血小板聚集试验方法及临床意义

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血小板聚集试验方法及临床意义

摘要】目的:探讨血小板聚集试验的方法及临床意义。方法:对血小板聚集功

能试验(PAgT)的试验操作及临床意义进行分析。结果:血小板聚集仪是主要用于

检测血小板聚集功能,其从原来的光学比浊原理向多种检测原理相结合的方向发展。是出血性疾病临床诊断中常用试验方法,可用于初步筛检血小板功能的增加或

下降。血小板聚集试验是对血栓性疾病和出血性疾病的诊断与治疗进行初步评估。结论:血小板聚集试验简便、经济实用,为评价血小板聚集功能的初筛试验。

【关键词】血小板取聚集试验;标本采集;方法;临床意义

【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2018)09-0101-02

血小板聚集是血小板的一个主要功能,血小板聚集是血小板参与止血和血栓

形成的重要因素之一。血小板聚集需要有体内(包括血小板自身)广泛存在的各

种诱导剂激发,体内能够激活血小板的强诱导剂主要有胶原蛋白、ADP、血栓烷

A2(TXA2)、凝血酶,弱诱导剂有5-羟色胺和肾上腺素[1]。在特定的连续搅拌条件下,于富含血小板的血浆(PRP)中加入诱导剂时,由于血小板发生聚集,液

体的浊度就会发生相应的改变,电池将浊度的变化转换为电讯号的变化,记录仪

上予以记录。根据描记曲线即可计算出血小板聚集的程度和速度。现对血小板聚

集仪测定的方法及临床意义进行分析如下。

1.采集与方法

1.1 标本采集

患者受检前一周内忌服影响血小板的药物,空腹12小时,受检前8小时内

禁止吸烟,用硅化注射器从肘静脉顺利取血4.5ml,注入到含有0.5ml浓度为

0.109mol/L枸橼酸钠溶液的硅化离心管中,充分混匀。PRP(富含血小板血浆)

的制备:以1000r/min离心10分钟,小心取出上层血浆,计数血小板并调至

250×109/L。PPP(贫含血小板血浆)的制备:将剩余血液以3000r/min离心20分钟,上层较为透明的液体即为PPP,其血小板一般低于10×109/L。

1.2 器材与试剂

血小板聚集测定仪及记录仪(量程10mV电子电位差计);富含血小板血浆(PRP)及贫含血小板血浆(PPP);100μl微量加液器、硅化试管及注射器;血

小板聚集诱导剂:1.07μg/mlADP二钠盐、5μg/ml肾上腺素、3U/ml胶原、1.0~1.5mg/ml瑞斯托霉素。

1.3 操作步骤

分别用PRP和PPP将PRP中的血小板数调节至250×109/L备用;打开所有测

定及分析记录仪器的电源,预温20分钟至恒温37℃,调整记录走纸速度一般为

2cm/min;将PPP标本0.8ml置于仪器比浊管内,作为空白管用620nm滤光片调

节透光度为100%;取0.72ml PRP加入另一比浊管,并加搅拌磁棒,在37℃预热,3分钟后取出擦尽管外水渍放入仪器,校正透光度为0%;随后在PRP中准确加入80μl的诱导剂,同时开始搅拌(1000r/min),测定时间为6~10分钟,记录聚集波型。

1.4 参考值

浓度为6×10-6mol/L的肾上腺素(ADP)引起的最大聚集率为21.7%~48.7%,坡度为41.7~86.1度。浓度为4.5×10-6mol/L的ADP可引起双相聚集曲线,第一

相的最大聚集率15.5%~25.1%,坡度29~94.8度。自发性血小板聚集试验:

2.4%~32.4%。

2.临床意义

2.1 血小板聚集率增高

反映血小板聚集功能增强,见于高凝状态和血栓性疾病,如动脉继样硬化性

心脏病(心肌梗死、心绞痛)、糖尿病(伴血管病变)及脑血管病变、静脉血栓

形成、高β脂蛋白血症,人工瓣膜、口服避孕药等[2]。

2.2 血小板板聚集率降低

反映血小板聚集功能减低,见于某些血小板功能缺陷性疾病和出血性疾病,

如血小板无力症、巨大血小板综合征、贮存池病、May-Hegglin异常、低(无)纤维蛋白原血症、肝硬化,尿毒症、细菌性心内膜炎、抗血小板抗体、服用血小板

抑制药物等。

3.质量控制

血小板聚集试验的标本准备很重要,抽血要顺利,避免反复穿刺而将组织液

抽到注射器内,不可反复穿刺或混入气泡。红细胞混杂、溶血、脂血等会降低悬

液透光度,影响血小板聚集变化[3]。组织液可使少量凝血酶形成而引起血小板聚集。实验应在采血后3小时内完成,时间过长会降低聚集强度或速度。采血后的

标本应放在15~25℃的室温下为宜,低温会使血小板激活,黏附、聚集能力增加

或有自发性聚集,故切忌放入冰箱。采血后血液中的CO2不断逸出到空气中,使

血浆pH值上升。pH6.5~8.5的标本可获得最佳聚集效果,pH低于6.4或高于10.0时,将会使聚集受抑制或消失。钙是血小板聚集过程中的重要因素。血小

板聚集作用随血浆中枸橼酸钠浓度的降低而增高,因此在贫血患者应当加入较正

常者为多的抗凝剂。EDTA由于螯合Ca2+作用强,使ADP不能引起血小板聚集,

因此忌用EDTA做为抗凝剂。红细胞混入、溶血及血浆脂类等因素可降低悬液透

光度,掩盖血小板聚集变化。因此,采血当天也应禁饮牛奶、豆浆类脂肪性食品。阿司匹林、潘生丁、肝素、双香豆素等均可抑制血小板聚集[4]。阿司匹林抑制血

小板聚集作用可持续1周,故采血前l周内不应服用此类药物。接触血小板的玻

璃器皿如未经硅化,可影响血小板聚集力,甚至使原来正常者出现异常结果。诱

导剂ADP在保存中会自行分解产生AMP,所以配置成溶液后宜在-20℃冰箱中

贮存。一般半年内活性不会降低。应用肾上腺素时,应裹以黑纸避光,以减少分解。诱导剂的种类和浓度对血小板聚集结果有影响,因此临床判断时应该注明所

用的诱导剂的浓度,以便进行对比。为此各实验室应有自己的参考值。

【参考文献】

[1]巫向前主编.临床检验结果的评价[M].北京:人民卫生出版社,2000.224-225.

[2]郑绍同,宣恒报.血小板聚集功能测定的临床应用[J].江西医学检验,2001,19(1):64.

[3]陈缙,张海洋,吴同果.血小板聚集功能检测的临床应用[J]. 心脏杂志,2015(6):732-735.

[4]边红放,王晓青.血小板聚集功能的检测及临床应用[J]. 当代医学,2007(13):24-25.

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