HBsAg金标快速试剂检测漏检原因分析

CD4细胞内因子检测试剂盒说明书

CD4细胞内因子检测试剂盒步骤 一.样本收集准备 血样收集要使用肝素钠及其他抗凝剂以中和淋巴细胞作用。使用前可放于室温条件避免血小板活化，收集后8小时内使用！长时间存放可影响抗原提呈细胞功能，运输也可合并细胞功能丧失。 二.步骤 1.标记2只15ml聚丙烯活化试管： 1管：加入0.5ml肝素化全血，稀释后的刺激剂PMA（取5ul 8×分装以1×PBS 35ul稀释至总体积40ul）和INOMYCINE（取2ul 4×分装以1×PBS 6ul稀释至总体积8ul）各1ul，5ul CD28/CD49d单克隆抗体混合物。 2管：加入0.5ml肝素化全血，5ul CD28/CD49d单克隆抗体混合物。 轻轻振荡每只试管，然后37°孵化2小时。注意：离心管盖子拧松！！ 2.从冰箱取出一只分装好的BFA，以消毒的1×PBS 1:10稀释（加90ul1×PBS稀释至总体积100ul），每管加入稀释液10ul，振荡，然后37°孵化4小时。注意：离心管盖子拧松！！ 3.每管加50ulEDTA的PBS溶液，剧烈振荡，室温孵育15分钟，再次最高速振荡10秒。 4.如果细胞马上用来染色，可参照4a执行；如果是冻存待染，参照4b。 4a： ?标记4只聚苯乙烯试管 1管：活化的同种型对照（AIC） 2管：未刺激同种型对照（UIC） 3管：活化样本（AS） 4管：未刺激样本（US） ?往AIC管和AS管各分装100ul活化全血 ?往UIC管和US管各分装100ul未刺激全血 ?接第5步。 4b： ?每管0.5ml全血样本（已活化和未刺激）均加5ml 5 mL of 1X BD FACS Lysing Solution (使用前用去离子水1:10稀释) ?振荡，室温孵育10分钟，直接放入-80°冻存。 ?染色时，37°水浴箱简单溶解细胞，加入7ml wash buffer，500G室温离心10分钟。 ?去上清，以0.5mlwash buffer 重悬沉淀颗粒。 准备染色时 ?标记4只聚苯乙烯试管，此同4a操作。 ?接第7步。 5.每管加入1ml 1X BD FACS Lysing Solution (使用前用去离子水1:10稀释，每个样本需取 400ul 10×BD FACS Lysing Solution加去离子水3.6ml稀释至4ml)，轻轻混匀，室温孵育10分钟。

肺吸虫抗体快速检测试剂盒(胶体金法)

肺吸虫抗体快速检测试剂盒（胶体金法） 肺吸虫病概述： 卫氏并殖吸虫，简称肺吸虫。此虫主要寄生于肺，造成肺部受损的人畜共患寄生虫病。人多因为生食或半生不熟含有肺吸虫囊蚴的石蟹、蜊蛄和生水而导致感染肺吸虫病，其临床症状多以咳嗽、咳棕红色痰为主要表现。当人体感染肺吸虫病后，机体会产生特异性抗体，通过肺吸虫血清抗体快速检测对该病的辅助诊断和流行病学的监测有着重要的意义！ 产品简介： 肺吸虫快速检测试剂盒采有金标渗滤式间接法定性检测试验血清中的肺吸虫抗体IgM/IgG，适用于疑似肺吸虫病的大量人群进行快速筛查。 检测原理： 本试剂盒利用斑点免疫金渗滤技术，将肺吸虫纯化抗原预先包被在固相载体硝酸纤维素薄膜上，待检测时，将预先处理好的样本血清滴加在加样孔中，通过渗滤使抗体和抗原在膜上发生特异性免疫结合反应，形成抗原抗体复合物。然后滴加红色胶体金标记的第二抗体（显色液），与复合物中对应的的抗体结合，则形成肉眼可读取的检测结果。 试剂盒组成： 1、肺吸虫快速检测板（含预先包被的肺吸虫纯化抗原） 2、试剂A（洗涤液1瓶，0.02moI/L PH7.4PBS） 3、试剂B（显色液1瓶，含胶体金标记物） 4、原版说明书1份 包装规格：24T/盒，单人份独立包装 检测样本：只限血清 储存条件：原试剂盒包装于2-8℃密封避光保存 有效日期：18个月 生产企业：广州市标健生物科技有限公司 样本要示： 样本只限血清，建议最好采用新鲜血清标本，若是陈旧血清或高血脂血清恐影响检测效果。 检验方法： 1、将试剂盒取出，和样本一起恢复室温25℃左右。 2、拆开试剂包装，将检测板水平放于工作台。 3、在反应孔中间垂直加入2滴（试剂A），待液体完全渗透。 4、在反应孔正中央垂直加入50ul待检血清，待血清完全渗透。 5、加入4滴显色液（试剂B），待液体完全渗透。 6、加入2滴（试剂A），待液体完全渗透，观察结果。 检测结果的解释： 阳性结果：检测板的C端出现红色线条，T端也出现红色线条，表明肺吸虫IgM抗体阳性。阴性结果：检测板的C端出现红色线条，T端不出现红色线条，表明肺吸虫IgM抗体阴性。

