血细胞计数实验报告

血细胞计数实验报告
血细胞计数实验报告

实验结果及分析

图一:血涂片制作观察图(一)血细胞计数

表一:血细胞统计计数表

样液中红细胞的数量为:181X50X200X10^6=1.81X10^12个/L

样液中白细胞的数量为:162/4X10X20X10^6=8.1X10^9个/L

(二)血涂片的制作(如上图)

实验分析

(一)血红细胞计数,计数室每个中方格容积为0.2X0.2X0.1=0.004uL,共计5个中方格中血红细胞数,容积为0.004X5=0.02ul,红细胞总数乘以50即为1ul血液的血红细胞数,稀释倍数为200倍,所以一升血中红细胞数为1ul血液血红细胞数乘以稀释倍数再乘以10^6。

白细胞计数,计数室一个大方格容积为0.1X0.1X1=0.1uL,共计4个大方格中白细胞的平均数,乘以10即为1ul血液的白细胞数,稀释倍数为20倍,所以一升血中白细胞数为1ul血液血白细胞数乘以稀释倍数再乘以10^6。(二)鸡血图片观察:可看到不同形态细胞被染成蓝紫色、紫红色。白细胞较少,实验比较成功。

注意事项

1.保证计数板、载玻片、盖玻片的清洁,以防影响最后实验结果的准确性。

2.一次性完成充池。如充池过多或者过少,有气泡以及出现任何碎片应该重新操作。

3.但凡压线的细胞,应该遵从数上不数下,数左不数右的计数原则。

4.血涂片制作要求厚薄均匀,注意涂片的量以及时间。

生理实验报告2红细胞计数

红细胞计数 一、实验目的: 学习、掌握应用稀释法计数红细胞的方法 二、实验原理: 1.血液中血细胞数很多,直接计数有一定难度,需要将血液稀释到一定倍数,然后用血细胞计数板计数。 2.在显微镜下计数一定容积的稀释血液中的红细胞,之后需要将其换算成每升血液中所含的红细胞数。 三、实验用品: 器具:显微镜、血细胞计数板、小试管、采血管、1mL和5mL移液管、玻璃棒、刺血针、干棉球 试剂:哺乳动物红细胞稀释液、蒸馏水、75%酒精 四、实验方法与步骤: 1.采血 2.稀释:用移液管取10微升血液,加至2mL红细胞稀释液中3.充池:将盖玻片的一边与计数池的纵线末端接触,然后缓慢放下,使盖玻片平放在计数室两侧的隆起上,醮少许红细胞稀释液靠近盖玻片乾元,靠毛细管作用将稀释液冲入计数池,于高倍镜下观察红细胞分布情况 4.静置计数板2~3min 待经红细胞下沉后,大方格四角以及中央取5个4×4中方格红细胞数,用高倍镜或低倍镜计数

5.计数,计算 注意事项: 1.保证计数板和盖玻片清洁;以防影响计数结果的准确性。 2.一次完成充池,如充池过少、过多、有气泡或出现任何碎片,应拭净计数板及盖玻片后重新操作。 3.充池后平放计数板,不能移动盖玻片。 4.计数板中细胞如果严重分布不均,应重新充池计数。 5.凡压线的细胞应按照数上不数下、数左不数右的原则,避免漏数或重复计数。 五、实验结果观察与记录以及分析: 1.结果计算:(53+113+76+60+64)/5=73.2 每16格平均73.2个红细胞,红细胞数: 73.2×25×200×10×1000000=3.66×10的12次方个/升 2.显微镜下图片 ①空白计数板: 低倍镜:

微生物的计数——血球计数板法

微生物得计数——血球计数板法 【摘要】测定微生物细胞数量得方法很多,有分光光度法、显微直接计数法与平板计数法。分光光度法比较简便,易操作,但就是会使数据严重偏大。而平板计数法则会使实验数据严重偏小.?显微计数法适用于各种含单细胞菌体得纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,常不易分辨.菌体较大得酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(PetrofHausser)细菌计数板。两种计数板得原理与部件相同,只就是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不能使用油镜,计数板下部得细菌不易瞧清.本实验采用血球计数板法,主要目得就是了解血球计数板法得构造与使用方法,学会用血球计数板对酵母菌细胞进行计数。 一、实验目得与要求 1、了解微生物计数常用得三种方法:分光光度法;平板计数法;血球计数板法。 2、了解血球计数板得构造与使用方法。 3、学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。 二、基本原理 利用血球计数板在显微镜下直接计数,就是一种常用得微生物计数方法。此法得优点就是直观、快速.将经过适当稀释得菌悬液(或孢子悬液)放在血球计数板载玻片与盖玻片之间得计数室中,在显微镜下进行计数。由于计数室得容积就是一定得(0、1mm2),所以可以根据在显微镜下观察到得微生物数目来换算成单位体积内得微生物总数目。由于此法计得得就是活菌体与死菌体得总与,故又称为总菌计数法. 血球计数板,通常就是一块特制得载玻片,其上由四条槽构成三个平台。中间得平台又被一短横槽隔成两半,每一边得平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分九个大方格,中间得大方格即为计数室,微生物得计数就在计数室中进行。 计数室得刻度一般有两种规格,一种就是一个大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格;另一种就是一个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。但无论就是哪种规格得计数板,每一个大方格中

