SMART技术及其应用进展

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smart手术方案

smart手术方案智能手术方案，简称Smart手术方案，是一种利用智能技术来辅助和优化手术过程的先进技术。

通过结合人工智能、机器学习和大数据分析等技术，Smart手术方案能够提高手术的安全性、精确性和效率，为患者提供更好的手术体验和康复效果。

一、智能诊断与手术规划Smart手术方案的第一步是利用智能诊断技术来确定患者的病情和手术需求。

通过对患者的医学影像数据进行分析，智能系统可以快速准确地识别出病变部位、大小和类型，为手术规划提供依据。

在手术规划阶段，智能系统根据患者的病情和医生的建议，通过大数据分析和机器学习算法，为患者提供个性化的手术方案。

智能系统可以比较不同的手术方案，并预测每种方案的风险和效果，为医生提供决策和指导。

二、智能导航和实时监测在手术过程中，Smart手术方案还可以通过智能导航技术来辅助医生进行手术操作。

智能导航系统可以实时跟踪手术器械的位置和进程，为医生提供导航图像和指引，使手术操作更加准确和安全。

同时，Smart手术方案还可以通过实时监测技术来监测手术过程中的生理参数和病情变化。

智能监测系统可以实时采集和分析患者的生命体征数据，如血压、心率和血氧饱和度等，及时警示医生有任何异常情况，以便及时调整手术方案和干预治疗。

三、智能辅助和自动化手术Smart手术方案还可以利用智能辅助技术和自动化设备来提高手术效率和精确度。

智能辅助器械可以通过机器学习和人工智能算法，辅助医生进行手术操作，提供更精确的力度和视觉反馈。

同时，Smart手术方案还可以利用机器人和自动化设备来自动执行手术中的一些重复性或简单的操作，减轻医生的工作负担，并减少操作的风险和误差。

四、智能数据分析和反馈Smart手术方案通过对手术数据的收集和分析，可以为医生提供反馈和改进建议。

智能系统可以实时分析手术过程中的数据，如手术时间、器械使用和治疗效果等，为医生提供数据和统计结果，帮助医生进行手术过程的评估和改进。

同时，智能系统还可以将手术数据与医学知识库进行比对和分析，发现手术中的不规范操作或问题，并提供改进方案和培训建议，促进医疗质量的提升。

全长cDNA文库的构建—SMART技术

【共享】全长cDNA文库的构建—SMART技术全长cDNA文库的构建—SMART技术真核细胞的mRNA在加工过程中有一个比喻为“穿鞋戴帽”的过程，因此mRNA 的末端都带有一段Poly A，这是利用逆转录酶制备cDNA文库的基础。

但是由于cDNA的5'端的序列各不相同，如何获得全长的cDNA，如何扩增由微量的mRNA逆转录得到的cDNA文库、如何利用已知片断序列得到全长的cDNA（即RACE），曾经是一个令人困扰的问题。

常见的做法是在合成cDNA的双链后在两端连上接头，利用已知的接头序列再进行扩增，或者是利用末端转移酶在双链cDNA的3'末端加上一连串的G或者C（或者A/T），再通过补齐粘末端，利用已知的两头序列进行扩增。

但是这些方法不同程度的存在一些问题，比如接头的连接效率非常有限，会导致部分信息的丢失，再加上这些方法需要多次用不同的酶处理有限的样品，需要经过反复的纯化，会损失很多有用的信息，特别是少量样品中的低丰度信息，很大程度上会影响结果的准确性。

另外由于mRNA容易部分降解，很难确定得到的cDNA是否就是全长的cDNA，还是cDNA的片断。

SMART技术的出现是一个新的里程碑。

这个称作Switching Mechanism At 5' end of the RNA Transcript(SMART)，原理实际上非常简单：在合成cDNA的反应中事先加入的3'末端带Oligo（dG）的SMART引物，由于逆转录酶以mRNA为模板合成cDNA，在到达mRNA的5'末端时碰到真核mRNA特有的“帽子结构”，即甲基化的G时会连续在合成的cDNA末端加上几个（dC），SMART引物的Oligo（dG）与合成cDNA末端突出的几个C配对后形成cDNA的延伸模板，逆转录酶会自动转换模板，以SMART引物作为延伸模板继续延伸cDNA单链直到引物的末端，这样得到的所有cDNA 单链的一端有含Oligo（dT）的起始引物序列，另一端有已知的SMART引物序列，合成第二链后可以利用通用引物进行扩增。

