酵母扩培岗位说明书
酵母扩培岗位说明书
北大纵横管理咨询公司烟台啤酒项目组岗位说明书岗位名
称酵母扩培管理员岗位编号所在部门生产技术科岗位定员2人直接上级化验室主任岗位工资直接下级无分析人所辖人员无分析日期本职：负责酵母扩大培养及化验室的部分分析
工作职责与工作任务：职责一职责表述: 负责酵母扩大培养实验室阶段的全部工作工作时间百分比：15% 工作任务1.按照要求对无菌室进行严格杀菌(酒精擦抹.甲醛熏蒸.紫外线照射)频次：5次/次扩培（1-2次扩培/月）用时：2hr2.对杀菌后的无
菌室进行微生物检验,若不合格要进行复杀,直至达到要求为止.
频次：5次/次扩培用时：
1.5hr3.对无菌室的工作服及所用器械进行杀菌与消毒频
次：5次/次扩培用时：1hr4.洗刷所用玻璃器皿,做好棉塞高温杀菌备用频次：1次/次扩培用时：4hr5.按照扩培要求取麦汁，做各阶段所需液体培养基,蒸汽杀菌后冷却备用频次：1次/次扩培用时：10hr6.严格按照无菌操作对原固体菌种进行各阶段无菌移
接频次：6次/ 次扩培用时：2hr7.对每一阶段的移接按时振摇称重,认真观察其发酵情况频次：16次/次扩培用时：1hr8.对每一阶段的酵母发酵情况进行镜检. 频次：8次/次扩培用时：1hr9.对每一阶段的发酵液进行微生物检验频次：8次/次扩培用时：
1hr10.认真填写原始记录,如有异常及时汇报
科长频次：10次/ 次扩培用时：0.5hr 职责二
职责表述：负责各类酵母菌种的活化和复壮,确保菌种的纯种和活性工作时间百分比：5% 工作任务1.按照要求对无菌室进行严格杀菌(酒精擦抹.甲醛熏蒸.紫外线照射)频次：6次/ 年用时：4hr2.对杀菌后的无菌室进行微生物检验,若不合格要进行复杀,直至达到要求为止频次：1次/ 次活化用时：
1.5hr3.对无菌室所用工作服清洗洁净后进行紫外线杀菌频次：1次/次活化用时：1hr4.洗刷所用试管，并对其高温杀菌备用频次：1次/ 次活化用时4hr5.按照扩培要求取麦汁做固体培养基频次：1次/ 次活化用时：10hr6.蒸汽杀菌后摆好斜面备用频次：1次/ 次活化用时：1hr7.严格按照无菌操作对各种菌种进行无菌移接频次1次/ 次活化用时：4hr8.待到菌落发育良好时取出置冰箱中保存频次：1次/次活化用时：0.5hr9.对各类菌种进行简单的性能对照确保酵母的良好性能频次：8次/ 次活化用时：0.5hr10.认真填写原始记录并让技术科长签字频次：1次/次活化用时：0.5hr 职责三
职责表述：负责各类酵母菌种的接收和保管工作时间百分比：2% 工作任务1.对新进酵母菌种进行外观鉴定频次：4次/年用时：1hr2.确认试管无破损及无其它异常现象方可接收频次：4次/年用时：1hr3.认真仔细地填写菌种保藏原始记录频次：4次/年用时：1hr4.报送技术科长签字确认频次：4次/年用时：1hr 职责四
职责表述：负责酵母扩培现场阶段的培养工作工作时间百分比：25% 工作任务1.各酵母培养罐的CIP刷洗频次：6次/次扩培（1-2次扩培/月）用时：
1.5hr
2.各酵母培养罐的蒸汽杀菌频次：6次/次扩培用时：
1.5hr3.酵母扩培管路的CIP杀菌频次：8次/次扩培用时：1hr4.酵母扩培间无菌风管路的蒸汽杀菌频次：1次/天 (扩培现场阶段)用时：0.5min5.种子罐扩培使用麦汁的蒸汽杀菌频次：1次/次扩培用时：
1.5 hr6.各酵母培养罐麦汁的接收工作频次：8次/次扩培用时：1hr7.各酵母培养罐间酵母的压送频次：2次/次扩培用时：0.5hr8.酵母培养罐的通风.增氧频次：1次/天 (扩培现场阶段)用时：5hr9.酵母培养罐的温度控制频次：1次/天 (扩培现场阶段)用时：1hr10.扩培酵母压送至发酵罐频次：5次/次扩培用时：1hr 职责五
职责表述：负责发酵液各阶段酵母细胞数的检测工作时间百分比：25% 工作任务1.按照要求到车间取样,确保样品的代表性频次：1-2次/天用时：1hr2.将取回样品进行镜检记数频次：1-2次/天用时：3hr3.计算结果认真填写原始记录并写好化验报告单交科长签字频次：1次/ 天用时：0.1hr4.化验单及时送报车间办公室频次：1次/ 天用时：0.1hr 职责六职责表述：负责酵母扩培间的环境卫生清扫工作工作时间百分比：4% 工作任务1.酵母扩培间地面及墙壁的清扫频次：1次/天 (扩培现场阶
段)用时：1hr2.酵母扩培间地面撒漂白粉.新洁尔灭频次：2次/周用时：
1.5 hr3.酵母扩培间的培养罐.管路.阀门.接流板的清洁维护频次：1次/周用时：
1.5hr 职责七职责表述：负责酵母扩培间各设备的分解清洗工作时间百分比：2% 工作任务1.阀门.管路的分解清洗频次：1次/半年用时：4hr
2.取样阀的分解清洗频次：1次/次扩培（1-2次扩培/月）用时：2hr
3.温度表及套管的清洗频次：1次/次扩培用时：2hr 职责八职责表述：负责分析用标准溶液的配制与标定工作时间百分比：3% 工作任务1.严格按照国家标准配制所用标准溶液频次：1次/月用时：2 hr2.严格按照国家标准标定所配制标准溶液的准确浓度频次：1次/月用时：4hr3.认真填写原始记录并交科长签字确认频次：1次/月用时：
