共培养法神经细胞诱导骨髓间充质干细胞向神经元的分化
细胞共培养体系在观察骨髓间充质干细胞对损伤脊髓神经元生长存活影响中的应用
范 洪 学 王 苹 ４ ， ５
目的 ： 立 细 胞共 培 养 体 系 ， 建 观察 骨 髓 问充 质 干 细胞 （ Ｍ Ｃ ） 正 常及 损 伤 的脊 髓 神 经元 的影 响 。 Ｂ Ｓ ｓ对
方法： 取新生 ７ 选 ｄ的 大 鼠 ， 菌 条 件下 大 鼠 ， 菌 条 件 下分 离 脊 髓 背 根 神 无 ４ 无
结 果 ： 培 养 组 神 经 元细 胞 ＮＳ 阳性 率 较 相 应 对 照 组 高 。在 Ｂ Ｃｓ与神 经元 共 培 养到 第 ６天 ， 数 神 经 元 的 存 活 共 Ｅ ＭＳ 计
率 ， 纯 神 经元 细 胞 培 养组 仅 有 ４ ％的 神经 元 存 活 ， 单 ０ 而共 培 养 组 神 经元 的存 活 率 达 到 ６ ％。 单 纯 损伤 神 经 元 细 胞 培 ５ 养 组 仅有 ２ ％的神 经 元存 活 ， 培 养 组 神经 元 的存 活达 到 ５ ％ ， 胞 凋亡 的数 量较 对 照 组 明显 低 。 ６ 共 １ 细 结 论 ： ＭＳ ｓ Ｂ Ｃ 可促 进 正 常 的 脊 髓 神 经元 存 活 ， 损 伤 的 脊髓 神经 元 有 保 护 作 用 ， 能 诱 导 神 经 前 体 细 胞 分 化 为 脊髓 对 并
Ｒｅ ｕ ｔ Ｉ ｈ ｇ ｏ ｐ ｆ Ｃ ｃ ｌ ｒｄ ｉ Ｂ Ｃｓ ａ ｄ ｎ ｒ ａ ｓ ｉ ａ ｃ ｒ ｎ ｕ ｏ ｓ ｈ ｐ ｓｔ ｅ ａｅ ｆ ＮＳ ｗ ｓ ｓ ： ｎ ｔ ｅ ｒ ｕ ｏ Ｏ— ｕ ｔ ｅ ｗ ｔ ｌ ｕ ｈ ＭＳ ｎ ｏ ｍ ｌ ｐ ｎ ｌ ｏｄ ｅ ｒ ｎ ，ｔ ｅ ｏ ｉ ｖ ｒ ｔ ｉ ｏ Ｅ ａ
经节 神 经元 ， 制备 机 械 损 伤 的模 型细 胞 。 用 Ｔ ａ ｓ ｅ 并 ｒｎ ｗ ｌ ｌ可渗 透 培 养 皿 构 建共 培 养 体 系 ， 过 细 胞 形 态 学 ， 疫 细胞 通 免
干细胞共培养的方法及其分化诱导_王珊青
ＣＲＴＥＲ复旦大学附属中山医院整形外科，上海市２０００３２王珊青★，女，１９８３年生，江苏省南京市人，汉族，２００７年复旦大学医学院毕业，硕士，住院医生，主要从事组织工程软骨方面的研究。
ｗｓｑｙｖｏｎｎｅ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ通讯作者：徐剑炜，主任医师，复旦大学附属中山医院整形外科，上海市２０００３２ｊａｍｅｓｗａｙ＠ｇｍａｉｌ．ｃｏｍ中图分类号：Ｒ３９４．２文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－８２２５（２００７）１１－０２１２２－０４收稿日期：２００６－１２－０７修回日期：２００７－０２－０１（０６－５０－１２－８８３１／ＺＳ・Ｑ）干细胞共培养的方法及其分化诱导★王珊青，徐剑炜Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｉｔｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎＡｂｓｔｒａｃｔＯＢＪＥＣＴＩＶＥ：Ｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｏｆｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓａｎｄｓｔｅｍｃｅｌｌｓｃｏｕｌｄｉｎｄｕｃｅｓｔｅｍｃｅｌｌｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｇｉｎｔｏｔｈｏｓｅｋｉｎｄｓｏｆｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ．Ｔｏｒｅｖｉｅｗｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｔｈｏｄｓｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．ＤＡＴＡＳＯＵＲＣＥＳ：ＴｈｅｒｅｌａｔｅｄａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｓｅａｒｃｈｅｄｉｎＰＵＢＭＥＤｂｅｔｗｅｅｎＪａｎｕａｒｙ１９９０ａｎｄＮｏｖｅｍｂｅｒ２００６ｕｓｉｎｇｃｏｍｐｕｔｅｒｗｉｔｈｔｈｅｋｅｙｗｏｒｄｓｏｆ＂ｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ｃｏｃｕｌｔｕｒｅ＂ｉｎＥｎｇｌｉｓｈ．Ａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ，ｔｈｅｒｅｌａｔｅｄａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｓｅａｒｃｈｅｄｉｎＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌＦｕｌｌ－ｔｅｘｔＤａｔａｂａｓｅ（ＣＪＦＤ）ｂｅｔｗｅｅｎＪａｎｕａｒｙ１９９０ａｎｄＮｏｖｅｍｂｅｒ２００６ｗｉｔｈｔｈｅｓａｍｅｋｅｙｗｏｒｄｓｉｎＣｈｉｎｅｓｅ．ＳＴＵＤＹＳＥＬＥＣＴＩＯＮ：Ｆｉｒｓｔｔｒｉａｌｗｉｔｈｔｈｅｄａｔａｗａｓｇｏｔｔｅｎ，ａｎｄｔｈｅｃｉｔａｔｉｏｎｓｏｆｅｖｅｒｙｒｅｆｅｒｅｎｃｅｗｅｒｅｃｈｅｃｋｅｄ．Ｉｎｃｌｕｓｉｖｅｃｒｉｔｅｒｉａ：Ｔｈｅａｒｔｉｃｌｅｓｔｈａｔｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｄｗｅｒｅａｄｏｐｔｅｄ．Ｅｘｃｌｕｓｉｖｅｃｒｉｔｅｒｉａ：ＲｅｐｅｔｉｔｉｖｅｒｅｓｅａｒｃｈｅｓｏｒＭｅｔａａｎａｌｙｓｉｓａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｅｘｃｌｕｄｅｄ．ＤＡＴＡＥＸＴＲＡＣＴＩＯＮ：Ｔｏｔａｌｌｙ４０ｒｅｌａｔｅｄａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄ，ａｎｄ３０ａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅａｃｃｏｒｄｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｌｕｓｉｖｅｃｒｉｔｅｒｉａ．Ｔｈｅ１０ｅｘｃｌｕｄｅｄａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｏｌｄｏｒｒｅｐｅａｔｅｄｏｎｅｓ．Ｉｎｔｈｅｓｅ３０ａｒｔｉｃｌｅｓ，ｔｈｅｙｄｉｓｃｕｓｓｅｄａｂｏｕｔｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｔｈｏｄｓｏｆｃｅｌｌｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅ，ｐａｒａｃｒｉｎｅａｃｔｉｏｎｏｆｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓ，ｃｅｌｌｓａｎｄｃｅｌｌｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎｍｅｄｉａｔｅｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｓｗｅｌｌａｓｔｈｅｐｏｓｓｉｂｌｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｄｕｅｔｏｃｒｅｖｉｃｅｕｎｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓ．ＤＡＴＡＳＹＮＴＨＥＳＩＳ：Ｓｔｅｍｃｅｌｌｓｃｏｕｌｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｉｎｔｏｍａｎｙｋｉｎｄｓｏｆｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓｉｎｄｅｆｉｎｅｄｍｅｄｉａ．Ｗｉｔｈｔｈｉｓｐｒｏｐｅｒｔｙ，ｉｔｈａｄｐｒｏｖｉｄｅｄｎｅｗａｐｐｒｏａｃｈｅｓｆｏｒｔｈｅｔｉｓｓｕｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓｗｉｔｈｍａｔｕｒｅｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓｃｏｕｌｄｉｎｄｕｃｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎｔｏｔｈａｔｋｉｎｄｏｆｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｐｈｅｎｏｔｙｐｅ．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅ６ｋｉｎｄｓｏｆｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓ，ｎａｍｅｌｙｍｏｎｏｌａｙｅｒｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｒａｎｓｗｅｌｌｓ，ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｃｕｌｔｕｒｅ，ｃｅｌｌｐｅｌｌｅｔ，ｃｅｌｌｓｈｅｅｔａｎｄｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｃｕｌｔｕｒｅ．Ｔｈｅｐｏｓｓｉｂｌｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓ＇ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｗｅｒｅｔｈａｔｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓｐｒｏｖｉｄｅａｓｕｉｔａｂｌｅｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｆｏｒｅｘｐａｎｓｉｏｎｏｆｔｈｅｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ｂｙｓｅｃｒｅｔｉｎｇｓｏｍｅｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，ａｎｄａｃｔｉｖａｔｉｎｇｔｈｅＰＩ３－ｋｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫｓ，ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ，ｃｅｌｌ－ｔｏ－ｃｅｌｌｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｗａｓａｓｅｐａｒａｔｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｆｏｒｓｔｅｍｃｅｌｌｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｓｔｅｍｃｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｗａｓｔｈｅｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ：Ｓｔｅｍｃｅｌｌｓｃａｎｂｅｉｎｄｕｃｅｄｔｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｂｙｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｏｆｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓａｎｄｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ｗｈｉｃｈｈａｖｅｂｅｅｎａｃｅｒｔａｉｎｆｅａｓｉｂｌｅａｎｄｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄ．Ｂｕｔｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｉｓｓｔｉｌｌｕｎｃｌｅａｒ．ＷａｎｇＳＱ，ＸｕＪＷ．Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｉｔｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．ＺｈｏｎｇｇｕｏＺｕｚｈｉＧｏｎｇｃｈｅｎｇＹａｎｊｉｕｙｕＬｉｎｃｈｕａｎｇＫａｎｇｆｕ２００７；１１（１１）：２１２２－２１２５（Ｃｈｉｎａ）［ｗｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ．ｃｏｍ／ｚｇｌｃｋｆ／ｅｊｏｕｒｎａｌ／ｕｐｆｉｌｅｓ／０７－１１／１１ｋ－２１２２（ｐｓ）．ｐｄｆ］摘要目的：体细胞与干细胞共培养可以诱导干细胞向该种体细胞表型分化，文章就干细胞共培养的不同方法及其诱导分化的机制进行综述。