智能制造技术的发展历程与趋势

智能制造技术的发展历程与趋势智能制造技术是近年来备受关注的领域之一。

随着科技的不断进步，人们对生产技术的要求越来越高，智能制造技术成为人们不断探索的领域。

本文将对智能制造技术的发展历程进行回顾，并展望未来的趋势。

一、智能制造技术的发展历程智能制造技术的起源可以追溯到20世纪50年代。

当时，瑞典生产了第一台数控机床。

以此为基础，人们在不断的探索中，发展了各种各样的智能制造技术。

以下是主要的里程碑事件。

1. 第一台数控机床1952年，瑞典姆卡公司生产了第一台数控机床。

这台机床是由美国麻省理工学院的约翰·T·希尔斯和罗伯特·舒尔曼发明的。

2. 第一台工业机器人1961年，美国发明了第一台工业机器人。

这台机器人是由一家名为“不可止”的公司发明的。

3. 工业自动化工业自动化是智能制造技术的重要组成部分之一。

20世纪70年代，工业自动化技术应用于工业生产中。

4. CAD/CAM技术20世纪80年代，计算机辅助设计（CAD）和计算机辅助制造（CAM）技术开始得到广泛应用。

这种技术使得制造过程更自动化，提高了生产效率。

5. 物联网技术21世纪，物联网技术的出现给智能制造技术带来了新的发展机遇。

物联网技术将智能设备连接起来，使得生产过程更加智能化和自动化。

二、智能制造技术的趋势随着物联网技术不断发展，智能制造技术的未来也变得更加光明。

以下是智能制造技术发展的趋势：1. 机器人技术的发展机器人技术已经被广泛应用于工业生产中，未来将更加智能化。

机器人将不仅用于简单的重复性工作，而是将具有更智能的功能，能够感知和处理复杂的信息。

2. 人工智能技术的发展随着人工智能技术的不断发展，制造商将更轻松地分析和管理大量数据。

这将帮助他们更好地了解产品的需求和生产的效率水平。

3. 智能传感器技术的发展智能传感器技术将能够为制造商提供更多的信息，从而使他们更好地了解产品的需求和生产过程中的任何问题。

4. 大数据技术的发展大数据技术已经广泛应用于各个领域。

智能制造技术的国内外研究进展与对比

智能制造技术的国内外研究进展与对比智能制造技术是当今世界制造业发展的重要方向，它通过集成传感器、信息技术和各种控制系统，实现了智能化、高效化和灵活化的生产过程。

本文将重点探讨智能制造技术在国内外的研究进展，并进行对比分析。

一、国内智能制造技术研究进展在国内，智能制造技术的研究与应用得到了广泛的重视和支持。

尤其是在中国制造2025的战略引领下，智能制造技术的研究取得了显著进展。

（段落1）首先，国内智能制造技术的研究涉及到多个领域，如机器人技术、物联网技术、人工智能等。

这些领域的交叉与融合，极大地推动了智能制造技术的发展。

例如，深度学习和自动控制技术的结合，使得机器人具备了更强的智能化和自主性能，可以在复杂环境下自主完成各种任务。

（段落2）其次，国内智能制造技术的研究重点在于提高生产效率和降低成本。

通过引入自动化设备和智能化系统，可以实现生产过程的高度自动化和灵活化，有效提高了生产效率。

同时，智能制造技术联网系统的应用，可以实时监控生产过程中的各项指标，及时调整和优化生产工艺，降低了生产成本。

（段落3）此外，国内智能制造技术的研究还注重了产品质量和可靠性的提升。

通过智能化的质量监控和检测系统，可以实时掌握产品质量情况，并及时采取措施进行纠正和改善，提高产品的合格率和可靠性。

二、国外智能制造技术研究进展与国内相比，国外智能制造技术的研究发展较早，并且取得了较为显著的成果。

以下介绍国外智能制造技术的研究进展与特点。

（段落1）首先，国外智能制造技术在机器人技术的领域表现出色。

