液相色谱-串联质谱法检测饲料中的莱克多巴胺
莱克多巴胺残留检测的不确定度分析
数据的准确可靠对分析工作而言是至关重要的,不确定度表征合理地赋予被测量之值的分散性,定量表示测量的准确性。
ISO/ IEC17025－2005《检测和校准实验室能力认可准则》也明确规定,检测实验室应对测量结果给出不确定度评定。
本文根据有关标准,结合对实际操作条件的分析,对液相色谱法对猪肉中莱克多巴胺残留量的测量不确定度进行评估。
1 仪器、试剂与方法1.1仪器与试剂Agilent1200高效液相色谱仪(FLD检测器)、离心机、pH计、梅特勒XS-104电子天平;E120H超声波清洗器、恒温干燥箱等;盐酸莱克多巴胺对照品(含量:98.0±0.5%)其他试剂均为分析纯。
1.2标准曲线的制备:精密称取莱克多巴胺对照品约10mg置于100mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀制成0.1mg/ml的溶液作为标准储备液。
精密量取上述标准储备液1ml,2ml分别置于100ml的容量瓶中,加2%的乙酸溶液稀释至刻度摇匀制成1μg/ml及2ug/ml的标准溶液,精密量取1ug/ml的标准溶液5ml、2ml、1ml分别置于10ml的容量瓶中,加2%的乙酸溶液稀释至刻度摇匀制成0.5μg/ml、0.2μg/ml 及0.1μg/ml的标准溶液,精密量取1μg/ml的标准溶液5ml置于100ml的容量瓶中,加2%的乙酸溶液稀释至刻度摇匀制成0.05μg/ ml的标准溶液。
精密量取上述标准溶液注入高效液相色谱仪,记录色谱图,按照浓度与峰面积制作标准曲线,回归方程:Y=-0. 00216+0.00273X(相关系数r＝0.9999),其中Y为浓度,X为峰面积。
1.3样品残留量的测定过程精密称取匀浆好的猪肝样品约5g,置于50ml的塑料离心管中加入乙腈20ml,漩涡振摇15min,于4℃的冷冻离心装置上以3500r/min 离心10min,取上清液。
将上述肝样用20ml的乙腈按照上述方法重复提取,合并上清液至分液漏斗中,用乙腈饱和的正己烷20ml振摇提取,静置分层后除去正己烷相,重复提取3次(20ml+20ml+20ml)。
高效液相色谱—质谱联用技术测定食品中有害物质残留分析方法的研究
高效液相色谱—质谱联用技术测定食品中有害物质残留分析方法的研究一、本文概述高效液相色谱—质谱联用技术（HPLCMS）是一种广泛应用于食品安全领域的分析手段，其结合了高效液相色谱的分离能力和质谱的鉴定与定量能力，为食品中有害物质残留的检测提供了一种高效、准确的方法。
本文旨在探讨HPLCMS技术在食品中有害物质残留分析方法研究中的应用和发展。
本文将介绍HPLCMS技术的基本原理及其在食品分析中的重要性。
接着，将详细阐述该技术在检测食品中特定有害物质，如农药残留、重金属、非法添加剂等的应用案例。
本文还将讨论HPLCMS技术在实际应用中面临的挑战，包括样品前处理、方法开发、定量准确性和仪器灵敏度等方面。
文章将展望HPLCMS技术在未来食品安全监测中的潜在发展趋势，以及如何通过技术创新进一步提升分析方法的效能和适用性。
通过对HPLCMS技术在食品中有害物质残留分析方法研究的深入探讨，本文期望为食品安全监管机构、食品生产企业以及相关科研工作者提供有价值的参考和指导，共同促进食品安全保障水平的提升。
二、高效液相色谱—质谱联用技术原理高效液相色谱质谱联用技术（LCMS）是一种将液相色谱（LC）和质谱（MS）技术相结合的分析方法。
它通过液相色谱技术对样品进行分离，然后利用质谱技术对分离后的组分进行检测和分析。
液相色谱分离是基于样品中各组分在流动相和固定相之间的分配差异。
样品溶液通过高压泵进入色谱柱，流动相携带样品通过固定相。
由于不同组分在两相中的分配系数不同，它们在色谱柱中的移动速度也不同，从而实现分离。
分离后的组分按顺序从色谱柱中流出。
分离后的组分进入质谱仪后，首先被离子化，产生带电的离子。
这些离子通过质量分析器，根据质荷比（mz）进行分离。
检测器检测到不同质荷比的离子，并记录其相对丰度。
通过分析质谱图，可以确定样品中各组分的分子质量、结构信息以及相对含量。
LCMS技术具有高分离能力、高灵敏度、高选择性和结构分析能力等特点，可以用于食品中有害物质残留的分析，如农药、兽药残留、违禁物质和有害添加剂等。
肉牛血浆和尿液中莱克多巴胺残留消除规律分析
肉牛血浆和尿液中莱克多巴胺残留消除规律分析梁晓维;年芳;张军民;赵青余;张凯;汤超华;李发弟【期刊名称】《甘肃农业大学学报》【年(卷),期】2016(051)003【摘要】【目的】研究莱克多巴胺在肉牛血浆和尿液中的残留消除规律．【方法】选取3头中国‘西门塔尔’杂交肉牛，连续饲喂莱克多巴胺28 d，给药剂量2．01 mg／（kg·d），采集给药第1、7、14、21、28 d和停药第3、7、14、28 d血浆和尿液样品，采用高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS-MS）检测血浆和尿液中莱克多巴胺含量．【结果】血浆与尿液中莱克多巴胺含量均在给药7 d达到峰值，血浆中残留量为（6．55±1．93）ng／mL，未酶解尿液中残留量为（8402．03±1307．09）ng／mL．峰值之后莱克多巴胺含量开始下降，停药后下降迅速，停药3 d时血浆中残留量为（0．60±0．01）ng／mL，未酶解尿液中残留量为（1334．93±25．74）ng／mL，停药28 d时血浆中未检测到莱克多巴胺，而未酶解尿液仍可检测到（5．77±0．10）ng／mL；酶解后尿液中莱克多巴胺含量显著高于酶解前（P＜0．05）．【结论】与血浆相比，肉牛尿液更适合作为莱克多巴胺的监管靶标．