院感细菌培养操作
1.目得: 医院就是病原微生物较集中,抵抗力低得人群密集得地方,加之化疗、放疗等手段得采用,影响病人免疫机能下降,大量使用抗生素,引起耐药菌株增多,菌群失调,以及先进医疗仪器广泛应用等原因,增加消毒灭菌得难度,致使院内感染已成为当前医疗实践得严重障碍,直接影响医疗效果。进一步规范院内感染监测标本得程序,更好、更快检测病原微生物得生长情况,预防医院感染得发生。
2.设备、试剂与材料
2、1 VITEK 2 pact鉴定药敏分析系统
2、2 VITEK 32鉴定药敏分析系统
2、3美国FORMAⅡ级生物安全柜
2、4显微镜
2、5酒精灯
2、6接种环
2、7恒温培养箱
2、8各种培养基
2、9 革兰氏染色液
2、10触酶试剂
2、11氧化酶试剂
2、12移液器
2、13无菌吸嘴
3.院感标本采集
3.1空气得采样
3.1.1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。
3.1.2采样高度与地面垂直高度80150CM。
3.1.3布点方法室内面积＜30m2,设一条对角线上取三点,即中心一点,两端各距墙1m处各取一点;室内面积＞30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。3.1.4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。
3.2物体表面采样
3.2.1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。
3.2.2采样面积被采表面＜100cm2,取全部表面;被采表面＞100cm2,则取100cm2。
3.2.3采样方法用5×5 cm2得标准来灭菌规格板,放在被检物体表面,用无菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液得棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样14个规格板面积,剪支手接触部位,将棉拭子放入装10ml采样液得试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体得方法采样。
3.3医护人员手采样
3.3.1采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。
3.3.2采样面积及方法被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水采样液得棉拭子一枝在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积30 cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去手接触部位,将棉拭子放入装有10ml采样液得试管内送检。采样面积按平方厘米(cm2)计算。
3.4医疗用品采样
3.4.1采样时间在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样。
3.4.2采样方法右用破坏性方法取样得医疗用品,如输液(血)器、注射器与注射针等,取其中得一部分放培养液中培养。对不能用破坏性方法取样得特殊医疗用品,可用浸有无菌生理盐水采样液得棉拭子在被检物体表面涂抹采样,被采表面＜100cm2,取全部表面;被采表面≥100cm2,取100cm2。
3.5使用中消毒剂得采集
3.5.1采样时间采取使用中得消毒剂。
3.5.2采样方法在无菌条件下,用无菌注射器抽取1ml被检样品,加入10ml稀释液混匀。(对于醇类与酚类消毒剂稀释液用灭菌生长盐水;对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入0、1%硫代硫酸钠;对于洗必泰、季铵盐类消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入3%(w/v)吐温80与0、3%卵磷脂;对于醛类消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入0、3%甘氨酸;对于含有表面活性剂得各种消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入3%(w/v)吐温80,以中与被检样液得残效作用。)
3.6内镜得采样
3.6.1咽喉镜、支纤镜用10ml戊二醛中与液冲洗内镜后,送检实验室。
3.6.2胃镜、消化镜、宫腔镜用10ml0、1%硫代硫酸钠中与液冲洗内镜后,送检实验室。3.6.3鼻咽镜、过氧化氢消毒得腔镜类用10ml生理盐水中与液冲洗内镜后,送检实验室。
3.7透析液得采样用灭菌得空试管取透析液10ml送检。
4.院感标本得运送及交接签收
4.1标本得采集
4.1.1空气标本得采集由临床科室负责完成,标本采集完毕,由临床各科在规定得时间内将标本安全送回实验室。
4.1.2物体表面、医务人员手、消毒剂、内镜等由院感科负责组织采样,在规定时间内将标本安全送达实验室。
4.2采样后必须尽快对样品进行相应指标得检测,送检时间不得超过6小时,若样品保存于04℃条件时,送检时间不得超过24小时。
4.3标本收回实验室后,将标本得信息登记在“院感监测登记本”上。
4.4微生物室工作人员得验收根据微生物室院感标本拒收标准进行检查,对不符合要求得,将拒收,立即退回给送检人员,指出问题,告知标本重取,所有拒收标本均需在《标本拒收记录本》上登记。拒收情况如下:
4.4.1空气培养平板数目击者不正确(房间小于30平方米做3个平板培养,房间大于30平方米做5个平板培养)。
4.4.2未注明标本采集科别、来源与培养目得。
4.4.3标本明显受污染。
5.检测步骤见本文件末面流程图
5.1空气标本得检测
5.1.1细菌室收到标本后,将标本编写当日日期,用平板压住验单,直接放入35℃培养箱培养48小时后,观察结果。
5.1.2有菌生长,则挑取可疑菌落进行鉴定,排除金黄色葡萄球菌、β溶血链球菌、铜绿假单胞菌等致病微生物得检出。
5.1.3结果计算及菌落换算空气细菌菌落总数(cfu/m3)=50000N/AT,式中A——平板面积,cm2;T——平板暴露时间,min;N——平均菌落数,cfu/平皿。即平皿上1个菌落等于空气中菌落数为157 cfu/m3 ,如果标本为3个点时换算=平皿上得菌落数×157÷点数。
5.2物体表面样本检测
5.2.1细菌室收到标本后,将标本编号,振摇80次后,吸500ul于普通琼脂平板中,把平板摇均匀,放入35℃培养箱培养48小时后,观察结果。
5.2.2有菌生长,则挑取可疑菌落进行鉴定,排除金黄色葡萄球菌、β溶血链球菌、铜绿假单胞菌等致病微生物得检出,如为儿科、爱婴区、新生儿科、儿科ICU 得标本时,还要排除沙门氏菌得检出。
5.2.3结果计算及菌落换算物体表面细菌菌落总数(cfu/c m2)=平皿上菌落数×采样液稀释倍数(A)/采样面积(cm2)。采样液稀释倍数即就是采集液总量与接种得采集液量之比值,即平皿上1个菌落等到于物体表面上菌落数为0、2cfu/cm2。。。
5.3医护人员手样本检测
5.3.1将标本编号,振摇80次后,吸500ul于普通琼脂平板中,如为儿科、爱婴区、新生儿科、儿科ICU 得标本时,加做一个HE平板,以监测沙门氏菌得检出。把平板摇均匀,放入35℃培养箱培养48小时后,观察结果。
5.3.2有菌生长,则挑取可疑菌落进行鉴定,排除金黄色葡萄球菌、β溶血链球菌、铜绿假单胞菌等致病微生物得检出。
5.3.3结果计算及菌落换算手细菌菌落总数(cfu/c m2)=平皿上菌落数×采样液稀释倍数
(A)/30×2(cm2),即平皿上1个菌落等到于物体表面上菌落数为0、33cfu/cm2。
5.4灭菌或一次性医疗用品样本检测
5.4.1样本采集完成后,接种于肉汤培养基,置35℃培养箱培养7天,每天观察一次,培养基有混浊则转种普通平板继续培养,观察最后结果。
5.4.2有菌生长,则挑取可疑菌落进行鉴定,结果报告就是否检出细菌。
5.5使用中消毒剂
5.5.1细菌室收到标本后,将标本编号,振摇80次后,吸500ul于普通琼脂平板中,如为儿科、爱婴区、新生儿科、儿科ICU 得标本时,加做一个HE平板,以监测沙门氏菌得检出。把平板摇均匀,放入35℃培养箱培养48小时后,观察结果。另接种于1个沙保劳培养基,置28℃培养箱培养7天,每天观察一次,观察最后结果。
