高效液相色谱法测定龙胆中龙胆苦苷的含量_刘少文
不同制剂中的黄芩苷含量测定方法与应用
不同制剂中的黄芩苷含量测定方法与应 用 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 【关键词】黄芩黄芩苷化学分析含量测定 黄芩苷具有抗菌消炎、降压利尿等作用，是中药黄芩的主要有效成分之一。黄芩苷几乎不溶于水、乙醚、苯、氯仿，难溶于甲醇、乙醇、丙酮，微溶于热冰乙酸、碳酸氢钠，易溶于N，N二甲基甲酸胺、吡咯。本文仅就不同制剂中黄芩苷含量测定方法与应用，介绍如下。 1 方法与应用 陶涛等［1］用薄层紫外分光光度法测定双解口服液中黄芩苷的含量，用硅胶H作固定相，乙酸乙酯—丁酮—甲酸—水(5∶3∶1∶1)为展开剂，样品液直接点样，刮下斑点后用50%乙醇洗脱，同时做空白，在岛津UV2100，278 nm处测定其吸收度，标准曲线为Y=18.871X+0.437(r=0.9999)，平均回收率为98.2%。该方法受主观因素影响较多，容易造成较大误差，重复性差已较少使用。
孟蕾蕾［2］用双波长紫外分光光度法测定小儿安金丸中黄芩苷含量，在以光束紫外可见分光光度计TU1901下测定,参比波长为250 nm，测定波长为278 nm，平均回收率为99.80%,RSD=1.23%，方法可靠。 颜耀东等［3］采用双波长薄层扫描法测定牛黄清胃丸中黄芩苷的含量，样品用甲醇提取，在聚酰胺板上用醋酸—乙醇(6∶1)，2次展开分离后,在岛津CS930双波长薄层扫描仪中以LR=280 nm，XS=207 nm进行扫描测定，平均回收率为98.19%,RSD=1.47%。应用该方法测定牛黄清胃丸中黄芩苷含量，分离效果好，结果准确。 卢劲伟［4］采用双波长薄层扫描法对凉膈散中黄芩苷含量进行测定,样品用50%乙醇提取,在聚酸胺薄膜上用30%醋酸展开,在岛津CS930双波长薄层扫描仪中以测定波长KS=282 nm;参比波长KR=360 nm,平均回收率为98.9%,RSD=1.03%。本法对黄芩苷分离效果好,不用特殊处理就可将干扰成分与欲测成分分离，方法简便、灵敏。 王增理等［5］采用二阶导数差示脉冲法对药材黄芩中有效成分黄芩苷的含量进行了测定，扫描范围为-0.60～2.40 mg/mL,扫描速度为50 mV/s,电流灵敏度为50 tA/V,脉冲振幅为20mV，结果平均回收率为99.69%,RSD=0.57%，表明该法精密度较高。
龙胆中化学成分的研究
龙胆中化学成分的研究 徐菁菁 吉林农业大学研究生学院 摘要：龙胆科植物龙胆（Gentiana scabra Bge.）作为药用植物已有悠久的历史，是以根入药为主的常用药材。目前的野生资源逐渐减少，药源只能以栽培龙胆为主，为用栽培龙胆弥补野生龙胆资源的不足，本文综述了龙胆化学成分的研究资料，以便今后对其进行深一步研究。 关键词：龙胆；化学成分 Study on The Chemical Constituents of Gentiana scabra Bge. Xu Jing-jing College of Graduate, Jilin Agriculture University Abstract:The plant of Gentianaceae, Gentiana scabra Bge. as medicinal plants have a long history, is the main root of the common herbs used as medicine. Gradually reduce the current wild resources, the source can only be cultivated Gentiana scabra Bge. mainly to make up the use of cultivated wild Gentiana scabra Bge. insufficient resources, this paper reviews the research data of the chemical constituents of Gentiana scabra Bge. for deep step of future research. Key words:Gentiana scabra Bge.；chemical constituents 1. 前言 龙胆（Radix Gentianae）为龙胆科（Gentianaceae）植物龙胆（Gentiana scabra Bge.）、三花龙胆（G.triflora Pall）、条叶龙胆（G.manshurica Kitag）或坚龙胆（G.riges cens Franch）的干燥根及根茎。前三种习称“关龙胆”，后一种习称“坚龙胆”[1]。主要分布于广西、四川、贵州、云南。春秋两季采挖、洗净、干燥。味苦、性寒，归肝、胆经。清热燥湿，泻肝胆火。用于湿热黄疸，阴肿阴痒，带下，湿疹瘙痒，肝火目赤，耳鸣耳聋，胁痛口苦，强中，惊风抽搐[2]。龙胆最早始载于《神农本草经》，列为中品[3]。梁代陶弘景的《名医别录》也有记载[4]。在临床上，龙胆是龙胆泻肝汤、泻青丸、当归龙荟丸等方剂的主药，具泻肝胆实火、清下焦湿热之功。具有保肝、利胆、健胃、中枢兴奋作用及抗炎、抗过敏及抗病原体的作用，抗菌作用也很明显[5]。主治高血压、头晕、耳鸣、小儿高热抽搐、乙型脑炎、肝胆实火之头胀头痛、目赤肿痛、耳聋耳肿、胸胁痛、胆囊炎、湿热黄疸、急性传染性肝炎、尿流感染、阴部瘙痒、小便淋痛、胃炎等症[6]。 许多龙胆属植物中含有龙胆苦苷(gentiopi- croside)，1854年，龙胆苦苷首次从龙胆科植物黄龙胆(gentiana lutea)中被分离得到，但其化学结构直到1968年才被完全弄清楚[7]。龙胆苦苷和獐牙菜苦苷均可促进细胞有丝分裂活动及胶原质的产生，加快创口愈合速度[8]。研究发现环烯醚萜类化合物及口山酮类化合物既是龙胆科植物的特征性成分也是主要的药
龙胆苦苷
