P-糖蛋白与多药耐药的关系

田庆锷张慧李玛琳*

昆明医学院省天然药物药理重点实验室昆明 650031 摘要本文对P-糖蛋白的结构与功能

为抗多药耐药的研究提供参考P-糖蛋白, 多药耐药

中图分类号 A 文章编号

该肿瘤对未接触过的机制各异的多种抗肿瘤药也具有交叉耐药性的现象

靶点本身的量和质以及靶点和药物之间的相互作用

涉及到药物作用靶标如拓扑异构酶改变损伤修复增强细胞增殖速率变化这些机制常可同时存在且不同机制间常相互影响

旨在为抗肿瘤MDR的药物研究和应用提供参考

定位于细胞膜

相对分子量为170 ku, 故又名P-170??ò?2?·???óDáù?????¤??oíò???o?ü??á?áo?óò?ü?ê?¤2àμ?μú6和第8跨膜区具有膜转运功能

1.2 P-gp的生理功能

P-gp在正常人体细胞内也可表达而具有一定的生理功能在真核生物中ABC 转运子(ATP-binding cassette transporter)具有运输

通道功能P-gp对内源性或外源性物质的吸收排泄均起关键性作用Sun J等也证实

肾对外源性物质的排泄等活动[5]

?úè?àà?ùòò×é?D而啮齿类由mdr-1P-gp是定位于染色体7q21上的mdr-1基因编码的产物

而mdr-2基因表达产物没有将亲脂类药排出胞外的功能Haus-Cohen M等[7]也证实可将细胞内不溶于水的毒性物质泵出胞外

2.2 P-gp与 MDR

经大量研究证实Bleiber G等[8]认为

但在治疗前mdr-1基因多态性并不影响细胞对药物的转运和病情的发展

mdr-1基因被诱导而扩增一般认为药泵功能当耐药细胞置于含抗癌药的体液中同时其ATP结合点连上ATP

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Chen Bo等[11]研究发现

产生MDR

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Yoshikawa M[4]与Marzolini C等[13]认为

P-gp是ABC转运子主要成分

此外］还发现

甚至食物和药物赋型剂也影响P-gp介导的MDR的药物分布和疗效

该发现为肿瘤耐药与凋亡耐受之间在分子水平建立了有机的联系P-gp可延迟凋亡级联反应

自由基并不抑制MDR 肿瘤细胞发生caspase非依赖型凋亡

3. P-gp多药耐药的药物逆转

逆转MDR的药物通常称为(chemosensitizer, CS)

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3.1 破坏P-gp多药耐药机制

针对P-gp多药耐药机制逆转MDR

×?é?′?ààDTê???è?SB-T-1213 SB-T-1102等可明显减少其对P-gp的结合[14]?·°???A

é3??ítDá(salvicine)在下调mdr-1基因和P-gp表达的同时还显示出其启动凋亡和解除凋亡抑制的双重作用[14]è?ò??úáù

′2ó|ó?μ?HMBA和新近发现的以SAHA为代表的部分蛋白脱乙酰酶抑制剂对MDR 肿瘤细胞显示出较强的非caspase依赖型凋亡诱导作用[14]

(4)许多药物通过多条途径起作用如PKC 抑制剂金雀异黄素既可抑制P-gp 的药物外排功能同时又经caspase依赖和非依赖机制诱导凋亡[14]

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è?P-gp特异性抗体MRK16与环孢素联用在K562/ADM细胞能增强VCR和ADR 的抗癌作用

3.3 其他

采用人工合成或载体表达的反义核酸从而在转录或翻译水平特异地抑制mdr基因的表达将mdr基因引入骨髓造血祖代细胞

保护骨髓

4. 结束语

深入研究P-gp的结构与功能及其与MDR的关系

从而进一步提高抗肿瘤药物的疗效

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肿瘤的多药耐药及其逆转剂研究进展样本

综述肿瘤的多药耐药及其逆转剂研究进展安徽省肿瘤医院桂留中化疗仍是恶性肿瘤的重要治疗手段之一, 然而肿瘤细胞的耐药常使化疗最终失败。根据肿瘤细胞的耐药特点, 耐药可分为原药耐药( Primary drug resistance,PDR) 和多药耐药( Multidrug resistance ,MDR) 。PDR只对诱导药物产生耐药而对其它药物不产生交叉耐药性, 如抗代谢药类; MDR则是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药产生抗药性的同时, 对其它结构和作用机制不同的抗肿瘤药产生交叉耐药性。MDR的表现十分复杂, 既可有原发性( 天然性) 耐药, 也可有诱导性( 获得性) 耐药; 还有典型性和非典型性耐药之分。由于MDR给化疗带来了困难, 近年人们对其产生的机制以及试图寻找逆转剂做了大量的工作。本文简介MDR产生的机制并着重介绍近年逆转剂的研究进展。 1.MDR产生的机制 1.1膜糖蛋白介导的机制 1.1.1 P-gp与MDR 1976年Ling等首先在抗秋水仙碱的中国仓鼠卵巢细胞株上发现了一种能调节细胞膜通透性的糖蛋白( P-glycoprotein,P-gp) ,因其相对分子量为170kd, 又称P-170。[1]。P-gp主要分布在有分泌功能的上皮细胞的细胞膜中, 在人类正常组织中有不同程度的表示, 其中肾上腺、肺脏、胃肠、胰腺等组织中表示较高, 而在骨髓中表示较低。P-gp属于ATP结合盒家族的转运因子, 其生理功能为在ATP供能下将细胞内的毒性产物泵出细胞, 对组织细胞起保护作用。P-gp由mdr1基因编码产生。人类mdr1基因位于7号染色体长臂2区一带一亚带( 7q21.1) 。1986年, Gros将编码P-gp的mdr1cDNA直接转染敏感细胞后, 转染细胞表现出完全的MDR 表型, 从而提供了P-gp能够导致多药耐药的有力证据。现已证明, 许多肿瘤原发性或获得性耐药均与P-gp过量表示有关。P-gp随mdr1基因扩增而增加。P-gp有多个药物结合位点, 因而具有多种药物泵出功能, 不过其底物多为天然性抗癌药如长春碱类、蒽环类、紫杉醇类和鬼臼毒素类等。由于P-gp 能逆浓度差将药物泵出胞外, 使细胞内药物浓度降低, 从而减弱了药物的细胞毒作用。