5.5.2有菌生长,则挑取可疑菌落进行鉴定,结果报告就是否检出细菌及真菌。
5.5.3结果计算及菌落换算使用中消毒剂细菌菌落总数(cfu/ ml )=平皿上菌落平均数×采样液稀释倍数(A)/采样体积(1ml),即平皿上1个菌落等于消毒剂中菌落数为10 cfu/ ml。
5.6灭菌效果监测
5.6.1压力蒸汽灭菌效果监测采用嗜热脂肪芽胞杆菌菌片,放于溴甲酚紫蛋白胨水指示剂中,标本送检后,把里面得玻璃压碎,置于56℃培养箱培养48小时,如指示剂颜色为紫色,说明无嗜热脂肪芽胞杆菌生长;如指示剂颜色为黄色则说明有嗜热脂肪芽胞杆菌生长。
5.6.2气体灭菌效果监测采用枯草芽胞杆菌菌片,放于溴甲酚紫蛋白胨水指示剂中,标本送检后,置于35℃培养箱培养48小时,如指示剂颜色为紫色,说明无枯草芽胞杆菌生长;如指示剂颜色为黄色则说明有芽枯草胞杆菌生长。
5.7内镜标本检测
5.7.1将标本编号,用旋涡器充分震荡(振摇80次),取0、5ml,加入直径9CM得普通琼脂平板上,把平板摇均匀,放入35℃培养箱培养48小时后计数,观察结果。
5.7.2有菌生长,则挑取可疑菌落进行鉴定,排除金黄色葡萄球菌、β溶血链球菌、铜绿假单胞菌等致病微生物得检出。
5.7.3结果计算及菌落换算细菌菌落数/镜=平皿菌落数×20
5.8透析液样本检测
5.8.1将标本编号,振摇80次后,吸200ul于普通琼脂平板中,反平板摇均匀,放入35℃培养箱培养48小时,观察结果。
5.8.2有菌生长,则挑取可疑菌落进行鉴定,排除金黄色葡萄球菌,、β溶血链球菌、铜绿假单胞菌等致病微生物得检出。
5.8.3结果计算:透析液细菌菌落总数=平皿菌落数×5
6.质量控制
6.1做好培养基及样本采集液得质量控制,确保其无菌以及适宜于细菌得生长。
6.2标本采集严格按照采集要求进行。
6.3做好培养箱得温度控制。
7.各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数卫生标准,见下表
7.2致病性微生物不得检出金黄色葡萄球菌,、β溶血链球菌及其她致病性微生物。在可疑污染情况下进行相应指标得检测,母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房得物体表面与医护人员手上,不得检出沙门氏菌。
7.3医疗用品卫生标准
7.3.1进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜得医疗用品必须无菌。
7.3.2接触粘膜得医疗用品细菌菌落总数应≤20cfu/g或100 cm2,致病性微生物不得检出。
7.3.3接触皮肤得医疗用品细菌菌落总数应≤200cfu/g或100 cm2,致病性微生物不得检出。
7.4使用中消毒剂卫生标准使用中消毒剂:细菌菌落总数应≤100 cfu/ml;致病性微生物不得检出。
7.5内镜消毒后得卫生标准细菌菌落总数应＜20cfu/件;致病性微生物不得检出。
7.6透析液消毒后得卫生标准
7.6.1入水口细菌菌落总数应＜200cfu/ml;致病性微生物不得检出。
7.6.2出水口细菌菌落总数＜2000cfu/ml;致病性微生物不得检出。
8.院感标本报告得录入
8.1在电脑点击“院感系统”,进入“院内检测”,在“环境卫生学及消毒灭菌效果监测结果”中根据检测得结果输入相关得项目。输入抽检科别、标本类别、抽检项目、报告结果/细菌总数、标本单位、检出细菌、送检日期、报告日期、检验者、院感受办抽查、次数。结果输完后按保存键,审核无误后按审核键。按录入键继续下一标本得录入。录入完毕退出系统。
8.2阴性院内感染监测标本得报告方式
8.2.1空气、物体表面、消毒液、灭菌生物监测菌片培养结果阴性发报告为“无菌生长”。
8.2.2无菌物品培养结果阴性发报告为“无细菌生长”。
8.3阳性院内感染监测标本得报告方式
8.3.1空气培养结果阳性发报告为“XX cfu/m3”。
8.3.2物体表面培养结果阳性发报告为“XX cfu/cm2”。
8.3.3消毒液培养结果阳性发报告为“XX cfu/ml”。
8.3.4生物监测菌片培养结果阳性发报告为“检出枯草芽胞杆菌/嗜热脂肪芽胞杆菌”。
8.3.5无菌物品阳性发报告为“检出细菌”。
9.参考文献
[1]中华人民共与国卫生部,制定,医院感染管理文件汇编,附录A:采样及检查方法。
[2]任南,主编, 实用医院感染监测方法与技术,湖南,湖南科学技术出版社,2008、3、
院感标本处理流程图
备注:编号规则按手、物表、台面由1号起编,消毒液由101起编,大肠杆菌快速测试由201起编,生物菌片由301起编,无菌物品由401起编,空气培养由501起编。各类标本各自为序。
普通细菌培养鉴定操作规程
普通细菌培养鉴定操作规程 1 检验目的 做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导临床治疗及预后和流行病学的调查。 2 原理 人体很多部位与外界相通，存在栖息菌群，但不致病，当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义；另外机体某些部位是无菌的，如检出细菌则视为致病菌。并排除采样及操作污染。 3 标本要求 （1）标本类型：血液，骨髓，脑脊液，胸水，腹水，尿液，等体液；痰液，前列腺液，脓液，组织分泌物或穿刺液等。 （2）标本采集：见标本采集手册 （3）标本储存和运输：室温放置，室温运输并立即送检。 （4）标本拒收状态：非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。 4 容器和添加剂类型 均使用灭菌器皿盛放标本 5 试剂 （1）试剂名称：革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、中国蓝平板、SS平板、柯玛嘉平板、相关生化试剂等。 6仪器设备： （1）接种针、接种环、酒精灯 （2）梅里埃ATB药敏鉴定仪 （3）显微镜、SPX-150B型生化培养箱、超净工作台、台式离心机、天平 7 校准程序 (送市计量质量检测研究所校准) 8操作步骤
（1）所有标本按照培养目的增菌培养12-18小时后盲目接种，血培养发现阳性立即进行接种。 （2）接种：以上增菌标本及其他临床标本用接种环取标本接种环划线血平板及其他选择性培养基上,35℃培养过夜，观察结果。 （3）涂片：肉眼见细菌生长，取生长物涂片做革兰氏染色； （4）纯培养：根据需要接种血平板、巧克力、中国蓝/柯玛嘉或厌氧平板过夜培养以获得纯培养。 （5）鉴定：按照鉴定仪要求调配菌液浓度，细菌的鉴定见梅里埃ATB微生物鉴定系统 9质量控制： 参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动 10 生物参考区间 血液，尿液，脑脊液等无菌部位采取的标本未见细菌生长；其他标本如大便，痰液为正常菌群或未见致病菌。 11 患者检验结果的可报告区间 细菌鉴定到种或属；菌群调查报告比例。 12 临床意义： 为医生提供病原学诊断，并为进一步药敏实验提供依据。
生化培养箱标准操作规程
1.目的 规范SPX-100B-Z型生化培养箱的使用、维护与保养。 2.范围 适用于SPX-100B-Z型生化培养。 3.职责 QC人员对本规程的实施负责，部门负责人监督实施。 4.规程 4.1准备操作 4.1.1接通电源，打开电源开关，使开关在“通”的位置（“I”为通，“O”为断），设备 进入上电状态。此时即可开始温度和时间的设定操作。 4.1.2温度/时间键可进行温度与时间切换： 4.1.3温度设定：按一下温度/时间键，仪表的温度设定指示灯亮。按设定键SV状态，设定 窗三个数字中有一个数闪烁，再按移位键（<）将闪烁数位移至需设定位，然后按△或▽键即可改变温度设定值到所需温度（最小值0℃），最后按下设定键将设定值存入单片机，此时左显示窗测量温度，右显示窗显示设定温度。 4.1.4时间设定：按下温度/时间键，仪表的时间设定指示灯亮。按设定键TV状态，设定窗 三个数字中有一个数闪烁，再按移位键（<）将闪烁数位移至需设定位，然后按△或▽键即可改变时间设定值，直到所需时间（最小值1h），最后按下设定键将设定值存入单片机，此时左显示窗测量时间，右显示窗显示设定时间。 4.1.5定时功能：仪器送电时，定时功能开始启动。定时结束后，输出关闭。加热器和制 冷压缩机停止工作，培养箱内温度逐渐达到外界环境温度。 4.1.6状态指示：设定完成后设备按设定好的参数运行。当测量温度低于设定温度时，设备 进入加热状态，加热指示灯亮。反之，当测量温度高于设定温度时，设备进入制冷状态。当测量温度高于设定温度4℃时，警报指示灯亮，蜂鸣声也发出鸣叫。 4.1.7参数修改：运行中若要修改温度、时间参数，再按程序2.2.1、2.2.2进行修改。 4.1.8快速设定：在设定参数时，三个数字中有一个数闪烁，若按△键则设定值末位数加 1；若按此键不放开，约3秒钟后，设定值连续加1；若按▽键则设定值末位数减1； 若按此键不放开，约3秒钟后，设定值连续减1。 4.2清洁、维护与保养 4.2.1仪器使用完毕后，及时清洁仪器表面，如仪器表面有污迹，可用软布沾清洁剂清洗， 并填写使用记录。 4.2.2驱潮处理方法：每季度按使用条件通电加温运行5小时，并每隔2小时开一次门放掉 潮气，以驱除电气部件的潮气，避免损坏有关器件。
