槲皮素,铜离子对葡萄糖苷酶的抑制作用
槲皮素药理作用及相关总结
现代医学认为槲皮素是止咳、平喘、降压的有效成分抗炎作用:当槲皮素的浓度为40μmol/ L 时,其恢复作用达到最大。
说明槲皮素对LPS(细菌脂多糖)延迟PMN自发性凋亡的效应产生了抑制作用,减轻了因预激因子活化PMN而加重的炎症反应,部分揭示了槲皮素的抗炎作用机制。
槲皮素通过对抗LPS 对PMN 黏附分子CD62L ,CD11b/CD18 的表达的影响,抑制LPS 诱导的中性粒细胞活化效应,从而阻止PMN 对血管内皮细胞的黏附,减少炎症细胞向炎症局灶的浸润。
这里的中性粒细胞(PMN)是最重要的炎性细胞,对炎症的发生发展和转归起到了关键作用在发挥防御作用时,PMN是一把“双刃剑”,其胞浆内的细胞毒性物质既可杀伤外来入侵的病原微生物,也可造成自身组织的损伤[3]。
PMN自发性凋亡则是炎症反应的主要收敛机制之一,这种机制是避免炎症反应扩大化,减少自身组织细胞损伤的最佳方式[4]。
止泻：肠道感染时，肠道受病原微生物及其毒素刺激，化学性炎症介质分泌增加，乙酰胆碱分泌增多，作用于肠道胆碱能受体，使肠道蠕动亢进，水、电解质、食物中的营养物质等在肠道停留时间缩短，来不及完全吸收而被排出体外，引起腹泻[27]。
槲皮素能够抑制离体豚鼠回肠乙酰胆碱的释放[28]. 槲皮素具有一定的抗炎活性，通过改变腹腔毛细血管和肠粘膜的通透性，减少肠道水分和电解质的分泌，最终达到止泻的目的[27]。
槲皮素具有较强的抗氧化作用，能够清除肠道内氧自由基[29]，槲皮素抗炎活性与其较强的抗氧化作用有关[27]。
槲皮素体外抗氧化作用主要通过直接清除活性氧自由基，抑制脂质氧化损伤，螯合金属离子，抑制DNA氧化损伤；体内抗氧化作用主要通过保护血管内皮细胞、提高一氧化氮水平和外周血总抗氧化力等方式发挥抗氧化作用[30]。
全身炎症反应综合症(SIRS)是导致多脏器功能衰竭综介症(MODS)根本原因,肺脏是MODS 时最易受损靶器官，ALI发生、发展与大量促炎因子和其他炎症介质失控性释放有关，而促炎细胞因子是SIRS触发和级联效应关键因素。
葡萄酒中的槲皮酮的保健功能
《广州食品工业科技》Guangzhou Food Science and Technology Vol.20 No.2(总80)中图分类号：ＴＳ２６；文献标识码：Ａ；文章篇号：１００７－２７６４（２００４）０２－００１４０－０５５ 葡萄酒中的槲皮酮的保健功能 裴鹰，钱洪 （李锦记（广州）食品有限公司，广州５１００００） 摘 要：槲皮酮是葡萄酒中的类黄酮物质之一，具有较强的抗氧化性，能抑制冠心病、动脉粥样硬化、消除自由基、抗癌和抗炎症的作用。
本文对葡萄酒中槲皮酮的含量，结构，保健功能以及其作用机理进行了介绍。
关键词：葡萄酒，槲皮酮，保健功能 １ 葡萄酒中槲皮酮（Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）的含量 槲皮酮属于类黄酮化合物，是葡萄酒中的活性物质之一，它广泛的存在于多种植物之中，如葡萄、橄榄、茶叶和洋葱中都含有槲皮酮。
