紫外分光光度法测定蜂蜜中果糖的含量
乳果糖吸光度标准
乳果糖吸光度标准一、样品采集1.1 采集方法：采用清洁、干燥的玻璃瓶或塑料瓶采集样品，避免使用金属容器。
1.2 采集量：根据实验需求，一般采集100-500mL样品。
1.3 采集位置：选择具有代表性的样品，避免采集异常部位或受到污染的样品。
二、仪器校准2.1 校准仪器：使用紫外-可见分光光度计进行吸光度测量，需提前校准仪器。
2.2 校准波长：选择待测物质的最大吸收波长进行校准。
2.3 校准标准：使用标准溶液进行校准，确保仪器准确度。
三、样品处理3.1 样品提取：将采集的样品用蒸馏水或纯净水稀释至适当浓度。
3.2 样品过滤：使用0.45μm滤膜过滤样品，去除杂质。
3.3 样品存储：处理后的样品应妥善保存，避免污染和变质。
四、绘制标准曲线4.1 标准品准备：准备一系列已知浓度的乳果糖标准品。
4.2 绘制曲线：将不同浓度的标准品分别测量吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
4.3 线性分析：对标准曲线进行线性回归分析，得出线性方程及相关系数。
五、样品测定5.1 样品吸光度测量：将处理后的样品溶液进行吸光度测量，记录吸光度值。
5.2 结果记录：将测量得到的吸光度值记录在表格中。
六、结果计算6.1 根据标准曲线方程计算样品中乳果糖的浓度。
6.2 根据需要计算其他相关指标，如含量、纯度等。
七、误差分析7.1 误差来源：主要包括仪器误差、操作误差、标准品误差等。
7.2 误差分析方法：采用统计方法分析误差，如平均值、标准差等。
7.3 误差控制：定期维护仪器，提高操作技能，使用可信的标准品等措施降低误差。
八、质量控制8.1 实验室内质量控制：定期进行内部质量控制，如实验室比对、人员考核等。
8.2 实验室间质量控制：参加外部实验室间的比对试验，提高实验室的可信度。
8.3 采用质量控制图：采用质量控制图对实验数据进行监控，及时发现异常数据并进行处理。
果糖的检测方法
果糖的检测方法
果糖是一种单糖，常见于水果和许多植物中。
在食品工业和医学研究中，检测果糖的含量是一项重要的任务。
以下是一些常用的果糖检测方法：酶法检测（酶法测定法）：
方法原理：利用果糖酶（fructosidase）催化果糖水解生成葡萄糖，然后通过葡萄糖氧化酶反应生成过氧化物，最后通过染色反应或电化学法测定。
优点：灵敏度高，专属性强。
缺点：酶法可能会受到其他成分的干扰。
高效液相色谱法（HPLC）：
方法原理：利用高效液相色谱技术，通过色谱柱对果糖进行分离和检测。
优点：准确度高，选择性强。
缺点：仪器设备较昂贵，操作技术要求较高。
质谱法（Mass Spectrometry）：
方法原理：利用质谱仪对果糖进行分子质量的测定，可以通过质谱图谱来鉴定和定量果糖。
优点：灵敏度高，可同时检测多个物质。
缺点：仪器昂贵，需要专业的操作技能。
红外光谱法（Infrared Spectroscopy）：
方法原理：通过分析果糖分子的振动光谱，来测定果糖的含量。
优点：非破坏性，不需要样品处理。
缺点：灵敏度相对较低。
硫酸-苯酚法：
方法原理：利用果糖在硫酸存在下生成羧基，然后与苯酚反应生成有色产物，通过测定产物的吸光度来定量果糖。
优点：操作简单，成本较低。
缺点：灵敏度较低，容易受到其他成分的干扰。
选择适当的检测方法需要考虑实验室设备和技术水平、样品性质以及检测的灵敏度和准确性等因素。
蜂蜜的品质评估与检测技术大全
蜂蜜的品质评估与检测技术大全蜂蜜是一种天然的营养品和食材，其品质的评估和检测对于蜂蜜行业的发展至关重要。
本文将介绍蜂蜜的品质评估与检测技术，以帮助读者了解如何判断蜂蜜的质量，并保证蜂蜜的安全和可靠性。
一、感官评估法感官评估法是最基本也是最直观的评估方法之一。