无菌室沉降菌测试标准操作规程
无菌室沉降菌测试标准操作规程 一、目的：建立无菌室中沉降菌的测试标准操作规程，保证微生物检验在规定洁净级别内进行。 二、范围：无菌室的沉降菌的监测。 三、依据：国家标准GB/T 16294-1996。 四、职责：微生物检验人员对本制度的实施负责。 五、内容 1、菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。通常用个数表示。 2、测试方法：沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经48小时以上培养，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室的洁净度。 3、所用的仪器和设备 1）高压灭菌锅锅 2）恒温培养箱：必须定期对培养箱进行检定。 3）培养皿：一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20分钟。 4、培养基：普通营养琼脂培养基。将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15m1。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入30～35℃恒温培养箱中培养数小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2～8℃的环境中存放。 5、测试步骤 1）采样方法：将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上盖后倒置。 2）培养，时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验，检查培养基本身是否污染，可每批选定3只培养皿作对照培养。 3）菌落计数：用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。 6、注意事项 1）测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。 2）采取一切措施防止人为对样本的污染。 3）对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。 4）由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。 5）采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。 7、测试规则 1）测试状态 （1）沉降菌测试前：被测试洁净室（区）的温湿度须达到规定的要求，静压差、必须控制在规定值内。被测试洁净室（区）已消毒。 （2）测试状态有静态和动态两种，并在报告中注明测试状态。 （3）测试人员：测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。静态测试时，室内测试人员不得多于2个人。
spx-250b-z生化培养箱操作规程
SPX-250B-Z生化培养箱操作规程 编制人： 审核人： 批准人： 批准日期： 版号：第1版 实施日期：2014年01月01 日 控制状态：
SPX-250B-Z生化培养箱操作规程 1 目的 为规范和指导SPX-250B-Z生化培养箱操作和使用，制定本作业指导书。 2 适用范围 适用于SPX-250B-Z生化培养箱的操作和仪器的维护。 3 仪器参数 公称容积：100L、150L、250L 电源电压：交流220V/50Hz 温度范围：5~50℃ 温度波动: ±1℃(100L、150L、250L) 输入功率：300VA（100L、150L） 360VA（250L） 工作环境：环境温度10-30℃；相对湿度70%一下 4 安装 4.1备需安装于避开阳光直射，通风干燥的室内，设备与墙壁必须有10cm以上距离。 4.2体可用底部调节螺钉调节，使箱体安置平稳。 4.3设备使用交流220V/50Hz电源，必须有可靠接地线。 5 使用方法 5.1接通电源，打开电源开关，使开关处于“通“的位置。 5.2温度设定：按一下温度/时间键，仪表的温度设定指示灯亮。按设定键进入SV状态，设定显示窗三个数字中有一个数闪烁，再按移位键将闪烁数位移至需设定位，然后按上下键即可改变温度设定值到所需温度（最小值0℃），最后按下设定键，此时左显示窗显示测量温度，右显示窗显示设定温度。 5.3时间设定：按一下温度/时间键，仪表的时间设定指示灯亮。按设定键进入TV状态，设定显示窗三个数字中有一个数闪烁，再按移位键将闪烁数位移至需设定位，然后按上下键即可改边时间设定值（最小1小时），最后按下设定键，此时左显示窗显示测量时间，右显示窗显示设定时间。 5.4状态指示：设定完成后设备按设定好的参数运行。当测量温度低于设定温度时，设备进入加入状态，加入指示灯亮。反之，当测量温度高于设定温度时，制
生化培养箱的使用标准操作规程
生化培养箱的使用标准操作规程 1 目的 建立生化培养箱使用标准操作规程，规范生化培养箱操作程序， 保证该设备的正常运行 2 范围：适用于本公司生化培养箱的运行操作。 3 责任者：生化培养箱的运行操作人员、设备管理人员。 4 内容 4.1设备概况 生化培养箱是用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存， 是生物、遗传工程、医学等行业实验室作稳定性实验及生物培养的重要实验设备，该设备外形为立式，容积为80升，箱体及箱内均采用优质 钢板表面喷塑，采用双层玻璃观察窗的结构，箱内装有可控制的照明灯，不开箱门就可清晰观察箱内培养物品的状况，工作室采用优质镜面不锈钢版，内有由不锈钢丝制成的可方便移动的多层隔板，隔板的间距可灵活改变。电源开关、电源指示灯、控温仪等集中于箱体上部。 该设备采用高精度微机控温仪及控湿仪，具有响应快、超调小、精度高的特点，使用轻触按键设定参数，具有可调温差报警方式、可调定时控制方式、基本控制模式等基本功能。 4.2设备主要参数
4.4 操作前的准备 4.4.1 确认设备状态是否处于完好已清洁。 4.4.2 取下完好已清洁状态标识卡，挂上运行状态标识卡。 4.5 操作 4.5.1 设定工作温度（最高可设定到60℃） 4.5.1.1 打开电源开关，此时控温仪会进行自检并显示箱内温度。 4.5.1.2 按“SET”键设定工作温度，这时控温仪上显示的温度值会闪烁。 4.5.1.3 根据工艺要求按“▲”升高键或“▼”降低键不放设定工作温度。 4.5.1.4 到达设定温度后放开“▲”升高键或“▼”降低键，这时设定的显示值会闪烁。 4.5.1.5 按一下“SET”键确认设定温度，新温度设定后，这时控温仪就转换为显示箱内实际温度。
院感细菌培养操作
