武平县部分鸡场禽白血病J亚群和A、B亚群抗体检测与分析
禽白血病J亚群病毒GP85蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
禽白血病J亚群病毒GP85蛋白单克隆抗体的制备与鉴定王彬;李晓齐;曹红;陈福勇;王永强;郑世军【摘要】为制备能够区分禽白血病A亚群和J亚群病毒的单克隆抗体,将J亚群病毒gp85基因构建到原核表达载体上,并在大肠杆菌BL21中表达携带His标签的禽白血病J亚群GP85融合蛋白,用复性纯化的融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c 小鼠.4次免疫后取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,经过3次亚克隆后获得1株稳定分泌针对GP85蛋白的杂交瘤细胞株,命名为3B6.经间接ELISA 测定,小鼠腹水效价为6.4×105,亲和力解离常数(kD)为2.18×10-9,这株单抗的亚型为IgG1.通过Western Blot和IFA实验证实该株单抗是针对J亚群病毒蛋白GP85的特异性抗体.初步确定此株单克隆抗体的抗原识别区位于GP85蛋白N端的1-50位氨基酸.该株单抗的制备为ALV-J病毒抗原检测以及致病机理的研究奠定了基础.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2015(051)011【总页数】5页(P23-26,29)【关键词】禽白血病病毒;GP85;单克隆抗体【作者】王彬;李晓齐;曹红;陈福勇;王永强;郑世军【作者单位】中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193【正文语种】中文【中图分类】S852.65+9.3J亚群禽白血病是由J亚群禽白血病病毒引起的一类以生长抑制、免疫抑制和骨髓细胞癌变为特征的传染性肿瘤性疾病[1]，主要引起肉鸡的骨髓细胞瘤[2]。
中国麻鸡中发现禽J亚群白血病
中国麻鸡中发现禽J亚群白血病近年来，禽J亚群白血病在中国麻鸡中发病率不断攀升，给养殖业带来了严重的威胁。
本文将简要介绍禽J亚群白血病的流行趋势和临床特征，并探讨有效的预防措施和治疗方案。
禽J亚群白血病是一种淋巴细胞性白血病，主要在鸡群中传播。
在中国麻鸡中发现该疾病，提示我们需要重视并加强防治。
近年来，禽J亚群白血病在中国麻鸡中的发病率呈上升趋势。
通过对历史病例的分析，发现该疾病的传播主要与以下因素有关：遗传因素：部分品种的鸡对禽J亚群白血病易感，这提示该疾病可能与遗传有关。
环境污染：养殖环境中的有害物质，如重金属、有机污染物等，可能增加鸡群感染的风险。
免疫抑制因素：如其他疾病感染、营养缺乏等，会导致鸡群免疫力下降，从而易感染禽J亚群白血病。
禽J亚群白血病主要表现为淋巴细胞性白血病，病鸡常见症状包括贫血、消瘦、消化不良、食欲减退等。
病鸡还可能表现出神经症状，如震颤、瘫痪等。
为有效控制禽J亚群白血病的传播，以下预防措施值得：选育抗病品种：针对易感品种的鸡，应加强选育工作，提高其抗病能力。
严格控制环境污染：养殖过程中应减少环境污染，定期清理鸡舍，保持环境卫生。
强化免疫接种：针对其他疾病疫苗的接种，应制定科学合理的免疫程序，以提高鸡群的整体免疫力。
加强饲养管理：保证饲料营养全面，避免营养缺乏；同时，要给鸡群提供充足的饮水，以降低感染风险。
目前尚未有针对禽J亚群白血病的特效治疗方法。
一旦发现疑似病例，应立即隔离饲养，避免疾病传播。
同时，可采用以下辅助治疗方法：给予抗病毒药物：可使用干扰素、利巴韦林等抗病毒药物，减轻病毒对鸡群的侵害。
免疫调节：通过补充免疫球蛋白、维生素等物质，提高鸡群免疫力，增强抵抗力。