实验—血球计数板的使用

一、血球计数板的使用原理 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数,然后推算出含菌数的一种方法。血球计数板是常用的计菌器之一。 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室。这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其容积为0.1mm3,即1mm×1mm×0.1mm方格的计数板;大方格的长和宽各2mm,深度为0.1mm,其容积为0.4mm3,即 2mm×2mm×0.1mm方格的计数板。在血球计数板上,刻有一些符号和数字,其含义是:XB-K-25为计数板的型号和规格,表示此计数板分25个中格;0.1mm 为盖上盖玻片后计数室的高;1/400mm2表示计数室面积是1mm2,分400个小格,每小格面积是1/400 mm2。

计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是25×16型,即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。 1.16×25型的计数板将计数室放大,可见它含16中格,一般取四角:1、4、13、16四个中方格(100个小方格)计数。将每一中格放大,可见25个小格。计数重复3次,取其平均值。计数完毕后,依下列公式计算:酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/100 ×400×10000×稀 释倍数

血球计数板法测水样细菌数量实验报告

血球计数板法测水样细菌数量实验报告 周畅 一、实验目的 1.为了巩固显微镜使用操作 2.学习血球计数板的使用 3.估计1ml污水水样溶入100ml水中后,1ml水中所含有的细菌 数量 二、实验原理 血球计数板:是一块特制的载玻片,其上表面中央部分由四条槽分成三个平台。中间平台又被一短槽一分为二,每边各有一个方格网,每个方格网有九个大小相等的大方格,中间的一个大方格即计数室,就是计数微生物或细胞的部位。

计数室刻度一般有两种规格: A、大方格分成16个中方格,而中方格又分成25个小方格的一 种 (图上) B、大方格分成25个中方格,而中方格又分成16个小方格的一种(图上)。 但两种规格的计数板均有400个(16×25 或25×16)小方格。 计数室容积一定,将待测标本的均匀悬液放在计数室中并在显微镜下计数,就可算出单位体积内的微生物总数目。 计数室容积为1×1×0.1=0.1mm3=10-4ml 计数公式: 1ml悬液中的微生物总数(个) = A×B×n×104 A为每个中方格中的微生物数平均值,B为稀释倍数,n为每大方格中的中方格数。 三、实验器材 1台显微镜、1块血球计数板、1ml的污水水样、滴管、盖玻片数块、吸水纸。 四、实验步骤

(1)称取1ml污水加入100ml的水中,配制成溶液。 (2)镜检、加样前,先要检查计数室内有无污物,若有则需清洗后烘干使用。 (3)加样、血球计数板上盖上清洁干燥的盖玻片,用无菌的细口滴管将稀释的微生物悬液从盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多)。这样通过毛细渗透作用液体可沿缝隙进入计数室,注意要使计数室中不产生气泡并且充盈稀释液。 (4)计数、将计数板置于载物台上静置5分钟左右,先用低倍镜找到计数室,然后换上高倍物镜。分别计数任意5个中方格内的微生物数(最好选4个角和中央的方格)。位于格线上的菌体或微生物一般只数上线和右线上的或下线和左线上的。要计数两个计数室求平均值。 (5)重复以上操作5次记录下5次计数的5个区域内的各族数据,并求其平均值。 (6)清洗、一般用水冲洗血球计数板,切勿用硬物洗刷,以免磨损计数室。洗完后要烘干或晾干。镜检,直至干净。 五、实验数据记录

微生物大小与数量的测定实验报告

山东大学实验报告2017年11月27日 ________________________________________ _________________________ 科目:微生物学实验题目:微生物大小与数量的测定姓名:丁志康 一、目的要求 1.学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法。 2.增强微生物细胞大小的感性认识。 3. 明确血细胞计数板计数的原理。 4. 掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。 二、基本原理 一)微生物大小的测定 1.微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一。微生物 大小的测定,需要在显微镜下,借助于特殊的测量工具——测微尺,包括目镜测 微尺和镜台测微尺。 2.镜台测微尺是中央部分可有精确等分线的载玻片,一般是将1mm等分为100格每 格长0.01mm(即10μm)。镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小,而是用于 矫正目镜测微尺每格的相对长度。 3.目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片,其中央有精确的等分刻度,有 等分为50小格和100小格两种。测量时,需将其放在接目镜中的隔板上,用以 测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大 倍数不同,目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不一样。因此,用目镜测微尺 测量微生物大小时,必须先用镜台测微尺进行校正,以求出该显微镜在一定大放 大倍数的目镜和物镜下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。然后根据微生物 细胞相当于目镜测微尺的格数,即可计算出细胞的实际大小。 4.球菌用直径来表示其大小;杆菌则用宽和长的范围来表示。如金黄色葡萄球菌直 径约为0.8μm,枯草芽孢杆菌大小为0.7~0.8×2~3μm。 二)微生物数量的测定 1.微生物数量的测定有多种方法,本次试验中使用显微镜直接计数法。显微镜直接 计数法是将少量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻 片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前 国内外常用的计菌器有:血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器以及Hawksley 计菌器等,它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数,基本原理相同。 后两种计菌器由于盖上盖玻片后,总容积为0.02mm3,而且盖玻片和载波片之间 的距离只有0.02mm,因此可用油浸物镜对细菌等较小的细胞进行观察和计数。(除 了用这些计菌器外,还有在显微镜下直接观察涂片面积与视野面积之比的估算法, 此法一般用于牛乳的细菌学检查。)显微镜直接计数法的优点是直观、快速、操