非小细胞肺癌中肺耐药蛋白的表达及与临床病理特征的关系

·临床检验研究论著· △ 　通讯作者，Ｔｅｌ：（０７１９）８８０１１９２；Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｉｃａｉｚｈａｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ。非小细胞肺癌中肺耐药蛋白的表达及与临床病理特征的关系余宗涛１，高　琼２，高　波１，吕　军１，张吉才１△ （湖北医药学院附属太和医院：１．检验部；２．呼吸内科，湖北十堰４２０００）摘　要：目的　探讨肺耐药蛋白（ＬＲＰ）在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中的表达及与临床病理特征的关系。方法　运用荧光定量－聚合酶链反应（ＦＱ－ＰＣＲ）检测４７例肺癌组织和１４例正常组织ＬＲＰ　ｍＲＮＡ的表达。结果　ＬＲＰ　ｍＲＮＡ在癌组织、正常组织中表达阳性率分别为７４．５％（３５／４７）、１４．３％（２／１４），正常组织中ＬＲＰ　ｍＲＮＡ表达值为０．１９±０．１７，癌组织中为０．５８±０．２４，癌组织中ＬＲＰ　ｍＲＮＡ表达明显高于正常组织，差异有统计学意义（ｔ＝５．７２，Ｐ＝０．００１）；ＬＲＰ　ｍＲＮＡ表达与患者年龄、性别、组织学分型、淋巴转移及临床分期无关（Ｐ＞０．０５），而与肿瘤分化程度有关（Ｐ＝０．００１）。结论　ＮＳＣＬＣ中存在原发性耐药现象，ＬＲＰ　ｍＲ－ＮＡ高表达在ＮＳＣＬＣ对顺铂的原发性耐药中可能起重要作用。关键词：聚合酶链反应；　癌，非小细胞肺；　抗药性，多药ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１２．０９．００８文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－４１３０（２０１２）０９－１０４２－０３Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｕｎｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｎｏｎｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒＹｕ　Ｚｏｎｇｔａｏ１，Ｇａｏ　Ｑｉｏｎｇ２，Ｇａｏ　Ｂｏ１，Ｌｖ　Ｊｕｎ１，Ｚｈａｎｇ　Ｊｉｃａｉ１△ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｔａｉｈｅ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｈｕｂｅｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｙａｎ，Ｈｕｂｅｉ　４４２０００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｌｕｎｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ（ＬＲＰ）ｉｎ　ｎｏｎｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ（ＮＳＣＬＣ）ａｎｄｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｓ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＦＱ－ＰＣＲ）ｗａｓｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＬＲＰ　ｍＲＮＡ　ｉｎ　４７ｃａｓｅｓ　ｏｆ　ＮＳＣＬＣ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ａｎｄ　１４ｃａｓｅｓ　ｏｆ　ｎｏｒｍａｌ　ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｐｏｓｉ－ｔｉｖｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ＬＲＰ　ｉｎ　ＮＳＣＬＣ　ａｎｄ　ｎｏｒｍａｌ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｗｅｒｅ　７４．５％（３５／４７）ａｎｄ　１４．３％（２／１４）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｗａｓ　ｓｉｇ－ｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｉｎ　ＮＳＣＬＣ　ｔｉｓｓｕｅｓ（０．５８±０．２４）ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｎｏｒｍａｌ　ｉｓｓｕｅｓ（０．１９±０．１７）（ｔ＝５．７２，Ｐ＜０．００１）．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｏｆ　ＬＲＰ　ｗａｓ　ｎｏｔ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｇｅ，ｓｅｘ，ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ　ｔｙｐｅｓ，ｌｙｍｐｈ　ｎｏｄｅ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｔａｇｅ（Ｐ＞０．０５），ｂｕｔ　ｗａｓ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ　ｔｉｓｓｕｅｓ（Ｐ＝０．００１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅｒｅ　ｍｉｇｈｔ　ｂｅ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｉｎ　ＮＳＣＬＣ．Ｈｉｇｈｅｒ　ｅｘｐｒｅｓ－ｓｉｏｎ　ｏｆ　ＬＲＰ　ｃｏｕｌｄ　ｐｌａｙ　ａ　ｍａｊｏｒ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ　ｍｕｌｔｉ－ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　ＮＳＣＬＣ．Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ；　ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ；　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ｍｕｌｔｉｐｌｅ肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，其中非小细胞肺癌（ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ　ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ，ＮＳＣＬＣ）占绝大部分。近年来肺癌发病率和死亡率在全世界范围内均有较大幅度增长，手术治疗仍是首选，但大部分患者确诊时已属中、晚期，失去了手术机会。化疗是治疗该阶段肺癌患者的主要手段，其治疗效果往往不尽人意。多药耐药（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）的出现是肺癌化疗失败的重要原因之一，严重影响了化疗的疗效。目前ＭＤＲ研究的重点主要放在耐药基因的转录调控上，为了解耐药基因———肺耐药蛋白（ｌｕｎｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ＬＲＰ）在ＮＳＣＬＣ耐药现象中的作用，本研究采用荧光定量－聚合酶链反应（ｆｌｕｏｒｅｓ－ｃｅｎｃｅ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ－ＰＣＲ，ＦＱ－ＰＣＲ）对ＬＲＰ的表达与ＮＳＣＬＣ病理特征之间的关系进行初步探讨，从基因转录水平探讨肺癌耐药机制，为提高肺癌化疗效果提供一定的理论依据。１　资料与方法１．１　一般资料　收集本院２０１０年４月至２０１１年６月ＮＳＣＬＣ的新鲜癌组织标本４７例，１４例正常肺组织（取自同次手术肺切缘组织）作为对照，均经病理检查证实。所有患者临床资料完整。其中男３１名，女１６名；年龄４７～７２岁，平均５１．７岁，≥５０岁３３例，＜５０岁１４例；鳞癌１９例，腺癌２８例；临床分期：Ⅰ期２５例，Ⅱ期１８例，Ⅲ期４例（因Ⅳ期患者失去手术机会，故未收集）；分化程度：高分化２６例，中分化１０例，低分化１１例；淋巴转移３０例，无淋巴转移１７例。所有患者术前均未接受放、化疗。１．２　主要试剂与仪器　Ｔｒｉｚｏｌ　Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ）、ＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　Ｓｙｓｔｅｍ　Ａ３５００、ＰＥ７５００（ＡＢＩ公司）、Ｇ－ＢＯＸ紫外凝胶成像系统（Ｇｅｎｅ公司）、ＮＤ－２０００微量核酸定量仪（美国ＮａｎｏＤｒｏｐ公司）、ＳＹＢＲ　ＧｒｅｅｎⅠ染料（Ｇｅｎｅ公司）、ＰＣＲ试剂及１００ｂｐ　ＤＮＡ　Ｍａｒｋ（上海生工）、ＴＧ－１６ＷＳ台式高速冷冻离心机（日立公司）等。１．３　方法１．３．１　引物合成　根据参考文献［１］设计ＬＲＰ　ｍＲＮＡ引物：５′－ＧＴＣ　ＴＴＣ　ＧＧＧ　ＣＣＴ　ＧＡＧ　ＣＴＧ　ＧＴＧ　ＴＣＧ－３′，５′－ＣＴＴＧＧＣ　ＣＧＴ　ＣＴＣ　ＴＴＧ　ＧＧＧ　ＧＴＣ　ＣＴＴ－３′，扩增产物２４０ｂｐ；ＧＡＰＤＨ：５′－ＧＡＡ　ＧＧＴ　ＧＡＡ　ＧＧＴ　ＣＧＧ　ＡＧＴ　Ｃ－３′，５′－ＧＡＡＧＡＴ　ＧＧＴ　ＧＡＴ　ＧＧＧ　ＡＴＴ　ＴＣ－３′，扩增产物２２６ｂｐ。１．３．２　ＲＮＡ的提取和逆转录　严格按照Ｔｒｉｚｏｌ说明书提取组织中ＲＮＡ，提取的ＲＮＡ经微量核酸定量仪测定浓度和纯度后溶于无ＲＮＡ酶双蒸水中，Ａ３５００逆转ＲＮＡ为ｃＤＮＡ，逆转录体系为：总ＲＮＡ　２μＬ，逆转录１０倍Ｂｕｆｆｅｒ　２μＬ，１０ｍｍｏｌ／Ｌ　ｄＮＴＰ混合液２μＬ，ＡＭＶ逆转录酶０．６μＬ，Ｒｅｃｏｍｂｉ－ ·２４０１·国际检验医学杂志２０１２年５月第３３卷第９期　Ｉｎｔ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｍｅｄ，Ｍａｙ　２０１２，Ｖｏｌ．３３，Ｎｏ．９