利津县食药监局食用农产品快速检测室建设方案

利津县食药监局食用农产品快速检测室建设方案表1 食用农产品快速检测仪器设备配置方案

表3 快速检测配件及耗材

以上总计为：116340.00元 农药残留快速检测仪 【参数要求】 ★1、检测通道：24通道。 ★2、用1cm比色皿检测，可以同时测试多个样品，每个样品由程序控制分别独立工作，不会互相干扰。 3、吸光度值范围：0.000 - 3.500A 4、抑制率测量范围：0－100% ★5、检测下限：0.2mg/kg（需省级技术监督部门的检测报告） 6、透射比示值误差：±1% 7、透射比重复性：±0.5% 8、光电流漂移：≤±0.5%/3min 9、吸光度准确度：±1.0% ★10、抑制率示值误差：±5%（需省级技术监督部门的检测报告） ★11、抑制率重复性：1%（需省级技术监督部门的检测报告） ★12、采用7寸触摸大屏幕中文液晶屏，支持全屏手写 13、内置智能操作系统，不用连接电脑限可实现无线发送检测数据、上网等 14、仪器内置远程监控系统 15、仪器可直接读取U盘、移动硬盘等各类存储设备 16、操作简单快速，无需复杂的前处理过程，1分钟内可出检测结果 17、接口方式：USB，可以使用USB接口和PC机通讯，并控制仪器工作 18、存储：大容量存储器，可以存储16000组测量原始数据 19、外设：内置嵌入式微型热敏打印机，大屏幕LCD显示 ★20、操作系统：采用Android4.0以上操作系统，有利于检测结果的自动化处理，不需外接电脑，检测系统支持在线升级。 21、网络接口：wifi，以太网、GPRS等，不用连接电脑限可实现无线发送检测数据、上网等

食品中四环素类抗生素金标快速检测试剂条的研究

食品中四环素类抗生素金标快速检测试剂条的研究 张银志1,肖利文2,杨燕2,孙秀兰1,23 　(1.江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214036;2.江南大学食品学院,江苏无锡214036) 摘要　[目的]建立一种检测四环素类抗生素的新方法。[方法]四环素通过两步衍生化后,与氨基化的BS A 上的表位氨基反应,合成T C 2BS A 偶联物。以四环素多克隆抗体-胶体金复合物作为分析探针,四环素完全抗原作为竞争抗原,构建分析体系。[结果]紫外吸收光谱、凝胶色谱图和红外光谱均表明人工完全抗原偶联成功。选择柠檬酸三钠加入量1.5m l 生成的胶体金作为该试验继续合成胶体金检测探针的金溶胶。当抗体稀释倍数为1∶100、pH 值为8.70时,金标灵敏度好。金标试纸条检测样品中四环素的检测限量是200μg/L ,检测时间不超过15.0m in 。与E LIS A 法检测样品作对比,采用新法的准确率达100%。探针溶液中加入10%(V/V )保护剂后,试剂条稳定性明显提高。[结论]该研究为四环素的快速检测提供了依据。关键词　四环素;纳米金;检测方法中图分类号　T S207.3 文献标识码　A 文章编号　0517-6611(2008)27-11637-03Study of R apid Detection on T etracycline A ntibiotics in Food by U sing G old 2labeled R eagent Strip ZH ANG Yin 2zhi et al (National K ey Lab of F ood Science and T echn ology ,S outhern Y angtze University ,W uxi ,Jiangsu 214036)Abstract [Objective]T he study was to establish a new m eth od for the rapid detection on tetracycline antibiotics.[M eth od]T hrough tw o step derivatiza 2tion ,the tetracycline reacted w ith epitope am in o in am ination BS A to synthesize into T C 2BS A conjugate.W ith the com pound of tetracycline polyclonal anti 2b ody 2colloidal g old as the analysis probe and the com plete antigen of tetracycline as the com petitive antigen ,the analysis system was constructed.[Result ]Ultraviolet abs orption spectrum ,gel chrom atogram and in frared spectrum all sh owed that the artificial com plete antigen was success fully coupled.T he col 2loidal g old generated by adding 1.5m l tris odium citrate was selected as the colloidal g old s olution in the ex perim ent of continu ously synthesizing the col 2loidal g old detection probe of g old s olution.W hen the dilution multiple of antib ody was 1∶100and pH was 8.70,the sensitivity of g old labeled strip was g ood T he detection lim it of g old 2labeled reagent strip on tetracycline in detected sam ple was 200μ g/L and the detection tim e was less than 15.0m in.C om 2pared w ith result of detecting sam ples by E LIS A the accurate rate by using new m eth od was 100%.A fter 10%(V/V )protective agent was added into probe s olution ,the stability of reagent strip was im proved obviously.[C onclusion]T he study provided a base for the rapid detection on tetracycline.K ey w ords T etracycline ;Nan o 2g old ;Detection m eth od 基金项目　国家质监总局立项资助项目(2007IK 136);江南大学211 师资基金资助项目。 作者简介　张银志(1975-),男,陕西汉中人,工程师,从事食品安全 检测方面的研究。3通讯作者。 收稿日期　2008206230 四环素类药物是一种广谱抗菌药物[1],可直接作为一种饲料添加剂投放到饲料中,曾以价格低、抗菌谱广等优点而在养殖业、畜禽业、水生生物等领域中广泛应用[2-5]。在欧盟,四环素类抗生素的使用量占了整个禽畜业中抗生素使用量的65% [6] 。1990年,欧盟因我国畜禽产品中抗生素残留超 标而停止进口我国畜禽产品[7]。目前关于四环素类抗生素的检测方法有酶联免疫法、薄层色谱法、毛细管电泳法、质谱连用法和高效液相色谱法等[8],但这些方法都需要大型的仪器,价格昂贵,还需要专人管理。近年来也有进口的用于四环素检测的E LIS A 试剂盒面世,但是保存期限短,价格高,远不能满足检测需要。笔者在前人的研究基础上[9-10] ,建立了 用金标免疫层析检测法检测四环素类抗生素的方法,为四环 素的快速检测提供了可能。 1　材料与方法 1.1　材料与仪器　供试材料:A BA 2BAS 抗血清、C DI 2BS A 抗 血清(江苏省苏微微生物研究所提供);氯金酸(上海化学试剂厂),950m l/L 盐酸四环素标准品(T C.HC l )(购于中国药品生物制品检定所);丁二酸酐、N2氯丁二酰亚胺(NCS )、水合肼、碳二亚胺盐酸盐E DC (S igma 公司);0.01m ol/L 羊抗鼠二抗P BS 缓冲液,pH 7.4,所用水均为无锡华晶公司超纯水;牛血清白蛋白BS A 、卵清蛋白OV A (华美公司);四环素多克隆抗体(实验室自制),纤维膜,金标垫,样品吸收垫,吸水纸。 供试仪器:UV22100紫外扫描仪(北京瑞利公司产品),磁力搅拌器(IK A 公司),冷冻离心机5840R (eppend orf 德国);微 量移液器PIPET M AN (G I LS ON 法国),DE LT A 2320pH 计(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司),H 21微型混合器(上海沪西仪器厂)。 1.2　方法 1.2.1　四环素完全抗原的合成[2-5]。 (1)称取20mg A BA ,溶解于2.2m l 浓度0.2m ol/L HC l 溶 液中。避光条件下缓慢滴加3.5m l 0.49m ol/L 亚硝酸钠水溶液,4℃下恒速搅拌1h 。 (2)称取27mg 四环素,溶解于10m l 0.05m ol/L 的硼酸 钠溶液(pH 值8.5,溶有0.15m ol/L 的氯化钠)中。向其中缓慢滴加1.5m l 制备好的重氮化A BA 溶液。4℃下避光反应2 h ,用H 3BO 3溶液将pH 值调至7.4。 (3)称取120mg E DC 、36mg NHS 和100mg OV A ,加入上 述反应液中,室温下恒速搅拌3h 。 (4)将上述反应液转移到透析袋中,以0.01m ol/L 磷酸 缓冲液透析3d ,每天换透析液3次,冷冻干燥,所得粉末保存于-20℃冰箱中备用[9]。 1.2.2　胶体金溶胶的合成[6]。取50.0m l 氯金酸溶液(1.0×10-4g/m l )置于250m l 的锥形瓶中,在磁力搅拌的同时加热至 沸腾,沸腾后迅速加入柠檬酸钠水溶液(浓度为0.01g/m l ) 1.50m l ,继续保持沸腾至溶液为清亮橘红色时停止加热,继 续搅拌1m in 停止。用紫外-可见光分光光度仪对金溶胶在紫外-可见光范围内(200～700nm )进行扫描,获得金溶胶紫外-可见光吸收光谱,测定最大吸收波长、吸光值和峰宽。 1.2.3　胶体金溶胶标记四环素抗体探针的制备[7]。用Na 2C O 3溶液将金溶胶液体pH 调至9.00,取20.0m l 2.4×10-5m ol/L 的金溶胶溶液,磁力搅拌的同时,缓慢滴加10 μg/m l 多克隆抗体溶液2.0m l ,静置1h 后,在4℃7500r/m in 安徽农业科学,Journal of Anhui Agri.Sci.2008,36(27):11637-11639 责任编辑　李占东　责任校对　傅真治

