重组乙肝疫苗接种告知书(酿酒酵母)

重组乙肝疫苗接种告知书(酿酒酵母)
重组乙肝疫苗接种告知书(酿酒酵母)

重组乙肝疫苗接种告知书(酿酒酵母)

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一种传染病,通过血液、体液和母婴传播。急性肝炎临床症状有疲倦、厌食、恶心、呕吐、皮肤巩膜黄染等。大多数的急性乙肝感染可完全康复,但部分人特别是婴幼儿可成为慢性乙肝携带者,随后可能发展成为慢性肝病、肝硬化或肝癌。我国是乙肝高发国,目前有1. 2亿人携带慢性乙肝病毒,慢性乙肝患者约3000万人。乙肝病毒在体内不断复制使得肝脏发生炎性病变,肝细胞受损,而且还可能恶变成肝硬化和肝癌,威胁生命。在我国,71%的肝癌是由乙型肝炎发展而来的。

接种乙肝疫苗是预防乙肝最有效的手段。本疫苗由重组酿酒酵母表达的乙肝病毒表面抗原经纯化,加入佐剂吸附后制成,抗原含量为10ug/0. 5ml。

【接种对象】可以在出生后任何年龄段使用,推荐用于处于乙肝病毒感染风险较高的人群,如从事医疗工作的医护人员及接触血液的实验人员。

【接种程序】全程接种3针,接种时间分别为0、l、6月,即第一针在出生后24小时内接种;第二针在第一针接种后1个月接种;第三针在第一针接种后6个月接种。

【接种反应】常见局部不良反应有注射部位疼痛、红斑和肿胀,大多轻微,一般在兔疫接种2天后消失。常见和偶见的全身不良反应有发热、头晕、头痛、食欲下降、恶心、呕吐、腹痛、腹泻、肌痛、疲劳、皮疹和瘙痒等。

【接种禁忌】对酵母或疫苗任一成分过敏者禁用,患严重发热性疾病、急慢性严重疾病患者禁用。

注意:接种时请带上儿童预防接种证和本告知书。

备注:《疫苗流通和预防接种管理条例》规定,疫苗分为第一类、第二类疫苗,第一类疫苗由政府免费向公民提供接种,第二类疫苗是公民自费并且自愿受种的疫苗,本疫苗属于第二类疫苗。

酿酒酵母乙肝疫苗接种回执(第针)

儿童姓名:出生日期:年月日户籍:常住□流动□

接种当日儿童体温:℃上次接种疫苗后有无异常反应:□有□无

有无禁忌症:□有□无

阅读上述说明后如自愿接种本疫苗(替代一类疫苗)并按照该疫苗程序接种,请签名确认;如暂不接种,也请签名确认备档,表明您已明确上述疾病的危害。

□同意接种

家长(监护人)签名

年月日

□不同意接种

家长(监护人)签名

共接种3针,具体接种程序见上“接种程序”一栏自费

年月日

安在时(重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母))

安在时(重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)) 【药品名称】 商品名称:安在时 通用名称:重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母) 英文名称:Hepatitis B Vaccine Made by Recombined DNA Techniques in Yeast 【成份】 本品系由重组酵母表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)经纯化、加佐剂吸附后制成 【适应症】 乙肝易感者,包括婴幼儿、儿童和因职业关系可能接触乙肝病毒的成年人。接种对象应为乙肝病毒表面抗原阴性和转氨酶正常者。 【用法用量】 5 g/次,注射部位为上臂三角肌内,第一针注射后,于1个月和6个月后重复注射,总共3次。 【不良反应】 偶见注射部位红肿或疼痛、发热和头痛 【禁忌】 患有发热、急性或慢性严重疾病者及对酵母成分过敏者禁止使用 【注意事项】 1注射于上臂三角肌内。2应备有肾上腺素,在过敏反应时使用。3用前摇匀,有摇不散的块状物不得使用。4另有乙肝基因工程疫苗为中国仓鼠卵巢细胞分泌的乙肝表面抗原加佐剂氢氧化铝制成,每支10μg,用法同本品。 【药物相互作用】

暂不明确 【药理作用】 1 基因工程疫苗能诱导抗体产生,通过主动免疫方式使人体获得对乙肝病毒的抵抗力。临床上证明本疫苗所产生的抗体几何平均滴度远高于有效保护水平(>10 miu/mL)。 2 用每支5 μg的剂量,经三次接种,即可达到满意的免疫效果,保护率在95%以上,母婴阻断率达85%以上,能有效降低乙型肝炎的感染和病毒携带率,为控制乙肝传播的重要手段和预防肝细胞癌的有效方法之一。 3 基因工程疫苗完全不同于血源乙肝疫苗,不需要乙肝病毒携带者的血浆作为生产原料,因此更安全、高效。本品是一种乙型肝炎表面抗原亚单位疫苗,系采用现代生物技术将乙肝病毒表面抗原基因,克隆进入酵母菌中,通过培养这种重组酵母菌来获取乙型肝炎表面抗原。 【贮藏】 密封保存 【批准文号】 S2*******

重组乙肝疫苗接种告知书(酿酒酵母)

