超高效液相色谱法测定龙胆药材中的獐芽菜苦苷和龙胆苦苷
超高效液相色谱法测定龙胆药材中的獐芽菜
苦苷和龙胆苦苷
作者：曹悦，左代英，吴晓兰，刘敬武，孙启时
【摘要】目的建立超高效液相色谱（UPLC）法测定龙胆药材中活性成分的方法。方法采用L9（34）正交表安排实验，确定最佳提取条件。色谱柱：Shimadzu C18（3.0 mm×75 mm, 1.7 μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸（V∶V = 5.5∶94.5），流速0.80 ml/min；检测波长235,270 nm；柱温为40℃。结果獐芽菜苦苷、龙胆苦苷分别在0.154 8～1.858 0 mg/ml，0.322～5.152mg/ml范围内呈良好的线性关系，平均回收率分别为102.09%，RSD=1.68％（n=6）；103.80%，RSD=1.11％（n=6）。结论采用UPLC法控制龙胆质量，操作简单,结果准确，方法可行。
【关键词】龙胆超高效液相色谱獐芽菜苦苷龙胆苦苷
Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of swertiamarin and gentiopicroside in root of Gentiana scabra Bge.by UPLC.MethodsBy L9（34）orthogonal design, an optimal condition was confirmed. The separation was performed on Shimadzu C18（3.0 mm×75 mm,1.7μm） column, the mobile phase was Acetonitrile-0.1% Phosphorylation（V∶V = 5.5∶94.5）. The flow rate was 0.8 ml/min, the detection wavelength was 235nm, 270nm, and the column temperature was 40℃.ResultsThis method had good linearity in the range of 0.322～5.152mg/ml,and the
average recovery was102.09 % with RSD of 1.68%for swertiamarin. It had good linearity in the range of 0.1548～1.858 mg/ml ,and the average recovery was 103.80% with RSD of 1.11%for gentiopicroside.ConclusionThis method is simple , accurate , and suitable for the quality control of root of Gentiana scabra Bge.by UPLC.
Key words：Radix Gentiana Scabra Bge.; UPLC; Swertiamarin; Gentiopicroside
龙胆为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag．，龙胆Gentiana scabra Bge．，三花龙胆Gentiana triflora Pall．或坚龙胆Gentiana rigescens Franch．的干燥根及根茎。具有清热燥湿，泻肝胆火的作用。用于湿热黄疸，阴肿阴痒，带下，强中，湿疹瘙痒，目赤，耳聋，胁痛，口苦，惊风抽搐［1］。龙胆的主要有效成分为环烯醚萜类化合物，有龙胆苦苷（Gentiopicroside）、獐牙菜苦苷（Swertiamarin）及獐牙菜苷（Sweroside）等,这类物质也是其苦味的物质基础［2］。目前采用常规液相分析时一般都需要较长的分析时间，而超高效液相色谱(UPLC)技术的应用，是我们在满足有效分离样品的同时，极大地缩短了分析时间，有效地提高了工作效率，节约了成本。而本文就是采用UPLC建立了一种快速、准确控制龙胆质量的方法。
1 仪器与试剂
岛津-UPLC超高效液相色谱仪，LC-solution色谱工作站。獐
龙胆中化学成分的研究
龙胆中化学成分的研究 徐菁菁 吉林农业大学研究生学院 摘要：龙胆科植物龙胆（Gentiana scabra Bge.）作为药用植物已有悠久的历史，是以根入药为主的常用药材。目前的野生资源逐渐减少，药源只能以栽培龙胆为主，为用栽培龙胆弥补野生龙胆资源的不足，本文综述了龙胆化学成分的研究资料，以便今后对其进行深一步研究。 