木瓜蛋白酶酶解鱼鳞提取胶原蛋白的工艺研究

木瓜蛋白酶酶解鱼鳞提取胶原蛋白的工艺研究

近年来,研究人员发现,乌木瓜蛋白酶可以有效的酶解鱼鳞提取胶原蛋白,并有效抑制其萎缩,丰富了海洋动物资源的利用,也有助于提升海产品加工品质和价值,因此,研究乌木瓜蛋白酶酶解鱼鳞提取胶原蛋白的工艺是十分有必要的。

一、实验材料

(一)乌木瓜蛋白酶:可以从乌木瓜中提取到质量较高的蛋白酶,可以用于酶解鱼鳞胶原蛋白。

(二)鱼鳞:可以收集新鲜的鱼鳞,经过化学处理提取胶原蛋白。

二、实验设备

(一)超声波处理仪:用于对魚鱗鱗片进行酶解处理,快速高效地酶解胶原蛋白。

(二)恒温槽:可以帮助用于控制反应的温度,维持反应的稳定性,提高胶原蛋白及其他物质的降解效率。

三、操作步骤

(一)鱼鳞处理:将新鲜收集到的鱼鳞经过剪切或研磨等处理技术,去除外层的软骨垢,然后置于室温4℃的恒温槽中浸泡2小时,消除鱼鳞中的胶原蛋白的定构,以便更好的进行酶解处理;

(二)超声处理:将鱼鳞浸泡后放入超声波处理仪中,调节处理温度

和湿度,脉冲波波长为20KHZ,功率300W,时间30min,然后酶解助剂加入入,配制成鱼鳞蛋白液中;

(三)乌木瓜蛋白酶处理:将经过超声处理后的鱼鳞液加入适量乌木瓜蛋白酶,室温40℃,搅拌60min,以达到最佳的效果;

(四)提取:冷却50℃时加入适量低聚糖,再将液体通过超滤盒进行滤过,最后用离心机进行离心,提取出胶原蛋白即完成。

本实验通过乌木瓜蛋白酶酶解鱼鳞提取胶原蛋白的工艺,能够有效的解析鱼鳞中的胶原蛋白,获取较高价值的产品,丰富了人们对海洋动物资源的利用,同时提升了海产品加工的品质和价值,从而发挥海洋的潜力。

鱼皮胶原蛋白的提取工艺及特性研究

龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/9b19126383.html, 鱼皮胶原蛋白的提取工艺及特性研究 作者:于颖肖刚陈晚华 来源:《上海医药》2019年第03期 摘要胶原蛋白是生物体内重要的组成部分,在生物医药、食品保健、化妆品和组织工程领域得到了广泛的应用。鱼皮胶原蛋白因来源广泛,且具有良好的生物性能,如低抗原性、可降解性以及高生物相容性等优势,已引起研究者的深入研究。本文介绍了鱼类胶原蛋白的提取工艺,探讨了鱼皮胶原蛋白的性质及其应用前景。 关键词鱼皮胶原蛋白提取工艺 中图分类号:TQ464.7 文献标志码:A 文章编号:1006-1533(2019)03-0070-04 Study on the technology for the extraction of fish skin collagen YU Ying*, XIAO Gang, CHEN Wanhua** (Shanghai Haohai Biotechnology Co., Ltd., Shanghai 201613, China) ABSTRACT Collagen is an important component of the organisms and has been widely used in biomedical, food health, cosmetic and tissue engineering fields. Collagen from fish skin has been deeply studied due to its extensive sources and good biological properties, such as low antigenicity, high biocompatibility and biodegradability. In this paper, the technology for the preparation of collagen from fish skin was introduced and its properties and application prospects were discussed. KEy WORDS fish skin; collagen; extraction technology 胶原蛋白是一种白色、不透明、无支链的纤维性蛋白质类高分子物质,以不溶性纤维形式存在于动物体的皮肤、骨骼、软骨、肌腱、韧带和血管中,对维持血管壁、皮肤弹性和软骨润滑度,支撑器官,保护机体,提高毛发亮度等都有重要作用[1]。胶原蛋白作为天然可降解聚 合物,具有生物活性高、生物相容性好、降解速度适宜等优势,并且易加工生产,是目前理想的生物医学材料之一。在以往,胶原蛋白主要是从牛、猪等陆生哺乳动物的皮肤中获取[2], 由于疯牛病和口蹄疫等疾病的发生,使人们对陆生哺乳动物胶原蛋白及其制品的安全性产生质疑。再加上有些地区的习俗和宗教信仰等原因[3],限制了陆生哺乳动物胶原蛋白制品的生产 与销售。 从20世纪70年代人们就开始从鱼皮、鱼骨、鱼鳞等部位提取胶原蛋白,研究发现鱼皮胶原蛋白与陆生哺乳动物胶原蛋白在理化特性、化学组成和溶液性质等存在一定差异[4],这更 加激发了人们的研究热潮[5]。我国的鱼类资源非常丰富,水产业加工过程中产生了大量的下