通过观察蜂蜜的外观、闻其气味、品尝其口感，可以初步判断蜂蜜的品质。
蜂蜜应具备透明澄清、无悬浮物、香甜芳馥的特点。
若蜂蜜出现混浊、有异味或口感不正常等情况，则提示蜂蜜存在品质问题。
二、物理化学指标检测法物理化学指标检测法是评估蜂蜜品质的常用方法之一。
以下是一些常见的蜂蜜指标及其检测方法：1. 水分含量：水分是蜂蜜中的重要指标，直接影响蜂蜜的保质期和防止发酵。
常用的测定方法包括比重法、干燥法和红外线法等。
2. 抗氧化性：蜂蜜的抗氧化性能可以通过测定总酚含量、总黄酮含量等指标进行评估。
这些物质的测定方法包括分光光度法、高效液相色谱法等。
3. pH值和电导率：pH值和电导率可间接反映蜂蜜的酸碱性和离子含量。
测定方法包括电极法和电导仪法。
4. 糖类成分：蜂蜜中的主要糖类成分为葡萄糖和果糖，其含量可以通过高效液相色谱法等方法进行测定。
5. 重金属和农药残留：重金属和农药残留是蜂蜜中的重要污染指标，可通过原子吸收光谱法、气相色谱法等进行监测。
三、稳定同位素比值检测法稳定同位素比值检测法是一种新兴的蜂蜜质量评估技术。
不同来源或不同质量的蜂蜜具有不同的稳定同位素组成，通过检测蜂蜜中的稳定同位素比值，可以识别蜂蜜的真实性和品质等级。
例如，可以通过检测蜂蜜中碳同位素比值（δ13C）来判断其真实性和加糖情况。
四、生化指标检测法生化指标检测法是一种综合性的蜂蜜品质评估技术。
通过检测蜂蜜中不同生化指标的含量和变化情况，可以全面了解蜂蜜的品质状况。
常见的生化指标包括酶活性、氨基酸含量、挥发性成分等。
测定方法包括酶判定法、气相色谱法等。
五、DNA检测技术DNA检测技术是一种较为先进的蜂蜜质量评估方法。
HPLC-ELSD法测定蜂蜜中四种糖含量
蜂蜜购于超市 。果糖、 葡萄糖 、 麦芽糖 、 蔗糖标 准试剂（ 国家标物 中心购买纯度 Ｉ ＞９ ６ ％） ， 乙腈 （ 色 谱纯 ， 迪马公司） ， 超纯水 （ 现制备现用， Ｍ ｉ ｌ ｌ ｉ —Ｑ纯
水机 ） 。
１ ． ２ 仪器 设备
中图分 类号 ： ０ ６ ５ ７ ． ３
蜂 蜜作 为 中 国的传 统食 品 ， 一 直被 人们所 喜爱 。 目前世 界 上 蜂 蜜 的消 耗量 在 １ ０ ０万 ｔ 左右 ， 中 国 每
１ ． ３ ． １ 各 种溶 液的 配制
４种糖 标准 储 备液 ： 分别称取 ０ ． ２ ５ ｇ精 确 至 浆标准品于 ２ ５ ｍ Ｌ的容量瓶 中， 加水溶解定容 至刻 度。得 １ ０ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ的四种糖标准储备液。
第３ ０卷 第 ７期 ２ ０ １ ４年 ４月
Ｇａ ｎｓ ｕ Ｓ ｃ ｉ ｅ 甘肃科 ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ 技 Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ
． ３ ０ Ｎｏ ． ７
Ａ ｐｒ ． ２ ０１ ４
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ—Ｅ Ｌ Ｓ Ｄ法 测定 蜂 蜜 中 四种 糖 含 量
１ ２ ６ ０型高 效液 相色谱仪 （ 美 国安捷伦 公司 ） 、
３ ３ ０ ０型蒸 发光 散 射 检 测 器 （ Ａ Ｌ Ｌ ｔ ｅ ｃ ｈ格 雷 斯 中 国有 限公 司 ） 、十万 分 之一 天平 。
１ ． ３ 方法
将１ ． ３ ． ３ 制备好 的蜂蜜样品 ， 按照 １ ． ３ ． ２节的 条件洗进行设置色谱条件 ， 谱 图如图 １ 所示 。 结果 表 明 ， 样 品 中四种糖 能 够得 到很好 的分离 ， 色谱图基线稳定。增益对其结果影 响较小 。
