移液管和加样枪的使用..共31页
规范一、移液枪使用说明
规范一、移液枪使用说明(总5页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--移液枪简介及使用规范1移液枪原理微量加样器（移液枪）最早出现于微量加样器（移液枪）最早出现于1956年，由德国生理化学研究所的科学家Schnitger Schnitger发明。
其后，在1958年德国Eppendorf Eppendorf公司开始生产按钮式微量加样器，成为世界上第一家生产微量加样器的公司。
加样的物理学原理有下面两种：①使用空气垫(又称活塞冲程)加样；②使用无空气垫的活塞正移动加样。
上述两种不同原理的微量加样器有其不同的特定应用范围。
活塞冲程(空气垫)加样器可很方便地用于固定或可调体积液体的加样，加样体积的范围在小于1ul至l0ml之间。
加样器中的空气垫的作用是将吸于塑料吸头内的液体样本与加样器内的活塞分隔开来，空气垫通过加样器活塞的弹簧样运动而移动，进而带动吸头中的液体，死体积和移液吸头中高度的增加决定了加样中这种空气垫的膨胀程度。
因此，活塞移动的体积必须比所希望吸取的体积要大约2％～4％，温度、气压和空气湿度的影响必须通过对空气垫加样器进行结构上的改良而降低，使得在正常情况下不至于影响加样的准确度。
一次性吸头是本加样系统的一个重要组成部分，其形状、材料特性及与加样器的吻合程度均对加样的准确度有很大的影响。
以活塞正移动为原理的加样器和分配器与空气垫加样器所受物理因素的影响不同，因此，在空气垫加样器难以应用的情况下，活塞正移动加样器可以应用，如具有高蒸汽压的、高黏稠度以及密度大于2．0g／cm3的液体；又如在临床聚合酶链反应(PCR)测定中，为防止气溶胶的产生，最好使用活塞正移动加样器。
活塞正移动加样器的吸头与空气垫加样器吸头有所不同，其内含一个可与加样器的活塞耦合的活塞，这种吸头一般由生产活塞正移动加样器的厂家配套生产，不能使用通常的吸头或不同厂家的吸头。
2移液枪品牌（德国艾本德）：世界上第一支微量加样器的诞生地。
临床生化检验：加样器及移液管的使用
临床生化实验报告实验名称：吸量管与加样器的使用实验目的：掌握吸量管和加样器的使用，比较两者的准确度实验原理：①吸量管是用于准确量取一定体积液体的量出式的玻璃仪器。
②加样器是精密量器，只能在特定范围内使用，移液范围选择在满量程的35%到100%时，可以保证最佳的准确性和重复性，尽量避免将移液器量程设置为最大值的10%以下。
实验材料：自来水实验仪器：洗耳球、吸量管、加样器、烧杯、电子天平实验操作步骤：1.使用移液管，首先要看一下移液管标记、准确度等级、刻度标线位置等。
2．吸液：用右手的拇指和中指捏住移液管的上端，将管的下口插入欲吸取的1号烧杯中的水中，插入不要太深或太浅（一般1-2cm处）。
左手拿洗耳球，接在管的上口把液体慢慢吸入，先吸入该容量的1/3左右，用右手的食指按住管口，取出，横持，并转动管子使液体接触到刻度以上部位，以置换内壁的水分，然后将溶液从管的下口放出并弃去，如此反复洗3次后，即可吸取溶液至刻度以上5mm处，立即用右手的食指按住管口。
2.将空烧杯放置在调平的电子天平上并置零。
3．调节液面:将移液管向上提升离开液面，用滤纸将沾在移液管外壁的液体擦掉，管的末端靠在盛溶液的1号烧杯的内壁上，管身保持垂直，略为放松食指（有时可微微转动吸管）使管内溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底部与标线相切为止，立即用食指压紧管口。
将尖端的液滴靠壁去掉，移出移液管，插入承接溶液的2号烧杯中。
4.放出溶液：将管的末端与2号烧杯内壁接触，移开食指，将移液管内的液体放入烧杯中。
并记录烧杯此时的重量，即为移液管内的水的重量。
5.将上述操作再重复两次，并记录下数据。
6.在吸液杆上安装与吸取量匹配的洗液嘴，套紧7.右手握住加样器，用拇指把“推进按钮”向下按到第一档位，将吸液嘴尖头浸入一号烧杯中1-3mm深度，在缓慢放开“推进按钮”，使其返回远处，停留1-2秒后，将吸液嘴离开溶液8.目测吸入体积是否合理，注意不要有气泡9.将3号烧杯放在电子天平上清零9．把吸液嘴尖头轻轻轻轻地接触3号烧杯内壁，成15-20°角倾斜，将推进按钮向下按到第一静止点，停留1-2秒，再按到第二档位，排出尖头残液，此时的重量即为加样器取出水的质量，观察并记录数据⑤将上述操作重复三次后记录数据⑥使用完毕，将吸头嘴卸下。
移液枪的正确使用
定期自己校正自己的移液枪，具体拜见移液枪说明书。
用完移液枪，务必量程复原！免得弹簧长期压迫，1. 调节量程在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则依照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超出量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以包管量取的最高精确度。
在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
2装配枪头(吸液嘴)在将枪头套上移液枪时，正确的方法是将移液枪(器)垂直拔出枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。
如果是多道(如8道或12道)移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地拔出，往前后方向摇动即可卡紧。