0.5hr4.修改标签并通知有关人员标准溶液浓度的变化频次：1次/月用时：0.1hr 职责九职责表述：负责车间所用各种洗罐液浓度的测定工作时间百分比：5% 工作任务1.对车间所用各种洗罐液进行抽样频次：5次/ 周用时：0.5hr2.对所取样品进行浓度的测定频次：5次/ 周用时：0.5hr3.计算结果填写化验单交科长审批签字频次：5次/ 周用时：0.1hr 职责职责表述：负责外送片碱及其他洗涤剂有效成分的测定工作时间百分比：3% 工作任务1.对外送片碱.漂白粉及其它洗涤剂进行抽样,确保样品具有代表性频次：1-2次/周用时：1hr2.对所取样品进行有效成
分的测定频次：1-2次/周用时：2hr3.及时填写记录及化验单并报科长审批签字频次：1-2次/周用时：0.5hr 职责一职责表述：负责本厂糖化自来水的分析检测工作时间百分比：2% 工作任务1.按照要求对糖化自来水进行取样,确保样品的代表性频次：1次/ 月用时：0.5hr2.对所取水样进行有关项目的全分析频次：1次/月用时：3hr3.认真填写记录和化验单并交科长审批签字频次：1次/月用时：1hr 职责二
职责表述：负责酵母扩培计划的制定工作时间百分比：1% 工作任务1.根据生产需要制定酵母扩培计划频次：12次/年用时：1hr2.交报技术科长审批频次：12次/年用时：0.5hr3.及时通知车间，协调糖化投料时间频次：12次/年用时：0.5hr 职责三
职责表述：负责酵母泥浓度的测定工作时间百分比：2% 工作任务1.及时从车间酵母罐取F酵母泥频次：1-3次/周用时：0.5hr2.对F酵母泥进行浓度测定频次：1-3次/周用时：0.5hr3.认真填写记录和化验单并交科长审批签字频次：1次/天用时：0.5hr 职责四
职责表述：负责特殊品种成品啤酒最终外观发酵度的测定工作时间百分比：1% 工作任务1.收取F酵母泥，用真空泵进行抽滤频次：1次/样品（1-2次/月）用时：2hr2.对成品酒添加酵母泥进行培养频次：1次/样品（1-2次/月）用时：6hr3.测定
发酵完的发酵液的外观浓度频次：1次/样品（1-2次/月）用时：1hr 职责五
职责表述：本岗位所有记录台帐.报表的整理与管理工作时间百分比：1% 工作任务1.认真.及时整理本岗位的记录台帐及报表频次：1次/ 天用时：0.5hr2.及时准确地统计每月的各项合格率频次：1次/月用时：1hr 职责六职责表述：负责所属卫生区及现场的清扫整理，做好5S工作工作时间百分比：2% 工作任务1.每天对所属工作环境和卫生区进行清扫整理频次：1次/天用时：0.5hr2.实验完毕对所有玻璃器皿刷洗，清理现场卫生并对仪器维护和保养频次：1次/天用时：1hr3.每周进行一次对缓冲间，无菌室的5S清理，以确保工作环境的无菌状态频次：1次/周用时：2hr4.每月进行一次卫生彻底大扫除，清除所有卫生死角，搞好纯生化管理频次：1次/月用时：4hr 职责七职责表述：完成上级交办的其他工作工作时间百分比：2% 权力：
1.根据酵母扩培实验室阶段情况要求微生物人员协助检验的权利，对异常情况有及时汇报
的权利。
2. 根据菌种活化情况要求微生物人员协助检验的权利，对异常情况有及时汇报
的权利。
3. 对新进酵母菌种有进行外观鉴定的权利，对异常情况有及时汇报
的权利。
4. 根据酵母扩培计划要求车间配合执行的权利，对扩培所用麦汁的冷却温度有监督的权利，对扩培所用设备异常时有要求车间及机修配合维修的权利，对异常情况有及时汇报
的权利。
5. 根据标准及工艺要求到车间取样的权利，有对仪器的维护使用权。
6. 对异常情况有及时汇报
的权利。
7. 对扩培所用设备异常时有要求车间及机修配合维修的权利，对异常情况有及时汇报
的权利。
8. 有对仪器.设备的维护使用权，对异常情况有及时汇报
的权利。
9. 根据标准及工艺要求到车间取样的权利，有对仪器.设备的维护使用权，对异常情况有及时汇报
的权利。
10.根据标准要求对外送片碱.漂白粉进行取样的权利，有对所检原料的判决权，有对仪器.设备的维护使用权，对异常情况有及时汇报
的权利。
11.根据标准及工艺要求到车间取样的权利，有对仪器.设备
的维护使用权，对异常情况有及时汇报
的权利。
12.根据酵母扩培计划要求车间配合执行的权利，有对酵母扩培计划中不合理的项目提出修改的权利。
13.根据标准及工艺要求到车间取样的权利，有对仪器.设备
的维护使用权，对异常情况有及时汇报
的权利。
14.有对仪器.设备的维护使用权，对异常情况有及时汇报
的权利。
15.对本岗位所有记录台帐.报表的有整理.管理.统计的权
利。
16.对所属卫生区的卫生有监督的权利，有对仪器.设备的维
护使用权，对工作现场有5S管理权。
17.有领导交办任务的相应权力。
考核指标：1.扩培及时.与生产需求相适应，实验室扩培阶段严格无菌操作2.保证酵母菌种的纯种及强壮3.保证酵母菌种的安全性4.严格按照扩培现场阶段的各项操作规程操作，保证扩培酵母无菌率100％.有活性5.取样要有代表性,酵母细胞数检测及时.准确6.确保酵母扩培间环境整洁.干净7.确保酵母扩培间设备的
清洁.卫生8.确保标准溶液配制与标定准确.及时9.确保对洗罐液浓度化验准确.及时10.确保对外送片碱.漂白粉有效成分测定准时.