鱼类胶原蛋白肽的制备及其功能的研究

鱼类胶原蛋白肽的制备及其功能的研究 一、胶原蛋白肽的制备 胶原蛋白肽的制备过程主要包括以下步骤: 1.1 原料选择 制备胶原蛋白肽的原料通常选择鱼皮、鱼鳞、鱼骨等富含胶原蛋白的鱼类部位。这些部位含有丰富的胶原蛋白,可以作为制备胶原蛋白肽的优选原料。 1.2 酶解法 酶解法是一种常用的制备胶原蛋白肽的方法。该方法使用特定的酶将大分子胶原蛋白分解成小分子的肽段。常用的酶包括木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶等。通过控制酶解条件,如酶的种类、浓度、作用时间等,可以获得分子量分布不同的胶原蛋白肽。 1.3 分离纯化 酶解后的溶液需要进行分离纯化,去除其中的非胶原蛋白成分以及未完全酶

解的胶原蛋白片段。常用的分离纯化方法包括沉淀法、色谱法、膜过滤等。通过选择合适的分离纯化方法,可以获得纯度较高的胶原蛋白肽。 1.4 干燥处理 为了便于长期保存和使用,胶原蛋白肽通常需要进行干燥处理。常用的干燥方法包括真空干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等。干燥后的胶原蛋白肽可以保持良好的物理化学性质,同时便于运输和使用。 二、胶原蛋白肽的功能研究 胶原蛋白肽具有多种生物活性功能,以下是对其功能的研究: 2.1 生物活性 胶原蛋白肽具有显著的生物活性,可以促进细胞增殖、分化、迁移等。研究表明,胶原蛋白肽能够促进成纤维细胞、表皮细胞、内皮细胞的增殖和分化,同时促进骨细胞和软骨细胞的增殖和分化。这些细胞在人体内发挥着重要的生理功能,如修复组织损伤、促进伤口愈合、维持皮肤弹性和光泽等。因此,胶原蛋白肽在美容、护肤、保健等领域具有广泛的应用前景。 2.2 吸收与代谢

胶原蛋白肽具有良好的吸收与代谢特性。研究表明,口服或局部应用胶原蛋白肽后,其能够被胃肠道或局部组织吸收利用,并发挥相应的生理功能。此外,胶原蛋白肽的分子量较小,更容易被人体吸收和利用。这为其在营养补充剂、功能性食品等领域的应用提供了有利条件。 2.3 抗氧化功能 胶原蛋白肽具有较强的抗氧化能力。研究表明,胶原蛋白肽能够清除体内的自由基,抑制脂质过氧化反应,保护细胞免受氧化损伤。此外,胶原蛋白肽还能够抑制炎症反应和细胞凋亡等过程,进一步发挥抗氧化作用。这些特性使其在抗衰老、抗疲劳、抗炎症等领域具有潜在应用价值。 2.4 对皮肤的影响 胶原蛋白肽对皮肤具有显著的改善作用。研究表明,口服或局部应用胶原蛋白肽能够增加皮肤水分含量、改善皮肤弹性、减少皱纹形成等。这些作用可能与胶原蛋白肽促进皮肤细胞增殖分化、增强皮肤基质合成以及抑制皮肤炎症反应等机制有关。因此,胶原蛋白肽在护肤品、化妆品等领域具有广泛的应用前景。 2.5 对骨骼健康的影响

胶原蛋白的工艺

胶原蛋白的概述与应用 The Introduction and Application of Collagen 姓名:周雨佳专业:食品科学与工程学号:201006064023 摘要:胶原蛋白是一种生物性高分子物质,占人体全身总蛋白质的30%以上。鱼鳞是最好的胶原蛋白原料 关键词:胶原蛋白;功效;萃取工艺;选择标准;应用 Abstract:Collagen is a kind of biological macromolecule,it account for 30% of the total protein in human body.Fish scale is the best raw material for collagen. Key word: collagen;effect;extract technology;select standard;application 一、胶原蛋白的介绍 胶原蛋白是一种生物性高分子物质,是一种白色、不透明、无支链的纤维性蛋白质,富含除色氨酸和半胱氨酸外的18种氨基酸。 胶原蛋白是人体的皮肤、骨骼、肌腱、软骨、血管的构成材料,占人体全身总蛋白质的30%以上,一个成年人的身体内约有3公斤胶原蛋白。皮肤干重的70% ~80%是由胶原蛋白组成,因此胶原蛋白对皮肤的作用不言而喻,它可以补充皮肤各层所需的营养,使皮肤中胶原活性增强,有滋润皮肤,延缓衰老、美容、消皱、养发等功效。 胶原蛋白大多存在于动物体内,除了常见的猪蹄、肉皮之外,富含胶原蛋白的食物主要有:牛蹄筋、鸡脚、鸡翅、鸡皮、鱼皮、鱼翅及软骨等。这些食物经过烹调,冷却后形成的“肉冻”、“鱼冻”就是胶原蛋白经过加水煮沸成溶胶后,再冷却形成的凝胶。[1] 到目前为止,已报道的胶原类型大约有19种,对天然胶原的研究有助于进一步理解靶药物和胶原之间结构功能关系。有人用人成纤维Ⅱ型胶原的三维结构模型来进行合成胶原组织、胶原的结构和功能的研究,利用这一系统进一步研究侧链基团的立体化学和特定分子的相互作用,继而评价胶原相关疾病的临床治疗效应。此外,连接分子末端非螺旋末端肽是胶原分子抗原性的主要来源,而且用胃蛋白酶除去末端肽的缺失胶原是很有应用前景的药物载体,特别是用于基因递送。[2,3] 二、胶原蛋白的提取工艺 1. 鱼鳞是最好的胶原蛋白原料 从权威检测结果来看,鱼鳞胶原蛋白的羟脯氨酸含量高于其他原料,由于鱼鳞中胶原蛋白寡肽与人皮肤胶原的结构相似,兼容性好,存在着离子键、氢键等。由鱼鳞制备的胶原蛋白产品,可以扩散到皮肤的深层,对人的皮肤有很好的营养作用;同时由于其分子中含有大量的羟基,因此它有着相当好的保温作用;其分子中的氨基和羧基又赋予它一定的表面活性,这使它与其它材料的兼容性很好,且对皮肤无刺激性。[4] 2. 胶原蛋白的提取技术主要有: 水解胶原蛋白法、酶解法等,现在流行的是酶解法,其工艺过程如下(以酶解法生产鱼鳞胶原蛋白必需生产环节和工序为例): 生产过程包括:清洗、酶解、过滤、灌装、浓缩、喷雾干燥等几道重要的生产环节。[5]

