细菌的生长曲线

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微生物实验报告:测定细菌生长曲线

微生物实验报告:测定细菌生长曲线

测定细菌生长曲线一、实验目的1.了解细菌生长曲线特征,测定细菌繁殖的代时;2.学习液体培养基的配制以及接种方法;3.反复练习无菌操作技术;4.了解不同细菌,不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同;5.掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法;二、实验原理将一定量的菌种接种在液体培养基内,在一定的条件下培养,可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性,如以细菌活菌数的对数做纵坐标,以培养时间做横坐标,可绘成一条曲线,称为生长曲线。

单细胞微生物发酵具有4个阶段,即调整期(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。

生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。

不同微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。

因此,测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。

测定微生物生长曲线的方法很多,有血细胞计数法,平板菌落计数法,称重法和比浊法。

本实验才用比浊法,由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比,因此,可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。

将所测得的光密度值(OD600)与对应的培养时间做图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。

注意,由于光密度表示的是培养液中的总菌数,包括活菌和死菌,因此所测生长曲线的衰亡期不明显。

从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间,即代时,以G表示,其计算公式为:G=(t2-t1)/[(lgW1-lgW2)/lg2]式中t2和t1为所取对数期两点的时间,W1和W2分别为对应时间测得的细胞含量或OD。

三、实验器材大肠杆菌,枯草杆菌菌液及平板;培养基(100mL/250mL三角瓶×10瓶/大组):牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基;取液器(5000ul, 1000ul 各一支),无菌1000ul吸头若干,无菌5000ul吸头若干,比色皿10个及共用参比杯一个,培养箱3台,722s分光光度计;四、实验步骤1.活化菌种将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中,37℃振荡培养18h,另外准备单菌落平板各1块;2.接种6人大组分为3个小组,按表1接种。

细菌生长曲线测定方案

细菌生长曲线测定方案

细菌生长曲线的测定1 目的1.1 了解细菌生长曲线特点及测定原理1.2 学习用比浊法测定细菌的生长曲线2 原理将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中,在适宜的条件下进行培养,定时测定培养液中的菌量,以菌量的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,绘制的曲线叫生长曲线。

它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。

依据其生长速率的不同,一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。

这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。

因此通过测定微生物的生长曲线,可了解各菌的生长规律,对于科研和生产都具有重要的指导意义。

测定微生物的数量有多种不同的方法,可根据要求和实验室条件选用。

本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与光密度(OD值)成正比,因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度,并将所测的OD值与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线,此法快捷、简便。

3 材料3.1菌种某细菌3.2培养基液体培养基3.3 仪器和器具721分光光度计,比色杯,恒温摇床,无菌吸管,试管,三角瓶。

4 流程种子液→标记→接种→培养→测定5 方法5.1种子液制备取细菌斜面菌种1支,以无菌操作挑取1环菌苔,接入肉膏蛋白胨培养液中(液体培养基接种法),静止培养24h作种子培养液。

5.2标记编号取盛有50mL无菌肉膏蛋白胨培养液的250mL三角瓶11个,分别编号为0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20h。

5.3接种培养用2mL无菌吸管分别准确吸取2mL种子液加入已编号的11个三角瓶中,于37℃下振荡培养。

然后分别按对应时间将三角瓶取出,立即放冰箱中贮存,待培养结束时一同测定OD 值。

5.4生长量测定将未接种的肉膏蛋白胨培养基(空白对照)倾倒入比色杯中,选用600nm波长分光光度计上调节零点,作为空白对照,并对不同时间培养液从0h起依次进行测定,对浓度大的菌悬液用未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定,使其OD值在0.10.~0.65以内,经稀释后测得的OD值要乘以稀释倍数,才是培养液实际的OD值。