对症治疗：针对病鸡出现的贫血、消化不良等症状，可采用相应的对症治疗方案，提高病鸡的生存率。
中国麻鸡中的禽J亚群白血病是一种严重的疾病，对养殖业造成严重危害。
本文分析了该疾病的流行趋势和临床特征，并探讨了有效的预防措施和治疗方案。
J亚群禽白血病病毒表位疫苗候选抗原表位的筛选与鉴定开题报告
J亚群禽白血病病毒表位疫苗候选抗原表位的筛选与鉴定开题报告一、研究背景和意义白血病病毒感染已成为影响家禽产业经济发展和动物健康的重要因素。
其中，亚群禽白血病病毒（JSRV）是一种具有高度传染性和致死性的病毒，能引起肿瘤和其他严重的呼吸系统疾病。
近年来，利用免疫学技术开发疫苗已成为控制JSRV的有效方法之一。
疫苗候选抗原表位的筛选与鉴定是疫苗研发的重要步骤。
表位是指一个抗原分子中所包含的能够与免疫系统中相应受体结合的部分。
因此，通过筛选和鉴定JSRV的表位，可以开发新的JSRV疫苗，提高JSRV的预防和治疗效果。
二、研究内容和方案本研究旨在通过基因工程技术筛选和鉴定亚群禽白血病病毒表位，为JSRV疫苗的开发提供支持。
具体内容和方案如下：1.亚群禽白血病病毒基因克隆和表达采用PCR方法从JSRV的宿主细胞中扩增JSRV基因，将其克隆进入表达载体中，构建JSRV基因的表达系统。
利用大肠杆菌表达JSRV基因，纯化JSRV基因产品，获得JSRV抗原。
2. JSRV抗原的扩增与表位筛选利用JSRV基因克隆扩增及大肠杆菌表达技术，制备JSRV天冬氨酸酶抗原（JSRV-AP）和噬菌体外被膜蛋白抗原（JSRV-Cap）。
通过ELISA 和Western blot等方法筛选和鉴定JSRV抗原的表位，筛选出JSRV抗原的重要表位序列。
3.构建JSRV表位疫苗根据筛选出的JSRV抗原表位，采用基因工程技术构建JSRV表位疫苗。
将JSRV表位序列插入相应载体构建表位疫苗，通过体内和体外实验检测JSRV表位疫苗的免疫原性和保护效果。
三、预期结果和意义通过上述方案，预期可实现以下结果：1.成功克隆和表达JSRV基因，制备JSRV抗原。
2.筛选出JSRV抗原的重要表位序列。
3.构建JSRV表位疫苗，评估其免疫原性和保护效果。
本研究结果将为JSRV疫苗开发提供候选抗原表位和理论基础，有助于提高JSRV的预防和治疗效果，缓解家禽产业的JSRV流行造成的经济损失。
山东省种鸡场禽白血病流行病学调查
山东省种鸡场禽白血病流行病学调查文│邢林林 李玉杰 徐聪 姜秀云 陈静（山东省动物疫病预防与控制中心）李佳璇（青岛农业大学海都学院）禽白血病（Avian Leukosis）是由禽白血病病毒（ALV）引起的禽类的多种传染性肿瘤疾病的统称，在我国禽类养殖场中广泛流行，给家禽业造成了较大的经济损失。
根据其宿主范围以及各病毒之间的干扰情况，ALV分为A、B、C、D、E和J等亚群，其中常见的外源性病毒是ALV-A和ALV-B，ALV-J最早是在19世纪80年代后期，从英国的商品肉鸡中分离出来的，也是商品鸡群中最常分离到的病毒。
外源性ALV主要有两种传播方式：经蛋的垂直传播以及通过直接接触或间接接触的水平传播，在流行病学上垂直传播是禽白血病主要传播方式，并能产生免疫耐受，接着排毒并通过种蛋产生垂直传播。
自2008年以来，我国逐步建立了全国禽白血病净化项目，在《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》中，将禽白血病列为重点净化疫病，经过多年的实施，ALV 发病率明显降低，ALV感染得到有效控制，J亚群尤为明显。
然而，Yawen Zhang等通过对吉林省、辽宁省、天津市、河北省、山东省、江苏省以及其他省份的采样发现，2018年以来山东8个养殖场均出现ALV感染。
本研究利用商品化的ALV抗原检测试剂盒，对山东省内7个种禽场的ALV进行流行病学调查，统计分析ALV的阳性率、感染程度等，探讨山东省ALV净化情况，为制定禽白血病的防治措施奠定基础。