例如，日本在机器人技术方面取得了重大突破，其机器人在制造业的应用已经非常广泛，不仅可以代替人力完成单一性重复动作，还可以进行复杂的装配和搬运工作。

（段落2）其次，国外智能制造技术注重产品个性化定制。

通过3D 打印技术和柔性制造系统的应用，可以根据客户需求实现产品的个性化定制生产，有效提高了产品的市场竞争力。

（段落3）此外，国外智能制造技术在虚拟仿真和智能决策方面也取得了重要进展。

人工智能在智能制造中的应用及发展趋势

人工智能在智能制造中的应用及发展趋势人工智能是当今科技领域最炙手可热的话题之一。

随着科技的不断发展，人工智能已经开始渗透到各个领域，并在智能制造中逐渐发挥着重要作用。

下面将探讨人工智能在智能制造中的应用及发展趋势。

一、智能制造概念及发展智能制造是指利用信息技术和智能化技术实现制造领域的全面智能化和高效化。

通过智能化技术，可以实现在制造过程中的自动化、智能化和网络化，提高生产效率和产品质量。

二、人工智能在智能制造中的应用人工智能在智能制造中具有广泛的应用场景。

首先是在生产过程中，人工智能可以实现生产线的自动化控制，提高生产效率。

其次是在质量检测中，人工智能可以通过机器学习算法进行产品的质量检测和分类。

此外，在供应链管理、智能仓储和智能物流等方面也有着重要的应用。

三、人工智能技术在智能制造中的四大支柱人工智能在智能制造中主要有四大支柱技术，包括机器学习、神经网络、自然语言处理和计算机视觉。

这些技术的不断发展和应用，推动了智能制造的快速发展。

四、智能工厂的建设智能工厂是智能制造的核心，是利用先进的信息技术和智能化技术实现生产自动化和智能化的工厂。

通过建设智能工厂，可以提高工厂的生产效率和产品质量，降低生产成本。

五、全球智能制造市场的发展状况全球智能制造市场近年来呈现快速增长的趋势。

据统计，智能制造市场规模逐年扩大，预计未来几年仍将保持高速增长。

各国政府和企业也在积极推动智能制造的发展。

六、智能制造在各行业的应用智能制造不仅在传统制造业中有着广泛的应用，还在金融、医疗、农业等各行业展开应用。

通过智能制造技术，可以提高各行业的生产效率和服务质量，实现产业升级和转型。

七、人工智能在智能制造中的挑战虽然人工智能在智能制造中有着广泛的应用前景，但也面临着一些挑战。

例如，数据安全问题、技术标准统一、人才短缺等问题都需要解决。

八、未来人工智能在智能制造中的发展趋势随着人工智能技术的不断发展和应用，未来智能制造将呈现出更加智能化、柔性化和高效化的趋势。

了解电脑硬盘的SMART技术

了解电脑硬盘的SMART技术SMART（自我监测、分析和报告技术）是一种用于硬盘驱动器的监测和诊断功能，可以帮助用户及时了解硬盘的健康状况，以便采取预防措施或及时更换硬盘。

在本文中，我们将探讨SMART技术的背景、原理和作用，以及如何利用SMART工具来监测和维护硬盘。

一、SMART技术的背景介绍SMART技术是由硬盘制造商引入的一项先进功能，旨在提供硬盘驱动器的自我监测和预警机制。

在过去，当硬盘出现问题时，用户可能无法及时发现，直到硬盘彻底失效或丢失重要数据。

SMART技术的引入旨在改变这一现状，提供更准确、及时的硬盘健康状况报告。

二、SMART技术的原理SMART技术基于硬盘驱动器内置的传感器和自检功能，通过监测多个参数和指标来评估硬盘的健康状况。

这些参数包括温度、旋转速度、读写错误率、寻道时间、驱动器使用时间等。

通过对这些参数进行监测和分析，SMART技术可以提前预测硬盘故障的可能性，并发送警报，提醒用户备份数据或更换硬盘。

三、SMART技术的作用1. 提前发现硬盘问题：SMART技术可以对硬盘进行实时监测，当硬盘出现异常时，如读写错误率过高或温度超过安全范围，SMART会向用户发送警报。

