基因工程试题4doc-基因工程试题

基因工程试题

一、选择题（每题1分，共15分）

1、下列有关基因的叙述，错误的是【】

A蛋白质是基因表达的唯一产物

B 基因是 DNA 链上具有编码功能的片段

C 基因也可以是 RNA

D 基因突变不一定导致其表达产物改变结构

2、基因工程的单元操作顺序是【】

A 增，转，检，切，接

B 切，接，转，增，检

C 接，转，增，检，切

D 切，接，增，转，检

3、生物工程的上游技术是【】

A 基因工程及分离工程

B 基因工程及发酵工程

C 基因工程及酶工程

D 基因工程及细胞工程

4、下列各组专业术语中，含义最为接近的是【】

A 终止子与终止密码子

B 基因表达与基因转译

C DNA 退火与 DNA 复性

D 重组子与转化子

5、根据酶切活性对盐浓度的要求，限制性核酸内切酶可分成【】

A 2 大类

B 3 大类

C 4 大类

D 5 大类

6、T

-DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其 4

底物的关键基团是【】

A 2' -OH 和 5' –P

B 2' -OH 和 3' -P

C 3' -OH 和 2' –P

D 5' -OH 和 3' -P

7、下列有关连接反应的叙述，错误的是【】

A 连接反应的最佳温度为 37 ℃

B 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%

C 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mM

D 连接酶通常应过量 2-5 倍

8、原生质体转化方法不大适用于【】

A 大肠杆菌

B 枯草杆菌

C 酵母菌

D 链霉菌

9、下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是【】

A Cosmid >λ-DNA > Plasmid

B λ-DNA > Cosmid > Plasmid

C Plasmid >λ-DNA > Cosmid

D Cosmid > Plasmid >λ-DNA

10、若某质粒带有 lacZ 标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培

养基中加入【】

A 半乳糖

B 异丙基巯基 -β- 半乳糖苷（ IPTG ）

C 蔗糖

D 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基 - β -D- 半乳糖苷

（ X-gal ）

11、下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的

是【】

A 大肠杆菌－繁殖迅速

B 枯草杆菌－分泌机制健全

C 链霉菌－遗传稳定

D 酵母菌－表达产物具有真核性

12、分子杂交的化学原理是形成【】

A 共价键

B 离子键

C 疏水键

D 氢键

13、某一重组 DNA （ 6.2 kb ）的载体部分有两个 SmaI 酶切位点。用 SmaI

酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的 SmaI 酶切位点共有【】

A 4 个

B 3 个

C 2 个

D 至少 2 个

14、下列设计的探针中，最佳的是【】

A ACATTAAATTATT

B GGGCA

C ACCTTGATAAGGT

D CGGACTTGACCATC

15、cDNA 法获得目的基因的优点是【】

A 成功率高

B 不含内含子

C 操作简便

D 表达产物可以分泌

二、名词解释（每题2分，共20分）

1、Southern blotting:

2、Cosmid vector:

3、cDNA library:

4、RACE:

5、Probe:

6、RT-PCR

7、Insert inactivation:

8、S-D Sequence:

9、Shuttle plasmid vector:

10、MCS:

三、简答题（每题5分，共25分）

1、理想质粒载体的必备条件？

2、核酸操作的基本技术有哪些？

3、影响核酸保存的关键因素是什么？怎样保存核酸制品？

4、合成cDNA第二链的主要策略有哪些？

5、基因工程诞生的理论基础是什么？

四、问答题（每题10分，共40分）

1 PCR技术主要应用在哪些领域？

2 细菌的限制与修饰系统有什么意义？大肠杆菌K12限制与修饰系统的遗传分析揭示的4种表型是什么？？

3 试述5′RACE技术原理和方法

4大肠杆菌作为基因工程受体菌具有哪些特点？真核基因在大肠杆菌中表达存在哪些障碍？

基因工程试题标准答案及评分标准

一、选择题（每题1分，共15分）

1、 A

2、 B

3、 A

4、 C 5 、B 6 、D 7 、A 8 、A 9、 A 10 、D

11 、C 12、 D 13 、D 14 、D 15、 A

二、名词解释（每题2分，共20分）

1、限制修饰系统：限制修饰系统是大多数细菌体内存在的类似动物免疫系统的同限制性内切酶和甲基化酶组成的保护系统。即通限制性内切酶破坏噬菌体的DNA而导致噬菌体的寄主范围受到限制，同时通过甲基化酶的作用，将细菌自身的DNA甲基化，使DNA得以修饰，从而免遭自身限制性酶的破坏。

2、质粒不亲和性：在没有选择压力的情况下，两种不同质粒不能够在同一宿主细胞系中稳定地共存的现象。

3、cDNA文库：是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。

4、RACE：是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以mRNA为模板反转录成cDNA 第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到3，或5，端之间未知序列的方法。

5、T-A clonging: 又名PCR克隆。TaqDNA聚合酶具末端转移酶活性，故用TaqDNA聚合酶进行PCR反应，反应产物在其3’末端往往习惯性的带上一个腺嘌呤粘性末端（-A）,从而难以将该产物以平末端连接的方式直接克隆到载体上；针对PCR产物的这一特点，将普通的质粒载体在其多克隆位点上用一种限制性内切酶处理，获得线形的平末端载体，再在该载体的基础上用末端转移酶给其3’末端加上一个胸腺嘧啶粘性末端（-T），由此获得的新型载体称之为T载体；用T载体的3 ’T与含PCR产物的3’A进行配对，而将PCR产物以粘末端连接的方式直接高效的克隆到T载体上的过程称之为T-A cloning。

6、RT-PCR:先用逆转录酶作用于mRNA，以寡聚dT为引物合成cDNA第一链，然后用已知一对引物，扩增嵌合分子，这种方法称为逆转录PCR

7、Insert inaction:即插入失活，基因工程载体上的某些选择标记基因常常含某种或某几种限制性内切酶的单一酶切位点，在该位点用相应的限制性内切酶处理，并将外源DNA片段插入该位点，则插入的外源DNA片段将破坏原有基因的读码框，往往导致原有的选择标记基因无法翻译表达，或即使翻译表达，形成的也是丧失了原有生物活性的蛋白质，这一现象称为插入失活。。

8、S-D序列：在大肠杆菌mRNA的核糖体结合位点上，含有一个转译起始密码子及同16S核糖体RNA 3，末端碱基互补的序列，该序列最初由Shine 、Dalgarno发现，故后来命名为Shine —Dalgarno 序列，简称S-D序列。

9、穿梭质粒载体：指一类由人工构建的具有两种不同复制起点的选择标记，因而可在两种不同宿主细胞中存活和复制的质粒载体。

10、MCS：指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点的DNA片段。

三、简答题（共25分，每题5分）

1、理想质粒载体的必备条件？

⑴具有较小的分子质量和较高的拷贝数。

⑵具有若干限制性核酸内切酶的单一酶切位点。

⑶具有两种以上的选择标记基因。

⑷缺失mob基因。