试剂溶解方法

试剂溶解方法(供参考) 试剂名称 溶解方法 ABA 脱落酸 溶于碳酸氢钠水溶液、氯仿、丙酮、乙酸乙酯和乙醚，微溶于苯和水。 ACES 该品0.1ml/L水溶液（20℃），PH值为3.0－4.5 丫啶橙 溶于水和乙醇。水溶液带橙黄色荧光。PH值8.4－10.4（由无色至黄绿色） 丙烯酰胺 无色透明片状结晶。溶于水、乙醇、丙酮、乙醚和三氯甲烷，微溶于甲苯，不溶于苯和庚烷。 腺苷 溶于水，微溶于乙醇和乙醚。 ADP Na2 5′-二磷酸腺苷二钠 溶于水。 琼脂 缓溶于热水成湖状，呈中性。不溶于冷水和乙醇。 琼脂糖 溶于热水，遇冷凝结成胶 L-丙氨酸 溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚和丙酮。 卵清白蛋白 溶于水和缓冲液 BSA V 牛血清白蛋白V 溶于水、氯化钠溶液及缓冲液后，成澄清溶液。 过硫酸铵 溶于水，但能缓慢水解并生成过氧化氢，热至120℃开始分解。 苦杏苷 味苦，溶于水和乙醇，不溶于乙醚。

AMV反转录酶 溶于PH缓冲液中，一般试剂1ul含有10－100单位。 α-淀粉酶 溶于水 L-精氨酸 易溶于水，不溶于乙醇和乙醚。 L-精氨酸盐酸盐 溶于水，微溶于乙醇。 抗坏血酸（维生素C） 溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚、苯、三氯甲烷和石蜡醚等。 L-天门冬酰胺 无色或白色晶体。溶于酸和碱溶液，不溶于乙醇、乙醚和苯。 L-天门冬氨酸 溶于热水和稀酸，不溶于乙醇。 ATP Na2 溶于水。 BCIP 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸 BCIP的钠盐用水溶，BCIP游离酸用DMSO溶。 6-BA 6-苄氨基嘌呤 溶于稀碱、稀酸溶液，不溶于乙醇。 BES 溶于水。 生物素 较易溶于热水和稀碱溶液，水溶液极易生长霉菌。 Bis-Tris 溶于水。 溴酚蓝 溶于乙醇、乙醚、苯和稀碱溶液，微溶于水。 CAPS 溶于水。