关键词：龙胆；化学成分 Study on The Chemical Constituents of Gentiana scabra Bge. Xu Jing-jing College of Graduate, Jilin Agriculture University Abstract:The plant of Gentianaceae, Gentiana scabra Bge. as medicinal plants have a long history, is the main root of the common herbs used as medicine. Gradually reduce the current wild resources, the source can only be cultivated Gentiana scabra Bge. mainly to make up the use of cultivated wild Gentiana scabra Bge. insufficient resources, this paper reviews the research data of the chemical constituents of Gentiana scabra Bge. for deep step of future research. Key words:Gentiana scabra Bge.；chemical constituents 1. 前言 龙胆（Radix Gentianae）为龙胆科（Gentianaceae）植物龙胆（Gentiana scabra Bge.）、三花龙胆（G.triflora Pall）、条叶龙胆（G.manshurica Kitag）或坚龙胆（G.riges cens Franch）的干燥根及根茎。前三种习称“关龙胆”，后一种习称“坚龙胆”[1]。主要分布于广西、四川、贵州、云南。春秋两季采挖、洗净、干燥。味苦、性寒，归肝、胆经。清热燥湿，泻肝胆火。用于湿热黄疸，阴肿阴痒，带下，湿疹瘙痒，肝火目赤，耳鸣耳聋，胁痛口苦，强中，惊风抽搐[2]。龙胆最早始载于《神农本草经》，列为中品[3]。梁代陶弘景的《名医别录》也有记载[4]。在临床上，龙胆是龙胆泻肝汤、泻青丸、当归龙荟丸等方剂的主药，具泻肝胆实火、清下焦湿热之功。具有保肝、利胆、健胃、中枢兴奋作用及抗炎、抗过敏及抗病原体的作用，抗菌作用也很明显[5]。主治高血压、头晕、耳鸣、小儿高热抽搐、乙型脑炎、肝胆实火之头胀头痛、目赤肿痛、耳聋耳肿、胸胁痛、胆囊炎、湿热黄疸、急性传染性肝炎、尿流感染、阴部瘙痒、小便淋痛、胃炎等症[6]。 许多龙胆属植物中含有龙胆苦苷(gentiopi- croside)，1854年，龙胆苦苷首次从龙胆科植物黄龙胆(gentiana lutea)中被分离得到，但其化学结构直到1968年才被完全弄清楚[7]。龙胆苦苷和獐牙菜苦苷均可促进细胞有丝分裂活动及胶原质的产生，加快创口愈合速度[8]。研究发现环烯醚萜类化合物及口山酮类化合物既是龙胆科植物的特征性成分也是主要的药
龙胆苦苷
龙胆中龙胆苦苷研究进展 1.龙胆苦苷简介 1.1龙胆苦苷的基本性质 龙胆有效药用成分中主要成分为龙胆苦苷，其广泛分布于龙胆属植物中。龙胆苦苷属于裂环烯醚萜苷类化合物的一种，容易在乙醇、甲醇以及水溶剂中发生溶解，其分子式为C16H20O9。龙胆苦苷性状为淡红/黄色或者白色针状结晶，存在内酯苷类化合物颜色反应，龙胆苦苷具有较强亲水性，而脂溶性则相对较差。英文名:Gentiopicroside 分子式：C16H20O9 化学名:5-Ethenyl-6-(β-D- glucopyranosyloxy)-5,6- dihydro- 1H,3H - pyrano[3,4-C]pyran-1-one 分子量：356 Mp: 191℃ [α]D: -196.3(H2O) UV:λmax 270(MeOH) 1.2龙胆苦苷的结构 2.龙胆苦苷的来源与应用 2.1龙胆苦苷的来源 本品为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、龙胆Gentiana scabra Bunge 、三花龙胆Gentiana triflora pall 或坚龙胆Gentiana rigescens Franch. 的干燥根及根茎.龙胆苦苷(Gent iopicroside)是龙胆科龙胆属植物龙胆的有效成分之一, 也是当药及獐芽菜等植物中的苦味成分, 属于裂环环烯醚萜苷类, 分子式为C16H20O9 , 白色粉末或淡黄(红)色结晶, 易溶解于水、甲醇及乙醇等溶剂, 阳光下易变色.龙胆具有利胆、抗炎、健胃、降压等作用。龙胆中主含环烯醚萜苷类成分，龙胆苦苷为其中主要有效成分。 2.1.1龙胆苦苷的植物来源 全球龙胆属龙胆科( Gentiana L．) 植物超过500种，其中以热带高山以及温带地区分布较为广泛，此类植物在我国也有广泛分布，其种类超过230 种，西南部为其主要产地，大部分龙胆属龙胆科植物均用于观赏，也有部分可入药。 2.1.2龙胆苦苷的药物来源 来源于龙胆的干燥根及根茎，也是当药及獐牙菜等植物的苦味成分。 2.2龙胆苦胆的应用 龙胆苦苷具有保护肝脏、抗氧化、抗炎、镇痛及抗肿瘤等作用. 2.2.1抗炎作用 陈长勋等[ 1]报道, 秦艽所含龙胆苦苷具有抗炎作用, 即龙胆苦苷可减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀, 抑制冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增加, 阻止角叉
龙胆苦苷的保肝作用研究.