龙胆中龙胆苦苷研究进展 1.龙胆苦苷简介 1.1龙胆苦苷的基本性质 龙胆有效药用成分中主要成分为龙胆苦苷，其广泛分布于龙胆属植物中。龙胆苦苷属于裂环烯醚萜苷类化合物的一种，容易在乙醇、甲醇以及水溶剂中发生溶解，其分子式为C16H20O9。龙胆苦苷性状为淡红/黄色或者白色针状结晶，存在内酯苷类化合物颜色反应，龙胆苦苷具有较强亲水性，而脂溶性则相对较差。英文名:Gentiopicroside 分子式：C16H20O9 化学名:5-Ethenyl-6-(β-D- glucopyranosyloxy)-5,6- dihydro- 1H,3H - pyrano[3,4-C]pyran-1-one 分子量：356 Mp: 191℃ [α]D: -196.3(H2O) UV:λmax 270(MeOH) 1.2龙胆苦苷的结构 2.龙胆苦苷的来源与应用 2.1龙胆苦苷的来源 本品为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、龙胆Gentiana scabra Bunge 、三花龙胆Gentiana triflora pall 或坚龙胆Gentiana rigescens Franch. 的干燥根及根茎.龙胆苦苷(Gent iopicroside)是龙胆科龙胆属植物龙胆的有效成分之一, 也是当药及獐芽菜等植物中的苦味成分, 属于裂环环烯醚萜苷类, 分子式为C16H20O9 , 白色粉末或淡黄(红)色结晶, 易溶解于水、甲醇及乙醇等溶剂, 阳光下易变色.龙胆具有利胆、抗炎、健胃、降压等作用。龙胆中主含环烯醚萜苷类成分，龙胆苦苷为其中主要有效成分。 2.1.1龙胆苦苷的植物来源 全球龙胆属龙胆科( Gentiana L．) 植物超过500种，其中以热带高山以及温带地区分布较为广泛，此类植物在我国也有广泛分布，其种类超过230 种，西南部为其主要产地，大部分龙胆属龙胆科植物均用于观赏，也有部分可入药。 2.1.2龙胆苦苷的药物来源 来源于龙胆的干燥根及根茎，也是当药及獐牙菜等植物的苦味成分。 2.2龙胆苦胆的应用 龙胆苦苷具有保护肝脏、抗氧化、抗炎、镇痛及抗肿瘤等作用. 2.2.1抗炎作用 陈长勋等[ 1]报道, 秦艽所含龙胆苦苷具有抗炎作用, 即龙胆苦苷可减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀, 抑制冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增加, 阻止角叉
桃仁中苦杏仁甙的HPLC含量测定
的生理作用[3]。黄连素是一种重要的生物碱，是我国应用很久的中药。可从黄连、黄柏、三颗针等植物中提取，具有显著的抑菌作用。黄连素在临床中一直作为非处方药用于治疗腹泻。肠易激综合征临床特点主要是腹痛、腹胀、排便习惯和性状改变，一般持久性存在，间歇发作，患者常有常运动功能紊乱和肠道菌群失调。本研究治疗原则主要从松弛平滑肌、扩充肠容积性、促进肠动力角度出发进行治疗。本研究通过马来酸曲美布汀、双歧杆菌联合黄连素治疗肠易激综合征，观察其疗效，结果表明，观察组和对照组组内比较，治疗后临床症状评分均明显低于治疗前（P ＜0.05） ，观察组治疗前临床症状评分与对照组治疗前比较，无显著性差异（P ＞0.05） ；观察组治疗后临床症状评分低于对照组治疗后（P ＜0.05） 。提示马来酸曲美布汀、双歧杆菌联合黄连素治疗肠易激综合征对于改善患者的临床症状明显。另外本研究还发现，观察组治疗总有效率明显高于对照组（P ＜0.05） 。因此通过本研究表明，马来酸曲美布汀、双歧杆菌联合黄连素治疗肠易激综合征具有明显疗效，值得临床推广使用。参考文献 [1] 斯锞,廖文.马来酸曲美布汀联合双歧杆菌治疗功能性肠胀气疗 效观察[J].四川医学,2009,30(1):19-21. [2] 吴泽生.马来酸曲美布汀联合酪酸菌制剂治疗肠易激综合征的 疗效分析[J].华北煤炭医学院学报,2006,8(3):339-340. [3] 姚凡保,马海生,廖浩峰.双歧杆菌治疗感染后肠易激综合征58例 疗效观察[J].华夏医学,2009,22(1):77-78. 桃仁来源于蔷薇科Prunus 属植物，桃[Prunus persica （L.）Batsch.]或山桃[Prunus daridiana （Carr.）Franch.]的干燥成熟种子。收载于《中国药典》[1]，均含苦杏仁甙（amygdalin ）及苦杏仁酶（emulsin ）等物质[1]。苦杏仁甙含量测定在药典采用间接测定氢氰酸容量法[2]，而桃仁在药典无含量测定项。苦杏仁甙的测定方法还有分光光度法[3] 、HPLC 法[4]等。本实验系统与已报道的HPLC 系统相比，有效地提高了苦杏仁甙的分离度，相关性好，可用于桃仁的质量控制。1 材料 实验所用桃仁为市售品，经中药室鉴定，桃仁为山桃的干燥成熟种子。 岛津LC-10A 高效液相色谱仪，SPD-10A 检测器，C-R6A 数据处理机，甲醇为色谱纯，其他均为分析纯。 苦杏仁甙对照品采用中国药品生物制品检定所产品，批号820-20002，供含量测定用。2 方法和结果2.1 色谱条件 色谱柱Irregular HC 18（4.6mm ×250mm ，10μm ），检测波长210nm ，室温，流动相磷酸盐缓冲液（pH=5.0）∶甲醇（800∶200），流速1mL/min 。2.2 标准曲线 精密称取苦杏仁甙对照品12.50mg 置25mL 量瓶中加ω（甲醇）=0.5溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，分别吸取此溶液0.25、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 置l 0mL 量瓶中，用ω（甲醇）=0.5的溶液稀释至刻度，以20 μL 定量阀进样，测定峰面积A ，以A 减C 求得回归方程为Y=1.11×103X-1.31×103，r = 0.9999，结果表明浓度为12.5~250.0μg/mL 成良好的线性关系。2.3 精密度和稳定性实验 广州奇星药业有限公司（510310）桃仁中苦杏仁甙的HPLC含量测定 赵 耀 【摘要】目的 探讨用HPLC 法定量测定桃仁中苦杏仁甙的含量。方法 IrregularHC 18 (4.6mm ×250mm ，10μm)，流动相为磷酸盐缓冲液 （pH=5.0）-甲醇（800∶200）。结果 苦杏仁甙在0.25~5μg 成线性， r =0.9999，平均回收率100.7%，RSD=1.3%。结论 本方法分离效果好，重现性高，操作简单，可用于质量标准制定。