狂犬病人免疫球蛋白不良反应的文献分析_季冬英
人狂犬病免疫球蛋白联合狂犬病疫苗对暴露后患者伤口愈合的影响研究
人狂犬病免疫球蛋白联合狂犬病疫苗对暴露后患者伤口愈合的影响 研究 目的探讨人狂犬病免疫球蛋白联合狂犬病疫苗对暴露后患者伤口愈合的影响研究。方法选择2015年2月～2016年2月在我中心预防接种门诊接受狂犬病疫苗的三级暴露后损伤患者共78例，将其分为两组，狂犬疫苗组和狂犬疫苗与狂犬病免疫球蛋白联合应用组，各39例。狂犬疫苗组患者采用狂犬病疫苗进行治疗，狂犬疫苗与狂犬病免疫球蛋白联合应用组患者在狂犬病疫苗外联合采用人狂犬病免疫球蛋白治疗，观察比较两组患者的伤口愈合效果以及不良反应发生率。结果与狂犬疫苗组82.05%的有效率对比，狂犬疫苗与狂犬病免疫球蛋白联合应用组患者97.44%的有效率明显较高，差异具统计学意义（P＜0.05）。狂犬疫苗与狂犬病免疫球蛋白联合应用组不良反应发生率为5.12%，狂犬疫苗组患者总不良反应发生率20.51%，两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论采用人狂犬病免疫球蛋白联合狂犬病疫苗治疗动物引起的暴露后损伤患者，有着良好的治疗效果，能够促进患者的伤口愈合，并且不良反应发生率低，可将其广泛地推广至临床治疗中。 标签：人狂犬病免疫球蛋白；狂犬病疫苗；暴露后患者伤口愈合；影响 为研究人狂犬病免疫球蛋白联合狂犬病疫苗对暴露后患者伤口愈合的影响，笔者于2015年2月～2016年2月在我中心预防接种门诊选择了接受狂犬病疫苗三级暴露后损伤患者共78例作为研究对象。将其分为两组，狂犬疫苗与狂犬病免疫球蛋白联合应用组和狂犬疫苗组，各39例。对其进行分组区别治疗，研究成果显著，报道如下。 1 资料与方法 1.1一般资料 研究对象均为2015年2月～2016年2月在我中心预防接种门诊接受狂犬病疫苗的三级暴露后损伤患者，共78例，按狂犬病暴露后处置患者知情同意书签字分为两组，狂犬疫苗与狂犬病免疫球蛋白联合应用组和狂犬疫苗组，各39例。所有患者均于研究前签署了知情同意书。狂犬疫苗与狂犬病免疫球蛋白联合应用组男21例，女18例；年龄23～65岁，平均年龄（44.2±3.6）岁。犬咬伤15例，猫咬伤11例，鼠咬伤4例；头部受伤5例，四肢受伤19例，躯干受伤15例。狂犬疫苗组患者中，男20例，女19例；年龄24～66岁，平均年龄（43.3±3.4）岁。犬咬伤16例，猫咬伤10例，鼠咬伤4例；头部受伤6例，四肢受伤18例，躯干受伤15例。排除标准：排除患有免疫缺陷症患者，排除正在采用免疫抑制剂治疗的患者，排除急性发热性疾病患者，排除伤口缝合包扎患者[1]。经过严密细致比较，两组患者在性别、年龄等一般资料中无显著差异，无统计学意义（P>0.05），有可比性。
狂犬病诊断标准
狂犬病诊断标准 1．流行病学史 有被犬、猫或其他宿主动物舔、咬、抓伤史。 2．临床症状 2．1愈合的咬伤伤口或周围感觉异常、麻木发痒、剌痛或蚁走感。出现兴奋、烦躁、恐惧，对外界刺激如风、水、光、声等异常敏感。 2．2“恐水”症状，伴交感神经兴奋性亢进（流涎、多汗、心律快、血压增高），继而肌肉瘫痪或颅神经瘫痪（失音、失语、心律不齐） 3．实验室检查 3．1免疫荧光抗体法检测抗原：发病第一周内取唾液、鼻咽洗液、角膜印片、皮肤切片，用荧光抗体染色，狂犬病病毒抗原阳性。 3．2存活一周以上者做血清中和试验或补体结合试验检测抗体、效价上升，曾接种过疫苗者其中和抗体效价需超过1：5000。 3．3死后脑组织标本分离病毒阳性或印片荧光抗体染色阳性或脑组织内检到内基氏小体。 4．病例分类 4．1临床诊断病例：具备3.1加3.2.1或3.2.2 4．2确诊病例:具备3.4.1加3.3的任一条.