一、材料与方法2019年12月至2020年1月，对山东省内7个种禽场进行血清及蛋清的随机抽检，抽样不小于以下方式计算数量，具体根据养殖场现况调整。
种鸡群抗体检测采样数量：采集血清。
生产公鸡存栏100只以下，100%采样；生产公鸡100只以上，按照发现疫情公式计算（置信度95%，预期流行率3%），将采样数量按照存栏比例分配到不同栋舍后随机抽样；其他鸡只按照发现疫情公式计算采样数量（置信度95%，预期流行率3%），将采样数量按照存栏比例分配到不同群体和栋舍后随机抽样。
禽白血病J亚群病毒特性的研究
禽白血病J亚群病毒特性的研究杨卉新;李冰【摘要】禽白血病引起以造血细胞恶性增生为主的肿瘤,引起养禽业较大的经济损失,其致病病毒一禽白血病病毒(ALV)的J亚群是目前危害鸡群的最主要亚群.gp85决定了ALV-J的亚群特异性,其基因具有极高变异,目前尚未有应用于临床的疫苗和防制药物.本文介绍了ALV的基因组结构、ALV-J亚群的致病特点和流行特点,以及ALV-J gp85的基因变异、单克隆抗体和疫苗的研究进展,为进一步深入研究ALV-J gp85的致病机理、研究开发诊断试剂盒和有效的预防疫苗提供了参考.【期刊名称】《现代畜牧兽医》【年(卷),期】2017(000)012【总页数】5页(P36-40)【关键词】ALV-J;gp85;流行病学;基因变异;预防【作者】杨卉新;李冰【作者单位】南京农业大学动物医学院,江苏南京210095;锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁锦州 121001【正文语种】中文【中图分类】S852.659.3禽白血病，又称禽白血病/肉瘤，临床上种类很多，分为淋巴细胞性白血病、髓细胞样白血病、结缔组织性肿瘤、成红细胞性白血病、成髓细胞白血病、骨硬化病等。
其中，对养禽业危害最大的是禽淋巴细胞性白血病。
从传播特点看，既有垂直传播，又有水平传播，但以垂直传播为主。
禽白血病是由反转录病毒科、正反转录病毒亚科、a反转录病毒属的禽白血病病毒（Avian leucosis/sarcoma virus，ALV）引起，以造血细胞恶性增生为主的良性及恶性肿瘤性疾病。
禽白血病增加了家禽死亡率，降低了生产性能，造成了养禽业巨大的经济损失。
ALV具有典型反转录病毒科C型肿瘤病毒的共同特征，病毒粒子近似球形，外部具有囊膜，其上有放射状突起，内部是电子致密的核心，ALV以出芽的方式从包膜中释放出来。
由于病毒囊膜含有丰富的脂类，因此对脂溶性溶剂、去污剂和甲醛敏感，可以抵抗一定的紫外线。
ALV病毒对热敏感，可以在-60℃以下保持数年感染力。
农业部办公厅关于开展种鸡场禽白血病等免疫抑制性疾病监测与流行病学调查工作的通知
农业部办公厅关于开展种鸡场禽白血病等免疫抑制性疾病监测与流行病学调查工作的通知文章属性•【制定机关】农业部(已撤销)•【公布日期】2010.11.01•【文号】农办医[2010]91号•【施行日期】2010.11.01•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】农业管理综合规定正文农业部办公厅关于开展种鸡场禽白血病等免疫抑制性疾病监测与流行病学调查工作的通知（农办医[2010]91号）各省、自治区、直辖市及计划单列市畜牧兽医（农牧、农业、农村经济）厅（局、办），新疆生产建设兵团畜牧兽医局，中国动物疫病预防控制中心，山东农业大学、中国农业大学：为切实了解全国种鸡场禽白血病等免疫抑制性疾病流行状况，进一步加强种禽和SPF鸡的防疫管理，经研究，我部决定近期在全国范围开展种鸡场禽白血病等免疫抑制性疾病监测和流行病学调查工作。
现将有关事宜通知如下：一、监测时间2010年11月1日-2011年3月30日。