红白细胞计数实验报告

《实验诊断学》实验报告 实验一红细胞、白细胞计数 实验原理 一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后,充入血细胞计数池中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数。用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞,混匀后充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的白细胞数。根据稀释倍数和计数的容积,换算求得每升血液中的红细胞数量以及白细胞数量。 实验内容与步骤 实验材料: 显微镜、微量吸管、毛细吸管、改良Neubauer计数板、盖玻片、小试管、RBC稀释液、WBC 稀释液、正常人的全血、纱布 实验步骤: 1、红细胞计数准备: 加稀释液,用微量吸管吸取RBC稀释液蒸馏水2.0 ml加到小试管内。 取血,毛细吸管取血10 μl。 用纱布擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2-3次,立即混匀。 2、白细胞计数准备: WBC稀释液: 冰醋酸3.0 mL(破坏红细胞) 蒸馏水97.0 mL 亚甲蓝(染色) 小试管加WBC稀释液0.38 mL。 采血,微量吸管取血20 μL。 擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2-3次,立即混匀。 充池、观察: 将计数板及盖玻片檫净,将盖玻片覆盖在计数板上。 用滴管吸取混均的红细胞悬液充入上方计数室,静置3-5 min,高倍镜下计数;白细胞悬液充入下方计数室,静置2-3 min,低倍镜下计数。 观察计数,红细胞,高倍镜下计数中央大方格内四角的4个中方格和正中的1个中方格的红细胞,压线细胞的计数按照数上不数下,数左不数右的原则。计数时按照弓形的计数方式,以免漏数或多数。 用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。 实验结果 1、红细胞计数实验结果: 5个中方格内RBC的计数/个=24+27+32+22+25 根据计算公式: RBC/L=5个中方格内RBC数×5×10×200×106 =5个中方格内RBC数/100×1012 推算得出RBC:1.3×1012/L 正常人群的红细胞计数参考区间: 人群红细胞计数(×1012/L)

细胞数的测定(血球计数板的使用方法)

、目的与要求了解血球计数板计数的原理,学会测定细胞总数方法。 二、原理 用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。血球计数板是一块特制的厚载玻 片,其上由四条槽构 成三个平台,中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分为9个大方格,中间的大方格即为计数室。计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成16个中方格,每个中方格又分成25个小格(即16x25),另一种是一个大方格分成25个中方格,每个中方格又分为16个小方格(即25X 16),但无论是哪一种规格的计数板,每一个大方格中的小方格都是400个,每一个大方格边长为 1 mm则每一个大方格的面积为 1 mm2,盖上盖玻片后,盖玻片 与载玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1 mm3 实磴圈-石血球计弦板杓构jfi 三、血球计数板的使用方法 (一)菌悬液的制备为便于计数,对样品进行适当稀释,稀释程度以每小格内含5?10个酵母为 宜,可采用10倍系列稀释法。 (二)加菌悬液样品将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌的毛细滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴,让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室,用吸水纸吸去多余水液。由盖玻 片边缘或槽内加入计数板来回推压盖玻片,使其紧贴在计数板上,计数室内不能有气泡。静置5-10分钟。 (三)显微镜计数在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数,上下调动细螺旋,以便看到小室内不同深度的菌体。位于分格线上的菌体,只数两条边上的,其余两边不计数。如数上线就不数下线,数左边线就不数右边线。当芽抱菌体达到母细胞大小的二分之一时,可记作两个细胞。 (四)计数时若使用刻度为25X 16 (大格)的计数板,则数四角的4个大格(即100小格)内的菌数。如用刻 细胞数的测定 D申決甌裕牧我

红细胞计数、白细胞计数实验报告

一.实验原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数量。用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血红细胞计数板,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。 二.实验内容与步骤 1、红细胞计数 (1)器材:显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板 (2)试剂:RBC稀释液①Hayem 稀释液:NaCl, Na2SO4,HgCl2 ②枸橼酸钠甲醛盐水溶液:枸橼酸钠,甲醛,NaCl ③生理盐水或含1%甲醛的生理盐水:仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用 (3)标本:外周血或抗凝血(EDTA抗凝) (4)操作步骤:①小试管加RBC稀释液2.0 ml。 ②采血,取血10 μl。 ③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~3次,立 即混匀。 ④混匀后充入计数室,静置3~5 min,高倍镜下计数(用高 倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细

胞数。) 2、白细胞计数 (1)器材:显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板 (2)试剂:WBC稀释液:冰醋酸3.0 mL(破坏红细胞);蒸馏水97.0 mL;亚甲蓝(染色) (3)标本:新鲜全血或末稍血 (4)操作步骤:①小试管加WBC稀释液0.38 mL。 ②采血,微量吸管取血20 μL。 ③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~3次,立 即混匀。 ④混匀后充入计数室,静置2~3 min,低倍镜下计数(用低 倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。) 三.实验结果 表一红细胞计数表 RBC/L=405/100×1012=4.05×1012/L 表二白细胞计数表 WBC/L =112/20×109=5.6×109/L 实验结果:RBC:4.05×1012/L WBC:5.6×109/L 四.讨论 1、从实验结果与正常范围比较,实验结果没有超出正常范围,提示被采血

血球计数板的使用(有图指导)

血球计数板的构造和使用 血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3. 计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.

