高效液相色谱法测定辣椒及辣椒制品中辣椒素类物质

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高效液相色谱内标法测定辣椒制品中苏丹红

关键词：内标法；橘红２号；ＨＰＬＣ；辣椒制品中图分类号：ＴＳ２０Ｉ．６／ＴＳ２０７．５文献标识码：Ａ文章编号：１００６—２５１３（２０１６）０３—０１７１—０４
ＨｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｍｅｔｈｏｄｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＳｕｄａｎｒｅｄｉｎｃｈｉｌｌｉｐｒｏｄｕｃｔｓ
ＤＩＷａｎ—ｓｈａｎ
（ＬｉａｏｎｉｎｇＰｅｔｒｏ－ｃｈｅｍｉｃａｌＶｏｃａｔｉｏｎａｌＴｅｃｈｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｊｉｎｚｈｏｕ１２１００１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｒａｎｇｅ２ｗａｓｃｈｏｓｅｎａｓｔｈｅｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｓｕｂｓｔａｎｃｅｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＳｕｄａｎｒｅｄｉｎｃｈｉｌｉｐｒｏｄｕｃｔｓｂｖＨＰＬＣ．Ｓａｍｐｌｅｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅｔｈｅｎｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ３０ｍｉｎａｎｄｆｉｌｔｅｒｉｎｇ．Ｔｈｅｆｉｌｔｒａｔｅｗａｓｍｉｘｅｄｗｉｔｈｓｏｄｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄｓｅｔｉｎｆｕｎｎｅ１ａｎｄｓｔｏｏｄｆｏｒｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ａｆｔｅｒｓｏｌｖｅｎｔｅｖａｐｏｒａｔｅｄ，１０ｍｌａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅｓｏｌｕｔｉｏｎｗａｓｔｈｅｎａｄｄｅｄ．Ｔｈｅｎ６ｍｌｍｅｔｈａｎｏｌｗａｓｕｓｅｄｔｏｗａｓｈａｃｔｉｖａｔｅｄａｎｄｓｍａｌｌｃｏｌｕｍｎｐｕｒｉｆｉｅｄａｍｉｎｏｓｏｌｉｄｐｈａｓｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．ＴｈｅＮｏｖａ．ＰａｋＣｌ８ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｃｏｌｕｍｎ（３．９ｍｍ１５ｍｍ｛５（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｍ）ｗａｓｕｓｅｄｉｎｓｅｐａｒａｔｉｏｎｗｉｔｈｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（Ａ），ｕｌｔｒａｐｕｒｅｗａｔｅｒ（Ｂ）ｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ：０～３ｍｉｎ，Ｂ３０Ａ７Ｏ％％ｌ３ — ４．５ｍｉｎＡ＿７Ｏ％～９５％ａｎｄＢ３０％～５％；４．５～７．５ｍｉｎＡ９５，Ｂ５％％；７．５～８．５ｍｉｎＡ９５％～７０％ａｎｄＢ５％～３０％．Ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ０．３ｍＬ／ｍｉｎ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓ５１５ｎｍ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｕｎｄｅｒｔｈｅａｂｏｖｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，Ｏｒａｎｇｅ２ｗａｓｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙｓｅｐａｒａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅＳｕｄａｎｒｅｄｉｎｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｗｈｉｃｈｃａｎｂｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＳｕｄａｎｒｅｄ．Ｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０．５～１．５ｍｇ／ｋｇ．ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｏｆ４ｋｉｎｄｓｏｆＳｕｄａｎｒｅｄｐｉｇｍｅｎｔｗａｓｂｅｔｗｅｅｎ８８．７％～９９．７％，ｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎ（ＲＳＤ）＜０．２５％，ｔｈｅｌｏｗｅｓｔｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｓｉｇｎａｌ—ｔｏ．ｎｏｉｓｅｒａｔｉｏｓ（Ｓ／Ｎ＝３）ｗｅｒｅ０．５６，０．５３，０４６，０．３３ｇ／ｋｇ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅｔｏｏｐｅｒａｔｅ，ｇｏｏｄａｃｃｕｒａｃｙ，ｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ．ＩｔＣａｌｌｂｅｕｓｅｄｆｏｒＳｕｄａｎｒｅｄａｎａｌｙｓｉｓｉｎｈｏｔｐｅｐｐｅｒｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｍｅｔｈｏｄｌｏｒａｎｇｅ２ｌＳｕｄａｎｒｅｄｌＨＰＬＣｌｐｅｐｐｅｒｐｒｏｄｕｃｔｓ