1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手段的采用，影响病人免疫机能下降，大量使用抗生素，引起耐药菌株增多，菌群失调，以及先进医疗仪器广泛应用等原因，增加消毒灭菌的难度，致使院内感染已成为当前医疗实践的严重障碍，直接影响医疗效果。进一步规范院内感染监测标本的程序，更好、更快检测病原微生物的生长情况，预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 2.1 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 2.2 VITEK 32鉴定药敏分析系统 2.3美国FORMAⅡ级生物安全柜 2.4显微镜 2.5酒精灯 2.6接种环 2.7恒温培养箱 2.8各种培养基 2.9 革兰氏染色液 2.10触酶试剂 2.11氧化酶试剂 2.12移液器 2.13无菌吸嘴 3.院感标本采集 3．1空气的采样 3．1．1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3．1．2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3．1．3布点方法室内面积＜30m2，设一条对角线上取三点，即中心一点，两端各距墙1m 处各取一点；室内面积＞30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。 3．1．4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。 3．2物体表面采样 3．2．1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。 3．2．2采样面积被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面＞100cm2，则取100cm2。3．2．3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板，放在被检物体表面，用无菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，剪支手接触部位，将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。3．3医护人员手采样
电热恒温培养箱操作规程
一、使用方法（步骤）： (1)将所需要培养或实验的物品放置内胆搁架上，关上箱门。 关于培养箱内培养品摆放的说明：所要培养或实验的物品请按顺序依次摆放进搁板上，请注意物品的摆放：请将物品的摆放在同一搁板上，相互之间要留出空间便于空气对流循环。 关于门把手开启箱门的说明：箱门的开启是通过门把手的动作来完成，门把手的开启为上下开启，门把手向上沿垂直方向按圆弧状缓缓提起为脱离搭扣，此时可开启箱门；门把手对准箱体搭扣，向下沿垂直方向按圆弧状缓缓按下为闭合搭扣，此时可闭合箱门。： (2)请确认设备的电源已接至220V的供电插座上，面板上的电源指示灯亮起；将左侧电源开 关键“0/1”按至“I”处，此时电源开关指示灯亮起，表明已有电源送至设备。 (3)此时两个上下显示窗依次显示“输入类型编码”，“温度范围编码”，最后PV显示窗显示的是当前箱内的实际温度，SV显示窗显示设定温度，此时设备按设定温度进行工作。 (4)在显示状态下，您可以通过设定“SET”键，“△”键，“V”键，来设定您实验工作时所需的温度和定时时间等功能，具体操作如下： a)温度设定：点击“设定”键，进入到温度设定状态，PV显示窗显示SU字样，通过增加、减少键在SV显示窗调整到所需的温度值：再按下设定键，保存并退出设定状态。 b)温度、时间切换显示：非设定状态下，点击“减小”键，可进
行温度、时间显示切换。 c)定时设定：非设定状态下，点击“减小”键，显示窗出现时间界面，时间指示灯亮，此时按下设定键，PV显示窗显示TJU字样，通过增加、减少键在SV显示窗调整到所需的定时值，再按下设定键，返回到温度显示界面（定时时间单位：分钟）。 ★定时功能说明：时间设为“0”时，表示没有定时功能，控制器连续运行；当设定时间不为“0”时，等测量温度达到设定温度后，定时器开始计时，时间到，运行结束，SV显示窗口显示“End”，蜂鸣器呜叫30秒钟，长按增加键4秒钟，程序重新开始运行。蜂鸣器呜叫时．可按任意键消音 关于定时功能的特别提示：本培养箱具有定时功能，定时的范围为1-999分钟，设定的时间最小单位为1分钟。当设定的时间为0分钟时，设备能连续工作。第一使用定时功能结束后， 再一次使用时设定的定时时间还保存在内，如不用定时功能请按“定时设定”把定时时间设为0。定时时间结束加热系统停止工作，Pv显示窗慢慢会显示出箱内的实际温度。 (5)培养结束后，请关闭电源开关，等物品冷却到一定温度后（最好等到降到室温后），再打开箱门取出物品，请注意物品的温度，小心烫伤。 二、设备使用注意事项： 1、9000系列干燥采用自适应温度控制，无须自整定，控制精度高，无超调。
无菌检查操作规程2015 (1)
无菌检查操作规程 1.目的 建立无菌检查标准操作规程，确保检查结果准确、可靠。 2.使用范围 本公司无菌产品的无菌检查 3.职责 质量部QC 4.依据 2015版《中国药典》通则1101 GB/T 19973.2-2005（ISO11737-2:1998） 《疗器械的灭菌微生物学方法第2部分：确认灭菌过程的无菌试验》 GB/T 14233.2-2005 《医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分：生物学试验方法》 5.内容 5.1.无菌检查环境保障 5.1.1.无菌检査的所有操作均需在严格控制微生物污染的环境下进行，即无菌检 査应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行。 5.1.2.操作环境的无菌保障程度将直接影响无菌检查结果，为了保证无菌检查用 洁净室（区）环境的稳定性，确保检查结果的可靠性，对洁净室（区）的环境定期监测并采取合理的措施保证洁净环境符合要求。 5.1.3.无菌检查全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 5.1.4.洁净区的温度、湿度等参数必须符合相应洁净级别的要求。 5.1.5.无菌检查操作还需要对检查环境进行监控， 5.2.培养基、稀释液、缓冲液 5.2.1.硫乙醇酸盐流体培养基，市售培养基干粉。除另有规定，接种后应置 30~35℃培养。 5.2.2.胰酪大豆胨液体培养基，市售培养基干粉。接种后应置20~35℃培养。 5.2.3.中和或灭活用培养基，按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培
养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法适用性试验。 5.2.4.胰酪大豆胨琼脂培养基，市售培养基干粉。 5.2.5.沙氏葡萄糖液体培养基，市售培养基干粉。 5.2. 6.沙式葡萄糖琼脂培养基，市售培养基干粉。 5.2.7.PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，市售培养基干粉。 5.2.8.0.9%无菌氯化钠溶液。 5.2.9.培养基使用性检查 无菌检査用的硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基等应符培养基的无菌性检査及灵敏度检査的要求。本检查可在供试品的无菌检査或与供试品的无菌检査同时进行。 5.2.9.1.无菌性检查：每批培养基随机取5支（瓶），按各培养基规定的温度下 培养14天，应无菌生长。 5.2.9.2.灵敏度检查 5.2.9.2.1.菌种：培养基灵敏度检查所用的菌株传代数不得超过5代(从菌种存中 心获得的干菌种第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以 证试验菌株的生物学特性。 金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003] 铜绿假单胞菌[CMCC(B)10 104] 枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63 501] 生孢梭菌[CMCC(B)64 941] 白色念珠菌[CMCC(F)98 001] 黑曲霉[CMCC(F)98 003] 5.2.9.2.2.菌液制备：接种金色葡萄球菌、铜绿假胞菌、枯草芽孢杆菌的培养物 至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭 菌的培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30?35℃培养18?24小时； 接种白色念珠菌的培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中或沙氏葡萄糖琼 脂培养基上，20?25℃培养24?48小时，上述培养后的新鲜培养物用 PH7.0无菌化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌化钠溶液制成每lml菌数小