槲皮酮在葡萄酒中的含量因酒的产地不同而异，José等［２］发现葡萄牙大陆和Azorer岛的12种葡萄酒中的槲皮酮的平均含量分别是4.38mg/L和5.57mg/L，大陆的9种葡萄酒中含量从2.39mg/L到7.62mg/L不等，Azorer岛的3种葡萄酒相差较大，最小值为1.81mg/L，最大值为11.95 mg/L。
红葡萄酒和白葡萄酒中槲皮酮的含量差别很大,Teiss- edre等［３］测得红葡萄酒中槲皮酮含量为7.7mg/L，而白葡萄酒中几乎检测不到。
引起这些差异的原因主要有三个：葡萄品种的不同、葡萄酒酿化期间发生的一系列的物理化学变化也会影响槲皮酮的含量。
２ 槲皮酮的保健功能 2.1 抗氧化功能抗氧化性是槲皮酮主要的活性之一，也是研究得最多的性质之一。
它能抑制由铜，铁以及AAPH引起的低密度脂蛋白（low-density lipoprotein，LDL）的氧化，对低密度脂蛋白起到保护作用［６］，并能降低或者防止紫外线对酶的破坏［４］。
Anne等［７］比较了槲皮酮、儿茶酚、花青素等黄酮物质对低密度脂蛋白氧化的抑制作用，并对它们的化学结构做了分析。
槲皮素的分子量
槲皮素的分子量槲皮素（Quercetin）是一种天然存在于植物中的黄酮类化合物，属于多酚类化合物。
其分子量是302.24克/摩尔。
槲皮素广泛存在于各类食物中，如蔬菜、水果、茶叶等，具有丰富的生理活性和药理学效应。
槲皮素具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、抗血小板凝聚等多种生理活性。
首先，槲皮素具有强大的抗氧化活性。
它可以通过清除自由基和抑制氧化酶的活性，保护细胞免受氧化损伤。
其次，槲皮素还具有抗炎作用，可以抑制多种炎症介质的释放，减轻炎症反应。
此外，槲皮素还具有抗肿瘤作用，可以抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭，促进肿瘤细胞凋亡。
槲皮素还具有调节免疫系统的功能，可以增强机体的免疫力。
研究发现，槲皮素可以调节免疫细胞的活性和功能，增强免疫细胞对病原微生物的识别和清除能力。
此外，槲皮素还可以抑制过敏反应，减轻过敏症状。
研究表明，槲皮素可以抑制过敏介质的释放，减少过敏症状的发生。
除了具有多种生理活性外，槲皮素还具有一定的药理学效应。
研究发现，槲皮素可以抑制血小板的凝聚和血栓形成，具有抗血栓作用。
此外，槲皮素还可以降低血脂，预防心血管疾病的发生。
研究还发现，槲皮素还具有抗糖尿病和抗肥胖作用，可以降低血糖和体重。
由于槲皮素具有如此丰富的生理活性和药理学效应，因此被广泛应用于医药和保健品领域。
目前，槲皮素已经被用作一种药物，用于治疗一些慢性疾病，如心血管疾病、肿瘤和炎症性疾病等。
此外，槲皮素还被广泛添加到保健品中，用于增强免疫力、抗衰老和预防疾病。
槲皮素是一种具有丰富生理活性和药理学效应的天然物质。
它具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、抗血小板凝聚等多种作用，可以保护细胞免受氧化损伤，减轻炎症反应，抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭，增强免疫力，抑制过敏反应，预防心血管疾病和糖尿病等。
因此，槲皮素在医药和保健品领域具有广阔的应用前景。
荞麦花总黄酮和槲皮素对α-葡萄糖苷酶活性的影响