重组乙肝疫苗接种告知书(酿酒酵母) 乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一种传染病,通过血液、体液和母婴传播。急性肝炎临床症状有疲倦、厌食、恶心、呕吐、皮肤巩膜黄染等。大多数的急性乙肝感染可完全康复,但部分人特别是婴幼儿可成为慢性乙肝携带者,随后可能发展成为慢性肝病、肝硬化或肝癌。我国是乙肝高发国,目前有1. 2亿人携带慢性乙肝病毒,慢性乙肝患者约3000万人。乙肝病毒在体内不断复制使得肝脏发生炎性病变,肝细胞受损,而且还可能恶变成肝硬化和肝癌,威胁生命。在我国,71%的肝癌是由乙型肝炎发展而来的。 接种乙肝疫苗是预防乙肝最有效的手段。本疫苗由重组酿酒酵母表达的乙肝病毒表面抗原经纯化,加入佐剂吸附后制成,抗原含量为10ug/0. 5ml。 【接种对象】可以在出生后任何年龄段使用,推荐用于处于乙肝病毒感染风险较高的人群,如从事医疗工作的医护人员及接触血液的实验人员。 【接种程序】全程接种3针,接种时间分别为0、l、6月,即第一针在出生后24小时内接种;第二针在第一针接种后1个月接种;第三针在第一针接种后6个月接种。 【接种反应】常见局部不良反应有注射部位疼痛、红斑和肿胀,大多轻微,一般在兔疫接种2天后消失。常见和偶见的全身不良反应有发热、头晕、头痛、食欲下降、恶心、呕吐、腹痛、腹泻、肌痛、疲劳、皮疹和瘙痒等。 【接种禁忌】对酵母或疫苗任一成分过敏者禁用,患严重发热性疾病、急慢性严重疾病患者禁用。 注意:接种时请带上儿童预防接种证和本告知书。 备注:《疫苗流通和预防接种管理条例》规定,疫苗分为第一类、第二类疫苗,第一类疫苗由政府免费向公民提供接种,第二类疫苗是公民自费并且自愿受种的疫苗,本疫苗属于第二类疫苗。 酿酒酵母乙肝疫苗接种回执(第针) 儿童姓名:出生日期:年月日户籍:常住□流动□ 接种当日儿童体温:℃上次接种疫苗后有无异常反应:□有□无 有无禁忌症:□有□无 阅读上述说明后如自愿接种本疫苗(替代一类疫苗)并按照该疫苗程序接种,请签名确认;如暂不接种,也请签名确认备档,表明您已明确上述疾病的危害。 □同意接种 家长(监护人)签名 年月日 □不同意接种 家长(监护人)签名 共接种3针,具体接种程序见上“接种程序”一栏自费 年月日

重组乙型肝炎疫苗_酵母_快速鉴别试验方法的建立_王静

中国生物制品学杂志2013年9月第26卷第9期Chin J Biologicals September 2013,Vol.26No.9 重组乙型肝炎疫苗(酵母)是由重组酵母菌表达的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg )经纯化,加入铝佐剂制成。鉴别试验是重组乙型肝炎疫苗常规的检测项目,《中国药典》三部(2010版)中规定重组乙型肝炎疫苗鉴别试验采用ELISA 法[1],但重组酵母菌表达的HBsAg 经铝佐剂吸附后不能直接检测,而且ELISA 法检测时间也较长。本实验用处理液将重组乙型肝炎疫苗(酵母)上的铝佐剂解离下来,再采用胶体金法检测疫苗中的HBsAg ,并对该方法进行验 证,以期建立稳定的重组乙型肝炎疫苗(酵母)快速鉴别试验。1材料与方法 1.1疫苗及参考品重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵 母)、重组乙型肝炎疫苗(汉逊酵母)和甲型乙型肝炎联合疫苗分别来自3个不同的生产厂家(编号为A 、B 、C );甲型肝炎灭活疫苗(批号:2009113001)由厂家C 提供;重组(酵母)乙型肝炎疫苗冻干参考品 重组乙型肝炎疫苗(酵母)快速鉴别试验 方法的建立 王静,白亦昊,周长明,纪宏,武晗燕 北京市药品检验所,北京100035 摘要:目的建立重组乙型肝炎疫苗(酵母)快速鉴别试验方法。方法选取不同的处理液对吸附铝佐剂的3批重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)进行解离,采用胶体金法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg ),筛选快速鉴别试验的最佳处理液;优化快速鉴别试验的反应温度和反应时间,并对该方法进行特异性、灵敏度和重复性验证。结果处理液A (10%Triton X -1000.20ml 、20%二乙醇胺1.25ml 、0.01mol /L PBS 8.55ml )为重组乙型肝炎疫苗快速鉴别试验的最佳样品处理液;快速鉴别试验的最佳反应温度为25℃,最佳反应时间为15min ;该方法特异性较强,重复性良好,最低检出限为1.375μg /ml 。结论建立了重组乙型肝炎疫苗(酵母)快速鉴别试验方法,为该疫苗的快速鉴 别提供了参考。 关键词:重组乙型肝炎疫苗;酵母;快速鉴别试验 中图分类号:R373.2+1R392-33文献标识码:A 文章编号:1004-5503(2013)09-1334-03 Development of a method for rapid identity test on recombinant hepatitis B vaccine (yeast ) WANG Jing,BAI Yi -hao,ZHOU Chang -ming,JI Hong,WU Han -yan Beijing Institute for Drug Control,Beijing 100035,China Corresponding author:ZHOU Chang -ming ,E -mail :ZCM.602@https://www.360docs.net/doc/2f7259861.html, Abstract :Objective To develop a method for rapid identity test on recombinant hepatitis B (HB )vaccine (yeast ).Methods Three batches of recombinant HB vaccine containing aluminium adjuvant were dissociated with various treat -ment solutions and determined for HBsAg with colloidal gold stripes to screen the optimal treatment solution.The reaction temperature and reaction time for rapid identity test were optimized,and the developed method was verified for specificity,sensitivity and reproducibility.Results Treatment solution A,containing 0.20ml of 10%Triton X -100,1.25ml of 20%diethanol amine and 8.55ml of 0.01mol /L PBS,was screened as optimal treatment solution for rapid identity test on recombinant HB vaccine (yeast ).The optimal temperature and reaction time for the test were 25℃and 15min respective -ly.The developed method showed high specificity and high reproducibility,by which the minimum detection limit was 1.375μg /ml.Conclusion A method for rapid identity test on recombinant HB vaccine (yeast )was developed,which provided a reference for rapid identification of the vaccine. Key words :Hepatitis B vaccine;Yeast;Rapid identity test ·技术方法· 通讯作者:周长明,E -mail :ZCM.602@https://www.360docs.net/doc/2f7259861.html, 1334·· DOI:10.13200/https://www.360docs.net/doc/2f7259861.html,ki.cjb.000160