【总页数】7页(P8-14)【作者】梁晓维;年芳;张军民;赵青余;张凯;汤超华;李发弟【作者单位】甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州 730070; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京100193;甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州 730070;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京100193; 中国农业科学院-世界农用林业中心农用林业与可持续畜牧业联合实验室，北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京 100193; 中国农业科学院-世界农用林业中心农用林业与可持续畜牧业联合实验室，北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京 100193; 中国农业科学院-世界农用林业中心农用林业与可持续畜牧业联合实验室，北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京 100193; 中国农业科学院-世界农用林业中心农用林业与可持续畜牧业联合实验室，北京 100193;甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州 730070【正文语种】中文【中图分类】S823.9+2【相关文献】1.沙丁胺醇在肉牛血浆及尿液中残留消除规律研究 [J], 张凯;刘希峰;张军民;赵青余;孟庆石;刘胜晟;汤超华;苏传友2.高效液相色谱-四极杆质谱联用测定猪尿液中莱克多巴胺残留 [J], 赖碧清;李秋剑3.猪尿液中莱克多巴胺残留量的测定r——液相色谱串联质谱法 [J], 陈俊萍;刘国华;黄婷4.猪肾脏等组织中盐酸莱克多巴胺的HPLC检测方法及其残留消除 [J], 申屠芬琴;强致懿;张素霞;丁双阳;江海洋;沈建忠5.克伦特罗在猪尿液和血液中的残留消除规律研究 [J], 朱文渊;霍翠梅;郝晴晴因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱-串联质谱法检测猪尿中四种β-受体激动剂残留的研究
０２ｍ ／ ｉ； ． Ｌ ｍｎ 进样 量 为 ２ Ｌ ０ 。质 谱条 件为 ： 电喷雾 离 子源 （ Ｓ ） 多反应 监 测 （ Ｒ 方式进 行 ＥＩ ， Ｍ Ｍ）
采集； 同位素内标法定量。结果表 明， 四种 Ｂ一受体激动剂在 １ ５ ｇｍ — ０ｎ／ Ｌ浓度范围内呈现 良好 的线性关系， 相关指数 尺 均大于 ０９ ８ 方法检测限为 ０ ３ｎ／ Ｌ 定量限为 ０ ５ｎ／ Ｌ 从 ０５ ．９ ； ． ｇｍ ， ． ｇｍ ； ． 、 １ ２ｎ／ Ｌ３ 和 ｇｍ 个添加浓度检测结果可 以看 出， 方法平 均回收率为 ８ ． ％ 一 １％ ， 内 Ｒ Ｄ为 ６６ １０ 批 Ｓ
Ｗ ． ｇ ｍ ．Ｔ ｅａｅ ｇ ｅｏｅ ｅ ｏ ｐｋｄｐｇｕｉ ｔ ｈ ｈｅ ｏｃｎ ａ ｏｓｏ ０ ５ Ｉａ ｄ２ｎ ／ ｌ ｓ ａ ０ ５ ｎ／ Ｌ ｈ ｖｒ ｅｒ ｖｒ ｓｆ ｍ ｓｉ ｉ ｒ ｅ ａ ｔｅｔ ｅｃｎｅｔ ｔｎ ｆ ． ， ｇ ｌ ａ ｃ ｉ ｒ ｅ ｎ ｒ ｒｉ ｎ ｌ Ｌ
维普资讯
２０ ， （ ）１ ～ ８孙 雷 ， ０８４ ４ ： １／ ２ ５ 等
中国兽药杂志
・ ５－ １
高效液相色谱 一串联质谱法检测 猪尿 中四种 ｐ一 受体激动剂残 留的研究
孙 雷 ， 琪， 骊 ， 刘 张 王树槐 ， 霞 汪
（ 中国兽 医药品监察所 ， 北京 １０ ８ ） ０ ０ １
ｍ ／ ｉ ； ｎｅｔ ｎ ｖｌｍｅＷ ０ Ｉ ．ＭａｓＳ ｅ ｔ ｍｅ ｙ ｃｎ ｉｏ ：Ｅ Ｉ ａ ｄ ＭＲ ｏ ｅ ｈ ａｉｒｔｎ Ｌ ｍ ｎ ｉｊ ｉ ｏ ｃｏ ｕ ａ ２ Ｌ ｓ ｘ ｓ ｐ ｃ ｏ ｔ ｏ ｄ ｉｎ Ｓ ｎ Ｍ ｍ ｄ ．Ｔ ｅｃｌ ａ ｏ ｒ ｒ ｔ ｂ ｉ
ｌｔ ｎ ｃ ｅｆ ｉｎ ａｉ ｏ ｆ ｃ ｅ ｔ ｏ ｉ ＞０ ９ ８ ． ９ ．Ｔ ｅ ｌ ｔ ｆｄ ｔ ｃ ｏ ｆｔ ｅ ｍｅｈ ｄ Ｗ ． Ｓ ｍＬ，ａ ｄ ｔ ｅ ｌ ｔ ｆｑ ａ ｔ ｃ ｔ ｎ ｈ ｉ ｅｅ ｔ ｎ ｏ ｔ ｏ ａ ０ ３ ｎ ／ ｍｉ ｏ ｉ ｈ ｓ ｎ ｉ ｕ ｉ ａ ｏ ｈ ｍｉ ｏ ｎ ｆ ｉ ｉ
关于高效液相色谱-串联质谱法测定牛肉中β-激动剂类药物残留的研究
关于高效液相色谱-串联质谱法测定牛肉中β-激动剂类药物残
留的研究
左丹
【期刊名称】《现代食品》
【年(卷),期】2024(30)4
【摘要】本研究采用高效液相色谱-串联质谱法,对牛肉中的3种β-受体激动剂沙
丁胺醇、莱克多巴胺、克伦特罗进行检测,重点开展酶解提取与净化优化实验。
结
果显示,该方法具备良好的线性关系与较高的加标回收率,可检测牛肉中的“瘦肉精”药剂残留,能够为相关人员开展肉制品中β-受体激动剂的检测提供参考。
【总页数】3页(P184-186)
【作者】左丹
【作者单位】湖南省分析测试中心有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】TS207.3
【相关文献】
1.高效液相色谱—串联质谱法测定牛肉中的十种磺胺类药物残留
2.超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛肉中18种食源性兴奋剂类药物残留
3.超高效液相色谱-串联质谱法测定牛肉中9种头孢菌素类药物残留
4.一步式QuEChERS方法结合高效液相色谱-串联质谱法测定牛肉中25种磺胺类药物残留
5.超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定猪肉中4种β-受体激动剂类药物残留
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液相色谱-串联质谱法测定饲料中16种氨基酸
形成一种平衡，从而达到机体的营养平衡状态。蛋白质突 然增加或减少摄入量时，平衡机制会被破坏。如果持续时 间过长，可能会导致体内抗体的死亡[2-3]。饲料作为畜禽动 物摄入的食物，对其所含氨基酸含量的监测至关物，是构成生命体蛋白质的基本物质。蛋白质作为人体必 需的营养物质，在人体内不能被直接利用，而是在胃肠道 中经过多种消化酶的作用，将高分子蛋白质分解为低分子 的氨基酸后被人体吸收[1]。氨基酸进入血液中与其输出速 度几乎相等，使体内氨基酸代谢处于动态平衡。当摄入的 蛋白质含量适宜时，蛋白质和氨基酸之间不断合成和分解
将 1.2 中 的 16 种 氨 基 酸 标 准 溶 液 稀 释 成 浓 度 在 0.01~50.00 μmol/L 的 标 准 系 列 溶 液 ，上 机 进 行 测 定 ，以 标准溶液浓度作为横坐标 x（μmol/L），以峰面积作为纵 坐 标 y 建 立 标 准 曲 线 。 由 表 3 可 知 ，16 种 氨 基 酸 在