枪头卡紧的标记是略为超出O 型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
3 移液的方法移液之前，要包管移液器、枪头和液体处于相同温度。
吸取液体时，移液器坚持竖直状态，将枪头拔出液面下2-3毫米。
在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水分歧的液体时)。
这时可以采纳两种移液方法。
一是前进移液法。
用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。
接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残存的液体。
最后松开按钮。
二是反向移液法。
此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不必吹出残存的液体。
先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。
接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续坚持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按)，取下有残留液体的枪头，弃之。
4. 移液器的正确放置使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。
当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
移液枪的操作
在进行分析测试方面的研究时，一般采用移液枪（pipette）量取少量或微量的液体。
对于移液枪的正确使用方法及其一些细节操作，是很多人都会忽略的。
现在分几个方面详细叙述。
量程的调节在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。
在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
枪头（吸液嘴）的装配在将枪头（pipette tips）套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。
正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。
如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。
枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。
吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2－3毫米。
在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。
这时可以采取两种移液方法。
一是前进移液法。
用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。
接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。
最后松开按钮。
二是反向移液法。
此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。
先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。
接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。
实验室移液管正确使用步骤及注意事项
实验室移液管正确使用步骤及注意事项一、移液管简介常用的移液管有5，10，25，50和75ml等规格。
通常又把具有刻度的直形玻璃管称为吸量管(见下图)。
常用的吸量管有1，2，5，和10mL 等规格。
移液管和吸量管所移取的体积通常可准到0.01mL。
二、使用步骤根据所移溶液的体积和要求选择合适规格的移液管使用，在滴定分析中准确移取溶液一般使用移液管，反应需控制试液加入量时一般使用吸量管。
1、检查仪器检查移液管的管口和尖嘴有无破损，若有破损则不能使用。
2、洗净仪器先用自来水淋洗后，用铬酸洗涤液浸泡，操作方法如下：用右手拿移液管或吸量管上端合适位置，食指靠近管上口，中指和无名指张开握住移液管外侧，拇指在中指和无名指中间位置握在移液管内侧，小指自然放松；左手拿洗耳球，持握拳式，将吸耳球握在掌中，尖口向下，握紧吸耳球，排出球内空气，将吸耳球尖口插入或紧接在移液管（吸量管）上口，注意不能漏气。
慢慢松开左手手指，将洗涤液慢慢吸入管内，直至刻度线以上部分，移开吸耳球，迅速用右手食指堵住移液管（吸量管）上口，等待片刻后，将洗涤液放回原瓶。
并用自来水冲洗移液管（吸量管）内、外壁至不挂水珠，再用蒸馏水洗涤3次，控干水备用。
3、吸取溶液摇匀待吸溶液，将待吸溶液倒一小部分于一洗净并干燥的小烧杯中，用滤纸将清洗过的移液管尖端内外的水分吸干，并插入小烧杯中吸取溶液，当吸至移液管容量的1/3时，立即用右手食指按住管口，取出，横持并转动移液管，使溶液流遍全管内壁，将溶液从下端尖口处排入废液杯内。
如此操作，润洗了3－4次后即可吸取溶液。
将用待吸液润洗过的移液管插入待吸液面下1～2cm处用吸耳球按上述操作方法吸取溶液（注意移液管插入溶液不能太深，并要边吸边往下插入，始终保持此深度）。
