人巨细胞病毒精编版
人巨细胞病毒
关键词：巨细胞内皮细胞北纳细胞网
巨细胞病毒(CMV)是一种可引起感染细胞肿大并出现巨大核内包涵体的病原体，自然界普遍存在，具有严格种属特异性，包括人、马、牛、猪、猫和鼠等CMV。感染人的巨细胞病毒称为人巨细胞病毒(HCMV)，也称为人疱疹病毒5型(HHV-5)。
一、临床意义
HCMV在全球普遍流行，各年龄均易感，感染率随年龄增长而升高，无季节性流行规律。感染来自患者的唾液、尿液、乳汁、泪液、粪便、阴道分泌物、血液及精液，包括先天性感染、围产期感染和后天性感染。先天性感染指母体HCMV 通过血液经胎盘感染胎儿，围产期感染指母体HCMV通过产道或乳汁感染新生儿，后天性感染通过呼吸道、消化道或输血、器官移植等途径感染HCMV。10％～15％HCMV先天性感染胎儿在妊娠期和新生儿期出现宫内生长迟缓、黄疸、肝脾肿大、皮疹、心肌炎、肺炎、中枢神经系统病变、耳聋及脉络膜视网膜炎等表现。围产期感染者出生3～12周开始分泌或者排泄病毒，通常无临床表现。性接触是HCMV 后天感染的重要途径。
大多数免疫功能正常者感染HCMV后无显著临床表现，少数出现EBV感染所致传染性单核细胞增多症的类似表现，包括持续2～3周的发热、乏力、非典型性淋巴细胞增多和轻症肝炎等。与其他人疱疹病毒一样，原发感染后HCMV会在宿主体内终身潜伏于内皮细胞、淋巴细胞以及多种组织细胞，当受到外界刺激，特别是免疫功能抑制时，潜伏的HCMV被激活开始复制。
二、生物学特性
HCMV病毒颗粒直径为120～200nm，有典型的疱疹病毒结构。最外层为病毒的脂质双层包膜，厚约10nm，现已知包膜含有至少10种病毒糖蛋白。包膜内为被膜，厚约50nm，含有至少14种病毒蛋白。被膜内为核衣壳，直径约100nm，由病毒壳体和包裹在内的病毒基因组组成。病毒壳体是由162个壳粒亚单位组成的对称20面体。最里面的基因组为线性双链DNA，长220～240kb，由长片段L 段和短片段s段连接而成，含约200个开放阅读框，分为立即早期基因IE、早期基因E和晚期基因L。晚期基因UL83编码的磷蛋白65(pp65)是病毒被膜内的最主要成分，占被膜蛋白致密颗粒95％，具有丝氢酸／苏氨酸蛋白激酶活性且高度保守。pp65表达与病毒复制呈明显的相关性，且在潜伏感染时表达量极低，
是临床用于HCMV活动性感染的指标。与其他疱疹病毒不同，电镜下，HCMV病毒颗粒呈高比率的破损和球型致密体等形态特征。HCMV，对外界抵抗力差，56℃30分钟、紫外线5分钟、脂溶性溶剂、强酸和反复冻融均能灭活。
人巨细胞病毒
人巨细胞病毒 关键词：巨细胞内皮细胞北纳细胞网 巨细胞病毒(CMV)是一种可引起感染细胞肿大并出现巨大核内包涵体的病原体，自然界普遍存在，具有严格种属特异性，包括人、马、牛、猪、猫和鼠等CMV。感染人的巨细胞病毒称为人巨细胞病毒(HCMV)，也称为人疱疹病毒5型(HHV-5)。 一、临床意义 HCMV在全球普遍流行，各年龄均易感，感染率随年龄增长而升高，无季节性流行规律。感染来自患者的唾液、尿液、乳汁、泪液、粪便、阴道分泌物、血液及精液，包括先天性感染、围产期感染和后天性感染。先天性感染指母体HCMV 通过血液经胎盘感染胎儿，围产期感染指母体HCMV通过产道或乳汁感染新生儿，后天性感染通过呼吸道、消化道或输血、器官移植等途径感染HCMV。10％～15％HCMV先天性感染胎儿在妊娠期和新生儿期出现宫内生长迟缓、黄疸、肝脾肿大、皮疹、心肌炎、肺炎、中枢神经系统病变、耳聋及脉络膜视网膜炎等表现。围产期感染者出生3～12周开始分泌或者排泄病毒，通常无临床表现。