硝酸盐的测定

硝酸盐 硝酸盐是由硝酸衍生的化合物的总称。硝酸盐是离子化合物，含有硝酸根离子NO3—和另一正离子，如硝酸铵中的NH4+离子。由金属离子和硝酸根离子组成的化合物，重要的有：硝酸钠、硝酸钾、硝酸铵、硝酸钙、硝酸铅、硝酸铈等。如：AgNO3（银离子和硝酸根离子），Zn(NO3)2（锌离子和硝酸根离子）……都是硝酸盐。NaNO3（钠离子和硝酸根离子）只是“硝酸盐”的一种。硝酸盐极易溶于水，所以溶液中硝酸根不与其他阳离子反应。 硝酸盐测定方法的比较： 表1 水中硝酸盐测定方法的比较 酚二磺酸分光光度法 1、试剂 （1）酚二磺酸：称25g苯酚置于500mL锥形瓶中，加150mL浓硫酸使之溶解，再加75mL发烟硫酸（含13%三氧化硫）。充分混合。瓶口插一小漏斗，小心置瓶于沸水中加热2h，得淡棕色稠液，贮于棕色瓶中，密塞保存。

（2）硝酸盐氮标准贮备溶液：称取0.7218g经105—110℃干燥后的硝酸钾（KNO3）溶于水中，移入1000mL容量瓶，稀释至标线，混匀。加2mL三氯甲烷作保存剂，至少可稳定6个月。每毫升该标准储备液含0.1000mg硝酸盐氮。（3）硝酸盐氮标准使用溶液（10mg/L）：吸取50.0mL硝酸盐氮标准贮备液，置蒸发皿内，加0.1mol/L氢氧化钠溶液使调至pH=8，在水浴上蒸发至干。加入少量水，移入500mL容量瓶中，稀释至标线，混匀。贮于棕色瓶中，此溶液至少稳定6个月。（注：本标准溶液应同时制备两份，用以检查硝化完全与否。如发现浓度存在差异时，应重新吸取标准贮备液进行制备。） （4）硫酸银溶液：1.00g/L （5）氢氧化铝悬浮液：将125g硫酸铝[KAl(SO4)2·12H2O]或硫酸铝铵[NH4Al(SO4)2·12H2O]溶于1000mL蒸馏水，加热至60℃，然后边搅拌边加入55mL氨水。放置约1h后，移至大瓶中，反复洗涤沉淀物，直至洗涤液中不含氯离子为止。 2、采样 水样中硝酸盐的测定，应在采样后尽快进行。如不能及时测定，为了抑制微生物活动的影响，应于每升水样中加入0.8mL浓硫酸，并于4℃保存。测定前用氢氧化钠中和。 3、测定步骤 （1）标准曲线的绘制：分别吸取一组硝酸盐氮标准使用液与一组50mL比色管中，用以配制系列标准溶液，将各比色管加入至约40mL，加3mL氨水使呈碱性，稀释至标线，混匀。在波长410nm处，以水为参比，测量吸光度。 将上述测得的吸光度减去空白后，绘制吸光度对硝酸盐氮的标准曲线。 （2）水样的预处理：水样混浊或带色时，可取100mL水样将其加2mL氢氧化铝悬浮液震荡，静置，过滤，弃去20mL初滤液。 水样中含有氯离子，则可用硫酸银沉淀后过滤去除。 水样中含有亚硝酸盐，则可先将亚硝酸盐氧化成硝酸盐，然后从硝酸盐氮的测定结果中减去亚硝酸盐氮的含量。 （3）样品的测定：取50.0mL经过预处理的水样于蒸发皿中，用pH试剂检查水样呈微碱性（pH=8），否则调节之；置水浴上蒸发至干。加1.0mL酚二磺酸，用玻璃棒研磨，使试剂与蒸发皿残渣充分接触，放置片刻，再研磨一次，放置

肺炎支原体抗体IgM金标检测试剂盒作业指导书

肺炎支原体抗体IgM金标检测试剂盒作业指导书

4.2.6.1 反应体组装程序： a) 在S6塑料基板上贴双面胶带S5（29，48mm）二条； b) 在S5上贴反应膜S1（20mm），S1上下缘距S6上下缘各29mm； c) 在S6上贴吸水纸S3（30mm），吸水纸下缘与S1上缘交接1mm,上缘与S5的上边 缘对齐； d) 在S5下端贴无纺布S2-1，其上缘压住S1下缘1mm； e) 在S2-1上平放金标抗体反应膜S4（10mm）上缘对齐； f) 在S4上平放无纺布S2-2（30mm）上下缘分别S4、S6对齐； g) 将组装成型的反应体系用电脑可调式切割机切成4.2mm测试条，装入干燥器，待包装。 4.2.6.2 成品包装：每支成品先装聚苯乙烯塑料外壳，再用镀铝膜包装加干燥剂，附说明书，打批号入库，每批留样100人份，以备复检．

4.2.7 参比品制备 4.2.7.1 肺支阳性血清质控品 取临床确诊肺支病人（临床症状明显、肺炎衣原体培养阳性）血清15份，间接ELISA测定肺炎支原体IgM抗体阳性，0D492≥0.3，混合血清加防腐剂,分装-70℃保存。 4.2.7.2 肺衣阴性血清质控品 取健康人血清（体查健康，培养法和间接ELISA测定肺炎支原体IgM抗体均阴性，0D492＜0.10）15份，混合血清加防腐剂,分装-70℃保存。 4.3 成品检测 产品技术要求应符合《肺炎支原体抗体IgM金标检测试剂盒》产品注册标要求。 4.3.1 外观 4.3.1.1 要求 a)检测条：表面应平整、无划伤、开裂、变形及污渍；检测卡各组分附着牢固、 内容齐全； b) 检测卡：外壳应平整，上下盖应均匀合拢，无明显间隙；反应芯试条在外壳内应附着 牢固； 4.3.1.2 检验 在自然光线下，用手感和目力观察方法进行检验。 4.3.2 符合率 4.3.2.1 阴性符合率