重组酵母乙型肝炎疫苗在成年人中的免疫效果回顾性调查分析

重组酵母乙型肝炎疫苗在成年人中的免疫效果回顾性调查分析 目的分析重组酵母乙型肝炎疫苗在成年人中的免疫效果。方法选我中心体检180例乙型肝炎抗体阴性成年人。经3次接种重组酵母乙型肝炎疫苗1年后,在在我中心体检复查是否具有乙型肝炎表面抗体(HBsAb),并计算阳转率及接种后不良反应,同时比较不同年龄组、不同性别接种人群的免疫效果。结果出现有HBsAb的人数有169例,其阳转率为93.89%。比较不同年龄组、不同性别接种人群的免疫效果时发现,年龄越小其免疫效果越好,且女性的免疫效果优于男性,P<0.05,具有统计学意义。结论乙型肝炎抗体阴性的成年人群接种重组酵母乙型肝炎疫苗后的HBsAb转阳率高达90%,因此可知,此类乙型肝炎疫苗对于乙型肝炎抗体阴性人群具有重要接种意义。 标签:乙型肝炎;重组酵母乙型肝炎疫苗;阳转率 乙型肝炎是我国目前重点监控的传染性疾病之一[1]。乙型肝炎具有传染性,临床症状复杂,严重威胁患者的生命健康[2],且在临床上无具体有效的治疗方法,因此如何有效防治并降低乙型肝炎的发生备受关注。据了解,乙型肝炎抗体阴性的成年人是被传染乙型肝炎的高危人群,因此此类人群需要加强机体对乙型肝炎的抵抗力。本文回顾性调查分析了重组酵母乙型肝炎疫苗在成年人中的免疫效果。具体如下。 1资料和方法 1.1一般资料本文中的重组酵母乙型肝炎疫苗接种人群的病例选用时间是在2012年6月~2013年6月。整合所有成年人的资料信息得知,180例成年人中,男性有74例,女性有106例,年龄18~67岁,平均年龄是(36.73±3.72)岁。经统计学分析得知,各患者在性别、年龄上比较时无显著性差异,因此具有可比性。 1.2方法采用回顾性调查分析的方法,分析在我中心体检的180例乙型肝炎抗体阴性的成年人经3次接种重组酵母乙型肝炎疫苗1年后的乙型肝炎表面抗体(HBsAb)情况。所有患者均在我市三甲医院进行肝功能检查(包括胆红素、麝香草酚浊度试验、AST、ALT、A/G、凝血酶原时间、血清蛋白电泳等)、特异血清病原学检查(包括HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc、抗-HBcIgM、肝脏活检(肝穿刺检查)及血糖、尿糖、尿常规等常规检查后确定诊断为乙型肝炎疾病。患者在接种疫苗后的具体的复查方法是医务人员对接种疫苗的成年人进行采血,利用荧光定量方法测定检测人群的肝病五项指标并进行最后计算出成年人接种此类乙型肝炎疫苗后的阳转率并分析成年人群接种疫苗后的不良反应情况,同时比较不同年龄组、不同性别接种人群的免疫效果。 1.3统计处理对此数据采用SPSS17.0软件系统进行统计和分析,计量资料采用?字2检验,计数资料采用t检验,若结果比较时具有明显差异,且P<0.05,则具有统计学意义。

