物体表面采样及监测标准操作规程
环境卫生学监测采样方法
六、环境卫生学监测结果分析流程
监测频度 医院应对感染高风险部门每季度进行监测；洁净手术部
(室)及其他洁净场所.新建与改建验收时以及更换高效过滤 器后应进行监测；遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时 随时进行监测，并进行相应致病微生物的检测。
注意事项
采样前，应关好门、窗，在无人走动的情况下，静止 10分钟后采样。
四、使用中消毒液染菌量监测
图 104—1 局部百级、周围千级
2、局部千级、周围万级：手术区布放 3 点（对脚布点），周边区布放 6 点（长 边内 2 点，短边内 1 点）（图 104—2）
图 104—2 局部千级、周围万级
3、局部万级、周边十万级：手术区布放 3 点（对角布点），周边区布放 4 点（每 边内 1 点）（图 104—3）
5 10 000 级 100 000 级
手术室
（75 个/m）
（150 个/m）
IV 准洁净
5 个/（30min·90 皿）（175 个/m）
5
300 000 级
手术室
注：1.浮游法的细菌最大平均浓度采用括号内数值。细菌浓度是直接所测的结果，不是沉降 法和浮游法互相换算的结果。
2.I 级眼科专用手术室周边区按 10 000 级要求。 3.表面最大染菌数（单位：个/㎡）推荐采用涂抹法，每次采样面积为 100 ㎡。
100 级 1 000 级
手术室
（5 个/m）
（ 10 个/m）
II 标准洁净 0.75 个/（30min·90 皿） 1.5 个/（30min·90 皿） 5 1 000 级 10 000 级
手术室 （25 个/m）
（50 个/m）
III 一般洁净 2 个/（30min·90 皿） 4 个/（30min·90 皿）
物体表面及手的检测
物品和物体表面消毒效果监测1、采样方法(1）采样时间：消毒处理后医疗操作前。
(2)采样面积：被采表面小于100cm²，时，取全部表面;被采表面大于等于100cm²时，取100cm²。
（3）采样方法：将5cm×5cm 灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液（中和剂＋洗脱液)的棉试子一只，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉试子,剪去手接触部位,将棉试子放入装有10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液(中和剂＋洗脱液)的试管内,在试管上标明科室、检品所在房间和物品或物体表面的名称及采样面积，立即送至检验科细菌室。
若采样面积大于等于100cm²，应连续采样四个点（即采样100cm²）。
2、检验方法（1）细菌总数检测〔cfu /cm²〕：将试管内的棉试子用力振打80次，无菌操作吸取1。
0ml 接种于灭菌平皿内，加入溶化冷至45一48℃的营养琼脂15一18ml,边倒入边摇匀,待凝固后放入 37℃培养箱培养 48h ，计数菌落数 cfu / cm²。
计算：cfu/cm²=平板上菌落数×稀释倍数／采样面积（cm²） ,不规则物品或物体表面报告单位为 cfu／件。
（2）致病菌检测①检测原则：致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。
②金黄色葡萄球菌检测取采样液1.0ml ,接种于 5ml SCDLP 液体培养基中→36℃±1℃增菌 24h→取1白金耳环上述增菌液，在血平板上作划线分离→36℃±℃培养24h→观察菌落特征→鉴定→报告。
③乙型溶血性链球菌检测取样品1.0ml，接种于1％葡萄糖肉汤→37℃增菌24h→取1白金耳环增菌液在血平板上作划线分离→36℃±1℃培养24h→观察菌落→鉴定→报告。
④沙门氏菌属、志贺氏菌属、非发酵菌群等致病菌的检测参照相关检测方法。
物体表面微生物监测标准操作规程
物体表面微生物监测标准操作规程1.目的规范物体表面采样及监测标准操作规程。
2.适用范围2.1医院感染高风险部门，每季度进行检测。
2.2 发生有暴发流行。
3.采样时间潜在污染区、污染区消毒后采样，清洁区根据现场情况确定。
4.职责医院感染管理专职人员或兼职人员应遵守本程序。
5.采样面积被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。
6.采样方法用5 cm×5 cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03 mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1~4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10 ml采样液的试管中送检。
门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样。
若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。
见表（5.5）。
表5.5化学消毒剂的常用中和剂消毒剂相应中和剂浓度（%）含氯消毒剂硫代硫酸钠0.2～1.0复合含氯消毒剂硫代硫酸钠+吐温80+卵磷脂0.2～1.0+2.0+0.3过氧乙酸硫代硫酸钠0.1~0.5过氧化氢硫代硫酸钠+吐温80+卵磷脂0.5～1.0+2.0+0.3碘酊碘伏硫代硫酸钠+吐温80 0.5+2.0甲醛双甲酮+马林 1.0+0.6戊二醛甘氨酸+吐温80 2.0+2.0乙醇吐温80+卵磷脂 3.0+0.3氯已定吐温80+卵磷脂注：配制各种中和剂均使用磷酸盐缓冲液（PBS）为基础溶剂。