血球计数板的使用 以计数酵母菌为例 (1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数. (2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可. (3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央计数室上加盖专用的厚玻片. (4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内. (5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.

(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞). (7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数. 3.计算公式 (1)16格×25格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁 血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.

血液检查实验报告doc

血液检查实验报告 篇一:血型测定实验报告 血型测定实验报告 一、实验目的: 学习ABO型血的鉴定原理和方法。观察红细胞凝集现象,了解抗原抗体反应。 二、实验原理: 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中,红细胞膜上抗原分A和B两种抗原,而血清抗体分抗A 和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体,则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A 型血清(含有抗B抗体)与标准B型血清(含有抗A抗体)中,观察有无凝集现象,从而测知受试者红细胞膜上有无A 或/和B抗原。在ABO血型系统,根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。(见表4-3-1-1)三消毒采血针;载玻片;消毒棉签;抗A、抗B血型定型试剂;75%乙醇;受检者血液四、实验步骤 (1)取双凹玻片一块,用干净纱布轻拭使之洁净,在玻片两端用腊笔标明A及B,并分别各滴入A及B标准血清一滴。 (2)细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴,加入含1ml 生理盐水的小试管内,混匀,即得约5%红细胞悬液。采血

时应注意先用75%酒精消毒指尖或耳垂。 (3)用滴管吸取红细胞悬液,分别各滴一滴于玻片两端的血清上,注意勿使滴管与血清相接触。 (4)竹签两头分别混合,搅匀。 (5) 10~30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象,肉眼不易分辨时,则在低倍显微镜下观察,如有凝集反应,可见红细胞聚集成团。 (6)判断血型根据被试者红细胞是否被A,B型标准血清所凝集,判断其血型。五、实验结果: 我们组本次实验中,载玻片1左边为抗B型定型试剂,呈淡红色,未发生凝聚;右边为抗A型定型试剂,血液在试剂中凝结,试剂较清亮。该受试者1血型为A。 载玻片2左右边的试剂内的血液皆不出现凝结现象,受试者2为O型血。 六、实验讨论: 1.实验中要分清牙签,不要用一牙签一端同时在抗A血清和抗B血清中搅拌,以免造成抗体试剂不纯。 2.实验中我们组发现15分钟后没有出现血凝现象,可用牙签轻轻搅拌一会儿,有些载玻片上就不现了血块,但有些经搅拌后仍不出现血凝现象,表示确实不含相应的抗原。篇二:血糖的测定实验报告

白细胞计数实验报告(仅供参照)

白细胞计数和分类 目的:掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、 原理:各种白细胞必须经过染色,才易于区分其类别。常用者为瑞氏(Wright’s)染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细胞的相对比值,以观察其数量、形态和质量变化,通过显微镜观察染色血涂片,计算血液中各类白细胞的百分率,称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率,即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。 实验器材:香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水、计数板及专用盖片、针1ml 刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片 实验步骤 白细胞分类 1.血片制作: 取一滴血,滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片,右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方,然后向后拉,当与血滴接触后,血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致,用力应均匀,即推出均匀的血膜(血膜不可过厚、过薄)。将制好的血涂片晾干,不可加热。 注:(1)良好涂片标准:1) 呈头、体、尾舌形 2) 血膜厚薄适宜 3) 两边留有空隙(2)涂片好坏与下列因素有关:1)血滴大小 2)推片与玻片之间角度 3)推片速度 2、血涂片的染色步骤: (1)用蜡笔在血膜两端各划一道线,以免染料外溢,置涂片于染色架上。(2)滴加瑞氏染液,共计七八滴数,以盖满血膜为度,静置1分钟。(3)再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液,轻轻摇动,并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀,静置15分钟。 (4)用清水冲洗。切勿先倾去染液再冲洗,否则沉淀物附于血膜上不宜出去。冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸取水分迅速干燥,即可镜检。 3、白细胞分类计数:先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处(一般在体尾交界处),在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数,计数移动时避免重复。根据所见到的100个白细胞,记录各种白细胞所占的百分数。