第七组_蜂蜜中葡萄糖_果糖和蔗糖NMR定量分析研究
Abstract ： Various configurations of glucose, fructose and sucrose in honey were determined by nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy when dissolved in heavy water, their main characteristic peaks in the 1H-NMR spectrum were attributed, and their contents was measured with potussium biphthalate as an internal standard. The RSDs of determination of glucose, fructose and sucrose were 0.33%, 0.17% and 1.34%, respectively, and mean recoveries for them in spiked honey were 96.68%, 98.03% and 95.56%, respectively. This method can be applied to direct determination of small-amount samples with stable and repeatable results and high precision for study of quality standards of honey. Key words： nuclear magnetic resonance (NMR)；honey ；glucose；fructose；sucrose；determination 中图分类号：TS201.2 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2009)14-0253-03
中心动态——真假蜂蜜快速鉴别方法
中心动态——真假蜂蜜快速鉴别方法事件：温州吴先生想要了解购买的蜂蜜是否掺假，遂致电食品安全快速检测网消费者体验中心，咨询后快递送检。
检测样品：枣花+荆条蜜混合、洋槐蜜检测项目：果糖和葡萄糖含量、淀粉和糊精含量检测仪器：蜂蜜果糖、葡萄糖速测盒、造假蜂蜜糊精速测盒检测结果：1、两个样品果糖和葡萄糖含量均在60%以上，符合国家标准2、两个样品中淀粉和糊精含量均为0。
以下为检测过程：一、检测项目：果糖和葡萄糖含量实验仪器：蜂蜜果糖、葡萄糖速测盒样品1.用0.2ml 塑料吸管取蜂蜜样品滴加1 滴到离心管中，再加入2ml 蒸馏水（或纯净水），盖紧上盖，上下摇动30 次。
2.用0.2ml塑料吸管吸取上述稀释后的样品溶液，向另一支离心管中滴加1滴。
滴加10 滴果糖和葡萄糖试剂，盖紧上盖，左右摇动5 次。
3.将样品显色管放入沸水浴中加热5 分钟，取出，再加入1.5ml 蒸馏水（或纯净水），盖紧上盖，上下摇动3次。
4.把样品显色管与果糖和葡萄糖比色卡比对，即可读出样品中果糖和葡萄糖的含量。
1、3管为样品，均大于60%，符合国家标准。
二、检测项目：淀粉和糊精含量实验仪器：蜂蜜中淀粉、糊精速测盒1、取一支检测管，加入约1mL 蜂蜜样品，加入约3mL 的纯净水，振摇混溶，滴入3 滴速测液，摇匀。
2、5-20min 内观察试管溶液颜色变化。
实验结果，检测管的颜色为黄色，表明不含淀粉糊精。
（常蜂蜜检测管的颜色为黄色或淡黄色。
如果试管溶液变为棕色或紫色或棕紫色，可确定样品中含有糊精，如果测试液变为灰色或灰蓝色，或出现灰色或灰蓝色沉淀，可确定样品中含有淀粉。