及时，取样有代表性,严格执行检验标准,不合格拒收11.确保对糖化自来水分析检测准确.及时12.制定扩培计划要及时，必要时与生产相协调13.确保对酵母泥浓度测定准确.及时14.确保对成品
啤酒最终外观发酵度的测定准确.及时15.记录台帐要清晰整洁并妥善保管，统计数据要准确.及时16.玻璃器皿刷洗洁净，5S检查达标，仪器.设备完好率98％17.达到领导要求内部协调关系科长.车间主任.糖化.薄板冷却.发酵.增殖.CIP刷洗外部协调关系外用送货单位任职资格：教育水平高中以上文化程度专业接受过本专业技术培训并取得证书工作经验3年以上工作经验能
力要求操作能力个性特征认真.仔细.有责任心生理特征无特殊要求所需培训接受本岗位培训及相关专业知识培训（3个月）工作特点：工作场所酿造车间.技术科化验室工作方式站立
工作时间特征一般为白天工作时间，经常需加班工作环境潮湿.异味.噪音体力精力消耗工作压力较大.精力集中度较高劳动保护接触消毒剂.杀菌剂.紫外线照射可能造职业病使用工具/设备电脑.计算器.电话.显微镜.紫外线灯,各种化验所需玻璃器皿和相关仪器；
培养罐.CIP清洗设备.阀门.管钳.扳手.叉扳.手电.镊子所需记录文档酵母扩培原始记录.发酵液镜检原始记录.标准溶液的配制与标顶原始记录.酵母菌种保藏原始记录.扩培计划报表备注：职务说明书用于：确定工作考核指标，确定岗位薪酬，请认真填写。5
啤酒发酵酵母扩培学习资料
啤酒发酵酵母扩培学习资料 啤酒厂获得接种酵母的方式有三种方式，其优缺点见图2.1： 这三种方式是：购买酵母泥；购买纯种酵母；自己保存和培养纯种酵母。 图2.1 啤酒获得酵母的方式和其优缺点 第一节纯种酵母的培养 一、培养啤酒纯种酵母工艺原理 酵母是一种兼性微生物，这就是说，细胞的新陈代谢和繁殖即可以在有氧的状态下也可以在无氧的状态下进行。 啤酒酵母菌的的繁殖过程分为四个阶段（见图2.7）： 1．迟缓期：在此期间，虽有营养物质存在，但酵母基本不繁殖； 2．对数生长期：此期间酵母繁殖最为迅速； 3．稳定期：此时，代谢产物CO2和酒精的积累使酵母繁殖逐渐变慢，活菌数最高； 4．衰亡期：营养物质耗尽和有毒代谢产物大量积累，酵母菌死亡率增加，活菌数减少。 酵母培养中，最重要的阶段是对数生长期，此时的营养、氧气供给及其他条件如：酵母细胞浓度和温度都必须达到最佳。酵母由于不断地消耗氧气，必须连续通入足够的无菌空气。因为氧气缺乏时，其中一部分酵母会进行发酵，从而产生CO2和酒精，而不是产生新细胞，这样生成的有活力的细胞数就减少了。 二、啤酒纯种酵母的分离培养 啤酒酵母的分离培养就是利用特殊的分离技术，将优良强壮的单细胞酵母从原菌中分离出来，加以扩大培养，供生产使用。分离培养的方法很多，工厂常用的是平板分离法或划
线分离法。 获得原菌的方法： （1）从实验室保存的原菌种中分离，原菌种必须先经过几次培养活化的再行分离； （2）从生产中的酵母泥或主发酵液中分离。 1．平板分离培养法（又称稀释分离法，见图2.2） 这种方法简单易行，适合于工厂现场使用。 先将盛有麦汁的琼脂试管培养基放在热水中融化，冷却至42～45℃，再将准备分离培养的酵母原菌用白金针移植到已融化的培养基内。如分离培养发酵液的酵母，则先使之静置，倾出上部清液，留少量发酵液，混合均匀后接种。如分离培养酵母泥，需加少量无无菌水或麦汁，稀释后再接种。 将分离培养的酵母移植于融化的培养基内后，充分振荡，使混合均匀，用白金针从该试管挑少许移植到第2支试管中，随即将第1支试管中的培养基倾注在已灭菌的培养皿中，均匀分布在培养皿底面，使之凝固。用同样方法再从第2支试管移植到第3支，而后第4支试管内，分别将取样后的培养基倾注在培养皿内，如图所示。然后，将培养皿置25～27℃保温箱中培养2～3天，每天检查菌落生长情况，剔除形态上有改变的菌落，选择菌落形态正常、细胞大小均匀的菌落进行培养。必要时应进行2～3次重复分离。 图2.2 平板分离培养法 2．划线分离培养法 此法和平板分离法的根据是相似的，各有优点。划线法简单，速度较快；平板法在平板上分离的菌落单一均匀，获得纯种的机率略高。 用接种针挑取适当稀释的菌液，直接在已灭菌的平面皿培养基上划线（图2.3），在第3或第4划线区可能得到单一菌落。然后将所需要的菌落移植到斜面培养基上，以待进一步检查。这个方法一般用于分离纯化生产上已有的菌种。 图2.3 划线分离培养法 1,2,3,4-分别表示第1,2,3,4次划线区
【免费下载】酵母及酵母制品生产许可证审查细则
酵母及酵母制品生产许可证审查细则 一、发证产品范围及申证单元 酵母及酵母制品按生产工艺可分为食用酵母、酵母深加工产品、酵母调配食品等三类产品品种。食用酵母是以糖蜜、淀粉质等为主要培养基，采用优良的啤酒酵母菌，经发酵培养、分离、洗涤、处理、浓缩或灭活浓缩、干燥而得的食用酵母。酵母深加工产品是以完整新鲜食用酵母为原料，经自溶、酶解、提取等生物技术处理所得到的酵母深加工产品。酵母调配食品是以食用酵母或酵母深加工产品为主要原料，添加适量的食品辅料或食品添加剂，经相应工艺制成的酵母调配食品。 酵母及酵母制品申证单元为1个。在生产许可证上要注明申证单元名称和获证产品名称，即其他食品[酵母及酵母制品（食用酵母、酵母深加工产品、酵母调配食品）]。生产许可证有效期为3年，其产品类别编号为2801。 二、基本生产流程和关键控制环节 （一）基本生产流程食用酵母生产流程 原料处理→发酵培养→酵母菌分离、洗涤→处理、浓缩→干燥→包装→成品酵母深加工产品生产流程： 已洗涤的新鲜食用酵母→自溶、酶解→提取→浓缩或浓缩干、管路敷设技术通过管线敷设技术，不仅可以解决吊顶层配置不规范问题，而且可保障各类管路习题到位。在管路敷设过程中，要加强看护关于管路高中资料试卷连接管口处理高中资料试卷弯扁度固定盒位置保护层防腐跨接地线弯曲半径标高等，要求技术交底。管线敷设技术中包含线槽、管架等多项方式，为解决高中语文电气课件中管壁薄、接口不严等问题，合理利用管线敷设技术。线缆敷设原则：在分线盒处，当不同电压回路交叉时，应采用金属隔板进行隔开处理；同一线槽内，强电回路须同时切断习题电源，线缆敷设完毕，要进行检查和检测处理。