6 mol/L 的盐酸溶液 10.0 mL，于氮气下充氮 3 min，赶去管
中空气，加盖；（110±2）℃的电热鼓风干燥箱中水解 24 h，
取出冷却，摇匀，使用快速定性滤纸过滤至另一 10 mL 离
心管中；量取 0.1 mL 样液于 55 ℃下氮气吹干，按样品中氨
基 酸 含 量 ，加 入 1~10 mL 的 0.1% 甲 酸 水 溶 液 复 溶 ，过
母离子/ 子离子/ 扫描
碰撞
去簇
（m/z） （m/z） 时间/ms 电压/V 电压/V
甘氨酸
76.125 30.357 15.5
11.70
30
肉牛血浆和尿液中莱克多巴胺残留消除规律分析
肉牛血浆和尿液中莱克多巴胺残留消除规律分析梁晓维;年芳;张军民;赵青余;张凯;汤超华;李发弟【摘要】【目的】研究莱克多巴胺在肉牛血浆和尿液中的残留消除规律．【方法】选取3头中国‘西门塔尔’杂交肉牛，连续饲喂莱克多巴胺28 d，给药剂量2．01 mg／（kg·d），采集给药第1、7、14、21、28 d和停药第3、7、14、28 d血浆和尿液样品，采用高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS-MS）检测血浆和尿液中莱克多巴胺含量．【结果】血浆与尿液中莱克多巴胺含量均在给药7 d达到峰值，血浆中残留量为（6．55±1．93）ng／mL，未酶解尿液中残留量为（8402．03±1307．09）ng／mL．峰值之后莱克多巴胺含量开始下降，停药后下降迅速，停药3 d时血浆中残留量为（0．60±0．01）ng／mL，未酶解尿液中残留量为（1334．93±25．74）ng／mL，停药28 d时血浆中未检测到莱克多巴胺，而未酶解尿液仍可检测到（5．77±0．10）ng／mL；酶解后尿液中莱克多巴胺含量显著高于酶解前（P＜0．05）．【结论】与血浆相比，肉牛尿液更适合作为莱克多巴胺的监管靶标．%[Obj ective]Eliminating rule of ractopamine residue in plasma and urine of beef cattle was in-vestigated.[Method]Three Chinese Simmental cross beef cattle were continuously fed ractopamine in a dose of 2.01 mg/(kg·d)weight/day for 28 days.Plasma and urine samples were collected on treated days of 1,7,14,21,28 and withdrawal days of3,7,14,28 d,The ractopamine concentrations were determined by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (HPLC-MS-MS)method.[Result]The ractopamine concentrations in plasma and urine peaked on the 7 th treated day,and the residue in plas-ma and urine was (6.55±1.93)and (8 402.03±1 307.09)ng/mL,respectively.Ractopamineresidues gradually decreased after the peak value and dropped rapidly after stopping treatment.After drug with-drawal for 3 days,the concentrations of parent ractopamine in plasma and urine were(0.60±0.01)and (1 334.93±25.74)ng/mL,respectively.Parent ractopamine residues was (5.77±0.10)ng/mL in urine and not detected in plasma after withdrawal for 28 days.After the hydrolysis of conjugates,ractopamine content in urine was significantly higher than that before hydrolysis(P<0.05).[Conclusion]Urine is a more favorable target for supervision before slaughter compared to plasma.【期刊名称】《甘肃农业大学学报》【年(卷),期】2016(051)003【总页数】7页(P8-14)【关键词】肉牛;莱克多巴胺;血浆;尿液;残留【作者】梁晓维;年芳;张军民;赵青余;张凯;汤超华;李发弟【作者单位】甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州 730070; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京100193;甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州 730070;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京100193; 中国农业科学院-世界农用林业中心农用林业与可持续畜牧业联合实验室，北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京 100193; 中国农业科学院-世界农用林业中心农用林业与可持续畜牧业联合实验室，北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京 100193; 中国农业科学院-世界农用林业中心农用林业与可持续畜牧业联合实验室，北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，农业部华北动物遗传资源与营养科学观测实验站，北京 100193; 中国农业科学院-世界农用林业中心农用林业与可持续畜牧业联合实验室，北京 100193;甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州 730070【正文语种】中文【中图分类】S823.9+2β-受体激动剂是一类具有肾上腺素功能的苯乙醇胺类化合物[1]，俗称“瘦肉精”.