【关键词】桃仁；苦杏仁甙；高效液相色谱法 中图分类号：R927.2 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2009）17-0084-02 2.3.1 将同一对照品溶液连续进样5次计算峰面积的RSD 为0.2%。2.3.2 同一样品溶液，在室温条件下，间隔一定时间，在0、2、4、8、12、24、48h 分别测定苦杏仁甙的含量，RSD 为0.5 %，表明样品在48h 内稳定。2.4 加样回收率试验 精密称取已知含量为2.24%的供试品0.2g ，分别加入对照品1~2mg ，按供试液方法制备，测定，计算回收率，结果平均值为100.7%，RSD 为1.3%（表1）。 表1 苦杏仁甙的回收率测定结果（n=5）取样量(g)样品含量(mg) 加入量(mg) 测定量(mg) 回收率(%)0.2139 4.79 1.52 6.33101.30.2106 4.72 2.10 6.8199.50.2033 4.55 1.73 6.2698.80.2100 4.70 1.21 5.94102.50.2221 4.98 1.65 6.65 101.2 2.5 供试品溶液的制备与测定 将供试品粉碎成粗粉，分别精密称取0.2g ，置索氏提取器中，用乙醚提取2h ，弃去乙醚，再用甲醇提取6h ，提取液转移到50mL 量瓶中，用ω（甲醇）= 0.5的溶液稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。取0.05mg/mL 的苦杏仁甙对照品溶液，分别进样20μL ，记录峰面积值，用外标法计算，结果见表2，色谱图见图1。3 讨 论 3.1 试验中如样品直接用甲醇超声提取，所得色谱杂质峰较多，干扰苦杏仁甙的测定，改用乙醚脱脂，甲醇回流提取后，杂质峰对苦杏仁甙无干扰。
(完整版)黄芩苷提取
项目一天然植物有效成分提取 子项目一、黄芩根中黄芩苷的提取 1、【项目目的】 （1）掌握黄芩苷不同提取工艺和操作要点，不同工艺对产品得率和品质的影响； （2）通过黄芩苷含量检测，掌握定性、定量方法在黄酮类物质检测中的应用；（3）通过对黄芩苷的单因素和正交实验优化，掌握正交方法在植物有效成分提取中的应用； （4）通过黄芩苷的提取工艺优化实训，掌握黄酮类物质提取的一般规律。 2、【项目任务】 （1）通过查阅文献，掌握水提法、醇提法在黄芩苷提取中的基本原理； （2）查阅文献设计不同的黄芩苷提取工艺，并结合正交实验进行黄芩苷的提取工艺优化，得到提取得率最大化； （3）查阅文献并结合黄芩苷国标检测方法，对提取中黄芩苷含量进行准确测定； （4）总结黄芩苷提取工艺各环节具体参数，得出最佳工艺条件，并分析存在的问题，各小组以PPT形式作出整体汇报。 3、【项目要求】 （1）能够全面准确采用单因素实验对可能影响提取得率的因素进行测定分析，同时确定主要影响因素； （2）在单因素的基础上进行正交分析，确定合适的因素和水平设计正交实验；（3）通过正交分析确定最佳提取工艺条件 4、【项目背景】 （1）黄芩及黄芩苷简介 黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi ）具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效。其主要成分黄芩苷（Baicalin）是从黄芩根中提取分离出来的一种黄酮
类化合物，具有抑菌、利尿、抗炎、抗变态及解痉作用，且具有较强的抗癌反应等生理效能。黄芩苷还能吸收紫外线，清除氧自由基，同时，又能抑制黑色素的生成，是一种很好的功能性美容化妆品原料，具有较高的开发利用前景。 黄芩化学成分研究逐渐为药学和化学工作者所重视，目前，国内对黄芩苷提取工艺的研究有较多报道，其提取方法主要有温浸法、煎煮法、微波法、超滤法等，但如何提高黄芩苷收率和纯度一直是实际生产中存在的问题，缺乏对整个工艺条件进行全面研究，因此，有必要对影响黄芩苷提取工艺及其影响因素作一全面探讨。 A、水提法 黄芩粉碎为20-40目，提取2次，物料比为10和5倍，时间为60 min和30 min，分离方式为先用双层细滤布过滤再离心分离，60℃用盐酸调 pH 2—3，再70℃保温60 min，静置3 h，蒸馏水分离洗涤两次，干燥得黄芩苷粗品，测量黄芩苷的含量，计算提取率。 工艺流程 原料选择→粉碎→煎煮→过滤→离心→调节Ph值→保温→静置→洗涤→粗制品→加蒸馏水溶解→调节Ph值→加乙醇→调节Ph值→冷却→过滤→干燥→成品。 B、回流提取法 黄酮苷类(如羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查耳酮等)一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取。其中用得最多的是甲醇一水(1：1)或甲醇。乙醇和甲醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂，高浓度的醇(如90％、95％)宜于提取甙元，60％左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取甙类物质。可以采用一定浓度的醇溶剂提取，测量黄芩苷的含量，计算提取率。
龙胆苦苷抗炎药理作用研究_陈长勋
?药理实验与临床观察? 龙胆苦苷抗炎药理作用研究 陈长勋1,刘占文2,孙峥嵘3,宋纯清1,胡之壁1a (1.上海中医药大学,上海 200032; 2.上海市同仁医院,上海 200050; 3.上海市金石药材有限公司,上海 200540) 摘 要:目的 研究秦艽所含龙胆苦苷的抗炎作用。方法 分别用二甲苯致小鼠耳肿胀,冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加及小鼠扭体反应,酵母多糖A、角叉菜胶、制霉菌素致大鼠或小鼠足跖肿胀模型,ig给药,观察龙胆苦苷的抗炎作用。结果 龙胆苦苷能减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀、冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶、酵母多糖A所致大鼠足跖肿胀,但对制霉菌素所致的炎症模型无明显作用。结论 秦艽所含龙胆苦苷具有一定的抗炎作用,其机制涉及对多种炎症介质的抑制。抗炎作用能部分代表秦艽生药的传统功效。 