鼠疫快速检测试剂盒(胶体金法)

鼠疫快速检测试剂盒（胶体金法） 鼠疫概述： 鼠疫是由鼠疫杆菌（Yersinia pestis）引起一种自然疫源性的烈性传染病。因其传播速度快、传染性强、病死率高、社会危害性大,被我国法定为甲类传染病。鼠疫主要通过鼠蚤类传播，曾在历史上有过三次大暴发流行。其临床症状主要表现为发热、严重毒血症症状、淋巴结肿大、肺炎、出血倾向等；随着现代社会交通的发展，对鼠疫快速诊断，尽早发现控制其传播的速度有着重要的意义！ 产品简介： 鼠疫抗原快速检测试剂盒采用胶体金标记技术，应用膜层析双抗体夹心法原理检测组织样本中的鼠疫菌抗原。用于疑似鼠疫病例的辅助诊断及现场筛查。 性能特点： 1、特异性：本品与假结核杆菌、布氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、土拉菌、伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、变形杆菌的108/ml悬液及正常人血清、褐家鼠血清样品，无交叉反应。 2、最低检出量：用生理盐水配制鼠疫菌F1抗原，最低检出量为1ng/ml。 检测原理： 本试剂盒以鼠疫菌特异性抗体致敏硝酸纤维素膜和制备免疫胶体金探针，应用层析式双抗体夹心法原理，用于临床标本、污染物和环境中鼠疫菌抗原的检出，也可用于纯培养鼠疫菌的鉴定。临床标本中，淋巴液的检出率高于血清和尿液。 试剂盒组成： 1、鼠疫抗原快速检测板 2、样本稀释液 3、说明书 4、干燥剂 包装规格：10人份/盒，单人份独立包装。 储存条件：4-25℃避光保存，不得冻存。 有效日期：2年 生产企业：广州市标健生物科技有限公司 样本要求： 制备样品检测液 1、纯培养细菌：挑取疑似鼠疫菌单个菌落，于小试管中制成0.3ml生理盐水菌悬液作为样品检测液。 2、临床标本：取疑似鼠疫患者或病畜腹股沟淋巴结针刺吸出物、脑脊液、血、痰和尿液标本，或死亡动物肝脾研磨标本，加少量生理盐水(约0.3ml)充分振荡混均，自然沉降后取上清作为样品检测液。 3、环境中污染物：取疑似鼠疫菌污染的土壤、灰尘，或物体表面、动物皮毛的擦拭子，浸

亚硝酸盐的快速检测

食品中亚硝酸盐的快速检测 摘要 亚硝酸盐主要指亚硝酸钠，亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。国家食品标准对不同的食品的亚硝酸盐含量有不同的规定，食品中所含亚硝酸盐如果超过了国家标准，会对人体的健康产生威胁和危，本文通过对亚硝酸盐常规检测方法与快速检测方法的对比分析，可得知试纸法作为一种快速的检测方法。对指导生产及市场流通质量控制，保障食品安全具有一定的实际意义 关键词：亚硝酸盐；快速检测；方法；展望 A fast detection method of Nitrite in food Food Science and Engineering 2009 suzhaoling Supervisor Fu Man Abstract The nitrite points to nitrous acid sodium mainly , nitrous acid sodium is extremely V aseline white powder or granulate, taste is tiny salty , easy to dissolve in water the country food standards nitrite contents to different food regulation having diversity , food is hit by had contained a nitrite if exceeding national standard , health that can direct on the human body produces the threat and danger, The main body of a book is passed to routine nitrite detecting method and speedy detecting method comparative analysis , may be informed that test paper follows the detecting method being one kind of fleetness, The mass under the control of circulating to direction childbirth and the marketplace, ensures food safety having certain actual significance Keywords: Nitrite, The fleetness checks, Principle, Met, Look into the distance 1 前言 亚硝酸盐系剧毒物质，但对肉制品具有发色和防腐保鲜作用，在肉制品加

农药残留胶体金快速检测试纸

农药残留胶体金快速检测试纸介绍 国家十五重大科技专项“食品安全关键技术”农药残留胶体金免疫快速检测试纸课题成果国家十一五 、“食品安全综合示范一一蔬菜安全生产质量控制技术研究课题”科技成果 原理及产品介绍： 农药残留胶体金检测试纸是属于国际医学界普遍公认的POCT方法，美国国家临床生 化科学院（NACB ）在其制定的“ POCT循证文件”的草案中，将POCT定义为“在接近患者治疗处，由未接受临床试验室科学训练的临床人员或患者（自我监测、检测）进行的临床实验室检验。是一种操作简单快速的方法，监测结果与理化仪器一一色谱仪检测结果相一致或相近似。胶体金免疫快速诊断试纸其原理是利用单克隆抗体建立诊断系统，多克隆抗体建立对照系统。用胶体金标记单克隆抗体，多克隆抗体或免疫原建立一套装置系统。它是应用胶体化学、有机合成化学、免疫学、物理学和材料学的精华综合学科集一体的高科技，实现了复杂的原理与简单操作的统一。产品按国家GB2763-2005《食品中农药最大 残留限量》标准或国际农药残留限量标准设定Cutoff值，能半定量检测出最大限量标准值。 Cutoff值以上表现一条红线，为阳性，代表农药残留超标；Cutoff值以下表现两条红线， 代表农药不超标。适合于蔬菜种植者采摘上市前自行检测，作为农药不超标的把关手段。也适合有目的性的单一品种的抽检。 万华公司现有农药残留胶体金快速检测试纸19种（明细见下表），其中包含了杀虫剂、 杀菌剂和除草剂三大类。