通过这些警报，用户可以及时采取措施来避免数据丢失或硬盘故障。

2. 数据备份和恢复：SMART技术不仅可以监测硬盘的健康状况，还可以提供有关硬盘寿命和剩余寿命的报告。

这使用户能够根据硬盘的状态来制定数据备份计划，以防止重要数据的丢失。

此外，在更换硬盘时，SMART技术也可以帮助用户进行数据的迁移和恢复。

3. 保证系统稳定性：硬盘是计算机系统的关键组件之一，其稳定性对于计算机的性能和可靠性至关重要。

通过使用SMART技术，用户可以及时检测硬盘的健康状况，预防潜在的硬盘故障，从而确保计算机系统的稳定性和可靠性。

四、如何利用SMART工具进行硬盘监测和维护1. 安装SMART工具：SMART技术通常由硬盘制造商提供相应的软件工具，用户可以从官方网站下载并安装这些工具。

学习smart总结

学习 Smart 总结引言随着技术的不断发展，智能化已经成为当下热门的话题。

Smart（智能）作为一种新兴的学习方式，旨在通过智能技术的应用，提高学习效果和效率。

在我个人的学习过程中，我逐渐探索并应用了Smart 学习方法，并取得了一些显著的成果。

本文将对我学习 Smart 的经历进行总结，并分享一些关键的心得和建议。

Smart 是什么？Smart 是一种智能学习方法，通过利用现代科技和计算机技术，结合认知科学和心理学原理，提供个性化和智能化的学习体验。

它可以根据学习者的特点和需求，提供个性化的学习内容和学习路径，从而更好地促进学习者的自主学习和深度理解。

Smart 学习方法通常使用一些智能工具和技术，例如人工智能、机器学习和大数据分析等，来辅助学习过程。

这些智能工具可以根据学习者的输入和反馈，自动调整学习内容和进度，提供即时的反馈和建议，并做出个性化的学习推荐。

我的 Smart 学习经历1. 制定清晰的学习目标在开始学习之前，我首先确立了明确的学习目标。

这样可以帮助我更好地了解自己的需求，并加强学习动力。

例如，想要提高编程能力，我会将目标设定为完成一系列编程挑战项目。

2. 寻找适合的学习资源和工具Smart 学习方法强调个性化学习体验，因此选择适合自己的学习资源和工具非常重要。

我会通过在线教育平台、学习应用程序和学术论文等渠道，寻找高质量的学习资源和工具。

3. 制定学习计划和时间管理为了有效地进行Smart 学习，我会制定详细的学习计划，并合理安排学习时间。

制定计划可以帮助我合理规划学习内容和任务，而时间管理可以帮助我高效利用时间，充分利用智能工具提供的学习反馈和建议。

4. 利用智能工具辅助学习智能工具在 Smart 学习中扮演着重要的角色。

我会利用智能学习应用程序和在线学习平台等工具，记录学习进展、获取学习反馈，并根据反馈进行调整和改进。

例如，如果一道题目反复错了，智能工具会自动调整学习计划，并提供针对性的指导。

smart原理的应用

smart原理的应用1. 引言智能化技术在各个领域得到广泛应用，其中的一个重要原理就是smart原理。

smart原理是指通过感知、决策和对环境的适应来实现智能化的能力。

本文将介绍smart原理的应用及其在不同领域中的具体应用案例。

2. 应用领域smart原理的应用涵盖了多个领域，包括智能家居、智能交通、智能医疗、智能制造等。

下面我们将分别介绍这些领域中smart原理的应用情况。

2.1 智能家居•智能家居通过感知居住环境中的温度、湿度、光照等信息，实现智能化的控制。

