戊型肝炎病毒动物宿主和动物模型研究进展
慢性心理应激大鼠模型的建立及评价研究进展
[收稿日期]2009-03-17 [基金项目]安徽省教育厅自然科学研究资助项目(K J 2008B 318)[作者单位]蚌埠医学院第一附属医院心内科,233004[作者简介]王 寅(1981-),男,硕士研究生,住院医师. [文章编号]1000-2200(2010)02-0206-03 综 述 慢性心理应激大鼠模型的建立及评价研究进展 王 寅 综述,王洪巨 审校 [关键词]应激,心理学;动物模型;大鼠;综述[中国图书资料分类法分类号]R 395 [文献标识码]A 随着社会环境和生活方式的改变,工作压力增加,生活节奏加快,心理应激因素参与疾病的发生、发展得到广泛重视。心理应激触发机体产生的生理学效应包括急性自主神经功能不全、神经内分泌激活、血流动力学改变和引发炎症反应过程。因此,研究心理因素在疾病发生、发展和康复过程中的作用,具有重要的意义。慢性心理应激动物模型在医学研究领域发挥着越来越重要的作用,大量用于临床药物的筛选和评价,并且通过这些慢性心理应激动物模型了解临床疾病的病理生理机制,发生、发展以及对疾病的预后评估都有不可替代的作用。目前对于心理应激模型还没有统一的标准,现将主要的几类心理应激动物模型及其评价方法作一综述。 1 慢性抑郁型动物模型 抑郁是一种以情绪低落,思维迟钝,行为迟缓为主要症状的精神疾病,同时可伴有睡眠减少,体重降低等躯体症状。1.1 模型制作 1.1.1 慢性温和的不可预知性应激(chron ic m ild stress ,C M S) 由K atz 等 [1] 于1981年创立,但缺点较多,如过强的 应激刺激常导致动物死亡。由W ill ner 等[2-3] 对其进行改 进,是目前应用和研究较多的一种抑郁症模型。让大鼠在2~4周内每天经历一种不愉快的轻度应激,包括冷水游泳(4 ,5m i n),电击(电流强度1.0mA,频率1次/分),热环境(45 ,5m in),日夜颠倒,闪光刺激(频率3次/分),禁食,禁水,夹尾(1m in)等刺激。每种刺激形式不连续2天出现,形成一种CM S ,避免动物对同一种刺激产生适应。1.1.2 束缚应激模型 慢性束缚模型[4-5] 是将动物限制在 一个狭小的容器内(直径5cm ,长20cm ),使动物产生无助 或抑郁,每次刺激时间约1h 。 1.1.3 行为绝望(behav i oural despair ,BD )模型 亦称之为 强迫游泳模型 (f o rced s w i m m i ng test ,F S T ),由Porso lt 等1977年建立,被R enard 等[6-7]应用,是将大鼠(或小鼠)置入盛水的环形玻璃缸内强迫游泳。动物最初在水中拼命游动、挣扎,试图逃脱,随之感到逃脱是不可能的,便不再挣扎和游动,仅将头部露出水面,肢体漂浮,维持一种不动状态,称之为 BD 。由此衍生出小鼠的悬尾模型(tail suspension test ,T ST ),是将小鼠尾部悬挂,悬尾小鼠为克服不正常体位而挣 扎活动,但活动一定时间后,出现间断性不动,显示 绝望 状态[7-8]。 1.1.4 其他类型 如药物诱发的抑郁模型[9],孤养模型[10]等抑郁模型。 1.2 模型行为评分 目前尚无公认的经典测量抑郁情绪的测验,在各种抑郁模型动物中主要通过以下试验测量抑郁水平:多用敞箱试验[1]进行行为测评,表现为大鼠自发性探究行为明显减弱,运动能力降低。体重减轻、性行为减少、血浆中糖皮质激素升高,睡眠周期紊乱。同时发现老鼠天生偏好糖水的兴趣下降,运用糖水消耗试验测定24h 饮用1%蔗糖溶液的量,若糖水消耗显著降低,表示抑郁模型造模成功[2]。1.3 模型评价 上述抑郁模型可用于抗抑郁药物的筛选及抑郁病理生理机制的研究,因其采用的刺激因子类似人在生活中经历的应激事件强度,较好地模拟了人类快感缺乏、兴趣降低这一核心症状,并且模型稳定持久,作为抑郁应激模型是理想的。2 焦虑动物模型 焦虑是事先知道但又不可避免的、即将发生的应激性事件引起的一种预期反应,以恐惧、担心、紧张等精神症状为主要表现,同时伴心悸、多汗、手脚发冷等植物神经功能紊乱,其核心症状为担忧。2.1 模型制作 2.1.1 间氯苯哌嗪(mCPP)诱导焦虑的明暗箱模型 1998 年B ilke -i Go rz 等[11]建立了W istar 大鼠mCPP (2.5m g /kg)诱导焦虑的明暗模型,焦虑症状是通过对动物进入明箱的次数明显减少表现的。谭德讲等[12]用ddy 小鼠取代W i star 大鼠建立mCPP 诱导焦虑的明暗箱模型,是一个简便易行,经济有效的焦虑模型。 2.1.2 V oge l 饮水冲突试验和条件性电击饮水冲突是将动物的饮水行为和不确定的电击结合起来,动物如果想满足饮水的需要就可能受到电击的创伤,由此造成动物在饮水和避免电击之间的冲突,产生焦虑反应[13]。而条件性电击模型中,将某种信号和电击随机结合起来,信号出现后可能会出现电击,也可能不出现电击,动物处于期待性焦虑反应[14]。2.1.3 社会行为模型 该类模型包括天敌暴露[15]、社会隔离、母爱剥夺[16]等。天敌暴露模型是将动物暴露于对其生命有强烈威胁的另一动物面前,天敌就会进行猛烈的进攻, 而造成其焦虑水平的提高。但这一模型往往会对试验动物造成创伤,故多采用可视天敌暴露和天敌气味暴露等模型。2.2 模型行为评分标准 经典的测量动物焦虑反应的方法是高架十字迷宫试验[17]和敞箱试验。高架十字迷宫试验是 206 J Bengbu M ed Co l,l Februar y 2010,Vo.l 35,N o .2