基因工程方法生产乙肝疫苗

重组乙肝疫苗的研制生产过程、理化性质、生物学活性、临床应用 国际上先后研制出了第一代血源性乙肝疫苗和第二代基因工程乙肝疫苗。第一代乙肝疫苗主要运用乙肝病毒携带者血清中提取纯化出的的乙肝病毒表面抗原,先后经过减毒处理和添加佐剂后注入人体预防接种。但是由于对血源性疫苗安全性存在顾虑,人们进一步着手开发第二代乙肝疫苗,也就是基因重组疫苗。 第一步是分离目的基因,获得目的DNA片段的方法主要有两种,一是直接从细胞基因组中分离,二是人工合成。 第二步是将DNA片段和载体在体外连接重组,成为重组DNA分子,多采用连接酶的方法连接。 第三步是基因克隆,即将重组体DNA分子,引进合适的宿主细胞(大肠杆菌、酵母)中增殖。根据所用载体的不同,可选用转化(以质粒作载体时,重组体DNA分子以此种方式进入感受态的宿主细胞,以获得转化子菌落)、转染(λ噬菌体作载体时,构成的重组体DNA分子,以此种方式进入宿主细胞,可转染得到噬菌斑)、转导(λ噬菌体DNA与外源DNA组成的重组体DNA分子,与噬菌体蛋白组装成具有感染力的噬菌体颗粒,即人工包装的噬菌体颗粒,引入宿主细胞)的方法,往宿主细胞引入重组体DNA分子。 第四步是目的基因克隆的筛选与鉴定,即从大量携带重组体DNA分子的细胞中分离出带目的基因的细胞。因为不是所有的细胞都能获得重组体DNA分子,为了获得摄取了重组体DNA分子细胞,需经筛选,才能将其与未摄取重组体DNA分子的细胞区别开来,并作进一步鉴定。筛选含有重组体DNA分子细胞的方法,一般都是以载体DNA 及目的基因的遗传标记及分子特征为依据,并结合受体细胞的基因表型而建立起来的。由于许多质粒都具有抗生素等药物的抗性标记,因此,在含有一定浓度抗生素的选择培养基上,可以很容易地把摄取了重组体DNA分子,因同时也获得了抗生素抗性的细胞辨认出来。但药物筛选只是一个方面,依据它只能判断质粒载体是否进入了受体细胞,还不能确定受体细胞是否摄取了含有目的基因的重组体DNA分子。 对于重组体DNA分子的鉴别,通常是在抽提出重组质粒DNA后,用凝胶电泳法或电镜观察其分子大小,用限制酶酶解,观察其酶切图谱进行。还可采用菌落原位杂交法来进行鉴定,即将菌落从最初生长的平板上转移到硝酸纤维素滤膜上,用碱裂解滤膜上的菌落,使DNA分子游离,变性,并固定在滤膜上,随即用同位素标记的与目的基因互补的DNA或RNA探针杂交,最后通过滤膜的放射自显影鉴定菌落,并从最初生长的平皿上挑选出放射自显影呈阳性的菌落。 第五步是基因表达,这是指宿主细胞在大量繁殖过程中外源DNA在宿主细胞中的转录和翻译,表达生成的产物(蛋白质),最好在细胞内不被分解,而分泌到细胞外面。表达产物若为较小的多肽,或是对细菌蛋白酶极为敏感的蛋白质,形成后,通常即被迅速降解。为了保证外源基因表达产物能分泌到细胞外而不被降解,通常可以把外源基因插入在载体的某些结构基因中间,在这种情况下,表达产物是融合蛋白质,融合蛋白质可以抵抗内源蛋白酶的降解,又可以在细胞信号肽的引导下分泌到细胞外。

(重组乙型肝炎疫苗)说明书

重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)说明书 药品名称: 通用名称:重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母) 成分和性状:本品系由重组酿酒酵母表达的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)经纯化,加入铝佐剂制成。为乳白色混悬液体,可因沉淀而分层,易摇散,不含任何防腐剂。 有效成分:乙型肝炎病毒表面抗原。辅料:氢氧化铝,氯化钠。 接种对象:本疫苗适用于16岁及16岁以上的乙型肝炎易感者。 作用与用途:接种本疫苗后,可刺激机体产生抗乙型肝炎病毒的免疫力。用于预防乙型肝炎。 不良反应 常见不良反应: 一般接种疫苗后24小时内。在注射部位可出现疼痛和触痛,多数情况下2~3天内自行消失。 罕见不良反应 1:一般接种疫苗后72小时内,可出现一过性发热反应,一般持续1~2天后自行缓解,不需处理。2;接种部位,中度的红肿,疼痛,一般持续1~2天后自行缓解,不需处理。 3:接种部位可出现硬结,一般1~2月可自行吸收。 极罕见不良反应 1:局部无菌性化脓:一般要用注射器反复抽出脓液,严重时(如出现破溃)需扩创清除坏死组织,病时较长,最后可吸收愈合。 2:过敏反应:过敏性皮疹,阿瑟反应。阿瑟反应一般出现在接种后10天左右,局部红肿持续时长,可用固醇类药物进行全身和局部治疗。 3:过敏性休克:一般在接种疫苗1小时内发生,应及时注射肾上腺素等抢救措施进行治疗。 禁忌: 1:已知对该疫苗所含任何成分,包括辅料以及甲醛过敏者。 2:患急性疾病,严重性慢疾病,慢性疾病,的急性发作和发热期和发热者。 3:妊娠期妇女。 4:患未控制的癫痫和其他进行性神经系统疾病者。 注意事项: 1:以下情况者慎用:家族和个人有惊厥史,患慢性疾病者,有癫痫史者,过敏体质者。 2:使用时应充分摇匀,如疫苗有裂纹,标签不清或失效者,疫苗瓶内有异物者均不得使用。 3:疫苗瓶开启后应立即使用。 4:应备有肾上腺素等药物,以备偶有发生严重过敏反应发生时急救用。接受注射者在注射后应在现在观察至少30分钟。 5:注射第1针后出现高热,惊厥等异常情况者,一般不再注射第2针。 6:严禁冻结。 规格:每支(或每瓶)1.0ml,每1次成人用剂量1.0ml,含HbsAg20ug。 免疫程序: 1:于上臂三角肌肌内注射。 2:基础免疫程序为3针,分别在0个月,第1个月,第6个月接种。 贮藏:于2~8℃避光保存和运输。有效期:36个月。