高效液相色谱法检测饲料添加剂样品中的辣椒素类似物

高效液相色谱法检测饲料添加剂样品中的辣椒素类似物陈玉艳;于家丰【摘要】本试验利用低毒、经济的乙醇作为提取液,回流冷凝提取样品中的辣椒素类似物.用高效液相色谱法测定辣椒素、二氢辣椒素和降二氢辣椒素,采用C8色谱柱,粒度5μm,长度150 mm,内径3.9 mm,乙腈-水(体积比40:60)作为流动相,流速1.00 mL/min,在280 nm处进行检测.方法简洁方便,操作简易,可重复性与精密度强,对饲料添加剂辣椒素类似物的检测研究具有很好地指导作用.【期刊名称】《现代畜牧兽医》【年(卷),期】2018(000)010【总页数】5页(P12-16)【关键词】辣椒素类似物;高效液相色谱;饲料添加剂【作者】陈玉艳;于家丰【作者单位】辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心,辽宁沈阳 110016;辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心,辽宁沈阳 110016【正文语种】中文【中图分类】O657.72辣椒是生活中常见的食品、香辛料和调味品。

辣椒素又称辣椒碱，是辣椒的活性成分，是辣椒的次级代谢产物，对哺乳动物包括人类都有刺激性并可在口腔中产生灼烧感，不仅可作为食品添加剂，在医药保健、海洋防污及电线电缆的防蚁防鼠等方面同样具有着广阔的应用。

从辣椒中提取分离出的辣椒碱作为食品加工过程中的添加剂，有利于辣度的控制和辣椒碱的充分吸收利用。

另外，现代研究表明，辣椒碱具有消炎、镇痛、麻醉和戒毒等方面的功效，还可抑制肿瘤的发生，对皮肤病和减肥拥有特殊功效[1-3]。

辣椒素作为驱避剂，因其强烈辛辣味具有较强驱赶作用，并且不杀死海洋生物，具有明显的生态效益。

二氢辣椒素具有杀菌消毒的作用，可作为食品防腐剂，还可促进胃肠蠕动及胃液分泌，帮助消化。

辣椒素类物质是一种混合物，目前己经确定有19种成分，其中辣椒素、二氢辣椒素等5种组分的含量最高，之和已占总量99%左右，5种化合物中又以辣椒素（占总量69%）、二氢辣椒素（占总量22%）含量高，二者之和占总量91%，降二氢辣椒素占到7%[4]。

高效液相色谱法测定辣椒制品中的碱性橙和碱性玫瑰精含量

高效液相色谱法测定辣椒制品中的碱性橙和碱性玫瑰精含量杨琳1，陈青俊1，梁晶晶1，王京1，丁献荣2，吴平3(1.浙江公正检验中心有限公司，浙江杭州 310009 ；2.浙江公正检验中心有限公司浙中分公司，浙江义乌 322000；3.杭州娃哈哈集团有限公司，浙江杭州 310009)摘要：辣椒制品中的非食用色素工业染料经甲醇-水(7:3，V /V )超声振荡数次提取，高速离心，采用HPLC 系统用20mmol/L 醋酸铵溶液和甲醇梯度洗脱，采用二极管阵列检测器检测，用外标法峰面积定量。