院感细菌培养操作20813讲课讲稿
院感细菌培养操作 20813
1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手段的采用，影响病人免疫机能下降，大量使用抗生素，引起耐药菌株增多，菌群失调，以及先进医疗仪器广泛应用等原因，增加消毒灭菌的难度，致使院内感染已成为当前医疗实践的严重障碍，直接影响医疗效果。进一步规范院内感染监测标本的程序，更好、更快检测病原微生物的生长情况，预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 2.1 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 2.2 VITEK 32鉴定药敏分析系统 2.3美国FORMAⅡ级生物安全柜 2.4显微镜 2.5酒精灯 2.6接种环 2.7恒温培养箱 2.8各种培养基 2.9 革兰氏染色液 2.10触酶试剂 2.11氧化酶试剂 2.12移液器 2.13无菌吸嘴 3.院感标本采集 3．1空气的采样 3．1．1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3．1．2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3．1．3布点方法室内面积＜30m2，设一条对角线上取三点，即中心一点，两端各距墙1m处各取一点；室内面积＞30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。 3．1．4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。 3．2物体表面采样 3．2．1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。
3．2．2采样面积被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面＞100cm2，则取100cm2。3．2．3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板，放在被检物体表面，用无菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，剪支手接触部位，将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。 3．3医护人员手采样 3．3．1采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 3．3．2采样面积及方法被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一枝在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30 cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm2）计算。 3．4医疗用品采样 3．4．1采样时间在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 3．4．2采样方法右用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射器和注射针等，取其中的一部分放培养液中培养。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。 3．5使用中消毒剂的采集 3．5．1采样时间采取使用中的消毒剂。 3．5．2采样方法在无菌条件下，用无菌注射器抽取1ml被检样品，加入10ml稀释液混匀。（对于醇类与酚类消毒剂稀释液用灭菌生长盐水；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在灭菌生理盐水中加入0.1%硫代硫酸钠；对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在灭菌生理盐水中加入3%（w/v）吐温80和0.3%卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在灭菌生理盐水中加入0.3%甘氨酸；对于含有表面活性剂的各种消毒剂，需在灭菌生理盐水中加入3%（w/v）吐温80，以中和被检样液的残效作用。） 3．6内镜的采样 3．6．1咽喉镜、支纤镜用10ml戊二醛中和液冲洗内镜后，送检实验室。 3．6．2胃镜、消化镜、宫腔镜用10ml0.1%硫代硫酸钠中和液冲洗内镜后，送检实验室。 3．6．3鼻咽镜、过氧化氢消毒的腔镜类用10ml生理盐水中和液冲洗内镜后，送检实验室。 3．7透析液的采样用灭菌的空试管取透析液10ml送检。 4.院感标本的运送及交接签收 4．1标本的采集
MHP-250霉菌培养箱使用操作规程
MHP-250霉菌培养箱使用操作规程 1 目的：规范MHP-250霉菌培养箱的操作，保证培养效果。 2 范围：MHP-250霉菌培养箱 3 职责：化验员负责对仪器的使用，化验室主任负责对仪器使用情况的监督。 4 内容 4.1概述：MHP-250霉菌培养箱（以下简称培养箱）是具有冷热控制的高精度恒温设备，是细菌、霉菌、微生物培养及育种试验的恒温培养装置，特别适用于生物遗传工程，医学研究卫生防疫、药检、环境保护、农村科学、水产、畜牧等领域从事科研和生产使用的理想设备。 4.2技术参数 电源电压：220V±10% 50Hz。 功率： 650W 制冷剂：任选 控温测温范围：0～60℃。 显示分辨率：0.1℃。 温度波动：±0.5℃ 4.3使用方法： 点击设定键，进入到温度设定状态，通过增加、简少键修改所需的值；再按下设定键，进入到时间设定状态，时间小时区闪烁，再按下设定键，时间分钟区闪烁，可通过增加、减少键修改所需的值，再按下设定键，保存并退出设定状态。当时间设置“0”时，表示没有定时功能；当设定时间不为“0”时，则等测量温度达到设定温度，定时器开始计时，时间到，运行结束，“停止”字符点
亮，蜂鸣器鸣叫30秒钟，长按减小键4秒钟，程序重新开始运行，蜂鸣器鸣叫时，可用增加键消音。 照明（或灭菌）可按使用客户的需要，选择打开或者关闭，并有对应指示灯亮或灭。 在非设定状态下，点击“减小∕在运行∕背光”键可开关液晶屏的背光灯。 4.4注意事项 本产品搬运中，禁止倒置与大于45度平放。 在使用中不要频繁设定温度，以免压缩机频繁启动造成过载影响寿命。 箱内不需要照明时，应按一下照明键即关闭照明，以免影响上层温度，同时延长灯管使用时间。 箱内培养物品不宜存放太多，摆放应留有间隙，以利箱内空气循环。 切忌触摸、碰撞箱内感温探头，以免损坏造成失控。 请勿用酸、碱及其它腐蚀性溶液擦拭表面，可用干布擦净。当设备不用时，应保持箱内干燥，并切断电源开关置于“0”位置。 该产品必须有专业人员负责操作和维护，非电器人员不得检修该设备，严禁带电检修。 使用本设备前请认真阅读产品使用说明书，再进行各项操作。
生化培养箱操作规程
生化培养箱操作规程 1、接上培养箱电源，打开电源开关。 2、按参数选择开关，调节温度旋扭至所需温度，此时设 温显示所需温度。加热指示灯亮，测温温度逐渐和设温温度接近。 3、打开培养箱门，将所需培养的物品放入培养箱，关好 门后培养。 4、培养结束后，取出物品。 5、关好培养箱门，切断电源。 注意事项： 1、该设备使用三脚插头，插座应妥善接地。 2、为保证冷凝有效地散热，冷凝器与墙壁之间距离大于100MM. 3、严禁含有易挥发性化学溶剂，爆炸性气体和可燃性气体置于箱内；培养箱附近不可使用可燃性喷雾剂，以免电火花引燃。 4、为防止污染，低温使用时应尽量避免工作室内壁面凝结冰珠。 5、在培养箱架上放置试验用品，放置时各试验瓶之间应保持适当距离，以利于冷热空气对流。 6、工作时，应避免频繁开门，以保持温度稳定，同时防止灰尘污物进入。