实验报告-细胞复苏及细胞鉴别与计数

细胞生物学实验报告 实验二细胞复苏及细胞鉴别与计数 1引言 1.1 实验目的 1. 掌握无菌操作技术。掌握细胞复苏技术。 2. 掌握用血球计数板进行细胞计数的方法。 3. 学习死活细胞鉴别的方法。 4. 了解细胞污染的判定方法。 5. 了解细胞形态的多样性。 1.2 实验原理 1.细胞复苏:以一定的复温速率将冻存的培养物恢复到常温的过程,复苏时要快速融化,必须将冻存在-196℃液氮中的细胞在1分钟内快速融化至37℃,使细胞迅速通过最易受损的温度区间-5-0℃,使冻存时细胞外的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。 2.细胞计数:采用血细胞计数板法,血细胞计数板由一块长约7.5cm,宽 3.5cm的厚玻璃制成,平台中部上下各有一个计数室,每个计数室分9大格,每格边长1mm,面积1mm2,盖上盖玻片后体积为0.1mm3。四角的大格划分为16个中方格,一般用作白细胞、血小板组织培养的细胞计数。中央的大方格则由双线划分为25个中方格,每个中方格面积为0.04mm2,盖上盖玻片后体积为0.004mm3,每个中方格又分成16个小方格,用于红细胞、微生物细胞的计数。细胞计数原则:细胞压线则计上不计下,计左不计右,镜下计数,有时偶尔有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算。对每个试样重复计数3次,取其算数平均值。 2实验仪器、试剂及操作步骤 2.1 实验仪器 超净工作台、倒置相差显微镜、CO2培养箱、酒精灯、酒精棉球、酒精喷壶、试管架、滴管筒 (头)、吸管筒(头)、废液缸、移液器、枪头等 2.2 实验试剂 DMEM培养基、血清、抗生素等 2.3 实验步骤 细胞复苏: 1.实验室和超净工作台消毒,紫外照射20Min左右。 2.穿好实验服,进无菌室前穿鞋套、洗手。 3.关闭紫外灯,开日光灯和开风机,超净工作台台面应整洁,用75%酒精擦双手消毒,擦拭台面。 4.自液氮中取出冷冻管,检查盖子是否旋紧,立即投入40℃水浴锅中解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内 全部融化。 5.正确摆放超净台内的实验用品,点燃酒精灯,准备一次性滴管和移液管。 6.将冻存管放入离心机中800转/分钟离心10分钟。 7.小心将冻存管移入超净台中,用75%的酒精棉球擦拭冻存管外部,打开冻存管用巴氏吸管弃上清, 加1mL的DMEM培养基吹打细胞使之均匀,取90uL细胞悬液和10uL台盼蓝染液于小指管中进行活细胞染色计数。 8.剩余细胞悬液吸至一个细胞培养瓶中,在细胞培养瓶中补加4mL的DMEM培养基,将盖子拧好稍回转,

实验8 血细胞计数板的使用

血球计数板的使用 Questions: 1.亚甲蓝染色液怎么配制? 2.计数时是全部计数还是选取其中一部分计数? 3.菌悬液怎么制备? 4.加样时可以先加样再盖玻片么? 5.计数时,若有菌体处于边界线上应怎么计数? 一、实验目的 1.能正确进行染色操作; 2.能正确使用显微镜; 3.能用血球计数板对微生物进行计数。 二、实验原理 血球计数板可计算活菌和死菌的数目,其用优质厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱,将特制的专用盖玻片覆盖其上,形成高0.10mm的计数池。计数池画有长、宽各3.0mm的方格,分为9个大方格,每个大格面积为1.0mm².容积为0.1mm(ul),其中,中央大方格用双线分成25个中方格,位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域,用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域,用单线划分为16个中方格。根椐国际标准局(NBS)规定,大方格每边长度允许误差为±1%。 三、实验仪器

显微镜、血球计数板、接种环、酒精灯 四、实验步骤 1.菌悬液的制备 用平板培养的微生物怎么制备菌悬液? 操作过程中是否需要无菌操作? 2.染色 注意染色剂浓度过稀菌体不能充分染色的情况。 3.血球计数板计数室洁净度检查 若有污染,清洗吹干后方能使用。 4.加样 血球计数板盖上盖玻片后,从盖玻片边缘加入菌液,此过程不可有气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽内多余菌液。 用什么加样? 5.显微计数 静止5min后,观察技术,以每小格内有5-10个菌体为宜。先用低倍镜,再用高倍镜。观察时注意调整光源亮度(可适当调弱)。 为什么要静止5min? 6.计算 7.清洗血球计数板 用水冲洗,不要用硬物擦洗,以免损坏网格刻度。自行晾干或吹干放入盒内保存。 五、注意事项

微生物显微计数--血球计数板法

微生物显微计数--血球计数板法 一、目的要求 1.了解血球计数板的构造和使用方法。 2.学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。 二、基本原理 利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液(或孢子悬液)放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中,在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的(0.1mm2),所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和,故又称为总菌计数法。 血球计数板,通常是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分九个大方格,中间的大方格即为计数室,微生物的计数就在计数室中进行。 计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。但无论是哪种规格的计数板,每一个大方格中的小方格数都是相同的,即16×25=400小方格。 每一个大方格边长为1mm,则每一大方格的面积为1mm2,盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1mm3。 在计数时,通常数五个中方格的总菌数,然后求得每个中方格的平均值,再乘上16或25,就得出一个大方格中的总菌数,然后再换算成1ml菌液中的总菌数。 下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算:设五个中方格中总菌数为A,菌液稀释倍数为B,那么,一个大方格中的总菌数 因1ml=1cm3=1000mm3, =50000A·B(个) 同理,如果是16个中方格的计数板,设五个中方格的总菌数为A',则 三、器材 酿酒酵母菌悬液,血球计数板,显微镜,盖玻片,无菌毛细管。 四、操作步骤 1.稀释 将酿酒酵母菌悬液进行适当稀释,菌液如不浓,可不必稀释。 2.镜检计数室 在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需清洗后才能进行计数。 3.加样品 将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌的细口滴管将稀释的酿酒酵母菌液由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多),让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室,一般计数室均能充满菌液。注意不可有气泡产生。 4.显微镜计数 静止5分钟后,将血球计数板置于显微镜载物台上,先用低倍镜找到计数室所在位置,然后换成高倍镜进行计数。在计数前若发现菌液太浓或太稀,需重新调节稀释度后再计数。

