薄层色谱法验证方案
实验五薄层色谱实验
实验五薄层色谱实验
一、实验原理
薄层色谱(Thin-Layer Chromatography,TLC)是一种分离分析技术，
它将混合物分离并加以分析，以测定化学物质在混合物中的含量，并对其
结构进行分析。
薄层色谱实验的一般步骤为：用菲林纸或其他实验材料，
在玻璃板上均匀铺设一层纸片，在纸片中加入一定量溶剂，并将要分析的
物质涂在纸片上，然后放入含有一定量溶剂的气相色谱仪中，溶剂从纸片
上上升，复杂的物质分子会随着溶剂上升而沿着纸片的方向分离，当溶剂
沿着纸片方向移动时，部分物质分子会停留在纸片移动轨迹上，从而可以
以物质分子逐渐沿着纸片的轨迹分布的方式对复杂的物质进行分离和检测。
二、实验准备
1.实验仪器
（1）薄层色谱仪：用于给纸片滴加溶剂，把溶剂按一定速度从纸片
上升起，滴加溶剂的速度可以用薄层色谱仪调节。
（2）紫外可见光检测仪：它能够测量沿着纸片的轨迹上出现的物质
吸收紫外线的能力，以来检测混合物中物质的比例和浓度总量。
2.实验材料
（1）纸片：一般使用硅胶薄层色谱纸片，其薄厚约为0.25mm，它的
表面非常细腻，不吸附变性物质，表面有良好的润湿性，可以形成一层薄层。
一种散剂中甘草薄层色谱鉴别方法的建立
一种散剂中甘草薄层色谱鉴别方法的建立
甘草常用来饮片制剂或中药颗粒中，为了确保其质量和安全性，需要建立一种可靠的甘草薄层色谱鉴别方法。
以下是一种建立甘草薄层色谱鉴别方法的步骤：
1. 材料与试剂
- 甘草样品
- 二甲基亚砜
- 正己烷
- 乙酸乙酯
- 甲醇
- 碘化钾溶液
2. 准备甘草样品溶液：
- 取少量甘草样品，粉碎并过筛，称取约1 g的样品
- 加入10 mL二甲基亚砜，超声溶解15分钟
- 用10 mL离心管离心10分钟，将上清液取出
3. 准备色谱开发溶剂：
- 准备好正己烷-乙酸乙酯（95:5）混合溶剂
4. 准备色谱板：
- 在一块玻璃碟上绘制样品点斑，每个点约为1 cm直径，要注意离点斑边缘约1 cm的地方不得放任何溶液
- 将玻璃碟放入抽取罩中，置于恒温器中恒温至20℃
5. 进行色谱开发：
- 将样品点斑处涂上一层甲醇，让其干燥
- 用玻璃毛细管在样品点斑上加上两点碘化钾溶液
- 将色谱板置入抽取罩并盖上抽取罩的盖子
- 将抽取罩放入蒸发皿中，加盖并置于恒温器中恒温15分钟
- 取出抽取罩，将罩内色谱板卷取，并用吹风机快速干燥
6. 观察结果：
- 根据甘草的特征色带和Rf值进行鉴别
- 通常甘草的Rf值为0.4-0.6，有3-4个特征色带
通过以上步骤，可以建立一种简单、可靠的甘草薄层色谱鉴别方法。
在实际分析时，应对样品进行重复检测，并与标准品进行比对，以确保鉴别结果的准确性。
薄层色谱实验步骤
薄层色谱实验步骤薄层色谱法是一种广泛应用于化学分析的快速、简便、经济的分离、检验和鉴定技术。
下面将介绍薄层色谱法具体的实验步骤。
实验仪器和试剂准备。
1.TLC板：通常使用硅胶或氧化铝带基底的TLC板。
2.TLC槽：透明玻璃槽，可用于涂层试剂；也可使用铝箔胶布或喷雾试剂涂布法。
3.试剂：如甲醛、硫酸、浓盐酸、氨、铁（III）氯化物、无水硫酸等。
4.检测剂：检测目标化合物。
实验步骤。
1.将TLC板剪成所需大小，用铅笔或墨水笔根据样品特点标记样品沉淀位置，悬于槽内。
2.制备溶剂相，选择合适的溶剂混合使溶剂相相容性强，稳定性好，与TLC板无相互作用，且与样品有一定的溶剂能力，便于分离化合物。
3.墨滴法：将溶剂相在薄层板上墨滴，约10~15毫升，用玻璃棒涂布（铝箔胶布法）或喷雾涂布（喷雾法）。