龙胆苦苷的保肝作用研究 作者：刘占文， 陈长勋， 金若敏， 史国庆， 宋纯清， 胡之璧 作者单位：上海中医药大学,上海,200032 刊名： 中草药 英文刊名：CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS 年，卷(期)：2002,33(1) 被引用次数：60次 参考文献(7条) 1.林原;刘玉华;苏成业龙胆苦苷对CCl4、扑热息痛毒性的保护作用 1991(03) 2.KONDO Y;Takano F;Hojo H Suppression of chemically and immunologically induced hepatic injuries by gentiopicroside in mice[外文期刊] 1994(05) 3.王海燕;宋纯清;孙昌高不同产地商品药材龙胆、秦艽中龙胆苦苷含量的比较 1999(06) 4.Matzkies F;Webs B Wirkung eines pflanzlichen kombinationspraparats auf die gastrointestinal transitzeit und die gallensauren-ausscheidung 1983(27-28) 5.李仪奎中药药理实验方法学 1991 6.陈奇中药药理研究方法学 1994 7.丁庆;谭俊峰;张丽娟甲基莲心碱对豚鼠离体胆道平滑肌的作用 1996(04) 本文读者也读过(9条) 1.冯英菊.杨甫昭.郭五保.顾莹.孙文基龙胆苦苷在Beagle犬体内药代动力学研究[期刊论文]-中药新药与临床药理2004,15(5) 2.陈长勋.刘占文.孙峥嵘.宋纯清.胡之壁龙胆苦苷抗炎药理作用研究[期刊论文]-中草药2003,34(9) 3.陈雷.王海波.孙晓丽.孙文基.CHEN Lei.WANG Hai-bo.SUN Xiao-li.SUN Wen-ji龙胆苦苷镇痛抗炎药理作用研究[期刊论文]-天然产物研究与开发2008,20(5) 4.冯怡.曾星.陈延.刘奕明.邓远辉龙胆苦苷在健康受试者的尿药动力学研究[会议论文]-2008 5.冯怡.曾星.陈延.刘奕明.邓远辉.FENG Yi.ZENG Xing.CHEN Yan.LIU Yi-ming.DENG Yuan-hui龙胆苦苷在健康受试者尿中的药代动力学[期刊论文]-中国临床药理学杂志2009,25(1) 6.王一娜龙胆的药理作用[期刊论文]-黑龙江医药2006,19(5) 7.陈雷龙胆苦苷衍生物合成及药理作用研究[学位论文]2008 8.郭海凤.朴惠顺龙胆苦苷的研究概况[会议论文]-2009 9.李艳秋龙胆苦苷（Gentiopicroside）的主要药效学研究[学位论文]2002 引证文献(60条) 1.姚新武.刘长霞.张鹏响应面法优化龙胆苦苷脂质体的复乳法制备工艺[期刊论文]-北京化工大学学报（自然科学版） 2012(2) 2.白兰.赵明琴.尹蓉莉.李东芬龙胆苦苷脂质体含量测定及包封率考察[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2012(7) 3.陈露露.徐关丽.袁红梅.蔡江晖.刘颖菊龙胆苦苷对脓毒症所致急性肺损伤小鼠的保护作用[期刊论文]-第三军医大学学报 2012(23) 4.黄元元.陈光.皮新梅.喻长远真菌对龙胆苦苷的生物转化研究[期刊论文]-长治医学院学报 2013(2) 5.白兰.尹蓉莉.李东芬.赵明琴龙胆苦苷脂质体的制备工艺研究[期刊论文]-中成药 2012(8) 6.刘学伟.曹敏.刘树民龙胆碱的解热作用及机制研究[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2011(24)
龙胆苦苷抗炎药理作用研究_陈长勋
?药理实验与临床观察? 龙胆苦苷抗炎药理作用研究 陈长勋1,刘占文2,孙峥嵘3,宋纯清1,胡之壁1a (1.上海中医药大学,上海 200032; 2.上海市同仁医院,上海 200050; 3.上海市金石药材有限公司,上海 200540) 摘 要:目的 研究秦艽所含龙胆苦苷的抗炎作用。方法 分别用二甲苯致小鼠耳肿胀,冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加及小鼠扭体反应,酵母多糖A、角叉菜胶、制霉菌素致大鼠或小鼠足跖肿胀模型,ig给药,观察龙胆苦苷的抗炎作用。结果 龙胆苦苷能减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀、冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶、酵母多糖A所致大鼠足跖肿胀,但对制霉菌素所致的炎症模型无明显作用。结论 秦艽所含龙胆苦苷具有一定的抗炎作用,其机制涉及对多种炎症介质的抑制。抗炎作用能部分代表秦艽生药的传统功效。 关键词:秦艽;龙胆苦苷;抗炎 中图分类号:R286.11 文献标识码:A 文章编号:02532670(2003)09081403 Studies on anti-inflammatory effect of gentiopicroside CHEN Chang-xun1,LIU Zhan-w en2,SUN Zheng-rong3,SONG Chun-qing1,H U Zhi-bi1 (1.Shang hai U niv ersit y of T CM,Shang hai200032,China; 2.Shang ha i T o ng r en Ho spit al,Shang hai200050,China; 3.Shang hai Jinshi M edicinal M ater ial Co.,L td,Shanghai200540,China) Abstract:Object T o study the anti-inflammatory