细胞生物学系列常见问题及解决方法
细胞生物学研究的现状与问题
细胞生物学研究的现状与问题细胞生物学是生命科学中极为重要的一门学科，它研究细胞的结构、功能、分化及其发育、增殖等生理与生化过程。
随着科学技术的不断迭代更新，细胞生物学的研究也越来越深入，但与此同时，也面临着一些问题。
本文将探讨细胞生物学研究的现状与问题。
一、现状1. 细胞学的进步细胞生物学是细胞学的主要领域之一。
经过几个世纪的发展和进化，现代细胞学可以追溯到19世纪初半，当时Schleiden和Schwann演绎出细胞学说。
自此，细胞学领域得到了快速的发展，引入了多种各不相同的技术和方法，如共聚焦显微镜、反映光学显微镜、电子显微镜、蛋白质组学、基因组学等。
这些技术和方法的引入，为细胞学界提供了新的研究工具，促进了细胞生物学的发展。
2. 细胞的多样性细胞是构成生命的基本单位，不同的细胞具有不同的特征，大多数的生物体都是由细胞构成的。
在不断发展的细胞生物学中，学者们开始发现细胞具有巨大的多样性。
细胞可以根据形态、结构、大小、功能等特征进行分类，此外，不同种类的细胞还具有不同的代谢和增殖过程。
因此，细胞的研究需要根据细胞的类型进行区分，才能保证研究的准确性和有效性。
3. 新型基因编辑技术的出现科学家们不断探究和开发出新型基因编辑技术，如CRISPR-Cas9等，这为细胞生物学研究提供了新的方法。
通过基因编辑工具，研究者可直接编辑特定基因，再通过检测其对细胞活动的影响，探究细胞活动和功能的本质。
利用这些新型技术，科学家们能够更精准地探究与基因有关的细胞过程，进一步提高了细胞生物学的研究水平。
二、问题1. 数据的分析和整合由于细胞生物学相关数据量庞大，数据来源和数据类型复杂多样，数据的整合和分析问题成为一个关乎细胞生物学研究质量和效率的重要问题。
因此，需要开发新的工具和算法，以加强数据的集成、整合和高效分析，并将其应用于实际的细胞生物学研究中。
2. 细胞动态的研究目前，细胞组成、结构和功能的研究已相对成熟。
生物期末难点解析技巧
生物期末难点解析技巧在生物学学习过程中，有些内容难以掌握，容易成为考试中的难点。
本文将介绍一些解析这些难点的技巧，帮助同学们提高生物学成绩。
一、细胞生物学细胞是生物学的基本单位，其中的细胞膜、细胞质、细胞核等结构是重点难点。
1. 细胞膜细胞膜是细胞的包裹物，起到保护细胞、细胞内外物质交换的作用。
关于细胞膜，考试常见的问题包括：细胞膜的结构、细胞膜的功能和细胞膜的运输方式等。
解析这些问题时，可以采用如下思路：（1）结构：描述细胞膜由磷脂双分子层组成，磷脂分子具有亲水头部和疏水尾部的特点；（2）功能：说明细胞膜控制物质的运进和运出，保持细胞内外环境的稳定；（3）运输方式：介绍细胞膜通过扩散、渗透、主动运输等方式实现物质的运输。
2. 细胞质细胞质是细胞膜与细胞核之间的区域，其中包含细胞器如线粒体、高尔基体等。
常见的难题包括细胞质的组成、细胞质中的代谢过程等。
解析这些问题时，可以按照如下方式进行：（1）组成：介绍细胞质由胶状物质和各种细胞器组成；（2）代谢过程：阐述细胞质中的蛋白质合成、糖酵解等重要代谢过程。
3. 细胞核细胞核是细胞的控制中心，包含了遗传物质DNA。
相关问题包括细胞核的结构、细胞核的功能和DNA的复制等。
解析这些问题时，可以采用如下思路：（1）结构：描述细胞核由核膜、染色质和核仁组成；（2）功能：说明细胞核储存和传递遗传信息，调控细胞内的蛋白质合成等；（3）DNA的复制：阐述DNA复制的过程和意义。
二、遗传学遗传学是生物学的一个重要分支，掌握遗传基础和遗传规律是解析遗传学问题的关键。
1. 遗传基础遗传基础包括基因、染色体和表现型等要点。