当管内液面上升至标线以上约1～2cm处时，迅速用右手食指堵住管口（此时若溶液下落至标准线以下，应重新吸取），将移液管提出待吸液面，并使管尖端接触待吸液容器内壁片刻后提起，用滤纸擦干移液管或吸量管下端粘附的少量溶液。
移液枪标准操作规程
移液枪标准操作规程移液枪是每个检验人员都会使用到的常用工具，对于移液枪的正确使用方法及其一些细节操作，是很多人都会忽略的。
现在分几个方面详细叙述。
一、移液枪量程的调节在调节量程时，用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮，如果要从大体积调为小体积，则按正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。
在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
二、枪头的装配在将枪头套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。
正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。
三、移液的方法移液之前，要保证移液枪、枪头和液体处于相同温度。
吸取液体时，四指并拢握住移液枪上部，用拇指按住柱塞杆顶端的按钮，移液枪保持竖直状态，将枪头插入液面下2—3毫米，缓慢松开按钮，吸上液体，并停留1〜2秒钟（粘性大的溶液可加长停留时间），将吸头沿器壁滑出容器，排液时吸头接触倾斜的器壁。
在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。
最后按下除吸头推杆，将吸头推入废物缸。
四、两种移液方法1、一是前进移液法。
用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。
接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。
最后松开按钮。
2、二是反向移液法。
此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。
先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。
接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。
移液器(移液枪)及其使用
移液器的校准
校准应在无通风的房间，移液器和空气温度在20℃-25℃之 间，相对湿度在55％以上。特别是当移液量在50ul以下，空气 湿度应越高越好，以减少蒸发损失的影响。 在万分之一级别天平上放臵一个小三角烧瓶，用待标定的 移液器吸取蒸馏水（隔夜存放或超声15min）加入小三角烧瓶内 底部，每次称重后计量，去皮重后再加蒸馏水，连续加蒸馏 水 10次。加蒸馏水的量根据待标定的移液器不同规格而不同， 见下表。移液器10次标定称量在所要求的重量范围之内为合格 移液器；不合格移液器需要进行调整。
5.需要高温消毒的移液器应首先查阅所使用的移液器是否适合高 温消毒后再行处理。
6.吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开， 以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。 7.吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液 膜”，第二次吸取时的体积会大于第一次的体积。 8.卸掉的吸头一定不能和新吸头混放，以免产生交叉污染。
设定容量
调整按钮为粗调
调整摩擦环为细调
设定容量时的注意事项
1、移液器要在规定的容量内使用，切勿超量程使用，否 则会卡住内部机械装臵而损坏了移液器。 2、调整容量时，如果从大到小时，可以直接调到想要的 容量；如果从小到大时，一定要调超三分之一圈，然 后再调回来，这样做可以使弹簧完全放开,而且移液器 总是在顺时针运转可以延长移液器的使用寿命。
移液器要放在支架上
移液过程
安装吸嘴
设定容量
预洗 吸液
放液
卸去吸嘴
散装吸嘴的安装方法
两只手分别持移液器和吸嘴，安装后旋转。
盒装吸嘴的安装方法
将移液器垂直插入吸嘴中，稍用力下压，然后旋转。
错误操作：在将枪头套上移液枪时，很多人会使 劲地在枪头盒子上敲几下。这样会导致移液枪的 内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而 变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住，严重 的情况会将白套筒折断。 正确操作：将移液器垂直插入枪头中，稍微用力 左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道 （如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第 一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后 方向摇动即可卡紧。 枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到 连接部分形成清晰的密封圈。
移液器的使用
以正确角度进
行吸液操作可 提高0.5%的移 液准确性
正确的角度
移液器规格
2µL和 10 µL 20 µL和 100 µL