重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)

..... 重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母) Chongzu Yixing Ganyan Yimiao (Niangjiu Jiaomu) Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant DNA Techniques in Saccharomyces Cerevisciae Yeast 本品系由重组酵母菌表达的乙型肝炎(简称乙肝)病毒表面抗原(HBsAg)经纯化、加入铝佐剂制成,用于预防乙型肝炎。 1 基本要求 生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。 2 制造 2.1 生产用菌种 2.1.1 名称及来源 生产用菌种为美国默克公司以DNA重组技术构建的表达HBsAg的重组酿酒酵母原始菌种,菌种号为2150-2-3(pHBS56-GAP347/33)。 2.1.2 种子批的建立 应符合“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。 由美国默克公司提供的菌种经扩增1代为主种子批,主种子批扩增1代 为工作种子批。 2.1.3 种子批检定 主种子批及工作种子批应进行以下项目的全面检定。 2.1. 3.1 培养物纯度 培养物接种于哥伦比亚血琼脂平板和酶化大豆蛋白琼脂平板,分别于20~25℃和30~35℃培养5~7天,应无细菌和其他真菌被检出。 2.1. 3.2 HBSAg基因序列测定 应与美国默克公司提供菌种的HBSAg基因序列保持一致。 2.1. 3.3 质粒保有率 采用平板复制法检测。将菌种接种到复合培养基上培养,得到的单个克隆菌落转移到限制性培养基上培养,计算质粒保有率,应不低于95%。 PR%= [A /(A+L)] ×100 式中PR为质粒保有率,(%); A为在含腺嘌呤的基本培养基上生长的菌落数,CFU/皿; A+L为在含腺嘌呤和亮氨酸的基本培养基上生长的菌落数,CFU/皿 2.1. 3.4 活菌率 采用血细胞计数仪器,分别计算每毫升培养物中总菌数和活菌数,活菌率应不低于50% 活菌率=活菌数/总菌数×100%

成人接种重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗后效果观察

2012年4月第2卷第8期·临床研究·成人接种重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和 重组(汉逊酵母)乙肝疫苗后效果观察 孙迎春 朱丽君 张?智 高冬梅 董桂华 沈阳市疾病预防控制中心免疫规划科,辽宁沈阳 110031 [摘要] 目的观察重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗在成人中的免疫效果。 方法对HBsAg、抗HBs、抗HBc三项指标全部为阴性、且未接种过乙肝疫苗的162名16岁以上人群,按照0、1、6的免疫程序接种10μg重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗,于全程免疫1个月后采血,测定血清中抗HBs水平。 结果 接种重组(酿酒酵母)乙肝疫苗的99人,抗HBs阳转率为94.95%,几何平均浓度为331.08 mIU/mL;接种重组(汉逊酵母)乙肝疫苗的63人,抗HBs阳转率为98.41%,几何平均浓度为270.79 mIU/mL。两组间抗HBs阳转率和几何平均浓度差异均无统计学意义(P>0.05)。接种两种疫苗均未观察到明显的不良反应。 结论 重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗均具有良好的安全性和免疫原性。 [关键词]重组(酿酒酵母)乙肝疫苗;重组(汉逊酵母)乙肝疫苗;免疫效果 [中图分类号] R4;R512.6+2 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616(2012)08-169-02 Evaluation on Immunization Effectivity of Recombinant Hepatitis B Vaccine (Saccharomyces cerevisiae) and Recombinant Hepatitis B Vaccine (Hansenula Polymorpha) in adults SUN?Yingchun ZHU?Lijun ZHANG?Zhi GAO?Dongmei DONG?Guihua Department of Gynaecology and Obstetrics, Shenyang Center for Disease Control and Prevention,Shenyang 110031,China [Abstract] Objective To observe and compare the immunization effectivity of recombinant hepatitis B vaccine (Saccharomyces cerevisiae) and recombinant hepatitis B vaccine (Hansenula Polymorpha) in adults. Methods Randomly selected 162 healthy subjects aged over 16 years old. They have no a history of hepatitis B vaccine immunization and their HBsAg, antiHBs and antiHBc were all negative. They were vaccinated with 10μg of recombinant hepatitis B vaccine (Saccharomyces cerevisiae) and recombinant hepatitis B vaccine (Hansenula Polymorpha) at 0, 1, 6 months. After a month in completing the 3rd vaccination, their serum samples were collected and antiHBs was detected. Results 99 people were slected to vaccinate recombinant hepatitis B vaccine (Saccharomyces cerevisiae). The positive seroconversion rate of antiHBs was 94.95%. The geometric mean concentration of antiHBs was 331.08 mIU/mL; 63 people were slected to vaccinate recombinant hepatitis B vaccine (Hansenula Polymorpha). The positive seroconversion rate of anti-HBs was 98.41%. The GMC of anti-HBs was 270.79 mIU/mL. The statistical significance of differences were not found in the positive seroconversion rates and the GMCs between two groups (P>0.05). All the vaccines did not show any severe adverse effect. Conclusion Both recombinant hepatitis B vaccine (Saccharomyces cerevisiae) and recombinant hepatitis B vaccine (Hansenula Polymorpha) are very effective and safe to adults. [Key words] Recombinant hepatitis B vaccine (saccharomyces cerevisiae); Recombinant hepatitis B vaccine (hansenula polymorpha); Immune effect 乙型病毒性肝炎(简称乙肝)是一种严重威胁人类健康的传染病,接种乙肝疫苗是预防和控制乙肝最有效的手段,目前使用较多的乙肝疫苗为重组(酿酒酵母)乙肝疫苗。重组(汉逊酵母)乙肝疫苗于2004年在中国上市,经过多年的观察研究,两种疫苗在儿童中使用的安全性和免疫原性已得到了肯定[1-3]。为比较重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗在成人中的免疫效果,笔者选择了162名健康成年人进行了观察,现报道如下。1 资料与方法 1.1?一般资料 选择沈阳市沈北新区未接种过乙肝疫苗,经筛检HBsAg、抗HBs、抗HBc三项指标全部为阴性,无乙肝病史,无乙肝疫苗接种禁忌证的162人为研究对象,年龄16~58。随机分为两组:接种重组(酿酒酵母)乙肝疫苗组99例,重组(汉逊酵母)乙肝疫苗组63例。 1.2?乙肝疫苗来源 重组(酿酒酵母)乙肝疫苗为深圳康泰生物制品股份有 CHINA MEDICINE AND PHARMACY 169