肿瘤多药耐药逆转剂的研究进展

◇讲座与综述◇ 肿瘤多药耐药逆转剂的研究进展戴春岭，符立梧（中山大学肿瘤防治中心，广东广州 510060）收稿日期：2004-10-18，修回日期：2004-12-09 基金项目：广东省自然科学基金资助项目（No 021813）；国家自然科学基金资助项目（No 30371659）作者简介：戴春岭（1978-），男，硕士生；符立梧（1964-），男，博士，教授，博士生导师，研究方向：肿瘤药理学，Tel ：020-********，E-mail ：Fulw @https://www.360docs.net/doc/b74491927.html, 中国图书分类号：R-05；R 341；R 730.5；R 730.53；R 979.1文献标识码：A 文章编号：1001-1978（2005）05-0513-06摘要：肿瘤细胞产生的多药耐药（multidrug resistance MDR ）已成为当前影响肿瘤化学治疗疗效的主要障碍。尽管MDR 产生机制复杂，但是由mdr1基因编码的P-糖蛋白（P-glyco-protein P-gp ）的过表达是产生MDR 的主要原因。寻找低毒有效的MDR 逆转剂是提高化疗疗效的一个重要方法，是化疗领域亟需解决的问题。关键词：多药耐药；P-糖蛋白；逆转剂；肿瘤；治疗 1943年，耶鲁大学的Gilman 等首先将氮芥应用于淋巴瘤的治疗，揭开了现代肿瘤化疗的序幕。1948年Farber 成功地应用叶酸类似物甲氨蝶呤治疗小儿急性淋巴瘤细胞性白血病获得缓解，此后新的抗肿瘤药物不断出现。在人们看到希望的同时，新的问题随之而出现：即肿瘤细胞多药耐药性的产生，已成为目前肿瘤化学治疗失败的一个主要原因。P-gp 抑制剂作为逆转MDR 、提高化疗疗效的一种方法已经研究多年。该文就MDR 的形成机制及其逆转剂的研究现状作一综述。1 MDR 的发现及形成机制 1970年Bidler 等通过对中国仓鼠肺细胞P383肿瘤细胞的研究首次发现了MDR 现象。多药耐药性（multidrug resistance MDR ）是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药性的同时，对结构和作用机制完全不同的抗肿瘤药物产生交叉耐药性。MDR 有两种类型，第一种为原发耐药或内在耐药，是指肿瘤细胞在治疗的初始阶段就对抗肿瘤药物产生耐药性；第二类称之为获得耐药，是指在化疗过程中肿瘤细胞对抗肿瘤药物产生耐药性。 MDR 形成机制相当复杂，而且是多因素的。与细胞膜有关的因素有： P170糖蛋白（P-gp ）、多药耐药相关蛋白（multidrug resistance-associated protein MRP ）、肺耐药相关蛋白（lung resistance-related pro-tein LRP ）、乳腺癌抗药性蛋白（breast cancer resist-ance protein BCRP ）的高表达；与细胞质/细胞核有关的因素有：谷胱甘肽S 转移酶（GST ）和谷胱甘肽（GSH ）的升高、拓扑异构酶（TOPO ）活力降低、凋亡抑制以及肿瘤细胞某些生化特征的改变：如膜离子通道、蛋白激酶C （PKC ）、磷酸化水平变化等。这些耐药机制可能单独或联合在MDR 的形成中起作用。但在MDR 中起主要作用且研究得最为深入的为：mdr1/p-gp 的高表达。2 P-gp 的生物学功能 P-gp 是由mdr1基因编码的分子量为170ku 的磷酸糖蛋白，该蛋白属于ABC 跨膜转运蛋白超家族中的一员。它具有多种功能，可能量依赖性地将药物泵出细胞外，并减少药物转运入细胞内，使细胞内蓄积药物减少；还可促使药物在细胞内的再分布，积聚于与药物作用无关的细胞器内，进一步降低作用于靶点部位的药物浓度，导致耐药。另外，P-gp 还具有抑制肿瘤细胞凋亡的功能，研究表明P-gp 能够抑制caspase-3和caspase-8的裂解激活，从而抑制了caspase 依赖的细胞凋亡。 P-gp 不仅在肿瘤组织中高表达，在正常组织中也有区域特异性表达，主要位于一些具有分泌、排泄功能的组织和器官，例如肾上腺皮质、胰腺、肝、肾、胎盘滋养层以及血脑屏障等。所以它除了可将化疗药物泵出肿瘤细胞外，还可能具有一些生理功能：减少组织对有害物质的吸收，从而保护一些重要器官。由此可见，P-gp 并非一种异常蛋白，这也可能是源于某些器官的肿瘤具有原发耐药性的原因。3 MDR 逆转剂 P-gp 抑制剂作为逆转MDR 的一种方法，已经被广泛深入的研究了二十多年，根据它们的特点，将其分为三代。 3.1 第一代MDR 逆转剂主要特点是在体外试验中，可以逆转甚至完全逆转MDR 。但在体内试验中，由于自身的剂量限制性毒性，不能达到体外有效逆转MDR 所需要的浓度。 ? 315?中国药理学通报 Chinese Pharmacological Bulletin 2005May ；21（5）：513～8