自检。 【样品的前处理方法】 参照农药残留分析样品的采样方法（NY/T 789-2004 ）进行样品的采集、处理、贮存。 整体测定法：选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片（叶 类剪成宽度为1cm左右的样品，果菜类、块茎类取1-2mm厚度左右的表皮样品），取5? 50g放入带盖瓶中，加入等量的水，振摇50次，静置6min以上。 【检验方法】 条型： 撕开铝箔袋，取出检测试纸条。将试纸条MAX端浸入样品液中（液面不得超过MAX 线）,此时样本液在毛细管作用下向试纸条的另一端缓缓移行，将固相的金标抗体溶解并带动它向前移行。 1?5分钟观察结果，最长不超过5分钟。 板型： 撕开铝箔袋，取出检测板和塑料滴管，平放在桌面上。用吸管吸取样品液并滴2?3滴 于检测板的圆孔（S）中，此时样本液在毛细管作用下向试纸条的另一端缓缓移行，将固相的金标抗体溶解并带动它向前移行。

快速诊断试剂盒化学反应原理

快速检测试剂盒化学反应原理 1.硫氰酸钠：白色斜方晶系结晶或粉末，易溶于水、乙醇、丙酮等溶剂，水溶液呈中性， 遇铁盐生成血红色的硫氰化铁，遇亚铁盐不反应，与硫酸生成黄色的硫酸氰钠，与钴盐作用生成深蓝色的硫氰化钴，与银盐或铜盐作用生成白色的硫氰化银或黑色的硫氰化铜沉淀，在空气中易潮解。 2.液体石蜡：即矿物油，珍珠大米的检测方法：取大米于样品杯中一半体积，加入70℃以 上的热水至样品杯近满处，用洁净牙签轻轻搅动30秒以上，静置片刻使溶液温度降低到50℃以下(固体石蜡的熔点为50～65℃)，如果样品中掺有石蜡，液面上会出现细微的油珠，随着温度的降低和时间的延长液体石蜡的油珠会聚集加大，固体石蜡的油珠会结成白色片状物浮于液面上。 3.工业碱：一般指（碳酸钠）、工业烧碱（氢氧化钠）、工业重碱（碳酸氢钠）。碳酸钠也 被称为纯碱。碱性溶液遇到酚蓝试剂变成紫红色，碳酸钠与钙的可溶性盐生成沉淀，而氢氧化钠或者碳酸氢钠遇到钙的可溶性盐则不会发生沉淀。 4.甲醇：工业酒精，甲醇经氧化试剂氧化后形成甲醛，甲醛可与品红-亚硫酸作用生成蓝紫 色化合物。（氧化剂配制：高锰酸钾-磷酸溶液，混合后不容易保存，所以分开配制逐一添加。品红-亚硫酸溶液：混合后不易保存，同样是分开配制逐一添加。亚硫酸为亚硫酸钠与盐酸配制所得，可百度。） 5.甲醛：乙酰丙酮法原理是利用甲醛与乙酰丙酮及氨生成黄色化合物二乙酰基二氢卢剔啶 后，412nm下进行分光光度测定。此法最大的优点是操作简便，性能稳定，误差小，不受乙醛的干扰，有色溶液可稳定存在12hr；缺点是灵敏度较低，最低检出浓度为 0.25mg/L，仅适用于较高浓度甲醛的测定；方法缺点是反应较慢，需要约60min；SO2 对测定存在干扰(使用NaHSO3作为保护剂则可以消除)。变色酸法也称铬变酸法,甲醛在浓硫酸溶液中可与变色酸(1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸)作用形成紫色化合物。该法的优点是操作简便、快速灵敏；缺点是在浓硫酸介质中进行，不易控制，且醛类、烯类化合物及NO2等对测定有干扰。酚试剂法原理是甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物，颜色深浅与甲醛含量成。正比副品红法原理是在甲醛存在下，亚硫酸根离子与副品红生成紫色络合物，其最大吸收峰在570nm处，检测限为50μg/L。本法的优点是简便灵敏，其它醛和酚不干扰测定；缺点是褪色快，灵敏度不高，易受温度影响，使用了有毒的汞试剂。AHMT法原理是甲醛与4-氨基-3-联氨-5-巯基-1，2，3－三氮杂茂（AHMT）在碱性条件下缩合,然后经高碘酸钾氧化成6- 基-5-三氮杂茂[4,3-b]-S-四氮杂苯紫红色化合物,比色定量。该方法优点是抗干扰能力强，对乙酰丙酮法、MBTH法及副品红法干扰严重的六胺对此测定方法无干扰，因此，该法是测定树脂交联过程释放甲醛的有效方法；灵敏度较高，最低检出限为0.01mg/m3，较适宜与一般情况下室内空气的检测；缺点是颜色随时间逐渐加深，要求标准溶液的显色反应和样品溶液的显色反应时间必须严格统一，在显色体系最大吸收波长550nm测定，Co2+、Cu2+干扰测定。溴酸钾－次甲基蓝法原理是在酸性介质中，甲醛可促进溴酸钾氧化次甲基蓝反应，降低体系吸光度的特点来快速测定甲醛含量。次甲基蓝在665nm处有最大吸收峰，在H2SO4介质中加入KBrO3能使其吸收峰微降，而再加入甲醛后，其吸光度会显著下降，△A降低与甲醛浓度成正比。银－Ferrozine法原理为水合氧化银能氧化甲醛并被还原为Ag，产生的Ag与Fe3+定量反应生成Fe2+，Fe2+与菲洛嗪（Ferrozine）形成有色配合物 6.溴酸钾：见附页。 7.硫酸镁：络合滴定法取供试品适量，加水溶解，以铬黑T为指示剂，用乙二胺四醋酸钠 滴定液（0.05mol/L)滴定至溶液自紫红色转变为纯蓝色。每1mL乙二胺四醋酸钠滴定液