骨髓间充质干细胞向多巴胺能神经元的诱导分化
骨髓间充质干细胞向多巴胺能神经元的诱导分化刘卓;徐运;黄丹青【摘要】背景:近年来研究发现,神经营养因子在骨髓间充质干细胞的分化中发挥重要作用.目前脑组织中具有再生能力的神经干细胞在体外是否具有直接诱导骨髓间充质干细胞分化为多巴胺能神经元的作用还未见报道.目的:观察大鼠间充质干细胞在胶质细胞源性神经营养因子与神经干细胞共培养两种诱导条件下体外分化成多巴胺能神经元的能力.方法:分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分2组培养,一组细胞应用胶质细胞源性神经营养因子单独诱导,另一组细胞与已培养成球的神经干细胞共培养进行诱导,共培养之前行Brdu标记.诱导3 d后以免疫组织化学法检测各组贴壁细胞神经元特异性标志物神经原纤维和多巴胺能神经元特异性标志物酪氨酸羟化酶的表达,观察间充质干细胞的分化情况.结果与结论:胶质细胞源性神经营养因子单独诱导组间充质干细胞在诱导24 h后胞体回缩呈锥形,突起延长且数量增多,有神经元样形态,且细胞间相互连接成网络状,3 d后部分细胞表达神经原纤维,其中少部分同时表达酪氨酸羟化酶.与神经干细胞共培养组神经干细胞球很快解离,迅速贴壁,共培养的贴壁细胞大量增殖且多呈神经元样,胞体细长多突起,相互间连接成网,多数贴壁细胞分别单独表达神经原纤维和酪氨酸羟化酶,少数细胞可见Brdu/神经原纤维,Brdu/胶质纤维酸性蛋白,Brdu/酪氨酸羟化酶双标阳性.提示间充质干细胞在胶质细胞源性神经营养因子、神经干细胞存在的情况下可定向转化为神经元,并有向多巴胺能神经元分化的可能.在该实验条件下胶质细胞源性神经营养因子效果好于神经干细胞.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2010(014)023【总页数】4页(P4227-4230)【关键词】骨髓间充质干细胞;神经干细胞;胶质细胞源性神经营养因子;诱导;神经元【作者】刘卓;徐运;黄丹青【作者单位】南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科,江苏省南京市,210008;南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科,江苏省南京市,210008;南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科,江苏省南京市,210008【正文语种】中文【中图分类】R394.20 引言间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是一类具有支持造血和多向分化潜能的非造血干细胞[1]，在体外适当的条件下可分化为骨、软骨、脂肪、心肌、神经元等中胚层细胞。
微囊化共培养诱导骨髓间充质干细胞体外定向成骨分化研究
高
校
化
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ＮＯ ６ Ｖ １ ４ ｂ． ２ Ｄｅ ． ２ Ｏ ｃ Ｏｌ
Ｊ ｕ ａ ｅ ｉａ ｇ ｎ ｅ ｉ ｇ ｏ ｉ ｅ ｅＵｎ ｖ ｒ ｉ ｅ ｏ ｒ ｌ Ｃｈ ｍ ｃ ｌ ｎ ｏｆ Ｅｎ ｉ ｅ ｒｎ ｆ Ｃｈ ｎ ｓ ｉ ｅ ｓｔ ｓ ｉ
文 章 编 号 ： １０ ・０ ５２ ００ －９ ３０ ０ ３９ １ （０１）６０ ９ －７
微 囊 化 共培 养 诱 导 骨 髓 间 充质 干细 胞 体 外 定 向成 骨 分 化研 究
刘 洋 于 滨 滨 １ 王 为 马 小 军 贺 欣 ， ， ２ ， ， ，
（．中国科 学院大连化 学物理研 究所 生物 医学材料 工程组 ， 辽 宁 大连 １６ ２ ； １ ０３ １
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手段 来评价骨髓 问充质干细胞 向成骨细胞定 向分化。结果表明在体外微 囊化 培养过程 中，被诱 导细胞的胞 内 ＡＬ Ｐ酶 活性逐渐 高于对照 组的干细胞 ，接近于成骨 细胞 ；ＡＬ Ｐ以及 Ｖ ｎＫｏｓ Ｏ ｓａ定性染色证 实被诱导细胞具 有较 高的 Ａ Ｐ活性 Ｌ