其颜色随糊精或淀粉含量的加大而加深或沉淀增多。
）来自：/html/2014/zxdt_0711/42189.html。
紫外可见分光光度法测还原糖
分光光度法测一、实验目的定发酵液中还二、实验原理三、实验仪器材料原糖含量四、实验操作步骤五、实验结果实验指导六、实验思考题1、实验目的1、理解可见分光光度法测定还原糖的目的和意义；2、掌握可见分光光度法测定还原糖的原理和方法；3、掌握几种型号的紫外、可见分光光度计的操作方法。
2、实验原理根据糖分的还原性的测定法，叫做还原糖法。
此法可用来测定葡萄糖、果糖、麦芽糖和乳糖等还原糖。
蔗糖和淀粉等许多碳水化合物，须经过水解后再用还原糖法测定。
主要的还原糖测定方法有: 兰-埃农法：将样品滴加到一定量、沸腾着的费林试液中，用甲基兰为指示剂，滴到它恰好褪色。
姆松-华尔格法：将样品试液与过量的费林试液反应，过滤取得生物Cu2O后，用直接称量法测知Cu2O的重量，然后在检索表中查到相当的糖含量。
缩合反应法：单糖与强酸加热产生糠醛或糠醛衍生物，然后通过显色剂缩合成有色络合物，再进行比色定量（包括酚硫酸法、蒽酮法等）。
另外还有碘量，本实验主要DNS法，采用可见吸光光度法测定。
DNS法测定的原理3，5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，用比色法测定。
3、. 实验仪器和材料仪器：分光光度计、离心机摇床等。
试剂：无水葡萄糖标准溶液1mg/mL：称取于105℃烘至恒重的无水葡萄糖0.1g，精确到0.0002g，加少量水溶解，移入100mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀；DNS试剂：甲液：溶解6.9g重蒸酚于15.2ml 100g/L 的NaOH溶液中，并稀释到70mL，在此溶液中加入6.9g亚硫酸钠。
乙液：称取255g酒石酸钾钠，加到300mL NaOH溶液中，再加入880mL 10g/L 3，5-二硝基水杨酸溶液，将甲液与乙液相混合即得黄色试剂，储存于棕色瓶中，室温下放置7天后使用。
4、实验操作步骤：（1）葡萄糖标准曲线的绘制：准确吸取0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6 mL 1mg/mL无水葡萄糖标准溶液分别置于6只25mL比色管中，并补水至2mL，加1.5mL DNS溶液，摇匀。
市售蜂蜜中糖类成分含量的快速测定
ａ ： 蜂博士牌洋槐 花蜂蜜 ， 购于时代超市 ， 棕色、 无结晶 ； ｂ ：
葡萄糖浓 度 （ Ｙ ） 绘 制 标准 曲线 ， 获 得线 性 回归方 程 为 ｙ＝ ０ ． ０ ０ ７ ｘ （ ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ７ ） ， 葡萄糖浓度 在 ０— ８ ｏ ， ｇ ／ ｍ Ｌ范围 内吸
蔗糖 旋 光 度 分 别 为 ： 蔗糖 ［ ］ 。 ２ ０： ＋６ ６ ． ６ ０ 。 ， Ｄ一 葡 萄 糖
［ ］ ２ 。 ０ ＝＋ ５ ２ ． ５ ０ 。 ， Ｄ一果 糖 ［ ］ 。 ２ ０＝一９ １ ． ９ 。 ， 旋光度 有加 合 性， 其数值与糖分含量里线性关 系。 蜂蜜水解前旋 光度 ． 与蔗糖 、 葡萄糖和果 糖含量关 系 ： ｏ 【 ＝ ５ ２ ． ５ Ｘ＋６ ６ ． ６ Ｙ 一 ９ １ ． ９ Ｚ； 蜂蜜 完全 水解后旋光度 ２ 与蔗 糖、 葡萄糖和果 糖含 量 关系 ： ：＝ ５ ２ ． ５（ ＋Ｙ ）一９ １ ． ９ （ Ｙ＋ ｚ ） ， 总糖含量 Ｇ和葡萄糖 含量 、 蔗糖含量 ｙ和果糖含 量 ｚ
蜂蜜具有较高的营养价值 和药 用价值 ， 被 广泛应用在 中