鱼鳞胶原蛋白提取工艺的研究现状及应用

鱼鳞胶原蛋白提取工艺的研究现状及应用 摘要:简述了胶原蛋白的作用,提取鱼鳞胶原蛋白的重要性,结合鱼鳞胶原蛋白研发的相关背景和现状,列举了鱼鳞胶原蛋白的多种提取方法,简述鱼鳞胶原蛋白的应用。 关键词:鱼鳞;胶原蛋白;提取方法;应用 1 前言 胶原蛋白在鱼类的真皮、骨、键、鳞等处含量丰富。通常胶原由三条多肽链构成三股螺旋结构,分子量约30万道尔顿,主要组成氨基酸为脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸,而且脯氨酸为其特征氨基酸。胶原蛋白一级结构的特征是含有甘氨酸的三联体 (Gly-X-Y)重复排列着,其中,X,Y经常为亚氨基酸的脯氨酸和羟脯氨酸。 胶原蛋白(Collagen)是一种白色、不透明、无支链的纤维蛋白质,为重要的功能性蛋白质,主要存在于动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腱、韧带和血管中,是结缔组织极重要的结构蛋白质,起着支撑器官、保护机体的功能。由于胶原蛋白的特殊功能,其提取物已被广泛应用于医药、食品、日用化工、生物合成等工业领域,如医用胶囊、外科手术材料、食用明胶、化妆品等。 鱼鳞中含有丰富的胶原蛋白,占20%~ 40%,这对提取鱼鳞胶十分有利。海水鱼鳞中含有较为丰富的磷脂,占7%左右,具有提高机体免疫力、延缓衰老、增强骨细胞和神经细胞功能的作用,还与机体的生殖生理和激素的代谢密切相关。鱼鳞灰分含量高,约占30%,主要成分是羟基磷灰石,绝大部分集中在骨质层;脂质含量少,相对目前生产胶原蛋白的主要原料猪皮和牛皮而言,这更有利于胶原的提取和纯化。 2 本课题研究的目的和意义 近年来,随着养殖规模的日益扩大和养殖技术的不断完善,养殖鱼类的产量提高很快。中国的水产品产量一直保持着高速增长势头,水产品产量2011年已经达到5611万t,占世界水产品产量35%,位居世界第一位。随着我国水产业的发展,水产加工也越来越受到人们的重视,加工的同时产生出大量下脚料,占鱼体总重的30%~50%,其中约5%是鱼鳞。然而,这些鱼鳞没有被充分利用,大部分作为废弃物丢弃了。据统计,我国每年废弃的鱼鳞达到5万t以上。造成了严重的资源浪费和环境污染。 近几年来,由于欧洲疯牛病和口蹄疫的影响,以牛皮、猪皮作为主要原料的胶原蛋白的安全性受到人们的质疑,人们开始以鱼皮、鱼骨等海洋生物材料代替猪、牛皮作为提取胶原蛋白的新原料,从七十年代人们就研究从鱼皮、鱼骨、鱼鳞中提取胶原蛋白,海洋生物胶原蛋白与猪、牛等陆生动物的胶原蛋白相比,其特性、组成及溶液的性质都存在显著不同。

胶原蛋白工艺

胶原蛋白工艺 胶原蛋白是一种存在于人体组织中的重要蛋白质,具有良好的生物相容性和生物降解性。因此,胶原蛋白在医药领域和生物工程领域有着广泛的应用前景。胶原蛋白的制备过程中,胶原蛋白的提取和加工工艺是至关重要的。 胶原蛋白的提取是整个工艺的第一步。目前常用的提取方法有酸法、碱法和酶解法。酸法是将胶原蛋白所在的组织用酸性溶液进行提取,然后通过中和、沉淀、洗涤等步骤,得到纯净的胶原蛋白。碱法则是利用碱性溶液将胶原蛋白从组织中溶解出来,再通过酸中和、沉淀、洗涤等步骤得到纯净的胶原蛋白。酶解法则是利用酶的作用将胶原蛋白分解出来,然后通过沉淀、洗涤等步骤得到纯净的胶原蛋白。这些提取方法各有优劣,选择合适的方法取决于胶原蛋白的来源和应用需求。 提取到的胶原蛋白需要经过加工处理才能得到最终的产品。加工过程中,常见的处理方法包括纯化、浓缩、干燥等。纯化是将提取到的胶原蛋白与其他杂质进行分离,得到纯净的胶原蛋白。浓缩是将胶原蛋白溶液中的水分去除,使其浓度增加。干燥是将浓缩后的胶原蛋白溶液进行干燥,得到固态的胶原蛋白产品。这些加工步骤的目的是提高胶原蛋白的纯度和稳定性,并方便后续的应用。 胶原蛋白工艺中的关键环节是对胶原蛋白的性质进行调控。通过调