结果显示：4种工业染料在0.25～20.0μg/mL 范围内的峰面积与质量浓度的线性关系良好，加标回收率为94.4%～101.9%。

该方法简便易行，准确可靠。

关键词：辣椒制品；碱性橙；碱性玫瑰精；高效液相色谱；二极管阵列检测器Determination of Basic Orange and Basic Rhodamine B in Cayenne Pepper by RP-HPLCYANG Lin 1，CHEN Qing-jun 1，LIANG Jing-jing 1，WANG Jing 1，DING Xian-rong 2，WU Ping 3(1. Zhejiang Gongzheng Testing Center Co. Ltd., Hangzhou 310009, China ；2. Zhejiang Gongzheng Testing Center Co. Ltd.,Zhezhong Filiale, Yiwu 322000, China ；3. Hangzhuo Wahaha Group Co. Ltd., Hangzhou 310009, China) Abstract ：An HPLC method for the determination of inedible basic colorants (basic orange and basic rhodamine) in cayenne pepper was established. Samples were extracted with methanol-water (7:3, V /V ) under ultrasonic assistance and the extract was centrifuged. The supernatant was then analyzed by HPLC-DAD with gradient elution (20 mmol/L ammonium acetate and methanol as mobile phase) and quanti ﬁ ed by external standard method. The concentrations of four industrial dyes (basic orange 2, 21 and 22 and basic rhodamine) in the range of 0.25–20.0 μg/mL showed good linearity with peak area. Recovery rates of basic orange 2, 21 and 22 and basic rhodamine in a known sample were in the range of 94.4%–101.9%. The HPLC method was simple and accurate.Key words ：cayenne pepper ；basic orange ；basic rhodamine ；HPLC ；diode array detector (DAD)中图分类号：O657.7 文献标识码：A文章编号：1002-6630(2012)24-0303-04收稿日期：2011-08-15碱性橙是一种偶氮类碱性工业染料，俗名“王金黄”、“块黄”等，主要用于纺织品、皮革制品及木制品的染色[1]；碱性玫瑰精又称罗丹明B 或玫瑰红B ，主要用于纸张和化妆品着色，也用于制色淀和染蚕丝，这两种染料都已经被认定长期食用是可以使人致癌的物质[2]，都被列为食品禁用物质[3]。

HPLC法测定辣椒制品中罗丹明B

HPLC法测定辣椒制品中罗丹明B作者：赵瑞来源：《食品安全导刊·下旬刊》2019年第02期摘要：颜色是人类判断食品好坏的一个重要指标，而罗丹明B化合物是一种鲜艳的荧光燃料常被用作食品染色剂。

罗丹明B的检测方面尚未有国家检测方法，本文以高效液相色谱-紫外二级阵列检测法为研究方法，以市场上的辣椒制品作为研究对象，进行罗丹明B检测的方法学研究。

关键词：罗丹明B;辣椒制品;回收率自古以来“食品安全重于泰山”，而罗丹明类化合物用于各类食品添加剂已有很长时间。

罗丹明B最早是用在萃取光度法中，使用过程中会接触毒性较大的有机试剂。

近几年间，人们还发现罗丹明B具有氧化还原特性、荧光特性以及较大的摩尔吸光系数。

目前，罗丹明B用作吸附质试剂、荧光指示剂、催化氧化还原指示剂染色剂等，已在荧光法、催化荧光法、伏安法、化学发光法、光度法、离子缔合食品染色等领域发挥重要作用[1]。

1 材料与方法1.1 材料、试剂与仪器本次试验所用样品：石磨辣椒粉、罗丹明B标准品Jkchemical（德国进口）、甲醇、乙酸乙酯、环己烷、丙酮、高效液相色谱仪、电子天平。

1.2 溶液的配制罗丹明B（标准系列工作溶液）的配制：分別精确吸取罗丹明B中间液0.1、0.2、0.5、1.0 mL于10 mL容量瓶中用甲醇溶液精确定容至刻度线配成10、20、50、100 ng/mL的标准系列工作溶液。