关键词:秦艽;龙胆苦苷;抗炎 中图分类号:R286.11 文献标识码:A 文章编号:02532670(2003)09081403 Studies on anti-inflammatory effect of gentiopicroside CHEN Chang-xun1,LIU Zhan-w en2,SUN Zheng-rong3,SONG Chun-qing1,H U Zhi-bi1 (1.Shang hai U niv ersit y of T CM,Shang hai200032,China; 2.Shang ha i T o ng r en Ho spit al,Shang hai200050,China; 3.Shang hai Jinshi M edicinal M ater ial Co.,L td,Shanghai200540,China) Abstract:Object T o study the anti-inflammatory effect of gentiopicro side extracted from Radix Gen-tianae M arrop hy llae.Methods The m odels o f aur icular edem a in m ice induced by dimethyl benzene,in-creased perm eability of celiac blo od capillary and body-tw isting reaction induced by acetic acid,paw sw elling induced by zym osan A,carrageenan and nystatin in rats or in m ice w ere prepared.Then g entiopi-cro side w as g iven to the r ats or m ice by ig.Results Gentiopicro side inhibited the auricular edem a,de-creased the perm eability of celiac blood capillary,r educed the paw sw elling induced by carr ageenan and zy-mosan A,but not by ny statio n.Conclusion Gentiopicro side ex tracted from R adix Gentianae Marrop hy l-lae,ex hibits o bvious anti-inflamm ato ry effects. Key words:Radix Gentianae M arr o p hy llae;gentio picr oside;anti-inflamm ation 秦艽是龙胆科龙胆属草本植物秦艽G entiana macr o p hy lla Pall.,麻花秦艽G.straminea M ax-im.,粗茎秦艽G.cr assicaulis Duthie ex Burkill或小秦艽G.dahur ica Fisch.的干燥根,为重要传统中药,具有祛风湿、止痹痛、清湿热的功效,临床用于风湿痹痛、筋脉拘挛、骨节烦痛、日晡潮热、小儿疳积发热等症。秦艽中的化学成分曾有不同报道。早期认为其主要含生物碱类成分,但近年的化学分析结果表明,秦艽乙醇浸液中含龙胆苦苷(gentiopi-cro side),对秦艽中确有的成分龙胆苦苷,目前国内尚无较系统的口服抗炎药理研究报道。故本研究针对龙胆苦苷进行抗炎方面的实验。 1 材料 1.1 供试品:龙胆苦苷粉末,从秦艽生药中提得,含量>95%,由上海中医药大学中药研究所生物工程研究室提供,实验前用蒸馏水配成所需浓度。 1.2 药品与试剂:消炎痛(粉剂),上海第十七制药厂产品,实验前用蒸馏水配成1mg/mL。酵母多糖A(zym osan A),Sig ma Chemical Co.产品,批号106H1088,实验前用生理盐水配成5m g/m L。角叉菜胶(carrageenan),瑞士Fluka公司产品,批号CH-9470,实验前用生理盐水配成10m g/m L。制霉菌素(ny statin),Sig ma Chem ical Co.产品,批号56H0470,实验前用生理盐水配成6m g/m L。 1.3 动物:昆明种小鼠,清洁级,动物合格证号:医动字第0224—03号;Wistar大鼠,清洁级,动物合格证号:医动字第02—24—04号,均由上海中医药大学实验动物中心提供。SD大鼠,清洁级动物,上 ? 814 ?中草药 Chinese T r aditio nal and Her bal D rug s 第34卷第9期2003年9月 a收稿日期:2002-12-18 基金项目:“九五”国家攻关课题(969030203) 作者简介:陈长勋(1948—),男,教授,博士生导师,上海中医药大学药理教研室主任,中华中医药学会中药实验药理专业委员会副主任兼秘书长,上海市药理学会理事,中药药理专业委员会主任,长期从事中药药理学教学、科研工作。 T el:(021)54232290 E-mail:cxchen6@hotm https://www.360docs.net/doc/9012454021.html,
龙 胆2010版药典
龙胆 Longdan GENTIANAE RADIX ET RHIZOMA 本品为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag．、龙胆Gentian.a scabra Bge.、三花龙胆Gentiana triflora Pall.或滇龙胆Gentiana rigescens Franch.的干燥根和根茎。前三种习称“龙胆”，后一种习称“坚龙胆”。春、秋二季采挖，洗净，干燥。 【性状】龙胆根茎呈不规则的块状，长1～3cm，直径0. 3～lcm；表面暗灰棕色或深棕色，上端有茎痕或残留茎基，周围和下端着生多数细长的根。根圆柱形，略扭曲，长10～20cm，直径0.2～0.5cm；表面淡黄色或黄棕色，上部多有显著的横皱纹，下部较细，有纵皱纹及支根痕。质脆，易折断，断面略平坦，皮部黄白色或淡黄棕色，木部色较浅，呈点状环列。气微，味甚苦。 坚龙胆表面无横皱纹，外皮膜质，易脱落，木部黄白色，易与皮部分离。 