P-gp多药耐药性蛋白转运体

P-gp多药耐药性蛋白转运体摘要：P-糖蛋白（P-gp）是一种能量依赖性的转运蛋白，能将许多结构不同的化合物逆向转运出细胞。P-糖蛋白的表达与肿瘤细胞的多药耐药密切相关，是导致肿瘤失败的主要原因。P糖蛋白的作用分子比较多，有不同的作用机制及作用效果。调节P-糖蛋白，在临床上有重要的作用，逆转P-gp的耐药作用展现了解决肿瘤治疗耐药的临床应用前景。关键字：P-gp；多药耐药；肿瘤；药物；转运体正文 P-糖蛋白（P-gp）是一种分子量170KD的跨膜糖蛋白（P170)，它具有能量依赖性“药泵”功能，是能量依赖性转运蛋白，能将许多不同的化合物转出细胞外。P-糖蛋白是一个比较常见的保护细胞免受外来有害分子入侵的分子泵，它位于细胞膜上，不停的“搜查”着外来的疏水分子，就如同一个守护细胞的“保安”。P-gp既能与药物结合，又能与ATP结合，ATP供能，使细胞内药物泵出细胞外，减低了细胞内的药物浓度使细胞产生耐药性。P-gp在正常人体血液，脑脊液中有少量表达，在心脏、睾丸、胎盘、肾上腺皮质、部分免疫细胞、脉络丛上皮细胞、膀胱上皮细胞均发现有P-gp的分布。P-gp以能量依赖性的方式将药物泵出细胞外，减少药物转运进入细胞内从而使细胞内蓄积药物减少。此外，还可使细胞内药物再分布而进一步减少作用靶点部位的药物浓度。有研究指出，P-gp可能通过一些信号通路参与了肿瘤多药耐药的发生，如阻断P13K／AKT信号通路可增强人结肠癌耐药细胞的药物敏感性，抑制p-Akt和p-13k的磷酸化表达水平，可以逆转P-gp介导的结肠癌多药耐药。也有研究发现，P糖蛋白广泛存在于正常的组织和器官，参与药物和内外毒素的吸收、分布和排泄，行使解读和防御保护的功能，因此可以通过移植P糖蛋白基因有效的降低经济鱼类、虾类等水产品和经济作物中有毒污染的积累，对保护人类健康有着重要的意义。肿瘤的多药耐药性(multidrug resistance gene MDR)是肿瘤耐药的主要机制之一，是导致机体多种恶性肿瘤化疗失败的主要原因，P-gp是肿瘤多药耐药的标志物。产生肿瘤多药耐药的原因很多，如通过细胞膜泵将药物泵出细胞外，对药物诱导的细胞凋亡的抑制作用，对药物作用靶点的分子修复作用，对细胞内积聚的药物的重新分配，一些生物化疗方面的改变等。MDR 是指肿瘤细胞不仅可以对同类型的抗肿瘤药物产生耐药而且对未接触过的结构不同作用机制各异的其他抗肿瘤药物也可产生交叉耐药,P-gp是MDR1基因编码的一种能量依赖性药物排除泵与抗癌多药耐药表型及临床化疗效果密切相关它是一系列复杂的疏水化合物底物的转运者。可介导植物碱类紫杉醇等抗癌药物的耐药。众多研究结果证实,P-gp是多药耐药机制的标志由它介导的耐药途径称为经典的耐药途径。肿瘤细胞通过ATP介导的转运蛋白将化疗药物泵出细胞外，这是目前公认的MDR最主要的机制。产生耐药有两种机制：第一，对第一次化疗产生的耐药天然性耐药；第二，在化疗过程中产生耐药的获得性耐药。化疗前MDR高表达的肿瘤，其化疗作用往往不理想，化疗前MDR低表达的肿瘤，对化疗有较好的效果，化疗后高表达的肿瘤与肿瘤的疗效及复发有关，如非霍奇金病，急淋、慢淋等。有资料报道，复发和难治