7. 检测方法将采样管充分振荡后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40℃~45℃的熔化营养琼脂每皿倾注15ml~20ml；36℃±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。
8.结果计算：8.1规则物体表面物体表面菌落总数计算方法见式（A.2）：物体表面菌落总数(CFU/cm2)= 平均每皿菌落数×洗脱液稀释倍数.........（A.2）采样面积(cm2)8.2小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示。
环境卫生学监测采样方法
照射强度：
普通30 W新紫外线灯辐照强≥90μW/cm2为合格 使用中紫外线灯辐照强度≥70 μW/cm2为合格 30 W高强度紫外线灯的辐射强度≥180 μW/cm2为合格 监测频率：新灯管使用前监测
使用中灯管半年监测一次。
环境卫生学监测采样方法
六、环境卫生学监测结果分析流程
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
采样方法
环境卫生学监测采样方法
结果判定：
洁净手术部和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数符合 ＧＢ５０３３３的要求。
Ⅱ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／１５ｍｉｎ·平皿 Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／５ｍｉｎ·平皿
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
结果判断
灭菌用消毒液的菌落总数应为０ｃｆｕ／ｍｌ 皮肤粘膜消毒液的菌落总数≤１０ｃｆｕ／ｍｌ 消毒用消毒液的菌落总数≤１００ｃｆｕ／ｍｌ
环境卫生学监测采样方法
五、紫外线灯照射强度监测
环境卫生学监测采样方法来自监测方法：环境卫生学监测采样方法
结果判断：
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
2020/11/23
环境卫生学监测采样方法
外科手消毒：
监测的细菌菌落总 数应≤5cfu/cm2
不能检出致病性微生物
环境卫生学监测采样方法
二、物体表面消毒效果监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
医院各种监测方法
监控护士掌握
院感科 2012.11
1.物体表面采样—涂抹法：
▪ 涂抹法：将5cm*5cm的标准规格板，放在被监测物 品表面，用浸一 有无菌生理盐水的棉拭子在规格板内 来回均匀涂抹横竖往返5次，连续采样1-4个规格板 面积，并随之转动棉拭子，剪去手接触部分后，将 面拭子放入盛有5-10ml生理盐水的试管中，门把手 等小型物体则采用棉拭子直接涂抹的方法采样，充 分振摇1min(80次），作适量稀释后，接种于普通 营养琼脂平板上进行计数，然后根据平板上的菌落 数得出物品表面每平方厘米的细菌数。
将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露时间： 5min(15min),顺序：放培养皿从内至外，收培养皿 由外至内，盖好，写好标签（里.中.外）注明采样 时间，立即送检。
6.医疗器械灭菌效果的监测（一）
▪ 1.采样时间：灭菌后，有效期内。 ▪ 2.采样方法：小件物品：直接放入5ml无菌洗脱液内，
立即送检。 ▪ 3.对手术钳.镊子等大的医疗器械在无菌操作下取2
样口用无菌棉签蘸取消毒液仔细消毒采样口处，要 反复冲洗后直接用无菌试管用无菌方法接取。
洁净空气细菌菌落总数监测布点 与标准（一）
▪ 一.洁净空气细菌菌落总数监测布点 ▪ 1.局部百级.周围千级：手术区布放5点（双对
角布点），周边区布放8点（每边内2点）
洁净空气细菌菌落总数监测布点 与标准（二)
▪ 局部万级，周围十万级：手术区布放3点（对 角布点），周边区布放4点（每边内1点）
▪ 2.采样面积及方法 ▪ 被检人五指并拢，用含相应中和剂无菌洗脱液（5ml)
的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦两次， 并随之转动采样棉拭子,减去手接触部位，将棉 ▪ 拭子投入无菌洗脱液中，立即送检。每只手面积按 照30cm²计算.卫生手表准:10cfu/cm²,外科手标准： 5cfu/cm²
物体表面采样及监测标准操作规程
1.目的规范物体表面采样及监测标准操作规程。
2 •适用范围2.1医院感染监控重点科室，每月常规监测。
2.2发生医院感染暴发流行时。
3.职责医院感染管理专职人员或兼职人员遵守本程序。
4程序4.1用5cm^ 5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，要求采用面积》100cm2,连续采样4个。
4.2用浸有无菌0.9%氯化钠（NaCI）采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返涂抹5次，并随之转动拭子，连续采样1〜4规格面积。
4.3剪去手接触部分，将棉拭子放入装有5 mL采样液的试管中送检。