effect of gentiopicro side extracted from Radix Gen-tianae M arrop hy llae.Methods The m odels o f aur icular edem a in m ice induced by dimethyl benzene,in-creased perm eability of celiac blo od capillary and body-tw isting reaction induced by acetic acid,paw sw elling induced by zym osan A,carrageenan and nystatin in rats or in m ice w ere prepared.Then g entiopi-cro side w as g iven to the r ats or m ice by ig.Results Gentiopicro side inhibited the auricular edem a,de-creased the perm eability of celiac blood capillary,r educed the paw sw elling induced by carr ageenan and zy-mosan A,but not by ny statio n.Conclusion Gentiopicro side ex tracted from R adix Gentianae Marrop hy l-lae,ex hibits o bvious anti-inflamm ato ry effects. Key words:Radix Gentianae M arr o p hy llae;gentio picr oside;anti-inflamm ation 秦艽是龙胆科龙胆属草本植物秦艽G entiana macr o p hy lla Pall.,麻花秦艽G.straminea M ax-im.,粗茎秦艽G.cr assicaulis Duthie ex Burkill或小秦艽G.dahur ica Fisch.的干燥根,为重要传统中药,具有祛风湿、止痹痛、清湿热的功效,临床用于风湿痹痛、筋脉拘挛、骨节烦痛、日晡潮热、小儿疳积发热等症。秦艽中的化学成分曾有不同报道。早期认为其主要含生物碱类成分,但近年的化学分析结果表明,秦艽乙醇浸液中含龙胆苦苷(gentiopi-cro side),对秦艽中确有的成分龙胆苦苷,目前国内尚无较系统的口服抗炎药理研究报道。故本研究针对龙胆苦苷进行抗炎方面的实验。 1 材料 1.1 供试品:龙胆苦苷粉末,从秦艽生药中提得,含量>95%,由上海中医药大学中药研究所生物工程研究室提供,实验前用蒸馏水配成所需浓度。 1.2 药品与试剂:消炎痛(粉剂),上海第十七制药厂产品,实验前用蒸馏水配成1mg/mL。酵母多糖A(zym osan A),Sig ma Chemical Co.产品,批号106H1088,实验前用生理盐水配成5m g/m L。角叉菜胶(carrageenan),瑞士Fluka公司产品,批号CH-9470,实验前用生理盐水配成10m g/m L。制霉菌素(ny statin),Sig ma Chem ical Co.产品,批号56H0470,实验前用生理盐水配成6m g/m L。 1.3 动物:昆明种小鼠,清洁级,动物合格证号:医动字第0224—03号;Wistar大鼠,清洁级,动物合格证号:医动字第02—24—04号,均由上海中医药大学实验动物中心提供。SD大鼠,清洁级动物,上 ? 814 ?中草药 Chinese T r aditio nal and Her bal D rug s 第34卷第9期2003年9月 a收稿日期:2002-12-18 基金项目:“九五”国家攻关课题(969030203) 作者简介:陈长勋(1948—),男,教授,博士生导师,上海中医药大学药理教研室主任,中华中医药学会中药实验药理专业委员会副主任兼秘书长,上海市药理学会理事,中药药理专业委员会主任,长期从事中药药理学教学、科研工作。 T el:(021)54232290 E-mail:cxchen6@hotm https://www.360docs.net/doc/d96375979.html,
龙 胆2010版药典
龙胆 Longdan GENTIANAE RADIX ET RHIZOMA 本品为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag．、龙胆Gentian.a scabra Bge.、三花龙胆Gentiana triflora Pall.或滇龙胆Gentiana rigescens Franch.的干燥根和根茎。前三种习称“龙胆”，后一种习称“坚龙胆”。春、秋二季采挖，洗净，干燥。 【性状】龙胆根茎呈不规则的块状，长1～3cm，直径0. 3～lcm；表面暗灰棕色或深棕色，上端有茎痕或残留茎基，周围和下端着生多数细长的根。根圆柱形，略扭曲，长10～20cm，直径0.2～0.5cm；表面淡黄色或黄棕色，上部多有显著的横皱纹，下部较细，有纵皱纹及支根痕。质脆，易折断，断面略平坦，皮部黄白色或淡黄棕色，木部色较浅，呈点状环列。气微，味甚苦。 坚龙胆表面无横皱纹，外皮膜质，易脱落，木部黄白色，易与皮部分离。 【鉴别】 (1)本品横切面：龙胆表皮细胞有时残存，外壁较厚。皮层窄；外皮层细胞类方形，壁稍厚，木栓化；内皮层细胞切向延长，每一细胞由纵向壁分隔成数个类方形小细胞。韧皮部宽广，有裂隙。形成层不甚明显。木质部导管3～10个群柬。髓部明显。薄壁细胞含细小草酸钙针晶。 坚龙胆内皮层以外组织多已脱落。木质部导管发达，均匀密布。无髓部。 粉末淡黄棕色。龙胆外皮层细胞表面观类纺锤形，每一细胞由横壁分隔成数个扁方形的小细胞。