清楚 。因此 ， 我们 在 前期 工作 基础 上 ， 荞 麦花 总 仪 测 定 ５ ５ ｍ 下 吸 光 度 值 。 从 ０ｎ 黄酮对 一葡萄糖苷 酶活性 的抑制作 用方面探讨其 降 ２ ３ 大 鼠灌 胃麦芽糖 后血 糖 峰值预 测 首 先用 １ ． ０只正 常大 鼠 ， 禁食 １ ｈ ２ 血糖的可能机制。 后 ， 胃麦芽糖 （ ／ ｇ ， 别于 ０ ３ ，０，０ １０ｍ ｎ取尾尖血测血糖 ， 灌 ２ｇｋ ）分 ，０ ６ ９ ，２ ｉ 确
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荞 麦（ ｕｋ ｈａ） ｂｃ ｗ ｅｔ为蓼科本草植物 ， 其全 草含较 反 应 。 高的黄酮类化合物 ， 我们前期 研究 发现荞麦 花总 黄酮 ２２ 荞 麦花 总黄 酮、 ． 槲皮素对 ｄ一 萄糖 苷酶 的抑制 活性 反应体 系 中分 葡
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槲 皮 素在 体 内外 对 一葡 萄糖 苷 酶 的活 性 均 有 明显 的抑 制 作 用 ， 能 是 其 降 血 糖 机 制 之 一 。 可
关 键词 ： 一葡萄糖苷酶 ； 荞麦花总黄酮 ； 槲皮 素
中图分 类号 ： ２ ５ ５ １ ８ ． ： １
文献标 识码 ： Ｂ
文章编 号 ：０ ８ ８ ５ ２ １ ）５ １３ ．２ １０ － ０ （ ０ ０ ０ —１５０ ０
槲皮素与原花青素对淀粉消化酶的抑制作用
槲皮素与原花青素对淀粉消化酶的抑制作用淀粉是人体中最主要的能量来源之一，但是过多的消耗淀粉会导致肥胖和糖尿病等健康问题。
因此，寻找一种有效的方法来抑制淀粉的消化过程，成为了当前研究的热点之一。
槲皮素和原花青素是两种天然的多酚类化合物，具有广泛的生物活性。
近年来，越来越多的研究表明，槲皮素和原花青素可以通过抑制淀粉消化酶来减缓淀粉的消化过程。
淀粉消化酶是指参与淀粉消化过程的酶类，包括α-淀粉酶、β-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶等。
这些酶类在肠道中将复杂的淀粉分解成简单的糖类，使其能够被人体吸收利用。
然而，如果淀粉消化酶过度活跃，就会导致过多的糖分进入血液循环系统，从而增加肥胖和糖尿病等慢性疾病的风险。
槲皮素和原花青素可以通过多种途径抑制淀粉消化酶的活性。
首先，它们可以与淀粉消化酶结合，阻碍其与淀粉底物的结合，从而降低酶类的催化效率。
其次，它们还可以影响酶类的构象和稳定性，使其失去催化活性。
此外，槲皮素和原花青素还可以调节肠道内菌群的组成和代谢产物的生成，从而影响淀粉消化过程。
一些研究表明，槲皮素和原花青素对淀粉消化酶的抑制作用与其化学结构有关。
例如，槲皮素中的羟基基团可以与酶类中的氨基酸残基形成氢键和范德华力相互作用，从而影响酶类的催化活性。
同样地，原花青素中的苯环和羟基基团也可以与酶类发生相互作用，并影响酶类的构象和稳定性。
除了对淀粉消化酶的抑制作用外，槲皮素和原花青素还具有其他生物活性。
例如，它们可以抗氧化、抗炎、抗癌、降低血脂等。
因此，在应用槲皮素和原花青素进行抑制淀粉消化酶时，还需要考虑到它们对其他生理功能的影响。
总之，槲皮素和原花青素是两种天然的多酚类化合物，具有广泛的生物活性。