错误的角度
吸头浸入深度
1mm 2-3 mm
200 µL和 1000 µL
5000 µL 和 10 mL
3-6 mm
6-10 mm
以正确吸头浸入 深度进行吸液操 作可提高1%的移 液准确性
微量可调式移液器
常见类型：手动单道、手动多道、电动单道、电动多道
微量可调式移液器的构造
•容量调节旋纽 • 手指把手 • 吸头推出杆
• 容量指示
• 吸头排出器套筒
• 吸头圆锥体
移液器的操作方法
• 1. 量程的调节： • 调节所需容量时一般由大体积处向小体积处旋转， 以保证移取的最佳精确度。
移液器的操作方法
移液器的操作方法
• 4．放出溶液
将吸嘴口贴到容器内壁并保持10～40°倾斜。 平稳地把按钮压到一档，略停后，二档排出剩余液体。 沿容器内壁稍停，缓慢松开按钮。
移液器的操作方法
• 5. 弃枪头
按下加样枪上的枪头推出杆，将枪头打入指定位置。
移液器的操作方法
• 6、复位
• 移液器使用完毕后，及时调至最大量程存放。
• 2. 枪头（吸头）的装配
将加样枪垂直插入枪头中，稍用力 左右转动即可使其紧密结合。
Example of tip sizes:
移液的操作方法
• 3. 吸液
吸取液体前，先用大拇指将按钮按下 至第一停点，移液器保持竖直状态，将 枪头插入液面下。然后慢慢松开按钮回 原点，取出加样枪。
垂 直 吸 液
移液枪的正确使用20140823
排液
吸液速度的影响
▪ 保持平顺，控制好吸液速度 ▪ 过快的吸液速度，
导致：
- 样品液进入套柄，对活塞和密封圈造
成损伤
- 带入气雾，造成样品交叉污染
排液
沿内壁排液（常规） 在液面上方排液
在液面下方排液
Internal usage only
放置
移液器正确的放置方法 1.如不使用，要把移液器的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松
常见的错误安装方法
在将吸头套上移液器时，使劲地在吸头盒上敲几下。
可能导致地后果
1.移液器的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚 至会导致刻度调节旋钮卡住 。
2.移液器套柄弯曲
Internal usage only
取液
▪ 用同一样品对吸头进行润洗，润洗三次 ▪ 先吸取样品，然后排回样品池或废液槽 ▪ 润洗有助于提高吸头多次相同移液操作的一致性
一般移液法： 1.将按钮压至第一停点 2.将吸头浸入液面，使按钮缓慢滑回 原位，松开按钮吸样 3.放液时，吸头紧贴容器壁，先将按 钮按至第一停点，略作停顿以后，再 按至第二停点。
高粘度样品
同常规移液操作相反的流程
第二零点吸液 第一零点排液
Internal usage only
吸头浸入角度和深度
小
小于 0.5%
技术操作
• 吸头浸入深度/角度不正确 (特别注意微量程移液器)
• 错误的吸液速度
• 选择合适的量程 • 吸头浸入深度 • 吸液速度 • 排液技术 • 一致性
• 量程设定 (已选合适量程) • 吸头浸入角度 • 润洗 • 手温影响
Internal usage only
Internal usage only
加样枪的使用及维护
加样枪的使用及维护加样枪的使用及维护加样枪的使用1.量程的调节转动加样枪顶部的按钮进行移液量的设定。
在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。
（在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
）2.枪头（吸液嘴）的装配在将枪头套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。
正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。
如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。
枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈3.移液的方法移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。
吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下1厘米。
在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时。
注意吸液体时，一定要缓慢平稳的松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入移液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
◆前进移液法a)用大拇指将按钮按下至第一停点。
b)将吸头插入液面下1厘米深处并慢慢松开按钮回原点，待管嘴吸入溶液后，将管嘴撤出液面并斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。
c)将加样枪移至待加入液体的容器，让吸头位于容器液面的近上方。
轻轻压上按钮至第一停点排出液体，待一秒钟后继续按按钮至第二停点吹出残余的液体，并让吸头尖部轻轻接触液面上方的容器壁，以免产生气泡。
d)继续按住按钮，撤出加样枪后松开按钮使之返回按钮起点位置。
◆反向移液法此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。