1.3 样品前处理方法准确称取试样辣椒粉1 g于50 mL具塞比色管中，加入25 mL乙酸乙酯-环己烷溶液溶解并定容至50 mL，于旋涡混匀器上混匀2 min。

进行超声15 min，放入离心机4 000 r/min离心5 min，进行固相萃取柱净化[2] 。

萃取：将待净化液加入柱中，再用0.2 mL提取液[乙酸乙酯/环己烷（1∶1）]淋洗样品管，一并加入SPE柱中，让其自然地流过萃取柱，流出液弃去。

清洗：待上样液完全流出后，用3 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去。

HPLC法测定辣椒红色素中辣椒素及二氢辣椒素含量

HPLC法测定辣椒红色素中辣椒素及二氢辣椒素含量刘立业;钟方丽;娄大伟;王慧竹;陈帅【期刊名称】《吉林化工学院学报》【年(卷),期】2015(032)008【摘要】利用高效液相色谱法(HPLC)测定辣椒红色素中辣椒素及二氢辣椒素的含量,结果表明:辣椒素在10～70 μg/mL范围内,回归方程为:y=34 158x+ 974 053,r =0.999 4,测定结果RSD为1.61(n =9),回收率为:94.23％(RSD=1.21,n=9),检测限为:0.5 mg/kg;二氢辣椒素在5～ 35 μg/mL范围内,回归方程为:y=41 404 +588 906,r=0.9 995,测定结果RSD为1.55(n =9),回收率为:93.17％(RSD=1.28,n=9),检测限为:1.0 mg/kg.该方法简便快捷,具有较高的灵敏度和精密度.【总页数】3页(P1-3)【作者】刘立业;钟方丽;娄大伟;王慧竹;陈帅【作者单位】吉林化工学院化学与制药工程学院,吉林吉林132022;吉林化工学院化学与制药工程学院,吉林吉林132022;吉林化工学院化学与制药工程学院,吉林吉林132022;吉林化工学院化学与制药工程学院,吉林吉林132022;吉林化工学院化学与制药工程学院,吉林吉林132022【正文语种】中文【中图分类】O657.7【相关文献】1.高效液相色谱法测定辣椒中辣椒素、二氢辣椒素2.HPLC 法测定不同产地辣椒中辣椒素和二氢辣椒素的含量3.RP-HPLC法测定辣椒风湿巴布膏中辣椒素和二氢辣椒素4.GPC-HPLC-MS／MS法测定食用油中天然辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素含量5.固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定食用油脂中的合成辣椒素、天然辣椒素和二氢辣椒素因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

HPLC法检测辣椒不同部位中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量

Ａｂｔａｔｈｕｎｎｓｆｅｐｒｓｏｔｂｔａｓｉｉａｄｉｏｐｕｄｅｉｄｆｍｃｐａｉ（ａｓｉ— ｓｃ：Ｔｅｒｉｔｔｏｐｅｉｃｎｒｕｄｔｃｐａｎｎｓｃｍｏｎｓｒｅｏａｓｉｎｃｐａｉｒｂｇａｅｐｉｅｏｃｔｄｖｒｃｃ
ｎｉｓ．Ｃｐａｃｎｉｙｒｃｐａｃａｅｔｅｓｏｇｓｂｒｉｇｅｅｔａｄａｅｍｒａ０ｏｅｔａｃｍｏ）ａｓｉｉａｄｄｈｄｏａｓｉｎｈｖｔｎｅｔｕｎｆｃｓｎｒｏｅｔｎ９％ｆｈｔｌｏ — ｄｎｉｈｒｎｆｈｔｏ
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（ｎｉｅｎｎｅｅｒｈＣｎｅｆａｒｌｉｎｅｅＰｏｉｃ，Ｈｎａ５２０ＥｇｅｉｇＲｓａｃｅｔｏｔａＰｇｔｎＨｂｉｒｖｅａｄｎ０７５）ｎｒＮｕｍｅｉｎ
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高效液相色谱法测定不同品种辣椒中的辣椒素

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同液相色谱法测定不同品种辣椒中的辣椒素效
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张海利。，李焕秀。，为国。刘，孙娟。，杨永超。佳。，陈
（．州市农业科学院蔬菜研究所，江温州３５１；２四川农业大学林学园艺学院，四川雅安１温浙２０４．
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高效液相色谱法测定辣椒中维生素C的含量