常见的问题有：基因的定义、染色体的结构和表现型的形成等。
解析这些问题时，可以按照如下方式进行：（1）基因：介绍基因是遗传信息的基本单位，以DNA形式存在；（2）染色体：描述染色体由DNA和蛋白质组成，负责遗传信息的传递；（3）表现型的形成：说明表现型是基因型和环境的相互作用结果。
细胞培养试剂常见问题及解决方法总结
细胞培养试剂常见问题及解决方法总结细胞培养是生物学和医学研究中的重要技术，但进行细胞培养时可能会遇到一些问题。
以下是细胞培养试剂常见问题及解决方法总结：1. 细胞生长缓慢或不生长：可能原因：营养不足、血清质量不佳、细胞密度过高或过低、温度不适等。
解决方法：调整培养基成分，使用优质血清，控制细胞密度，保持温度恒定。
2. 细胞形态异常：可能原因：培养基中某些成分影响、有毒代谢产物积累、污染等。
解决方法：检查并调整培养基成分，定期更换培养基，检测并处理污染。
3. 细胞死亡：可能原因：血清质量差、有毒代谢物积累、pH值或渗透压失衡等。
解决方法：使用优质血清，定期检测和更换培养基，维持pH和渗透压的稳定。
4. 污染：可能原因：操作过程中未严格遵守无菌原则、培养环境不洁净、未及时处理污染等。
解决方法：加强无菌操作训练，定期清洁和消毒培养环境，发现污染立即处理。
5. 细胞分化：可能原因：长时间传代、某些生长因子刺激等。
解决方法：尽量减少传代次数，避免不必要的生长因子刺激。
6. 细胞融合：可能原因：某些病毒或化学物质诱导、操作不当等。
解决方法：避免使用可能导致融合的物质，严格控制操作条件。
7. 基因表达异常：可能原因：基因突变、染色体重排等。
解决方法：使用基因编辑技术进行修正，或选择适当的细胞系。
8. 染色体异常：可能原因：长时间传代、某些化学物质影响等。
解决方法：尽量减少传代次数，避免不必要的化学物质刺激。
9. 培养基问题：可能原因：某些成分分解、过期、配置错误等。
解决方法：检查并更新培养基，确保其质量和有效期。
10. 试剂质量问题：可能原因：购买的试剂质量不佳、运输或存储条件不当等。
解决方法：选择信誉良好的供应商，确保运输和存储条件符合要求。
11. 设备问题：可能原因：设备故障、老化、校准不当等。
解决方法：定期维护和校准设备，确保其性能和准确性。
12. 操作问题：可能原因：操作不当、未遵循标准化流程等。
解决方法：加强操作培训，建立并遵守标准化操作流程。
医学细胞生物学常见问题解析
医学细胞生物学常见问题解析细胞是生物体的基本结构与功能单位，而医学细胞生物学则是研究细胞在生理和病理状态下的表现、功能及相互关联的学科。
在医学研究和临床实践中，细胞生物学扮演着重要的角色。
在本文中，我们将解析医学细胞生物学中常见的问题，以帮助读者更好地了解这一领域。
1. 什么是细胞？细胞是生物体的最基本单位，由细胞膜、细胞质和细胞核组成。
细胞通过各种化学反应维持其功能，包括新陈代谢、基因表达和细胞分裂等。
2. 细胞有几种类型？根据形态和功能的不同，细胞可以分为原核细胞和真核细胞。
原核细胞是没有核膜的细胞，如细菌和蓝藻。
真核细胞则具有细胞核和细胞器，包括动物细胞和植物细胞。
3. 细胞如何进行物质交换？细胞通过细胞膜进行物质交换。
细胞膜是由脂质双层构成的，具有选择性渗透性，可以控制物质的进出。
通过不同的转运蛋白通道和转运器，细胞膜实现了物质的主动和被动运输。
4. 细胞是如何进行能量代谢的？细胞通过三大代谢途径进行能量代谢：糖酵解、三羧酸循环和线粒体呼吸链。
糖酵解将葡萄糖分解为乳酸或乙醛酸，产生少量ATP。
三羧酸循环将乙醛酸转化为二氧化碳和更多的ATP。
线粒体呼吸链进一步利用三羧酸循环产生的能量，最终生成大量ATP。