狂犬病知识热点问答 什么是狂犬病? 狂犬病是由狂犬病毒引起的一种急性传染病，人兽都可以感染，又称恐水病、疯狗病等。狂犬病毒主要在动物间传播。该病主要是通过动物咬人时牙齿上带的唾液中的狂犬病病毒侵入人体而受到感染。狂犬病一旦发病，其进展速度很快，多数在3-5天，很少有超过10天的，病死率为100%。 被狂犬咬伤，就肯定要得狂犬病吗？ 答：不一定，有学者统计发现就是被真正的狂犬或其它疯动物咬伤，且没有采取任何预防措施，结果也只有30%－70%的人发病。 被狂犬咬伤后是否发病有很多影响因素： 1.要看进入人体的狂犬病毒的数量多少，如果疯狗咬人时处于发病的早期阶段，它的唾液中所带的狂犬病毒就比处于发病后期时少； 2.咬伤是否严重也影响被咬的人是否发病。大面积深度咬伤就比伤口很小的浅表伤容易发病； 3.多部位咬伤也比单一部分咬伤容易发病，且潜伏期较短。 4.被咬伤后正确及时的处理伤口，是防治狂犬病的第一道防线，如果及时对伤口进行了正确处理，和抗狂犬病暴露后治疗，则可大大减少发病的危险。 5.通过粘膜感染发病较咬伤皮肤感染发病难，而且病例较多呈抑郁型狂犬病。 6.疯动物咬伤头、面和颈部等那些靠近中枢神经系统的部位或周围神经丰富的部位，较咬伤四肢者的发病率和病死率要高。 7.抵抗力低下的人较抵抗力强的人更易发病。 被犬咬伤后，伤口如何处理？ 1.被咬后立即挤压伤口排去带毒液的污血或用火罐拨毒，但绝不能用嘴去吸伤口处的污血。 2.用20%的肥皂水或1%的新洁尔灭彻底清洗，再用清水洗净，继用2%－3%碘酒或75%酒精局部消毒。
药物分析论文
阿司匹林对抗血栓的分析研究方法 姓名：陈曦 班级：制药132 学号：2013013085
阿司匹林对抗血栓的分析研究方法 【摘要】心血管疾病是危害人类健康的严重疾病，而抗血栓治疗是此类疾病抢救措施及预防策略的核心。抗血栓药按作用机制主要分为抗血小板药、抗凝血药和溶栓药三类。 【关键词】心血管疾病；抗血栓治疗；抗血小板药；抗凝血药。 心血管疾病是危害人类健康的严重疾病，是造成死亡的主要原因之一。心血管疾病是指由于心脏及血管病变而引起的一系列疾病，包括心脏病、高血压、高脂血症等。抗血栓治疗一直是心血管疾病抢救措施及预防策略的核心。抗血栓药按作用机制主要分为抗血小板药、抗凝血药和溶栓药三类。前两类主要用于预防血栓形成，是抗血栓治疗的重要方法，后一类主要用于急性心肌梗死、脑梗死后，溶解已形成的血栓。 1.抗凝血药 抗凝血药是通过影响凝血过程中的某些凝血因子阻止凝血过程的药物。正常人由于有完整的血液凝固系统和抗凝及纤溶系统，所以血液在血管内既不凝固也不出血，始终自由流动完成其功能，但当机体处于高凝状态或抗凝及纤溶减弱时，则发生血栓栓塞性疾病。目前常用的抗凝血药根据化学结构主要有以下两类： 1.1肝素类 肝素是一种由D-葡糖醛酸和N-乙酰-D葡糖胺残基交替排列，并经脱乙酰和硫酸化，D-葡糖醛酸转化为L-艾杜糖醛酸等一系列修饰而成的直链粘多糖。肝素是最早使用的抗凝药，在体内外均有很强的抗凝
作用，这是通过抗凝血酶Ⅲ来实现的，可有效地防止深静脉血栓和肺栓塞的形成，临床上常用于治疗急性心肌梗死和不稳定型心绞痛。该制剂只能静脉给药，当用量过多引起出血时，可用等量鱼精蛋白中和，长期使用肝素有引起出血的危险，副作用较大。与普通肝素相比，低分子量肝素类物质具有较强的抗Xa因子活性和促纤溶作用，其抑制凝血酶及血小板的作用较弱，且不增加血管通透性，故血小板减少及出血发生率明显减少。低分子量肝素类物质血浆蛋白非特异性结合力低，其生物利用度可达98%，量效关系明确，预期浓度和疗效准确，加之其本身对APTT影响不明显．故无需药物监测。低分子量肝素类物质血浆半衰期长，达200~300分钟，为未分馏肝素类物质的2~4倍。因此用药简单，一般经皮下注射给药，每日注射1次即可。 在1993年以前，深度静脉血栓和肺栓塞的治疗几乎完全依赖于肝素（heparin）。然而时至今日，由于低分子量肝素类产品更易给药且副反应发生率低，尤其是出血风险大为降低及用药后不需密集监测，故它们已经成为用来预防和治疗深度静脉血栓的主要临床选择。 1.2香豆素类 香豆素是一类含有4-羟基香豆素基本结构的物质，口服参与体内代谢才能发挥抗凝作用，称为口服抗凝药，这是唯一在临床广泛应用的口服抗凝血药，如双香豆素、华法林(苄丙酮香豆素)和醋硝香豆素，它们的化学结构与维生素K类似，故亦称为维生素K拮抗剂，它们的药理作用相同。 华法林与维生素K竞争羧化酶，使凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ合成
狂犬病免疫球蛋白制造及检定规程
狂犬病免疫球蛋白制造及检定规程 本品系由乙型肝炎疫苗免疫后，再经狂犬病疫苗免疫的献血员中采集狂犬病抗体效价较高的血浆，经低温乙醇法提制的特异性免疫球蛋白制剂。本品所含丙种球蛋白占总蛋白量的90%以上，每ml含狂犬病抗体效价不低于100IU。主要用于狂犬病的预防。 1 制造 1.1 制造要求 1.1.1 原料血浆应符合《原料血浆采集（单采血浆术）规程》中11项要求。 1.1.2 狂犬病疫苗免疫按卫生部批准的免疫程序进行。所用抗原应符合《人用狂犬病浓缩疫苗制造及检定规程》要求。免疫后血样用酶标法或蚀斑法或小鼠脑内中和试验测定抗体效价，达到10Iu /ml以上者即可采集免疫血浆作为原料。在末次免疫后半年中，可每间隔2周采浆一次，每次400ml。 1.1.3 原料血浆应无热原污染，并保持无菌。不能及时投料制备时，应及时置-20℃以下冻存。冻存期最长不应超过1年。 1.1.4 制造工作室、冷库及各种生产用具等要求同《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》中1.1.3项。
1.1.5 生产用水应符合饮用水标准，直接用于制品的水应符合注射用水标准。所用各种化学药品应符合《中国生物制品主要原材料试行标准》，未纳入试行标准者应不低于化学纯。 1.2 制造工艺 1.2.1 采用低温乙醇法，可加适宜稳定剂。若加防腐剂硫柳汞，其含量不得超过0.009%(g /ml)。 1.2.2 分批 每批制品最少应由100名以上免疫献血员的血浆混合制成。同一制造工艺、同一容器溶解、稀释的制品作为1批；用不同滤器除菌过滤或不同机柜冻干的制品分为亚批。 1.2.3 半成品检定 除菌过滤后每批半成品应进行理化检定、抗体效价测定、无菌试验及热原质试验，其方法及要求同成品检定。 1.2.4 冻干 除菌过滤的制品应及时分装，并按《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》中1.2.5项进行冻干。制品温度不得超过35℃。 1.3 剂型与规格
药物分析论文
药物化学论文 题目：苯佐卡因的合成 作者陈媛学号 系别化学化工系专业11师范班完成时间二0一四年六月十日