莱克多巴胺作为其中一种，又名雷托帕明、培林等，对动物具有促生长作用，能够促进蛋白合成，降低脂肪沉积量，提高胴体瘦肉率，起到营养重分配的作用[2-4].然而“瘦肉精”能够在动物体内残留，人食用后轻则引发头晕、恶心、肌肉震颤、心率失常等症状，重则有可能引起恶性肿瘤[5-7].美国、日本和澳大利亚等国家批准莱克多巴胺作为动物饲料添加剂使用，而早在2002年我国农业部就明确规定禁止莱克多巴胺用作动物饲料和饮水添加剂[8].但是，我国仍有不法商贩为了谋取暴利而在动物生产过程中非法使用，由于“瘦肉精”而引发的食物中毒事件仍屡屡发生.我国监管部门常将血浆和尿液作为“瘦肉精”的监管靶标，莱克多巴胺在血浆和尿液中的残留时间决定其作为监测靶标的可靠性，目前国内外关于莱克多巴胺在动物血浆和尿液中的残留消除规律研究较少，肉牛血浆和尿液中莱克多巴胺残留消除数据缺乏.因此，本试验选取3头中国‘西门塔尔’杂交肉牛，连续饲喂莱克多巴胺28 d，以研究其在肉牛血浆和尿液中的残留消除规律，为监管部门提供数据支撑，完善对“瘦肉精”在反刍动物上的监管.1.1 试剂和仪器莱克多巴胺标准品 (德国Sigma-Aldrich公司) 纯度 94.05%，莱克多巴胺-D3内标 (加拿大C/D/N Isotopes公司)纯度98.5%，莱克多巴胺原药 (用于动物试验)纯度93%，由中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所提供，β-葡萄糖苷酸酶 (德国Merck Chemical公司)，甲醇、甲酸、乙腈均是色谱级，其他化学试剂均为分析纯.Waters高效液相色谱串联质谱仪(Xevo-TQ)，固相萃取柱(Mcx 60 mg，3 mL)，0.2 μm针筒式微孔过滤膜，24孔固相萃取仪等.1.2 试验设计及饲养管理选取体况良好的中国‘西门塔尔’杂交肉牛3头(265±14) kg，预饲期7 d，给药期28 d，休药期28 d，给药剂量2.01 mg/(kg·d)，根据初始体质量计算每日莱克多巴胺用药量，将所称药物拌入精料中于给药期早上7∶00一次性饲喂.试验在中国农业科学院北京畜牧兽医研究所肉牛试验基地进行，试验牛采取舍饲拴系饲喂，预饲期前打耳号，正式期前称体质量，其他条件按照养殖场的饲养管理进行.1.3 样品采集试验开始前采集空白血浆、尿液样品，开始后分别在给药第1、7、14、21、28 d 和停药第3、7、14、28 d采集血浆和尿液样品.血样于给药前通过颈静脉采集，经3 500 r/min离心10 min后分离血浆样品，-20 ℃保存待检.尿样采用集尿袋装置收集24 h尿液，混匀后取20 mL，-20 ℃保存待检.1.4 样品提取样品的提取过程主要参考Tang等[9].取血浆或尿液样品1 mL置于10 mL离心管(高浓度尿液在提取时稀释相应倍数后取1 mL)，加入50 μL内标溶液(5 ng/mL，内标用甲醇溶液稀释)，加入3 mL乙酸铵缓冲液 (pH 5.2)，添加10%高氯酸溶液500 μL沉淀蛋白，涡旋混匀1 min，8 000 r/min离心5 min，上清液备用.固相萃取柱先用3 mL甲醇活化和3 mL 0.1%甲酸溶液平衡，将上述处理后的样品上清液全部过柱，然后用3 mL 0.1%甲酸溶液、3 mL甲醇淋洗，真空抽干.用3 mL 5 %氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，50 ℃下氮气吹干.残余物用1.0 mL流动相(0.1甲酸溶液∶乙腈=9∶1)复溶后，涡旋混匀1 min，0.2 μm微孔滤膜过滤，上机测定.酶解尿液提取时所加内标用乙酸铵缓冲液稀释，防止有机溶剂破坏酶的活性，在加入3 mL乙酸铵缓冲液后添加β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶50 μL，37 ℃酶解16 h，然后添加10%高氯酸溶液500 μL沉淀蛋白，其余步骤同上.1.5 色谱质谱条件色谱柱为Acquity UPLC BEH C18 (50 mm×2.1 mm，粒径1.7 μm)，柱温40 ℃，进样量5 μL，流动相为0.1%甲酸溶液 (A)和乙腈 (B)，流速均为300 μL/min.使用Xevo-TQ三段四级质谱仪，离子源为ESI+，毛细管电压3 kV，锥孔电压29 V.离子源和去溶剂化温度分别为150 ℃和350 ℃，氮气流量为为600 L/h.监测模式：多重反应监测(MRM)，莱克多巴胺母离子 m/z 302.0对应子离子m/z107.1、m/z 164.1，莱克多巴胺-D3内标母离子 m/z 305对应子离子 m/z 124.1、m/z 167.2.1.6 数据处理试验数据利用EXCEL进行初步整理后使用SAS 9.2 (SAS Institute，US)中配对法t检验进行分析.试验数据采用表示.2.1 方法验证莱克多巴胺浓度为0.5～40 ng/mL范围内色谱峰面积与浓度呈线性相关，所得标准曲线为y=997.89x(R2=0.998 6).肉牛血浆中莱克多巴胺的检测限 (LOD)为0.05 ng/mL，定量限(LOQ)为0.2 ng/mL.肉牛尿液中莱克多巴胺的LOD为0.3 ng/mL，LOQ为2 ng/mL.血浆和尿液空白样品添加回收率及变异系数见表1.血浆和尿液中莱克多巴胺标准、莱克多巴胺-D3内标和总离子流图 (TIC)分别见图1-2.2.2 肉牛血浆中莱克多巴胺残留消除规律给药期及停药期肉牛血浆中莱克多巴胺残留消除规律见图3.给药后随时间推移血浆中莱克多巴胺残留量逐渐增加，给药1 d莱克多巴胺残留量为(4.00±0.47)ng/mL，给药7 d时达到峰值(6.55±1.93) ng/mL)，随后开始下降，给药28 d血浆中残留量为(3.43±0.59) ng/mL.而停药后血浆中莱克多巴胺残留量迅速下降，在停药3 d已下降至(0.60±0.01) ng/mL，停药7 d和14 d时残留量分别为(0.31±0.07)、(0.30±0.03) ng/mL，停药28 d时未检测到莱克多巴胺.2.3 肉牛尿液中莱克多巴胺残留消除规律给药期及停药期酶解前后肉牛尿液中莱克多巴胺残留消除规律见图4.