【鉴别】 (1)本品横切面：龙胆表皮细胞有时残存，外壁较厚。皮层窄；外皮层细胞类方形，壁稍厚，木栓化；内皮层细胞切向延长，每一细胞由纵向壁分隔成数个类方形小细胞。韧皮部宽广，有裂隙。形成层不甚明显。木质部导管3～10个群柬。髓部明显。薄壁细胞含细小草酸钙针晶。 坚龙胆内皮层以外组织多已脱落。木质部导管发达，均匀密布。无髓部。 粉末淡黄棕色。龙胆外皮层细胞表面观类纺锤形，每一细胞由横壁分隔成数个扁方形的小细胞。内皮层细胞表面观类长方形，甚大，平周壁显纤细的横向纹理，每一细胞由纵隔壁分隔成数个栅状小细胞，纵隔壁大多连珠状增厚。薄壁细胞含细小草酸钙针晶。网纹导管及梯纹导管直径约至45μm。 坚龙胆无外皮层细胞。内皮层细胞类方形或类长方形，平周壁的横向纹理较粗而密，有的粗达3μm，每一细胞分隔成多数栅状小细胞，隔壁稍增厚或呈连珠状。 (2)取[含量测定]项下的备用滤液，作为供试品溶液。另取龙胆苦苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取供试品溶 液5μl、对照品溶液1pl，分别点于同一硅胶GF2s4薄层板上，以乙酸乙酯一甲醇一水(10：2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】水分不得过9.0%（附录ⅨH 第一法）。 总灰分不得过7.0%(附录ⅨK)。 酸不溶性灰分不得过3.0%(附录ⅨK)。 【浸出物】照水溶性浸出物测定法(附录ⅨA)项下的热浸法测定，不得少于36.0%。 【含量测定】照高效液相色谱法(附录ⅥD)测定。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(25：75)
高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷的含量
高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷的含量 作者：钱平,贾云,刘志辉,钱芳 【摘要】目的建立高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷含量的方法。方法色谱柱：Supelco ODS C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(20∶80)；柱温：25 ℃；流速：1.0 mL/min；检测波长：210 nm。结果苦杏仁苷峰分离良好,苦杏仁苷浓度在0.066 13～4.232 μg间线性关系良好,r＝1.000 0,平均回收率为95.91%(RSD＝2.29%)。结论本方法准确、可靠,可用于郁李仁中苦杏仁苷的含量测定。 【关键词】郁李仁；苦杏仁苷；高效液相色谱法；含量测定 Abstract：Objective To establish a HPLC method for the determination of amygdalin in Semen Pruni. Methods The analytical column was Su pelco ODS C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm), with methanol-water (20∶80) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min, and the detection wavelength was 210 nm. Results The linear range for amygdalin was 0.066 13～4.232 μg (r＝ 1.000 0). The average recovery was 95.91% (RSD＝ 2.29%). Conclusion The method is accurate and reliable, and can be used in the determination of amygdalin in Semen Pruni. Key words：Semen Pruni；amygdalin；HPLC；content determination 郁李仁为蔷薇科植物欧李Prunus humilis Bge.、郁李Prunus japonica Thunb.或长柄扁桃Prunus pedunculata Maxim.的干燥成熟种子,前二者习称“小李仁”,后者习称“大李仁”,具有润 燥滑肠、下气、利水的功效[1]。苦杏仁苷为郁李仁的主要成分之一,2005年版《中华人民共和国药典》在该药材含量测定项下采用银量法测定,但银量法属于间接测定方法,影响因素多,而目前采用其他方法对郁李仁进行含量测定的报道较少。笔者采用高效液相色谱(HPLC)法直接测定郁李仁中苦杏仁苷的含量,方法准确、可靠,为郁李仁中苦杏仁苷的含量测定提供了依据和参考。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Waters 515泵高效液相色谱仪,Waters 2487紫外检测器,ZW色谱柱,恒温箱(中国科学院大连化物所),Empower色谱工作站,Agilent手动进样器(20 μL)；十万分之一电子分析天平(BP- 211D型,德国Sartorius)；Cary50紫外分光光度计(美国瓦里安)。 1.2 试药 苦杏仁苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号110820- 200403)；郁李仁药材购自安徽亳州药材市场,经鉴定分别为蔷薇科植物郁李和长柄扁桃的干燥成熟种子。乙腈为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
超高效液相色谱法测定龙胆药材中的獐芽菜苦苷和龙胆苦苷