性接触是HCMV 后天感染的重要途径。 大多数免疫功能正常者感染HCMV后无显著临床表现，少数出现EBV感染所致传染性单核细胞增多症的类似表现，包括持续2～3周的发热、乏力、非典型性淋巴细胞增多和轻症肝炎等。与其他人疱疹病毒一样，原发感染后HCMV会在宿主体内终身潜伏于内皮细胞、淋巴细胞以及多种组织细胞，当受到外界刺激，特别是免疫功能抑制时，潜伏的HCMV被激活开始复制。 二、生物学特性 HCMV病毒颗粒直径为120～200nm，有典型的疱疹病毒结构。最外层为病毒的脂质双层包膜，厚约10nm，现已知包膜含有至少10种病毒糖蛋白。包膜内为被膜，厚约50nm，含有至少14种病毒蛋白。被膜内为核衣壳，直径约100nm，由病毒壳体和包裹在内的病毒基因组组成。病毒壳体是由162个壳粒亚单位组成的对称20面体。最里面的基因组为线性双链DNA，长220～240kb，由长片段L 段和短片段s段连接而成，含约200个开放阅读框，分为立即早期基因IE、早期基因E和晚期基因L。晚期基因UL83编码的磷蛋白65(pp65)是病毒被膜内的最主要成分，占被膜蛋白致密颗粒95％，具有丝氢酸／苏氨酸蛋白激酶活性且高度保守。pp65表达与病毒复制呈明显的相关性，且在潜伏感染时表达量极低，
人类巨细胞病毒IgG
湖南省职业病防治院 作业指导书 标题：人类巨细胞病毒病毒（IgG）（酶联免疫法） 修改记录
湖南省职业病防治院作业指导书文件编号： 标题：人类巨细胞病毒IgG（酶联免疫法）版号：第 1 版页码1/2 1、目的 用于检测人体血清或血浆人类巨细胞病毒（IgG）. 2、范围 利用酶联免疫间接法原理（ELISA）定性检测人血清中的人类巨细胞病毒IgG 抗体，适用于人类巨细胞病毒病毒感染的辅助诊断。 3、职责 检测人员按照本规程进行检测操作。 4、原理 采用酶联免疫间接法原理定性检测人血清中的人类巨细胞病毒IgG抗体（HCMV-IgG），以纯化人类巨细胞病毒抗原包被酶联板。待检血清中的人类巨细胞病毒与包被抗原反应，再与酶标记鼠抗人IgG抗体结合，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物。加底物TMB显色，在酶标仪上比色后根据吸光度（A值）判定有无人类巨细胞病毒IgG抗体的存在。 5、样本要求 5.1仅限于检测人体血清或血浆。 5.2常规方法采集。 5.3血清：采血后，室温放置1-2小时，待血液凝固，再于3000转/分钟离心15分钟。 5.4血浆：采血后，样品与抗凝剂反复轻摇混匀，再3000转/分钟离心15分钟。 5.5如果样品没有在8小时内测定，应将其保存于2℃-8℃。如果样品不能在7天内测定，应将血清或血浆与血细胞分离， -20℃保存，避免反复冻融。 6．分析系统 6.1分析仪器：Thermo Mk3型酶标仪，检测波长450nm，参考波长630nm。 6.2 37℃恒温箱。 6.3 振荡器用于样品、试剂的混匀。 6.4 微量加样枪。 6.5 试剂准备： 试剂盒于冰箱保存，使用前应取出置37℃。 取试剂盒内洗涤液用蒸馏水作25倍稀释，置洗瓶中备用。 6.6 质控试剂：-20℃保存，溶解后随试剂一起冷藏，每天随样品一起检测并保存质控结果，每月一次质控小结，失控要有记录及纠正的结果。
人巨细胞病毒与动脉粥样硬化相关性研究进展