、电气课件中调试对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料试卷相互作用与相互关系，根据生产工艺高中资料试卷要求，对电气设备进行空载与带负荷下高中资料试卷调控试验；对设备进行调整使其在正常工况下与过度工作下都可以正常工作；对于继电保护进行整核对定值，审核与校对图纸，编写复杂设备与装置高中资料试卷调试方案，编写重要设备高中资料试卷试验方案以及系统启动方案；对整套启动过程中高中资料试卷电气设备进行调试工作并且进行过关运行高中资料试卷技术指导。对于调试过程中高中资料试卷技术问题，作为调试人员，需要在事前掌握图纸资料、设备制造厂家出具高中资料试卷试验报告与相关技术资料，并且了解现场设备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。 、电气设备调试高中资料试卷技术电力保护装置调试技术，电力保护高中资料试卷配置技术是指机组在进行继电保护高中资料试卷总体配置时，需要在最大限度内来确保机组高中资料试卷安全，并且尽可能地缩小故障高中资料试卷破坏范围，或者对某些异常高中资料试卷工况进行自动处理，尤其要避免错误高中资料试卷保护装置动作，并且拒绝动作，来避免不必要高中资料试卷突然停机。因此，电力高中资料试卷保护装置调试技术，要求电力保护装置做到准确灵活。对于差动保护装置高中资料试卷调试技术是指发电机一变压器组在发生内部故障时，需要进行外部电源高中资料试卷切除从而采用高中资料试卷主要保护装置。
酵母扩培工作流程
酵母扩培工作流程 1，菌种选购 首先购买具备国家权威机构认可（或注册）的单位提供的菌种，并与提供菌种的科研单位沟通，让其将此菌种制成二十支冻干管（便于常温下长期保存不会变异），以后每年拿出一支冻干管进行转移、保藏（使用至当年年底）、扩培。这种方式培养菌种可以确保生产上使用的酵母不会变异、退变。 2，菌种移植 将菌种移植在斜面培养基上（4-7支斜面管），25°培养2-3天，挑选出边缘整齐、呈乳白色无污染长势良好的菌株两只管，放入4°冰箱内保存（注明移种日期、操作人、菌株特性等信息，同时做好笔记）。另选出一支长势良好的菌株移至斜面培养基上（活化）培养2-3天，此次最好移植3-5支斜面培养基。最后从此斜面上挑选出1支长势最好的菌种（待用），用于下一步扩培。 3，实验室扩培 取上述一支活化过的待用菌种，挑一菌耳接种至含有10ml液体培养基试管内，最好接种3-5管以防失败），25°培养1—2天，培养期间每隔半小时用手震荡一次充氧（或放在恒温振荡器内培养）。选出发酵旺盛的液体试管（掌握好移种时间非常重要），分别全量移至装有100ml麦汁的300ml三角烧瓶内（4个300ml的三角烧瓶），22°培养1-2天，培养期间每隔半小时摇动一次（或放在恒温振荡器内培养）。然后全量分别移至装有1500ml麦汁的3000ml烧瓶内（三个3000烧瓶），19°培养1-2天，培养期间每隔半小时摇动一次（或在恒温振荡器内培养）。将已培养好的（掌握移种时间非常重要）3000ml烧瓶内的麦汁分别全量移入15L麦汁的卡氏罐内（卡氏罐内的麦汁事先杀好菌，冷却至接种温度后再接种），16°培养1-2天，培养期间应定期充氧（每隔3小时用无菌压缩空气充氧5分钟）。 4，生产车间扩培 卡氏罐内培养1-2天（酵母数达到：5-8x107个/ml，将卡氏罐内的麦汁最大按1:10的比列全量移至培养罐（培养罐内的麦汁要二次杀菌冷却后才能接种），14°C下培养1-2天（酵母数达到：5-8x107个/ml）后，按1:5的比列转接至下一扩大罐（可直接取沉淀槽冷却的麦汁），培养期间每隔2小时充氧10分钟，转接之前镜检酵母数、死亡率、杂菌。酵母数达到：5-8x107个/ml；死亡率小于2％；镜检下未见杂菌时可用于大罐接种。
6.1酵母工艺流程
酵母生产工艺流程示意图 冷藏) 鲜酵母成品 干酵母成品
1.原辅材料验收：按《采购控制程序》选择合格的原、辅材料厂家，入厂时按公司制定的相应原材料标准进行验收，因为原材料加入之前要用高温灭菌、热水配制，有灭菌过程，所以卫生方面主要控制重金属含量； 2.包装材料：内包装材料按公司制定的标准验收，并按《包装材料的管理》检验其杂菌数。 3.空气：酵母发酵是有氧发酵，需要大量空气进入发酵液，空气首先经过甲醛消毒，然后经过粗效、精效过滤器过滤除杂菌。 4.辅助材料的配制：辅助原材料用90 ℃以上热水溶配，并在贮罐60 ℃以上保温，然后泵入发酵、干燥使用，流加原料，每周检测各配制原料的杂菌数。 5.糖蜜处理：糖蜜先经过≥80 ℃加热(时间≥2小时）分离除渣，然后经125-135 ℃高温瞬时灭菌（时间：9秒），泵入发酵罐。输送管线糖蜜循环，以保证管线温度高，而不残存杂菌。每周检测各配制原料的杂菌数。 6.菌种选育：菌种按《菌种选育操作规程》选育菌种，菌种选育最重要的要求保证操作过程中不能染菌，菌种无杂菌，然后经过三角瓶、卡氏瓶扩大培育，接入纯培养罐。 7.纯培养罐培养：将糖蜜加入PC罐里，经过121℃ 30分钟灭菌后，降温至30℃，接入卡氏瓶菌种，经过通风纯培养，发酵液达到乙醇和湿重指标后，转入种子培养罐培养。
8.种子罐发酵：发酵罐加入工艺水、转入纯培养菌种、流加入N、P营培盐，通风扩大培养，按发酵工艺规程规定的时间和指标发酵。 9.酵母分离：种子发酵液培养结束后，通过分离机把酵母和水等分开，成干物质20%左右的酵母乳，进入酵母乳贮罐。 10.商品培养：在商品发酵加入工艺底水，接入种子酵母乳、流加N、P、硫酸镁、硫酸锌等营养盐，通风发酵。 11.商品酵母分离：按9方法将商品酵母液分离成酵母乳，进入酵母乳贮罐。 12 酵母乳贮存:分离后酵母乳进入贮罐,然后泵入真空转鼓过滤. 13.过滤：商品酵母乳加入盐水,泵入真空转鼓过滤器,通过真空转鼓抽滤，把酵母乳抽滤成含水量为36%左右的酵母泥。流加乳化剂与酵母泥混合后造粒. 14.造粒：通过造粒机把酵母泥挤压成很细酵母面条以增大表面积，便于热交换。造粒后酵母进入干燥床. 15.干燥：酵母粒通过在沸腾干燥床中和干燥的热空气进行交换，迅速脱水干燥成干酵母。 16.震荡筛：干燥后酵母,通过20目震荡筛除去干燥过程中结团的酵母。过筛后的酵母送入干酵母贮罐. 17.干酵母均质:将干酵母贮罐里的酵母分批放入均质器里,开搅拌器均质,送入包装机.