内皮层细胞表面观类长方形，甚大，平周壁显纤细的横向纹理，每一细胞由纵隔壁分隔成数个栅状小细胞，纵隔壁大多连珠状增厚。薄壁细胞含细小草酸钙针晶。网纹导管及梯纹导管直径约至45μm。 坚龙胆无外皮层细胞。内皮层细胞类方形或类长方形，平周壁的横向纹理较粗而密，有的粗达3μm，每一细胞分隔成多数栅状小细胞，隔壁稍增厚或呈连珠状。 (2)取[含量测定]项下的备用滤液，作为供试品溶液。另取龙胆苦苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取供试品溶 液5μl、对照品溶液1pl，分别点于同一硅胶GF2s4薄层板上，以乙酸乙酯一甲醇一水(10：2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】水分不得过9.0%（附录ⅨH 第一法）。 总灰分不得过7.0%(附录ⅨK)。 酸不溶性灰分不得过3.0%(附录ⅨK)。 【浸出物】照水溶性浸出物测定法(附录ⅨA)项下的热浸法测定，不得少于36.0%。 【含量测定】照高效液相色谱法(附录ⅥD)测定。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(25：75)
超高效液相色谱法测定龙胆药材中的獐芽菜苦苷和龙胆苦苷
超高效液相色谱法测定龙胆药材中的獐芽菜 苦苷和龙胆苦苷 作者：曹悦，左代英，吴晓兰，刘敬武，孙启时 【摘要】目的建立超高效液相色谱（UPLC）法测定龙胆药材中活性成分的方法。方法采用L9（34）正交表安排实验，确定最佳提取条件。色谱柱：Shimadzu C18（3.0 mm×75 mm, 1.7 μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸（V∶V = 5.5∶94.5），流速0.80 ml/min；检测波长235,270 nm；柱温为40℃。结果獐芽菜苦苷、龙胆苦苷分别在0.154 8～1.858 0 mg/ml，0.322～5.152mg/ml范围内呈良好的线性关系，平均回收率分别为102.09%，RSD=1.68％（n=6）；103.80%，RSD=1.11％（n=6）。结论采用UPLC法控制龙胆质量，操作简单,结果准确，方法可行。 【关键词】龙胆超高效液相色谱獐芽菜苦苷龙胆苦苷 Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of swertiamarin and gentiopicroside in root of Gentiana scabra Bge.by UPLC.MethodsBy L9（34）orthogonal design, an optimal condition was confirmed. The separation was performed on Shimadzu C18（3.0 mm×75 mm,1.7μm） column, the mobile phase was Acetonitrile-0.1% Phosphorylation（V∶V = 5.5∶94.5）. The flow rate was 0.8 ml/min, the detection wavelength was 235nm, 270nm, and the column temperature was 40℃.ResultsThis method had good linearity in the range of 0.322～5.152mg/ml,and the
不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量测定
收稿日期:2003-08-28 作者简介:魏岚(1978-),女(汉族),辽宁沈阳人,硕士研究生,主要从事中药现代化研究,T el:(024)23843711-3363,E-mail:ksbi@https://www.360docs.net/doc/d96375979.html, 。 文章编号:1006-2858(2004)02-0114-04 不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量测定 魏 岚,陈晓辉,王晓辉,毕开顺 (沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳 110016) 摘要:目的建立龙胆中龙胆苦苷的R P H PLC 定量分析方法,并对38批不同产地的龙胆进行含量测定。方法采用Diamonsil C 18色谱柱(5 m,200mm 4 6mm i d ),以乙腈 水 醋酸(V V V =10 80 1)为流动相,流速为1 0mL min -1,紫外检测波长为270nm,柱温为室温,内标物为对羟基苯甲酸(100mg L -1)。结果龙胆苦苷在12 8~153 6mg L -1质量浓度内线性关系良好(r =0 9999),方法回收率为99 1%,RSD 为0 4%(n =9)。38批龙胆中龙胆苦苷的含量差异较大。结论该方法可用于质量控制,并为不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量比较提供了依据。关键词:反相高效液相色谱法;龙胆;龙胆苦苷中图分类号:R 94 文献标识码:A 龙胆(Radix Gentianae)为龙胆科植物条叶龙胆(Gentiana manshur ica Kitag.)、龙胆(G.scabra Bge.)、三花龙胆(G.tr if lor a Pall.)、坚龙胆(G.rigescens Franch.)的干燥根及根茎尚有非正品龙胆草龙胆(Veronicastr um sibir icum (L )Hara)的根及根茎和红花龙胆(Gentiana rhodan tha Franch.)的全草。