人巨细胞病毒与动脉粥样硬化相关性研究进展 发表时间：2015-10-16T11:04:20.537Z 来源：《航空军医》2015年7期作者：李维维[导读] 河北大学临床医学院河北保定 071000 本文参阅大量国内外文献，就人巨细胞病毒（HCMV）与动脉粥样硬化（AS）的相关性研究进展进行综述。 河北大学临床医学院河北保定 071000 【摘要】动脉粥样硬化发病率逐年增高，且趋于年轻化，严重危害人类健康，但其机制尚不十分清楚，大量流行病学和实验室研究表明人巨细胞病毒感染在动脉粥样硬化发病中起重要作用，本文参阅大量国内外文献，就人巨细胞病毒（HCMV）与动脉粥样硬化（AS）的相关性研究进展进行综述。 【关键词】人巨细胞病毒；动脉粥样硬化；相关性动脉粥样硬化是严重危害人类，尤其是老年人健康的疾病之一，其致病机制一直备受关注，Fabrieant 等[1] 在1985年用鸟类疱疹病毒在火鸡体内诱发出冠状动脉粥样硬化斑，第一次证明HCMV与As之间存在密切关系，之后国内外许多学者的研究都表明H C M V感染在动脉粥样硬化发生中起着重要作用，本文就人巨细胞病毒与动脉粥样硬化相关性研究予以综述。 1.实验室检查与分子生物学证据 1.1 AS患者血清检测 许从峰等[2]对304例动脉硬化患者和164例非动脉硬化患者进行血清抗CMV的IgG抗体检测，结果显示动脉粥样硬化组血清中CMV的阳性率显著高于非动脉粥样硬化组（分别为82．2％和61．0％，P=0．02）。王凌燕等[3] 用ELISA方法对56例糖尿病合并冠心病（A组，及48例未合并冠心病组的（B组）血清人巨细胞病毒IgG、IgM 抗体进行检测，结果 A 组患者HCMV IgG、IgM 阳性率均明显高于B组。以上研究显示HCMV及其抗体在AS患者血清中含量显著高于正常人，表明HCMV可能在动脉粥样硬化形成过程中发挥重要作用，1.2 AS患者动脉斑块检测 许从峰等[2] 对15例冠状动脉粥样硬化的组织标本和7例正常血管组织标本进行HCMV基因检测，显示结果动脉粥样硬化斑块中HCMV 基因出现率显著高于正常血管组织（13／15和2／7，P=0．O1），此实验证明AS患者动脉斑块中HCMV的含量较正常水平高，HCMV感染可促进动脉粥样硬化的发生与发展。 1.3 AS患者血管组织检测 陈瑞珍[4]等人利用原位杂交的方法检测了32例临床上AS患者的动脉血管组织以及32例患者的正常血管组织（22例取动脉，10例取大隐静脉）中HCMV DNA 序列，结果显示阳性分别为13／32及3／22，表明HCMV 感染与AS的发生有密切关系。而且HCMV DNA 主要见于内膜下平滑肌及中膜平滑肌．外膜组织及细胞外间质则少见，提示HCMV 感染血管组织后，在血管皮细胞核中增殖、复制，而后释放，自内膜逐渐向中膜肌层扩散。李心怡[5]等人对15例动脉粥样硬化患者的外周动脉标本，采用原位杂交及免疫组织化学染色的方法，定性及定位检测外周动脉中人巨细胞病毒核酸及抗原的表达情况，结果原位杂交结果为人巨细胞病毒核酸在15例动脉粥样硬化患者的外周动脉中均为阴性表达。免疫组织化学染色结果为人巨细胞病毒抗原pp65在15例标本中14例为阳性表达，1例为阴性表达；人巨细胞病毒抗原IE1 72在15例标本中为阴性表达。结论动脉粥样硬化动脉标本中存在人巨细胞病毒感染的证据2.流行病学证据 在80年代后期，Stanford大学医学院对301位心脏移植并使用大量免疫抑制剂患者进行研究发现，有91位患者发生HCMV感染，5年后，HCMV感染阳性组的患者有69％由于移植心脏加速出现了严重的冠状动脉粥样硬化而导致移植失败，而无非HCMV感染组中这一比例为27％[6]。美国Minnesota观察研究了102位接受心脏移植并接受大量免疫抑制剂的患者，移植术后2年有HCMV感染的患者有32％出现了冠状动脉粥样硬化，而无HCMV感染者的冠状动脉粥样硬化发生率仅为10％。