成药和食品中。蜂蜜组成 成分 复杂 ， 可检 出成分 在 ２ ０种 以 上 ， 其 中蔗糖 、 葡 萄糖 和果 糖 占６ ５ ％ 一８ ０ ％， 为蜂蜜 的主
１ ． ３
试 验 原理 及 数 据 处理
蜂蜜 中蔗糖被稀酸水解 ， 产生等 量的 Ｄ～葡萄糖 和 Ｄ一
（ 南京理工大学泰 州科技学院化工学 院， 江苏泰州 ２ ２ ５ ３ ０ ０ ）
摘要 ： 采用硫酸 一 苯酚法测定蜂蜜总糖含量 ， 利用旋光度法测定蜂蜜水解前后旋光度 ， 并计算蜂蜜 中葡萄糖 、 果糖
和蔗糖 含 量 。结 果 表 明 ， １ ０种 蜂 蜜 总 糖 含 量 为 ６ ６ ． ２ ８ ％ ～９ ３ ． ７ １ ％ 之间， 蔗糖含量在 １ ． ３ ７ ％ 一２ ． ５ ５ ％， 都 符 合
蜂蜜的卫生检验
• 判定标准：≤4 判定标准：
• 2、淀粉酶值的测定
• 原理 • 将淀粉溶液加入蜂蜜样品溶液中，部分淀粉被 将淀粉溶液加入蜂蜜样品溶液中， 蜂蜜中所含的淀粉酶水解后， 蜂蜜中所含的淀粉酶水解后， 剩余的淀粉与加入 的碘反应而产生蓝紫色， 随着反应的进行， 的碘反应而产生蓝紫色， 随着反应的进行，其蓝 nm波 紫色反应逐渐消失。 紫色反应逐渐消失。用分光光度计于 660 nm波 长处测定其达到特定吸光度所需要的时间。 长处测定其达到特定吸光度所需要的时间。换算 1g 蜂蜜在 1h内水解 1%淀粉的毫升数。 淀粉的毫升数。 内水解 淀粉的毫升数
• 2.1 样品处理：称取 5g 试样， 置于 mL烧杯 试样， 置于20 烧杯
水和2.5 mL乙酸 mL水和 加入 水和 乙酸盐缓冲液后 入含有1.5 mL氯化钠溶液的 氯化钠溶液的25 mL容量瓶中并定 入含有 氯化钠溶液的 容量瓶中并定 容( 样品溶液应先加缓冲液后再与氯化钠溶液混 合)。 。
• 判定标准：≧4 判定标准：
• 注：如5 min时初测的数据已接近吸光度 时初测的数据已接近吸光度0.235 而 时初测的数据已接近吸光度 另一测定数据又很快达到吸光度0.200左右， 说 左右， 另一测定数据又很快达到吸光度 左右 明该样品的淀粉酶值含量高[大于 大于35 明该样品的淀粉酶值含量高 大于 mL / ( g · h) ] 。但为了结果的准确，应重复测定即从开始 但为了结果的准确， 计时起，每分钟测定一次； 计时起，每分钟测定一次；对于淀粉酶值含量低 的样品，应每10 min测定一次， 通过若干个数 测定一次， 的样品，应每 测定一次 据划线即可预测其终点值， 据划线即可预测其终点值，但5 mi n 时初测的数 据不能用于终点值的预测精密度。 据不能用于终点值的预测精密度。
蜂产品分析思考题
1、我国蜜蜂产品利用历史可以分几个阶段？答：⑪原始：蜂蜜、蜂子和蜂蜡的采收；蜂产品与蜂蛰疗法的初步利用。
⑫加工：蜂产品的简单加工和扩大利用；蜂产品开发取得进展。
⑬现代：50年代产品比较单一主要依靠生产蜂蜜和蜂蜡；60—70年代，改以往单纯生产为综合生产①政策扶持。
②蜂产品的加工利用，初具规模。
③蜂产品质量监督检验标准化管理。
④生产多样化。
⑤出口稳定增长。
2、《蜜蜂产品分析》课是一门什么样的学科？答：蜜蜂产品分析是一门研究和评定蜂产品品质及其变化的学科。
3、蜜蜂产品分析的内容有哪些？答：无机成分矿物质、水蛋白质天然成分脂类化合物碳水化合物有机物质维生素激素蜜蜂产品及色素，呈香味物质加工成品的有毒物质化学组成天然来源的食品添加剂食品添加剂人工合成的食品添加剂非天然成分生产、加工过程中不可避免的污染污染物质环境污染4、蜜蜂产品分析的方法有哪些？答：⑪感官：味觉、嗅觉、视觉、触觉、听觉⑫物理分析法：通过对样品的比重、密度、旋光度、折射率、熔点、凝固点、粘度、透明度等物理常数的测定。
⑬化学分析法：利用蜜蜂产品中各种成分特点的化学性质来分析蜜蜂产品质量，主要有重量法、容量法（滴定法）、比色法等。