重组乙型肝炎疫苗(乙肝疫苗)

重组乙型肝炎疫苗(乙肝疫苗) 【预防的疾病】 乙肝疫苗可以预防乙型病毒性肝炎。 【种类】 乙肝疫苗有重组乙肝疫苗(酿酒酵母)、重组乙肝疫苗(汉逊酵母)和重组乙肝疫苗(CHO细胞)3种。 【接种对象】 主要为新生儿。 【免疫程序】 共接种3剂次,其中第1剂在新生儿出生后24小时内接种,第2剂在1月龄时接种,第3剂在6月龄时接种。 【禁忌】 (1)已知对该疫苗的任何成分,包括辅料以及甲醛过敏者; (2)患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者; (3)患未控制的癫痫和其他进行性神经系统疾病者。 【注意事项】

(1)接种疫苗之前,应如实向预防接种医生告知儿童身体健康状况。若有感冒、发热等症状,待恢复健康后进行补种;(2)接种疫苗后,须在预防接种单位留观至少30分钟。若儿童出现轻度发热等一般反应,通常不需任何处理。若高烧不退或伴有其他并发症者,应及时到医院就诊。 1. 疾病概况 乙肝是由乙肝病毒感染引起的传染病。传染源为乙肝病人和乙肝病毒携带者。主要通过血液、性接触和母婴传播。人群对乙肝病毒普遍易感,感染结局与感染乙肝病毒时的年龄有关,年龄越小,转为慢性乙肝的可能越大。约80%~90%的围生期感染者、30%的<6岁儿童感染者可转为慢性乙肝,成人感染乙肝病毒后转为慢性乙肝的比例<10%。有15%~25%的慢性乙肝患者可发展为肝硬化和原发性肝细胞癌而导致死亡。 2. 主要症状 乙肝发病比较隐匿,临床上常表现为低热、乏力、食欲减退、恶心、呕吐、厌油、腹胀、肝区疼痛,可出现巩膜黄、尿黄如茶水样等黄疸症状、轻度发热等。重症者可能发展为肝硬化和原发性干细胞癌,甚至导致死亡。 3. 治疗原则 乙肝治疗主要包括抗病毒、免疫调节、抗炎和抗氧化、抗纤维化和对症治疗,其中抗病毒治疗是关键。只要有适应证,且条件允许,就应到专科医院和专科门诊进行规范化的治疗。乙肝病毒携带者需定期随访。 4. 预防措施 接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效措施。目前对新生儿实行免费接种乙肝疫苗,在0、1、6月龄各接种1剂。

基因工程乙肝疫苗的制备

基因工程乙肝疫苗的制备 【摘要】基因工程乙肝疫苗是通过构建含有乙肝表面抗原的重组质粒转染酵母细胞,制备乙肝病毒表面的有效蛋白。本文主要介绍基因工程疫苗--重组酵母乙肝疫苗制备的基本原理和工艺流程,以及乙肝疫苗的纯度分析方法。 【关键词】乙肝疫苗重组质粒工艺流程 1.基因工程乙肝疫苗产生背景 疫苗是人类目前可以彻底消灭某一疾病的唯一武器,接种疫苗被认为是最有效、最经济的疾病预防手段。《发展中国家消灭乙型肝炎免疫接种计划实施指南》中指出:“世界上四分之三的人口生活在中或高乙肝流行区,因此,唯一的策略就是有效地减少乙肝的流行,最终消灭乙肝······” 世界卫生组织肝炎专家及计划免疫全球咨询组认为:控制全球乙型肝炎及减少死亡的策略是开展大规模的婴儿及学龄前儿童的乙肝疫苗接种。 我国卫生部制定的目标是从92年开始在全国逐步推行乙型肝炎(HB)计划免疫。92年全国共生产血源疫苗1500万人份,尚不能满足新生儿接种需要,如考虑其他人群,缺口更大。为了实现HB计划目标,进一步为控制全球HB做出贡献,我们必须大规模提高HB 疫苗的产量和进一步提高质量。 血源HB疫苗原料为无症状带毒者的HBsAg阳性血浆。血源价格昂贵,供应量有限,采集困难。因此血源疫苗的产量和成本受到原料的限制。利用基因工程重组微生物细胞表达HBsAg生产HB疫苗的技术,原料易得,价廉,适宜进行大规模生产,有可能大幅度降低成本。 2.使用重组酵母的原因和重组酵母构建 2.1使用重组酵母的原因 使用重组酵母进行乙肝疫苗的大规模生产,有如下几点原因: (1).酵母对培养基的要求低,价廉易得。 (2).酵母细胞生长快,故生产率高。 (3).动物细胞生长慢,容易染菌,对操作要求严。 (4).酵母系统容易放大,动物细胞系统放大难。 2.2重组酵母构建 HBV只有3200bp,为双链的DNA,是一个相当小的病毒。其基因组共有四个ORF,编码以下一些蛋白:Core蛋白和pre-core蛋白,Pol蛋白,X蛋白,以及S蛋白(L、M、S)。故重组酵母可用以下方法: (1).根据已经测定的编码乙肝病毒表面抗原决定簇基因序列,用化学合成法直接合成目的基因或者通过鸟枪法克隆目的基因。用识别相同黏性末端的限制性内切酶将外源DNA和质