它们可以通过多种途径抑制淀粉消化酶的活性，并在一定程度上减缓淀粉的消化过程。
然而，在应用槲皮素和原花青素进行抑制淀粉消化酶时，还需要进一步探索其安全性和有效性，并考虑到它们对其他生理功能的影响。
槲皮素对药物代谢酶调控作用的研究进展_杨婷玉
槲皮素的功能主治
槲皮素的功能主治1. 槲皮素简介槲皮素（Quercetin）是一种天然的黄酮类化合物，广泛存在于植物中，如苹果、洋葱、葡萄和绿茶等。
它具有丰富的生物活性和药用价值，被广泛研究并应用于医学和保健领域。
2. 槲皮素的功能槲皮素具有多种功能，主要包括：2.1 抗氧化作用槲皮素是一种强效的自由基清除剂，具有抗氧化作用。
它可以中和自由基，降低氧化应激和炎症反应，保护细胞免受损害。
槲皮素的抗氧化作用可以延缓衰老过程，预防各种慢性疾病的发生。
2.2 抗炎作用槲皮素具有抗炎作用，可以抑制炎症因子的产生和炎症反应的发生。
它可以减轻关节炎、哮喘和过敏等炎症性疾病的症状，并有助于促进伤口的愈合和组织修复。
2.3 抗肿瘤作用槲皮素具有抗肿瘤作用，可以抑制肿瘤细胞的增殖和扩散。
研究表明，槲皮素可以通过多种途径抑制肿瘤细胞的生长，诱导肿瘤细胞凋亡，并阻断肿瘤血管的形成，从而抑制肿瘤的发展和转移。
2.4 降脂作用槲皮素具有降脂作用，可以调节血脂代谢，降低血浆胆固醇和三酰甘油水平。
它可以增加胆固醇的排泄，并抑制胆固醇的合成和吸收，从而减少血管壁的脂质沉积，预防动脉粥样硬化等心血管疾病的发生。
2.5 改善免疫功能槲皮素对免疫系统具有调节作用，可以增强免疫细胞的活性和免疫球蛋白的产生。
它可以提高机体的抵抗力，增强抗病能力，预防感染和疾病的发生。
3. 槲皮素的主治疾病槲皮素在中医药传统中被广泛应用于各种疾病的治疗，主要包括以下方面：3.1 心血管疾病槲皮素可以降低血脂，预防动脉粥样硬化和冠心病的发生。
它还具有抗血小板聚集和抗凝血作用，可以预防心肌梗死和脑卒中。
3.2 抗过敏槲皮素具有抗过敏作用，可以减轻过敏性鼻炎、过敏性皮炎等过敏性疾病的症状。
它可以抑制过敏反应的发生，减少组胺的释放和炎性细胞的聚集。
3.3 抗肿瘤槲皮素可以抑制肿瘤细胞的生长和转移，诱导肿瘤细胞凋亡。
它可以作为辅助治疗肿瘤的药物，提高化疗和放疗的效果，减少毒副作用。
芦丁、槲皮素对α-葡萄糖苷酶活性抑制研究
芦丁、槲皮素对α-葡萄糖苷酶活性抑制研究
王斯慧;黄琬凌;陈庆松;曾里;曾凡骏
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2012(031)001
【摘要】为了研究苦荞黄酮降血糖作用的机理,以及苦荞黄酮中产生降血糖作用的主要成分,故分别研究芦丁和槲皮素的降血糖功能.结果表明芦丁和槲皮素对α-葡萄糖苷酶抑制成阳性,表明芦丁溶液和槲皮素溶液都具有辅助降血糖的功能.芦丁和槲
皮素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用与阳性对照物阿卡波糖相比,均优于阿卡波糖.芦丁溶液和槲皮素溶液、阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度分别为0.061mg/mL、0.055mg/mL、0.52mg/mL.