血液实验实验报告汇总

血液实验实验报告 09 生物技术 摘要:血液在体内承担着物质运输、免疫等重要的生理功能。比较不同动物的血液组成和血细胞的差异,对了了解血液的功能以及不同动物体的特征有重要意义。制作血涂片用于观察红细胞、白细胞、血小板形态;使用血细胞计数板于显微镜下直接计数,计算分别得到红细胞、白细胞数目。 关键字:血液红细胞白细胞血细胞计数血涂片 第一章前言 血液在维持内环境稳定上起着重要作用,具有运输、缓冲、防御等功能。比较不同动物的血液组成和血细胞的差异,对了了解血液的功能以及不同动物体的特征有重要意义。 动物红细胞的形态、大小、数目与动物的进化和生态适应均有一定的关系,一般来说,动物越高等,红细胞的数目越多,而体积越小,同时血细胞也高度分化;白细胞体积(除鱼类)比红细胞大,但比重却比红细胞小。白细胞按其组成又分为粒细胞和无粒细胞。在不同生理状态下,白细胞数目波动较大。 通过观察不同脊椎动物的血涂片,并在镜下计数,即可初步观察到不同脊椎动物血细胞形态变化即数目变化。 第二章材料与方法 2.1 血涂片的制作与观察 2.1.1 材料

鲤鱼、牛蛙、家鸽、家兔、小白鼠血液样品,洁净载玻片,毛吸管,瑞氏染液,蜡笔 2.1.2方法 取末血样少量置于玻片的一端,左手 持载玻片,右手以边缘平滑的推片的一端 从血滴前方后移接触血滴,血滴即沿推片 散开,推片与载片夹角保持30-45度平稳 地向前移动,载片上保留下一薄层血膜。 待干后用蜡笔在血膜两侧划线,以防染液 溢出。然后将血膜平放在染色架上,加瑞 氏染液2-3滴,使覆盖整个血膜。固定 0.5-1.0分钟,滴加等量或稍多的新鲜蒸 馏水。与染料混匀染色5-10分钟。当液 面浮现一层金黄色金属状物质,表示染液 起了作用。用蒸馏水冲去染液,待自然干燥 后,即可置血涂片于显微镜下进行镜检。 红细胞 淡红色,无核的圆形细胞,因红细胞为双凹形,故边缘部分染色较深,中心较浅,直径7-8微米。 颗粒白细胞 嗜中性颗粒白细胞:体积略大于红细胞,细胞核被染成紫色分叶状,可分1-5叶。直径10-12微米。 嗜酸性颗粒白细胞:略大于嗜中性白细胞,细胞核染成紫色,通常为2叶,胞质充满嗜酸性大圆颗粒,被染成鲜红色。直径10-15微米。 嗜碱性颗粒白细胞:体积略小于嗜酸性白细胞,细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒,颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少,核1-2叶,染成淡蓝色。直径10-11微米。 淋巴细胞 胞质少,常为围绕细胞核的一薄层,其中无颗粒细胞核是肾形或马 蹄形,染成蓝紫色。 血小板 血小板体形甚小,形态不规则,染淡蓝色,内含紫色颗粒,无核,常聚集成团。

实验五、微生物的计数——血球计数板法

实验五、微生物的计数——血球计数板法测定微生物细胞数量的方法很多,有分光光度法、显微直接计数法和平板计数法。分光光度法比较简便,易操作,但是会使数据严重偏大。而平板计数法则会使实验数据严重偏小。 显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petrof Hausser)细菌计数板。两种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不能使用油镜,计数板下部的细菌不易看清。本实验采用血球计数板法,主要目的是了解血球计数板法的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母菌细胞进行计数。 一、实验目的与要求 1、了解微生物计数常用的三种方法:分光光度法;平板计数法;血球计数板法。 2、了解血球计数板的构造和使用方法。 3、学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。 二、基本原理 利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液(或孢子悬液)放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中,在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的(0.1mm2),所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和,故又称为总菌计数法。 血球计数板,通常是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分九个大方格,中间的大方格即为计数室,微生物的计数就在计数室中进行。 计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。但无论是哪种规格的计数板,每一个大方格中的小方