肉牛未酶解尿液中莱克多巴胺残留量随着给药时间的延长而逐渐增加，给药1 d时含量为(4 211.0±1 572.18) ng/mL，给药7 d达到峰值(8 402.03±1 307.09)ng/mL，随后开始下降，给药28 d时含量为(3 630.62±825.21)ng/mL，停药后下降迅速，停药7 d时尿液中莱克多巴胺已下降至(55.66±9.08) ng/mL，而在停药28 d时尿液中仍可检测到(5.77±0.10) ng/mL.酶解后尿液中莱克多巴胺含量显著高于酶解前(P<0.05)，但残留消除趋势与酶解前相似，酶解后尿液在给药1 d时莱克多巴胺含量为(19 325.57±5 482.17)ng/mL，给药7 d时达到峰值(24 014.32±3 539.45) ng/mL，药28 d含量为(7 539.917±1 130.82) ng/mL，停药后迅速下降，在停药3 d时已下降至(1431.69±347.64) ng/mL，而在停药28 d时酶解尿液中仍有(13.41±0.96) ng/mL 莱克多巴胺.3.1 肉牛血浆中莱克多巴胺残留消除规律目前，国内外关于莱克多巴胺在动物血浆中的残留消除规律报道很少，早期研究报道猪饲喂30 mg/kg莱克多巴胺4 d，停药0、1 d时血液中的残留量分别为40、10 ng/mL，停药2 d时未检测到，LOD为10 ng/mL[10].Qiang等给长白猪连续口服饲喂莱克多巴胺28 d，结果发现在给药7 d时血浆中有5.1～9.6 ng/mL的莱克多巴胺残留，给药14 d时残留量达到8.4～9.9 ng/mL，而在给药28 d时残留量低于1 ng/mL，停药后未检测到[11].Tang等研究显示干乳期奶牛经瘤胃灌服2.01 mg/(kg·d)莱克多巴胺5 d，给药期血浆中莱克多巴胺随时间延长呈增长趋势，给药5 d时残留量为6.10 ng/mL，而停药后开始下降，停药3 d时为0.69 ng/mL，停药5 d已检测不到[9].本试验结果与以上研究结果相似，在给药期肉牛血浆中莱克多巴胺残留量随时间延长而逐渐增加，给药7 d达到峰值(6.55ng/mL)，随后开始下降，停药后快速消除，停药7 d到停药14 d时莱克多巴胺含量0.3 ng/mL左右.由于给药时间、剂量、方式和动物种类的不同，以及仪器检测限的不同，导致残留时间的差异，本试验在肉牛血浆中莱克多巴胺的残留时间要长于以上研究.3.2 肉牛尿液中莱克多巴胺残留消除规律莱克多巴胺在动物尿液中残留消除规律已有相关报道，但肉牛相关研究较少.Pleadin等研究结果表明，给猪连续饲喂28 d(0.1 mg/(kg·d))莱克多巴胺后，发现在给药1 d尿中莱克多巴胺含量为0.5 ng/mL，随着给药时间的延长，莱克多巴胺的含量逐渐增加，在给药25 d时达到峰值，随后开始下降，停药7 d尿中仍能检测到莱克多巴胺[12].Qiang等研究结果表明，猪饲喂18 mg/kg莱克多巴胺28 d，给药7 d尿中莱克多巴胺含残留量最高(650.1 ng/mL)，随后开始下降，在停药14 d检测不到残留[11].相似的研究中，同样饲喂18 mg/kg的莱克多巴胺，饲喂两周后检测尿中莱克多巴胺的残留情况，结果发现停药1 d猪尿中莱克多巴胺的含量，随着停药时间的延长尿中莱克多巴胺的残留逐渐减少，但在停药28 d尿液中仍能检测到莱克多巴胺[13].Smith等研究了莱克多巴胺在绵羊和肉牛尿液中残留规律，绵羊给药剂量0.373 mg/(kg ·d)，给药7 d，肉牛给药剂量0.432 mg/(kg·d)，给药8 d，结果显示在给药5 d时尿中莱克多巴胺均达到峰值，绵羊酶解尿液在停药7 d时仍有(178±78) ng/mL，肉牛尿液在停药7 d时低于LOQ(LOQ=50 ng/mL)[14-16].Tang等报道干乳期奶牛给药5 d，给药期间尿中莱克多巴胺含量逐渐增加，停药后下降，停药14 d仍可检测到[9].本试验中莱克多巴胺在尿液中的残留规律与以上研究结果相似，残留量随给药时间的延长而逐渐增加，给药7 d达到峰值，随后开始下降，然而由于给药期、给药剂量及动物种类的不同，莱克多巴胺在尿液中达到峰值的时间及残留时间存在一定的差异，本试验停药28 d肉牛尿液中仍可检测到莱克多巴胺 (以上尿液中莱克多巴胺残留量均为酶解前含量).莱克多巴胺进入机体后可代谢形成葡萄糖苷酸或硫酸轭合物[17]，研究发现猪体内主要有3种莱克多巴胺代谢物[18]，而在肉牛体内有四种莱克多巴胺代谢物[19]，因此本试验分别测定了酶解前后尿液中莱克多巴胺的含量，结果显示酶解后尿液中莱克多巴胺残留量显著高于酶解前(P<0.05)，这与其他文献的报道一致[9-16].尿液中排出的莱克多巴胺既包括原药又含有其轭合物[20]，经β-葡萄糖苷酸酶酶解后莱克多巴胺轭合物转化为游离态，从而增加了酶解尿液中莱克多巴胺的含量[21].3.3 肉牛血浆和尿液中莱克多巴胺残留消除规律对比莱克多巴胺进入动物机体后通过胃肠道吸收进入血液循环[22]，然后经过肾脏的浓缩过滤随尿液排出体外[23]，尿液是莱克多巴胺排出的主要途径[24].本试验中尿液与血浆相比，血浆和尿液中莱克多巴胺在同一时间点达到峰值，同时尿液中的残留量显著高于血浆，并且莱克多巴胺在尿液中的残留时间较长，这与Qiang等[11]的研究一致.本试验发现肉牛血浆中莱克多巴胺在停药7 d和停药14 d残留量均在0.3 ng/mL左右，而市面上莱克多巴胺快速检测试剂盒LOD大多在0.3 ng/mL左右，若用血浆作为靶标检测时易造成假阴性结果，因此在对莱克多巴胺非法使用的监管过程中，应选用尿液作为快速检测靶标，由于在进行快速检测时主要针对原药形式，因此应结合高效液相色谱串联质谱法进一步检测其酶解后含量，以确保动物性食品的安全.本试验结果显示莱克多巴胺在肉牛血浆和尿液中的残留存在峰值，尿液中莱克多巴胺残留量显著高于血浆，且残留时间长于血浆；酶解后尿液中莱克多巴胺含量显著高于酶解前，莱克多巴胺以原药和轭合物两种形态存在于尿液中.在肉牛监管方面选用尿液作为快速检测靶标的同时结合高效液相色谱串联质谱法进一步检测其酶解后含量，以确保肉类食品的安全.【相关文献】[1] 王培龙.β-受体激动剂类药物分子印迹和质谱分析技术研究[D].北京：中国农业科学院，2012[2] Carr S,Hamilton D,M iller K,et al.The effect of ractopamine hydrochloride (Paylean®) on lean carcass yields and pork quality characteristics of heavy pigs fed normal and amino acid fortified diets[J].Meat Science,2009,81(3):533-539[3] 丁焕中，陈杖榴，杨志凌.