【总页数】3页(P133-135)
【作者】王斯慧;黄琬凌;陈庆松;曾里;曾凡骏
【作者单位】四川大学轻纺与食品学院,四川成都610065;四川大学轻纺与食品学院,四川成都610065;四川大学轻纺与食品学院,四川成都610065;四川大学轻纺与
食品学院,四川成都610065;四川大学轻纺与食品学院,四川成都610065
【正文语种】中文
【中图分类】TQ925
【相关文献】
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敏;陈华;李永东
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槲皮素，铜离子对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究
一、实验原理
α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)是一类能够从含有α-葡萄糖苷键底物的非还原端催化水解α-葡萄糖基的酶的总称，包括麦芽糖酶、异麦芽糖酶、蔗糖酶等，又叫α-D-葡萄糖苷水解酶。
位于小肠绒毛粘膜细胞刷状缘的α-葡萄糖苷酶在机体的代谢过程中起着十分关键的作用，参与了人体对摄入的淀粉和蔗糖等碳水化合物的消化吸收、糖蛋白和糖脂的加工，与许多因代谢紊乱失调而引起的疾病、神经细胞的分化、肿瘤的转移以及病毒和细菌的感染有密切关系。
因此，通过抑制α-葡萄糖苷酶的活性可以达到治疗某些疾病的目的，研究最为成熟的是治疗Ⅱ型糖尿病的口服降糖药物。
其作用机制为：竞争性抑制位于小肠的各种α-葡萄糖苷酶，使淀粉类分解为葡萄糖的速度减慢，从而减缓肠道内葡萄糖的吸收，降低餐后高血糖。
虽然苯并咪唑衍生物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性鲜有报道，但α-葡萄糖苷酶抑制剂的种类繁多，如多糖类（包括多糖、纤维素、果胶、寡糖等）、黄酮类、生物碱类、皂苷类等。
应用于临床的α-葡萄糖苷酶抑制剂主要是：阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇（图1）。
当前，为了寻找抑制活性更强、副作用更低以及合成步骤更简单的α-葡萄糖苷酶抑制剂，国内外仍不断地致力于开发新型的α-葡萄糖苷酶抑制剂。
图1阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇的结构式
二、实验材料与方法
1. 实验试剂
酵母α-葡萄糖苷酶、对硝基苯酚葡萄糖苷(pNPG)、金属离子和糖类、槲皮素(HPLC分析测试纯的大于98%)、缓冲溶液0.01M的溶质(磷酸钠盐：pH=6.80)
（1）槲皮素溶液的配制：称取3.02mg槲皮素溶解于10ml DMSO中，配成1μmol/ml。
（2）硫酸铜溶液的配制：称取2.50mg五水硫酸铜溶解于10ml蒸馏水中，配成1μmol/ml。
（3）α-葡萄糖苷酶溶液的配制：称取2mg酶，溶解在1ml缓冲液中。
（4）底物的配制：称取对硝基苯酚葡萄糖糖苷（pNPG ）15mg ，溶液在15ml 蒸馏水中。
2. 实验仪器
岛津UV -2501PC 、 江苏海门市麒麟医用仪器厂QL-901型漩涡混合器、 石英比色皿(光径1cm)、可调试移液器、 瑞士Gunt W28恒温水浴锅、 CvberScan pH510型电子数显pH 计。
3. 实验方法
（1）α-葡萄糖苷酶抑制活性的半抑制浓度IC 50测定方法
在1.5mL 的离心管中加入50μl 一定浓度的样品溶液（DMSO 溶解）、10μl α-葡萄糖苷酶溶液（1.00mg/mL ），磷酸盐缓冲液（0.01mol/L, pH=6.80）880μl ，在室温下放置20min 后，加入60μl 对硝基苯酚葡萄糖糖苷（pNPG ）溶液（1.00mg/mL ），迅速混合均匀后测定其在400 nm 处吸光度的时间扫描曲线，由其随时间增长而上升的斜率可反映其反应速率。
以相同体积的空白DMSO 的反应速率为控制速率K 0。
不同浓度槲皮素样品的配制：