5. 为什么细胞需要进行分裂？细胞分裂是细胞生物学中的重要过程，它使得生物体可以生长、发育和修复受损部位。
细胞分裂分为有丝分裂和减数分裂，可以产生两个完全相同的细胞（有丝分裂）或四个具有不同基因组成的细胞（减数分裂）。
6. 细胞凋亡与细胞坏死有什么区别？细胞凋亡是一种受控的细胞死亡，它通过一系列的信号通路和程序性细胞死亡实现。
细胞凋亡对于生物体的稳态和发育过程至关重要。
而细胞坏死是一种非受控的细胞死亡，通常发生在细胞受到损伤或缺血缺氧的情况下。
7. 什么是细胞分化？细胞分化是指未分化的细胞逐渐转变为特定类型的细胞，具备特定的形态和功能。
细胞分化在胚胎发育和组织修复过程中起着重要的作用，也是维持生物体多样性的基础。
细胞生物学问题与解决方案
细胞生物学问题与解决方案细胞是生物体的最基本单位，也是组成生命的基础。
对于细胞的结构和功能的研究是细胞生物学的主要内容。
在细胞生物学的研究中，常会出现一些问题，有些问题可能已经解决，但也有些问题至今仍未得到彻底解决。
本文将对一些在细胞生物学中常见的问题进行探讨，并介绍一些解决这些问题的方案。
1.细胞分裂如何实现染色体的准确分配？细胞分裂是生命进程中不可或缺的过程，孟德尔基因遗传学假说与染色体分离定律的提出，揭示了细胞分裂与遗传物质（DNA）的基本关系。
染色体在有丝分裂中的准确分配是能够实现基因传递的重要保障，而定期分配染色体，需要一种高度协调和精确的机制。
在过去的一段时间里，分子细胞生物学家已证明，进行染色体有丝分裂的细胞，包括分裂酵母、线虫和果蝇等常见模型生物，均通过蛋白酶体这种高分子结构来维持染色体准确的分配。
这些高分子结构与母中心体这样的细胞器紧密配合，形成精确的物理和化学环境以支持染色体准确地分离。
2.细胞之间的信号传导机制是如何实现的？细胞生物学极具复杂性，其间存在着许多细胞之间的信号通信途径，包括了神经系统、内分泌系统、细胞相互作用机制等，这些互动影响了生命的正常运作。
诸如激素在生长、发育、分化还有免疫反应等等过程中，其信号的传递方式便是直接调控细胞代谢及其核内蛋白质的作用。
近年来，研究者开发出了新型的绿色荧光蛋白（GFP）能够帮助观察设置内细胞信号传导的分子，这一技术的运用使得他们更容易了解、识别和阐述其中的过程。
例如，研究者在某些细胞中，经GFP药物处理后发现这些药物可以强化细胞内信号传递通路。
3.细胞膜的性质影响细胞内吞过程细胞膜为生物细胞独特的外膜，对于细胞通透性、渗透性、选择性和障碍性等都拥有重要的影响，它是细胞本身的防护罩和内外界的交互枢机。
在细胞生物学研究中，人们坚信过程如内吞作用、融合作用及有丝分裂等等均受细胞外膜性质的直接指导。
同时研究发现，由于环境因素及其他因素的影响以及突变的发生，细胞膜的性质如渗透性会发生改变，这会影响到细胞内外营养物质的交换进程，从而导致细胞内营养物质不平衡并可能触发全球性疾病问题。
细胞培养过程中常见的变异问题分析与解决方法
细胞培养过程中常见的变异问题分析与解决方法细胞培养作为生物学研究中重要的实验手段之一，被广泛应用于细胞生物学、生物医学研究和药物研发等领域。
然而，在细胞培养过程中，常常会遇到各种变异问题，如细胞形态改变、生长速度减慢以及细胞死亡等等。
本文旨在分析这些常见的变异问题，并提供相应的解决方法。
一、细胞形态改变细胞形态的改变是细胞培养过程中较为常见的变异问题之一。
通常，细胞形态的异常变化可能包括细胞变大或变小、细胞伸长或收缩等。
这些变异往往会导致细胞功能和代谢活性的改变，从而影响实验结果的准确性。
解决方法：1. 检查培养条件：首先，应对培养基质及培养液的pH值、温度、含氧量等因素进行仔细的调控与监测，以确保细胞处于适宜的生长状态。