摘要：本文主要介绍了苯左卡因以硝基苯甲酸为原料的制备方法，以及苯左卡因的实验制备过程。通过对本文的学习，我们能够了解苯左卡因的化学 性质和发展状况以及他在医药方面的相关用途。 关键词：苯左卡因；硝基甲酸；合成 Abstract: This article mainly introduced benzene left Kain take the nitryl benzoic acid as raw material preparation method, as well as the benzene left Kain's experiment prepares the process.Through to this article study, we can understand the benzene left Kain's chemical property and the development condition as well as he in the medicine aspect related use. Key word: Benzene left Kain; Nitryl formic acid; Synthesis
1 苯佐卡因概况 1.1苯佐卡因的基本性质 苯佐卡因，英文名BenLzocaine，化学名为对氨基苯甲酸乙酷(Ethylp一aminobenzoate)或4一氨基苯甲酸乙酷(p~Aminobenzoieacidethylester)，化学分子式为CgHllNOZ，相对分子量为165.19。苯佐卡因为白色针状晶体，无臭，味苦。熔点91~92e，沸点183~184e(1.87kPa)。微溶于水，溶于乙醇!氯仿，乙醚。它是重要的医药中间体，可作为奥索仿!奥索卡因!普鲁卡因等前体原料。 1.2国内外制剂开发现状 国外使用苯佐卡因的制剂很多，美国药物索引1984年收载苯佐卡因制剂即达一百多种，其中片剂27种，软膏17种，霜剂6种，胶囊剂3种，还有凝胶剂!栓剂!洗剂!气雾剂等。苯佐卡因作用的特点适用于口腔科，如美国Beutllch生产的/Hurrieaine0是以水溶性聚乙二醇为基质，含20%苯佐卡因的软膏，主要用于口腔科注射前局部麻醉和牙结石!牙酿手术前的麻醉止痛;Armour生产的/AAA0气雾剂，含苯佐卡因1.5%，氯化节基十六烷基二甲基胺0.0413%，用于治疗由寒冷!滴鼻后和其他刺激所引起的咽喉痛，口腔溃疡及口腔咽喉的轻度感染;英国ICI的/复方洗必泰片0(HibitaneantisePtie)含盐酸洗必泰smg，苯佐卡因Zmg，治疗口腔和咽喉感染，缓解咽喉痛和喉炎，防止扁桃体切除术和牙科手术后的继发性感染。 美国药典(第24版)!英国药典(1998年版)!中国药典(2000年版)等对苯佐卡因制剂均有收载l6]。国内有制成散剂!5%软膏!栓剂，国外制剂品种较多，用于口腔杀菌!溃疡!咽喉止疼止痒，并且含片!喷雾剂!以及耳用制剂品种较多。与国外相比，苯佐卡因在我国的使用范围是非常狭窄的，仅仅在一些外用软膏中作为止痒成份，因此它的作用特点没有得到充分的发挥。美国药典(24版)还收载有单复方凝胶!软膏!霜剂!表面溶液剂等，我国这方面品种还没有。仅见盐酸丁卡因片(1997年新药品种汇编)适用于消化道内镜检查前麻醉咽喉粘膜。苯佐卡因疗效确切，安全有效，5中国药品6把它列为我国第一批非处方药(OTC)。其制剂的开发需要进一步加强。 2苯佐卡因合成研究现状 苯佐卡因的制备，有从甲基苯胺出发，有从对硝基苯甲酸出发，亦有从甲苯出发。当前国内厂家生产的苯佐卡因大部分都以对硝基苯甲酸和乙醇为原料，经酷
犬猫血清中狂犬病抗体的测定酶联免疫吸附法
犬猫血清中狂犬病抗体的测定酶联免疫吸附法 1 范围 本标准规定了犬猫血清中狂犬病免疫抗体的测定方法。 本标准适用于接种狂犬病疫苗的犬猫血清中狂犬病免疫抗体的定性检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 向包被有狂犬病病毒抗原的酶标板中加入犬猫血清，犬猫血清中的狂犬病抗体与酶标板中的抗原相结合，然后加入酶标记物，酶标记物与酶标板上的抗原抗体结合物形成复合物，最后加入底物，底物与酶标记物反应形成有颜色的化合物，终止反应后，用酶标仪测量其OD值，通过阳性质控的OD值确定犬猫血清中有无狂犬病免疫抗体。 4 仪器与设备 4.1 酶标仪：内置450 nm和630 nm滤光片。 4.2 多道移液器：（50～300）μL。 4.3单道移液器：（5～50）μL，（10～200）μL，（100～1000）μL。 4.4恒温培养箱。 4.5振荡混匀器。 5 试剂与材料 犬猫狂犬病免疫抗体ELISA检测试剂盒：试剂盒的组成、说明及使用注意事项参见附录 A。实验用水应符合GB/T 6682的规定。 6 操作程序 6.1 质控分布与稀释 用单道移液器向A1，A2，B1，B2酶标板微孔里各加90μL样品稀释液，分别向A1，A2孔里加10μL阴性质控，向B1，B2孔里加10μL阳性质控，使质控的稀释比例为1：10。 1
2 向每个血清稀释板微孔里各加入90μL样品稀释液，然后分别加入10μL待检血清，使样品预稀释 液的稀释比例为1：10。 6.3 样品的分布与稀释 向剩余每个酶标板微孔里加入90 μL样品稀释液，然后分别加入10 μL样品预稀释液，用振荡混匀器充分混匀后，用封口膜封好，使样品最终稀释比例为1：100。 6.4 孵育 （37±1）℃孵育（60±5）min。 6.5 洗液的配制 按1：10的比例，用实验用水稀释浓缩洗涤液。 6.6 洗板 取掉封口膜，先甩去酶标板微孔里的液体，然后用多道移液器向每个酶标板微孔里加入300μL洗液，每次浸泡30s，再弃去洗液，先后洗涤5次，最后在吸水纸上拍干。 6.7 加酶标记物 按1：10的比例，用酶标记物稀释液稀释酶标记物后，向每个酶标板微孔里加入100μL稀释好的酶标记物，用振荡混匀器充分混匀后，用封口膜封好。 6.8 孵育 同本标准6.4。 6.9 洗板 同本标准6.6。 6.10 底物反应 向每个酶标板微孔里加入100μL过氧化物酶底物，室温（20～25）℃，避光孵育（30±5）min。 6.11 终止反应 向每个酶标板微孔里加入50μL终止液，轻轻摇动酶标板使之混匀，使孔内无气泡。 6.12 测量OD值 用酶标仪在双波长450nm和630nm，或者单波长450nm下测量OD值。 7 检测有效性及结果判定 7.1 当阳性质控OD值≥0.300，并且当阴性质控OD值 < 0.5×阳性质控OD值时，实验结果成立。7.2样品的OD值≥阳性OD值，则可判定为狂犬病免疫抗体阳性。
药物分析新技术的研究进展