4.薄层板干燥：将上述涂层薄层板放置于通风干燥处或使用风扇干燥，待其从液态变为固态，检查其涂层均匀性，有必要可重复涂层，达到标准面积。
5.样品沉淀：将样品按照其化学特性采用不同方式沉淀于TLC板上。
6.将均匀的样品涂覆于干燥好的TLC板上。
7.将TLC板放在槽中，使其满足样品的容积，保持宽度和溶剂相接触，用透明玻璃板盖住，可加快电解质升华和避光。
8.开始沿着底部涂抹板的一边逐渐滑动，使之不断前进到另一端，需要保证样品分离的距离足够。
检查沿途情况，稳定的液面，颜色的均匀和样品吸附情况等。
9.至样品分离远端，取出TLC板，立即在不同的位置视察不同颜色的圆弧带。
观察其明显点、颜色、位置和尺寸，拍照并做成荧光片即可检测。
10.对比荧光或紫外光下的分离结果。
总之，薄层色谱法是一种简单、灵敏、易于掌握的分析方法，能实现高效、高分辨率的化合物分离和鉴定，是许多化学、药物、生物等领域的重要工具。
薄层色谱实验报告
薄层色谱实验报告引言薄层色谱（Thin-Layer Chromatography, TLC）是一种分离、鉴定和定量化学物质的常用技术，主要用于分析混合物中的成分。
薄层色谱以薄层吸附剂作为固定相，涂在玻璃或铝板上形成薄层，利用固体和液体之间的相互作用进行物质的分离。
本实验旨在通过薄层色谱技术分离混合物中的两种组分，并尝试使用不同的溶剂系统来优化分离。
实验原理薄层色谱实验原理基于物质在不同相（固体和液体）之间的亲疏性差异，通过在固定相表面上进行吸附、分配和扩散，实现物质的分离。
薄层色谱实验通常包括以下步骤： 1. 制备薄层：将吸附剂溶解在适当的溶剂中，均匀地涂覆在铝板或玻璃板上，制备薄层。
2. 样品施加：将待分离的混合物施加在薄层上，通常采用微量吸管或毛细管进行施加。
3. 溶剂选择：根据待分离物质的特性选择合适的溶剂系统，以实现良好的分离效果。
4. 扩散分离：将薄层放入含有溶剂的密闭容器中，让溶剂不断上升，通过扩散分离混合物中的物质。
5. 结果展示：将薄层取出后，用目视或检测设备观察分离结果，并记录或标记分离出的带点。
6. 类比法测量：根据已知浓度的参照物质的上升距离与待测物质的上升距离的关系，推算出待测物质的浓度。
实验步骤1.制备薄层：取一块铝板，使用硅胶吸附剂溶于少量氯仿，均匀地在铝板上涂覆薄层。
2.样品施加：将待分离的混合物使用微量吸管施加到铝板上，需控制施加的位置和施加的量。
3.选择溶剂系统：根据待分离物质的特性，选择合适的溶剂系统。
4.分离扩散：将涂有样品的铝板插入含有溶剂的玻璃罐中，使薄层与溶剂接触，并将罐口密封。
5.分离结果观察：观察薄层上物质的分离情况，可用目视或检测设备进行观察与记录。
6.测量距离：根据已知浓度的参照物质的上升距离与待测物质的上升距离的关系，计算待测物质的浓度。
实验结果与讨论在本实验中，我们使用薄层色谱技术分离了一种有机混合物中的两种组分。
首先，我们制备了一块涂有硅胶吸附剂的铝板，确保薄层均匀涂覆。
实验五-薄层色谱实验
六、思考题
1.如何利用Rf值来鉴定化合物？ 2.薄层色谱法点样应注意些什么？ 3.常用的薄层色谱的显色剂是什么？
活化后的薄层板放在干燥器内保存待用。
4、点样
•先用铅笔在距薄层板一端 1cm处轻轻划一横线作为 起始线，然后用毛细管吸 取样品，在起始线上小心点样， 斑点直径一般不超过2mm。
•若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶 剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散 等现象，而影响分离效果。若在同一板上点几个样，样点 间距离应为1。 •点样要轻，不可刺破薄层。