龙胆苦、寒;归肝、胆经;具有清热燥湿、泻肝胆火的功效[1];主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古,浙江、湖南、江西、福建、江苏、广东、新疆也有分布。龙胆苦苷(g entiopi croside,GT P )是龙胆的主要有效成分,具有强烈苦味活性,是龙胆药苦寒的物质基础[2]。作者采用正交试验设计考察了龙胆中龙胆苦苷的提取工艺,建立了龙胆中龙胆苦苷的RP HPLC 定量分析方法,并对38批不同产地的龙胆进行含量测定,从而为龙胆的质量研究提供了科学依据。 1 仪器与试药 岛津LC 10A 高效液相色谱仪,SPD 10A 紫外检测器,N2000色谱工作站,岛津UV 265FW 型紫外分光光度仪,Sartorius BP210S 型电子分析天平,ZFQ85A 型旋转蒸发仪。 甲醇、乙腈为色谱纯,其他试剂为分析纯。龙胆样品共38批,由本校孙启时教授鉴定,粉碎过40目筛,置于干燥阴凉处备用,来源情况见表2。龙胆苦苷对照品(770 200105),购于中 国药品生物制品检定所。 2 方法 2 1 提取工艺的考察 以龙胆苦苷含量为检测指标,选取溶剂种类、溶剂用量、提取时间、提取次数4个因素,每个因素4个水平,采用L 16(45)正交表进行试验,按 2 5 条制备样品溶液,按 2 6 条进行测定。综合直观分析和方差分析的结果,确定最佳提取工艺为:用60倍于药材量的甲醇回流提取2次,每次2h 。2 2 检测波长的选择 取龙胆苦苷对照品适量,用甲醇配制成质量浓度为25mg L -1的溶液,在400~200nm 内进行紫外扫描,结果显示最大吸收波长为269 2nm,故选择270nm 为检测波长。2 3 对照品溶液的制备 取龙胆苦苷对照品约6 4mg ,精密称定,置25mL 量瓶中,甲醇超声溶解定容,摇匀,作为对照品贮备溶液。 2 4 内标溶液的制备 取对羟基苯甲酸约5 0m g,精密称定,置50mL 量瓶中,甲醇超声溶解定容,摇匀,得到质量浓度为100mg L -1 的内标溶液。 2 5 供试品溶液的制备 取龙胆药材粉末0 45g,加入27mL 甲醇,70 水浴回流2次,每次2h,合并提取液并过滤, 第21卷第2期2004年3月 沈 阳 药 科 大 学 学 报Journal of Shenyang Pharmaceutical U niversity V ol 21 No 2 M ar 2004p 114
龙胆苦苷的体外稳定性_陈国锋
复旦学报(医学版) Fudan U niv J M ed Sci 2008M ar ,35( 2)龙胆苦苷的体外稳定性 陈国锋 高东雁 张文鑫 王建新 ■ (复旦大学药学院药剂教研室 上海 200032) 【摘要】 目的 研究龙胆苦苷(G T P )在体外生物样品中的稳定性。方法 将龙胆苦苷溶解在不同pH 的磷酸盐缓冲液、pH 1.2的盐酸溶液及大鼠胃肠黏膜匀浆、胃肠道内容物、肝组织匀浆和血浆中,37℃恒温水浴,孵育一定时间后取样,高效液相色谱法测定龙胆苦苷的浓度,考察其在不同pH 缓冲液和生物样品中的稳定性。结果 37℃孵育48h 后,龙胆苦苷在pH 1.2的盐酸溶液、pH 6.8、7.4和8.0的磷酸盐缓冲液中的降解百分率分别为2.6%、7.9%、20.2%和34.4%。龙胆苦苷在胃内容物、胃黏膜、小肠内容物、肠黏膜、肝组织匀浆中稳定,而在大肠内容物中12h 降解79.8%,血浆中24h 降解46.9%。结论 G T P 在偏酸性环境中较稳定,随碱性增加稳定性显著降低;G T P 在胃、小肠、肝脏中稳定,而在血液和大肠中易降解。【关键词】 龙胆苦苷; 生物样品; 稳定性【中图分类号】 R 284 【文献标识码】 A 上海市科委中药现代化专项项目(06DZ 19720) ■ Cor responding author E -mail :jxwang @s hmu .edu .cn Stability of gentiopicrin in biological fluids in vitro CH EN Guo -feng ,GAO Dong -y an ,ZH ANG Wen -xin ,WANG Jian -x in ■ (Department o f Pharmaceutics ,School o f Pharmacy ,Fudan University ,Shanghai 200032,China ) 【Abstract 】 Objective T o investigate the stabili ty of gentiopicrin (G TP )in biological fluids in vitro . Methods T otal gentian glycosides w as dissolved in phosphate buffer solutions and diluted hydro -chloric acid at different pH ,liver homogenate ,plasma ,gast rointestinal contents and mucosa homoge -nat es of rats ,t hermostatically maint ained at 37℃.A t time intervals af ter degradation ,samples were withdrawn and the concent rations of G T P w ere determined by HP LC ,from w hich stability of it at dif -ferent biological specimen was evaluated . Results Deg radation of gentiopicrin did not f ollow appar -ent first -order kinetics