节温度、pH值、添加剂等因素,可以改变胶原蛋白的溶解性、流动性、凝胶性等特性。例如,在制备胶原蛋白凝胶时,可以通过调节温度和pH值来控制凝胶的强度和形态。此外,添加剂如乙醇、盐类等也可以影响胶原蛋白的凝胶性能。这些调控手段可以根据具体应用的需求来选择和优化,以获得理想的胶原蛋白产品。 胶原蛋白的交联是提高其稳定性和机械性能的重要方法。交联可以通过化学交联和物理交联两种方式实现。化学交联是通过添加交联剂使胶原蛋白分子间发生共价键结合,从而形成三维网络结构。物理交联则是通过温度、pH值等因素的改变,使胶原蛋白分子间发生非共价键结合,形成临时的交联结构。交联的方式和程度可以根据胶原蛋白的应用需求进行调控,以达到预期的效果。 胶原蛋白工艺是一个复杂而关键的过程。胶原蛋白的提取和加工工艺要根据具体应用需求选择合适的方法和条件,以获得高纯度、稳定性好的胶原蛋白产品。通过调控胶原蛋白的性质和进行交联处理,可以进一步改善胶原蛋白的功能和性能,为其在医药领域和生物工程领域的应用提供更多可能性。

木瓜蛋白酶的提取与分离纯化的方法

木瓜蛋白酶的提取与分离纯化的方法 木瓜蛋白酶(papain)是一种天然的蛋白酶,广泛应用于食品、 制药等行业中。其提取与分离纯化的方法可以分为以下几个步骤: 1.选择合适的木瓜品种:不同品种的木瓜蛋白酶活性不同,因此 选择具有较高酶活性的木瓜品种对提取纯化效果至关重要。 2.酶源准备:将选好的木瓜切成小块,去掉果肉,保留果实中的 细胞浆和硬实质。然后将木瓜块浸泡于缓冲液中,以提取木瓜蛋白酶。 3.离心分离:将浸泡木瓜块的混合液进行离心分离,以去除果肉 等杂质,得到较为纯净的木瓜蛋白酶液。 4.澄清液处理:将离心分离得到的液体通过滤纸或滤膜进行澄清,去除悬浮的固体颗粒。 5.蛋白酶的分离:通过离心、超滤、透析等手段,将木瓜蛋白酶 与其他蛋白质分离,得到较为纯净的蛋白酶液。 6.结晶纯化:可以采用醇沉淀、浓缩、结晶等方法对蛋白酶进行 纯化。其中,醇沉淀方法是常用的分离纯化方法之一,通过醇的添加,

使蛋白酶蛋白质聚集并沉淀下来,然后进行洗涤、溶解等操作,最终 得到纯净的木瓜蛋白酶。 7.洗脱:将获得的木瓜蛋白酶溶解于缓冲液中,使其达到所需的 适宜酶活性和稳定性。 8.酶活性测定:用适当的方法测定提取分离纯化后的木瓜蛋白酶 的活性,以确定其纯化程度和活性。 需要注意的是,木瓜蛋白酶的提取与分离纯化过程中,应注意保 持温度、pH值等参数的控制,以防止酶的失活或蛋白质的降解。同时,在纯化过程中需要使用无菌操作,以防止细菌、病毒等污染物的引入。 总结起来,木瓜蛋白酶的提取与分离纯化的方法包括酶源准备、 离心分离、澄清液处理、蛋白酶的分离、结晶纯化、洗脱和酶活性测 定等步骤。通过合理的步骤设置和操作,可以得到较为纯净、高活性 的木瓜蛋白酶,以满足工业和科研的需求。

木瓜蛋白酶在制取青鳞鱼可溶性蛋白中的应用

木瓜蛋白酶在制取青鳞鱼可溶性蛋白中的应用 杨萍;邓尚贵;吴玉廉;夏杏洲 【期刊名称】《广东海洋大学学报》 【年(卷),期】2002(022)003 【摘要】研究了木瓜蛋白酶的酶解温度、酶浓度、酶解时间、加水量、pH值对青鳞鱼可溶性蛋白得率的影响,探讨了α-氨态氮含量与青鳞鱼可溶性蛋白得率的关系.结果表明:温度小于50 ℃,随着酶解温度的提高、酶浓度的增加、酶解时间的延长青鳞鱼可溶性蛋白得率及α-氨态氮的含量均增加,α-氨态氮含量增加比可溶性蛋白得率的增加明显;加水量的增加,可溶性蛋白得率增加;pH值对水解效果及可溶性蛋白得率影响不大.综合考虑,最佳水解条件为:温度50℃,酶浓度为1 500 u/g,酶解时间80 min,m原料:m水=1∶2,pH 6.8.酶解所得可溶性蛋白经氨基酸分析仪检测,其氨基酸总量为49.47 mg/mL,必需氨基酸占氨基酸总量的41.0%,游离氨基酸含量为6.3 mg/mL,肽含量为87.2% . 【总页数】4页(P38-41) 【作者】杨萍;邓尚贵;吴玉廉;夏杏洲 【作者单位】湛江海洋大学食品工程系,广东,湛江,524025;湛江海洋大学食品工程系,广东,湛江,524025;湛江海洋大学食品工程系,广东,湛江,524025;湛江海洋大学食品工程系,广东,湛江,524025 【正文语种】中文 【中图分类】TS254.1