⑭仪器分析法⑮微生物分析法：一般认为菌数达100—1000万个/g的食品就可能引起食物中毒，蜜蜂产品样品处理三个步骤：样品处理、含量测定、分析结果的表示与数据的处理。
6、蜂蜜的主要物理特性与化学成分？答：主要物理特性⑪外观：粘稠的透明或半透明的胶状液体。
⑫比重：1.368—1.443（39—44.05波美度）。
⑬气味与味道：甜的，具有各蜜源植物所特有的气味。
⑭颜色：（水白色、特、白色、特浅琥珀色、浅琥珀色、琥珀色、深琥珀色）。
表2—3 蜂蜜的不同色泽等级的波长范围蜂蜜色泽等级普方特仪标定的波长范围（mm）水白色0—8 特白色8—17 白色17—34特浅琥珀色34—50 浅琥珀色50—85琥珀色85—114 深琥珀色＞114⑮弱酸性：PH 3～4 ⑯吸湿性：一种物质从空气中吸收水分的能力。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
紫外分光光度法测定蜂蜜中果糖的含量
Ξ
占达东
(海南省琼州大学化学系海南五指山市572200)
[摘要] 研究了用紫外分光光度法直接测定蜂蜜中果糖的含量.果糖在盐酸的作用下,对紫外光有吸收,
其最大吸收波
长在291nm.果糖浓度在0～30mgΠL范围内服从比尔定律.采用此方法对野生蜂蜜的果糖含量进行了测定
.
关 键 词:分光光度法;果糖;蜂蜜
中图分类号:O657.32 文献标识码:A 文章编号
:10005900(2003)02004102
DeterminationoffructoseinhoneybasedonUV-Spectrometry
ZHANDadong
(DepartmentofChemistrgQiongzhouUniversity,WuzhishangHainan572200China)
【Abstract】
Anewphotometricanalysismethodfordeterminationoffructosewaspresented.Fructoseabsorbsultraviolet
at291nminthepresenceofhydrochloricacid.Themeasuredabsorbancecanbelineartothepresenceoffructoseinthe
0～30mgΠLconcentrationrange.Thepresentedmethodhasbeensuccessfullyappliedtothedeterminationoffructose
contentinhoneysamplesourcedfromwildbee.
Keywords: photometricanalysis;fructose;honey
有关蜂蜜中果糖含量的测定法有很多,有滴定法、气相色谱法、液相色谱法、毛细管电泳法[1]、分光
光度法[2,3]等.文献报道的分光光度法匀加入显色剂,如间苯二酚,铁氰化钾等,这些物质对环境有污染
.
用紫外分光光度法在酸性条件下直接测定果糖还未见报道.果糖在盐酸的作用下生成羟甲基糠醛
[4]
,
通
过对果糖在盐酸介质中的吸收光谱进行扫描,发现在波长291nm处有最大吸收.果糖浓度在0～30mgΠ
L范围内服从比尔定律.本法只加入盐酸,不加入其它显色物质,方法简便、快速、灵敏,不造用成污染,
样品无需预处理.用本方法测定了蜂蜜中的果糖含量,并与文献[3]报道的数值进行了比较,二者之间
图1 吸收曲线
Fig.1 Absorbancecurve
具有较好的一致性
.
1
实验部分
1.1
试剂及仪器
1.1.1 果糖标准溶液 称取0.1000gD-
果
糖(生化试剂)溶于二次蒸馏水,并定容到
1000
mL,果糖标准溶液的浓度为0.1mgΠmL;
浓盐酸
(分析纯)
;所有实验用水均为二次蒸馏水.