酵母扩培工艺
酵母扩大培养工艺 1、目的 规范酵母扩培作业程序，有效控制扩培工艺参数，保证培养酵母质量均一、稳定。 2.适用范围 适用于实验室、酿造车间现场扩培和锥罐扩培工序。 3.职责 由公司技术处负责编制、修改，实验室和酿造车间负责实施。 4.规定内容 4.1实验室培养 4.1.1培养基制备流程 4.1.1.1取12度生产定型(热或冷)麦汁,调整pH至 5.3-5.5,进行稀释，稀释比例 以最终煮沸浓度控制在12度为准。 4.1.1.2稀释后麦汁冷却(或加热)至40℃按每升2个蛋清搅至起泡后打入。升温 至60℃保温30分钟，保温结束后升温至100℃煮沸30分钟。 4.1.1.3检测调整浓度后过滤、分装入试管、小三角瓶、大三角瓶， 0.07Mpa灭 菌30分 钟。 4.1.1.4灭菌后培养基要贴有制备日期标签，空培(室温放置)3天以上确认无菌后 方可使用。 4.1.1.5卡氏罐培养基制备采用过滤后热麦汁装入清洗并经0．10Mpa蒸汽杀菌 1 小时后的卡氏罐中0．10Mpa灭菌30分钟，提前1-2天完成，确保接 种温度稳定。当天能够迅速冷却的，则取当天麦汁处理，冷却后接种。 4.1.2无菌室卫生操作流程
4.1.2.1每天对室内进行30分钟紫外杀菌。超净台用前提前打开风机及自带的紫 外灯灭菌30分钟。 4.1.2.2无菌操作前对无菌室进行全面彻底清洁。地面、墙壁、天棚及空间采用甲 醛熏蒸或75%酒精擦试。同时用紫外杀菌30分钟。 4.1.2.3卡氏罐接种，超净台无法操作时，室内空间当天再次进行上述空间杀菌。 4.1.2.4无菌室内应避免其他物品的摆放，尤其操净台面。以免破坏空气层流。 4.1.2.5每次扩培时应对无菌室内空间及超净台进行两次空气捕捉检测。斜面接 出及卡氏罐接种时各进行一次。 4.1.3实验室阶段扩培工艺流程 1.安培管(或斜面菌种)在无菌条件下,接入装10ml麦汁培养液的18×180mm 试管中，在25℃培养箱中活化培养24小时(如从安培管转接,需再活化一次). 2.将活化后的试管培养液摇均,在无菌条件下,分别接1ml入装10ml麦汁培养液的 18×180mm试管中，在25℃培养箱中培养活化24小时. 3.将试管中的10ml酵母培养液转接到装50ml麦汁培养液的150ml三角瓶中, 在22℃培养箱中培养24小时. 4.将三角瓶中的50ml酵母培养液转接到装500ml麦汁培养液的1000ml三角 瓶中, 在19℃培养箱中培养24小时. 5.将三角瓶中的500ml酵母培养液转接到装3000ml麦汁培养液的5000ml三 角瓶中, 在19℃培养箱中培养24小时. 6.将三角瓶中的3000ml酵母培养液转接到装25L麦汁培养液的卡氏罐, 在 13℃培养箱中培养24小时～48小时. 7.将卡氏罐中的酵母培养液转接到装300L麦汁培养液的汉生罐(种子罐), 在13℃条件下培养24小时～48小时.
酵母扩大培养过程关键控制点
酵母扩大培养过程关键控制点 金星集团信阳啤酒有限公司黄华龙465100 啤酒工厂从单细胞分离得到一个酵母细胞，经过鉴定确认、生产试验，得到优良菌株，然后经过若干次扩大培养，最后制备成107～108个细胞/ml后供发酵用，酵母扩大培养关键在于：第一，选择优良的单一细胞出芽菌株；第二，在整个扩大培养中保证酵母菌种的强壮、无污染。近代由于发酵规模越来越大，对接种酵母要求越来越严。各工厂扩大培养方式和顺序大致相同，而扩陪的结果得到种酵母的纯度、强壮情况、污染情况却差异很大，其原因在于是否有一个科学、无菌的扩培技术管理。 一、出芽菌株的选择 作为扩大培养的出芽菌株，，无论是实验室保藏菌株还是生产现场（主酵或酵母泥）分离得到的菌株。一般均需进行单细胞分离，并通过一系列生理特性和生产性能测定，包括酿酒口味鉴评后，确认是工厂生产需要的优良纯种后才允许投入生产扩大培养。此单细胞分离和菌株鉴定，需要在有丰富微生物理论和实践经验的技术人员指导下进行。 二、扩陪过程的无菌操作 扩大培养应严格建立在纯种的基础上，扩大培养过程的无菌技术是扩陪成败的关键。它包括：培养器皿、设备的无菌，移种操作的无菌，培养过程中通风调节温度的无菌。在汉生罐以后从麦汁进罐至移种结束，必须保证汉生罐处于正压状态，这是杜绝吸入有菌空气的先
决条件。 三、优良的培养基 麦汁是啤酒厂最方便的酵母培养基，但绝对不是“凡可以用来酿造啤酒的麦汁均是优良的培养基”。许多工厂，常常从大生产麦汁中分割作为任何一级扩陪培养基，由于麦汁组成太差，会造成扩大培养失败。无论是哪级扩陪，培养基均需要有特殊要求的麦芽汁。 实验室（从试管至大锥形瓶）培养用麦汁，一般应有实验室自己制备，可按以下方式制备成10°P全麦芽麦汁用于试管活化及菌种保藏。 1.麦汁制备: 1)称取优级麦芽约200g，除去铁屑、石粒等坚硬杂质，采用EBC 粉碎。 2)调EBC粉碎机的磨间距，使细粉颗粒直径为0.2㎜。 3)料水比例：1：3～3.5 4)称取细粉适量（准确至0.1g），于已知重量的糖化杯（500～ 600ml专用金属杯中），加入46℃水200ml,在不断搅拌下于 45℃水浴中保温30min。 5)把温度数显表调至70℃，设定。使醪液以1℃/min的速度升 温，在25min内升至70℃，此时于杯内加入70℃水100ml（加 水时注意冲洗杯壁和搅拌棒）。 6)醪液在70℃下保温1hr，在保温10min时开始碘检，用玻璃 棒取一滴麦汁，置于白瓷滴板上，冷却后加一滴碘溶液，混
酵母管理系统知识
1.目的 使用糖化醪，在密闭罐内接入酵母菌种，通入微量的无菌空气，保压培养，获得发酵力强的纯酒母醪，供酒精发酵。 2.扩培工艺流程 3.工艺数据 复活温度：35℃—38℃。 培养温度：28℃—30℃。 分割时，留种量：15%左右。 酒母培养时间：8小时。 通风量：观察罐内液体翻动即可，每两小时开一次，每次15分钟左右。 4.要点 配料：酒母糖液罐全容积为18m3，实装容积为80%，计算15.0m3。 配方：糖化醪15m3，尿素0.15%（12kg），青霉素50g。 5.看罐 值班人员每小时检查一次酒母罐温度，做好原始记录，发现异常及时调整，至培养成熟为止。 6.生产工艺