【相关文献】 1.蛋白酶及其作用方式对制取青鳞鱼肉水解蛋白的影响 [J], 杨萍;邓尚贵;吴玉廉 2.木瓜蛋白酶在制取青鳞鱼可溶性蛋白中的应用 [J], 3.青鳞鱼下脚料水解蛋白的制取及其营养评价 [J], 杨萍;邓尚贵;夏杏洲;吴玉廉 4.木瓜蛋白酶在制取斑鰶鱼蛋白中的应用 [J], 肖月娟;赵征;李润丰 5.青鳞鱼浓缩鱼蛋白制取技术的研究 [J], 邓尚贵 因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买

低值鱼肉蛋白酶解工艺研究

低值鱼肉蛋白酶解工艺研究 张佳兰 【摘要】以翘嘴红鲐(Hemiculter lcucisculus)肉为研究对象,选用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种酶,研究了反应条件对翘嘴红鲐肉蛋白水解度的影响规律,并通过正交试验方法得出了蛋白酶的水解最佳工艺:中性蛋白酶的适宜反应条件为pH7.0,加酶量为3600U/g,温度为50℃,料液比为1∶4,时间为8h;碱性蛋白酶的适宜反应条件为pH9.0,加酶量为3600U/g,温度为45℃,料液比为1∶5,时间为8h;木瓜蛋白酶的适宜反应条件为pH6.5,加酶量为4800U/g,温度为50℃,料液比为1∶4,时间为8h. 【期刊名称】《长江大学学报(自然版)理工卷》 【年(卷),期】2011(008)011 【总页数】5页(P248-251,257) 【关键词】翘嘴红鲌(Hemiculter lcucisculus)肉;蛋白酶;酶解;水解度 【作者】张佳兰 【作者单位】长江大学动物科学学院,湖北荆州434025 【正文语种】中文 【中图分类】TS254.1 近年来,我国水产生产持续稳定发展,已成为世界第一渔业大国。随着养殖规模的不断扩张,产量大幅度提高,水产品加工的地位已显得日益重要。随着人们生活水平的提高,低值鱼类直接食用的价值越来越低[1]。目前,低值鱼深加工仍是个薄

弱环节。除冷冻外运外,精加工尚处于起步待开发阶段[2-3]。对低值鱼蛋白进行水解得到的水解蛋白,含有大量的肽类和氨基酸,不仅具有独特的风味,而且还有许多生理活性,在调味品和营养保健等方面都有很广泛的应用[4-5]。本研究以翘嘴红鲌(Hemiculter lcucisculus)为对象,探讨了鱼肉酶解工艺,试图为低值鱼的深加工探索一条出路。 1.1 材料 翘嘴红鲌采购于长江大学农贸市场。测定小翘嘴红鲌的基本组成为:蛋白质15.74g/100g、粗脂肪 4.60g/100g、水分72.39g/100g和灰分0.98g/100g。中性蛋白酶(60000U/g)、碱性蛋白酶(10000U/g)、木瓜蛋白酶(500000U/g)、茚三酮、乙酸、乙酸钠、盐酸、氢氧化钠、考马斯亮蓝G-250、无水乙醚均为化学纯,国药集团化学试剂有限公司生产;牛血清、抗坏血酸、亮氨酸均为分析纯,天津市百世化工有限公司生产。 HH-4数控恒温水浴锅、离心机为常州圆华电器有限公司生产;UV-1800紫外可见分光光度计为上海美谱达仪器有限公司生产;101A-3型电热鼓风干燥箱为武汉教学仪器总厂生产;PL303 1/1000 电子天平为梅特勒托利多仪器(上海)有限公司生产。 1.2 方法 将翘嘴红鲌经去头、去尾、去内脏、去鱼鳞的预处理,清洗,沥干水分,绞碎成鱼肉。 采用常压干燥法GB-64351986测定鱼肉水分、高温灼烧法GB/T5009.4-1985测定鱼肉总灰分、索氏抽提法GB/T5512-1985测定鱼肉粗脂肪、考马斯亮蓝G-250染色法测定鱼肉蛋白质。 称取一定量绞碎的鱼肉,按比例加入适量的蒸馏水,用2mol/L的NaOH或HCl 调节至合适的pH,恒温水浴一定时间,水解结束后沸水浴灭酶10min,于