2. 检测浓度：根据细胞系的特性，调整培养基中添加物的浓度，如血清、酶消化液等，以维持适当的细胞形态。
3. 鉴别混杂：定期进行细胞株的鉴别，避免因细胞混杂导致形态异常。
二、生长速度减慢细胞在培养过程中，如果出现生长速度减慢的情况，可能会严重影响实验进展与结果的获取。
细胞生长速度的减慢可能是由多种因素引起的，如细胞老化、细胞密度过高、培养液中营养物质不足等。
解决方法：1. 细胞分离：及时将细胞进行适当的分离，避免细胞在培养中过度堆积，从而影响生长速度。
2. 营养补充：调整培养基中的营养物质浓度，确保细胞处于良好的生长环境中，并加强对细胞的营养补充。
3. 细胞凋亡检测：定期检测和评估细胞凋亡的情况，如有需要，可采取相应的干预措施，以保证细胞群体的健康状态。
三、细胞死亡细胞死亡是细胞培养过程中常见的变异问题之一，其发生率可能由多种因素决定，如感染、细胞凋亡、培养条件不良等。
细胞死亡不仅会影响细胞培养的连续性，也会对实验结果的可重复性产生不良影响。
解决方法：1. 检测感染：对培养基进行微生物污染检测，避免细菌、真菌等微生物的感染，导致细胞死亡。
2. 调整培养条件：对培养条件进行优化，如温度、培养基组分等，保证细胞处于最适宜的生长状态。
细胞实验中常见问题
细胞实验中常见问题
一、细胞培养问题
1.1 细胞生长缓慢或停止生长：可能原因是营养物质不足、血清质量不佳、培养箱温度不稳定或CO2浓度不正确等。
1.2 细胞形态异常：可能是由于培养基问题、营养不足、感染或污染等原因。
1.3 细胞结块：可能是由于细胞密度过大或血清用量过多等原因。
二、细胞活性检测问题
2.1 实验结果不一致或不准确：可能是由于试剂问题、操作误差或实验条件不稳定等原因。
2.2 假阳性或假阴性结果：可能是由于抗体交叉反应、实验操作不当或细胞状态不佳等原因。
三、细胞转染问题
3.1 转染效率低：可能是由于转染方法不正确、转染试剂选择不当或细胞状态不佳等原因。
3.2 细胞毒性：可能是由于转染试剂用量过多或转染条件不适应等原因。
四、细胞计数与消化问题
4.1 细胞黏附性强，不易消化：可能是由于细胞类型或状态不适应于消化方法等原因
4.2 细胞碎片多，影响计数：可能是由于消化过度或消化不充分等原因。
五、细胞标记与染色问题
5.1 染色不均匀或不显色：可能是由于染色时间过短或过长、抗体浓度不当或细胞状态不佳等原因。
5.2 非特异性染色问题：可能是由于抗体交叉反应或抗体纯度不佳等原因。
六、细胞分型与鉴定问题
6.1 分型结果不准确：可能是由于抗体选择不当、操作误差或细胞状态不稳定等原因。
6.2 鉴别困难：可能是由于细胞分化程度高、抗原表达量低或鉴别方法不敏感等原因。
七、细胞感染与病毒问题
7.1 细菌污染：可能是由于培养基或细胞株本身带菌等原因。
7.2 支原体污染：可能是由于培养环境不洁净、操作过程中污染等原因。
细胞培养中的常见问题解决方法
细胞培养中的常见问题解决方法细胞培养是生物医学研究和药物开发中不可或缺的重要工具。
然而，细胞培养过程中常常会遇到一些问题，例如污染、细胞凋亡、不适当的生长条件等。
本文将介绍细胞培养中的一些常见问题以及相应的解决方法。
1. 细胞污染细胞污染是细胞培养中最常见的问题之一。
它可能是由细菌、真菌、酵母、病毒等微生物引起的。
污染会导致细胞生长受阻、实验结果的不可靠以及其他严重后果。
为了解决这个问题，可以采取以下几种方法：- 严格按照无菌操作操作培养细胞。
使用无菌操作条件，包括在无菌环境下穿戴手套、使用消毒液清洗操作台面和器具、对培养皿和培养物进行灭菌处理等。
- 经常检查细胞培养物的外观。
细胞培养物应呈现透明、均匀的状态。