两种剂量重组酵母乙肝疫苗免疫接种效果比较

两种剂量重组酵母乙肝疫苗免疫接种效果比较 目的比较儿童接种5 μg、10 μg两种不同剂量重组酵母乙肝疫苗的免疫效果,为儿童乙肝疫苗免疫方案的制定提供参考依据。方法选择笔者所在医院乙肝疫苗接种婴幼儿为观察对象,将200名儿童分组以5 μg组、10 μg组两种剂量,按照0-1-6免疫程序接种重组酵母乙肝疫苗,于首次免疫后的第7个月检测血清抗-HBs(HBsAb)阳性率和抗体HBsAb效价。结果5 μg组、10 μg组血清抗-HBs阳性率分别为90.0%,97.5%,两组间无显著性差异;两组效价组间比较有显著性差异,10 μg组血清抗-HBs效价明显高于5 μg组。结论接种较大剂量(10 μg)的乙肝疫苗后,抗HBs阳性率高且抗体效价也高,有效保护时间会更长。 标签:计划免疫;酵母乙肝疫苗;抗体测定 病毒性乙型肝炎的治疗至今没有理想的抗病毒药物,乙型肝炎的预防和控制关键依靠接种乙型肝炎疫苗。目前,我国研制开发的基因工程疫苗主要有两种:重组酵母乙型肝炎疫苗和重组(中国仓鼠卵巢细胞,CHO细胞)乙肝疫苗。我国儿童疫苗接种常采取0-1-6免疫程序,重组酵母乙型肝炎疫苗的常用剂量为5 μg/(0.5 ml·支),而重组(CHO细胞)乙肝疫苗的常用剂量为10 μg/(0.5 ml·支)。本组研究主要观察两种不同剂量重组酵母乙肝疫苗抗体阳性率和抗体的效价。 1资料与方法 1.1一般资料选择笔者所在医院母亲体检HBsAg阴性的小儿为接种重组酵母乙肝疫苗的观察对象,将200名儿童按0-1-6免疫程序,分别以5 μg/(0.5 ml·支)和10 μg/(0.5 ml·支)两种不同剂量分组接种重组酵母乙肝疫苗,于首次免疫后的第7个月检测血清抗-HBs(HBsAb)阳性率和抗体HBsAb。 1.2疫苗与接种按第0个月、第1个月、第6个月为接种时间点,于上臂三角肌肌肉注射接种。 1.3抗体检测方法采用固相放射免疫试剂,检测抗HBs,以HBsAb效价(GMT)大于1 IU/L计为阳性,HBsAb效价(GMT)大于10 IU/L为血清有保护作用。 1.4疫苗安全性观察接种前告知接种对象疫苗可能的副反应,如注射部位有轻度红肿、疼痛,接种当天有轻度头痛、疲劳、乏力等不适,一般2 d内会缓解消失。 1.5统计学处理用SPSS 1 2.0软件统计数据,采用χ2检验和方差分析多组均值的比较。P<0.05为差異有统计学意义。 2结果 疫苗安全性是接种疫苗的前提,本次接种对象中少数出现注射部位肿痛或全

重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)

重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母) Chongzu Yixing Ganyan Yimiao (Niangjiu Jiaomu) Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant DNA Techniques in Saccharomyces Cerevisciae Yeast 本品系由重组酵母菌表达的乙型肝炎(简称乙肝)病毒表面抗原(HBsAg)经纯化、加入铝佐剂制成,用于预防乙型肝炎。 1 基本要求 生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。 2 制造 2.1 生产用菌种 2.1.1 名称及来源 生产用菌种为美国默克公司以DNA重组技术构建的表达HBsAg的重组酿酒酵母原始菌种,菌种号为2150-2-3(pHBS56-GAP347/33)。 2.1.2 种子批的建立 应符合“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。 由美国默克公司提供的菌种经扩增1代为主种子批,主种子批扩增1代 为工作种子批。 2.1.3 种子批检定 主种子批及工作种子批应进行以下项目的全面检定。 2.1. 3.1 培养物纯度 培养物接种于哥伦比亚血琼脂平板和酶化大豆蛋白琼脂平板,分别于20~25℃和30~35℃培养5~7天,应无细菌和其他真菌被检出。 2.1. 3.2 HBSAg基因序列测定 应与美国默克公司提供菌种的HBSAg基因序列保持一致。 2.1. 3.3 质粒保有率 采用平板复制法检测。将菌种接种到复合培养基上培养,得到的单个克隆菌落转移到限制性培养基上培养,计算质粒保有率,应不低于95%。 PR%= [A /(A+L)] ×100 式中PR为质粒保有率,(%); A为在含腺嘌呤的基本培养基上生长的菌落数,CFU/皿; A+L为在含腺嘌呤和亮氨酸的基本培养基上生长的菌落数,CFU/皿 2.1. 3.4 活菌率 采用血细胞计数仪器,分别计算每毫升培养物中总菌数和活菌数,活菌率应不低于50% 活菌率=活菌数/总菌数×100%