例如，智能空调可以根据室内温度的变化自动调节温度，提供更舒适的居住环境。

•智能家居还可以通过对电器的远程控制，实现远程开关灯、调节窗帘等功能，提高家居的便捷性和舒适性。

2.2 智能交通•智能交通系统通过感知交通状况、分析车辆流量等信息，实现智能化的交通管理。

例如，智能交通信号灯可以根据不同道路的车流量自动调整绿灯时间，提高交通效率。

•智能导航系统可以根据实时交通信息，选取最优的路线，帮助驾驶员避开拥堵路段，提高出行效率。

2.3 智能医疗•智能医疗通过感知患者的生理参数、分析医学影像等信息，实现智能化的健康管理。

例如，智能医疗设备可以实时监测患者的心率、血压等指标，及时发现异常情况并进行预警。

•智能医疗还可以通过对患者的健康数据进行分析，提供个性化的健康管理方案，帮助患者更好地管理自己的健康。

2.4 智能制造•智能制造通过感知生产过程中的各种参数和指标，实现智能化的生产管理。

例如，智能工厂可以实时监测设备状态、生产车间的温湿度等信息，及时发现异常情况并进行调整。

•智能制造还可以通过对生产数据的分析，优化生产过程，提升生产效率和质量，降低生产成本。

3. 应用案例下面介绍几个智能化领域中的应用案例，展示smart原理的具体应用情况。

3.1 案例一：智能家居智能家居系统通过感应居住者的到达和离开家的时间，自动控制家中的电器设备的开关和调节。

当居住者离开家时，系统可以自动关闭灯光、关闭电视等，实现节能和便利。

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３ＳＭＡＲＴ技术应用领域
ＳＭＡＲＴ技术应用广泛，近年与显微解剖法结合，使得对来源有限的组织研究成为可能；随着与其它基因ＭＡＲＴ技术已然分析技术联合，更发挥出巨大潜力。Ｓ成为研究基因的一个得力手段，在于生命科学还有待进一步发展，主要包括五个方面的内容：
［２］
采用ＳＭＡＲＴ技术将少至２５ｎｇ的ｍＲＮＡ或者５０ｎｇ的ＴｏｔａｌＲＮＡ制备成可大量扩增的ｃＤＮＡ，合成的ｃＤＮＡ可以直接进行对数扩增或者线性扩增，可以作为定量ＰＣＲ的模板，可以直接用于Ｃｌｏｎｔｅｃｈ的抑制性消减杂交，可以构建ｃＤＮＡ文库或者做反向Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交（ＶｉｒｔｕａｌＮｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ），可以用于芯片检测的ｃＤＮＡ探ＮＡ样本时做虚拟的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ针制备，以及在有限的Ｒ杂交，用来代替标准的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交。
１］ ① 定向克隆［。
２ＳＭＡＲＴ技术流程
具体流程如图同主要包括三个方面的内容：１）ｍＲＮＡ的制备：从总ＲＮＡ中纯化ｍＲＮＡ的方法是（Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）? 纤维素柱层析法。总ＲＮＡ通过柱时，ｍＲＮＡ３ ′ 端ｐｏｌｙ（Ａ）与纤维素上连接的Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）链结２）ｃＤＮＡ第一链合而吸附于柱上，从而被分离出来。（的合成：在合成ｃＤＮＡ的反应中事先加入的３ ′ 末端带