动物氧化应激研究进展
动物氧化应激研究进展 中国农业科学院饲料研究所姚浪群 北京爱绿生物科技有限公司胡红军 随着我国畜牧业特别是现代养殖业集约化程度的提高以及人们对动物福利意识的增强，动物应激医学已成为动物医学的重要组成部分。在动物应激医学研究中，动物氧化应激又逐渐成为国内外学者的热点研究课题。 1 氧化应激概念与起因 1.1 氧化应激概念 动物在正常生理代谢过程中，会产生许多自由基，这些自由基通常不会导致组织细胞的损伤，机体依靠自身体内的抗氧化防御体系，主要包括抗氧化酶类（包括超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px、谷胱甘肽硫转酶GST等）以及非酶类的抗氧化剂（包括维生素C、维生素E、谷胱甘肽、褪黑素、a-硫辛酸、类胡萝卜素、微量元素铜、锌、硒等），可以保护机体组织和细胞防止自由基的损伤。当动物机体细胞内产生的自由基的水平高于细胞的抗氧化防御能力时，氧化还原状态失衡，过量的自由基存在于组织或细胞内，即诱发氧化应激，并导致氧化损伤。因此，氧化应激(Oxidative Stress)是机体应答内外环境，通过氧化还原反应对机体进行多层次应激性调节和信号转导，同时造成氧化损伤的重要生命过程。器官和组织对氧化应激的易感性依赖于它的抗氧化系统的状态和氧化剂与抗氧化之间的动态平衡。 氧化应激可导致细胞膜磷脂过氧化、蛋白质过氧化(受体和酶)以及DNA的氧化损伤。脂质、蛋白质和DNA的氧化会对机体造成不同程度的危害，从而影响机体的生长、发育、衰老等过程。急性和慢性的应激都能通过产生自由基诱导胃肠道、免疫系统等多方面的氧化应激。 1.2 氧化应激的起因 1.2.1 自由基的产生 细胞在正常新陈代谢和先天免疫反应过程中，都会产生活性氧代谢物(ROM)——自由基。首先，肠上皮细胞的主动新陈代谢本身就是ROM的来源，其生成与电子传递链的活性有关。所产生的活性物质包括超氧化物阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)和羟基自由基(·OH)，它们都是线粒体中氧化磷酸化不可避免的产物。其次，另一个内源性氧化应激源自于肠道先天及获得性免疫系统在与许多共生物和病原微生物反应过程中产生的一氧化氮(NO)，其在食物和水的吸收过程中不可避免的会产生。 当动物遭受应激刺激或患病时，机体代谢出现异常而骤然产生大量自由基，过量的自由基数
建立小鼠肿瘤模型的研究进展
建立小鼠肿瘤模型的研究进展 摘要：建立一种理想的肿瘤动物模型对研究肿瘤的发病、治疗和预防有重大的意义。其中小鼠肿瘤模型具有生长周期快、易获得、易操作等优点被基础实验研究所广泛采用，如何选择和建立一个合适的小鼠肿瘤模型对肿瘤的整个研究有着举足轻重的作用。 关键字：肿瘤，动物模型，小鼠 肿瘤，是一种严重威胁人类健康的多发病和常见病。对肿瘤的研究一般都是在人类疾病动物模型的基础上展开的。建立一个完全反映人类疾病的动物模型比较困难，但可依据不同的实验目的选择相应的动物实验模型。 1.实验动物的选择 可用作肿瘤模型的动物有很多，小鼠肿瘤模型作为其中一种常用模型主要因为有以下几个优点。（1）易获得，常用的肿瘤模型小鼠通常采用SPF级小鼠，SPF级小鼠一般医学院校及研究所都能买到。（2）生长周期短，一般小鼠肿瘤模型两周左右就能长大，能大大缩短实验周期。（3）易操作，小鼠的动物实验操作一般简便，因此可适当增加组内样本数量，使实验数据更具说服力。 2.理想的建立肿瘤模型应具备的条件 （1）肿瘤生长的过程应与人类肿瘤生长过程相似，做到尽可能复制出与人类肿瘤相同的模型。 （2）制作模型的方法简单易行。 （3）动物模型的重复性要好，要能满足实验的多次重复试验结果稳定性好。 （4）采用的建模方法对实验人员和环境无危害或危害较小。 3.肿瘤来源的选择 现在世界上保有近500种的动物移植瘤，但常用于筛药的不到40种，多数为小鼠肿瘤，其次是大鼠和仓鼠移植瘤，包括小鼠L1210淋巴白血病，P1534淋巴白血病，艾氏腹水瘤，Friehd病毒白血病，肉瘤180，白血病P388，Lewis肺癌，腺癌755，白血病615，Walker-256，吉田肉瘤，肉瘤45，Liol淋巴瘤，Dunning 白血病，Ｗagner癌肉瘤，白血病L5170Y，P1798淋巴肉瘤，LPC-1浆细胞瘤，淋巴瘤8，B16或Cloadman黑色素瘤，Ridaway骨肉瘤，Gardner 淋巴肉瘤，肉瘤37，P315白血病，Mur hy-sturm淋巴肉瘤，Jensen肉瘤，Geurin氏癌，仓鼠十二指肠腺癌和人体肉瘤HSL第1代杂交鼠移植。它们对抗癌药作用的敏感性大致可分
国内近期关于动物模型的文献