超高效液相色谱法测定龙胆药材中的獐芽菜 苦苷和龙胆苦苷 作者：曹悦，左代英，吴晓兰，刘敬武，孙启时 【摘要】目的建立超高效液相色谱（UPLC）法测定龙胆药材中活性成分的方法。方法采用L9（34）正交表安排实验，确定最佳提取条件。色谱柱：Shimadzu C18（3.0 mm×75 mm, 1.7 μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸（V∶V = 5.5∶94.5），流速0.80 ml/min；检测波长235,270 nm；柱温为40℃。结果獐芽菜苦苷、龙胆苦苷分别在0.154 8～1.858 0 mg/ml，0.322～5.152mg/ml范围内呈良好的线性关系，平均回收率分别为102.09%，RSD=1.68％（n=6）；103.80%，RSD=1.11％（n=6）。结论采用UPLC法控制龙胆质量，操作简单,结果准确，方法可行。 【关键词】龙胆超高效液相色谱獐芽菜苦苷龙胆苦苷 Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of swertiamarin and gentiopicroside in root of Gentiana scabra Bge.by UPLC.MethodsBy L9（34）orthogonal design, an optimal condition was confirmed. The separation was performed on Shimadzu C18（3.0 mm×75 mm,1.7μm） column, the mobile phase was Acetonitrile-0.1% Phosphorylation（V∶V = 5.5∶94.5）. The flow rate was 0.8 ml/min, the detection wavelength was 235nm, 270nm, and the column temperature was 40℃.ResultsThis method had good linearity in the range of 0.322～5.152mg/ml,and the
燀苦杏仁检验方法确认方案
憚苦杏仁检验方法确认方案 一、简介 憚苦杏仁取净苦杏仁，照憚法去皮。用时捣碎。主要用于降气止咳平喘，润肠通便＜用于咳嗽气喘，胸满痰多，肠燥便秘。 二、验证目的： 憚苦杏仁检验质量标准收载在《中国药典》2010版一部P187,为保证生产出的成品符合检验标准的要求，确认该检测方法是否适用于本公司生产的成品检验。现对质量标准分析方法进行验证，确保检验结果的准确可靠。 三、验证范围 ①、鉴别 ②、含量测定 四、验证小组成员及职责 4.1验证小组成员 4.2人员职责 表1: 五、验证实施步骤 1.为了确保验证数据的准确可靠，采取以下几个先行保障措施 1.1仪器：己经过校正并在有效期内 1.2人员：均经过培训，熟悉方法及使用的仪器 1.3对照品：均购自江西省药品检验所 1.4材料：均符合检验要求 1.5参考资料： 《中国药典》2010年版一部 《药品生产验证指南》（2003版）
2.鉴别 2.1试验A:取本品粉末2g，置索氏提取器中，加二氯甲烷适量，加热回流2小时，弃 去二氯甲烷液，药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苦杏仁苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法(附录W B)试验，吸取上述两种溶液各3卩l，分别点于同一硅胶G薄层板 上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15 : 40: 22: 10)5?10C放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，立即用0.8 %磷钼酸的15%硫酸乙醇溶液浸板，在105C加热至斑点显 色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 2.2试验B:取二氯甲烷适量，置索氏提取器中，加热回流2小时，弃去二氯甲烷液， 药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苦杏仁苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录切B)试验，吸取上述两种溶液各3卩l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷- 乙酸乙酯-甲醇-水(15 : 40: 22: 10)5?10°C放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，立即用0.8 %磷钼酸的15%硫酸乙醇溶液浸板，在105C加热至斑点显色清晰。 2.3检测结果： 表 2 2.4验证标准：试验A供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑 点。试验B供试品溶液在与对照品色谱相应的位置上未显相同颜色的斑点。 2.5检验结果评价 3.含量测定 照高效液相色谱法测定。 仪器：L-3000高效液相色谱仪 3.1专属性 3.1.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1 % 磷酸溶液(8 : 92)为流动相；检测波长为207nm理论板数按苦杏仁苷峰计算应不低于7000。 3.1.2对照品溶液的制备取苦杏仁苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含
不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量测定