这些研究都表明HCMV可增加发生冠状动脉粥样硬化的危险性。 综上可知，流行病学调查、实验室检查和分子生物学证据都表明人巨细胞病毒与动脉粥样硬化的发生存在着非常密切的关系，但HCMV导致AS发生发展的确切机制及影响因素有待进一步研究。参考文献： [1] Fabrieant CG，fabrican tJ，Litre nta M M，eta1.Journal of Experimental MediCine.1978，148：335-40. [2] 许从峰，陈瑞珍等.巨细胞病毒感染对动脉粥样硬化的影响[J].免疫学杂志，2003，19：451-53. [3] 王凌燕，吴金等.糖尿病合并冠状动脉粥样硬化血清抗人巨细胞病毒抗体检测[J]中国老年学杂志2002，3：225-26. [4] 陈瑞珍，李武，杨英珍.原位杂交检测人动脉粥样硬化斑块组织中人巨细胞病毒 D N A[J].中华医学杂志，1995，75：592-593. [5]李心怡，张宗泽等.人巨细胞病毒感染与动脉粥样硬化的相关性研究[J]山东医药，2002，52：73-73. [6]Grattan M，Moreno-Cabral C，Starnes V，et al.Cytomegalovirus infection is assosiated with cardiac allograft rejection and atherosclerosis [J].JAMA，1989，261（24）：3562-6
65-人巨细胞病毒核酸检测标准操作程序
人巨细胞病毒核酸定量核酸检测标准操作规程 （荧光PCR法） 1.目的 规范人巨细胞病毒(HCMV)核酸DNA（荧光PCR法）检测操作流程，准确进行人巨细胞病毒(HCMV)DNA分析。 2.应用范围 使用中山大学达安基因股份有限公司人巨细胞病毒(HCMV)核酸检测试剂盒（荧光PCR 法）和PE GeneAmp 5700、ABI Prism 7000、ABI Prism 7700等仪器进行人巨细胞病毒(HCMV)DNA 检测。 3.职责 由PCR实验室制定程序文件，专业技术人员负责执行，实验室主管负责监督实施。4.内容 4.1 实验原理和临床应用 本品选取人巨细胞病毒珠（即人疱疹病毒5型）-AD169基因组中编码即刻早期转录调节蛋白的IE1基因的一高度保守的非编码区为扩增靶区域，设计特异性引物及荧光探针，扩增片段长度为86bp,利用实时荧光定量PCR技术，定量检测尿液、乳汁、血清或淋巴细胞样本中人巨细胞病毒DNA。 本品用于器官移植、骨髓移植及HIV阳性/AIDS患者尿液、乳汁、血清或淋巴细胞中的人巨细胞病毒(HCMV)感染的检测，用于人巨细胞病毒感染的辅助诊断和疗效监控，不用于血源筛查。本品检测结果仅供临床参考，不能单独作为确诊或排除病例的依据。 4.2标本采集 4.2.1 使用标本类型：尿液、乳汁、血清和淋巴细胞 4.2.2 标本采集；由合作单位按照以下要求进行采集。 4.2.2.1 尿或乳汁：取晨尿或成熟乳1ml于1.5ml的无菌离心管中，离心取沉淀即为标本。标本可立即用于测试，也可保存于-20℃待测，保存期为6个月。 4.2.2.2 血清：用无菌注射器抽取受检者静脉血1ml,注入无菌1.5mlEppendoff管，4℃静置过夜。吸取上层血清（注意勿带入红细胞）至另一无菌1.5mlEppendoff管中，即为血清标本。标本可立即用于测试（48小时以内），也可以保存于-20℃待测，保存期为6个月。