槲皮素逆转肿瘤多药耐药作用进展

槲皮素逆转肿瘤多药耐药作用研究进展翟闪闪杨成君王芳傅瑶（吉林大学白求恩医学院生物化学与分子生物学实验中心，吉林长春130021）〔关键词〕槲皮素；肿瘤细胞；逆转；多药耐药〔中图分类号〕R73 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕1005-9202（2012）13-2906-03；doi ：10.3969/j.issn.1005- 9202.2012.13.126通讯作者：杨成君（1964-），男，副教授，硕士生导师，主要从事生物化学与分子生物学实验教学与研究。第一作者：翟闪闪（1986-），女，在读硕士，主要从事肿瘤多药耐药研究。槲皮素是一种具有多种生理活性和药理活性的天然小分子黄酮类化合物。近年来研究发现，槲皮素可抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、干扰肿瘤细胞周期、干扰肿瘤细胞信号转导通路、逆转肿瘤细胞多药耐药等作用。本文结合国内外文献，就槲皮素影响肿瘤细胞多药耐药相关蛋白的表达，逆转肿瘤多药耐药方面进行综述分析。1 槲皮素抗肿瘤的作用临床肿瘤患者很大一部分发生多药耐药现象，即对某些结构与作用机制不同的药物也产生耐药现象，严重阻碍了肿瘤患者的临床治疗。因此探索肿瘤细胞多药耐药的机理并加以有效的逆转，已成为肿瘤研究领域亟待解决的问题。目前针对肿瘤多药耐药的治疗主要采用联合化疗，而一些多药耐药逆转剂如维拉帕米、环孢素A 等因其副作用大，尚不能投入临床使用〔1〕，因此从日常饮食中寻找潜在副作用小的多药耐药逆转剂以成为目前亟待解决的问题。槲皮素，化学名为3，3'，4'，5，7-五羟基黄酮（结构式见图1），是一种天然的小分子黄酮类化合物。槲皮素及其衍生物作为一种常见的多酚类物质形成了普通饮食的一个组成部分，在蔬菜、水果、谷物和多种中草药中含量丰富〔2〕。近年来研究发现，槲皮素可抑制肿瘤细胞的增殖、诱导肿瘤细胞的凋亡、干扰肿瘤细胞的周期、干扰肿瘤细胞的信号转导通路、逆转肿瘤细胞多药耐药等作用〔3 5〕。 2 肿瘤多药耐药的机制 ATP 结合盒（ABC ）跨膜转运蛋白的过度表达是肿瘤细胞多药耐药最常见的一种机制。ABC 家族是一个庞大的膜结合蛋白家族，与肿瘤多药耐药关系密切的主要有P 糖蛋白（P-gly-coprotein ，P-gp ）、多药耐药相关蛋白（multidrug resistance-associ-ated protein ，MRP1）、乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein ，BCRP ）〔6 8〕。ABC 转运蛋白的底物众多，常用的抗肿瘤药物有蒽环类、长春碱类等。ABC 转运蛋白的功能组成分为两个部分：12个跨膜区（trans-membrane domain ，TMD ），形成底物转运通道，具底物识别功能；2个核苷酸结合区（nucleotide bind-ing domain ，NBD ）水解ATP 为转运提供能量〔8〕。BCRP 仅具有6个跨膜转运区和1个核苷酸结合区，需要形成二聚体发挥生图1 槲皮素的基本结构理功能〔9〕。 2.1 P-gp P-gp 由多药耐药基因1（MDR1）基因编码，是目前研究的最多的ABC 转运体。P-gp 可以转运多种化疗试剂像长春碱类，蒽环类，紫杉烷类等〔10〕。其在节肠癌细胞，白血病细胞，畸胎癌细胞中均被检测到，在肿瘤细胞膜上过度表达，与化疗物结合，将其泵出胞外，使的细胞对化疗药物的敏感性降低，产生了多药耐药。曾有文献报道利用RNA 干扰技术特异性地抑制直肠癌细胞MDR1及P-gp 的表达，导致阿霉素及长春新碱在胞内浓度上升，从而使长春新碱及阿霉素的细胞毒性增强〔11〕。 2.2MRP1 MRP1是由ABC C 1基因编码。的带负电的药物能被MRP1排出细胞外，从而造成MRP1高表达肿瘤细胞的多药耐药。MRP1的药泵作用与P-gp 并无协同，其特异性的转运底物是在胞内与还原型谷胱甘肽共轭结合的化疗药物。曾有文献报道通过建立K562/ADM 发现此细胞MRP1的表达较亲代明显升高，并表现出对长春新碱、阿霉素（adriamycin ，ADM ）、顺铂（cisplatin ，DDP ）、依托泊苷（etoposide ，VP-16）不同程度的耐药〔12 14〕。 2.3 BCRP 1998年Doyle 等从人乳腺癌耐药细胞系（MCF-7/ Ad-rVP ）中发现了BCRP ，其是由BCRP 基因编码的，其与P-gp 、MRP1同属于ATP 依赖性膜转运蛋白超家族，其同样是以药泵的形式减少胞内药物浓度来实现耐药的〔15〕。BCRP 在乳腺癌细胞，白血病细胞，肺癌细胞等多种肿瘤细胞中均被检测，在对应的耐药株中表达量较高〔16〕。BCRP 虽与P-gp 和多药耐药蛋白同属于ABC 跨膜转运蛋白超家族，但他们在空间结构上存在很大的差异，这种差异导致了他们之间的耐药机制的不同。