木瓜蛋白酶的应用简介

木瓜蛋白酶的应用简介 木瓜蛋白酶在食品加工中的应用 1木瓜蛋白酶的概述 木瓜酶就是一种运用很广为的植物蛋白酶,纯天然,安全并无毒素,在食品加工业中 应用领域广为,属食品添加剂,已在啤酒酿造和肉类嫩化等行业被广泛应用领域。利用木 瓜酶的酶促发展反应,可以把食品中的大分子的营养物质(例如蛋白质、脂肪、麦芽糖、 纤维素等)水解成小分子的氨基酸或多肽等,存有助消化,不易人体稀释,十分适宜体弱 多病或消化系统疾病患者的营养须要,更有利于老人、儿童、病人的消化吸收;木瓜酶能 够有效率转变肉质汤料,用作生产高级便利食品。可以做成肉类甜化剂、酒类回应剂、饼 干吉化剂、高级口服液、保健食品、营养食品等。由于酶促发展反应的专一特性,使应用 领域木瓜酶制剂的食品加工过程中副产品极少,更易于产品的纯化和精简工艺步骤;木瓜 酶反应条件保守、催化效率低、安全性低、能够有效率减少食品生产成本,提升食品质量,增加收入。 2木瓜蛋白酶的组成与结构 未成熟番木瓜果实中所含木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶a、木瓜凝乳蛋白酶b、木瓜 肽酶b等多种蛋白水解酶。且未知4种半胱氨酸蛋白酶的一级结构具备高度的同源性。其 中木瓜蛋白酶属于巯基蛋白酶可以水解蛋白质和多肽中精氨酸和赖氨酸的羧基端,并能够 优先水解在肽键的n端的具备2个羧基的氨基酸或芳香l氨基酸的肽键。木瓜蛋白酶就是 一种蛋白水解酶,分子量为27000u,由一种单肽链共同组成,所含212个氨基酸残基。至少存有3个氨基酸残基存有于酶的活性中心部位,它们分别就是cys25、his159和asp158,另外6个半胱氨酸残基构成了三对二硫桥,且都无此活性部位。 3木瓜蛋白酶的制备及保存 木瓜蛋白酶的制取就是将未成熟番木瓜果实生口乳液回去杂,在室温下重新加入半胱 氨酸溶液在研钵中充份搓坯,静置后挑上清液即为为粗制酶,其水溶液呈圆形浑浊状,然 后在通过Vergt回去卤的上清液中重新加入硫酸铵分级分离得结晶,重新加入半胱氨酸溶 液后经盐析重结晶潮湿得精制酶。木瓜蛋白酶室温储藏活力稳定性与活力多寡呈圆形静电力,正常采用时导致活力上升的主要因素为潮湿舱内、温度和空气氧化。粗制酶比精制酶 平衡,热风揉搓和喷雾干燥的酶比冷冻干燥的酶平衡,因此酶应当存放在高于十度条件下,为了防止木瓜蛋白酶失活,可以加入适量edta、亚硫酸氢钠、汪亚硫酸钠等保护剂,用作医药行业则须要进一步提纯。 4木瓜蛋白酶在食品行业中的应用 4.1豆类食品

食品酶法提取鱼蛋白质的工艺研究

食品酶法提取鱼蛋白质的工艺研究 鱼蛋白质是一种重要的食品原料,具有丰富的营养价值和广泛的应用前景。鱼 蛋白质的提取方法多种多样,其中食品酶法提取成为研究热点。本文将探讨食品酶法提取鱼蛋白质的工艺研究。 1. 食品酶法提取鱼蛋白质的原理 食品酶法是通过添加适量酶类来降解鱼肌肉中的结构蛋白,使其变为可溶性鱼 蛋白质。酶类能够特异性地作用于鱼肌肉中的蛋白质,将其水解成各种氨基酸和小肽,从而提高鱼蛋白质的提取率和纯度。 2. 食品酶法提取鱼蛋白质的工艺条件 (1)酶类选择:常用的酶类有胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和其他微生物来源的蛋 白酶等。选择酶类应根据鱼类的种类和成分特点进行合理选择。 (2)酶解条件:酶解鱼肌肉需控制合适的pH值、温度和酶解时间。不同酶类和酶解条件对提取效果有着显著影响,需进行优化设计。 (3)酶解辅助物:在酶解过程中,添加一定的助剂可提高酶解效果,如抗氧 化剂、蛋白质稳定剂等。辅助物的选择应综合考虑鱼蛋白质的性质和酶解系统需要。 3. 食品酶法提取鱼蛋白质的优势 (1)高效性:食品酶法能够在较短时间内高效提取鱼蛋白质,有效提高提取 率和纯度。 (2)无污染:酶类作用下,无需添加化学试剂,对环境无污染。 (3)营养价值保持完整:食品酶法提取鱼蛋白质过程中,酶类特异性作用, 仅降解结构蛋白,对其他营养成分影响较小,能够保持鱼蛋白质的营养价值完整。 4. 食品酶法提取鱼蛋白质的应用前景

(1)功能性食品:鱼蛋白质具有独特的功能特点,能够为功能性食品提供重 要的功能性成分。 (2)食品添加剂:鱼蛋白质可作为食品添加剂,用于改善产品质地、增加口 感和营养。 (3)生物医药领域:鱼蛋白质具有生物相容性好、易于吸收等优势,有望成 为生物医药领域的重要原料。 总之,食品酶法提取鱼蛋白质是一种高效、无污染且具有广阔应用前景的方法。随着科技的不断发展和工艺的不断优化,食品酶法在鱼蛋白质提取领域的应用前景将更加广阔,为食品工业的发展和人们的生活健康提供有力支持。

鱼鳞有效成分提取技术的研究进展

鱼鳞有效成分提取技术的研究进展 吴锁连;康怀彬;李冬姣 【摘要】The research of the category and extraction methods of effective ingredients of fish scale was reviewed at home and abroad .The ex-traction process of fish scale was studied, including collagen, hydroxyapatite, lecithin,guanine etc.The different extraction methods were ana-lyzed to provide theory basis for further research and comprehensive developmenting extraction technology of effective ingredients of fish scales.%论述了国内外关于鱼鳞有效成分的特性及提取技术的最新研究进展,研究鱼鳞胶原蛋白、羟基磷灰石、卵磷脂、鸟嘌呤等提取工艺过程,并分析不同提取方法,为鱼鳞有效成分提取技术的进一步研究和综合开发技术提供理论依据. 【期刊名称】《安徽农业科学》 【年(卷),期】2017(045)027 【总页数】4页(P110-112,141) 【关键词】鱼鳞;有效成分;胶原;羟基磷灰石;卵磷脂;鸟嘌呤 【作者】吴锁连;康怀彬;李冬姣 【作者单位】鄂州职业大学医学院,湖北鄂州436000;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471000;鄂州职业大学医学院,湖北鄂州436000 【正文语种】中文 【中图分类】TS201