九、国内近期动物疾病模型文献 （一）中医中药研究用动物模型 1．熊启达等：“卫气营血”模型，四川医学，（2）：65，1983。 2．梁月华等：“寒症、热症”模型，中医杂志，（11），1982。 3．毛腾敏：大鼠“血瘀”模型，北京医学院学报，（4）：306，1981。 4．金惠铭等：家兔“血瘀”模型，中医杂志，（8）：1982。 5．贲长恩等：大鼠“血虚”模型，中医杂志（6）：69，1981。 6．李传英等：大鼠“脾虚”模型，浙江中医杂志，（8）355，1982。 7．张启元等：金黄地鼠、大鼠“脾虚”模型，中华医学杂志，（2）：83，1980。 8．黄柄山等：小鼠“脾虚”模型，中西医结合杂鼠，3（5）：295，1983。 9．施玉华等：小鼠“阳虚”模型，中医杂志，（2）：31，1982。 10．宫斌等：小鼠“阳虚”模型，上海中医学院科研汇编，1980。 11．董笃一等：小鼠“阴症”与“阳症”模型，陕西中医学院学报（3）：1，1981。 12．左箴等：脉微欲绝模型，第二军医大学学报，（1）：19，1982。 13．杨连卿等：大鼠“阴阳失调”模型，中西医结合杂志，（6）：353，1983。 14．孙爱真等：狗“里实”模型，上海中医研究所科研资料汇编，1979。 15．施玉华等：某些助阳药对阳虚动物模型的作用，上海中医药杂志（2）：6，1980。 16．北京师范大学生物系消化生理科研组：中医脾虚证动物模型的造型，中华医学杂志60（2）：83，1980。 17．陕西中医学院生理教研室：“阴定”与“阳症”动物模型的初步建立，陕西中医学院学报，4（3）：1，1981。 18．南京医学院中西医结合研究组，脾虚泄泻证动物模型的研究，浙江中医杂志，（8）：355，1982。 19．史荫绵等：“血瘀”动物模型的初步研究，中医杂志（8）：64，1982。 20．胡素坤等：大黄所致大鼠“虚证”模型的形态学研究，免疫学快报3（4）：14，1983。 21．关崇芬等：大黄所致大鼠“虚症”模型的免疫功能观察，免疫学快报3
戊型病毒性肝炎诊断标准及处理原则GB17011—1997
戊型病毒性肝炎诊断标准及处理原则— 前言 戊型病毒性肝炎是由戊型肝炎病毒引起的，以肝实质细胞炎性坏死为主的肠道传播性疾病。患者主要为成年人，病死率较高，尤其孕期最后个月的妊娠妇女患病后，病死率可达％～％。戊型病毒性肝炎，首先在印度次大陆发现，中亚、东南亚、非洲、印度次大陆均有较大流行的报道。多数爆发流行为水源性的。食源性的报道亦见诸文献。我国人群戊型肝炎的感染率约％。急性散发性肝炎中戊肝约占％，是我国乙类法定传染病之一。 本标准的附录是标准的附录。 本标准的附录是提示的附录。 本标准由中华人民共和国卫生部提出。 本标准由中国预防医学科学院病毒学研究所和北京地坛医院负责起草。 本标准的主要起草人：刘崇柏、徐道振。 本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院负责解释。 范围 本标准规定了戊型病毒性肝炎的诊断标准及处理原则。 本标准适用于各级医疗卫生防疫机构作为戊型病毒性肝炎的诊断和防治依据。 戊型病毒性肝炎诊断标准 依据流行病学资料，症状体征及实验室检查进行综合诊断，确诊则依赖病原血清学或病原学检查。 ．急性戊型肝炎及（黄疸型／无黄疸型） ．．流行病学资料：发病前～周内接触过肝炎病人或饮用过被粪便垃圾污染的水或外出就餐，到戊型肝炎高发区或流行区。 ．．无其他原因可解释的持续周以上乏力、食欲减退或其他消化道症状或肝肿大伴有触痛或叩击痛。 ．．血清谷丙转氨酶（）明显升高。 ．．血清病原学排除急性甲、乙、丙、庚型肝炎。 ．．皮肤巩膜黄染、血清胆红素＞．μ／（＞／）或尿胆红素阳性，并排除其他疾病所致的黄疸。 ．．病原血清学检测，抗－阳性或抗－由阴转阳，或滴度由低转高，或高转低倍以上者。 临床诊断：．．、．．加．．。 确诊病例：．．。 注：有．．者为黄疸型，无．．者为无黄疸型。 ．急性重型戊型病毒性肝炎 ．．符合急性黄疸型戊型肝炎（参照．）。 ．．起病后天内出现精神、神经症状（指肝性脑病）而排除其他原因者。 ．．黄疸迅速加深，血清胆红素大于μ／。 ．．凝血酶原时间延长，凝血酶原活动度低于％。 疑似病例：．．＋．．。 确诊病例：疑似病例加．．＋．．。 ．亚急性重型戊型病毒性肝炎 ．．符合急性肝炎黄疸型（参照．）。 ．．起病后天以上出现以下情况者：
动物氧化应激研究进展
动物氧化应激研究进展
动物氧化应激研究进展 随着我国 畜牧业 特别是现代养殖业集约化程度的提高以及人们对动物福利意识的增 强，动物 应激医学已成为动物医学的重要组成部分。在动物应激医学研究中，动物氧化应 激又逐渐成为国内外学者的热点研究课题。 1 氧化应激概念与起因 1.1 氧化应激概念 动物在正常生理代谢过程中，会产生许多自由基，这些自由基通常不会导致组织细胞 的损伤，机体依靠自身体内的抗氧化防御体系，主要包括抗氧化酶类(包括超氧化物歧化 酶 SOD 、过氧化氢酶 CAT 、谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px 、谷胱甘肽硫转酶 GST 等) 及非酶类的抗氧化剂(包括 维生素 C 、维生素 E 、谷胱甘肽、褪黑素、 a- 硫辛酸、类胡萝 卜素、微量元素 铜、锌、硒等)，可以保护机体组织和细胞防止自由基的损伤。当动物机 体细胞内产生的自由基的水平高于细胞的抗氧化防御能力时，氧化还原状态失衡，过量的 自由基存在于组织或细胞内，即诱发氧化应激，并导致氧化损伤。因此，氧化应激 (Oxidative Stress) 是机体应答内外环境， 通过氧化还原反应对机体进行多层次应激性调节 和信号转导，同时造成氧化损伤的重要生命过程。器官和组织对氧化应激的易感性依赖于 它的抗氧化系统的状态和氧化剂与抗氧化之间的动态平衡。 氧化应激可导致细胞膜磷脂过氧化、蛋白质过氧化 (受体和酶 )以及 DNA 的氧化损伤。 脂质、 蛋白质和 DNA 的氧化会对机体造成不同程度的危害，从而影响机体的生长、发育、 衰老等过程。急性和慢性的应激都能通过产生自由基诱导胃肠道、免疫系统等多方面的氧 化应激。 1.2 氧化应激的起因 1.2.1 自由基的产生 细胞在正常新陈代谢和先天免疫反应过程中， 基。首先，肠上皮细胞的主动新陈代谢本身就是 性有关。