多药耐药相关蛋白2及其在肿瘤耐药中的研究进展

chicken ane m ia virus-derived p r otein apop tin requires activati on of cas pases f or inducti on of apop t osis in human tumor cells[J].J V ir ol,2000,74(15):7072-7078. [13]　Pietersen AM,van der Eb MM,Rade maker HJ,et al.Specific tumor -cell killing with adenovirus vect ors containing the apop tin gene [J].Gene Ther,1999,6(5):882-892. [14]　Guelen L,Paters on H,G ken J,et al.T AT-apop tin is efficiently delivered and induces apop t osis in cancer cells[J].Oncogene, 2004,23(5):1153-1165. [15]　Song JS.Enhanced exp ressi on of apop tin by the Myc-Max binding motif and S V40enhancer f or SCLC gene therapy[J].B i osci B i o2 technol B i oche m,2005,69(1):51-55. [16]　O lijslagers SJ,Zhang YH,Backendorf C,et al.Additive cyt ot oxic effect of apop tin and che motherapeutic agents paclitaxel and et opo2 side on human tumour cells[J].Basic Clin Phar macol Toxicol, 2007,100(2):127-131. [17]　L ian H,J in N,L i X,et al.I nducti on of an effective anti-tumor i m2 mune res ponse and tumor regressi on by combined adm inistrati on of I L-18and Apop tin.Cancer I m munol I m munother,2007,56(2): 181-192. [18]　Peng DJ,Sun J,W ang YZ,et al.I nhibiti on of hepat ocarcinoma by syste m ic delivery of Apop tin gene via the hepatic asial oglycop r otein recep t or[J].Cancer Gene Ther,2007,14(1):66-73. [19]　A Hajit ou,R Rangel,M Trepel,et al.Design and constructi on of targeted AAVP vect ors for ma mmalian cell transducti on[J].Nature Pr ot ocols,2007,2:523-531. 多药耐药相关蛋白2及其在肿瘤耐药中的研究进展杜方兵,梅小冬 The p r ogress of multidrug resistance-ass ociated p r otein2(MRP2)and its r ole in cancer drug resistance DU Fang-bing,ME I Xiao-dong D epart m ent of Respiratory M edicine,A ffiliated P rovincial Hospital of A nhui M edical U niversity,Hefei230001,China. 【Abstract】　Multidrug resistance(MDR)p lay a critical r ole in the resistance of tu mors t o multi p le anticancer a2 gents.MDR mainly results fr om overexp ressi on of P-glycop r otein(Pgp),multidrug resistance-ass ociated p r otein (MRP),lung resistance p r otein(LRP)and breast cancer resistance p r otein.MRPs include MRP1-MRP9.The mul2 tidrug resistance p r otein2(MRP2)is an ATP binding cassette trans porter.Gene characteristic ofMRP2and its r ole in cancer and che motherapy is revie wed. 【Key words】cancer drug resistance;multidrug resistance-ass ociated p r otein2;p r ogress Modern Oncol ogy2008,16(3):0478-0480 【指示性摘要】　肿瘤对化疗药物多药耐药是肿瘤治疗失败的重要原因之一。多药耐药的主要原因是由Pgp、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP)、乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)等转运蛋白表达异常增高所致。MRP包含9个成员:MRP1-MRP9。多药耐药相关蛋白2(MRP2)是三磷酸腺苷(ATP)结合盒运载体蛋白家族成员之一,本文就MRP2基因的特性及其在肿瘤耐药中的作用作一综述【关键词】肿瘤耐药;多药耐药蛋白2;研究进展【中图分类号】R730.5 【文献标识码】A 【文章编号】1672-4992-(2008)03-0478-03 肿瘤细胞的多药耐药性(multidrug resistance MDR)及其相关蛋白的表达严重影响肿瘤的化疗效果,是导致肿瘤化疗失败的主要原因。产生MDR的原因很多,目前已知的有MDR、MRP和LRP基因及其编码的蛋白过度表达,GST-π解毒系统活性的增高,DNA损伤修复功能的改变,细胞凋亡抑制等。其中ABC转运蛋白超家族(ATP-binding cassette 【收稿日期】　2007-04-28 【作者单位】　安徽医科大学附属省立医院呼吸科,安徽　合肥　230001 【作者简介】　杜方兵(1983-),男,安徽六安人,硕士研究生,主要从事肿瘤耐药逆转研究。 trans porter superfa m ily)成员介导的药物外排在MDR中起了重要作用,也是目前国内外研究的热点之一。MRP基因家族至少含有7个成员:MRPl编码的多药耐药蛋白,MRP2或c MOAT(the canal-icular multis peeific organic ani on trans port2 er)编码的管状多特异性有机阴离子转运蛋白及其它五个同系物,MRP3、MRP4(c MOAT B)、MRP5(c MOAT-C)、MRP6和MRP7。MRP1、MRP2和MRP3都是有机阴离子和多种药物转运蛋白,都是介导恶性肿瘤耐药的重要蛋白[1]。本文就现在研究的热点MRP2基因的特性及其在肿瘤耐药中的作用作一综述。 1　M RP2的生物学特性 1.1　M RP2的结构及其功能 ? 8 7 4 ?MODERN ONCOLOGY,Mar12008,VO I116,NO13

纳米药物载体介导的联合给药逆转肿瘤多药耐药的研究进展

纳米药物载体介导的联合给药逆转肿瘤多药耐药的研究进展目的：为设计用于联合给药逆转肿瘤多药耐药的新型纳米药物载体提供参考。方法：以“纳米药物载体”“联合给药”“多药耐药”“Multidrug resistance”“Co-delivery”“Nanoparticle”等为关键词，组合查询2012-2017年在中国知网、万方、维普、PubMed、Elsevier等数据库中的相关文献，对纳米药物载体介导的联合给药在逆转肿瘤多药耐药中的优势及联合给药的类型进行综述。结果与结论：共检索到相关文献282篇，其中有效文献47篇。药物经纳米载体包载后具有增加药物在肿瘤部位的蓄积、延长药物在体内的循环时间、促进药物在肿瘤部位的靶向递送、控制联合给药药物比例、增强逆转多药耐药的协同作用等优势。纳米载体可以介导不同类型药物的联合给药用于逆转肿瘤多药耐药。联合递送的药物组合类型包括化疗药与化疗药、化疗药与多药耐药逆转剂、化疗药与小干扰RNA、化疗药与单克隆抗体、天然产物与天然产物等。其中，采用化疗药与其他药联合给药是最常见的联合给药类型。纳米药物载体介导的联合给药是逆转肿瘤多药耐药的非常具有潜力的给药形式，但目前均未进入临床阶段。为使纳米药物载体介导的联合给药更好地应用于临床，在处方工艺和临床效果评价等方面尚需大量的研究工作。关键词纳米药物载体；联合给药；肿瘤多药耐药；综述肿瘤多药耐药（MDR）是指肿瘤细胞在对一种化疗药产生耐药的情况下同时对一系列不同结构和不同机制的化疗药产生耐药的现象，MDR是临床上导致化疗失败的重要原因[1]。MDR发生机制复杂，包括细胞内因以及肿瘤微环境改变等，MDR发生机制的复杂性为克服肿瘤耐药带来挑战[2-3]。目前有研究报道的逆转MDR的策略很多，包括应用新型药物递送系统递送化疗药、采用MDR 逆转剂与传统化疗药联合给药等[4-6]。与临床单一药物治疗比较，联合给药对耐药肿瘤具有更好的疗效，目前临床上往往采用联合给药的策略治疗耐药肿瘤或降低耐药肿瘤的发生率[7]。采用纳米药物载体共载需联合给药的药物可进一步增强对耐药肿瘤的增殖抑制作用，为逆转肿瘤MDR提供了很好的药物递送平台[8-9]。采用药物递送系统联合递送化疗药与MDR逆转剂是近年来一种非常有前景的逆转MDR的策略[6]。有研究报道的可以用于联合递送药物的常用纳米药物载体包括脂质体、纳米粒、胶束、脂质体、纳米乳和纳米凝胶[7]。纳米载体可以通过高通透性和滞留（EPR）效应、延长体内循环时间、靶向给药等增强逆转MDR的效果。笔者以“纳米药物载体”“联合给药”“多药耐药”“Multidrug resistance”“Co-delivery”“Nanoparticle”等为关键词，组合查询2012-2017年在中国知网、万方、维普、PubMed、Elsevier等数据库中的相关文献。结果，共检索到相关文献282篇，其中有效文献47篇。现对纳米药物载体介导的联合给药在逆转肿瘤MDR中的优势及联合给药的类型进行综述，以期为设计新型纳米药物载体联合给药用于逆转肿瘤MDR提供参考。 1 纳米药物载体介导的联合给药的优势