收稿日期:2003-08-28 作者简介:魏岚(1978-),女(汉族),辽宁沈阳人,硕士研究生,主要从事中药现代化研究,T el:(024)23843711-3363,E-mail:ksbi@https://www.360docs.net/doc/9012454021.html, 。 文章编号:1006-2858(2004)02-0114-04 不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量测定 魏 岚,陈晓辉,王晓辉,毕开顺 (沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳 110016) 摘要:目的建立龙胆中龙胆苦苷的R P H PLC 定量分析方法,并对38批不同产地的龙胆进行含量测定。方法采用Diamonsil C 18色谱柱(5 m,200mm 4 6mm i d ),以乙腈 水 醋酸(V V V =10 80 1)为流动相,流速为1 0mL min -1,紫外检测波长为270nm,柱温为室温,内标物为对羟基苯甲酸(100mg L -1)。结果龙胆苦苷在12 8~153 6mg L -1质量浓度内线性关系良好(r =0 9999),方法回收率为99 1%,RSD 为0 4%(n =9)。38批龙胆中龙胆苦苷的含量差异较大。结论该方法可用于质量控制,并为不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量比较提供了依据。关键词:反相高效液相色谱法;龙胆;龙胆苦苷中图分类号:R 94 文献标识码:A 龙胆(Radix Gentianae)为龙胆科植物条叶龙胆(Gentiana manshur ica Kitag.)、龙胆(G.scabra Bge.)、三花龙胆(G.tr if lor a Pall.)、坚龙胆(G.rigescens Franch.)的干燥根及根茎尚有非正品龙胆草龙胆(Veronicastr um sibir icum (L )Hara)的根及根茎和红花龙胆(Gentiana rhodan tha Franch.)的全草。龙胆苦、寒;归肝、胆经;具有清热燥湿、泻肝胆火的功效[1];主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古,浙江、湖南、江西、福建、江苏、广东、新疆也有分布。龙胆苦苷(g entiopi croside,GT P )是龙胆的主要有效成分,具有强烈苦味活性,是龙胆药苦寒的物质基础[2]。作者采用正交试验设计考察了龙胆中龙胆苦苷的提取工艺,建立了龙胆中龙胆苦苷的RP HPLC 定量分析方法,并对38批不同产地的龙胆进行含量测定,从而为龙胆的质量研究提供了科学依据。 1 仪器与试药 岛津LC 10A 高效液相色谱仪,SPD 10A 紫外检测器,N2000色谱工作站,岛津UV 265FW 型紫外分光光度仪,Sartorius BP210S 型电子分析天平,ZFQ85A 型旋转蒸发仪。 甲醇、乙腈为色谱纯,其他试剂为分析纯。龙胆样品共38批,由本校孙启时教授鉴定,粉碎过40目筛,置于干燥阴凉处备用,来源情况见表2。龙胆苦苷对照品(770 200105),购于中 国药品生物制品检定所。 2 方法 2 1 提取工艺的考察 以龙胆苦苷含量为检测指标,选取溶剂种类、溶剂用量、提取时间、提取次数4个因素,每个因素4个水平,采用L 16(45)正交表进行试验,按 2 5 条制备样品溶液,按 2 6 条进行测定。综合直观分析和方差分析的结果,确定最佳提取工艺为:用60倍于药材量的甲醇回流提取2次,每次2h 。2 2 检测波长的选择 取龙胆苦苷对照品适量,用甲醇配制成质量浓度为25mg L -1的溶液,在400~200nm 内进行紫外扫描,结果显示最大吸收波长为269 2nm,故选择270nm 为检测波长。2 3 对照品溶液的制备 取龙胆苦苷对照品约6 4mg ,精密称定,置25mL 量瓶中,甲醇超声溶解定容,摇匀,作为对照品贮备溶液。 2 4 内标溶液的制备 取对羟基苯甲酸约5 0m g,精密称定,置50mL 量瓶中,甲醇超声溶解定容,摇匀,得到质量浓度为100mg L -1 的内标溶液。 2 5 供试品溶液的制备 取龙胆药材粉末0 45g,加入27mL 甲醇,70 水浴回流2次,每次2h,合并提取液并过滤, 第21卷第2期2004年3月 沈 阳 药 科 大 学 学 报Journal of Shenyang Pharmaceutical U niversity V ol 21 No 2 M ar 2004p 114
清热解毒片中黄芩苷的含量测定
清热解毒片中黄芩苷的含量测定 目的采用高效液相色谱法测定清热解毒片中黄芩苷的含量。方法用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，用甲醇-0.2%磷酸溶液（48：52）为流动相，流速1.0 ml·min-1，检测波长280nm。结果该试验的结果为清热解毒片中黄芩苷进样量在0.13～0.95μg范围中线性关系良好（该区间中r=0.9996），精密度试验RSD 为1.11%，重复性试验RSD为1.16%，平均回收率为100.13%，RSD为1.30%（n=6 ）。结论本方法操作比较简便，精密度好，结果准确可靠，适用于清热解毒片中黄芩含量的测定。 标签：高效液相色谱法；黄芩苷；清热解毒片 清热解毒片收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二十册。该药的功效主要为清热解毒，临床中流感，上感及各种发热性质的疾病首选该药。这种药物的主要成分是金银花、生石膏、黄芩、龙胆、玄参、地黄、金银花等12味中药组成。原标准中未对黄芩进行含量检测，在本实验中应用的较为先进的高效液相色谱法，通过该种方法测定黄芩在该成药中的含量，该法由于仪器可靠，方法和操作较为简单，因此结果相对的准确可靠。 1 资料与方法 1.1一般资料LC2010A型高效液相色谱仪，黄芩苷对照品，自中国食品药品检定研究院购得（含量测定用，批号：110715-201117）；样品来源于陕西盘龙制药集团有限公司，水为重蒸馏水，甲醇在色谱中是色谱纯，乙醇、磷酸在色谱中是分析纯。 1.2方法 1.2.1色谱的条件该试验的填充剂是用的十八烷基硅烷键合硅胶，试验中的色谱柱是VP-ODSC18柱（4.6mm×250mm，5μm）；用甲醇-0.2%的磷酸溶液（48︰52）做流动相；该实验中设置的流速为10ml/min；检测的波长为280nm；温度检测设置为35℃；理论塔板数以黄芩苷计算，不能低于3000。 1.2.2制备对照品溶液用精密的方法称取60℃下已经减压干燥时间为4h的黄芩苷对照品适量，加入甲醇溶解该制剂，制成的溶液为每1ml含60μg的黄芩苷做对照品，即能够得到。 1.2.3制备供试品溶液从该成品中随机取10片，除去包裹着的糖衣，通过精密工具称重，然后研磨成粉末状。取出大约0.5g左右，放入带有塞子的锥形瓶里，加入甲醇（浓度为60%）25ml，称得重量之后，通过超声振荡20min（功率250W，频率35kHz），冷却之后，再测取其重量，减少的重量用甲醇补足（浓度为60%），然后摇匀，后滤过，测出滤出的液体5ml，放入25ml的量瓶中，用甲醇（浓度为60%）补至刻度，充分混匀，通过大小为0.22μm微孔滤膜，获取