以及具有 分泌钙基 质的能力 。微囊 化成骨细胞 和外部干细胞 的其培 养体系较好地模拟 了体内干细胞 向成 骨细胞转化的
Ｌ ＵＹａｇ， Ｙ ｉ ｂ ， ＷＡ Ｇ Ｗｅ ， ＭＡ Ｘｉ － ｎ， Ｈ ｎ Ｉ ｎ Ｕ Ｂｎ ｉ ．ｎ Ｎ ｉ ａｊ ｏｕ ＥＸｉ
体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化：两种方法的比较
为阳性 。共培养法 第 ５ 天可 见典型神经细胞结构 ，突起数量较 多，神经元特 异性烯醇化酶染色 阳性 率 （ ５ ０ ． ８ ２ ￣ ２ ． ４ ６ ） ％， 化学诱导法培养第 ７天可见染色阳性率 （ ４ ３ ． ５ ６ ￣ １ ＿ ７ ４ ） ％。说明骨 髓 间充质 干 细胞 经共 培养 法诱 导分 化后 的神 经样 突起 数 量多 并较 早互相 形成 连接 ，且 共培 养 法神 经元 特异 性烯 醇 化酶 染色 阳性 率 高于化 学 诱导法 。
主题 词：
徐 丽 丽★ ， 女， １ ９ ８ ２年生 ， 山 东省 日照 市人 ，汉族 ，
２ ０ ０ ９年青 岛大学医学 院
毕 业 ，硕 士 ， 主治 医 师 ， 主要 从 事 内分泌 与 代谢 、 骨质 疏松 方面 的研 究。 ｘ ｕ ｌ ｉ ｌ ｉ ２ ０ １ ３ １ ４ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｍ
ｄ ｏ ｉ ： ｌ Ｏ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｍ ｓ ｎ ． ２ ０ ９ ５ ４ ３ ４ ４ ． ２ ０ １ ３ ． ４ ５ ． ０ ０ １ ［ ｈ ｔ ｔ ｐ ： ／ ／ ｗ ｗ ｗ ． ｃ ｒ ｔ ｅ ｒ ． ｏ ｒ ｇ ］ 徐丽丽 ．匡设 ．张佳 体钤诱导蛋髓闯充质于细胞 向神经元样细胞分化 两种力法的 比较ｌ Ｊ １ ． 中国组织Ｉ程 研究，２ ０ １ ３ ，１ ７ （ ４ ５ ） ： ７ ８ ２ １ － ７ ８ ２ ６
ｉ ｎ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ ｎ ｅ ｕ ｒ ａ ｌ － ｌ ｉ ｋ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ｄｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ ｔ ｉ ｏｎ ｆ ｒ ｏ ｍ ｂ ｏｎ ｅ ｍａ ｒ ｒ ｏ ｗ ｍｅ ｓ ｅ ｎ ｃ ｈ ｙ ｍａ ｌ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ：
人骨髓间充质干细胞诱导分化为RPE样细胞的探讨
1 材料与方法
1. 1 材料 DMEM-LG 培养基、胰蛋白酶、胎牛血清（Hyclone, USA）；
bFGF、EGF、BDNF、PEDF(Peprotech,US A)；Taurine（Sigm a,US A）； 淋巴细胞分离液（天津市灏洋生物制品科技有限责任公司）； 小鼠抗人巢蛋白单克隆抗体、小鼠抗人角蛋白 8＆18 单克隆抗 体、小鼠抗人 RPE65 单克隆抗体（NeoMarkers，USA）；流式 细胞术试剂小鼠抗人单抗 CD34-FITC+小鼠抗人 CD90-PE，小 鼠抗人单抗 CD34-FITC+小鼠抗人 CD44-PE（Beckman-Coulter， USA）, RT-PCR 试剂盒（Fermentas，USA），transwell 双层共 培养 系统（Corning，US A）。 1. 2 方法 1.2.1 骨髓的采集、BMSCs 的分离与培养
RPE65 蛋白检测：收集细胞爬片进行 RPE65 蛋白的免疫 细胞化学检测：PBS 洗涤，4%多聚甲醛固定，5%正常羊血 清封闭，加入小鼠抗人 RPE65 蛋白单克隆抗体（稀释度为 1： 100），4℃过夜，滴加聚合物辅助剂及生物素化山羊抗小鼠 IgG， DAB 显色及苏木素复染，自来水洗涤后干燥，树脂封 片，显微镜下观察，拍照。 1.2.5 诱导分化