药物分析新技术的研究进展 【摘要】本文介绍近年来药物分析领域中发展起来的几种新技术，包括高效毛细管电泳技术、高效液相色谱-质谱联用技术、高速逆流色谱技术、时间分辨荧光分析法、手性药物的液相色谱分析法，以及它们的最新 应用进展。 药物分析目的是保证药物的质量和用药的安全有效。它研究药物的化学检验、药物稳定性、生物利用度、药物临床监测和中草药有效成分的定性和定量等。传统的药物分析,大多是应用化学方法分析药物分子,控制药品质量。然而,现代药物分析在计算机技术以及分析技术的飞速发展下已经发生了翻天覆地的的变化。本文主要介绍一些基于现代色谱、现代波谱、色谱连用技术上的用于药物分析的现代化技术方法。 1、高效毛细管电泳技术 高效毛细管电泳（high performance capillary electrophore-sis，HPCE）又称毛细管电泳（CE）。毛细管电泳 ( CE)是 80年代后期在世界范围内迅速发展起来的一种分离分析技术，是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物。其分析应用的范围极广 ,小至无机离子 ,大至生物大分子 ,都可以用 CE来测定。HPCE 在DNA、氨基酸及蛋白质的分析中应用非常广泛，已在生命科学和生物工程等领域中显示出极其重要的应用前景，被用于DNA分析，如实现微量DNA的检测、DNA片段的分离、DNA的测序、DNA突变的检测、DNA损伤判断、临床诊断等[1]。 HPCE 技术因其特别适宜快速大量地分析复杂的中药成分而被广泛用于中药材鉴别和质量控制、中药有效成分的分离与测定、中成药和中药制剂的分析。韩乐等[2]建立了HPCE 同时测定玄参中梓醇、桃叶珊瑚苷、哈巴苷、哈巴俄苷、毛蕊花糖苷及肉桂酸含量的方法，用于玄参药材内在质量的评价和控制。Yu 等[3]等采用中心组合设计法和多变量分析法，以黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素作为控制标准建立黄芩毛细管指纹图谱，对34个不同产地的黄芩进行质量分析控制，方法快速、精密、可靠，对所有来源的药材进行了质量评价。 2、高效液相色谱-质谱联用技术 高效液相色谱-质谱（High performance liquid chro-matography-mass spectrometry，HPLC-MS）联用技术是近几年来发展起来的一项新的分离分析技术。它将高效液相色谱（HPLC）对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，在生物、药物、临床医学、化工和环境等领域得到了广泛的应用，是分析和鉴定复杂混合物的强有力的工具,尤其适用于生物样品中痕量药物的测定。Zhu等[4]采用液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)法测定人血浆中奥普力农. 3 高速逆流色谱技术 高速逆流色谱（high-speed countercurrent chromatogra-phy，HSCCC）技术是20 世 纪80 年代发展起来的一种连续高效的新型液-液分配色谱分离技术，最初由美国国立健 康研究院（NIH）的Ito教授研制开发。HSCCC最大的优点是无需固相载体作固定相，并 具有操作简单快捷、分离纯度高、样品回收率高、适用范围广、可一步制备纯品的优点。既 适用于小量分析，也可用于规模纯化，在中药、生化、食品、天然产物化学、环境分析等领域 有着广泛的应用。 HSCCC 在天然植物活性成分的分离中得到了相当广泛的应用，在有机酸、黄酮、生物碱、植物多酚、醌类、萜类、木脂素、香豆素、皂苷等几乎所有的天然植物化学成分的分离中 都有应用。HSCCC可以用来对天然产物的粗提物进行有效成分的提纯以及对天然产物进 行除杂处理。 王晓丽等[5]通过紫外-可见分光光度计法对高速逆流色谱仪分离芦荟多糖的溶剂系统进 行研究，探索出分离芦荟多糖的溶剂系统为PEG600-KH2PO4-K2HPO4-H2O （5∶15∶15∶65，w/w）体系。钱俊青等[6]采用高速逆流色谱法分离纯化大豆异黄酮，并选 用HPLC法测定样品的质量分数，成功分离得到大豆苷91.65%，染料木苷92.97%。高 赛男等[7]采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（3.0∶5.0∶3.5∶5.0，v/v）溶剂体系，采用高速逆流 色谱法从丁公藤中成功分离纯化得到东莨菪内酯，纯度可达98.04%。 4 时间分辨荧光分析法 时间分辨荧光分析（timeresolved fluorescence assay，TR-FA）是近年来发展起来的非同
给人注射的狂犬疫苗是抗原还是抗体
给人注射的狂犬疫苗是抗原还是抗体？-----抗原给人注射的狂犬疫苗是抗原还是抗体？有的老师认为是抗体，有的老师认为是抗原。那么究竟是抗原还是抗体呢？ 认为是抗体的老师的理由是狗咬伤人后，进入人体内的是病毒，我们应该注射抗体，将病毒清除。 其实不然，狂犬病疫苗是抗原，是一种蛋白抗原，是狂犬病病毒灭活后制成的疫苗。（狂犬疫苗系用狂犬病毒固定毒接种于原代地鼠肾细胞，培养后，收获毒液，经浓缩、纯化、精制并加氢氧化铝佐剂，经全面检定合格后即为预防狂犬病的疫苗。）疫苗必须保存在2℃～8℃的温度下，一旦不小心冰冻或温度过高，蛋白质内部就会形成冰晶，影响其抗原性，都不能使用。 狂犬病病毒疫苗用于对狂犬病毒有高危接触者(例如兽医)的接触前免疫接种，也可与狂犬病免疫球蛋白联合用于接触后的预防。只不过，给人注射的是灭活的病毒（一般时期）；给动物注射的是减毒的病毒。 人被动物咬伤后接种狂犬疫苗和抗狂犬病血清是预防感染狂犬病的主要方法。注射灭活细菌是为了激发人体免疫系统，经过淋巴细胞，形成浆细胞，人体血液中可出现抗狂犬病毒抗体，这些抗体可防止病毒在细胞间直接传播，减少病毒的增殖量，同时还能清除游离的狂犬病毒，阻止病毒的繁殖和扩散，从而达到预防狂犬病。
抗原跟抗体功效是不同的。注射抗原是主动免疫。很凶险的病的免疫一般使用灭活的疫苗，不大凶险的病或者免疫反应弱的病用的是减毒的疫苗。注射血清（抗体）是被动免疫——一般用于急救或者是很凶险的伤病情。如：被狂犬咬伤时，被毒蛇咬伤时。一般不常用。一般抗原注射的功效期比较长，属于自体记忆细胞免疫；而抗体注射的功效期短，随代谢会逐渐消耗，且不会产生新的抗体。 人若被狗咬伤后，在全程注射完狂犬疫苗后第15天左右，一定要到医院检测自己体内是否产生狂犬抗体。如果没有，一定要重新补种疫苗。
药物分析(1).doc