微生物生长曲线细菌生长曲线的区别

微生物生长曲线细菌生长曲线的区别

微生物生长曲线细菌生长曲线的区别微生物生长曲线是描述微生物在特定时间内生长数量变化的一种图形表示方法。

它是微生物学研究中非常重要的概念,可以帮助我们更深入地了解微生物的生长规律,帮助我们预测微生物在不同环境下的生长情况。

在微生物学中,我们常常会听到微生物生长曲线这个概念,但是不同类型的微生物可能具有不同的生长规律,因此我们也常常会听到细菌生长曲线的概念。

那么微生物生长曲线和细菌生长曲线有什么区别呢?接下来,我们将从深度和广度两个方面来探讨这个问题。

深度方面来看,微生物生长曲线是一个更加宏观和综合的概念,它可以用来描述不仅仅是细菌,还可以用来描述真菌、古菌等各种微生物在不同环境下的生长规律。

微生物生长曲线一般分为四个阶段:潜伏期、指数期、对数期和平稳期。

在潜伏期,微生物适应环境、增殖准备;指数期是细胞增殖最为迅速的时期;对数期是细胞数量以对数倍增长的时期;平稳期是细胞数量维持在一个相对稳定的阶段。

而细菌生长曲线则是微生物生长曲线中的一种特殊情况,它更多地指代细菌在不同环境中的生长规律,通常也分为潜伏期、指数期、对数期和平稳期。

但需要注意的是,不同类型的细菌在不同环境中的生长曲线可能会有所不同,因此在研究细菌生长曲线时需要具体问题具体分析。

广度方面来看,微生物生长曲线涉及到的范围更加广泛,包含了各种不同类型的微生物在不同环境下的生长规律。

而细菌生长曲线则更偏向于研究细菌在不同环境下的生长规律,更具体、更细致。

在实际的微生物学研究中,我们常常会根据具体的研究对象和研究目的选择使用微生物生长曲线还是细菌生长曲线来进行研究,以更好地满足研究的需要。

总结来看,微生物生长曲线和细菌生长曲线在深度和广度上有一定的区别。

微生物生长曲线更宏观、更综合,适用于研究各种类型的微生物在不同环境下的生长规律;而细菌生长曲线则更具体、更针对性,适用于研究细菌在不同环境下的生长规律。

在实际研究中,需要根据具体问题和研究目的来选择使用哪种生长曲线进行研究,以更好地帮助我们深入理解微生物的生长规律。

微生物的生长曲线图及在实践中的意义

微生物的生长曲线图及在实践中的意义

微生物的生长曲线图及在实践中的意义微生物生长曲线是以微生物数量(活细菌个数或细菌重量)为纵坐标,培养时间为横坐标画得的曲线。

一般说,微生物(细菌)重量的变化比个数的变化更能在本质上反应出生长的过程。

曲线可分为三个阶段即生长率上升阶段(对数生长阶段)、生长率下降阶段及内源呼吸阶段。

典型的微生物生长曲线包括四个时期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。

1、迟缓期该期菌体增大,代谢活跃,为细菌的分裂繁殖合成并积累充足的酶、辅酶和中间代谢产物;迟缓期长短不一,按菌种本身的遗传特性、菌龄和菌量,以及营养物等不同而异,一般为1~ 4小时。

2、对数期生长速率常数r最大,细胞每分裂一次所需要的时间——代时(generation time,g,又称增代时间)最短;细胞进行平衡生长(balanced growth),菌体各部分的成分均匀;酶系活跃,代谢旺盛;细胞群体的形态与生理特性最一致;微生物细胞抗不良环境的能力最强。

3、稳定期生长速率常数等于0,即新增细胞数和死亡细胞数几乎相等,二者处于动态平衡,活菌数保持相对稳定并达到最高水平,菌体产量也达到最高点;细菌分裂速度降低,代时逐渐延长,细胞代谢活力逐渐减退,开始出现形态和生理特征的改变;细胞内已经开始累积储藏物质,例如肝糖粒、异染颗粒、脂肪粒等;多数芽孢细菌在此期构成芽孢;许多关键的蒸煮产物主要在此期间大量累积并达至最高峰。

4、衰亡期细胞形态发生变化(整体表现为多形态,例如管状或圆形的发育形态),甚至畸形;细胞新陈代谢活力明显降低,有的微生物因蛋白水解酶活力的进一步增强引致菌体丧生并充斥着菌体自溶,释放出来新陈代谢产物;有些革兰氏阳性菌染色反应反应变成阳性;有的微生物在此期间进一步合成或释放对人体有益的抗生素等次级代谢产物,而芽孢杆菌在此期间释放芽孢。