高压锅操作规程 1、将水加到高压锅内至其刻度线，将欲灭菌品放入锅内，关 闭锅门，拧紧螺丝并确认已经封紧。 2、打开排气阀。 3、打开进水管开关，向锅内加水，并接通电源，使其产生蒸 汽。 4、观察排气阀的排气情况，待排除的气体由冷气变为蒸汽， 并排除均匀时，关闭排气阀。 5、将压力表达到0.05mPa时，打开放气阀放气一次，关闭放 气阀；然后等压力表再升到0.05mPa时，再放气一次。 6、关闭放气阀，当压力达到0.15mPa时，开始计时。 7、压力达到0.15mPa后，可调节变压器到150伏左右的位置 上，使其稳定在0.15mPa，即温度为121℃，维持15分钟消毒。 8、切断电源，让锅内物品自然冷却，不可马上打开排气阀， 以免发生意外。 9、待锅内压力降为零时，可打开锅盖，取出物品。
院感细菌培养
第一部分 卫生标准 1、各类环境空气、物体表面、医护人员手卫生标准 1.1、细菌菌落总数 允许检岀值见表1 表1各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数卫生标准 1.2致病性微生物 不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他致病性微生物。在可疑污染情况下进行相应指标的检测。 母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房的物体表面和医护人员手上，不得检岀沙门氏菌。 ________ 2、医疗用品卫生标准 2.1进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。 2.2接触粘膜的医疗用品 细菌菌落总数应w 20cfu/g或100cm2::致病性微生物不得检岀。 3、使用中消毒剂与无菌器械保存液卫生标准 3.1使用中消毒剂 细菌菌落总数应w 100cfu/ml，致病性微生物不得检岀。 3.2、无菌器械保存液必须无菌 4、污物处理卫生标准 污染物品无论是回收再使用的物品，或是废弃的物品，必须进行无害化处理。不得检岀致病性微生物。在可疑污染情况下，进行相应指标的检测。 第二部分 采样方法 1、采样及检查原则 采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h。若样品保存0—4C条件时，送检时间不 得超过24h。
2、空气采样方法 2.1 采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 2.2 采样高度与地面垂直高度80—150cm。 2.3 布点方法 室内面积w 30m2，设一条对角线上取3点，既中心一点、两端各距墙1m处各取一点：室内面积〉30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。 2.4 采样方法 用9cm 直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min 后送检培养。 3、物体表面采样方法 3.1 采样时间选择消毒处理后4h 内进行采样。 3.2 采样面积 被采表面v 100cm2，取全部表面：被采表面》100cm2,取100cm2 3.3 采样方法 用5 x 5cm2的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸1支，在规格板内横 竖往返各涂抹5 次，并随之转动棉拭纸，连续采样1—4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭纸放入装10ml 采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭纸直接涂抹物体的方法采样。 4、医护人员手采样方法 4.1 采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 4.2 采样面积及方法被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只 手涂擦面积30cm2）并随之转动采样棉拭纸，剪去手接触部位，将棉拭纸放入装有10ml采样液的试管内送检。 采样面积按平方厘米计算。 5、医疗用品采样方法 5.1 采样时间在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 5.2 采样量及采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990年版一部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水采 样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面v 100cm2,取全部表面；被采表面》100cm2，取100 cm2。 6、使用中消毒剂与无菌器械保存液 6.1 采样时间采取更换钱使用中的消毒剂与无菌器械保存液。 6.2 采样量及方法 在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml 被检样液，加入9ml 稀释液中混均，对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含典消毒剂、过氧化物消毒剂，需在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠；对于 洗必泰，季铵盐类消毒剂，需在肉汤中加入3% （w/v ）吐温80和0.3%卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在肉汤中 加入0.3%甘氨酸；对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需在肉汤中加入3% （w/v）吐温80，以中和备检样 液的残效作用。 6.3 结果分析 平板上有菌生长，证明被检样液有残存活菌，若每个平板菌落数在10个以下，仍可用于消毒处理（但不能用于灭菌），若每个平板菌落数超过10个，说明每毫升被检样液含菌量已超过100个，即不宜再用。 7、污染采样方法 7.1 采样时间 在消毒或灭菌处理后进行采样 7.2 采样量及采样方法按5.2 执行
洁净室(区)浮游菌测定标准操作规程
1.目的：建立一个洁净室（区）浮游菌测定的标准操作规程，确保洁净室（区）洁净程度。 2.范围：适用于洁净室和洁净区、无菌室或局部空气净化区域（包括洁净工作台）的浮游菌的测定和环境的验证。 3.责任：质量管理部QA监测员对本规程的实施负责。 4.程序： 4.1.术语和定义：下列术语和定义适用于本标准操作规程。 ：微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称CFU。通常用个数表示。 ，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 ，以计数浓度表示，单位是个/m3或个/L。 ，由使用者自行设定微生物含量等级。当检测结果超过该等级时，应启动监测程序对该区域的微生物污染情况立即进行跟踪。 ，由使用者自行设定一个微生物含量等级，从而给定了一个正常状态相比最早警戒的偏差值。当超过该最早警戒的偏差值时，应启动保证工艺或环境不受影响的程序及相关措施。 4.2.测试方法 ，经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数，以判定该洁净室的微生物浓度。 ，其中包含涉及的卫生知识和基本微生物知识。 洁净室（区）的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的