二、监测范围全国蛋种鸡祖代以上鸡场和SPF种鸡场，主要包括21家祖代蛋鸡场、5家曾祖代蛋鸡场和15家SPF鸡蛋生产单位，以及国家级地方鸡种基因库。
主要病种：禽白血病、禽网状内皮组织增殖症、鸡白痢、鸡传染性贫血病、禽呼肠弧病毒病等垂直传播的免疫抑制性疫病。
三、监测承担单位中国动物疫病预防控制中心牵头、山东农业大学和中国农业大学共同参与。
所有血清样品的鸡白痢抗体检测由中国农业大学承担，其他疫病检测由中国动物疫病预防控制中心和山东农业大学承担。
采样工作由中国动物疫病预防控制中心和山东农业大学承担，具体分工见附件1、2、3。
各有关省份协助做好监测和流行病学调查工作。
四、监测比例与数量（一）祖代蛋鸡场据统计全国祖代蛋鸡场21家，按照在产祖代蛋鸡存栏量的1.5%比例抽检，各场抽检血清和种蛋数量不足100份（枚）时，按照各自100份（枚）抽取，抽检样品数见附件1。
其中血清样品检测禽白血病J亚型抗体（ALV-J亚群-Ab）、禽白血病A/B亚群抗体（A/B亚群-Ab）、禽网状内皮组织增殖症病毒抗体（REV-Ab）和鸡白痢抗体（SP-Ab）。
禽白血病病毒AB亚群抗体检测方法
禽白血病病毒（A亚群和B亚群）抗体检测酶联免疫吸附法1. 目的范围检测鸡血清中禽白血病病毒（A亚群和B亚群）抗体，为禽白血病综合防控提供依据和参考。
适用于鸡血清中禽白血病病毒（A亚群和B亚群）抗体的检测。
2.依据《禽白血病诊断技术》（GB/T 26436-2010）;禽白血病病毒抗体检测试剂盒说明书（美国IDEXX公司）。
3.检测原理将病毒抗原包被在96孔酶联免疫反应板上，加入被检样品后，如样品中含禽白血病病毒（A亚群和B亚群）的抗体，就会与病毒抗原结合形成抗原抗体复合物。
加入洗板液后，洗掉没有反应结合的物质。
在孔中加入可与鸡禽白血病病毒（A亚群和B亚群）的抗体结合的酶标二抗，通过洗板后，将没有结合的酶标二抗洗掉。
加入底物后，通过孵育显色，显色强度与被检样品中禽白血病病毒抗体（A亚群和B亚群）含量正相关。
4.仪器设备4.1 量程为100μL的单道移液器和300μL的八道或十二道移液器；4.2 酶标仪；4.3 自动或手动洗板系统；4.4 稀释用96孔板；4.5 一次性移液器吸头；4.6 1000mL量筒；4.7 吸水纸。
5.试剂和样品5.1 试剂盒组成5.1.1 酶标板：ALV抗原包被板 5块（96孔/块）5.1.2 酶标抗体：辣根过氧化物酶标记的（羊抗）鸡抗体 1瓶（50mL）5.1.3 阳性对照：稀释的鸡抗ALV抗体，叠氮钠防腐 1瓶（1.9mL）5.1.4 阴性对照：稀释的鸡血清，不与ALV反应，叠氮钠防腐 1瓶（1.9mL）5.1.5 样品稀释缓冲液，叠氮钠防腐 1瓶（235mL）5.1.6 TMB底物溶液 1瓶（60mL）5.1.7 终止液 1瓶（60mL）5.2 纯水或超纯水5.3 样品准备：检测前用样品稀释液将被检样品进行500倍稀释（如：1μL的样品用样品稀释液稀释到500μL）。
6.操作步骤使用前所有试剂应恢复至室温（20~25℃），将其振摇混匀后再进行使用。
6.1 取出酶标板并标记好被检样品的位置。
禽白血病病毒J亚群(ALV-J)的攻毒试验
禽白血病病毒J亚群(ALV-J)的攻毒试验成子强;赵振华;张利;高娃【期刊名称】《中国兽医学报》【年(卷),期】2004(24)3【摘要】将禽白血病病毒 J亚群 (AL V- J)内蒙株 NM876 1和 NM9996人工接种于 1日龄爱维茵肉种鸡 ,通过眼观、病理组织学检查观察了攻毒鸡的病理学特征 ;通过 PCR和 EL ISA技术检测了病毒感染率、抗体变化规律以及病毒和抗体的相关性。