所产生的活性物质包括超氧 化物阴离子 ( · OH) ，它们都是线粒体中氧化磷酸化不可避免的 产物。其次，另一个内源性氧化应激源 自于肠道先天 及获得性免疫系统在与许多共生物和病原微生物反应过程中产生的一氧化 氮 (NO) ，其在食物和水的吸收过程中不可避免的会产生。 当动物遭受应激刺激或患病时，机体代谢出现异常而骤然产生大量自由基，过量的自 由基数量 将超过抗氧化体系的还原能力， 使机体处于氧化应激状态， 结果会导致机体损伤。 目前研究表明主要有四种致细胞损伤机制： 1) 对脂类和细胞膜的破坏，从而导致细胞死亡。 2) 对蛋白质、酶的损伤，从而导致蛋白质变性，功能丧失和酶失活。 3) 对核酸和染色体的破坏，从而导致 DNA 链的断裂，染色体的畸变和断裂。 4) 对细胞外基质的破坏，从而使细胞外基质变得疏松，弹性降低。 1.2.2 氧化应激的起因 1.2.2.1 外源性因素 1.2.2.1.1 日粮 营养因素 营养缺乏或不良可能使体内自由基增加，而且还影响抗氧化酶生物合成及 内源性抗氧 都会产生活性氧代谢物 (ROM) ——自由 ROM 的来源，其生成与电子传递链的活 (O2-) 、过氧化氢 (H2O2) 和羟基自由基
戊肝
一．病因 戊肝是一种自限性传染病，由戊型肝炎病毒引起的肝脏疾病(简称戊型肝炎)，主要经粪口途径传播，发病人群以成年人为主，具有明显季节性，春冬季高发，多见于雨季或洪水之后，其预后良好。 二．临床表现 1.常见症状：发热、倦怠乏力、食欲缺乏、恶心、呕吐、上腹不适、肝区痛、腹胀、腹泻。 2.潜伏期为10～60日，平均40日。 3.一般起病急，黄疸多见。半数有发热。约1/3有关节痛。常见胆汁淤积状，如皮肤瘙痒、大便色变浅较甲型肝炎明显。多数肝大。 4.大多数病人黄疸于2周左右消退，病程6～8周，一般不发展为慢性。 5.孕妇感染HEV病情重，易发生肝功能衰竭，尤其妊娠晚期病死率高，可见流产与死胎（其原因可能与血清免疫球蛋白水平低下有关）。 三．治疗原则 主要采取支持与对症治疗，适当休息、合理营养为主，选择性使用药物为辅。应忌酒、防止过劳及避免应用损肝药物。 四. 护理措施 1.休息 早期严格卧床休息最为重要，症状明显好转可逐渐增加活动量，以不感到 疲劳为原则，治疗至症状消失，隔离期满。经1～3个月休息，逐步恢复工作。 2.饮食 以合乎患者口味，易消化的清淡食物为宜。应含多种维生素，有足够的热 量及适量的蛋白质，脂肪不宜限制过严。 宜进食高蛋白，高维生素，低脂肪类食物，碳水化合物不宜过多。例：鱼肉， 豆腐，山药
3．对症下药 在合理休息，营养治疗基础上，选用保肝药物促进肝功恢复。此外恶心，呕吐者服用止吐药，反酸，烧心者予抑制胃酸分泌，腹胀者予胃动力及助消化药物。 五．预防（主要采取以切断传播途径主为的综合性措施） 保护水源，不要让粪便及污物污染水源，提倡喝开水 搞好个人卫生，饭前便后要洗手，食具、茶具和生活用具等要经常消毒。 注意饮食卫生，不要进食生肉或半熟动物肉制品，尽量不生吃海鲜、少吃凉拌菜，剩菜剩饭加热后再食用。 六，家中如出现戊型肝炎病人，首要措施是隔离。一定要和病人分开居住，家人进隔离室要穿专门的衣服、鞋子，出隔离室要用0。5％过氧乙酸消毒液泡洗1－2分钟，尔后用流动水洗净。病人的排泄物可用漂白粉干粉做1：5混合均匀放置二小时倒掉，地面可用500毫克／升漂白粉液擦洗60分钟，餐具1000毫克／升浸泡30分钟，衣服125毫克／升浸泡30分钟即可，戊型肝炎隔离时间自发病日起3－4周即可。 平时若生活在一起应注意个人物品应专人专用，使用后应注意消毒，吃饭尽量做到分餐，衣物要单独洗晒消毒，饭前便后勤洗手。
脑肿瘤动物模型的研究
脑肿瘤动物模型的研究 动物模型是研究肿瘤发病机制和检验各种治疗方法的有力武器，本文就脑肿瘤动物模型的历史发展和应用前景作一综述。 脑肿瘤目前仍是严重威胁人类健康和生命的疾病，而肿瘤实验动物模型的建立为研究其发病机制、生物学特性和检测各种治疗方法提供了一种高模拟性工具。自上世纪以来，先后建立了化学物质诱发脑肿瘤模型、病毒诱发模型、同种以及异种移植模型，随着现代分子生物学技术的发展，转基因动物模型又将成为人们研究的热点。 1.早期脑肿瘤动物模型及其局限性 1．1 自发性脑肿瘤动物模型 脑肿瘤在哺乳动物中的发病率不一，有报道狗为0.1-0.5%，SD大鼠（7803只）为0.44%，但另一组41000只SD大鼠中仅发现38例中枢神经系统肿瘤，在灵长类动物中更为罕见，曾解剖14000只恒河猴和1247只猕猴尸体，未发现一例脑肿瘤[1]。由于发病率低，加之自发瘤的隐匿性及荷瘤动物生存期短的特点，自发瘤模型难以用于临床。 1．2 化学物质诱发模型 早期使用甲基胆蒽注入鼠脑实质内可成功诱发出脑肿瘤，其中大部分为胶质瘤和脑膜肉瘤。在20世纪70年代，开始使用一种合成的致癌物质N-亚硝基脲及其衍生物乙基亚硝基脲（ENU）等进行肿瘤诱发实验。Kostener[2]等将50㎎/㎏的ENU给受孕20天的大鼠一次性静脉注射后，子代中均出现了中枢神经系统肿瘤，但ENU对成年鼠诱发脑肿瘤率较低。亚硝基脲类物质诱发的脑肿瘤在部位、类型、诱导时间以及恶性程度等方面均有很大差异。 1．3病毒诱发模型 由于发现病毒与脑肿瘤的发病存在一定的关系，一些学者试图使用病毒进行脑肿瘤诱发实验，核糖核酸病毒（Rous肉瘤病毒）和脱氧核糖核酸病毒（腺病毒）均可诱发脑肿瘤。Bigner[3]等把浓缩的Rous肉瘤病毒（0.01ml）注射到一种新生犬脑内，经一段潜伏期后全部发生胶质瘤或肉瘤，而且在动物体内并未发现子代病毒，这说明病毒的致瘤机理可能与其复制无关。