上行法
层
析
缸
薄层板
展开剂
玻璃板
SiO2
上涂吸附剂层 Al2O3
下行法
层 析 缸 薄层板
滤纸条 展开剂
1.薄层板的制法； 2.薄层色谱活化； 3.薄层色谱点样； 4.薄层色谱展开； 5.薄层色谱显色与分析；
四、实验步骤：
1、吸附剂的选择 薄层色谱的吸附剂最常用的是氧化铝和硅胶。 1）硅胶： “硅胶H”—不含粘合剂； “硅胶G”—含煅石膏粘合剂； 其颗粒大小一般为260目以上。颗粒太大，展开剂 移动速度快，分离效果不好；反之，颗粒太小溶 剂移动太慢，斑点不集中，效果也不理想。
2、薄层色谱的用途：
1）化合物的定性检验。（通过与已知标准物对比 的方法进行未知物的鉴定）在条件完全一致的情况，纯碎的 化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离，称比移值（Rf值） ，所以利用薄层色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质 相似的化合物是否为同一物质。
影响比移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的大小 ，酸碱性，活性等级，外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性 等。所以，要获得重现的比移值就比较困难。为此，在测定某 一试样时，最好用已知样、品进行对照。
薄层色谱法实验范文
薄层色谱法实验范文实验目的：1.学习薄层色谱法的原理和操作方法。
2.了解化合物的相对亲和性和极性。
3.学会使用TLC进行物质的分离和纯化。
实验原理：薄层色谱法基于化合物在一个固定相上由于不同的相对亲和性和极性而分离的原理。
实验中，将待测样品涂布在薄层板上，然后将其放置在溶剂中使其进行上升或下降。
与非极性成分相对亲和性较大的化合物将上升较慢，而与极性成分较亲和性大的化合物将上升较快。
实验步骤:1.准备试样：将待测样品溶解在合适的溶剂中，以得到一个适合于TLC的样品溶液。
2.准备薄层板：将薄层板切割成需要的大小，并标记起点线。
3.涂布试样：使用一根玻璃棒或吸管，在薄层板上涂布适量的样品溶液。
4.开展分离：将涂布了试样的薄层板放入装有一定量移液溶剂的密闭容器中，使其进行分离。
5.进行定性和定量分析：将分离结束的薄层板拿出，用目视或紫外灯照射来观察分离效果。
根据色带的位置和形状，进行化合物的定性和定量分析。
实验注意事项：1.在操作过程中要注意个人安全，如佩戴实验手套、护目镜等防护用品。
2.在溶剂的选择上要注意其与试样是否相容，避免溶解度不佳或化学反应的发生。
3.涂布试样时要均匀、避免过浓。
过浓的试样会使分离效果不佳，不利于化合物的定性和定量分析。
4.容器要密封好，以防挥发性的溶剂逸出。
5.注意记录实验结果，包括色带的颜色、形状、迁移距离等。
实验结果和讨论：实验中可以观察到样品在薄层板上的分离效果。
根据色带的位置和形状，可以判断样品中存在的化合物以及它们的相亲和性和极性。
此外，还可以使用色带的迁移距离进行化合物的定量分析。
根据分离结果进行化合物的纯化和鉴定。
可以将色带切下，使用溶剂进行洗提或再结晶等方法，得到纯化的化合物。
通过对纯化后化合物的物理性质和光谱分析等进行鉴定，可以确定化合物的结构和纯度。
总结：薄层色谱法是一种快速、简便、低成本的分析方法，广泛应用于化学实验室中。