穿戴方式。 选择合适的浮游菌采样器，包括采用无油的抽气泵，较低的气流流速和较大的采样流量，以保证培养基表面的水分不被吹干。 本测试需要具备仪器、辅助设备和培养基如下： 浮游菌采样器、培养皿、培养基（见本标准附录B）、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器。 浮游菌采样器一般采用撞击法机理，可分为狭缝式采样器、离心式或针孔式采样器。狭缝式采样器由内部风机将气流吸入，通过采样器的狭缝式平板，将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基表面上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。离心式采样器由于内部风机的高速旋转，气流从采样器前部吸入从后部流出，在离心力的作用下，空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固形培养条上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。针孔式采样器是气流通过一个金属盖吸入，盖子上市密集的经过机械加工的特制小孔，通过风机将收集到得细小的空气流直接撞击到平板培养基表面上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。 本标准操作规程中使用的浮游菌采样器为狭缝式采样器。 ，定期对仪器作检定，使用校验合格，且在使用有效期内的仪器。 ，若必需，则先清洁表面，或在相应的洁净室内准备和存放（用保护罩或其他适应当地外罩保护仪器）。 ，上面应蒙上一张透明不沾尘的覆盖物，在A级洁净室内不能用铅笔和橡皮。 ，预热至稳定后，方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正，同时检查采样
sop微生物检查操作规程
sop微生物检查操作规程 1目的 建立微生物限度检查的标准操作规程，确保检验结果的准确性。 2 范围 适用于本厂质监科化验室对本厂生产的固体制剂及物料进行微生物限度的检查。 3 责任 化验员有责任按照本操作规程进行检验、判定,并对检验结果负责。 4 定义 微生物限度检查法系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，包括染菌量及控制菌的检查。 5 内容 5.1 总则： 5.1.1供试品应随机抽样。一般抽样量为检验用量（2个以上最小包装单位）的 3倍量。 5.1.2 供试品在检查前不得开启，检查全过程均应严格遵守无菌操作规程，严防 再污染。 5.1.3 控制菌的污染检查应做相应的已知菌对照试验，对照菌株为大肠杆菌 [CMCC（B）44102]，每批试验已知菌加入量为50-100个。 5.1.4 染菌量的检查或控制菌的检查均应做空白对照试验。 5.1.5 供试品稀释成稀释液后应在均匀状态下取样，凡有抑菌成份或防腐剂的供 试品应做特殊处理后进行检验。 5.1.6 供试品稀释后应在1小时内操作完毕。
第2页/共6页 5.1.7 除另有规定外，细菌培养温度为30-35℃，霉菌、酵母菌培养温度为 25-28℃，控制菌培养温度为36℃±1℃。 5.1.8细菌、霉菌检验结果的报告以1g、1ml或10cm2为单位；控制菌检验报告 以每1g、每1ml或每10cm2为单位报告“检出”或“未检出”。 5.2仪器、用具 恒温培养箱、隔水式生化培养箱、电子天平，移液管(1ml、10ml)、试管、离心管、双碟、镊子、剪刀、不锈钢吸管筒、酒精灯、取样勺、称量纸、研钵一个、不锈钢双碟筒。 5.2.1用具的包扎 移液管：用纱布包住移液管，然后放入不锈钢灭菌筒内。 试管、双碟：试管在管口塞上纱布棉塞、双碟放入不锈钢双碟筒内。 无菌衣、裤、帽、口罩：用布口袋将洗净的衣裤、帽子、口罩配套后装入，扎紧袋口，再用牛皮纸包好。 5.2.2用具的灭菌 将包扎好的用具，在121±0.5 ℃蒸汽灭菌柜中灭菌30 分钟，物品取出时切勿立即置冷处，以免急速冷却灭菌物品内蒸汽凝造成负压，易致染菌，应置烘箱烘干。 5.3培养基、试剂 5.3.1营养琼脂培养基 称取本品36克，加1升蒸馏水，加热溶解后，按需要进行分装，经121℃15分钟灭菌备用。 5.3.2虎红培养基 称本品30克，加1升蒸馏水，加热溶解，分装，高压灭菌116℃20分钟。 5.3.3胆盐乳糖培养菌（BL） 称本品36克，加1升蒸馏水，加热溶解，分装，高压灭菌116℃20分钟。 5.3.4曙红亚甲蓝琼脂培养基（EMB） 称本品42克，加1升蒸馏水，加热溶解，分装，高压灭菌116℃20分钟。 5.3.5生理盐水 称取9 g 氯化钠，加水1000 ml 溶解，分装后于121℃±0.5℃湿热灭菌30分钟，供作稀释剂用。 5.3.6 75%酒精棉 量取无水乙醇75ml，加水稀释至100ml，摇匀，将脱脂棉与75%酒精混合即得。
院感监测SOP(操作规程)
院感监测操作规程 一、目的： 为了预防和控制医院感染，提高医疗质量，确保医疗安全，需定期对院内感染相关的各项目进行监测，并及时发现院内感染薄弱环节及存在问题，为采取控制感染措施提供依据。 二、内容： 根据本院实际情况，需做院感监测的项目包括空气培养，手卫生，一次性物品细菌培养，无菌物品培养，高压锅灭菌效果生物监测，物体表面细菌培养，紫外线灭菌效果监测。 三、操作规程 1、层流手术室定义 不同级别的层流手术室，其空气洁净度标准不同 1）. 百级层流手术室的标准：每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤100颗（或每升空气中≤3.5颗）。可做关节置换、器官移植、脑外科、心脏外科、眼科等手术。（本院无） 2）. 千级层流手术室的标准：每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤1000颗（或每升空气中≤35颗）。本院有1间手术室，作为Ⅰ类切口无菌手术，如整形外科、胸外科肝胆胰外科等手术。3）. 万级层流手术室的标准：每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤10000颗（或每升空气中≤350颗）。本院有7间手术室，作为Ⅱ类切口，如单睑、鞍鼻等手术。 4）. 十万级层流手术室的标准：每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤100000颗（或每升空气中≤3500颗）。本院有5间手术室，作为Ⅲ类切口手术。 5）. 洁净辅助用房：本院为万级和10万级。 2、洁净手术室、洁净辅助用房要求 表1. 洁净手术室的等级标准 注：本院手术室等级为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级。
表2. 洁净辅助用房的等级标准 2、层流手术室静态空气净化效果的监测： 1）设备材料：90mm培养皿，普通培养基，37℃温箱. 2)采样时间：洁净手术室房间清洁并搽拭消毒后状态，然后进行测试，室内应无工作人员。 3)监测人员要求：穿洁净服，戴口罩，手卫生。动作要轻，避免产生二次污染。 4)布点顺序： 原则：放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始布置，依次向外，最后人员撤出。 每间房间都是从房间最靠里的点开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。 收取培养皿的顺序相反，从最外边的房间开始收，每间房间从门附近的培养皿开始收，最先布置的培养皿最后收，沉降时间略有差别。 5).布点高度：室内地面至0.8m高度的任意高度，若有固定设备、仪器、手术床等，可放置在设备上。 6).布点位置及数量：测试皿、对照皿在洁净间内均匀布置即可。 具体布点数量及位置[2] 洁净度局部千级设置9个点（●）洁净度局部万级设置7个点（●）洁净度十万级设置5个点周围万级设置4个点（▲）周围十万级设置2个点（▲） ▲▲▲ ●●● ●●●● ●●●●●●● ●●●● ○●●● ▲▲▲ 备注：千级手术室设○点为空白对照皿。操作方法：此培养皿打开后立即封盖。图上灰色区为手术床。7).采样方法：每个培养皿布点前必须按上述表格贴上手术室的级别、位置的标签。申请单上要注
最新院感细菌培养操作20813说课材料
1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低 的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手 段的采用，影响病人免疫机能下降，大量 使用抗生素，引起耐药菌株增多，菌群失 调，以及先进医疗仪器广泛应用等原因，增加消毒灭菌的难度，致使院内感染已成 为当前医疗实践的严重障碍，直接影响医 疗效果。进一步规范院内感染监测标本的 程序，更好、更快检测病原微生物的生长 情况，预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 2.1 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 2.2 VITEK 32鉴定药敏分析系统 2.3美国FORMAⅡ级生物安全柜 2.4显微镜 2.5酒精灯 2.6接种环 1.