药物分析——药品质量标准的制订 药品（质量）标准是国家对药品质量、规格及检验方法所作的技术规定，是药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据。我国现行的药品标准分为三级：国家药典（中国药典）、部标准（卫生部药品标准）和地方标准（各省、直辖市、自治区药品标准）。 制订药品质量标准的原则： 1、从人民健康需要出发，坚持质量第一的观点； 2、同一品种新药原则上只能制订一个部级标准，并有二年试行期，期满后修订转为正式标准； 3、后申报的标准必须达到已申报的标准水平；若比已申报的标准先进，则按先进的药品标准修订； 4、同时申报新药的，要统一标准，按其中高的标准制订，若因生产水平及工艺条件不同造成杂质项目检查有不同者，可将杂质检查项目共存； 5、从药品的生理效用和临床应用的方法合理性来制订。总之要体现“安全有效，技术先进，经济合理”的方针。 制订药品质量标准的基础： 一、查阅文献和新药命名：首先要查阅大量的文献，查阅其化学名、俗称、英文名及中文名；其次要介绍药品的研制过程，简略
说明实验室研究与临床试验的时间、机构和试验结论。国外已生产的，要介绍最早上市的国家（或厂家）和时间。 二、新药化学结构或处方的确定：通过各种方法（试验数据、图谱、图谱的解析、有关文献资料）确证化学结构或组份，并注意可能存在的各种异构体。在有些情况下要规定无效异构体的限度。处方要效果更优，不良反应更小。 三、生产工艺和晶型：不同生产工艺会有不同的异构体。还会产生不同的晶型。 四、晶型的性质与药效：晶型不同其生物利用度往往不同，可能会影响疗效、剂量、熔点和红外图谱等。 五、生产或贮存过程中带来的杂质或降解产物：不同生产路线会带来不同的杂质，在贮存过程中要考虑到药物的分解。 六、含量测定方法的制订：一种药物的含量可用多种方法进行测定，但在制订质量标准时往往只选其中一种。对选取这种方法的理由应加以解释，必要时需附不同方法的测定结果进行比较。同时还要说明测定的原理、方法的精度与准确度，还要讨论影响测定结果的因素等。 七、药理及毒理作用的研究：有的药物随着临床药理研究的深入，会发现还有其它方面的药理作用。新药研制时还要做毒理试验、“三致”（致癌、致畸、致突变）试验。 八、药物动力学研究：主要是研究药物的吸收速率、吸收程度、在体内重要器官的分布和维持情况，以及排泄的速率和程度，作
狂犬疫苗与免疫球蛋白接种知情同意书
狂犬病疫苗和抗狂犬病血清/狂犬病人免疫球蛋白 使用知情同意书 狂犬病是由狂犬病病毒引起的急性传染病，主要由携带狂犬病病毒的犬、猫等动物咬伤所致。当人被感染狂犬病病毒的动物咬伤、抓伤及舔舐伤口或粘膜后，其唾液所含病毒经伤口或粘膜进入人体，一旦引起发病，病死率达100%。 被可疑动物咬伤后，立即正确地处理伤口，根据需要注射狂犬病人免疫球蛋白和严格按照要求全程接种狂犬病疫苗，则能大大减少发病的风险。狂犬病人免疫球蛋白能特异地中和狂犬病病毒，可立即起效。狂犬病疫苗接种后可刺激机体产生抗狂犬病病毒的保护性抗体。为安全有效地使用狂犬病疫苗和狂犬病人免疫球蛋白，在您使用之前我们将有关信息告知于您，您可以根据自己的具体情况决定是否使用。 分级接触方式暴 露 程 度 医师建议 （在相应栏目划 勾） 患者/监护人员意见 及 签名 I级符合以下情况 之一者： 1.接触或喂养 动物 2.完好的皮肤 被舔 无确认接触方式可 靠则不需处置 同意（） 不同意（） II级符合以下情况 之一者： 1.裸露的皮肤 被轻咬 2.无出血的轻 微抓伤 或擦伤 轻 度 1.处理伤口 2.注射狂犬病人 免疫球蛋白免 3、接种狂犬病疫 苗 同意（） 不同意（） III 级符合以下情况 之一者： 1.单处或多处 贯穿性皮肤 咬伤或抓伤 2.破损皮肤被 舔 3.开放性伤口 或粘膜被污 染 严 重 1.处理伤口； 2.注射狂犬病人 免疫球蛋白 3.注射狂犬病疫 苗 同意（） 不同意（） 同意（） 不同意（） 卫生部发布的《狂犬病暴露预防处置工作规范（2009年版）》中规定:确认为Ⅱ级暴露者且免疫功能低下的，或者Ⅱ级暴露位于头面部且致伤动物不能确定健康时，按照Ⅲ级暴露处置。判定为三级暴露者须注射狂犬病人免疫球蛋白，如果患方拒绝
狂犬病治疗原则
狂犬病治疗原则 作者: 网络资源管理员来源: 网络资源管理员更新日期：2007-3-16 阅读次数：1297 狂犬病的治疗应在被咬伤（抓伤）后发病前立即开始。 (一)对被咬的人的处理 1．立即用肥皂和清水洗被咬部位伤口，然后用40－70％的酒精或氯胺苯（benzyl ammonium chloride）（zephiran）清洗，注意不要缝合伤口。 2．局部使用高价抗狂犬病毒免疫血清，最好应用人免疫血清，剂量为每公斤体重肌注20－40国际单位，如应用马抗狂犬免疫血清，则注射剂量是每公斤体重40国际单位，其中一半应注射于伤口周围。 3．应尽快开始疫苗的全程注射。 (二)对病人的治疗原则 1．将病人严格隔离于较安静、光线较暗的单人病房，避免不必要的刺激。 2．病人分泌物、排泄物严格消毒处理。 3．加强对呼吸、循环等系统并发症的监护。 4．对症处理：补充水电解质及热量，纠正酸碱平衡失调；对烦躁不安、痉挛者轮流使用各种镇静剂，如安定、苯巴比妥、水合氯醛及冬眠药物等。有脑水肿给脱水剂。防止呼吸肌痉挛导致窒息，必要时气管切开给氧。有心动过速、心律失常、血压升高时可用β受体阻滞剂或强心剂。 狂犬病诊断标准 作者: 网络资源管理员来源: 网络资源管理员更新日期：2007-3-16 阅读次数：1445 1．流行病学史 有被犬、猫或其他宿主动物舔、咬、抓伤史。 2．临床症状 2．1愈合的咬伤伤口或周围感觉异常、麻木发痒、剌痛或蚁走感。出现兴奋、烦躁、恐惧，对外界刺激如风、水、光、声等异常敏感。 2．2“恐水”症状，伴交感神经兴奋性亢进（流涎、多汗、心律快、血压增高），继而肌肉瘫痪或颅神经瘫痪（失音、失语、心律不齐）
药物分析文献综述
2016-20 17学年第1 学期 文献综述 名称高效液相色谱法手性固定相分手性药物研究进展专业2016级药物化学 学号161320217 姓名李松子 导师柯美荣 指导老师林子俺 时间2016年12月19日