6.1 破碎工艺 破碎颗粒直径：1.5mm—1.8mm； 拌料温度：70℃—75℃； 拌料加水比：1：2.5—2.8； 添加耐高温α-淀粉酶：用量0.8ц/g—1.2ц/g淀粉。 6.2 蒸煮糖化 蒸煮温度为81℃—83℃，蒸煮时间为90min，用酶量为90单位/g—120单位/g，控制糖化时间在60℃±2。 6.3 发酵 糖化醪入二分之一，加入青霉素1ц/mL，入罐温度32℃—34℃，主发酵期34℃—36℃，发酵周期60小时。 7.结论 7.1 扩培后使用，干酵母的用量较少，并减少了传统酵母多级培养中小酒母前的操作环节，便于控制酒母质量。 7.2 扩培中，糖液是直接由糖化锅泵入，省去了传统酵母培养中对醪液的杀菌过程，从而节约了水、电、汽。 7.3 发酵成绩提高，发酵醪酒精浓度提高1%，吨酒精节省蒸汽消耗约300kg，降低生产成本约50元。同时，吨酒精节省工艺用水1.2t—1.5t，减少酒糟排放量1.5t—2t。 汉生罐留种扩大培养酵母的控制点击数：199 发布时间：2009年11月1日来源：中国发酵在线进入论坛交流
酵母的保存和管理
“酵母是啤酒酿造的灵魂！”啤酒生产不仅要有优质的原料、先进的生产工艺，更要有优良的酵母菌种。如何做好菌种的保存，以及酵母的正确使用、回收、排放等管理工作，对促进企业产品质量有着极其重要的作用。 一、菌种保存 1.建立菌种管理档案 建立原始酵母菌种的档案，例如菌种的编号、使用状态、转接时间、菌种来源等，定期进行原菌的活化、转接、筛选等工作，做好菌种跟踪检测。检测项目包括满罐酵母数、死亡率、发芽率、降糖速度、还原降双乙酰情况、酵母凝聚性、酵母回收质量等。 2.原始菌种的保存方法 2.1 固体斜面保存法 将保存的酵母接种到麦汁琼脂培养基斜面上，25℃保温培养2至3天，待酵母繁殖成菌落，经检查无污染后，即放入4℃的冰箱中保存。每年移接3至4次。 2.2 液体石蜡斜面保存法 酵母菌种接在培养基的斜面试管中，加入已灭菌的不含水分的液体石蜡，防止培养基水分蒸发，并隔绝与空气的接触，然后置于2℃—4℃下保存。 2.3 液体试管保存 将要保存的酵母接种到10%的灭菌蔗糖溶液中，25℃培养24小时后，置于2℃—4℃下保存。 二、酵母扩培 1.编制扩培计划 1.1 每次扩培前，编写详细的扩培计划，安排、协调好车间糖化生产，提供组分合理的扩培麦汁，有利于菌种的扩培质量。 1.2 建立扩培各阶段的质量控制点，及时依据实测数据掌握酵母转接的时机。 2.啤酒酵母的实验室扩培 斜面试管（原菌）→20毫升试管→500至1000毫升三角瓶→卡氏罐。 步骤：取适量麦汁于试管内灭菌，将斜面原菌接种到试管内，在25℃—27℃保温下，培养
2至3天，每天定期摇动，使沉淀的酵母细胞重新分布到培养基中。 无菌条件下，将试管中的酵母液接种到500mL—1000mL的灭菌麦汁中，25℃培养2至3天，每天检查培养情况。 无菌条件下，将三角瓶中的酵母液接种到10L—20L的灭菌麦汁中，混合均匀于15℃—20℃保温培养3至5天，即可接入生产现场扩培。 3.啤酒酵母的扩培 三、酵母生产现场保存 1.保存要求 在酵母菌种的保存中，由于贮存时间长，酵母会因长期处于饥饿状态，造成酵母细胞营养不良。为恢复酵母细胞活力，麦汁生产使用的辅料比例不能超过30%，麦汁浓度不低于10°P，有利于提高酵母活性。 2.保存方法 2.1 种子罐酵母菌种的保存 种子罐保存菌种要注意事项： （1）种子罐保种前，酵母扩培室内墙、地面要清洗、杀菌，设备罐体、管 道要严格彻底地清洗灭菌。 （2）种子罐菌种起发后，当糖度降至7.5°P（以10°P麦汁为例），酵母数在40×106 个/mL左右时，即可降温至3℃保压在0.01Mpa—0.02Mpa下保存菌种。 2.2 锥形罐保存种酵母 2.2.1 保种酵母的温度控制 发酵罐种酵母在贮存期间，发酵罐上、中、下温度要控制在0℃—-1℃，控温要平稳，不能忽高忽低，更要谨防因供冷过低造成罐内壁结冰，这样会使锥底保存酵母细胞的生理受损、性能退化。 2.2.2 锥形罐保存种酵母的选择标准 （1）选主酵期间发酵正常，双乙酰还原速度快的罐。
酵母及酵母制品生产许可证审查细则
酵母及酵母制品生产许可证审查细则 一、发证产品范围及申证单元 酵母及酵母制品按生产工艺可分为食用酵母、酵母深加工产品、酵母调配食品等三类产品品种。食用酵母是以糖蜜、淀粉质等为主要培养基，采用优良的啤酒酵母菌，经发酵培养、分离、洗涤、处理、浓缩或灭活浓缩、干燥而得的食用酵母。酵母深加工产品是以完整新鲜食用酵母为原料，经自溶、酶解、提取等生物技术处理所得到的酵母深加工产品。酵母调配食品是以食用酵母或酵母深加工产品为主要原料，添加适量的食品辅料或食品添加剂，经相应工艺制成的酵母调配食品。 酵母及酵母制品申证单元为1个。在生产许可证上要注明申证单元名称和获证产品名称，即其他食品[酵母及酵母制品（食用酵母、酵母深加工产品、酵母调配食品）]。生产许可证有效期为3年，其产品类别编号为2801。 二、基本生产流程和关键控制环节 （一）基本生产流程 食用酵母生产流程 原料处理→发酵培养→酵母菌分离、洗涤→处理、浓缩→干燥→包装→成品 酵母深加工产品生产流程： 已洗涤的新鲜食用酵母→自溶、酶解→提取→浓缩或浓缩干燥
→包装→成品 酵母调配食品生产流程： 原料验收→配料→混合→处理、成型→包装→成品（二）关键控制环节 食用酵母： （1）发酵用原辅材料控制；（2）食品添加剂的控制；（3）酵母菌种的控制；（4）工艺要求的控制（防止发酵过程染菌）； 酵母深加工产品： （1）食用鲜酵母的控制；（2）食品添加剂的控制；（3）自溶、酶解过程的控制；（4）提取过程控制。 酵母调配食品： （1）原辅材料控制；（2）食品添加剂的控制。 （三）容易出现的质量安全问题 食用酵母： （1）菌种的安全性；（2）发酵过程出现染菌；（3）食品添加剂超范围和超量使用。 酵母深加工产品： （1）菌种的安全性；（2）食用酵母的控制；（3）食品添加剂超范围和超量使用；（3）微生物超标。 酵母调配食品： （1）菌种的安全性；（2）微生物超标；（3）食品添加剂超范围和超量使用。
酵母培养操作规程