如果有任何可疑的异常，请及时进行检查和处理。
- 使用含有抗生素的培养基。
对于某些细胞株来说，添加适量的抗生素可以阻止细菌等污染物的生长。
2. 细胞凋亡细胞凋亡是正常细胞生命周期的一个重要阶段，但在细胞培养过程中，过量的细胞凋亡会导致细胞数量的减少，对实验结果造成不利影响。
以下是一些常见的细胞凋亡问题及其解决方法：- 减少细胞培养的过度处理。
频繁的细胞移植和传代会导致细胞凋亡增加。
适当延长传代周期，避免过多的细胞移植。
- 提供适当的细胞营养来源。
细胞需要足够的营养物质来维持正常的生长。
不合适的培养基组分或者浓度可能会导致细胞凋亡。
确保培养基中的营养物质符合细胞的需求，并根据细胞株的特点进行相应的调整。
- 坚持细胞培养的无菌操作。
如前所述，细菌或其他微生物的污染会导致细胞凋亡的增加。
通过无菌操作避免细胞污染，继而减少细胞凋亡。
3. pH值失调培养基的pH值是细胞培养中一个重要的生长条件。
pH值的不稳定性会影响细胞的代谢和生长。
以下是一些解决pH值失调的建议：- 定期检测和调整培养基的pH值。
使用pH计或试纸进行测定，及时调整pH值，保持在适宜的范围内。
- 确保培养基的配制正确。
细胞培养基的配制过程中，需要严格按照配方中所指定的浓度和比例添加各种成分。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
细胞生物学系列常见问题及解决方法
一、Vazyme TUNEL系列
1)、高背景(如未凋亡细胞的强绿色荧光背景)
a)、标记时间可能过长，可减少孵育时间。
b)、适当减少TdT酶及dUTP的用量。
c)、在操作过程中保持细胞湿润；标记反应完成，载玻片在用PBS洗一遍之后，可再用含0.1% Triton® X-100和5mg/ml BSA的PBS洗三次，每次5分钟。
2)、荧光信号弱或无信号
a)、细胞建议用Triton-100通透，切片用蛋白酶K处理，切片厚度小于10-15µm 时，通透10~30min即可，如果过厚则延长通透时间。
b)、延长标记时间至2h，并适当增加TdT酶及dUTP的含量。
c)、阳性对照：设立凋亡模型。
3)、组织切片从载玻片上脱落
a)、组织切片粘附之前的包被不充分。
在展片之前，用3-氨丙基三乙氧基硅烷包被显微镜载玻片比多聚赖氨酸效果更好。
4)、荧光显微镜或流式细胞仪分析只剩下很少的细胞
a)、在操作过程中丢失大量细胞：提高起始的细胞量。
b)、在制备贴到显微镜载玻片的细胞悬液时，离心过程中用含1%BSA的PBS洗细胞。
二、Vazyme的Annexin V系列
1)、Annexin V-FITC染色失败或者阳性率偏低
a)、要确定实验中的诱导剂是否能产生凋亡：可通过设定确切凋亡诱导效果的阳性药物对照来排除这一情况。
b)、贴壁细胞消化不当：AnnexinV跟PS的结合需要Ca2+离子，但大多数胰酶中含Ca2+的络合剂EDTA，从而影响染色，建议使用无EDTA的胰酶。
c)、细胞用冷PBS洗涤离心后，应尽量去掉残余液体：残留PBS中的磷酸根，会与游离的Ca2+形成磷酸钙沉淀。
d)、Binding Buffer是否被污染：瓶盖要紧闭，空气中的CO2进入后与游离的Ca2+形成CaCO3沉淀，导致实验的失败。
e)、若为贴壁细胞，药物诱导后漂浮的细胞也要收集，这部分细胞往往是凋亡阳性的细胞，丢弃会造成阳性结果偏低。
2)、假阳性
a)、细胞本身活力差：建议用台盼蓝染色计算细胞的活力，台盼蓝拒染的细胞应大于95%。
若活力低，建议重新复苏细胞，通常刚复苏的细胞至少要传代3次以
后才能进行实验。
b)、细胞操作不当：尤其是贴壁细胞消化过程中反复剧烈吹打导致破坏细胞膜，使得假阳性偏高。