逆转多药耐药的实验操作步骤

逆转耐药性的实验步骤: （孵育时间为48h）多柔比星也叫阿霉素 1.各种给药组(多柔比星组,多帕菲,空白制剂,多西胶束制剂)对MCF-7和MCF-7/ADR细胞株的IC50值 2.多帕菲组，空白制剂，多西胶束制剂对MCF-7和MCF-7/ADR细胞株，细胞存活率达到 90%以上的剂量 3.联合培养：针对MCF-7和MCF-7/ADR细胞株，多帕菲组，空白制剂，多西胶束制剂加入存活率90%以上的剂量（比如设4个浓度梯度，并固定此浓度，调节多柔比星的浓度，计算多柔比星的IC50值），孵育1h后，加入不同浓度梯度的多柔比星溶液（浓度设定范围应在其IC50值以下，必须包含IC50这一浓度，可以再加一个高一点的浓度）注意：药物联合时，配制终浓度的阿霉素时，要从母药中只取一次，减少取药多次造成误差；每一次筛药，板子上都要设空白组、单独加药阿霉素组、单独加逆转剂药物组。 4.计算耐药倍数和逆转指数。耐药倍数=耐药细胞IC50/敏感细胞IC50；逆转指数=使用逆转剂前IC50/使用逆转剂后IC50。耐药倍数，是分析耐药细胞耐药性的。实验中用到的是逆转倍数（对耐药细胞叫做逆转倍数=使用逆转剂前IC50/使用逆转剂后IC50）；增敏倍数（联合剂与阿霉素联合对敏感细胞的增敏倍数=使用联合剂前IC50/使用联合剂后IC50）。比较这两个倍数，如果都大于1（我们一般看逆转倍数至少在2以上才有效，越大越好），且逆转倍数更大，说明具有逆转耐药的作用的同时还具有增敏作用。如果两个倍数一样，说明你的药物只具有增敏作用。如果增敏倍数为1，逆转倍数大于1（我们一般看逆转倍数至少在2以上才有效，越大越好），说明你的药物具有逆转耐药的作用。

P-糖蛋白与多药耐药的关系

P-糖蛋白与多药耐药的关系田庆锷张慧李玛琳* 昆明医学院省天然药物药理重点实验室昆明 650031 摘要本文对P-糖蛋白的结构与功能为抗多药耐药的研究提供参考P-糖蛋白, 多药耐药中图分类号 A 文章编号该肿瘤对未接触过的机制各异的多种抗肿瘤药也具有交叉耐药性的现象靶点本身的量和质以及靶点和药物之间的相互作用涉及到药物作用靶标如拓扑异构酶改变损伤修复增强细胞增殖速率变化这些机制常可同时存在且不同机制间常相互影响旨在为抗肿瘤MDR的药物研究和应用提供参考定位于细胞膜相对分子量为170 ku, 故又名P-170??ò?2?·???óDáù?????¤??oíò???o?ü??á?áo?óò?ü?ê?¤2àμ?μú6和第8跨膜区具有膜转运功能 1.2 P-gp的生理功能 P-gp在正常人体细胞内也可表达而具有一定的生理功能在真核生物中ABC 转运子(ATP-binding cassette transporter)具有运输通道功能P-gp对内源性或外源性物质的吸收排泄均起关键性作用Sun J等也证实肾对外源性物质的排泄等活动[5] ?úè?àà?ùòò×é?D而啮齿类由mdr-1P-gp是定位于染色体7q21上的mdr-1基因编码的产物而mdr-2基因表达产物没有将亲脂类药排出胞外的功能Haus-Cohen M等[7]也证实可将细胞内不溶于水的毒性物质泵出胞外

2.2 P-gp与 MDR 经大量研究证实Bleiber G等[8]认为但在治疗前mdr-1基因多态性并不影响细胞对药物的转运和病情的发展 mdr-1基因被诱导而扩增一般认为药泵功能当耐药细胞置于含抗癌药的体液中同时其ATP结合点连上ATP ê1??°??úμ?ò????¨?èê?????3?óú??μí???? Chen Bo等[11]研究发现产生MDR ?ú???-?ˉá?oó2??é??ò?2????ˉμ?°×?a2?oíèé?ù°?μ??D???D·￠?? Yoshikawa M[4]与Marzolini C等[13]认为 P-gp是ABC转运子主要成分此外］还发现甚至食物和药物赋型剂也影响P-gp介导的MDR的药物分布和疗效该发现为肿瘤耐药与凋亡耐受之间在分子水平建立了有机的联系P-gp可延迟凋亡级联反应自由基并不抑制MDR 肿瘤细胞发生caspase非依赖型凋亡　 3. P-gp多药耐药的药物逆转逆转MDR的药物通常称为(chemosensitizer, CS) óDμ?ò?ê?ó?óúáù′2 3.1 破坏P-gp多药耐药机制针对P-gp多药耐药机制逆转MDR ×?é?′?ààDTê???è?SB-T-1213 SB-T-1102等可明显减少其对P-gp的结合[14]?·°???A é3??ítDá(salvicine)在下调mdr-1基因和P-gp表达的同时还显示出其启动凋亡和解除凋亡抑制的双重作用[14]è?ò??úáù ′2ó|ó?μ?HMBA和新近发现的以SAHA为代表的部分蛋白脱乙酰酶抑制剂对MDR 肿瘤细胞显示出较强的非caspase依赖型凋亡诱导作用[14] (4)许多药物通过多条途径起作用如PKC 抑制剂金雀异黄素既可抑制P-gp 的药物外排功能同时又经caspase依赖和非依赖机制诱导凋亡[14] ò?ò???????D?oí1|?ü è?P-gp特异性抗体MRK16与环孢素联用在K562/ADM细胞能增强VCR和ADR 的抗癌作用 3.3 其他采用人工合成或载体表达的反义核酸从而在转录或翻译水平特异地抑制mdr基因的表达将mdr基因引入骨髓造血祖代细胞