木瓜蛋白酶

木瓜蛋白酶的固定方法 摘要:木瓜蛋白酶[ EC 3. 4. 22. 2 ]是一种重要的生化产品,在食品、医药工业中有广泛的用途, 还用于饲料、纺织及制革等领域[ 1 ]。由于木瓜蛋白酶价格昂贵并且无法重复利用,促使人们研究和制备固定化木瓜蛋白酶。此研究始于20世纪60年代初, 至今已有许多文献报道[ 2 ] 。酶的固定化方法主要有:包埋法、吸附法、共价键结合法、交联法等,这些方法各有利弊[ 3 ]。 木瓜蛋白酶(Papain)简称木瓜酶,又称为木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Carica papaya)果实中的乳汁,采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶制品。它是一种含疏基(-SH)肽链内切酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,有较广泛的特异性,对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力,同时,还具有合成功能,能把蛋白水解物合成为类蛋白质。溶于水和甘油,水溶液无色或淡黄色,有时呈乳白色;几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。最适合PH值5.7(一般3~9.5皆可),在中性或偏酸性时亦有作用,等电点18.75;最适合温度55~60℃(一般10~85℃皆可),耐热性强,在90℃时也不会完全失活;受氧化剂抑制,还原性物质激活。 一、木瓜蛋白酶的固定方法 1包埋法固定 包埋法:将酶或含酶菌体包埋在多孔载体中,使酶固定化的方法称为包埋法。凝胶包埋法是将酶包埋在各种凝胶内部的微孔中,制成一定形状的固定化酶的方法。最常用的凝胶有琼脂、琼脂糖、海藻酸钙、卡拉胶、聚丙烯酰胺等。微胶囊包埋法是将酶包埋在高分子半透膜中,制成微胶囊固定化酶的方法。 1. 1 海藻酸钠- 壳聚糖固定化木瓜蛋白酶( Immobilized papain on sodium alginate - chitosan,IPSAC) 海藻酸是从褐藻提取的,是甘露糖醛酸以β-1, 4键相连接的多糖类物质,它是包埋酶较为理想的载体,其固定化方法较为简单,条件温和,操作可在室温下进行,酶很少失活。但是,海藻酸钙凝胶在含多价阴离子(磷酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐等) 的溶液以及高浓度电解质( K+ , Na+ ) 溶液中不稳定,Ca2 +离子易脱落,凝胶变软,甚至溶解。何平等[ 4 ]在研海藻酸钠- 壳聚糖固定化木瓜蛋白酶时一方面在制作凝胶时使用Tris盐酸缓冲液,减少Ca2 +子的脱落,保持凝胶的稳定;另一方面首次通过加入壳聚糖粉末来提高凝胶硬度,壳聚糖上的正电荷( - NH+3 )与海藻酸的羧基相互作用,起到稳定凝胶的作用,适用于装柱使用,与不加壳聚糖粉末的固定化酶酶活性相同。在何平等[ 4 ]的研究中, PA与IPSAC的最适pH值均为7. 2,在70℃以下活性稳定;经包埋的PA空间结构没有发生变化,故最适pH值及热稳定性基本没变。IPSAC半衰期为59 d 。海藻酸钠- 壳聚糖固定化木瓜蛋白酶( IPSAC) ,其热稳定性好, 半衰期长, 凝胶硬度较高,可用于装柱使用, 便于工厂中自动化生产。 2吸附法固定 吸附法:利用固体吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表面而使酶固定化的方法称为吸附法。常用的吸附剂有活性炭、氧化铝、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃、硅胶、羧基磷灰石等。吸附法制备固定化酶,操作简便、条件温和,不会引起酶的变性失活,载体价廉易得,而且可反复使用。由于靠物理吸附作用,结合力较弱,酶与载体结合不牢固、易脱落,所以在实际生产中运用较少,这方面的研究也较少。 2. 1冷冻- 真空吸附法在介孔材料中固定木瓜蛋白酶 介孔分子筛孔道里组装功能材料的方法有多种, 常见的有气相吸附、浸渍法等, 与普通吸附方法相比, 冷冻- 真空吸附法是一种新的方法, 其优点为: 一是驱动力大, 吸附蛋白量会更大; 二是在低温状态下可保持酶蛋白的活性。高波等[ 6 ]以介孔材料SBA - 15为载体制备固定化木瓜蛋白酶。对固定化酶和溶液酶的特性进行对比,发现木瓜蛋白酶被固定后最适