５］郑萍萍等［采用ＳＭＡＲＴ技术，构建了黑斑蛙（Ｒａｎａ
ｎｉｇｒｏｍａｃｕｌａ２质粒，挑选阳性克隆进行ＰＣＲ检测，其插入片段平均长度约为１．０ｋｂ。挑取阳性克隆分别从５ ′ 端和３ ′ 端进行测序，得到一长约ｌ１７１ｂｐ的序列。经序列分析可知，该序列含有完整的编码框，编码３０５个氨基酸，是一全长ｃＤＮＡ序列。
２００８，２８（６）
刘卫辉等：ＳＭＡＲＴ技术及其应用进展
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麻烦，而且能得到全长的ｃＤＮＡ５ ′ 端。另一方面，只要少至２５个碱基的已知序列即可钓出全长的ｃＤＮ８］
１ＳＭＡＲＴ法的原理
ＳＭＡＲＴ技术的全称是ＳｗｉｔｃｈｉｎｇＭｅｃｈａｎｉｓｍＡｔ５ ′ ｅｎｄｏｆｔｈｅＲＮＡＴｒａｎｓｃｒｉｐｔ，其名称反映了该技术的精ｏｗｅｒｓｃｒｉｐｔＴＭＲＴ和限制髓，它充分利用了反转录酶Ｐ性内切酶ＳｆｉＩ的特性（流程如图１）。该方法中全长ｃＤＮＡ的获得是借助ＰｏｗｅｒｓｃｒｉｐｔＴＭＲＴ的末端转移酶ＤＮＡ第一、二链活性来实现的。此外，实验设计时，在ｃ引物的５ ′ 端引入了ｓｆｉＩ（Ａ）和ＳｆｉＩ（Ｂ）位点，因此只需对目的ｃＤＮＡ进行单酶切（ＳｆｉＩ酶切），即可实现对其
４］一个高效的方式。同样地，ＤｉａｎＸｉａｎｇＬｉ等［通过抑 ?
制性削减杂交伴随ＳＭＡＲＴｃＤＮＡ方法，克隆了来自于被细菌感染的中国虾的血细胞的假定的邻? 甲基转移酶基因（ＯＭＴ），从而证明了构成性表达与细菌感染的相ＭＴ存在于形形色色的器官中，在植物和动物关性。Ｏ生长、发展、再生和防御方面起到重要作用，并且在人情绪变化和疾病状况下也被涉及。３．２ＳＭＡＲＴｃＤＮＡＬｉｂｒａｒｙＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ利用ＳＭＡＲＴ技术建库，可以得到全长的ｃＤＮＡ文ｄａｐｔｏｒ的连接。目前，研究人员已经利库，也不需要Ａ用此种方法，在不ｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，２８（６）：１２９～１３２
ＳＭＡＲＴ技术及其应用进展
刘卫辉窦科峰（第四军医大学西京医院西安７１００３２）
摘要ＳｗｉｔｃｈｉｎｇＭｅｃｈａｎｉｓｍＡｔ５ ′ ｅｎｄｏｆｔｈｅＲＮＡＴｒａｎｓｃｒｉｐｔ（ＳＭＡＲＴ）技术是一项应用于生物科学研究领域的方法，典型特点是能保证全长ｃＤＮＡ的获得。目前尚未见有关该技术的综述发表，系统阐述了ＳＭＡＲＴ的原理和方法，综述了ＳＭＡＲＴ技术的最新进展。ＳＭＡＲＴ技术应用领域在不虽然ＳＭＡＲＴ技术是非常有效和实用的一项技术，但同时也存在一定问题需要改进。关键词ＳＭＡＲＴ基因进展应用
图１ＳＭＡＲＴ技术流程图Ｆｉｇ．１ＴｈｅｐｒｏｔｏｃｏｌｏｆＳＭＡＲＴ
６］用ＳＭＡＲＴ技术，通过同源重组的方法，在李静琪等［
酵母菌株Ｙ２× １０，重组子不同插入片段大小在