在实验中，根据化合物在固定相薄层上的不同相对亲和性和极性，可以进行分离和纯化，并通过对分离结果的观察和分析，确定化合物的结构和纯度。
2020版《中国药典》薄层色谱法检验操作规程
二、范围；本标准适用于样品薄层色谱法的测左。
三、职责：1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录：2、化验室负责人：监督检査检验员执行本操作规程。
四、内容：薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄层色谱扫描仪进行扫描，用于鉴别、检査或含量测定。
1、仪器与材料1.1薄层板：1.1.1按支持物的材质分为玻璃板、塑料板或铝板等；按固定相种类分为硅胶薄层板、键合硅胶板、微晶纤维素薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。
固定相中可加入黏合剂、荧光剂。
硅胶薄层板常用的有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254、G、H表示含或不含石膏黏合剂。
F254为在紫外光254nm波长下显绿色背景的荧光剂。
按固左相粒径大小分为普通薄层板（10~40um）和髙效薄层板（5〜10um）o1.1.2在保证色谱质量的前提下，可对薄层板进行特别处理和化学改性以适应分离的要求，可用实验室自制的薄层板。
固左相颗粒大小一般要求粒径为10〜40um a玻板应光滑、平整，洗净后不附水珠。
1.2点样器：一般采用微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器材。
1.3展开容器：上行展开一般可用适合薄层板大小的专用平底或双槽展开缸，展开时须能密闭。
水平展开用专用的水平展开槽。
1.4显色装豊：喷雾显色应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器，要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷岀：浸溃显色可用专用玻璃器械或用适宜的展开缸代用：蒸气熏蒸显色可用双槽展开缸或适宜大小的干燥器代替。
1.5检视装程：为装有可见光、254nm及365nm紫外光光源及相应的滤光片的暗箱，可附加摄像设备供拍摄图像用。
暗箱内光源应有足够的光照度。
1.6薄层色谱扫描仪：系指用一左波长的光对薄层板上有吸收的斑点，或经激发后能发射岀荧光的斑点，进行扫描，将扫描得到的谱图和积分数据用于物质左性或左量的分析仪器。
薄层色谱法检验记录
薄层色谱法检验记录薄层色谱法（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种常用的分离和物质检验技术。
它基于化学物质在固定相上沿毛细作用和物质吸附与解吸之间的相互作用进行分离。
在本次实验中，我们将使用薄层色谱法进行其中一种药物的质量检验。
首先，我们准备了实验所需的仪器和试剂。
仪器包括薄层色谱平板、色谱槽和展开槽等。
试剂包括样品溶液、参比物溶液和色谱移液剂等。
实验的前期准备工作包括制备样品溶液和参比物溶液。
样品溶液的制备需要将一定量的药物样品溶解在适量的溶剂中，并摇匀使其完全溶解。
参比物溶液的制备同样需要将一定量的参比物溶解在溶剂中。
接下来，我们将薄层色谱平板用移液器均匀地涂抹一层固定相，然后放置在干燥器中风干。
实验中，先将薄层色谱平板上方的标线绘制在适当的位置。
然后，将薄层色谱平板放入色谱槽中，加入足够的色谱移液剂使其达到初始线位置。
