，并可产生配子进行有性繁殖。

适宜温度为20-23℃，温度过低会影响小球藻的繁殖。

海水小球藻适宜盐度20-30‰。

适宜光照5000-10000LX，太弱会抑制光合作用，影响生长和繁殖。

适宜水质为pH=8，氮磷钾、二氧化碳含量高的海水。含量太低会抑制生长和繁殖。

三、轮虫繁殖用活体小球藻的培育条件

温度与繁殖缸相近即可，我用室温8-26℃。

盐度与繁殖缸一样，我用30‰，比重1.02。

合适的光线，我用自然光，必要时加照明。

合适的营养液，可购买或自己配制（方法后面介绍）

四、准备一容器做培养缸，可以是玻璃或透明塑料的，容积可根据要繁殖的轮虫的数量确定，我是用食用油瓶改制培养缸，我繁殖轮虫只用5升的就够了。准备加热棒、照明、气泵，根据需要使用。收到活体小球藻后，测出比重（一般较低，1.01左右），然后据此比重调整培养缸的海水比重，加入合适的营养液，初次培养用新配的海水和小球藻种液。然后将种液倒入，放光亮处繁殖。每天搅拌几次，也可用气泵加气，不要加沙头，就像孵化丰年虾一样。当培养缸海水颜色从淡变深绿时（一般7天左右，生长太快的小球藻营养低）就可以使用了。倒出一部分做藻种长

期保存（方法后面介绍），剩下的添加海水继续培养3天左右（变深绿色）。

五、循环培养。正常培养缸在室温8-26℃时可不加温，不加气，用自然光，节约能源。培养完成后部分把小球藻连水抽出喂养轮虫，每天不断添加海水（可以用滤完轮虫的海水，我是用高质量的沙头过滤轮虫），一周后只剩很少的小球藻了（水变成淡绿色），喂养周期结束，然后调整好比重（一般加淡水），添加营养液，重新进入培养循环。一般5-6个循环小球藻就会遭到其他浮游生物的污染，就必须纯化藻种了（方法后面介绍），有些人藻液被蓝藻（有毒）污染，会造成轮虫和小丑鱼的死亡。

六、时间节奏的调整。小球藻培养要掌握节奏,最好轮虫重新培养时达到最深颜色（培养一周左右）。小球藻太多时可连水抽出放低温处（冰箱冷藏室）保存几十天没有问题，还可以用下面方法调整。减慢小球藻增殖的方法：减少照明，降低温度。加快小球藻增殖的方法：增加供气，增加营养液，增加照明，提高温度。一般调整得好，可以和公子小丑鱼产卵和孵化同步，我的公子小丑隔15天产卵一次，小球藻培养8天喂7天，也是15天循环一次。

七、小球藻种的保存1。

液体保存。

用第一次培养好后倒出的一部分藻液（深绿色）做藻种，用水族呼吸袋包装好后再用橡筋扎紧密封，然后放入透气的塑料盒

中，再放入冰箱的冷藏室保存即可。使用时取出摇匀（会有沉淀）让温度慢慢升到室温就可以当藻种用了。我最长保存过近一年，还可以正常繁殖。更长的时间就没有试过了。

八、小球藻种的保存2.

干法保存。

在加过营养液的海水中加入琼脂，加热融化后冷却成果冻状，切成小块，然后放入第一次培养好后倒出的一部分藻液（深绿色）中，几天后果冻表面会长有一层小球藻，呈绿色，取出后放入透气的塑料盒中，再放入冰箱的冷藏室保存即可。使用时取出，让温度慢慢升到室温就可以当藻种用了。我最长保存过近一年，还可以正常繁殖。更长的时间就没有试过了。每次从冰箱取出一部分即可，使用和保存比液体更方便。

九、小球藻种的浓缩。

1、小球藻在光照和营养盐缺乏的情况下会产生沉淀。在培养时，当营养盐较低的时候（生长条件正常，但小球藻不增殖，即浓度不变化），把小球藻装入瓶内，放入冰箱冷藏室，1-3天后就会沉淀，倒出上层清液，即可取得浓缩小球藻液体。用前面介绍的呼吸袋效果更好，小球藻的活力更高。营养盐还可以用离子交换树脂吸附来降低。

2、用电泳或阳离子絮凝剂如明矾、聚合氯化铝、聚合硅酸硫酸铝等可以让小球藻沉淀，此方法会引入其他盐类。

3、用蛋白分离器打出浓缩小球藻，此方法容易破坏小球藻

活性，还会富集其他蛋白质。

九、营养液的配制。

配方一（适合保存藻种和精细培养）

A液：

NaNO3 150g/L

K2HPO4 4g/L

MgSO4 7.5 g/L

CaCl 3.6 g/L

Na2CO3 100g/L

B液：

Citric acid 0.6 g/500mL

Ferric ammonium citrate 0.6g/500mL

EDTANa2 0.1g/500mL

C液：

H3BO3 0.286g/100mL MnCl2·4H2O 0.186g/100mL ZnSO4·7H2O 0.022g/100mL Na2MoO4.2H2O 0.039g/100mL CuSO4. 5 H2O 0.008g/100mL Co(NO3)2.6 H2O 0.005g/100mL