中图分类号Ｑ８１９真核细胞的ｍＲＮＡ在加工过程中有一个比喻为ＲＮＡ的３ ′ 末端都带有一段 “ 穿鞋戴帽” 的过程，因此ｍＰｏｌｙＡ列各不相同，如何获得全长的是由于ｃｃＤＮＡ，如何扩增由微量的ｍＲＮＡ逆转录得到ｃＤＮＡ文ＤＮＡ（即库，如何利用已知片段序列得到全长的ｃＲＡＣＥ），曾经是令人困扰的问题。常见的做法是在合ＤＮＡ的双链后在两端连上接头，利用已知的接头序成ｃ列再进行扩增，或者是利用末端转移酶在双链ｃＤＮＡ的３ ′ 末端加上一连串的Ｇ或者Ｃ（或者Ａ／Ｔ），再通过补齐粘末端，利用已知的两头序列进行扩增。但是，这些方法在不同程度上存在一些问题，比如接头的连接效率非常有限，会导致部分信息的丢失，再加上这些方法需要多次用不同的酶处理有限的样品，需要经过反复的纯化，会损失很多有用的信息，特别是少量样品中的低丰度信息，很大程度上会影响结果的准确性。另外，ＲＮＡ容易部分降解，很难确定得到的ｃＤＮＡ是由于ｍ否就是全长的ｃＤＮＡ，还是ｃＤＮＡ的片段。ＳＭＡＲＴ技术的出现是一个新的里程碑。ＳＭＡＲＴ技术是利用逆转录酶内源的末端转移酶活性，只要单管，一步即可完成，不需要额外的ｃＤＮＡ抽提纯化，或者额外的酶反应，只需要少至２５ｎｇ的ｍＲＮＡ或者５０ｎｇ的ＴｏｔａｌＲＮＡ就可０１２９修回日期：２００８０３１７Ｃ０３０３０３０３）国家自然科学基金资助项目（电子信箱：ｄｏｕｋｆ＠ｆｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ通讯作者，
ＤＮＡ能够代表原有样品中的ｍＲＮＡ重要的是得到的ｃ的丰度，可以应），以及用于芯片检测的已知序列钓全长ｃｃＤＮＡ探针的扩增等。
１２］高１０倍、稳定性较原有的试剂提高３０％。Ｈａｌｌ等［研
ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｌｏｎｔｅｃｈ．ｃｏｍ
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中国生物工程杂志ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
３．１ＳＭＡＲＴＰＣＲｃＤＮＡ
Ｖｏｌ．２Ｇ）的ＳＭＡＲＴ引物，以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１２１８为引物， ? ｍＲＮＡ模板在到达ｍＲＮＡ的５ ′ 末端时碰到真核ｍＲＮＡ特有的“ 帽子结构” ，即甲基化的Ｇ时会连续在合成的ｃＤＮＡ末端加上几个（ｄＣ），ＳＭＡＲＴ引物的Ｏｌｉｇｏ（ｄＧ）与合成ｃＤＮＡ末端突出的几个Ｃ配对后形成ｃＤＮＡ的ＭＡＲＴ引物延伸模板，逆转录酶会自动转换模板，以Ｓ作为延伸模板继续延伸ｃＤＮＡ单链直到引物的末端。３）通过长距离ＰＣＲ（ＬＤ－ＰＣＲ）扩增ｃＤＮＡ：以事先加（入的３ ′ 末端带Ｏｌｉｇｏ（ｄＧ）的ＳＭＡＲＴ引物为５ ′ 端引物，以第一链３ ′ 末端Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１２～１８引物的互补序列为３ ′ 端引物，在ＤＮＡ聚合酶的催化下，互补合成ｃＤＮＡ的第二链；合成第二链后可以利用通用引物进行扩增。由于有５ ′ 帽子结构的ｍＲＮＡ才能利用这个反应得到能扩增的ｃＤＮＡ，扩增得到的ｃＤＮＡ就是全长ｃＤＮＡ，且使全长ｃＤＮＡ得到大量的复制和扩增，因此可消除基因ＮＡ和无ｐｏｌｙ（Ａ）的ＲＮＡ，并且允许用很微量的总组ＤＲＮＡ或ｍＲＮＡ构建高比例全长ｃＤＮＡ。
３］Ｗａｎｇ等［用从显微解剖的组织获得的ＲＮＡ通过
ＳＭＡＲＴｃＤＮＡＰＣＲ技术扩增，进而通过抑制性削减杂交（Ｓ剖的ＳＭＡＲＴｃＤＮＡＰＣＲＳＳＨ，用 ? 或侵袭性进展的基因，是来鉴定可能涉及肿瘤发生和／