2.7恒温培养箱 2.8各种培养基 2.9 革兰氏染色液 2.10触酶试剂 2.11氧化酶试剂 2.12移液器 2.13无菌吸嘴 3.院感标本采集 3．1空气的采样 3．1．1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3．1．2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3．1．3布点方法室内面积＜30m2，设一条对角线上取三点，即中心一点，两端各距 墙1m处各取一点；室内面积＞30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、 2.
北点均距墙1m。 3．1．4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。 3．2物体表面采样 3．2．1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。 3．2．2采样面积被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面＞100cm2，则取100cm2。 3．2．3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板，放在被检物体表面，用无菌规格 板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理 盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横 竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子， 连续采样1-4个规格板面积，剪支手接触 部位，将棉拭子放入装10ml采样液的试 管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭 子直接涂抹物体的方法采样。 3．3医护人员手采样 3.
电热恒温培养箱操作规程
电热恒温培养箱操作规程 一、使用方法 1、通电前，先检查培养箱的电气性能，并应注意是否有断路或漏电现象。 2、电热培养箱系列待一切准备就绪，可放入试品，关上箱门，适当调节排气阀；隔水式培养箱在通电前必须先加水，水位高低上指示不要超过水位指示线，下水位要显示得出。 3、若是指针式表，缓慢转动调整器，使电表指在“0”处，把设定钮的白色标注线对准所需要的温度值。合上电源开关至“开”处，仪表绿灯亮，此箱开始加热，随着箱温上升，温度指示针能及时显示测量温度值。当达到设定值时，仪表红灯亮，此箱停止加热，温度逐渐下降；当降到设定值时，仪表又转至绿灯亮，箱内升温。周而复始，可使温度保持在设定值附近。时间比例调节的仪表，当进入比例带后，仪表指示灯忽亮忽熄；反复多次，应红灯亮，此箱不加热。当设定高于室温时，应绿灯亮，此箱开始加热，随着箱温上升，当达到设定值时，仪表红灯亮，此箱停止加热，温度逐渐下降；当降到设定值，仪表又转至绿灯亮，箱内升温。周而复始，以下同于提针式表。当采用时间比例、过零、移相调节功能的仪表时，面板上有“手动再调”式上限设定的电位器，用于当加热系统平衡时，因负载加热功率的大小，至使产生实测值高于或低于设定的静差修正，调节该电位器，即可消除偏差，以适应不同情况。 4、温度恒温时，其温度往往会继续上升，这是余热影响，此现象约九十min 后趋于稳定。 5、物品放置箱内不宜过挤，以便冷热空气对流不受阻塞，以保持箱内温度均匀。 二、注意事项 1、箱体必须有可靠的接地，以确保安全。通电时切忌打开箱体左侧门内有电器线路，防止触电，切勿用湿布揩抹，更不能用水冲洗。 2、打开大门观察试物时，不能将水点溅在玻璃上，以防玻璃受骤冷而爆裂。 3、移动箱体必须先切断电源，将箱内的物品取出，防止触电和碰损。 4、本型号系非防爆性产品。 5、易燃物品不宜放入箱内作烘焙试验，如需作烘焙试验，事先应测得各物品
霉菌培养箱操作规程
霉菌培养箱操作规程 一、使用说明 1．设备到位后，锁紧前脚轮，使箱体安置平稳。 2．接通220V/50Hz电源，且电源插座应有可靠接地。 3．控制器操作说明。(配用仪表，PC-2002-PT100) 1)面板示意图参照图： 面板上左窗口3位数码管，可显示测量温度或设定温度，右窗口4个数码管可 显示设定时间或计时值（倒计时），同时对应的指示灯亮。 2)面板右下部为一组按键，功能分别如下： ①温度／时间键在上电状态下，按一下该键，仪表进入温度设定状态，仪表左窗口显示原先设定的温度值，且末位数码管闪烁，同时温度设定指示灯亮，用户可根据需要修改参数。再按一下，仪表进入时间设定状态，仪表右窗口显示原先设定的时间值，同时时间设定指示灯亮，用户可根据需要修改参数。（若工作时间设定为000，则表示定时器不工作，在此状态下运行时，右窗口显示设定温度）再按一下该键，则又回到温度设定状态，如此循环。 按住该键不松开，约5秒后，仪表进入其他参数设定状态，左、右窗口分别显示： sc **.*表示温度修正值（一～+℃）(出厂值0) dEL ***表示压缩机延时时间(60～300秒)(出厂值180) AL ***表示超温报警温度～10．Ot)（出厂值）
设定完毕，按设定写入键退出设定状态。 若上电后，无任何键按下，约10秒后，仪表进入运行状态，计时指示灯亮，仪表根据设定的温度控制值，对系统进行温度控制，并根据设定的定时值，开始倒计时，当计时值为零后，仪表结束运行，仪表显示End，并有蜂鸣器输出，呜叫约30秒钟。用户若需再次运行，可按一下温度／时间键，10秒后，仪表自动进入运行状态。 ②▲键该键为加数键。在设定参数时，数字中有一个闪烁。若按该键，则设定数值末位数加1。若按住该键不松开，约2秒后，设定值连续加（时间连续加10）；按住该键不松开约5秒后，时间设定值连续加100。 ⑧▼键该键为减数键。在设定参数时，若按该键，则设定数值减l，若按住该键不松开，经3秒后，设定值连续减（时间连续减10）；按住该键不松开约5秒后，时间设定值连续减100。 ④设定写入键在设定完成后，按一下该键退出设定状态。 ⑤照明开/关键在任何时候，按一下该键，则照明控制继电器接通，再按一下，则继电器断开。 说明： ①仪表加热时，加热指示灯亮。 ②压缩机延时时间为所设定的dEL值。压缩机工作时，制冷指示灯亮；若此时压缩机延时保护时间未到，则压缩机继续等待，且制冷指示灯闪烁。 ⑧如果测量温度>设定温度+AL时，则有蜂鸣器报警，报警指示灯亮，