酵母培养操作规程 本文主要介绍酵母的选育、保种、培养的操作工艺等。 目录 第一章酵母扩培 (2) §1-1 实验室扩培 (2) 1培养基制备 (2) 2接种操作 (3) §1-2 生产现场扩培 (5) 1准备工作 (5) 2汉生罐接种操作 (5) 3扩大罐扩培 (5) 4二次（车间）扩大罐扩培 (6) 第二章菌种保藏 (7) 1实验室菌种保藏与活化 (7) 2汉生罐菌种保藏与活化 (7) 第三章酵母检测 (8) §3-1 取样 (8) 1扩培液、发酵液及待滤酒等的取样 (8) 2酵母泥的取样 (8) §3-2 检测 (10) 1酵母细胞形态检测 (10) 2酵母细胞大小测定 (10) 3酵母泥外观检测 (11) 4酵母细胞数和出芽率的测定（血球计数板法） (11) 5酵母死亡率的测定（血球计数板法） (12) 6酵母肝糖染色法 (13) 7酵母凝聚性的测定 (14) 8酵母死灭温度的测定 (15) 9酵母发酵失重实验 (16) 10酵母的呼吸缺陷型检测 (16) 第一章酵母扩培 §1-1 实验室扩培 1培养基制备 【试剂】：冷麦汁、蒸馏水、新鲜鸡蛋。 【器具】：试管（15×150）及（18×180）、小巴氏瓶（三角瓶）、大巴氏瓶（大三角瓶）、卡氏罐、中 速滤纸、电炉、量筒、不锈钢锅、糖度计等。 【仪器】：杀菌锅、天平（精度0.1g）。
【方法】 〖试管、三角瓶及巴氏瓶培养基的制备〗 ①取样：取糖化冷却麦汁，视麦汁浊度情况判定是否进行过滤。 2℃，按每0.5~1L使用一个鸡蛋的比例，加入打成泡沫的蛋清，在不断地搅拌下保温30min；然后升温煮沸30min；将煮沸后的麦汁用水浴冷至80~90℃，用双层中速滤纸过滤。±②澄清：将麦汁加热至45 0.2°P。±③调糖：将过滤后的麦汁用蒸馏水调整糖度为11 ④分装：试管（15×150）5mL，试管（18×180）10mL，分装小巴氏瓶（三角瓶）、大巴氏瓶（大三 角瓶）。 ⑤灭菌：分装后包扎好，115℃杀菌20min；杀菌后培养基放置2~3天，确定无菌后备用。 〖卡氏罐培养基的制备〗 取糖化冷却麦汁（有条件的可取薄板前热麦汁）加入卡氏罐，然后封闭卡氏罐取样口，各呼吸阀等接口处均应以棉塞或呼吸阀进行封闭后包扎结实，115℃杀菌30~40min，于室温冷却至17~18℃；接种前以3L/min的速率充纯氧2~3min（卡氏罐有效容积20L）。 2接种操作 【器具】：酒精灯、酒精棉、剪刀、接种针、镊子、定量移液器或吸管等。 【仪器】：超净工作台等。 【方法】 无菌室使用前，使用紫外线灯照射20~30分钟进行杀菌；进入无菌室换无菌工作服；所有操作采用无菌操 作。 〖活化〗 ①操作前将冷冻管菌种置于室温下，使之内部培养基达到室温后，振荡均匀；无菌操作，将冷冻管内 的培养液全部转入盛有5mL培养基的试管中，于25±1℃培养72±2小时。 ②将试管中的培养液轻轻振荡均匀，用接种环接取三环加入另一支盛有5mL培养基的试管中，于 25±1℃培养24~36小时。 ③将培养结束的试管培养液轻轻振荡均匀，用无菌吸管接0.1mL加入盛有10mL培养基的试管，振荡 均匀后于25±1℃培养24~36小时。 〖扩大〗 ①将培养结束的试管培养液轻轻振荡均匀后，全部接入小巴氏瓶（三角瓶），每个小巴氏瓶（三角瓶） 接入一支试管的培养液；然后于23±1℃培养24~36小时。 ②将培养结束的小巴氏瓶（三角瓶）轻轻振荡均匀后，全部接入大巴氏瓶（大三角瓶），每个大巴氏 瓶（大三角瓶）接入一只小巴氏瓶（三角瓶）的培养液；然后于21±1℃培养24~36小时。 ③将培养结束的大巴氏瓶（大三角瓶）轻轻振荡均匀后，全部接入卡氏罐，每个卡氏罐接入两只大巴 氏瓶（大三角瓶）的培养液；然后于18±1℃培养24~36小时。 〖注〗：除卡氏罐外，其它液体培养基在接种后每12小时应振摇一次，以去除二氧化碳，保证酵母耗氧需 求。 【实验室扩培工艺】 容器扩大倍数培养温度℃培养时间hr
活性干酵母的生产
面包酵母液体深层通风发酵实验 一、实验目的 要求学生掌握通风发酵的基本原理及过程，掌握上罐操作技术，掌握流加补料控制技术。 （1）发酵罐及管路、空气过滤器灭菌操作及发酵罐系统管路的熟悉 （2）实罐灭菌—培养基灭菌实验 （3）观察并记录酵母菌扩培过程及上罐发酵过程菌种生长变化情况 二、实验原理 面包酵母（分子式：C3.72H6.11O1.45N0.61+P0.035+K0.051+5.6g其它物质）培养是最典型的细胞物质生产过程。利用葡萄糖为碳源，通风培养面包酵母的微生物反应过程可用下列化学平衡式表示： 6.67CH2O+2.10O2→C3.92H6.5O1.94+2.75CO2+3.42H2O (碳水化合物) (酵母菌体) 200 67.2 84.6 121 61.6 如果在酵母菌体内再计入除碳、氢、氧以外的其它无素如氮、磷以及灰分，则每200g 碳水化合物约可得到100g干酵母。即得率约为50%。 在通风供氧充足的前提下，分批补料（流加）培养。本实验面包酵母培养的目的是获得最大酵母浓度。因此采用流加培养较为理想。其原理是所谓的反巴斯德效应（CRABTREE效应）：在酵母培养过程中，糖浓度过高时，即使溶解氧很充足，但由于糖生成乙醇，从而使菌体得率下降的现象。 （1）、分批培养： 分批培养是微生物在特定条件下只完成一个生长周期（growth cycle）的方法，即接种少量微生物在一密闭系统中生长繁殖，直到某些营养物耗尽或某些产物积聚到毒害浓度为止。生长中微生物群体所经历的几个生长阶段分别为迟滞期（lag phase），对数生长期(exponential phase)，稳定期(stationary phase)，死亡期（deathphase）。 胞 数 对 数
酵母扩培岗位说明书
岗位说明书 岗位名称酵母扩培管理员岗位编号 所在部门生产技术科岗位定员2人直接上级化验室主任岗位工资 直接下级无分析人 所辖人员无分析日期 本职：负责酵母扩大培养及化验室的部分分析工作 职责与工作任务： 职责一职责表述:负责酵母扩大培养实验室阶段的全部工作工作时间百分比：15% 工作 任务 1、按照要求对无菌室进行严格杀菌(酒精擦抹、甲醛熏 蒸、紫外线照射) 频次：5次/次扩培 （1-2次扩培/月） 用时：2hr 2、对杀菌后的无菌室进行微生物检验,若不合格要进行 复杀,直至达到要求为止、 频次：5次/次扩培 用时：1.5hr 3、对无菌室的工作服及所用器械进行杀菌与消毒频次：5次/次扩培用时：1hr 4、洗刷所用玻璃器皿,做好棉塞高温杀菌备用频次：1次/次扩培用时：4hr 5、按照扩培要求取麦汁，做各阶段所需液体培养基, 蒸汽杀菌后冷却备用 频次：1次/次扩培 用时：10hr 6、严格按照无菌操作对原固体菌种进行各阶段无菌移 接 频次：6次/次扩培 用时：2hr 7、对每一阶段的移接按时振摇称重,认真观察其发酵情 况 频次：16次/次扩培用时：1hr 8、对每一阶段的酵母发酵情况进行镜检. 