野生蜂
蜜购于海南省五指山市农贸市场
.
1.1.2 仪器 TU-1201
紫外可见分光光度计
(北京通用公司)
.
1.2
实验方法
在具塞比色管中加入适量的0.1000mgΠ
mL
的果糖标准溶液,加入3mL浓盐酸,用二次水定
容到10mL.在沸水中加热8min,取出用流水冷
却.用1cm比色皿,以试剂空白为参比,于波长291nm处测定其吸光度
A
.
第25卷第2期2003年6月 湘 潭 大 学 自 然 科 学 学 报
NaturalScienceJournalofXiangtanUniversity Vol.25No.2June2003
Ξ
收稿日期
:20020106
作者简介:占达东(1963),男,海南人,副教授
.E-mail:Zhandadong@163.com
2
结果与讨论
a.吸收曲线: 按实验方法用紫外分光光度计进行吸收光谱扫描,测出最大吸收波长在291nm
(
见
图1).当果糖浓度增大时最大吸收波长略有增加,本实验选定291nm为吸收波长
.
b.盐酸的影响: 按实验方法对不同体积的浓盐酸进行试验,结果表明,不加浓盐酸时,
吸光度
A
=0;当盐酸的加入量达3～4mL时,吸光度达到最大值;继续加入盐酸,吸光度降低(见图2).
盐酸的用
量以3mL为宜
.
图2 盐酸的影响 图3 加热时间的影响
Fig.2 EffectofHCl Fig.3
Effectofheatingtime
c.温度及加热时间的影响: 对不同反应温度进行试验,结果表明,在100℃的水浴中加热6min
后,吸光度基本不变(见图3).为使反应充分,实验选定加热时间为
8min.
d.放置时间对稳定性的影响: 用紫外分光光度计进行60min的时间扫描,
结果发现吸光度基本
不变.实验选定在40min内完成测定
.
e.工作曲线: 在上述选定的实验条件下,果糖浓度在0～30mgΠL
范围内与吸光度呈良好的线性
关系,其线性方程为:A=0.0318c+0.0203,相关系数
r
2
=0.9969.对20mgΠL果糖进行11次测定,
其
相对标准偏差为
2.6%.
f.干扰物质实验: 按照实验方法进行了干扰试验,结果表明:葡萄糖浓度大于果糖浓度的5
倍
时,葡萄糖对果糖产生干扰(以误差小于5%计).蔗糖对本方法有较大干扰
.
3
样品分析
称取野生蜂蜜0.1736g,定容到100mL,制成待测液.在上述实验条件下,取0.1mL待测液进行测
定,并进行加标试验.野生蜂蜜中的果糖含量检测结果列于表1.从实验结果可见该方法具有很好的选
择性和较高的灵敏度,适用于蜂蜜中的果糖含量测定
.
表1 蜂蜜中果糖含量的测定结果
Tab.1 Analysisresultsoffructosecontentinhoneysample
试 样测量值(C%)平均值(C%)RSD(%)加入值mΠ
μg回收率η
Π
%
文献值
[3]
(C%)
蜂 蜜42.86,45.22,43.7843.952.7100102.737.78～
44.57
参 考 文 献
[1] 耿越,赵相轩,花义山,等.高效毛细管电泳法测定蜂蜜中单糖的含量[J].食品科学,2002,23(1):114-116.
[2] 姜英勤,黄治清,马克荣等.间苯二酚分光光度法测定果葡糖浆中的果糖[J].化学世界,1989,1:18-21.
[3] 许汉英,赵晓君.流动注射-吸光光度法测定葡萄糖共存下的果糖[J].理化检验-化学分册,2000,3:102-103.
[4] 赵凯元,王忠秋,张绍镇,等.用间苯二酚光度法定量测定果葡糖浆中果糖含量及葡萄糖异构酶活性的研究[J].河北省科学院学报,
1989,1:110-115.
24
湘 潭 大 学 自 然 科 学 学 报 2003年