营养重分配剂莱克多巴胺的药理作用和应用[J].兽药与饲料添加剂，2002，7(1)：18-20[4] 左晓磊，邱伟，韩爱云，等.莱克多巴胺在畜禽生产中的应用及残留[J].中国畜牧兽医，2007，34(9)：12-14[5] 王昱.盐酸克伦特罗对小鼠大脑皮层ATP，SDH，ADA和 LDH活性的影响[J].甘肃农业大学学报，2013，48(2)：21-25[6] 魏蔚，祝伟霞，杨冀州.气相色谱-质谱 (GC-MS)测定猪尿中莱克多巴胺残留[J].监督与选择，2007(12)：61-61[7] 刘晓云.从莱克多巴胺在动物尿液及毛发中的消除规律探讨其监控模式与方法[D].广州：华南理工大学，2010[8] 中华人民共和国农业部.中华人民共和国农业部公告第193号：食品动物禁用的兽药及其他化合物清单[R].2002[9] Tang C,Zhang J,Li L,et al.Ractopamine residues in urine,plasma and hair of cattle during and after treatment[J].Journal of Analytical Toxicology,2014,38(3):149-154 [10] Dalidowicz J E,Thomson T D,Babbitt G E.Ractopamine hydrochloride,a phenethanolamine repartitioning agent:metabolism and tissue residues[C].ACS Symposium Series (USA).1992[11] Qiang Z,Shentu F,Wang B,et al.Residue depletion of ractopamine and its metabolites in swine tissues,urine,and serum[J].Journal of agricultural and Food Chemistry,2007,55(11):4319-4326[12] Pleadin J,Vuliĉ A,Perši N,et al.Ractopamine and clenbuterol urinary residues in pigs as food-producing animals[J].Food Technology and Biotechnology,2011,49(4):517-522 [13] Thompson C S,Haughey S A,Traynor I M,et al.Effective monitoring for ractopamine residues in samples of animal origin by SPR biosensor and mass spectrometry[J].Analytica Chimica Acta,2008,608(2):217-225[14] Smith D J,Shelver W L.Tissue residues of ractopamine and urinary excretion of ractopamine and metabolites in animals treated for 7 days with dietaryractopamine[J].Journal of Animal Science,2002,80(5):1240-1249[15] Shelver W L,Smith D J.Determination of ractopamine in cattle and sheep urine samples using an optical biosensor analysis:comparative study with HPLC andELISA[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2003,51(13):3715-3721[16] Shelver W L,Smith D J.Application of a monoclonal antibody-based enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of ractopamine in incurred samples from food animals[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2002,50(10):2742-2747 [17] MacNeil J,Soback S.Ractopamine hydrochloride[C].FAO Food and Nutrition Paper,FAO FNP,2004,41:16[18] Dalidowicz J parative metabolism of14C-ractopamine HCI in swine,dogs,and rats[C]∥Unpublished Report No.ABC-0369 from Lilly Research Laboratories,Division of Eli Lilly and Company,Greenfield,Indiana,USA.Submitted to WHO by Elaneo Products Company,Division of E1i Lilly and Company,Indianapolis,USA,1987[19] Elliott C,Thompson C,Crooks S H,et al.Screening and confirmatory determination of ractopamineresidues in calves treated with growth promoting doses of theβ-agonist[J].Analyst,1998,123(5):1103-1107[20] Lehner A,Hughes C,Harkins J,et al.Detection and confirmation of ractopamine and its metabolites in horse urine after paylean○Radministration[J].Journal of Analytical Toxicology,2004,28(4):226-237[21] 强致懿.