样品溶液 （μl ）： 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0（空白） DMSO （μl ）： 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 与缓冲液、酶液培育20分钟，加底物60μl ，混合后400nm 测光吸收随时间变化值。
不同浓度铜离子样品配制：
样品溶液（μl ）： 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0（空白） 缓冲液 （μl ）： 880 885 890 895 900 905 910 915 920 925 930 加入酶液10μl ）后，培育20分钟，加底物60μl ，混合后400nm 测光吸收随时间变化值。
（2）α-葡萄糖苷酶抑制作用类型动力学的测试方法
采用Lineweaver-Burk 作图法判断。
反应速率的测量方法同上。
固定酶和样品浓度，改变底物浓度，得一系列反应速率值，以1/V 对1/[S]作图，即得一条双倒数曲线。
保持酶浓度不变，改变样品浓度，以同样方法得到另外几条双倒数曲线。
根据双倒数作图可确定其为可逆抑制类型，根据双倒数方程可计算α-葡萄糖苷酶的米氏常数K m 和样品对α-葡萄糖苷酶抑制作用的抑制常数K i 。
底物浓度的变化：20μl ，25μl ，30μl ，35μl ，40μl ，45μl ，50μl ，55μl ，60μl 。
建议铜离子浓度：样品固定10μl ，20μl 。
建议槲皮素浓度：10μl ，20μl
三、数据处理
（1）作图法求IC 50值
根据实验结果，将没有加入样品时的酶活力定为100%，那么加入不同浓度样品后的酶活力为相对活力百分数(即残余活力百分数)
%100(%)
i v a v =
⨯
表1 槲皮素抑制活性结果
将相对活力与样品浓度（μmol/L）作图，从图上找出酶相对活力为50%时，样品的浓度，即为IC50值。
去除2个（3号、7号）误差大的数据后作图得：
图2 槲皮素抑制相对活力a-浓度c作图
从图中可以看出，相对活力为50%时槲皮素浓度大约为23μmol/L，即为IC50值。
（2）抑制作用动力学实验作图
表2 抑制作用动力学实验结果
图3 未加槲皮素时1/V -1/[S]模拟图
由图中数据可得模拟方程为：1/V(min)=1531.1/[S] （μmol/L）-1+8.31
图4 槲皮素体积为10μL时1/V-1/[S]模拟图由图中数据可得模拟方程为：1/V(min)=4860.5/[S] （μmol/L）-1+5.46
图5 槲皮素体积为20μL时1/V-1/[S]模拟图
由图中数据可得模拟方程为：1/V(min)=6439.4/[S] （μmol/L）-1+2.35
米氏常数推导如下：
由上图可知：未加槲皮素时Km=1531.1/8.31=184.2 μmol/L
槲皮素体积为10μL时Km=4860.5/5.46=890.2 μmol/L
槲皮素体积为20μL时Km=6439.4/2.35=2740.2 μmol/L
平均值Km=（184.2+890.2+2740.2）/3=1271.5 μmol/L
讨论
本实验测定IC
值时，在去除两个异常值后得到的曲线拟合得较好，说明实验结果较准确。
测50
定槲皮素对α-葡萄糖苷酶的抑制动力学类型时得到的数据误差较大，以此计算的Km值波动也大，这与
Km值只与酶的种类有关，与酶浓度和底物浓度均无关的事实不相符合，其中误差主要与取样时的体积误差、紫外仪的灵敏度限制和样品的浓度误差有关。
四、结论
本实验研究了槲皮素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，测定了其抑制活性IC50值，还研究了槲皮素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用动力学类型，计算了米氏常数，但实验误差较大，实验结果仅供参考。
五、感想
本人在做化学生物学实验时深深体会到它与其它物化、有机、无机实验的不同，最主要的区别就是对加样准确性的要求大大提高，还有就是对实验方法的深刻理解，觉得化生实验的实验方法比其它类型
实验逻辑性、辩证性强得多，因此在化生实验课上可以学到其它实验课无法学习的东西。