红细胞计数、白细胞计数实验报告

.实验原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数量。用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血红细胞计数板,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。 二.实验内容与步骤 1、红细胞计数 (1)器材:显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板 (2)试剂:RBC稀释液①Hayem稀释液:NaCI, Na2SO4, HgCI2②枸橼酸钠甲醛盐水溶液:枸橼酸钠,甲醛,NaCI③生理盐水或含1%P醛的生理盐水:仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用 (3)标本:外周血或抗凝血(EDTA抗凝) (4)操作步骤:①小试管加RBC ffi释液2.0 ml。 ②采血,取血10卩l。 ③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~3次,立 即混匀。 ④混匀后充入计数室,静置3~5 min,高倍镜下计数(用高倍镜依 次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细 胞数。)

2 、白细胞计数 (1)器材:显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板 (2)试剂:WB(稀释液:冰醋酸3.0 mL (破坏红细胞);蒸馏水97.0 mL ;亚甲蓝(染色) (3)标本:新鲜全血或末稍血 (4)操作步骤:①小试管加WB(稀释液0.38 mL。 ②采血,微量吸管取血20卩L。 ③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~3次,立即混 匀。 ④混匀后充入计数室,静置2~3 min,低倍镜下计数(用低倍镜计 数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。)三.实验结果 RBC/L = 405/100 X 10 = 4.05 X 10 / L 表二白细胞计数表 9 , WBC/L = 112/20X 109= 5.6X 109/ L 实验结果:RBC 4.05 X 1012/ L 9 WBC 5.6 X 10 / L 四.讨论 1、从实验结果与正常范围比较,实验结果没有超出正常范围,提示被采血 者无病理或生理性异常。

简析使用血球计数板对酵母菌进行计数的若干问题

简析“使用血球计数板对酵母菌进行计数”的若干问题 乔静 如何正确使用血球计数板对酵母菌种群数量进行计数,是近年来的高考题或模拟题中多次出现相关的试题,而且不仅从如何计算酵母的数量的角度来考查学生,还从操作方法或操作过程中出现的一些问题以及处理方法来考查学生。而教师在遇到这些问题往往让学生记答案,学生对这些问题仍是感到疑惑。笔者在近年来的教学实践中,将教师和学生在做该实验和相关命题遇到的一些问题,进行了分析探讨。 1 血球计数板的构造和计数原理 虽然不同版本的教材推荐使用的血球计数板的规格不同,人教版建议使用 2mmx2mmx0.1mm方格,苏教版推荐使用1mmx1mmx0.1mm方格,但是血球计数板的使用原理和方法是相同的。以下以1mmx1mmx0.1mm方格的计数板为例分析结构和计数原理。 每个血球计数板上有两个计数室(图1)。血球计数板上的符号和数字(图1)的含义是:XB-K-25为计数板的型号和规格,表示此计数板中计数室分25个中格;0.1mm 为盖上盖玻片后计数室的高;1/400mm2表示计数室面积是1mm2(计数室边长1mm),分400个小格,每小格面积是1/400mm2(图2),9个大方格中只有中间的有小方格的中央大方格才是计数室。不要认为9个大方格都是计数室。 计数室通常也有两种规格:一种是16x25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格(图2);另一种是25x16型,即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16x25=25x16=400个小方格组成。 计数时,若计数室是由16个中方格组成,数左上、左下、右上、右下的4个中方格(即100个小方格)的菌数。如果是由25个中方格组成的计数室,除数上述4个中