结果显示 ,攻毒鸡从第 3周开始即可检出病毒 ,NM876 1株和 NM9996株病毒感染率分别为 71.4 %和6 4 .3% ;从第 5周开始 ,出现较明显的病理学变化 ,病变特征以骨髓、肝脏、心脏、脾、卵巢等组织内髓细胞增生为主 ,而法氏囊、脑、坐骨神经无变化 ;攻毒鸡抗体消长变化有一定的规律 ,一般在 7～ 8周龄和 18～ 2 0周龄时分别出现 1次高峰 ,而在 4～ 6周龄、10周龄和 2 3周龄分别出现 1次低谷 ,提示鸡场进行 EL ISA检测时要避开这一时期 ;攻毒鸡产生耐受性病毒血症 ,即病毒阳性而抗体阴性 (V+A- )的比例较高 (7/14 ,9/14 )。
通过以上的研究证明 ,AL V- J内蒙株疾病模型复制成功 ,NM876 1。
【总页数】4页(P219-222)【关键词】禽白血病病毒;J亚群;ALV-J;感染率;抗体;病理学特征;攻毒试验【作者】成子强;赵振华;张利;高娃【作者单位】山东农业大学动物科技学院;内蒙古农业大学动物科学与医学学院【正文语种】中文【中图分类】S852.65【相关文献】1.禽白血病病毒J亚群(ALV-J)的血清学调查及PCR诊断 [J], 成子强;赵振华;郝永清;赵心力;哈斯阿古拉2.禽白血病病毒J亚群(ALV-J)免疫抑制特性研究 [J], 张利;刘青;王晓伟;王峰;陈洪博;成子强3.禽白血病病毒J亚群(ALV-J)基因表达与抗原定位的研究 [J], 成子强;刘思当;张利;赵振华4.从病鸡肿瘤组织中同时检测出网状内皮组织增生症病毒(REV)和J亚群禽白血病病毒(ALV-J) [J], 陆桂平;陆熹5.J亚群禽白血病病毒(ALV-J)ELISA检测方法的建立 [J], 叶建强;秦爱建;邵红霞;金文杰;刘岳龙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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福建畜牧兽医
第３ ６卷
第 ５期
２ ０ １ ４年
武平县部分鸡场禽 白血病 Ｊ亚群 和 Ａ、 Ｂ亚群抗体检测与分析
刘辉 兰 福建 省武 平县 动物 疫病 预 防控制 中心 ３ ６ ４ ３ ０ ０
摘 要 采 用 禽 白血 病抗 体 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ检测试剂盒 ， 对 武 平 县境 内三 个 黄 羽 品 种 鸡 采 集 ６个 场 ２ ７ ２份 血 清进 行 禽 白血 病 Ａ、 Ｂ 亚 型 ｔ ￣ ￣（ Ａ Ｌ Ｖ－ Ａ Ｂ） 和 Ｊ亚 型抗 体 （ Ａ Ｌ Ｖ－ Ｊ ） 检测。 结果 表 明 ： 武平 县 三 个 黄 羽 品 种 鸡 群 中存 在 Ａ Ｌ Ｖ－ ｊ亚 型和 Ａ Ｂ 亚型 自然 感 染 现 象 ， 其 中 ＡＬ Ｖ— Ａ Ｂ 抗 体 阳性 率 为 ２ ７ ． ６ ％（ ７ ５ ／ ２ ７ ２ ） ， Ａ Ｌ Ｖ－ Ｊ 抗体 阳性率为 ２ ０ ． ６ ％（ ５ ６ ／ ２ ７ ２ ） ，同时具有 Ａ Ｌ Ｖ— Ａ Ｂ抗体和 Ａ Ｌ Ｖ－ ｊ 抗 体 的 阳性 率 为 １ １ ％（ ３ ０ ／ ２ ７ ２ ） ； 不 同鸡群 的 Ｌ 、 ， 感染有所不同 ， 广 西 三 黄 鸡＞长 汀 河 田鸡 ＞ 武 平 象洞 鸡 、 商品鸡＞ 种鸡。 关 键 词 禽 白血 病
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文献标识码 ： Ａ
抗体
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文章 编 号 ： １ ０ ０ ３ － － ４ ３ ３ １ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ５ — ０ ０ １ ４ — ０ ２
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