龙胆苦苷的体外稳定性_陈国锋
复旦学报(医学版) Fudan U niv J M ed Sci 2008M ar ,35( 2)龙胆苦苷的体外稳定性 陈国锋 高东雁 张文鑫 王建新 ■ (复旦大学药学院药剂教研室 上海 200032) 【摘要】 目的 研究龙胆苦苷(G T P )在体外生物样品中的稳定性。方法 将龙胆苦苷溶解在不同pH 的磷酸盐缓冲液、pH 1.2的盐酸溶液及大鼠胃肠黏膜匀浆、胃肠道内容物、肝组织匀浆和血浆中,37℃恒温水浴,孵育一定时间后取样,高效液相色谱法测定龙胆苦苷的浓度,考察其在不同pH 缓冲液和生物样品中的稳定性。结果 37℃孵育48h 后,龙胆苦苷在pH 1.2的盐酸溶液、pH 6.8、7.4和8.0的磷酸盐缓冲液中的降解百分率分别为2.6%、7.9%、20.2%和34.4%。龙胆苦苷在胃内容物、胃黏膜、小肠内容物、肠黏膜、肝组织匀浆中稳定,而在大肠内容物中12h 降解79.8%,血浆中24h 降解46.9%。结论 G T P 在偏酸性环境中较稳定,随碱性增加稳定性显著降低;G T P 在胃、小肠、肝脏中稳定,而在血液和大肠中易降解。【关键词】 龙胆苦苷; 生物样品; 稳定性【中图分类号】 R 284 【文献标识码】 A 上海市科委中药现代化专项项目(06DZ 19720) ■ Cor responding author E -mail :jxwang @s hmu .edu .cn Stability of gentiopicrin in biological fluids in vitro CH EN Guo -feng ,GAO Dong -y an ,ZH ANG Wen -xin ,WANG Jian -x in ■ (Department o f Pharmaceutics ,School o f Pharmacy ,Fudan University ,Shanghai 200032,China ) 【Abstract 】 Objective T o investigate the stabili ty of gentiopicrin (G TP )in biological fluids in vitro . Methods T otal gentian glycosides w as dissolved in phosphate buffer solutions and diluted hydro -chloric acid at different pH ,liver homogenate ,plasma ,gast rointestinal contents and mucosa homoge -nat es of rats ,t hermostatically maint ained at 37℃.A t time intervals af ter degradation ,samples were withdrawn and the concent rations of G T P w ere determined by HP LC ,from w hich stability of it at dif -ferent biological specimen was evaluated . Results Deg radation of gentiopicrin did not f ollow appar -ent first -order kinetics equation .Af ter 48h of incubation ,G TP deg raded by 2.6%,7.9%,20.2%and 34.4%respectively at pH 1.2diluted hydrochloric acid and pH 6.8,pH 7.4and pH 8.0phos -phate buffer solutions .The degradation profile of G TP in gast ric content s and mucosa homogenates ,small intestinal contents ,intestinal mucosa homogenates and liver homogenates was similar to that in the aqueous buff er .G TP w as found only 20%of it s original concent ration after 12h of incubation spiked in the large intestinal contents ,and 53%after 24h spiked in plasma . Conclusions GT P is st able in stomach ,small intestine and liver .Blood and large intestine are possible sites w here G T P might be deg raded . 【Key words 】 gentiopicrin ; biological fluids ; stability 龙胆为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshu -rica Kitag .、龙胆Gentiana scabra Bge .、三花龙胆Gentiana tri f lora pall .或坚龙胆Gentiana reges -cens Franch .的干燥根及根茎[1],为中医常用的清肝胆实火,除下焦湿热的要药。裂环环烯醚萜苷类为龙胆中的主要活性部位,包括龙胆苦苷(Gentio p -icrin ,G TP )、当药苦苷(Sw ertiam arian )、当药苷(Sw eroside )、马钱子苷酸(Log anic acid )等[2,3] 。其 中龙胆苦苷为龙胆中的主要活性成分,具有保肝、利胆、健胃、抗炎、抗菌等活性[4],是评价龙胆质量的主要指标成分。 研究发现 [5] ,小鼠G TP 灌胃后,虽然吸收迅速, 220