收稿日期:2008206201修改日期:2008209201基金项目:南京晓庄学院院级科研项目(2006NXY18作者简介:胡应杰,男,南京晓庄学院化学系教师,硕士.2008年11月第6期南京晓庄学院学报JOURNAL OF NANJ I N G X I A OZ HUANG UN I V ERSI TY Nov .2008No .6高效液相色谱法测定辣椒中维生素C 的含量胡应杰1,潘康标2,陈昌云1,柳闽生1(1.南京晓庄学院化学系,江苏南京210017;2.江苏省农产品质量检验测试中心,江苏南京210036摘要:文章建立了一种高效液相色谱测定辣椒中维生素C 含量的方法.采用0.1%的草酸作为提取剂,色谱中采用Hypersil 2C 18色谱柱,pH =6,0.05mol/L 磷酸二氢钾缓冲溶液:甲醇=95∶5(v/v 作流动相.流速1.0m l/m in,DAD 检测器,检测波长254n m.维生素C 在20—100mg/L 内有良好的线性关系,线性回归方程为y =29.664x -12.37,相关系数为0.9953,方法回收率为91.24%-105.6%,相对标准偏差小于2%.本文测定方法简便,快速,能准确测定辣椒中维生素C 的含量.关键词:辣椒;高效液相色谱;维生素C中图分类号:O642文献标识码:A 文章编号:100927902(200806200302030引言辣椒营养价值很高,堪称“蔬菜之冠”,其富含维生素B 、维生素C 、蛋白质、胡萝卜素、铁、磷、钙,以及糖等成分,尤其是维生素C 的含量特别丰富,居蔬菜中的前列.每百克辣椒中所含维生素C 比茄子多35倍,比西红柿多9倍,比大白菜多3倍.维生素C 又名抗坏血酸,是一类水溶性的活性物质,有较强的还原作用,及重要的生理功能.维生素C 它广泛存在于新鲜的水果、蔬菜中[122],人体本身不能合成,必须依靠膳食供给,因此研究水果蔬菜中维生素C 的含量测定方法具有重要意义.维生素C 测定的方法一般有化学法、比色法、紫外分光光度法、荧光法等,这些方法所需试剂较多、操作繁琐[324].高效液相色谱法具有高效、快速、稳定、可靠等特点[5].在所测样品较多的情况下,借助仪器的分析方法能更快更准确的进1行含量的测定,且准确性较高.近年来用高效液相色谱法测定维生素C 含量已有一些报道[628],但用此方法测定几种辣椒中的维生素C 含量尚未见报道.本文选择五种常见辣椒,通过液相色谱分离条件优化,建立了一种简便、快速、稳定的辣椒中各种维生素C 含量测定方法.该方法同样适合于其它水果和蔬菜中维生素C 的含量测定.1实验部分1.1仪器与试剂HP1100高效液相色谱仪配有二极管阵列检测器(美国惠普公司;色谱柱Hypersil 2C 18(5μm ,150mm ×416mm (中国科学院兰州化学物理研究所;K Q5200B 型超声波清洗器;AE 系列电子天平(梅特勒2托利多仪器上海有限公司;组织捣碎机,布氏漏斗,烧杯,25m l 棕色容量瓶.维生素C 标准对照品(维生素C 含量99.17%,中国医药集团化学试剂公司;2次蒸馏水;甲醇(色谱纯,美国Fisher 公司;草酸、盐酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾均为分析纯;市售青椒、虎皮尖椒、甜椒、杭椒、小红尖椒.1.2样品处理及实验条件样品处理采用国标[9]的方法:将辣椒洗净,切开,放置于匀浆机中,加0.1%的草酸为提取剂,匀浆,然后用布氏漏斗过滤.称取5g 样品滤液于50mL 容量瓶中,用011%草酸溶液定容,分析前用0145μm 滤膜过滤.高效液相色谱的条件:A:pH =6,0.05mol/L 磷酸二氢钾,B:甲醇(A:B =95∶5v/v 为流动相,流速为1.0m l/m in,检测波长254n m ,进样量10μl,柱温20℃维生素C 标准溶液的制备:准确称取维生素C标准品50mg 于小烧杯中,用0.1%的草酸溶解,搅—03—拌,转移至50m l棕色容量瓶中,加水定容,得到维生素C含量为1000μg/m l的标准溶液.2结果与讨论2.1维生素C提取剂的选择维生素C溶液热稳定性较差,在中性或碱性水溶液中易被氧化,但在酸性溶液中却很稳定.提取维生素C的方法很多[3,9,10],为防止样品及标样中维生素C被氧化分解[8],用0.1%草酸溶液作溶剂来溶解样品及标样.2.2流动相的选择考虑到维生素C在酸性环境中比较稳定,选择调节流动相的pH值为酸性.经过采用不同值的实验证明,pH值在5.0~6.5之间,维生素C的吸收比较大,灵敏度比较高,因此本文选择磷酸二氢钾为流动相,调节pH值为6.0[11].本文选择了配比分别为90∶10,95∶5,85∶15,80∶20的流动相,发现出峰快了,杂质干扰较大,峰不易分开,出峰慢了,实验时间变长,最后确定95∶5的配比.另外流动相必须现配现用,放久易产生多磷酸盐,且一般在低温下保存.2.3检测器波长的选择维生素C在254nm有最大吸收,故选择254 n m作为检测波长.2.4标准工作曲线的绘制:用0.1%草酸溶液分别配制20、40、60、80、100mg・L-1维生素C标准溶液,定容至50m l,溶液用0.45μm滤膜过滤,用微量进样器进样10μL,依次测出峰面积.然后以维生素C标准溶液质量浓度(mg/L作自变量,相对应的峰面积作因变量,绘制标准工作曲线,如图1所示.标准曲线的相关系数R2=0.9953,说明曲线的线性关系良好.图1维生素C的标准工作曲线2.5维生素C含量测定及精密度考察五种辣椒样品都在同一实验条件下平行测定7次,维生素C含量的测定结果见表1,维生素C标准样品色谱图见图2,甜椒样品色谱图见图3.由表1可知,精密度实验的相对标准偏差小于2%,说明该方法重复性和再现性都是比较高的.从样品色谱图中可以看到,维生素C的出峰时间在2m in左右,具有灵敏,快速的特点.由表1可知,五种辣椒中维生素C含量大小顺序为:小红尖椒>青椒>甜椒>虎皮尖椒>杭椒.表1维生素C含量测定结果及精密度考察(n=7样品Vc测定结果(mg/100mL平均值(mg/100mL标准偏差相对标准偏差(%青椒6.67,6.64,6.64,6.51,6.72,6.74,6.516.630.231.40甜椒5.53,5.53,5.65,5.37,5.59,5.59,5.475.530.241.71虎皮尖椒5.04,4.94,5.06,5.07,4.94,5.02,4.834.980.221.70小红尖椒9.11,8.94,8.82,8.84,8.95,9.01,8.858.870.251.13杭椒4.49,4.50,4.46,4.48,4.50,4.64,4.484.510.141.302.6回收率实验在测定完样品溶液中的维生素C含量后,以小红尖椒样品做回收率实验,分别取样品2mL,向样品中加入质量浓度为100μg/mL的维生素标准溶液,定容至25mL,进行峰面积的测定,然后将得到的峰面积代入线性回归方程就可以得到相应的维生素C测量值,经计算即得到维生素C的回收率.