心脏型脂肪酸结合蛋白h-FABP胶体金快速检测试剂盒使用说明书

心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)胶体金快速检测试剂盒 使用说明书 (仅供专业人员体外诊断使用) 用途 心脏型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）检测试剂盒是应用免疫胶体金层析技术建立的快速、特异、操作简便的一步法定性检测方法，用于定性检测人血清或血浆中的心脏型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）。可用于急性心肌梗塞（AMI）的辅助诊断。 简介 用于早期诊断急性心肌梗塞（AMI, Acute Myocardial infarction）的指标主要有肌酸激酶异构酶(CK-MB)、肌钙蛋白I（Troponin I）、肌钙蛋白T（Troponin T）和肌红蛋白（Myoglobin）等，但它们对于早期诊断AMI却很不理想，主要原因是：CK-MB、肌钙蛋白I、肌钙蛋白T缺乏敏感性，它们在胸痛后6-8小时才浓度上升；而肌红蛋白则缺乏特异性，它虽然在胸痛后2-3小时浓度上升，但不能区分骨骼肌和心肌损伤。 而心脏型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）则克服了以上两缺点，对于早期诊断AMI具有特异性和敏感性，它是15KD的小分子，动力学特征类似于肌红蛋白，即在胸痛后2-3小时后浓度开始上升，在12-24小时内恢复到正常水平，在4-8小时内达到最高值；而且h-FABP的免疫性不同于其它类型的FABP（如小肠型FABP 和肝脏型FABP），具有特异性，不会发生交叉反应。基于h-FABP以上特点使得其成为理想的AMI早期诊断生化指标。

检测原理 心脏型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）检测试剂盒是采用固相免疫胶体金层析技术，利用双抗体夹心法定性检测人血清或血浆中的h-FABP。 人血清或血浆扩散通过附着红色颗粒包被的抗体的滤膜，与滤膜中的包被抗体结合，在检测线（T）区域内，h-FABP－抗体复合物开始与包被在检测线区内的抗体接触，如果血清h-FABP浓度大于10ng/ml，在检测线区h-FABP－抗体复合物被抗-h-FABP的抗体捕获，并出现一条可见的红色条带。h-FABP浓度越高，检测线区出现色带的速度越快，色带越深。彩色颗粒包被的抗体扩散到质控线（C）区域被第二抗体捕获形成质控区红色带。 保存条件和有效期 铝箔袋包装, 4－25℃储存，切勿冷冻, 有效期1年。 试剂盒组成 每盒包装中含：单人份检测卡25包，使用说明书1份。 注意事项

犬瘟热金标快速检测试纸条(CDV-Ag)

犬瘟热金标快速检测试纸条（CDV-Ag） 简介 犬瘟热，俗称狗瘟，是由犬瘟热病毒引起的一种烈性传染病。临床特征为双相热型、消化道、呼吸道炎症，眼、鼻流出脓样分泌物，少数病例可发生非化脓性脑炎。多发生于3-6个月龄幼犬，青年犬也有感染，潜伏期为3-6天。病毒单独感染症状轻微，若继发细菌感染症状加重，病死率较高。 检测原理 本试纸为免疫层析法对病毒进行双抗体夹心检测。检测样品为眼部及结膜分泌物，鼻液，唾液。产品组分 1．20份CDV Ag 试纸卡 2．20份样品稀释液 3．20份消毒棉签 4．一份产品说明书 保存及有效期限 室温保存，不可冷冻。生产日期起18个月有效。 样品收集及准备 1、用生理盐水沾湿的棉签收集狗眼部及结膜分泌物，鼻液，唾液； 2、采集样品时注意多部位同时收集新鲜及有效样品，充分在试管中搅拌稀释；； 3、静置5分钟，用一次性滴管取上清液； 4、样品一般须当即进行检测，否则应冷藏保存，超过24小时的，应该冷冻保存。 检测步骤 1、试纸条恢复室温； 2、取出试纸，开封后平放在桌面，从滴管中缓慢而准确地逐滴加入3-5滴混合液。 3、加样品液后，红色的液体从靠样品孔的观察窗边缘涌出，朝另一方向流动。 4、5-10分钟后判断结果。 结果判定 阳性（+）：当位置C显示出红色线条，而位置T同时显示出红色线条时，判为阳性。 阴性（-）：当位置C显示出红色线条，而位置T不显色时，判为阴性。 无效：当位置C不显示出红色线条，则无论位置T显示出红色线条与否，该试剂盒判为无效。 阳性阴性 注意事项 1．仅用作体外诊断。 2．注意样品具有潜在传染性，注意防止交叉感染。 3．该试纸及配套试管、棉签均为一次性产品，不可交叉及重复使用。 4．包装袋破损或产品过期请勿使用。

肝吸虫抗体快速检测试剂盒(胶体金法)