equation .Af ter 48h of incubation ,G TP deg raded by 2.6%,7.9%,20.2%and 34.4%respectively at pH 1.2diluted hydrochloric acid and pH 6.8,pH 7.4and pH 8.0phos -phate buffer solutions .The degradation profile of G TP in gast ric content s and mucosa homogenates ,small intestinal contents ,intestinal mucosa homogenates and liver homogenates was similar to that in the aqueous buff er .G TP w as found only 20%of it s original concent ration after 12h of incubation spiked in the large intestinal contents ,and 53%after 24h spiked in plasma . Conclusions GT P is st able in stomach ,small intestine and liver .Blood and large intestine are possible sites w here G T P might be deg raded . 【Key words 】 gentiopicrin ; biological fluids ; stability 龙胆为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshu -rica Kitag .、龙胆Gentiana scabra Bge .、三花龙胆Gentiana tri f lora pall .或坚龙胆Gentiana reges -cens Franch .的干燥根及根茎[1],为中医常用的清肝胆实火,除下焦湿热的要药。裂环环烯醚萜苷类为龙胆中的主要活性部位,包括龙胆苦苷(Gentio p -icrin ,G TP )、当药苦苷(Sw ertiam arian )、当药苷(Sw eroside )、马钱子苷酸(Log anic acid )等[2,3] 。其 中龙胆苦苷为龙胆中的主要活性成分,具有保肝、利胆、健胃、抗炎、抗菌等活性[4],是评价龙胆质量的主要指标成分。 研究发现 [5] ,小鼠G TP 灌胃后,虽然吸收迅速, 220
龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定
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龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定 作者：侴桂新， 王峥涛， 董婷霞， 詹华强， 禹志领， CHOU Gui-xin， WANG Zheng-tao，DONG Ting-xia， ZHAN Hua-qiang， YU Zhi-ling 作者单位：侴桂新,王峥涛,CHOU Gui-xin,WANG Zheng-tao(上海中医药大学中药研究所,上海,201203)， 董婷霞,詹华强,禹志领,DONG Ting-xia,ZHAN Hua-qiang,YU Zhi-ling(香港科技大学生 物学系,香港,九龙) 刊名： 上海中医药杂志 英文刊名：SHANGHAI JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 年，卷(期)：2005,39(11) 被引用次数：11次 参考文献(6条) 1.徐国钧;徐珞珊中国药材学(上) 1996 2.卫生部药典委员会中华人民共和国药典 2000 3.俞桂新;董婷霞;詹华强龙胆药材中龙胆苦苷含量测定样品制备方法比较[期刊论文]-现代中药研究与实践 2004(05) 4.黄海;金惠敏;孙文基龙胆药材中龙胆苦苷的HPLC法测定[期刊论文]-西北药学杂志 1998(03) 5.马潇;陈兴国;胡之德甘肃产秦艽的龙胆苦苷含量比较[期刊论文]-中药材 2003(02) 6.江蔚新;沈志滨;王雪莲三花龙胆不同部位龙胆苦苷的含量测定[期刊论文]-中草药 2003(03) 本文读者也读过(10条) 1.马潇.朱俊儒.何禄仁.赵建邦.MA Xiao.ZHU Junru.HE Luren.ZHAO Jianbang甘肃产秦艽类药材中龙胆苦苷的含量测定[期刊论文]-中药新药与临床药理2009,20(5) 2.丁文雅.张婷婷.王强.DING Wen-ya.ZHANG Ting-ting.WANG Qiang7种龙胆科蒙药药材中龙胆苦苷的含量测定[期刊论文]-中国药科大学学报2008,39(1) 3.江蔚新.安胜利.尹清永.杨红梅.江淼不同方法对龙胆中地上部分有效成分的含量测定[期刊论文]-哈尔滨商业大学学报(自然科学版)2002,18(6) 4.刘涛.付玉芹.才谦.杨松松.韩立伟.黄学石.LIU Tao.FU Yu-qin.CAI Qian.YANG Song-song.HAN Li-wei.HUANG Xue-shi龙胆总裂环环烯醚萜苷质量标准研究[期刊论文]-云南中医学院学报2006,29(2) 5.魏岚.陈晓辉.王晓辉.毕开顺不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量测定[期刊论文]-沈阳药科大学学报2004,21(2) 6.敖茂宏.宋智琴.AO Mao-hong.SONG Zhi-qin黔产龙胆不同部位中龙胆苦苷的含量测定[期刊论文]-西南农业学报2010,23(5) 7.吴宗芬.