等待一段时间，使得色谱平板与色谱移液剂达到平衡。
接下来，我们将样品溶液和参比物溶液用毛细管或微量移液器分别均匀地沿标线滴在薄层色谱平板上。
注意，每次滴液后都需要等待片刻，使溶液完全吸附扩散在固定相上。
当所有溶液都滴涂完毕后，将薄层色谱平板放入展开槽中。
展开槽中的溶液会逐渐向上移动，溶剂会在不同化学物质的作用下沿着薄层色谱平板向上移动。
当溶液前进到一定高度时，立即将薄层色谱平板取出，并用气吹使其迅速干燥。
最后，我们将干燥的薄层色谱平板放在紫外光下进行观察和分析。
化学物质在紫外光下会产生特定的荧光，通过观察色谱带的位置、形状和颜色等特征，我们可以判断样品中所含的化学物质。
在本次实验中，我们通过薄层色谱法成功地对其中一种药物进行了质量检验。
通过比较样品溶液和参比物溶液在薄层色谱平板上的色谱带，我们可以确定样品中是否含有目标化合物，并可以计算出其含量。
同时，我们还通过类似的方法对其他样品进行了检验，并得到了相应的分析结果。
总的来说，薄层色谱法是一种简便、快速、准确的分析方法。
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白术薄层鉴别方法验证方案
一、 试液的配制
1、重现性 取相同的供试品、对照药材溶液，由两名检验
员同时做，做薄层鉴别实验，由色谱图实验结果，验证其重现性。
2、专属性 取相同的供试品、对照药材溶液，利用正己
烷试剂作为空白溶液，做薄层鉴别实验，由薄层色谱图结果，验证其
专属性。
3、耐用性 按1、2方法下做薄层色谱实验，分别点样于
青岛海洋化工厂分厂、烟台大学生物科技与工程研究所制备的硅胶G
薄层板，由薄层色谱图结果，验证其耐用性。
白附子薄层鉴别方法验证方案
一、 试液的配制
1、重现性 取相同的供试品、对照药材溶液、对照品溶液，
由两名检验员同时做，做薄层鉴别实验，由色谱图实验结果，验证其
重现性。
2、专属性 取相同的供试品、对照药材溶液、对照品溶
液，利用丙酮试剂作为空白溶液，做薄层鉴别实验，由薄层色谱图结
果，验证其专属性。
3、耐用性 按1、2方法下做薄层色谱实验，分别点样于
青岛海洋化工厂分厂、烟台大学生物科技与工程研究所制备的硅胶G
薄层板，由薄层色谱图结果，验证其耐用性。
五味子薄层鉴别方法验证方案
一、 试液的配制
1、重现性 取相同的供试品、对照药材溶液、对照品溶液，
由两名检验员同时做，做薄层鉴别实验，由色谱图实验结果，验证其
重现性。
2、专属性 取相同的供试品、对照药材溶液、对照品溶
液，利用三氯甲烷试剂作为空白溶液，做薄层鉴别实验，由薄层色谱
图结果，验证其专属性。
3、耐用性 按1、2方法下做薄层色谱实验，分别点样于
青岛海洋化工厂分厂、烟台大学生物科技与工程研究所制备的硅胶G
薄层板，由薄层色谱图结果，验证其耐用性。
HPLC法测五味子中五味子醇甲方法验证方案
一、 标准曲线的制定 利用已知纯度的对照品溶液，设计5个
不同浓度，每个浓度制定一份供试品溶液，进行测定，以峰面积作为
Y轴，浓度为X轴，并进行线性回归，得出回归方程，得出相关系数
r。
二、方法的验证
1、准确度的测定 用已知浓度的对照品溶液，利用加样回收
率实验的方法，制备不同浓度的溶液6份，计算回收率的大小，并计
算出RSD的大小。
2、精密度的测定 取一批原药材，分别制成6份溶液，测定
峰面积，计算平均值，并计算出RSD大小。
3、专属性 采用纯甲醇试剂作为空白样品，连续进样
三针，有色谱图结果，考察是否有干扰。
4、检验结果考察 取一批原药材，分别制成3份溶液，分
别进样一针，并计算出结果，确定方法的可靠性。