小鼠脾脏细胞原代培养及观察计数实验报告-山东大学

小鼠脾脏细胞原代培养及观察计数 【实验目的】 1.学习掌握细胞培养的基本原理以及具体方法,并对小鼠脾细胞进行原代培养; 2.掌握无菌操作的具体过程及无菌操作台的使用; 3.学习掌握染色法鉴别细胞的生死状态的原理及方法; 4.学习使用血球计数板对细胞总数及活细胞数进行计数; 【实验原理】 1.细胞培养 细胞培养指的是在无菌条件下,把动、植物细胞从组织中取出,在体外模拟体的生理环境,使离体的细胞在体外生长和繁殖,并且维持其结构和功能的一种培养技术。动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。从供体获得组织细胞,在无菌条件下,用胰蛋白酶消化或机械分散等方法,将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法称为细胞的原代培养。当培养的动物细胞生长增殖达到一定密度,形成致密的单层细胞时,用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞,从一个容器中以1:2或其他比例转移到另一个容器中扩大培养的方法,称为细胞的传代培养。传代培养的累计次数就是细胞的培养代数。 高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体的功能活动是十分困难的。但如果把活细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究,则要方便和简单得多。被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料,对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类揭开生、老、病、死的规律,探索优生、抗衰老和防治各种疾病的途径和机制,也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性,使其向有利于人类健康长寿的方向发展。因此动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段,被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。 细胞培养的意义:具有其他生物技术无可比拟的优点;培养条件易改变和控制,便于单因子分析;便于人们直接对细胞结构、细胞生长及发育等过程的观察;在生物学的各个领域(如分子生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学及病毒学等)已被广泛应用。 细胞培养的局限性:在脱离机体复杂环境下,细胞培养条件与躯体环境有一定距离;观察到的结果有时难以正确反映机体的状况;细胞培养得到的产物少。 培养细胞的条件有水的质量、无菌环境,最适温度、渗透压、气体条件、最适PH、营养条件和培养基质等。 2.细胞死活鉴定 细胞生死状态的鉴别方法主要是化学染色法和荧光染色法。 活细胞和死亡细胞在生理技能和性质上主要存在一下差异: ①细胞膜通透性的差异:活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性地通过;而细胞死后,细胞膜受损,其通透性增加。基于此,发展出了以台盼蓝、伊红、苯胺黑、赤藓红、甲基蓝以及荧光染料碘化丙啶或溴化乙啶等为染料鉴别细胞生死状态的方法,上述染料能使死亡细胞着色,而活细胞不被着色。此外,应用植物质壁分离的性质也可鉴定植物细胞的生死状态。活细胞的原生质具有选择透过性,死细胞因其原生质的选择透过性已遭破坏,故与高渗透压溶液接触时不产生质壁分离。 ②代上的差异:活细胞中新代作用强,细胞的酶具有较强的活性和还原能力。基于此,发展处了以荧光素二乙酸酯(FDA)、荧光素二丙酸酯、荧光素二丁酸酯或荧光素二苯甲酰酯等酯化的荧光素鉴别细胞生死状态的方法,上述酯化的荧光素亲脂性提高,容易被细胞吸收进入,活细胞的酯酶具有较强的活性,可将酯化的荧光素分解而释放出能发荧光的荧光素,该物质不能自由透过活的细胞膜,积累在细胞,荧光显微镜下显示有明亮的绿色或黄绿色荧光;而死亡细胞的酯酶因失去活性,不能分解酯化的荧光素,荧光显微镜下显示不发光。另外,可用亚甲基蓝为染料鉴定酵母细胞的生死状态。亚甲基蓝是一无毒染料,氧化型为蓝色,还原型为无色。活细胞因具有较强的还原能力,能使亚甲蓝从蓝色的氧化型变成无色的还原型,故活的酵母细胞在用亚甲基蓝染色后显示无色;死亡酵母细胞或代缓慢的衰老酵母细胞,因无还原能力或还原能力极弱,使亚甲蓝仍处于氧化态,故呈现蓝色或淡蓝色。 3.血球计数板的使用

血常规实验报告

五常规报告单分析 一、相关项目 1. rbc、hb、mcv(平均红细胞体积)、hct(红细胞压积)、mch(平均rbc血红蛋白含量)、 mchc(平均rbc血红蛋白浓度)、rdw(rbc体积分布宽度); 2. wbc、dc(ly、mo、gr)绝对值; 3. plt、pct(血小板比积)、pdw(血小板体积分布宽度)、mpv(平均血小板体积) 二、各主要参数的临床意义及参考范围(★) 1. rbc及hb增多:是指单位容积血液中rbc数及hb量高于参考值上限。一般经多次检 查成年男性rbc>6.0×1012/l,hb>160g/l,女性rbc>5.5×1012/l,hb>150g/l 时认为增多。可分为相对增多和绝对增多。①相对增多,是因血浆容量减少,血浆中水分丢 失,血液浓缩使rbc容量相对增多。见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤等。②绝 对增多,临床上称为rbc增多症,可分为原发和继发两类,原者即真红。 2. rbc及hb减少:是指单位容积循环血液中rbc数、hb量及血细胞比容(hct)低于参考 值,通常称贫血。以血红蛋白为标准,成人男性hb<120g/l,成人女性hb<110g/l,皆可 认为是贫血。临床上还根据hb减低的程度将贫血分为四级:轻度:hb<90g/l;中度:hb: 90-60g/l;重度:hb:60-30g/l;极重度:hb<30g/l。引起减少原因包括两类:①生理性 减少:婴儿从出生3个月起-15岁以前的儿童;妊娠中、后期孕妇血浆容量增加,使血液稀 释,;老年人骨髓造血容量逐渐减少,使造血功能减低,均可导致rbc、hb减少,统称生理性 贫血。②病理性减少:见于各种贫血。 3.参考值(※) 成人男 成人女 新生儿 4.血细胞压积(hct) hct可反映rbc的增多或减少,但受血浆容量的影响,同时也受rbc体积大小的影响。 参考值:男:0.4-0.5l/l;女:0.37-0.48l/l。 5.mcv(平均rbc比容) 参考值:血细胞仪:80-100fl 6.mch(平均hb含量) 参考值:血细胞仪:27-34pg 7.mchc(平均rbc、hb浓度) 参考值:320-360g/l rbc 4.0-5.5×1012/l 3.5-5.0×1012/l 6.0-7.0×1012/l hb 120-160g/l 110-150g/l 170-200g/l 临床意义:根据上述三项rbc平均值可进行贫血的形态学分类。 ⑴正细胞性贫血:见于aa、先天性贫血、多数溶贫、骨髓病性贫 血如白血病等。 ⑵大细胞性贫血:见于叶酸、b12缺乏所引起的ma、如营养不良 性贫血、妊娠期、婴儿期ma及恶性贫血。 ⑶小细胞低色素性贫血:见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫 血、mds-ras。 ⑷单纯小细胞性贫血:见于慢性感染、炎症、肝病、尿毒症、恶 性肿瘤、风湿性疾病所致的贫血。 8.rdw(rbc体积分布宽度)是反映rbc体积大小不等程度的客观指标,对贫血的诊断有重 要意义。

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