余萍.WU Zong-fen.YU Ping中药龙胆酊中龙胆苦苷的薄层鉴别[期刊论文]-中国兽药杂志2009,43(12) 8.赵瑞芝.梁伟杰.丘小惠.ZHAO Ruizhi.Liang Weijie.QIU Xiaohui龙胆药材中龙胆苦苷的提取工艺研究[期刊论文]-中国药房2005,16(12) 9.杨骏.刘翠兰.李洁.YANG Jun.LIU Cui-lan.LI Jie HPLC法测定知柏龙胆草片中盐酸小檗碱的含量[期刊论文]-上海中医药杂志2007,41(5) 10.侴桂新.董婷霞.詹华强.禹志领.王峥涛龙胆药材中龙胆苦苷含量测定样品制备方法比较[期刊论文]-现代中药研究与实践2004,18(5) 引证文献(12条) 1.敖茂宏.宋智琴黔产栽培龙胆药材龙胆苦苷的含量测定[期刊论文]-浙江农业科学 2010(6) 2.敖茂宏.宋智琴黔产龙胆不同部位中龙胆苦苷的含量测定[期刊论文]-西南农业学报 2010(5) 3.田俊秋.谷丹龙胆中龙胆苦苷的提取工艺优选[期刊论文]-黑龙江科技信息 2011(24)
金龙胆草总皂苷提取工艺
1仪器与药品Cary50紫外分光光度计；电子分析天平；KQ．500E型医用数控超声波清洗器。金龙胆草皂苷。 2方法与结果 2．1超声提取工艺正交实验 根据预试验结果，选取试剂(A)、超声时间(B)、超声次数(C)、萃取次数(D)四个因素，每个因素三个水平，按L9(3 )正交表进行试验。每组试验平行做三份，每组取金龙胆草样品80 g过100目筛后，充分混合，按下述方法分别制备样品溶液并进行测定。因素水平安排见表1。 表1因素水平表 2．2金龙胆草总皂苷(GS)含量测定 2．2．1对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的金龙胆草皂苷10 mg，加甲醇溶液定容至10 mL，制成每1 mL含 1 mg的标准溶液。 2．2．2 标准曲线的制备精密移取对照品溶液30、60、90、120、150、180uL、分别加入5支干燥具塞的试管中，水浴挥干溶剂，各加入新配制的5％香草醛冰醋酸溶液0．2 mL，高氯酸0．8 mI ，于60。C恒温水浴加热15 min，取出。流水冷却2 min，加冰醋酸5 mL，摇匀，随行试剂空白，用Cary50紫外分光光度计在550 nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，以含量( g)为横坐标绘制标准曲线，求回归方程 2．2．3供试品的制备取金龙胆草样品2 g，根据表1的设计，加入20 mL试剂，超声温度为30。C，超声功率为500 kw超声处理，过滤液常压蒸干，加入30 mL水充分溶解，加入乙醚30 mI 脱脂2次，然后用30 mL水饱和正丁醇萃取，收集正丁醇萃取液，常压蒸去溶剂，残渣用甲醇定容至10 mL。 2．2．4金龙胆草皂苷含量的测定取供试品20uL，水浴挥干，加入新配制的5 香草醛冰醋酸溶液0．2 mL，高氯酸0．8 mL，于60℃恒温水浴加热15 min，取出。流水冷却2 min，加冰醋酸5 mL，摇匀，在550 nm测其吸光度值，计算金龙胆草总皂苷的含量，取 3 次平均值即为测量结果。 2．2．5精密度测定精密吸取金龙胆草对照品30uL，依法显色后，测定吸光度，结果RSD。 2．2．6重现性测定精密吸取对照品溶液30 uL，5份依法显色后，测定吸光度，结果RSD 。 3 结果与讨论 3．1试验结果及试验分析表如下见表3、表4。 表3金龙胆草总皂苷正交试验结果
龙胆苦苷衍生物的合成及其抗炎活性研究
目录 摘要 (1) ABSTRACT (3) 符号说明 (6) 前言 (7) 第一章龙胆苦苷衍生物的合成 (10) 第一节龙胆苦苷缩醛衍生物的合成 (10) 1 实验材料与仪器 (10) 1.1 实验材料 (10) 1.2 实验仪器 (11) 2 实验方法与结果 (12) 2.1 龙胆苦苷缩醛衍生物的合成设计 (12) 2.1.1反应机理 (12) 2.1.2 合成设计 (13) 2.2 实验方法 (13) 2.2.1 溶剂和试剂的处理 (13) 2.2.2 实验操作 (13) 2.3 实验结果 (13) 3 结论与讨论 (31) 第二节龙胆苦苷缩酮衍生物的合成 (32) 1 实验材料与仪器 (32) 1.1 实验材料 (32) 1.2 仪器 (32) 2 实验方法与结果 (32) 2.1 龙胆苦苷缩酮衍生物的合成设计 (32) 2.1.1 反应机理 (32) 2.1.2 反应设计 (32) 2.2 实验方法 (33) 2.3 龙胆苦苷缩酮衍生物的结构确定及理化性质鉴别 (33)
3 结论与讨论 (34) 第三节四乙酰龙胆苦苷的合成 (35) 1 实验材料与仪器 (35) 1.1 实验材料 (35) 1.2 实验仪器 (35) 2 实验方法与结果 (35) 2.1 四乙酰龙胆苦苷的合成设计 (35) 2.1.1 反应机理 (35) 2.1.2 实验设计 (35) 2.2 实验方法 (36) 2.3 四乙酰龙胆苦苷的结构表征及理化性质鉴别 (36) 3 结论与讨论 (37) 第二章龙胆苦苷衍生物的抗炎活性研究 (38) 第一节龙胆苦苷衍生物对脂多糖诱导的巨噬细胞的炎症反应 (38) 1、实验材料及仪器 (38) 1.1 实验材料 (38) 1.1.1细胞系及来源 (38) 1.1.2 主要试剂及试剂盒 (38) 1.2 主要仪器 (38) 2 实验方法与结果 (39) 2.1 部分主要试剂的配制 (39) 2.1.1 胎牛血清灭活 (39) 2.1.2 PBS的配制 (39) 2.1.3 龙胆苦苷衍生物储备液的制备 (39) 2.2 RAW264.7细胞培养与处理 (40) 2.2.1 RAW264.7细胞培养 (40) 2.2.2 RAW264.7细胞消化 (40) 2.2.3 RAW264.7细胞处理 (40) 2.3 MTT法检测龙胆苦苷衍生物对细胞活力的影响 (40)