猪肝脏、肌肉、尿液和血液中莱克多巴胺残留检测方法及残留消除的研究[D].北京：中国农业大学，2007[22] Ungemach F R.Ractopamine (addendum)[C]∥Institute of pharmacology,pharmacy and toxicology veterinary Faculty,University of Leipzig,Leipzig,Germany,2004[23] 蒋锡源.药物与肾脏[J].人民军医，1983，8：46[24] Dalidowicz J E,Thomson T D.14C-Ractopamine HCl balance-excretion study in cattle[C]∥Unpublished report on study No.ABC-0422 from Agricultural Biochemistry,Lilly Research Laboratories,Division of Eli Lilly and Company,Greenfield,IN,USA.Submitted to WHO by Elanco Animal Health,Division of Eli Lilly and Company,Indianapolis,USA,1989。
固相萃取-高效液相色谱法测定动物尿样中的莱克多巴胺
固相萃取-高效液相色谱法测定动物尿样中的莱克多巴胺应永飞;皮雄娥;陈慧华;朱聪英【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2006(24)3【摘要】莱克多巴胺（ractopamine）是一种新型的β-肾上腺素兴奋剂，我国农业部、卫生部、国家药品监督管理局在2002年联合下发的176号公告中已经明确将其列入禁用药品名单。
目前，文献报道的莱克多巴胺的检测方法很少，特别是国内还未见文献报道。
由于莱克多巴胺在动物体内代谢较快，因而药物往往以原形的形式从体内排出。
检测动物尿样具有快速、准确等特点，建立动物尿样中的莱克多巴胺的检测方法可以对畜产品生产过程中使用莱克多巴胺的现象进行有效的监控。
因此，探索动物尿样中莱克多巴胺的检测方法具有非常重要的理论意义和实际价值。
本文建立了动物尿样中莱克多巴胺残留量的高效液相色谱（HPLC）测定方法，样品处理简单，灵敏度高。
【总页数】1页(P320-320)【作者】应永飞;皮雄娥;陈慧华;朱聪英【作者单位】浙江省畜产品质量安全检测中心,浙江,杭州,310020;浙江省农业科学院植物保护与微生物所,浙江,杭州,310021;浙江省畜产品质量安全检测中心,浙江,杭州,310020;浙江省畜产品质量安全检测中心,浙江,杭州,310020【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.固相萃取气相色谱-质谱联用法测定动物组织中的莱克多巴胺 [J], 刘勇军;吴银良;刘素英;单吉浩;尤华2.高效液相色谱法测定动物组织中的莱克多巴胺残留量 [J], 程盛华;杨春亮;郑龙;丁丽3.固相萃取气相色谱-质谱联用法测定动物组织中的莱克多巴胺、沙丁胺醇 [J], 刘勇军;吴银良;刘素英;单吉浩4.固相萃取-高效液相色谱法测定动物组织中的莱克多巴胺 [J], 应永飞;皮雄娥;吴平谷;陈慧华;朱聪英;任玉琴5.固相萃取-高效液相色谱法测定大鼠尿样中调环酸钙 [J], 马安萍;陈红红;阮小林;丘静静;吴邦华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱-串联质谱法测定牛尿液中14种β-兴奋剂残留
i
shake
r MS２ 型);台 式 冷
冻离心机(
BECKMAN ALLEGRA２５R 型);
pH 计
(METTLER);恒 温 制 冷 摇 床 (
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rmo);超 声 波 仪
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吹氮浓缩仪(
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移液枪(
１
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０~２
０
０μL、
Ｇ兴奋剂类药
物多残留的液质联用确证方法.牛尿液样品经β
Ｇ葡萄 糖 醛 苷 酶 水 解、
２ 的 乙 酸 Leabharlann 溶 液 提 取、pH５．
固相萃取柱净化富集后,在正离子模式下,采用多反应监测模式 对β
Ｇ兴 奋 剂 进 行 定 性 和 定 量 分 析.
该方法 的 定 量 限 为 ０．
５ mg/L,在 ３ 个 浓 度 水 平 进 行 验 证 试 验,结 果 平 均 回 收 率 为 ７８．
动 物 体 内 脂 肪 代 谢 增 强 ,蛋 白 质 合 成 增 加 ,可 以 明
显 提 高 胴 体 瘦 肉 率 和 饲 料 利 用 率 [１],因 而 被 非 法
作 为 饲 料 添 加 剂 用 于 畜 产 品 的 生 产 ,以 促 进 动 物
生 长 和 改 善 肉 质 . 但 是 ,该 类 药 物 残 留 会 聚 集 在
３％ ~
１１７．
３％ ,相对标准偏差为 ２．
０４％~１３．
７０％ .该方法简便、准确,各项技术指标满足国内外法规的
超高效液相色谱-串联质谱法检测动物肌肉组织中19种β-受体激动剂残留
２ ０ １ ３４ ７ （ １ １ ） ： ２ ２—２ ６ ／ 李 丹， 等
，
超 高效 液 相 色谱 一 串联 质 谱 法 检 测 动 物 肌 肉 组织 中 １ ９种 ｐ一受 体激 动剂 残 留
李 丹， 孙 雷， 毕言锋 ， 苏 富琴 ， 徐秉 恩 ， 王鹤佳 ， 徐 士新
甲酸水 溶液 为流 动相进 行梯 度 洗脱。 同位 素 内标 法和基 质 匹配标 准 溶液 外 标 法定 量。 １ ９种 Ｂ一受 体 激 动剂在 系列 浓度 范 围 内呈现 良好 线 性 关 系 ， 相关 系数 ｒ 均 大 于 ０ ． ９ ９ ； １ ９种 药 物在 肌 肉组 织 中 的检测 限 为 ０ ． ２ ５ ｋ ｇ ， 定 量 限为 ０ ． ５ ｋ ｇ 。从０ ． ５ 、 １和 ５ ｋ ｇ三个 添加 浓度 检 测 结果 可 以看
Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ １ ９ ｐ—ａ ｇ ｏ ｎ ｉ ｓ ｔ ｓ ｉ ｎ Ａｎ ｉ ｍａ ｌ Ｍｕ ｓ ｃ ｌ ｅ Ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｓ ｂ ｙ ＵＰ ＬＣ—Ｍ Ｓ ／ ＭＳ
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关键 词 ： 质联 用 ； 液 检测 ； 料 ； 克 多 巴胺 饲 莱
１ ｌ ｌ 乙 酸 溶 液 ：准 确 移 取 冰 乙 酸 （ ．） ． ｍｏ Ｌ ９ ／ １ ４ 莱克 多 巴胺 也称 盐 酸莱 克 多 巴胺 ． 一 种 医 是 药 原料 ．可 用 于治 疗 充血 性 心力 衰竭 的强 心药 ．
定 浓 度 范 围 内成 正 比 ， 样 与 工 作 曲 线 比 较定 量 。 实验 ， 试 经
１ 甲酸 ： ． ５ 色谱 纯 ：
１ 三 水合 乙酸钠 ： ． ６ 优级 纯 ；
１ ＭＣ 混 合 型 阳 离 子 固 相 萃 取 净 化 小 柱 ： ． ７ Ｘ
６ ｍｇ３ｍＬ； ０ ／
肪 蓄积 由于莱 克 多 巴胺 有类 似于 盐酸克 伦特 罗
的作 用 ， 动 物 组 织 中残 留 ． 能 对 人 体 产 生 不 在 可
利 影 响 ， 以我 国农业 部 、 生部 、 所 卫 国家 药 品监督 管 理局 明文禁 止莱 克多 巴胺 用 于动物 养殖 饲 料 样 品 中 的莱 克 多 巴胺 经 酸性 三 水 合 乙 酸钠 溶 液提 取 ． 心后 经 ＭＣ 固相 萃取 柱 净化 ． 离 Ｘ
还 可 以用 于治 疗 肌 肉萎 缩 症 ． 长 肌 肉 ． 少 脂 增 减
５ ｍ 用 超纯 水定 容至 １０ ． Ｌ， ７ ０ ｍＬ容 量瓶 中 ， 匀 ； 摇 １１ 洗 脱 液 ： ． ０ 准确 移 取 氨水 （ ．） ． 。 乙 酸 １ ３ ｍＬ 用 ２ ５ 乙酯 （．） 容 至 １ ０ Ｌ容量 瓶 中 ， １ 定 ３ ０ｍ 摇匀 ； １１ 样 品复 溶 溶液 ： 取 甲醇 （．）０ ｍ 甲酸 ．ｌ 移 １１２ ０ Ｌ， （ ．） ｍ ，用超 纯 水定 容 至 １０ ０ Ｌ容 量瓶 中 ， １ ２Ｌ ５ ０ ｍ 混 合均匀 ： １１ 莱 克 多 巴胺 标 准 品 ：纯度 １９ ． 国家标 ．２ ＞ ９０ ％（ 准 物质 中心提 供 ） ：
员 ， 量监 督 员 。 质
移 取 莱 克 多 巴胺 标 准 中间 工 作 溶液 （ ． ．）．、 １１ ２ ０１ ２ １ 、 ．、 ．、００ Ｌ置 于 １ ０ ． ２０ ５ １ ． ０ ０ ｍ ０ ｍＬ容 量瓶 中 ．用 样
１ ２１ 莱 克 多 巴胺 标 准贮备 溶 液 ： ． ． １ 准确称 取 莱 克 多 巴胺 标 准 品 （．２ ０１０ ｇ 置 于 １０ １ ）． ０ ， １ ０ ０ ｍＬ棕色 容
量 瓶 中 ． 甲醇 溶 解 并 定 容 至 刻度 ． 溶 液 浓 度 用 其 相 当于 ｌ ／ Ｌ： 于一 ０【 ｍｇ ｍ 置 ２ ｏ冰箱 中避光 保存 。 效 ＝ 有 期 ６个 月 ： １１ ． 莱 克 多 巴胺 标 准 中间工 作溶 液 ： ． ２ ２ 准确 移 取 莱 克 多 巴胺 标 准贮 备 溶液 （ ． ．） ． ， 样 品 １１ １ １ ｍＬ 用 ２ ０
最 后用 高效 液 相 色谱 一 串联 质谱 仪 检测 器进 行 测
定： 同等条 件 下 绘 制 工 作 曲 线 ． 克 多 巴胺 含 量 莱 与 吸光 度值 在 一定 浓 度 范 围内成 正 比 ． 样 与 工 试 作 曲线 比较定 量 。
１ 试剂 和材料
除 非另 有规 定 ． 试验 使用 已知 的优 级 纯试 本 剂； 用水 应 符 合 Ｇ ／ ６ ２ ２ ｏ 《 析 实 验 室 用 ＢＴ ６ ８ — ０ ８ 分 水 规格 和试验 方法 》 ３级用 水 的规 定 ； 中
也 就显 得 尤 为 重 要 本 文 以高 效 液 相 色谱 一 串联 质 谱 法 检
测饲 料 中 的莱 克 多 巴胺 ． 料 样 品 中 的莱 克 多 巴胺 经 酸 性 饲
三 水 合 乙 酸 钠 溶 液 提 取 ．离 心 后 经 ＭＣ 固 相 萃 取 柱 净 Ｘ 化 ． 后 用 高效 液 相 色 谱 一 联质 谱 仪 检 测 器 进 行测 定 ； 最 串 同 等 条 件 下绘 制 工 作 曲线 ． 克 多 巴 胺 含量 与 吸光 度 值 在 一 莱
庄树广萄 ０２ ｌ １ ２１ 年第７ 期
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检 测分 析
Ｄ ￡ ｉｔ，ｄｎｙ ｅｒｎｉｃ Ａｏｉ ｅ ａ１ｒ ｓ ｍ ０ａ ｌｓ ７
液相色谱 一串联磺谱法检测饲料中的菜克多巴股
贾 涛
摘
要 ： 于莱 克 多 巴胺通 过 饲 料 饲 喂 动 物 会 残 留 在 由
复 溶溶 液 （．１定 容 至 １０ １ ） １ ０ｍＬ容量 瓶 中 ， 溶 液 其
浓 度 相 当 １ １ ／ Ｌ； 于 ４Ｃ 箱 中避 光 保存 ， ０ｇ ￣ｍ 置 ￣冰 有
效期 １ ： 周 １１ － 莱 克 多 巴胺 标 准 曲线工 作溶 液 ： ． ３ ２ 分别 准 确
贾 涛 ： 京 市 饲料 监 察 所 ， 牧 师 ， 化 检 验 室检 验 北 畜 理
应用高效液相色谱一 串联 质 谱 法 检 测 饲 料 中莱 克 多 巴胺 ． 标 准 曲 线 ｒ Ｉ０９ ９ ５ 值 ＞ ．９６ ：检 测 回 收 率 均 ≥８ ％ ，批 内 Ｏ
Ｒ Ｄ≤８ ， 间 Ｒ Ｄ￣ １ ％。 Ｓ ％ 批 Ｓ ＜ ０
１ 乙酸 钠 缓 冲溶 液 ：称 取 三 水 合 乙酸钠 （ ．） ． ８ １ ６ ３ ． ｇ溶 于水 中 ， 入 冰 乙酸 （．） １ ｍＬ 用 超 １３ ６ 加 １ １． ， ４ ６
１ 甲醇 ： ． １ 色谱 纯 ， ０４ １ 有机相 滤膜 ； 过 ． ｘ ５ｍ １ 氨水 ： ． ２ 分析 纯 ： １ 乙酸乙酯 ： ＿ ３ 优级 纯 ：
ｌ 冰 乙酸 ： 级纯 ： － ４ 优
动 物 的肌 肉与 内脏 组 织 中 ． 饲 料 中 莱克 多 巴胺 进 行 监 测 对