临床分子诊断学习题汇总

第一章绪论

一、名词解释

1.临床分子诊断学

二、问答题：

1．用于临床分子诊断的主流技术包括哪几种？

3．第一个实践分子诊断的人类单基因遗传病是什么？

4．哪3种分子生物学方法构成了整个现代分子生物学的实验基础？

第二章基因组及蛋白质组

一、名词解释：

1. Gene

2.Genome

3.operon

4.质粒的不相容性

5. overlapping gene

6. segmented genome

7. 反向重复序列

8. 卫星DNA

9.multigene

family

10.RFLP 11.SNP 12. Genomics 13.nucleoid 14.proteome

15.proteomics 16.双向凝胶电泳技术（2-DE）17. Pseudo gene 18. 基因多

态性

二、问答题：

1. 简述原核生物基因组特征。

2. 简述质粒的分类。（按功能、复制机制、转移方式）

3. 简述病毒基因组特征。

4. 简述真核生物核基因组的特征？

5. 真核生物基因组重复序列主要包括哪几类？

6. 中度重复序列可分为哪两个类型？

7. 真核生物的细胞器基因组具有哪些特点？

6. 真核生物基因组中基因多态性的表述常采用哪两种方式？

7. RFLP分为哪两种类型？

8. 简述IPG-IEF的基本原理

9. 简述蛋白质经2-DE分离后，凝胶上的蛋白质斑点常见的几种染色方法。

10.简述质谱分析法的过程。

11.简述生物质谱的组成部件有哪些？最重要的两个部件是什么？并写出这两个部件的主要作用是什么？

12.生物质谱中常使用的离子源有哪几种？

13.简述生物质谱中使用的质量分析器的类型？

14.简述酵母双杂交技术的基本原理。

15.定量蛋白质组学技术有哪些？

第四章核酸与蛋白质的分离与纯化

一、名词解释：

生物大分子（biomacromolecule）

二、问答题：

1、临床诊断常见的标本包括哪些？应从哪几方面进行考虑来选择适宜的分离和纯化核酸的方法？

2..分离与纯化核酸的技术很多，各具特点及适用范围，但不论采取何种方法，均应遵循总的原则，其内容是什么？

3..在核酸的分离与纯化过程中，应该清除的杂质主要包括哪三部分？

4..浓缩核酸最常用且高效的方法是什么？其优点是什么？

5.核酸的有机溶剂沉淀法的原理是什么？

6.紫外分光光度法测定核酸浓度的原理是什么？具体的换算关系是什么？灵敏度是多少？

7.紫外分光光度法测定核酸浓度的原理是什么？

8.采用紫外分光光度法如何对核酸制品的纯度进行鉴定？

11.如何采用琼脂糖凝胶法对核酸的完整性进行鉴定？

12.酚抽提法提取哺乳动物细胞基因组DNA所需试剂及过程是怎样的？

13.酚抽提法涉及到的主要试剂有哪些？它们的作用是什么？

14.纯化与回收所需要的DNA片段需要注意的原则是什么？

15.从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的方法主要有哪些？

16.从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段的标准方法是怎样的？

17.质粒DNA的提取与纯化的经典方法包括哪些？这些方法主要包括哪三个步骤？

18.纯化质粒DNA的方法很多，效果好且适用范围广的方法主要包括哪些？

19.RNA分离与纯化需要注意哪些？

20.酸性异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离总RNA的过程是怎么样的？

21.mRNA分离纯化的方法有哪些？

22.蛋白质分离与纯化的主要依据和方法有哪些。（71页表4-2）

23.蛋白质精制纯化的方法有哪些？

第五章核酸扩增技术

英译汉：

polymerase chain reaction (PCR)

denaturation

annealing

extention

prime

restriction fragment length polymorphism(RFLP)

reverse transcription PCR(RT-PCR)

real-time fluorescent quantitative PCR (RFQ-PCR)

Multiplex PCR

1.PCR是由美国哪位科学家于1985年创立，并为此荣获哪个年度诺贝尔化学奖？

2.简述PCR技术的基本原理。

3.PCR反应体系的基本要素有哪些？分别具有哪些特点和作用？

4.PCR反应的特异性主要由哪一个要素决定？

5.引物在PCR反应中的三大作用是什么？

6.简述引物设计原则。

7.简述PCR反应条件设定原则（循环参数设定）。

8.依据PCR反应动力学，如何计算PCR产物的量？（公式）

9.提高PCR反应特异性的方法有哪些？

10.PCR产物的检测方法有哪些？其中最常用的是哪一种？最可靠的是哪一种？

11.什么是逆转录PCR？

12.RT-PCR常用的逆转录酶和逆转录引物有哪些？

13.什么是实时荧光定量PCR？其具备哪些特点？

14.实时荧光定量PCR的定量检测方法分为哪两大类？

15.实时定量PCR技术的特异性荧光探针主要包括哪几种？

16.何谓分子信标？简述Taqman探针技术和分子信标技术的基本原理。

17.何谓荧光阈值和Ct值？

18.影响荧光定量PCR的主要因素有哪些？

19.荧光定量PCR主要应用于哪些方面？

20.PCR标准化操作程序包括哪几个方面？

21.何谓PCR？

22.常用热启动PCR方法有哪些？

23.临床基因扩增检验实验室原则上分为几个区？各个区进行的主要操作是什么？

24.如何进行标本的稳定化处理？

第六章核酸分子杂交

英译汉：

nucleic acid hybridization

nucleic acid probe

hyperchromic effect

melting temperature (Tm)

denaturation

annealing

fluorescence in situ hybridization(FISH)

问答题：

1.何谓核酸分子杂交？

2.DNA 的T m大小与哪些因素有关？

3.核酸变性因素有哪些？何谓增色效应？

4.影响DNA复性速度的因素有哪些？

5.核酸分子杂交的影响因素有哪些？洗涤条件遵循的原则是什么？

6.常用的固相支持介质有哪些？分别具有哪些特点？

7.常用的转膜方法有哪些？各有何优缺点？

8.何谓Southern印迹杂交？简述Southern印迹杂交的基本过程。

9.何谓预杂交？其目的是什么？常用封闭物有哪几类？

10.何谓Northern印迹杂交？Northern印迹杂交与Southern印迹有哪些不同点？

11.何谓斑点杂交？与传统杂交技术相比有何优缺点？主要应用在哪些方面？

12.何谓菌落杂交？主要应用在哪些方面？

13.何谓原位杂交？主要应用在哪些方面？其基本步骤是什么？

14.何谓核酸探针？根据性质和来源不同，可分为哪几大类？

15.简述寡核苷酸探针的设计原则。

16.理想的探针标记物应具有哪些特征？核酸探针标记物分为哪两类？

17.核酸探针非放射性标记物分为哪几类（举例）？各有何特点？

18.常用核酸探针标记方法有哪些？

19.简述切口平移法的基本过程及注意事项。

20.简述随机引物法的基本过程及注意事项。

21.如何对核酸探针3’端或5’端标记？