药品生物技术《4细菌生长曲线-迟滞期》

药品生物技术《4细菌生长曲线-迟滞期》
➢将少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中后,在适宜的 温度、通气〔厌氧菌除外〕等条件下,它们的群体会有规律地生长起 来。每隔一定时间取样,测菌细胞数目。以细胞数目的对数值作纵坐 标,以培养时间作横坐标,可以画出一条有规律的曲线即单细胞微生 物的典型生长曲线。
➢生长曲线代表了单细胞微生物在新的环境中从开始生长、分裂直至死 亡的整个动态变化过程。
第一页,共五页型生长曲线
第二页,共五页。
〔一〕 延滞期
又称:停滞期、调整期、适应期-“万事开头难〞
1、特点: 生长速率常数R= 0; 细胞形态变大或增长;
细胞内RNA特别是rRNA含量增高,原生质嗜碱性增强; 合成代谢活泼〔核糖体、酶类、ATP合成加快〕,易产生诱导酶;
对外界不良条件反响敏感〔如氯化钠浓度、温度、抗生素等理 、化学药物〕。
第三页,共五页。
2、在发酵工业上需设法尽量缩短延迟期,措施有:
①接种龄:对数生长期的菌种接种,子代停滞期短;稳定 期的菌种接种,子代停滞期居中;停滞期或衰亡期菌种 接种,子代停滞期长。 ②增加接种量;一般来说, 接种量增大可缩短甚至消除 延迟期〔发酵工业上一般采用1/10的接种量〕。 ③调整培养基的成分,应适当丰富,且发酵培养基成 分尽量与种子培养基的成分接近。
第五页,共五页。
第四页,共五页。
内容总结
将少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中后,在适宜的温度、通气〔厌氧菌除外〕等条件下,它们的群体会有 规律地生长起来。生长曲线代表了单细胞微生物在新的环境中从开始生长、分裂直至死亡的整个动态变化过程。又称:停滞期、 调整期、适应期-“万事开头难〞。合成代谢活泼〔核糖体、酶类、ATP合成加快〕,易产生诱导酶。对外界不良条件反响敏感 〔如氯化钠浓度、温度、抗生素等理、化学药物〕。②增加接种量

细菌两次生长曲线不一致的原因

细菌两次生长曲线不一致的原因

细菌两次生长曲线不一致的原

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细菌的生长曲线通常由四个主要阶段组成:潜伏期、指数增长期、稳定期和衰退期。

如果细菌在两次生长过程中表现出不一致的生长曲线,可能有以下原因:
环境条件不同:细菌对环境条件非常敏感,包括温度、pH值、营养物质和氧气水平等。

如果两次实验中的环境条件不同,例如温度或培养基成分不同,细菌的生长曲线可能会受到影响。

初始细菌数量不同:即使环境条件相同,如果两次实验中的初始细菌数量不同,也会导致生长曲线的不一致。

较多的初始细菌数量可能导致更快的指数增长期和更早的稳定期。

细菌菌株变异:细菌菌株之间可能存在遗传变异。

如果两次实验使用的是不同的细菌菌株,它们的生长特性可能会有所不同,导致生长曲线不一致。

技术操作差异:实验操作的技术差异也可能导致生长曲线的不一致。

例如,在培养细菌的过程中,培养基的制备、接种的方法、培养条件的控制等因素都可能对细菌的生长产生影响。

随机性:细菌的生长是一个随机过程,在相同条件下,两次实验的生长曲线可能会有一定的差异。

这是由于微小的随机事件和细菌个体之间的差异所致。

综上所述,细菌两次生长曲线不一致的原因可能是由于环境条件、初始细菌数量、细菌菌株的变异、技术操作差异和生长过程的随机性等多种因素的综合影响。

简述细菌在液体培养基中生长所表现的生长曲线各个时期的名称

简述细菌在液体培养基中生长所表现的生长曲线各个时期的名称

简述细菌在液体培养基中生长所表现的生长曲线各个时期的名称
细菌的生长繁殖的4个时期:迟缓期,对数期,稳定期,衰亡期。

迟缓期(lag phase):又叫调整期。

细菌接种至培养基后,对新环境有一个短暂适应过程(不适应者可因转种而死亡)。

此期曲线平坦稳定,因为细菌繁殖极少。

迟缓期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异,一般为1~4小时。

此期中细菌体积增大,代谢活跃,为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。

对数期(logarithmic phase):又称指数期。

此期生长曲线上活菌数直线上升。

细菌以稳定的几何级数极快增长,可持续几小时至几天不等(视培养条件及细菌代时而异)。

此期细菌形态、染色、生物活性都很典型,对外界环境因素的作用敏感,因此研究细菌性状以此期细菌最好。

抗生素作用,对该时期的细菌效果最佳。

稳定期(stationary phase):该期的生长菌群总数处于平坦阶段,但细菌群体活力变化较大。

由于培养基中营养物质消耗、毒性产物(有机酸、H2O2等)积累pH下降等不利因素的影响,细菌繁殖速度渐趋下降,相对细菌死亡数开始逐渐增加,此期细菌增殖数与死亡数渐趋平衡。