c)、诱导时间过长：一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡，因此通常不需要处理大于48小时以上；诱导时间过长会使营养物质耗尽，导致细胞状态差，假阳性结果偏高。
三、Cell Cycle Assay Kit
1)、G0/G1突然发生变化或漂移
a)、流式细胞仪管路中有气泡或被阻塞：建议检查管路是否通畅或是否有气泡
b)、PI浓度不够：建议增加PI的浓度
c)、与PI孵育的时间不够长：建议增加孵育的时间
2)、峰宽
a)、流式细胞仪的流速太快，建议调整流式细胞仪的流速
b)、样品中有气泡，检查样品中是否有气泡
c)、样品中有坏死细胞，建议更换样品
3)、无样品峰
a)、可能样品中无细胞核，坏死细胞过多，建议显微镜观察样品或更换样品
b)、细胞碎片过多
四、ExFect
1)、转染效率偏低
a)、ExFect与DNA的比例不优化：通过预实验测试ExFect与DNA的最佳比例(在2～
5 μl/μg DNA范围内尝试)。
在后续的实验中选择转染效率高、细胞毒性低的比例进行转染。
b)、转染前为细胞更换了无血清培养基：ExFect/DNA复合物的包装反应需在无血清条件下进行，但使用包装好的复合物进行转染时，细胞培养基中应含有血清。
多数情况下，在完全培养基中进行转染，并且转染后不更换培养基有助于获得更高的转染效率和更低的细胞毒性。
c)、转染时细胞密度不合适：多数情况下，当细胞密度达到60%～80%时转染可以取得较高的转染效率。
然而细胞类型不同，最适的转染密度也不尽相同。
可以通过预实验寻找较优化的转染密度，并在后续实验中保持这个密度。
d)、DNA质量偏低(降解或包含内毒素)：为实现高效率、低毒性的转染，应使用高质量的DNA(高纯度、无菌、无内毒素)。
e)、转染试剂/DNA复合物包装体系中包含血清：当复合物包装反应中存在血清时，转染试剂/DNA复合物无法正常形成。
f)、存在转染抑制因素：当包装反应和转染过程中存在多聚阴离子聚合物时(例如：硫酸葡聚糖、肝素等)转染将无法正常进行。
因此应使用不含这些成分的培养基。
g)、细胞状态偏差：传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。
因此，为了提高转染效率和稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。
2)、细胞毒性偏高
a)、转染前为细胞更换了无血清培养基：ExFect/DNA复合物的包装反应需在无血清条件下进行，但使用包装好的复合物进行转染时，细胞培养基中应含有血清。
多数情况下，在完全培养基中进行转染，并且转染后不更换培养基有助于获得更高的转染效率和更低的细胞毒性。
b)、转染时细胞密度不合适：多数情况下，当细胞密度达到60%～80%时转染可以取得较高的转染效率。
然而细胞类型不同，最适的转染密度也不尽相同。
可以通过预实验寻找较优化的转染密度，并在后续试验中保持这个密度。
c)、ExFect/DNA复合物过量：转染试剂过量会导致较高的细胞毒性。
尝试减少DNA或者ExFect的使用量。
d)、ExFect/DNA复合物加入培养基时分布不均匀：局部转染试剂/DNA复合物浓度过高是导致细胞毒性偏高最常见的原因之一。
当复合物添加到培养基之后，应平置培养皿，并前后、左右交替晃动。
e)、细胞状态偏差：传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。
因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。