频次：8次/次扩培用时：1hr 9、对每一阶段的发酵液进行微生物检验频次：8次/次扩培用时：1hr 10、认真填写原始记录,如有异常及时汇报科长 频次：10次/次扩 培 用时：0.5hr 职责二职责表述：负责各类酵母菌种的活化和复壮,确保菌种的纯种和 活性工作时间百分比：5% 工作 任务 1、按照要求对无菌室进行严格杀菌(酒精擦抹、甲醛熏 蒸、紫外线照射) 频次：6次/年用时：4hr 2、对杀菌后的无菌室进行微生物检验,若不合格要进行 复杀,直至达到要求为止 频次：1次/次活化用时：1.5hr 3、对无菌室所用工作服清洗洁净后进行紫外线杀菌频次：1次/次活化用时：1hr 4、洗刷所用试管，并对其高温杀菌备用频次：1次/次活化用时4hr 5、按照扩培要求取麦汁做固体培养基频次：1次/次活化用时：10hr 6、蒸汽杀菌后摆好斜面备用频次：1次/次活化用时：1hr 7、严格按照无菌操作对各种菌种进行无菌移接频次1次/次活化用时：4hr 8、待到菌落发育良好时取出置冰箱中保存频次：1次/次活化用时：0.5hr 9、对各类菌种进行简单的性能对照确保酵母的良好性 能 频次：8次/次活化用时：0.5hr
酵母双杂交实验流程(精)
模块七蛋白质之间的相互作用 1. 实验目的 本实验以重组质粒和酵母细胞为材料, 学习检测蛋白质相互作用的基本原理和技术方法。主要介绍酵母双杂交的基本原理与操作技术; 让学生了解和掌握酵母 双杂交系统的应用; 掌握酵母感受态的制备的基本原理和主要的操作步骤。 2. 实验原理 1989年 Fields 和 Song 等人根据当时人们对真核生物转录起始过程调控的认识(即细胞内基因转录的起始需要转录激活因子的参与 ,提出并建立了酵母双杂交系统。该系统作为发现和研究活细胞体内的蛋白质与蛋白质之间的相互作用的技术平台,近几年得到了广泛的运用和发展。 相比于其它蛋白质筛选系统,酵母双杂交系统具有以下优点:(1检测在真核活细胞内进行,在一定程度上代表细胞内的真实情况。 (2作用信号是在融合基因表达后,在细胞内重建转录因子的作用而给出的,省去了纯化蛋白质的繁琐步骤。 (3检测结果是基因表达产物的积累效应,因而可检测存在于蛋白质之间的微弱或暂时的相互作用。 (4酵母双杂交系统可采用不同组织、器官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA 文库,能分析细胞质、细胞核及膜结合蛋白等多种不同亚细胞部位及功能蛋白。 (5 通过 mRNA 产生多种稳定的酶使信号放大。同时,酵母表型、 X-Gal 及 HIS3 蛋白表达等检测方法均很敏感。 酵母双杂交系统也具有一定的局限性。首先, 经典的双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内, 因而限制了该系统对某些细胞外蛋白和细胞膜受体蛋白的研究。酵母双杂交系统的另一个局限性是“假阳性” 。在酵母双杂交系统建立的初期阶段,由于仅仅采用β-半乳糖苷酶这一单一的报告基因体系,这种报告基因的表达往往不能十分严谨地被控制,因此容易产生假阳性。由于某些蛋白本身具有激活转录的功能或在酵母中表达时发挥转录激活作用, 使 DNA 结合结构域融合蛋白在无特异激活结构域的情况下也可被激活转录。另外某些蛋白表面含有对多种蛋白
酵母扩培岗位说明书
酵母扩培岗位说明书 北大纵横管理咨询公司烟台啤酒项目组岗位说明书岗位名 称酵母扩培管理员岗位编号所在部门生产技术科岗位定员2人直接上级化验室主任岗位工资直接下级无分析人所辖人员无分析日期本职：负责酵母扩大培养及化验室的部分分析 工作职责与工作任务：职责一职责表述: 负责酵母扩大培养实验室阶段的全部工作工作时间百分比：15% 工作任务1.按照要求对无菌室进行严格杀菌(酒精擦抹.甲醛熏蒸.紫外线照射)频次：5次/次扩培（1-2次扩培/月）用时：2hr2.对杀菌后的无 菌室进行微生物检验,若不合格要进行复杀,直至达到要求为止. 频次：5次/次扩培用时： 1.5hr3.对无菌室的工作服及所用器械进行杀菌与消毒频 次：5次/次扩培用时：1hr4.洗刷所用玻璃器皿,做好棉塞高温杀菌备用频次：1次/次扩培用时：4hr5.按照扩培要求取麦汁，做各阶段所需液体培养基,蒸汽杀菌后冷却备用频次：1次/次扩培用时：10hr6.严格按照无菌操作对原固体菌种进行各阶段无菌移 接频次：6次/ 次扩培用时：2hr7.对每一阶段的移接按时振摇称重,认真观察其发酵情况频次：16次/次扩培用时：1hr8.对每一阶段的酵母发酵情况进行镜检. 频次：8次/次扩培用时：1hr9.对每一阶段的发酵液进行微生物检验频次：8次/次扩培用时： 1hr10.认真填写原始记录,如有异常及时汇报
科长频次：10次/ 次扩培用时：0.5hr 职责二 职责表述：负责各类酵母菌种的活化和复壮,确保菌种的纯种和活性工作时间百分比：5% 工作任务1.按照要求对无菌室进行严格杀菌(酒精擦抹.甲醛熏蒸.紫外线照射)频次：6次/ 年用时：4hr2.对杀菌后的无菌室进行微生物检验,若不合格要进行复杀,直至达到要求为止频次：1次/ 次活化用时： 1.5hr3.对无菌室所用工作服清洗洁净后进行紫外线杀菌频次：1次/次活化用时：1hr4.洗刷所用试管，并对其高温杀菌备用频次：1次/ 次活化用时4hr5.按照扩培要求取麦汁做固体培养基频次：1次/ 次活化用时：10hr6.蒸汽杀菌后摆好斜面备用频次：1次/ 次活化用时：1hr7.严格按照无菌操作对各种菌种进行无菌移接频次1次/ 次活化用时：4hr8.待到菌落发育良好时取出置冰箱中保存频次：1次/次活化用时：0.5hr9.对各类菌种进行简单的性能对照确保酵母的良好性能频次：8次/ 次活化用时：0.5hr10.认真填写原始记录并让技术科长签字频次：1次/次活化用时：0.5hr 职责三 职责表述：负责各类酵母菌种的接收和保管工作时间百分比：2% 工作任务1.对新进酵母菌种进行外观鉴定频次：4次/年用时：1hr2.确认试管无破损及无其它异常现象方可接收频次：4次/年用时：1hr3.认真仔细地填写菌种保藏原始记录频次：4次/年用时：1hr4.报送技术科长签字确认频次：4次/年用时：1hr 职责四