中国生物治疗网https://www.360docs.net/doc/b214457942.html,杨教授特别指出，肺癌的早期症状也有人将AD12病毒直接注入到出生后24小时的鼠脑实质内，经过数月的潜伏期后就能发生脑肿瘤，其中大部分为髓母细胞瘤。Tabuchi[4] 则把感染Rous病毒的纤维母细胞接种到猴的右额叶内，73%发生了肿瘤，主要是肉瘤。病毒诱发的脑肿瘤可在同种动物中连续传代，经过克隆后可制成生物特性稳定的模型，但其致瘤周期不一，诱发瘤性质差别较大，而且病毒不宜保存，对人也有一定的伤害作用，从而限制了其应用。 2．脑肿瘤移植模型 同种移植模型较多用于胶质瘤的研究。将诱发的鼠脑胶质瘤进行体外细胞培养，形成稳定的细胞系，如C6，9L，BT4A等，再将这些细胞植入同种大鼠脑内，可得到同种移植胶质瘤模型。脑肿瘤同种移植模型虽能提高肿瘤的模拟性和统一性，但动物脑瘤与人脑瘤相比，在遗传学、细胞动力学和生物学方面均存在显著的差异，因而人们将目光更多地投向脑肿瘤异种移植模型。 由于免疫排斥反应的存在，早期多将肿瘤移植于动物免疫缺陷区，如豚鼠眼前房、仓鼠颊囊、兔角膜和鸡胚绒毛膜等，还有学者采用药物、X线照射等方法抑制动物免疫反应[5]。直到1968年由于免疫缺陷动物的发现，才真正开创了脑肿瘤异种移植动物模型的时代，这些动物包括T淋巴细胞功能缺陷的裸小鼠、裸大鼠，B淋巴细胞功能缺陷的CBA/N小鼠以及T、B淋巴细胞联合缺陷的Lasat小鼠、SCID小鼠等。目前对于脑肿瘤移植的方法还存在不同意见，主要包括：脑内移植、肾包膜下移植和皮下移植。脑内移植最接近肿瘤的人体生长环境，但其操作复杂，动物感染及死亡率高。近来有学者[6]采用立体定向技术将浓缩的肿瘤
戊肝的研究现状和展望
戊肝的研究现状和展望 近年来戊型肝炎成为全球关注的问题,针对戊型肝炎的研究更多的集中于流行病学、诊断及预防，在发病机制方面也有一些研究成果。本文从戊型肝炎病毒的结构、戊型肝炎病毒的基因分型（基因1型，2型，3型及4型，其中基因3型及基因4型为人畜共患）、戊型肝炎的流行病学及诊断治疗、预防等方面对戊型肝炎的研究现状进行阐述并对戊型肝炎未来的研究作出展望。 一、戊型肝炎病毒 HEV是无包膜的单股正链RNA病毒，直径约为27~34 nm的球形病毒颗粒,表面有突起及缺口。HEV基因组全长约7.2kb。5'端有m7帽子结构，后有28nt的非编码区（nocoding region,NCR) ;3'端有多聚A尾，其前同样有68nt的NCR。基因组分为3个开放读码框（open reading frame， ORF):ORF1、ORF2及ORF3。其中最大的开放读码框是ORF1,起始于基因组5'的第2nt，终止于第5109nt，编码非结构蛋白；ORF2则起始于第5147nt，终止于第7127nt，编码一个全长约660个氨基酸的病毒衣壳蛋白；ORF3与ORF2部分或者完全重叠，编码一个小分子蛋白，具体功能尚不清楚。 HEV基因1型和基因2型病毒株目前仅有人类感染的报道，除在实验条件下可有效感染食蟹猴及恒河猴等灵长类动物外，尚无感染动物a报道，提示基因1型及2型不能突破种属障碍感染其他动物;基因3型及基因4型则可突破种属障碍，既可以感染猪也可以感染人。同一地区分离所得的人与猪的HEV同源性高度相似，甚至同一亚型内，两者之间同源性可达95% ~ 100%。提示基因3型及基因4型HEV感染导致的戊型肝炎是人畜共患病。 目前戊型肝炎尚无合适的动物及细胞模型，因此尚不清楚HEV进入肝细胞的具体途径以及肝细胞表面存在的HEV受体。 二、戊型肝炎的流行病学 HEV基因1型从非洲和亚洲大流行的患者体内分离而得;基因2型则以墨西哥株为代表，且报道较少，近来也有尼日利亚株的报道;基因3型从欧、美、日、韩等发达国家，以及阿根廷急性戊型肝炎患者中分离而得;基因4型主要分布于中国大陆、中国台湾。基因1型和
转基因小鼠肿瘤模型的研究进展_百替生物
转基因小鼠肿瘤模型的研究进展 沈富毅，潘隽玮，郁嘉伦，余昂，侯晓骏 [摘要]动物模型在肿瘤病因的揭示，发病机理的探索以及治疗措施的评估中有着不可替代的重要作用。继常规转基因方法之后，可诱导表达转基因、基因打靶、条件性基因打靶以及基因捕获等技术的出现及其在肿瘤模型建立中的应用为我们提供了大量能较好模拟人体相应肿瘤的动物模型，极大地深化了我们对肿瘤生物学行为的认识，并有助于人们找到攻克肿瘤的办法。 [关键词]肿瘤，小鼠模型，转基因 肿瘤是一类严重危害人类健康及生命的重大疾病，动物模型在肿瘤病因、发病机理的揭示以及治疗措施的评价中发挥着不可替代的作用。肿瘤动物模型最早源自小鼠自发突变系或经致癌剂诱变而得，对它们的研究使我们对环境致癌物及其代谢活动机理有了一定的认识；但自发突变频率在自然状态下通常很低，而诱发模型也因其不可精确控制性而限制了它们的应用。在过去的二十多年里，随着人们对癌基因激活或抑癌基因失活在肿瘤发生发展中作用的认识日益深入，以及近年发展起来的小鼠生殖系引入可诱导或精细调控突变技术的应用，小鼠肿瘤模型的建立工作取得了突破性进展，本文就此作一简要综述。 1.常规转基因（transgenic） 上世纪80年代初发展起来的原核显微注射技术，使我们可以将外源DNA直接导入小鼠生殖系以构建转基因动物模型。目的基因在合适启动子驱动下表达，可赋予转基因动物新的表型，通过其表型分析可识别研究基因的功能。转基因动物技术在肿瘤研究中的主要作用就是建立转基因的肿瘤动物模型，该研究始于1974年，Jaenisch等1用显微注射法将多瘤病毒SV40的DNA导入到小鼠的囊胚（blastocyst）中，在子代小鼠的肝、肾组织中检测到了SV40的DNA。