高效液相色谱法手性固定相分手性药物研究进展 摘要 手性（chirality)是指化合物的分子式和结构式相同，因分子空间排列不同导致两个分子互为镜像和实物的现象。手性药物（chiral drug)是指药物分子结构中引人手性中心后得到的一对互为实物与镜像的对映异构体（enantiomer) 这些对映构体的理化性质基本相似，仅旋光性质有所差别。目前在约2000种常用药物中有近500种药物以外消旋体的形式存在。外消旋体药物中可能只有一种对映异构体有药效，其镜像分子却有毒副作用或药效相反或无药效：如左旋巴比妥酸盐抑制神经活动而右旋巴比妥酸盐却兴奋神经；右旋甲状腺素钠可降低血脂而左旋甲状腺素钠对心脏有毒副作用；抗菌药左旋氧氣沙星的药效高于其右旋体数倍对映异构体也对香料化学和农业化学方面有重要作用：如S-型的香芹酮有香菜味,而R-型却具有荷兰薄荷香味；农药溴氰菊酯的8个异构体中，（3R,1R,S）异构体的杀虫活性是（3S, lS，R)的70多倍。手性药物的分离分析在生物和化学领域一直是研究热点。 色谱法利用固定相与外消旋体之间的作用力不同使流动相洗脱时各组分保 留时间不同而实现分离的目的。色谱法以其优良的识别能力成为目前应用最广泛的手性拆分方法，尤其在性药物的分离分析和纯度检测等方面。常用的手性色谱分离技术包括高效液相色谱法（HPLC)、气相色谱法（GC)、毛细管电色谱法（CEC)等根据侍分离化合物的分子结构选择合适的手性色谱非常重要。 在用HPLC法分离手性物质时，可以通过改变色谱柱的流动相和固定相来改变改善HPLC的分离效果。根据手性固定相的不同来源，可分为天然、半合成和全合成三大类。本文介绍国内外近几年手性固定相拆分手性药物的研究进展，包括几种经典类型及一些新型手性固定相。固定相可分为几种经典的固定相：环糊精类手性固定相、多糖类手性固定相、Pirkle 型手性固定相、蛋白质类手性固定相。根据添加剂的性质可将手性流动相添加剂(CMPA)分为4类：配基交换型手性添加剂、手性离子型配合剂、环型葡聚糖添加剂以及基于其他作用的手性流动相添加剂。 1.几种经典手性固定相的手性药物拆分
狂犬病
一条不知名的褐色小狗，在没有教练指导、技术支持和观众喝彩的情况下成为登山英雄，而且目的地是近6000米高的乞力马扎罗山。 在白雪皑皑的山顶发现小家伙时，法国登山者安东尼·伽罗迪克震惊极了。他难以想象是什么力量促使小狗登顶这座非洲最高峰。 动物学家却警告登山者，不要盲目和小英雄拥抱或者握手，原因是这只过度兴奋的小狗很可能患上了狂犬病。 科学家的警告不无道理。根据世界卫生组织的报告，这种病死率高达100%的人兽共患中枢神经系统传染病，每年导致全球5.5万人死亡。 在中国，这一数字达2400人以上，居全球第二位。另一个数据是，中国也是全球狂犬病疫苗的第一大生产国和使用国，相关费用每年超过100亿元。 “付出的代价是世界第一，效果却是世界倒数第二。”武汉生物制品研究所基因工程室研究员、博士生导师严家新对中国青年报(微博)记者说，“这说明中国狂犬病防治策略出现了路线性的问题。” 全世界超过80%的狂犬病疫苗“都被中国人打了” 严家新所在的武汉生物制品研究所，是全国为数不多的检测狂犬病抗体的机构。对于这位已经退休的老教授来说，每天的工作内容是接待担心患上狂犬病的人。 他碰到过一个职业是繁育宠物狗的厦门小伙子，在一年的时间里打了近百针狂犬病疫苗。另一位北京患者接种了疫苗后，每个月仍然到武汉来做抗体水平检测，说是“图个安心”。 目前，中国狂犬病疫苗年使用量达1500万人份，这意味着全世界超过80%的狂犬病疫苗“都被中国人打了”。 在严家新看来，这些现象和数字体现了中国人对于狂犬病的无知。 狂犬病俗称“疯狗病”，是由狂犬病毒侵犯神经系统引起的急性传染病，主要传染源是病犬，其次为猫和其他动物——如兔子、狐狸、狼、臭鼬、浣熊等。人类感染狂犬病毒会引起脑炎，死亡率几乎是100%。 严家新告诉记者，早在4300多年前，位于今天伊拉克境内的美索不达米亚古王国就有了关于狂犬病的记载：“如果狗疯了，而且当局已将有关事实告诉主人，他却不将狗关在家里，以致狗咬伤一个人并引起死亡，主人应赔偿27个锡克尔(古银币，重约16克)。” 从公元前24世纪到19世纪，干旱、性挫折甚至“魔鬼附身”都被视为狂犬病暴发的主要原因。面对这个魔鬼，截肢成了很多人付出的高昂代价。 1885年，一次艰难的科学实验终止了这一切。法国微生物学家巴斯德将疯狗绑在桌子上，用嘴通过吸管从狗的下颌吮吸唾液以取得病毒样品，然后用自己的身体做疫苗实验。为了制止他疯狂的行为，家人不得不将63岁的科学家看管起来。最终，他发明了狂犬病疫苗，成为继天花疫苗之后人类发明的第二种疫苗。到了1940年，有效的狂犬疫苗被大量应用于狗，狂犬病的传播途径被有效阻断。
狂犬病免疫球蛋白使用方法
狂犬疫苗 狂犬疫苗是人用精制VERO细胞狂犬病疫苗及精制地鼠肾细胞，狂犬病疫苗均为轻度混浊白色液体，久放形成可摇散的沉淀，含硫柳汞防腐剂。 1用药剂量 狂犬疫苗接种流程 VERO细胞狂犬病疫苗及精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗规格为1ml/安培,效价≧2.5IU。巴斯德精制VERO细胞狂犬病疫苗规格为0.5ml/安培,效价≧2.5IU。 规程：咬伤后预防 0,3,7,14,30 无咬伤预防 0,7,21 具体方法 (1)咬伤后预防。对一般咬伤，即皮肤无流血的轻度擦伤、抓 伤或破损皮肤被舔舐，应于0(第1天，注射当天)、3(第4天，以下类 推)、7、14、30天各注射该疫苗1安瓿，儿童用量相同。对严重咬伤，除应按上述方法注射该疫苗外，应于0、3天注射加倍量疫苗，并在0 天注射疫苗的同时用抗狂犬病血清(40IU/kg体重)或狂犬病免疫球蛋白 (20IU/kg体重)，浸润咬伤局部和肌内注射。凡联合使用抗狂犬病血清 或免疫球蛋白者，必须在疫苗全程注射完毕后，再加强注射2～3针疫苗，即在全程注射后第15、75天或第10、20、90天分别加强注射1针。 凡注射疫苗 1天前注射抗狂犬病血清、慢性病人如肝硬化、免疫缺陷症、服用免疫抑制药物、老人、严重营养不良和咬伤后48小时才 开始免疫等7种情况，均应于初种时加2～3倍疫苗量，分部位注射，才 有较好的免疫效果。此外，有的虽属轻伤，但侵入的病毒量较多或伤及 富含神经部位，亦可出现潜伏期短而单用疫苗无效病例。世界卫生组织 重新建议，不论任何部位的破皮咬伤均应合用抗血清。
(2)对未咬伤健康者预防注射，可按0、7、21天注射3针。1 年后加强1针，以后每隔1～3年再加强1针。 (3)该疫苗供上臂三角肌肌内注射。儿童应在大腿前内侧区肌内 注射。 (4)使用前将疫苗振摇成均匀悬液。 2接种人群 可分为两种 :一为咬伤后预防，二为无咬伤预防。 ⑴咬伤后 (暴露后)预防。任何可疑接触狂犬病毒，如被动物(包括 貌似健康动物)咬伤、抓伤(即使很轻的抓伤)，皮肤或粘膜被动物舔过，都必须接种本疫苗。 ⑵无咬伤 (暴露前)预防。在疫区有咬伤的高度危险或有接触 病毒机会的工作人员，如疫区兽医、动物饲养管理人员、畜牧人员、屠宰人员、狂犬病毒实验人员、疫苗制造人员、狂犬病人的医护人员、岩洞工作人员，以及与其他哺乳动物接触频繁人员及严重疫区儿童、邮递员、去疫区旅游者，均应用狂犬病疫苗进行预防接种。[1] 3伤口处理 (1)就地及时(最好是在咬伤后几分钟内)对伤口进行清洗消毒，对预防狂犬病具有非常重要的意义。先用3%-5%肥皂水或0.1%新洁尔灭或再用清水反复洗涤15分钟；对较深的伤口，用注射器伸人伤口深部进行灌注清洗，做到全面彻底。再用75%乙醇消毒，继而用浓碘酊涂擦。局部伤口处理愈早愈好，即使延迟1～2天甚至3～4天也不应忽视局部处理，此时如果伤口已结痂，也应将结痂去掉后按上法处理。 (2)伤口不宜包扎、缝口，开放性伤口应尽可能暴露。如果伤口 必须包扎缝合(如侵入大血管)，则应保证伤口已彻底清洗消毒并已按上述方法使用抗狂犬病血清。 (3)必要时使用抗生素或精制破伤风抗毒素。