回收率实验结果见表2.从表2中可以看到,当采用A: pH6.0,0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液;B:甲醇(A∶B=95∶5v/v作流动相测定小红尖椒中维生素C的含量,回收率为91.24%—105.6%,符合定量分析中准确度的要求.表2回收率实验结果序号样品中维生素C量/mg加入维生素C标样量/mg测得的维生素C量/mg回收率/(% 1177.4100254.1591.24 2177.4200360.8195.41 3177.4300503.20105.6 4177.4400574.9499.56 5177.4500693.94102.53结论由以上分析可知,本文采用的分析方法是可靠的,该方法同样也适用于于其它水果、蔬菜中维生素C含量的测定.由于维生素C对光不稳定,遇氧易分—13—图2Vc标准样品色谱图图3甜椒样品的色谱图解,故本实验应避光操作,整个实验均用棕色容量瓶定容[12213];流动相均需色谱纯度,水用高纯度水,脱气后的流动相要小心尽量不引起气泡;所有过柱子的液体均需严格的过滤;压力不能太大,最好不要超过15MPa .采用该方法对五种辣椒进行维生素C 含量进行测定,结果表明,五种辣椒维生素C 含量大小依次为:小红尖椒>青椒>甜椒>虎皮尖椒>杭椒.参考文献:[1]陆道礼,李国文,陈庶来,等.草莓汁加工贮藏过程中维生素C 稳定性的研究[J ].食品研究与开发,2004,25(6:1212123.[2]姜波,范圣第,刘长建.菠萝中维生素C 的高效液相色谱分析[J ].大连民族学院学报,2003,5(1:52253.[3]贾君.5种水果中维生素C 含量的测定研究[J ].冷饮与速冻食品工业,2004,10(2:33234.[4]冯德明.用高效液相色谱法测定饮料中维生素C 的含量[J ].嘉兴学院学报,2003,15(3:49252.[5]崔容,李皎,王洪伟.水溶性维生素的高效液相色谱测定方法的研究[J ].中国卫生检验杂质,2005,1(15:55257.[6]赵玉娟,等.牛肉样品中维生素C 的HP LC 测定[J ].现代仪器,2005,(5:32233.[7]周晓霞.用高效液相色谱(HP LC 法测定饮料中维生素C的含量[J ].饮料工业,2003,6(1:43246.[8]王艳颖,姜国斌,胡文忠,等.高效液相色谱测定法测定草莓中维生素C 的含量[J ].大连民族学院学报,2006,27(2:21227.[9]G B /T5009.86蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸测定(荧光法和2,4一二硝基苯法[S].2003.[10]王雪梅,等.HP LC 法测定新鲜草莓中水溶性维生素[J ].食品科学,1995,5:52253.[11]蒋晔,刘红菊,郝晓花.反相高效液相色谱法同时测定9种水溶性维生素[J ].药物分析杂志,2005,25(3:3392342.[12]高志杰,李静涛,饶小思.高效液相色谱2二极管阵列检测器法测定饮料中维生素C 的研究[J ].中国卫生检验杂志,2006,16(4:4462447.[13]GI Kvesitadze,AG Kalandiya,S O Papunidze1,et al .I 2dentificati on and quantificati on of ascorbic acid in ki w i fruit by high perf or mance liquid chr omat ography[J ].App l B i o 2che mMocr o2bile,2001,37(2:2432246.(责任编辑:陈昌云Determ i n ati on of Vc i n Hot Pepper by Hi gh Performance L i qui d Chro matographyHU Ying 2jie 1,P AN Kang 2biao 2,CHEN Chang 2yun 1,L I U M ing 2sheng1(1.Depart m ent of Chem istry ,Nanjing Xiaozhuang University,Nanjing 210017,China;2.Agricultural Pr oducts Quality Safety Center of J iangsu Province,Nanjing 210036,ChinaAbstract:A p ractical method of detecting the content of V ita m in C in different kinds of hot Pepper by using HP LC was established .A Hypersil -C 18colu mn was used and the mobile phase was a m ixture of 0.05mol/L phos phoricacid t w o hydr ogen potassiu m buffer s oluti on and methanol (95∶5,v /v .The detect or was DAD with the fl ow rate being 1.0m l/m in and the detecti on wavelength,254nm in the HP LC syste m.The standard working curve of V ita 2m in C had a g ood liner relati on in the concentrati on ranging fr om 20t o 100mg/l,the liner equati on was y =291664x -12137,and the related coefficient was 0.9953.The recoveries were 91.24%-105.6%and the rela 2tively standard deviati on was bel ow 2%.This method was si m p le and fast,and it can exactly detect the content of V ita m in in hot pepper .Key words:hot pepper;high perf or mance liquid chr omat ography (HP LC ;vita m in C—23—。