这一结果证明，将外源基因导入胚胎细胞中并实现整合是可能的。以后相继有人用同样的方法实现了外源基因向小鼠受精卵的转移，并能遗传给后代。在基因转移的方法上相继出现了逆转录病毒载体法、电脉冲法等。1985年，Adams2等用转基因方法首次构建了B淋巴瘤myc癌基因易位的小鼠模型，此后10年，陆续发展了针对各种类型恶性肿瘤的转基因小鼠研究。如今这项技术运用较为成熟的是，利用免疫球蛋白启动子调控的c-myc基因在转基因小鼠中的表达，导致早期淋巴瘤的发生3。在LTR/c-myc转基因小鼠模型中，利用哺乳类动物肿瘤病毒长末端重复序列（LTR）驱动c-myc广谱的表达，可造成多种组织形成肿瘤，如睾丸、乳腺和淋巴系。1984年Stewart把小鼠乳腺癌病毒（MMTV）的增强子与myc基因或ras基因连接,形成的MMTV-myc转基因小鼠和MMTV/V-Ha-Ras转基因小鼠都有高的乳腺癌发生率4。近年来，这项技术更多的运用于肿瘤发生机制的探索上。Li等5构建了乳腺癌WAP-Tag转基因小鼠模型，该模型由小鼠乳清酸蛋白WAP启动子和SV40大T抗原构建而成，可用于乳腺癌变过程中细胞的增殖与凋亡、DNA突变及修复机制等方面的研究。在慢性粒细胞性白血病(CML)的研究中，Heisterkamp等6构建的bcr-abl和crkl双转基因小鼠发病潜伏期及存活期均大大缩短，直接证明了crkl参与
心肾不交所致失眠大鼠模型_郜红利
tamin D 3，recombinant human transforming growth factor-beta 1，and recombinant human bone morphogenetic protein-2induce in vitro differentiation of canine osteosarcoma cells ［J ］．J Vet Med Sci ，1999，61（6）：649-656． ［15］ Sitara D ，Ｒazzaque M S ，St-Arnaud Ｒ，et al ．Genetic ablation of vitamin D activation pathway reverses biochemical and skele-tal anomalies in Fgf-23-null animals ［J ］．Am J Pathol ，2006，169（6）：2161-2170． ［16］ Wasserman ＲH ，Fullmer C S．Vitamin D and intestinal calci-um transport ：facts ，speculations and hypotheses ［J ］．J Nutr ，1995，125（7）：1971-1979． 心肾不交所致失眠大鼠模型 郜红利1，涂星2*，卢映2，孙敏红3，张方 4 （1．湖北民族学院中医药学院，湖北恩施445000；2．广州中医药大学第一临床医学院，广东广州510405；3．湖北省恩施州疾病控制中心，湖北恩施445000；4、湖北省恩施自治州优抚医院，湖北恩施 445000） 收稿日期：2013-10-12作者简介：郜红利（1967—），男，副教授，研究方向：民族药物的开发与利用。E-mail ：349523825@qq．com *通信作者：涂 星（1987—），男，博士生，研究方向：中药药理学，药物制剂新剂型与新技术。E- mail ：kuangsheng1234@126．com 摘要：目的 建立同时符合中医“心肾不交”和下丘脑-垂体-肾上腺轴紊乱的失眠大鼠模型。方法 采用母乳鼠分离 法、多种焦虑刺激和腹腔注射对氯苯丙氨酸造失眠模型，并考察受试大鼠的一般行为学、血象及血浆Orexin 、促肾上腺皮质激素释放激素（CＲH ）、促肾上腺皮质激素（ACTH ）的水平。结果模型组大鼠睡眠时间显著减少，目光呆 滞，双目、口唇呈苍白色，爪甲较光滑，皮毛重度枯槁蓬乱；血象检查血浆中红细胞数目和血红蛋白水平显著降低； 血浆中ACTH 、Orexin 、CＲH 水平显著性升高。结论本实验的失眠大鼠模型能体现了“心肾不交”所致下丘脑-垂 体-肾上腺轴内分泌紊乱的失眠发生特点。 关键词：失眠；心肾不交；下丘脑-垂体-肾上腺轴；动物模型；激素分泌中图分类号：Ｒ285.5 文献标志码：A 文章编号：1001-1528（2014）06-1138-04doi ：10.3969/j．issn．1001-1528.2014.06.006 Ｒat model for insomnia caused by heart-kidney imbalance GAO Hong-li 1， TU Xing 2， LU Ying 2， SUN Min-hong 3， ZHANG Fang 4 （1．Institute of Traditional Chinese Medicine ，Hubei Institute for Nationalities ，Enshi 445000，China ；2．The First Affiliated Hospital of Guangzhou Uni-versity of Chinese Medicine ，Guangzhou 510405，China ；3．The Enshi Center for Disease Control and Prevention ，Enshi 445000，China ；4．