狂犬病免疫学
2011年2月，WHO最新发布了《疫苗接种的免疫学基础丛书，第17分册：狂犬病(The Immunological Basis for Immunization Series，Module 17: Rabies）》，现将其中的《第2章：狂犬病的免疫学》全文翻译如下： 2.1 临床疾病的预防 狂犬病与其他传染病相比最独特之处，就是在暴露于病毒之后，如能及时实施暴露后预防（PEP），仍能防止临床疾病的出现，即使病人以前未接种过疫苗。WHO推荐的PEP包含三部分内容：（a）对伤口进行清洁、冲洗、消毒等处理；（b）依据不同的治疗方案和给药途径，在28至90天的期间内接种疫苗；（c）所有三级（严重）暴露病人应在接种第一针疫苗的同时或之后一周内注射狂犬病毒免疫球蛋白（RIG）。暴露于狂犬病毒的后果取决于多种因素，包括：暴露位置及严重程度，进入伤口的病毒量及其型别（基因型或生物型），以及接种是否及时、是否严格遵照WHO关于PEP的建议。病人的先天免疫（基础免疫系统产生的非特异抗病作用）和适应性免疫（高度特异，系统的细胞和体液免疫）都参与发挥保护作用以预防狂犬病的发生。 除了对伤口的一些物理和化学处理措施以外，PEP主要的免疫学目的是中和并清除暴露时侵入病人体内的狂犬病毒。为达此目的，需要以最快速度增加狂犬病毒中和抗体（RVNA）的数量。因此，一个关键问题是，保护性免疫反应应当能确保尽快产生直接针对狂犬病毒G 蛋白的RVNA。RVNA水平几乎总是能在初次接种后的7至14天之间达到足以被检测到的浓度（适应性或主动免疫）。不过，由于人狂犬病无例外地是致命的，疫苗接种方案中尽早接种免疫球蛋白(RIG)（被动免疫）的目的是提供补充的保护作用，尤其是对于严重和/或多处受伤的病人。 2.2 狂犬病疫苗 自从30年前开始开发以来，细胞培养和基于鸡（鸭）胚的狂犬病疫苗（CCV）已证明对于预防人狂犬病高度有效，包括用于暴露前预防性接种（PrEP）和与RIG联合用于PEP。CCV的投产是一项重大进展，特别是其质量明显优于在一个世纪以前用受感染动物脑
药物分析文献
Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 108(2015)97–101 Contents lists available at ScienceDirect Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis j o u r n a l h o m e p a g e :w w w.e l s e v i e r.c o m /l o c a t e /j p b a Short communication Development of the MAE/UHPLC-MS-TOF method for determination of benzodiazepines in human bio-?uids for toxicological analysis Aneta Wo ′zniakiewicz,Renata Wietecha-Pos?uszny ?,Micha?Wo ′zniakiewicz, Julia Nowak,Pawe?Ko′s cielniak Laboratory for Forensic Chemistry,Department of Analytical Chemistry,Jagiellonian University,3Ingardena Street,30-060Kraków,Poland a r t i c l e i n f o Article history: Received 24October 2014 Received in revised form 3February 2015Accepted 5February 2015 Available online 16February 2015 Keywords: Benzodiazepines Human serum and blood analysis Microwave-assisted extraction Liquid chromatography Mass spectrometry a b s t r a c t A rapid method of microwave-assisted extraction (MAE)followed by ultrahigh performance liquid chro-matography with mass spectrometry with time of ?ight detection (UHPLC-MS-TOF)was optimized and validated for the purpose of determination of ?ve benzodiazepines in human serum and blood sam-ples.Extraction parameters and conditions of the UHPLC-MS-TOF method were de?ned.Validation of the developed method was performed at three concentration levels:10,100and 250ng/mL of each drug for both serum and blood samples.For serum and blood the limit of detection was found in the ranges 0.46–2.58ng/mL and 0.43–1.87ng/mL,precision (RSD):0.3–6.7%and 0.9–8.4%,accuracy of the assay (RE):?5.3to +2.4%and ?5.7to +7.6%,recovery:80.5–104.3%and 79.9–106.9%,matrix effects:95.9–110.5%and 97.5–114.2%,respectively.Moreover,the optimized and validated MAE/UHPLC-MS-TOF method was applied to analysis of blood samples. ?2015Elsevier B.V.All rights reserved. 