重组乙肝疫苗的研制生产过程、理化性质、生物学活性、临床应用

时间: 地点: 主讲:胡永珍 参加人员: 内容:重组乙肝疫苗的研制生产过程、理化性质、生物学活性、临床应用 国际上先后研制出了第一代血源性乙肝疫苗和第二代基因工程乙肝疫苗。第一代乙肝疫苗主要运用乙肝病毒携带者血清中提取纯化出的的乙肝病毒表面抗原,先后经过减毒处理和添加佐剂后注入人体预防接种。但是由于对血源性疫苗安全性存在顾虑,人们进一步着手开发第二代乙肝疫苗,也就是基因重组疫苗。第一步是分离目的基因,获得目的DNA片段的方法主要有两种,一是直接从细胞基因组中分离,二是人工合成。第二步是将DNA片段和载体在体外连接重组,成为重组DNA分子,多采用连接酶的方法连接。第三步是基因克隆,即将重组体DNA分子,引进合适的宿主细胞(大肠杆菌、酵母)中增殖。根据所用载体的不同,可选用转化(以质粒作载体时,重组体DNA分子以此种方式进入感受态的宿主细胞,以获得转化子菌落)、转染(λ噬菌体作载体时,构成的重组体DNA分子,以此种方式进入宿主细胞,可转染得到噬菌斑)、转导(λ噬菌体DNA与外源DNA组成的重组体DNA分子,与噬菌体蛋白组装成具有感染力的噬菌体颗粒,即人工包装的噬菌体颗粒,引入宿主细胞)的方法,往宿主细胞引入重组体DNA分子。第四步是目的基因克隆的筛选与鉴定,即从大量携带重组体DNA分子的细胞中分离出带目的基因的细胞。因为不是所有的细胞都能获得重组体DNA分子,为了获得摄取了重组体DNA分子细胞,需经筛选,才能将其与未摄取重组体DNA分子的细胞区别开来,并作进一步鉴定。筛选含有重组体DNA分子细胞的方法,一般都是以载体DNA及目的基因的遗传标记及分子特征为依据,并结合受体细胞的基因表型而建立起来的。由于许多质粒都具有抗生素等药物的抗性标记,因此,在含有一定浓度抗生素的选择培养基上,可以很容易地把摄取了重组体DNA分子,因同时也获得了抗生素抗性的细胞辨认出来。但药物筛选只是一个方面,依据它只能判断质粒载体是否进入了受体细胞,还不能确定受体细胞是否摄取了含有目的基因的重组体DNA分子。 对于重组体DNA分子的鉴别,通常是在抽提出重组质粒DNA后,用凝胶电泳法或电镜观察其分子大小,用限制酶酶解,观察其酶切图谱进行。还可采用菌落原位杂交法来进行鉴定,即将菌落从最初生长的平板上转移到硝酸纤维素滤膜上,用碱裂解滤膜上的菌落,使DNA分子游离,变性,并固定在滤膜上,随即用同位素标记的与目的基因互补的DNA或RNA探针杂交,最后通过滤膜的放射自显影鉴定菌落,并从最初生长的平皿上挑选出放射自显影呈阳性的菌落。第五步是基因表达,这是指宿主细胞在大量繁殖过程中外源DNA在宿主细胞中的转录和翻译,表达生成的产物(蛋白质),最好在细胞内不被分解,而分泌到细胞外面。表达产物若为较小的多肽,或是对细菌蛋白酶极为敏感的蛋白质,形成后,通常即被迅速降解。为了保证外源基因表达产物能分泌到细胞外而不被降解,通常可以把外源基因插入在载体的某些结构基因中间,在这种情况下,表达产物是融合蛋白质,融合蛋白质可以抵抗内源蛋白酶的降解,又可以在细胞信号肽的引导下分泌到细胞外。最后,利用发酵工程培养重组与乙肝疫苗的工程菌理化性质从热稳定性方面说酵母源乙型肝炎疫苗37℃保存1周不改变其免疫原性乙肝疫苗,主要成分是45个氨基酸的多肽,通过化学合成的方式制备,使用直接注射的方法打入静脉。这45个氨基酸分别编码了三个抗原表位(所谓表位,是一串大于9个氨基酸的多肽,是能够刺激免疫系统发生反应的最小多肽片段):,HBscFv等电点理论值为8.5 1,实验值为7.3~8.1(就是抗体)综上所述,用基因工程法生产乙肝疫苗要先后将过获取目的基因、构建重组质粒、构建基因工程菌、培养工

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