Special Care Hospital of Enshi ，Enshi 445000，China ） ABSTＲACT ：AIM To establish a rat model for insomnia that was consistent with both heart-kidney imbalance and disorder of hypothalamic-pituitary-adrenal （HPA ）axis．METHODS Maternal separation ，multiple anxiety stimulation ，and the abdominal administration of chlorophenylalamine were adopted to induce rats with insomnia．The general behavior of rats was observed and their hemogram and the levels of ACTH ，orexin ，CＲH were meas-ured．ＲESULTS Compared to the control group ，the rats in the model group showed sleep-less ，glassy-eyed ， pale lips ，and withered fur．The number of red blood cells and the hemoglobin concentration in plasma decreased significantly as well ，while the level of ACTH ，orexin and CＲH significantly increased．CONCLUSION The in-somnia rats can present the symptom of heart-kidney imbalance and dysfunction of hypothalamic-pituitary-adrenal axis． KEY WOＲDS ：insomnia ；heart-kidney imbalance ；hypothalamic-pituitary-adrenal （HPA ）axis ；animal model ；hormone secretion 8 311
戊型肝炎病毒的危害性及流行状况分析
戊型肝炎病毒的危害性及流行状况分析 戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus, HEV，下简称戊肝病毒）为正链RNA病毒，是戊型肝炎病毒科（Hepeviridae）戊型肝炎病毒属（hepevirus）的唯一成员，目前被认为是亚洲、中东和非洲国家急性肝炎的最重要病因之一[1]。 戊肝病毒主要分为4个基因型，1型主要分布于亚洲、非洲、南美的发展中国家，2型主要分布于墨西哥、乍得、尼日利亚等国；3型存在于发达国家的本土戊肝病人和世界各地的猪体内；4型主要来自日本、中国、台湾的发达地区和印度，也存在于猪体内[2]。但是迄今为止，发现戊肝病毒只有一个血清型。 1 HEV的感染率、发病率和死亡率； 1.1 HEV的爆发流行情况： 近50年以来，世界各地的发展中国家陆续发生了多次大规模的戊肝爆发（表1）。1955年，携带HEV的污水污染了印度德里供水的泵站导致戊肝大爆发。此次流行持续了近2个月，整体感染率大约为2.3%，青壮年（15-40岁）的感染率最高，约2.9%。2007年10月至今，非洲乌甘达北部Kitgum地区发生戊肝的暴发流行，累计发病人数9772人，死亡155人[3]。在疫情最严重的Madi Opei和Paloga镇，戊肝发病率分别为30.9%和19.2%。此次疾病流行过程中受害最严重的人群是孕妇和0-2岁的儿童，在Madi Opei和Paloga，孕妇的发病率高达85.4% 和72.0%。在Madi Opei，2岁以下儿童和孕妇中的病死率最高，分别为8.7%和8.2%（personal
communication）。我国是戊肝的高流行区之一，自1982发现戊肝病例以来至今已报道了11次戊肝爆发流行。最大的一次爆发流行于1986年9月至1988年4月发生在新疆南部，波及23个县市，持续20多个月，共发病119280例，死亡707人[4]。其中在新疆多鲁乡，发病率高达42.6%（9371/21958），死亡率0.5%（47/9371）,孕妇病死率13.6%（20/147）[5]。戊肝在大流行时的病死率位于0.2%-4%之间。但在孕妇中（特别是怀孕7-9个月的孕妇）因HEV导致的重症肝炎而死的比率很高，达10-20%。 表1 近半个世纪较大规模的戊肝爆发 年份国家地区病例数 2009-今斯里兰卡，瓦武尼亚2,000 2007-今乌干达，基特古姆10,000 2004 苏丹，达尔富尔2621 1991 印度，坎普尔79,000 1988-89 索马里，谢贝利河下游11,413 1986-88 中国，新疆120,000 1981-82 尼泊尔，加德满都山峡12,000 1978-82 印度，克什米尔52,000 1976-77 缅甸，曼德勒市20,000 1973-74 尼泊尔，加德满都山峡10,000 1955-56 前苏联，吉尔吉斯共和国10,812 1.2 抗HEV抗体的流行病学概况
戊型病毒性肝炎