细菌形态、染色、生物活性可出现改变,并产生相应的代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素、以及芽胞等。

衰亡期(decline phase):随着稳定期发展,细菌繁殖越来越慢,死亡菌数明显增多。

活菌数与培养时间呈反比关系,此期细菌变长肿胀或畸形衰变,甚至菌体自溶,难以辩认其形。

生理代谢活动趋于停滞。

故陈旧培养物上难以鉴别细菌。

细菌典型生长曲线在临床中的应用

细菌典型生长曲线在临床中的应用

细菌典型生长曲线在临床中的应用细菌典型生长曲线(Bacterial growth curve)是指在适宜生长条件下细菌生长的数量与时间的关系的曲线。

这些曲线的形状可以被分类为四个主要阶段:潜伏期、对数期、静止期和死亡期。

细菌典型生长曲线的研究可以帮助临床医生更好的诊断和治疗细菌感染。

这篇文章将阐述细菌典型生长曲线在临床中的应用。

1. 确定细菌对抗生素的最佳治疗时间细菌的对数期是其最适宜生长的时期。

在细菌处于对数期时使用抗生素会比在潜伏期或者静止期使用更为有效,因为抗生素会影响处于快速分裂的细菌群体。

基于细菌典型生长曲线,医生可以更好地了解细菌的生长过程,从而更好地确定给患者用抗生素的时间。

2. 快速诊断细菌感染快速诊断细菌感染是临床中至关重要的一步。

根据细菌典型生长曲线,患者在感染初期的细菌数量是不太多的,因为病原菌还处于潜伏期。

如果医生想尽早地诊断细菌感染,就需要在患者症状初现时进行检测。

而且患者在感染初期就接受诊治,治疗更为有效。

3. 评估治疗是否有效细菌在被抑制或者被杀死后,就会进入死亡期。

死亡率越快,治疗效果就越好。

基于细菌典型生长曲线,临床医生可以通过测量细菌数量的变化来评估治疗是否有效。

如果细菌数量开始减少,则说明治疗在进展。

反之,则需要考虑更改治疗方案或者加强治疗措施。

4. 设计治疗方案基于细菌典型生长曲线,医生可以更好地了解细菌的生长模式,因此可以更好地设计治疗方案,以确保最好的治疗效果。

根据细菌的生长曲线,医生可以选择在最适宜生长的对数期给予抗生素,使用最适合的抗生素,在最有利的时间使用治疗手段,使治疗更为有效。

细菌典型生长曲线在临床中的应用很广泛,并且对于预防和治疗细菌感染非常有帮助。

因此,更深入研究细菌典型生长曲线,帮助医生更好地了解细菌生长的规律,临床医生将可以更有效地预防和治疗细菌感染。

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细菌的生长曲线
1、细菌的生长曲线
细菌的生长曲线是描述在特定环境条件下,细菌的数量变化趋势的曲线。

在常规条件下,一个细菌种群会先经历快速生长、然后维持稳定的生长率、最后放缓增长,最终停止增长,并形成稳定的细菌密度。

细菌种群的生长曲线主要分为四个阶段:
(1)暂时性增殖阶段
暂时性增殖阶段是指细菌刚被接种或放置于新环境时的快速增
殖阶段,大量繁殖单细胞分裂,细菌数量增加,细菌密度不断升高,使时间和细菌数量的变化曲线呈现上升趋势。

(2)持续性增殖阶段
持续性增殖阶段是指细菌数量达到一定程度之后,细菌群体在维持稳定的状态下持续增殖的阶段。

细菌群体的生长曲线在此阶段呈现一条比较平稳的直线,表明细菌数量增加速度慢于繁殖速度,细菌密度也保持在一个较低的水平。

(3)减缓增殖阶段
减缓增殖阶段是指细菌数量进一步增加,出现资源紧缺或宿主免疫应答开始发挥作用时,细菌的增殖减弱,增加缓慢,而细菌的死亡率增加,细菌数量和细菌密度也随之减少,使时间与细菌数量的变化曲线呈下降趋势。

(4)恒定密度阶段
恒定密度阶段是指细菌数量在紧缺的环境条件下开始维持在一个恒定的水平,细菌的死亡率与繁殖率大体保持平衡。

在此阶段,细菌数量和细菌密度基本保持稳定,而时间与细菌数量的变化曲线也几乎平行于X轴。

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