髓核细胞共培养诱导骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化
韦 葛堇 ★， 男， １ ９ ８ １ 年生 ， 广 西 壮 族 自治 区 河 池 市 人 ，瑶族 ，２ ０ ０ ９年 南方 医 科 大 学毕 业 ，硕士 ，主 治 医师，主要从事脊柱、关
节损 伤 的研究 。
通 讯作者 ：林 舟丹 ，硕 士 ， 主 任 医师 ，硕 士 生导 师 ，
Ｄｉ ｆｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ ｔ ｉ ｏｎ ｏ ｆ ｂ ｏ ｎ ｅ ｍａ ｒ ｒ ｏ ｗ ｍｅ ｓ ｅ ｎ ｃ ｈ ｙ ｍａ ｌ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｉ ｎ ｔ ｏ ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ｕ ｓ ｐ ｕ ｌ ｐ ｏ ｓ ｕ ｓ － ｌ ｉ ｋ ｅ ｃｅ ｌ ｌ ｓ ａ ｆ ｔ ｅｒ ｃｏ・ ｃｕｌ ｔ ｕｒ ｅ ｗｉ ｔ ｈ ｎｕｃｌ ｅｕｓ ｐｕｌ ｐｏｓｕｓ ｃｅｌ ｌ ｓ
髓核细胞共培养诱导骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化木 ★
韦葛堇，黄育强，覃万安，廖长川，林舟丹（ 解放军第３ ０ ３ 医院骨科，广西壮族 自治区南宁市 ５ ３ ０ ０ ２ １ ）
文章 亮 点 ：
１实验引入髓核细胞非接触共培养结合转化生长因子 Ｂ １诱导剂的方法， 探索骨髓间充质干细胞髓核分化 的有 效 手段 ，技 术方法 有创 新 。 ２ 这 种方 法可 以模拟 椎 间盘退 变 的早期 病变 中 尚有 部分 髓核 细胞 存活 的环境 ，促进 骨髓 间 充质干 细胞 诱 导 分化 并修 复椎 间盘 退变 的环境 。 关键 词 ： 干 细胞 ；骨 髓干 细 胞 ；骨髓 间充质 干细 胞 ；细 胞共 培养 ；诱 导分 化 ；转化 生长 因子 Ｂ １ ；Ｉ Ｉ 型胶原 ；髓核 细胞 ； 类 髓核 细胞 ；省 级基 金 ；干细胞 图片文章
ｔ ｈ ｅ ３ ０ ３ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｐ Ｌ Ａ ， Ｎ ａ ｎ ｎ ｉ ｎ ｇＺ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ Ａ ｕ ｔ ｏ ｎ ｏ ｍｏ ｕ ｓ Ｒ ｅ ｇ ｉ ｏ ｎ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
骨髓间充质干细胞向光感受器样细胞和视网膜神经样细胞的分化及移植后的分布情况
的一种 ， 不 仅 具 有 干 细 胞 多 向分 化 和 大 量 扩 增 的 潜 能 ， 而 且 可 以直 接 从 自体 骨 髓 中 获 得 ， 避 免 异 体 和 异 种 移 植 引 起 免 疫 排斥 问题 ， 因 而 成 为 目前 干 细胞 移 植 研 究 的 焦 点 。 本 研究 旨 在 为视 网膜 退 行 性 疾 病 提 供 新 的 参 考方 案 。
膜 色素 上 皮 层 和视 锥 、 视杆细胞层 。
关键词 ： 骨髓 间 充质 干细 胞 ； 共培养 ； 视 网膜 神 经 样 细 胞 ； 光感 受器 样 细 胞 ； 移 植
中 图分 类 号 ： Ｒ７ ７ ４ ； Ｑ２ ５ 文 献 标 识码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ８ —０ １ ０ ４ （ ２ ０ １ ３ ） ０ １ —０ ０ ５ ８ —０ ２
・５ ８・
黑 龙 江 医药 科 学
２ ０ １ ３ 年２ 月第３ ６ 卷第 １ 期
骨 髓 间充 质干 细胞 向光 感受 器样 细胞 和视 网膜 神经 样 细胞 的分化 及移 植后 的分布 情况
徐 志刚 ， 吕淑慧 ， 刘远光 ， 王玉 清 ， 李 宏
（ 佳 木 斯 大 学 附属 第一 医院 眼科 ， 黑 龙 江 佳未 斯 １ ５ ４ ｏ ｏ ３ ）
１ ． ７ Ｍｔ ｔ法 检 测 各 组 ＢＭＳ Ｃｓ活 性
Ｌ ｅ ｗ ｉ ｓ 大 鼠３ 只， ４ ～５ Ｎ龄 ， 雌雄不限 ， 体重９ ｏ ～ｌ Ｏ Ｏ ｇ 。
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