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高效液相色谱法测定辣椒及辣椒制品中辣椒素类物质
1.范围：
用高效液相色谱法测定辣椒及辣椒制品中辣椒素类物质的方法及辣度表示
方法。
本方法的检出限：辣椒素、二氢辣椒素均为1mg/Kg，线性范围为
1mg/L-150mg/L。
2.试样提取：
在样品中加入甲醇—四氢呋喃混合溶剂25ml，用保鲜膜封口，用针扎几个
小孔，然后在60℃浴条件下，使用超声波清洗器提取30min。用滤纸过滤，收集
滤液，然后将滤渣连同滤纸重新加甲醇—四氢呋喃混合溶剂25ml，使用超声波
清洗器提取10min，重复两次，将三次过滤收集的滤液合并，用氮吹仪在70℃温
度下浓缩至10ml—20ml，然后用甲醇—四氢呋喃混合溶剂定容至50ml，经过滤
器(0.45µm微孔过滤膜)过滤后进行色谱分析。根据样品中辣椒素类物质总量和
检测器的灵敏度，必要时可以适当调整稀释倍数。
3.色谱参考条件：
色谱柱：Kromasil C-18 (4.6mm*250mm 5um)
流动相：甲醇：水=65：35
进样量：10 µl
流速：1.0 ml/min
紫外检测波长：280nm
柱温箱温度：30℃
4.结果：
按照色谱条件，进行HPLC分析，用标准物质色谱峰的保留时间定性；根据
辣椒素、二氢辣椒素标准曲线及试样中的峰面积定量。