1.Introduction Benzodiazepines (BZDs)are a large group of psychoactive drugs which demonstrate unique properties,depending on the substi-tuted groups attached to the core [1–3].Long-term use of BZDs can induce physical and mental addiction.However,despite these threats,they are the most frequently prescribed medications due to their positive properties and high treatment effectiveness [4].Therefore,it is important to develop new analytical methods for the determination of BZDs in the human body.In recent years,much attention has been directed to the application of microwave radiation to the sample preparation step [5–7].Moreover,liquid chromatography with mass spectrometry has been widely used to screen,identify and quantify BZDs or their metabolites in various materials [4,8,9]. The aim of this research was to exploit microwave-assisted extraction (MAE)in the preparation step of the serum and blood samples in order to determine ?ve BZDs:alprazolam,estazolam,lorazepam,diazepam and tetrazepam.Extracts of the studied compounds were analyzed by means of ultrahigh performance liquid chromatography (UHPLC)coupled to mass spectrometry with a time of ?ight mass analyzer (MS-TOF).The validated ?Corresponding author.Tel.:+48126632084;fax:+48126632084.E-mail address:wietecha@https://www.360docs.net/doc/092577854.html,.pl (R.Wietecha-Pos?uszny). MAE/UHPLC-MS-TOF method was then applied to analysis of serum reference materials and forensic blood samples. 2.Material and methods 2.1.Standards,reagents and materials Drug standards:alprazolam (Alp),estazolam (Est),lorazepam (Lor),diazepam (Dia),tetrazepam (Tetr)were purchased from LGC Standards (Teddington,UK).The deutered analogues of BZDs:estazolam-d5(Est-d5),lorazepam-d4(Lor-d4)and diazepam-d5(Dia-d5)were obtained from Lipomed AG (Arlesheim,Switzerland).Drug stock solutions (10mg/mL)were prepared in methanol and stored in ?20?C.Spiking solutions were prepared daily by appro-priately diluting stock solutions with water.Standard drug solu-tions were prepared by diluting stock solutions with a mobile phase to concentrations of 75,150ng/mL and 1.88?g/mL –(correspond-ing to 10,20and 250ng/mL,respectively,within 1mL of bio?uid sample).LC–MS grade acetonitrile and methanol,ammonium for-mate,isopropyl alcohol,electrospray calibrant solution and sodium tetraborate decahydrate were purchased from Sigma–Aldrich (St.Louis,MO,USA).Analytical grade formic acid was supplied by Merck (Darmstadt,Germany).Ethyl acetate and 30%NaOH water solution,both of analytical grade,were purchased from POCH (Gli-wice,Poland).Water (18.2M cm,TOC <5ppm)was ultrapuri?ed and ?ltered through a Milli-Q Plus system (Millipore,Bedford,MA, https://www.360docs.net/doc/092577854.html,/10.1016/j.jpba.2015.02.009 0731-7085/?2015Elsevier B.V.All rights reserved.