肝吸虫抗体快速检测试剂盒（胶体金法） 肝吸虫概述： 华枝睾吸虫简称肝吸虫，成虫寄生于人体的肝胆管内，主要引起患者的肝脏受损。人体感染肝吸虫病主要因为生食或半生食含有肝吸虫囊蚴的淡水鱼虾所导致的，当人体感染肝吸虫病后，机体会产生特异性抗体，通过肝吸虫血清抗体快速检测对该病的辅助诊断和流行病学的监测有着重要的意义！ 产品简介： 肝吸虫快速检测试剂盒采有金标渗滤式间接法定性检测试验血清中的肝吸虫抗体IgM/IgG，适用于疑似肝吸虫病的大量人群进行快速筛查。 检测原理： 本试剂盒利用斑点免疫金渗滤技术，将肝吸虫纯化抗原预先包被在固相载体硝酸纤维素薄膜上，待检测时，将预先处理好的样本血清滴加在加样孔中，通过渗滤使抗体和抗原在膜上发生特异性免疫结合反应，形成抗原抗体复合物。然后滴加红色胶体金标记的第二抗体（显色液），与复合物中对应的的抗体结合，则形成肉眼可读取的检测结果。 试剂盒组成： 1、肝吸虫快速检测板（含预先包被的肝吸虫纯化抗原） 2、试剂A（洗涤液1瓶，0.02moI/L PH7.4PBS） 3、试剂B（显色液1瓶，含胶体金标记物） 4、原版说明书1份 包装规格：24T/盒，单人份独立包装 检测样本：只限血清 储存条件：原试剂盒包装于2-8℃密封避光保存 有效日期：18个月 生产企业：广州市标健生物科技有限公司 样本要示： 样本只限血清，建议最好采用新鲜血清标本，若是陈旧血清或高血脂血清恐影响检测效果。 检验方法： 1、将试剂盒取出，和样本一起恢复室温25℃左右。 2、拆开试剂包装，将检测板水平放于工作台。 3、在反应孔中间垂直加入2滴（试剂A），待液体完全渗透。 4、在反应孔正中央垂直加入50ul待检血清，待血清完全渗透。 5、加入4滴显色液（试剂B），待液体完全渗透。 6、加入2滴（试剂A），待液体完全渗透，观察结果。 检测结果的解释： 阳性结果：检测板的C端出现红色线条，T端也出现红色线条，表明肝吸虫IgM抗体阳性。阴性结果：检测板的C端出现红色线条，T端不出现红色线条，表明肝吸虫IgM抗体阴性。

(KJ201704)食品中亚硝酸盐的快速检测盐酸萘乙二胺法

附件4 食品中亚硝酸盐的快速检测 盐酸萘乙二胺法（KJ201704） 1范围 本方法规定了食品中亚硝酸盐的快速检测方法。 本方法适用于肉及肉制品（餐饮食品）中亚硝酸盐的快速测定。 2原理 样品中的亚硝酸盐经提取后，在弱酸性条件下与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺反应生成紫红色偶氮化合物，其颜色的深浅在一定范围内与亚硝酸盐含量成正相关，通过色阶卡进行目视比色，对样品中亚硝酸盐进行定性判定。 3试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。 3.1试剂 3.1.1对氨基苯磺酸。 3.1.2盐酸萘乙二胺。 3.1.3盐酸。 3.1.4盐酸（20%）：量取20mL盐酸，用水稀释至100mL。 3.1.5对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL20%盐酸中，混匀，置棕色瓶中，临用新制。 3.1.6盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶解于100mL水中，混匀，置棕色瓶中，临用新制。 3.2参考物质 亚硝酸钠参考物质中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥99%。 表1亚硝酸钠中文名称、英文名称、CAS登记号、分子式、相对分子质量 3.3标准溶液配制 亚硝酸钠标准工作液（200μg/mL，以亚硝酸钠计）：精密称取适量经110℃—120℃干燥恒重的亚硝酸钠参考物质（3.2），加水溶解，移入250mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。 3.4材料

亚硝酸盐快速检测试剂盒：适用基质为肉及肉制品，需在阴凉、干燥、避光条件下保存。 4仪器和设备 4.1移液器：200μL，1mL。 4.2涡旋混合器或超声仪。 4.3电子天平或手持式天平：感量为0.01g和0.0001g。 4.4离心机。 4.5微孔滤膜：0.45μm（水系）。 5分析步骤 5.1试样制备 取适量有代表性样品的可食部分，充分粉碎混匀。 5.2试样的提取 准确称取试样1g（精确至0.01g），置于离心管中，准确加水10mL，超声或涡旋振荡提取5min，静置10min。准确吸取1mL上清液（如样品浑浊，≥3000r/min离心5min取上清液，或经微孔滤膜过滤后取续滤液）于检测管中，向检测管中滴加对氨基苯磺酸溶液200μL，混匀静置1min，再加入盐酸萘乙二胺溶液100μL，混匀静置5min，即得待测液。 5.3测定步骤 将待测液与标准色阶卡目视比色，10min内判读结果。进行平行试验，两次测定结果应一致，即显色结果无肉眼可辨识差异。 5.4质控试验 每批样品应同时进行空白试验和质控样品试验（或加标质控试验）。用色阶卡和质控试验同时对检测结果进行控制。 5.4.1空白试验 称取空白样品，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。 5.4.2质控样品试验（或加标质控试验） 亚硝酸盐质控样品：采用典型样品基质或相似样品基质按照实际生产工艺生产的，含有一定量亚硝酸盐，并可稳定保存的样品。经参比方法确认的质控样品中亚硝酸盐含量（以亚硝酸钠计）应包括但不限于10mg/kg。 加标质控样品：准确称取空白试样1g（精确至0.01g），置于离心管中，加入适量亚硝酸钠标准工作液（200μg/mL）（3.3）使样品中亚硝酸钠含量为10mg/kg。 质控样品（或加标质控样品）按5.2和5.3步骤与样品同法操作。 6结果判定要求 观察检测管中样液颜色，与标准色阶卡比较判读样品中亚硝酸盐（以亚硝酸钠计）的含量。颜色浅于检出限（1mg/kg）则为阴性样品；颜色深于10mg/kg则为阳性样品。色阶卡见图1。 注：1.颜色接近或深于1mg/kg，但浅于或接近10mg/kg时，则考虑本底污染或带入所