木瓜蛋白酶提取三文鱼鱼皮油的工艺研究

木瓜蛋白酶提取三文鱼鱼皮油的工艺研究 李平;曹璐蕾;毛相朝 【摘要】为提高三文鱼皮的利用率,实现其高值化利用,本研究以三文鱼(Salmo salar)加工后丢弃的鱼皮为材料,分别利用风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶提取鱼油,经筛选,以提油率为指标确定木瓜蛋白酶为最佳水解酶.通过单因素实验和正交试验优化提油工艺条件,参照SC/T 3502—2016中规定的指标对所提取鱼油的质量进行比较分析.结果表明:在加酶量为8000 U/g(以原料计)、pH 7.0、65℃条件下酶解4 h,提油率可达88.03%.提取的粗鱼油中过氧化值为7.85 meq/kg、酸价为12.49 mg/g、碘价为162.55 g/100 g、水分及挥发物含量为0.5%、杂质含量为0.5%,达到二级粗鱼油标准.本研究可为三文鱼皮的综合利用和精深加工提供数据参考和技术支持. 【期刊名称】《中国渔业质量与标准》 【年(卷),期】2018(008)006 【总页数】8页(P18-25) 【关键词】三文鱼;鱼皮;木瓜蛋白酶;鱼油;综合利用 【作者】李平;曹璐蕾;毛相朝 【作者单位】中国海洋大学食品科学与工程学院,山东青岛 266003;中国海洋大学食品科学与工程学院,山东青岛 266003;中国海洋大学食品科学与工程学院,山东青岛 266003 【正文语种】中文

【中图分类】S98;TS225.2 三文鱼(Salmo salar),属硬骨鱼纲鲑形目鲑科,肉质鲜美,蛋白质含量高,深受 消费者喜爱,是当今世界范围内的高档水产消费品[1]。在三文鱼的加工处理过程中,通常分离出鱼肉后,产生约50%的废料,如鱼皮、内脏、鱼头等,但并未得 到有效的利用[2]。其中,鲑鱼皮的含油量在23.32%~61.53%(以干重计),具有 较高的利用价值[3]。鲑鱼皮油中多不饱和脂肪酸含量丰富,尤其是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA),它们不仅是构成动物细胞的重要成分,还具有多 种生理功能,比如防止动脉粥样硬化,降血压,改善糖尿病、炎症、癌症等[4], 对人类健康大有益处。 油脂提取的常用方法主要有压榨法、蒸煮法、溶剂法、淡碱水解法、超临界流体萃取法及酶法等。其机理是通过各种物化作用,破坏含油组织的结构,加速油脂分子的热运动,降低其黏度和表面张力,使油脂从破坏了的组织中分离出来,随着乳胶体的破坏,油脂逐渐变得清澈透明[5]。压榨法和蒸煮法操作简便,但鱼油提取率 较低。压榨法通常与酶法结合使用,以提高油的产出。溶剂法和超临界流体萃取法在提取油脂前需控制材料的含水量,而且残余溶剂含量和操作成本较高[6-8]。超 临界流体萃取法设备运行维护比较困难,同时可能引入内源挥发性化合物而影响人体健康[9]。淡碱水解法中碱浓度不易控制,浓度过低则水解不完全,浓度过高则 会引起鱼油皂化,均会降低鱼油的提取率[10]。酶法具有作用温和、时间短的特点,与热处理法相比,能够提高油的产量;与有机溶剂法相比,提取的极性脂质有更高含量的DHA[11]。Kechaou等[12]用碱性蛋白酶水解沙丁鱼内脏后,得到的脂质比有机溶剂法富含更多磷脂,营养价值高。此外,酶解液中含有可溶性蛋白,可用于蛋白质回收、功能性多肽或药物等研究,有利于提高原料的综合利用率。因此酶法提油的应用更为广泛。

木瓜蛋白酶的提取

木瓜蛋白酶的提取、分离纯化及其生物学研究综述及实验方法 13生物技术第二大组第二小组 组员:王玓玥(组长)、王子贺、王思瑶、王宇涛、王守鑫、谭国栋一、研究背景: 在经济飞速发展的今天,人们的生活水平已远远不只在于吃饱穿暖,食品的安全和营养问题受到人们越来越多的关注,绿色健康的生活也成为大家共同的追求,木瓜蛋白酶以它自身耐热及特殊结构等特点被广泛的用于食品行业,如何分离纯化得到高纯度低成本的木瓜蛋白酶则是人们现在研究的重点,本小组便也以此为研究主题展开实验。 二、木瓜蛋白酶基本介绍: 木瓜蛋白酶,又称木瓜酶,是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶,广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内,其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,属于巯基蛋白酶,它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点,这种蛋白水解酶,分子量为23406,由一种单肽链组成,含有212个氨基酸残基。至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位,他们分别是Cys25、 His159和Asp158,当Cys25被氧化剂氧化或与金属离子结合时,酶的活力被抑制,而还原剂半胱氨酸(或亚硫酸盐)或EDTA能恢复酶的活力木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均

能分解蛋白质的蛋白酶。它的外观为白色至浅黄色的粉末,微有吸湿性;木瓜蛋白酶溶于水和甘油,水溶液为无色或淡黄色,有时呈乳白色;几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。木瓜蛋白酶是一种含巯基(-SH)肽链内切酶,具有蛋白酶和酯酶 的活性,有较广泛的特异性,对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力,但几乎不能分解蛋白胨。木瓜蛋白酶的最适合PH值6~7(一般3~9.5皆可),在中性或偏酸性时亦有作用,等电点(pI)为8.75;木瓜蛋白酶的最适合温度55~65℃(一般10~85℃皆可),耐热性强,在90℃时也不会完全失活;受氧化剂抑制,还原性物质激活。。另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,且都不在活性部位。纯木瓜蛋白酶制品可含有:(1)木瓜蛋白酶,分子量21000,约占可溶性蛋白质的10%;(2)木瓜凝乳蛋白酶,分子量26000,约占可溶性蛋白质的45%;(3)

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