戊型病毒性肝炎临床路径 （2017年版） 一、戊型病毒性肝炎临床路径标准住院流程 （一）适用对象。 第一诊断戊型病毒性肝炎（ICD-10：B17.201） （二）诊断依据。 根据中华医学会《临床诊疗指南〃传染病学分册》（2006.12，人民卫生出版社） 1.急性起病； 2.流行病学：病前在戊型病毒性肝炎流行区，进食未煮熟的海产品等，或饮用污染的水； 3.主要症状：乏力、食欲减退，恶心、呕吐、厌油、腹胀、肝区痛，尿色加深，黄疸，少数可伴发热； 4.主要体征：可有皮肤巩膜黄染，肝大，质地软，边缘锐，伴触痛及叩痛； 5.病原学：戊型肝炎病毒（HEV）相关检查阳性，其中血或粪便HEVRNA（+）具有确诊意义，抗HEV-IgM和/或抗HEV-IgG阳性有参考价值； 6.排除其他原因甲型病毒性肝炎、其他嗜肝病毒如巨细胞病毒、药物等导致的急性肝损伤； 根据上述1-4，6条标准加上抗HEV-IgM（+）可以临床诊断；血或粪便HEV-RNA（+）阳性可以确定诊断。
（三）进入路径标准。 1.第一诊断必须符合ICD10：B17.201，戊型病毒性肝炎； 2.病情严重程度属轻-中度，未达到急性肝衰竭（ICD10：K72.002）或亚急性肝衰竭（ICD10：K72.051）诊断标准； 3.无慢性肝病/肝硬化基础，无恶性肿瘤、风湿免疫病、器官移植等需要应用免疫抑制治疗/化疗等情况； 4.当患者同时具有其他疾病诊断时，但在住院期间不需要特殊处理也不影响第一诊断的临床路径流程实施时，可以进入路径。 （四）标准住院日。 标准住院日2-3周。 （五）住院期间的检查项目。 1.必需的检查项目 1）血常规； 2）尿常规； 3）粪便常规和潜血； 4）肝肾功能、电解质、血糖； 5）凝血功能； 6）甲胎蛋白（AFP）； 7）腹部超声； 8）血清抗HEV-IgM，抗HEV-IgG或/和血清或粪便HEV-RNA。
NSFC2008-慢性疲劳综合征动物模型的研究
课题编号： 国家自然科学基金 申请书 资助类别：面上项目 亚类说明：青年科学基金项目 附注说明： 项目名称：慢性疲劳综合征动物模型的研究 申请者：电话： 依托单位： 通讯地址： 邮政编码：单位电话： 电子邮件： 申报日期： 2008年1月15日 国家自然科学基金委员会
摘要：作为亚健康重要组成部分的慢性疲劳综合征（CFS）将成为21世纪影响人类健康的严重问题之一，开展对CFS的系统化研究具有重要的现实意义。由于缺乏公认的CFS实验动物模型，导致CFS的基础研究以及防治研究未见突破性进展。以往的研究主要通过注射病毒、慢性束缚的方法制作慢性疲劳动物模型，与人体CFS发病的多因性有较大差距，且检测指标单一，不能满足CFS系统研究的需要。基于目前慢性疲劳动物模型研究的不成熟，本课题从病因学方面入手，不仅使动物慢性疲劳运动，而且干扰其正常睡眠，扰乱生理节律，从而使动物模型更接近于临床实际，同时系统检测CFS大鼠在免疫系统、神经系统功能异常和行为异常改变方面的多项指标。为进一步研究CFS的发病机制、防治方法提供符合临床实际的、标准的、可重复的、可控易行的实验动物模型，推动CFS研究的发展。
（一）研究的目的及意义（研究意义、国内外研究现状及分析，附主要参考文献目录。） 随着当代社会竞争的增强，生活节奏的加快，临床上以精神紧张、慢性疲劳为主诉的患者日趋增多，慢性疲劳综合征（chronic fatigue syndrome ，CFS）日益受到医学界乃至整社会的广泛关注。有研究表明，全球真正健康的人只占5%，病人占20%，亚健康人群占75%[1]，作为亚健康重要组成部份的CFS将会成为21世纪影响人类健康的严重问题之一，开展对CFS的系统化研究具有重要的现实意义。 CFS是一种以长期疲劳为突出表现，同时伴随有低热、头痛、肌肉关节疼痛、失眠和多种精神症状的一组证候群。尽管CFS介于疾病状态和健康之间，在体检和常规实验检查中一般无异常发现，且在短期内不会危及生命。但是由于其发病率高，持续时间长，对人们身心健康、生产和生活质量等方面均带来严重的负面影响，并很容易由临床前期转入疾病状态，因此世界各国医学、心理学和社会学界都极为关心和重视，已有学者开展对CFS的流行病学[2-6]、表现症状群[5-6]、病因[7]、中医发病机制[8-12]等基础研究，以及防治CFS的新药开发研究[13，14]等多方面的研究。但是，由于缺乏公认的CFS动物模型，导致CFS的基础研究以及防治研究未见突破性进展。本课题致力于研究CFS动物模型，即希望填补这一研究空白，突破CFS的研究瓶颈。 众所周知，疾病谱已由单因性疾病向多因性疾病转化，CFS的增多即是典型代表。自1987年CFS被美国疾病控制中心正式命名以来，各国学者从现代医学角度进行了大量的研究，虽然取得了一定进展，但迄今为止对其病因病理还没有获得清楚而统一的认识。一般认为CFS是由于病毒诱发、精神压力、不良生活习惯、脑力和体力劳累过度等因素导致人体神经、内分泌、免疫等多系统的功能失调所致[7，13，15-18]。正是由于CFS发病的多因素机制，西医从动物实验的角度研究CFS者很少见。有报道通过注射病毒、慢性束缚[19]的方法制作慢性疲劳动物模型，但仅考虑了病毒感染、过度劳累致慢性疲劳，与人体CFS发病的多因性仍有较大差距，而且这些研究检测指标亦较单一，不能满足CFS系统研究的需要。基于目前慢性疲劳动物模型研究的不成熟，本课题从病因学方面入手，研制CFS动物模型，为进一步研究CFS的发病机制、防治方法奠定基础。 已有的CFS流行病学研究表明[4，5，7]：CFS在某些行业（科技、新闻、公务人员、演艺人员、出租车司机、毕业班中学生等）的人群中发病率较高，其发病与长期精神紧张、不愉快的生活事件及生活习惯的改变等等个人心理与社会等应激因素有关。由