中医药逆转肿瘤多药耐药性的研究进展

【关键词】抗药性，多药;抗药性，肿瘤;抗肿瘤药，植物;综述文献肿瘤诱导化疗不易缓解或缓解后极易复发，重要原因是肿瘤细胞的耐药现象———多药耐药性。多药耐药性（multidrug resistance，MDR）是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生抗药性的同时，对结构和作用机制不同的抗癌药物产生交叉耐药性。MDR的形成机制十分复杂，肿瘤细胞可通过不同途径导致MDR的产生。同时，单个MDR细胞可同时存在多种抗药性的机制，一种或几种联合作用均可导致MDR的产生。MDR是肿瘤化疗急需解决的难题，对其发生机制的研究和开发逆转多药耐药性的药物是当前肿瘤研究中的重要课题。随着中医药对肿瘤化疗减毒增效及逆转肿瘤多药耐药性研究的深入，寻找开发逆转肿瘤多药耐药性的高效、低毒中医药已成目前中医肿瘤内科研究的重要课题［1］。现对近年来中医在开发逆转肿瘤多药耐药性方面的研究综述如下。 1 多药耐药性产生机制肿瘤多药耐药性产生的原因和机制十分复杂，细胞可通过多种机制产生多药耐药性，与细胞膜有关的主要因素有P-糖蛋白（P-gp）、多药抗药性相关蛋白（MRP）、肺多药抗药性相关蛋白（LRP）、乳癌耐药性相关蛋白（BCRP）等;与细胞质有关的主要因素有拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）、蛋白激酶C（PKC）、谷胱苷肽氧化还原系统等。但最重要的为P-gp介导的多药耐药性，即典型MDR［2，3］。抗凋亡机制在肿瘤细胞发生发展及多药耐药性中起很重要作用［4］。化学结构和作用靶点各异的抗肿瘤药物均可诱导肿瘤细胞凋亡，细胞对化疗药物多药耐药性的产生部分是凋亡受抑制的结果。已发现30多种基因对细胞凋亡起促进或抑制作用，如肿瘤抑制p53基因、抗肿瘤凋亡蛋白bcl-2家族、凋亡蛋白抑制因子IAP家族，但其发生机制仍不完全清楚。另外，癌基因C-jun 编码转录激活因子AP-1激活，谓之jun.AP-1。该产物可识别特异基因的启动子，与C-fos 基因产物形成异源二聚体后，即可与基因结合并激活其转录，激活的PKC可持续活化jun.AP-1，且其活性增强，对基因转录产生正向调节［5］。有研究表明MDR细胞株具有凋亡抗性，P-gp 能延缓凋亡“瀑布”的出现。P-gp除了作为药物外排泵外，能抑制Caspase-3和Caspase-8的激活，抑制大多数抗肿瘤药物诱导细胞凋亡的核心通路———Caspase依赖性细胞凋亡［6］。肿瘤多细胞球体是由多个肿瘤细胞组成的球状聚集体，组织结构与实体瘤相似，和肿瘤单细胞相比，多细胞球体对化疗MDR增加，渗透机制不足以完全解释多细胞球体细胞的多药耐药现象。可能机制有:①多细胞球体细胞周期特异性敏感的细胞数减少;②细胞接触或黏附介导的生存机制，化疗多药耐药部分是凋亡受抑制的结果，细胞接触或黏附可抑制细胞凋亡的发生，这也可能是多细胞球体细胞化疗多药耐药的原因之一;③多细胞球体的生长微环境引起多药耐药相关基因活性变化［7］。逆转MDR主要有2种途径，开发对MDR细胞不具有多药耐药性的新抗肿瘤药物及寻找MDR逆转剂与抗肿瘤药物合用，恢复MDR细胞对抗肿瘤药物的敏感性，后者目前已在以下方面开展研究以克服MDR:①使用免疫治疗药物，如单克隆抗体;②使用能抑制P-gp功能的药物;③抑制多药耐药基因表达;④逆转MDR中医药的开发研究。[!--empirenews.page--] 2 中药复方及临床研究 2.1中药方剂R1的无细胞毒浓度可完全逆转人乳腺癌细胞系（MCF-7adv）.阿霉素（ADM）的MDR［8］。中药R3（补骨脂抽提剂）的无细胞毒浓度可增加MCF-7.ADR对ADM的敏感性，且与异搏定具有协同作用，可完全抑制P-gp的表达，呈时间依赖性，48h后P-gp表达完全消失。提示中药R3可能通过抑制P-gp功能，增加ADM在MCF-7.ADR细胞中浓度，调控MCF-7.ADR的MDR［9］。中医药对MDR肿瘤细胞有诱导凋亡作用。研究4种中药提取物GLYC、DLEN、SPES、PC-SPES的提取液对小细胞肺癌H69（敏感株）、H69VP（耐药株）、正常肺上皮细胞BEAS-2作用表明，4种中药提取物组方对肿瘤细胞的细胞毒作用强于对BEAS-2，不同中药组方对细胞作用不同，在GLYC中细胞表现为坏死;在DLEN、SPES、PC-SPES中有凋亡表现，且用原位末端标记法分析确认后三者的表达为细胞凋亡［10］。康莱特注射液（KLT）对耐药人白血病细胞K562.adr和K562.vcr的作用实验结果显示:①人白血病耐药细胞对KLT有轻度抗性;②KLT 能明显增强MDR细胞对化疗药物的敏感性，其逆转作用呈剂量依赖关系;③KLT能诱导人白血