4.4门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体全部表面的方法采样。
4.5计算方式平板上菌落的平均数x采样液稀释倍数2物体表面细菌菌落数（CFU/cm） =采样面积（cm^平板上菌落的平均数x采样液稀释倍数物体表面细菌菌落数（CFU/f牛）=件5.结果判断各类物体表面细菌菌落总数卫生标准参考医学医护人员手的致病菌：i、n类区域致病菌指金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌；川、w类区域致病菌指金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌。
母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌。
母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房医务人员手上，不得检出沙门菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌。
6•注意事项6.1送检时间不得超过6h,若样品保存于O C -4C，则不得超过24h;被采样本面积v 100cm2取全部面积，被采样本面积〉100cm2，取100cm2;若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。
6.2实验结果的计算和判读：除强调认真仔细外，还应注意排除污染情况，当一个平皿计数大于300 CFU/crn且分布均匀时，如果要准确计数则需启用更高稀释度样本接种的培养皿，再进行2计算。
若菌落大于300 CFU/cm且集中于平皿边缘或分布极不均匀时，应考虑有污染，标本废弃，重新米样。
7•参考文献7.1中华人民共和国卫生部.消毒技术规范（2002年版）.20027.2杨华明，易滨.现代医院消毒学.北京：人民军医出版社，2002（注：表格素材和资料部分来自网络，供参考。
医院感染消毒灭菌效果监测评价标准及取样指导
医院感染消毒灭菌效果监测评价标准及取样指导根据《消毒技术规范》的要求，现将我院消毒灭菌效果监测、环境微生学监测的采样方法、结果判定、质控标准等规范如下：第一章环境卫生学监测包括空气、物体表面、医务人员手的监测采样及检查原则：采样应具有一定数量和代表性，采样后必须尽快对样品按要求指标进行检测，送检时间不得﹥6小时，若样品保存在冰箱内送检时间不得﹥24小时。
一、空气监测1.采样时间：消毒处理后，操作前2.采样方法：平板沉降法（1）布点方法：室内面积≤30ｍ²，设内、中、外对角线3点，两端距墙1米；室内面积＞30ｍ²，设东、西、南、北4角及中央5点，其中东、西、南、北均距墙1米。
（2）采样方法：将直径为9cm普通营养琼脂平板在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5米，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5分钟，盖好立即送检。
(3)计算公式：空气细菌菌落总数（cfu/m³）=50000N/（A ×T）式中A为平板面积（cm2）；T为平板暴露时间（min）；N为平均菌落数（cfu）。
（4）注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样。
(5)质控标准：Ⅰ类区域：细菌总数≤10cfu/m3(或0.2cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；Ⅱ类区域：细菌总数≤200cfu/m3(或4cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；Ⅲ类区域：细菌总数≤500cfu/m3(或10cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。
二、医务人员手的监测1.采样时间：在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样。
2.采样面积及方法：手的采样:被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦 2 次(一只手涂擦面积约30cm2)，并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。
物体表面微生物监测标准操作规程
物体表面微生物监测标准操作规程1.目的规范物体表面采样及监测标准操作规程.2.适用范围医院感染高风险部门,每季度进行检测.发生有暴发流行.3.采样时间潜在污染区、污染区消毒后采样,清洁区根据现场情况确定.4.职责医院感染管理专职人员或兼职人员应遵守本程序.5.采样面积被采表面＜100cm2,取全部表面；被采表面≥100cm2,取100cm2.6.采样方法用5 cm×5 cm灭菌规格板放在被检物体表面,用浸有无菌 mol/L磷酸盐缓冲液PBS或生理盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样1~4个规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭子放入装有10 ml采样液的试管中送检.门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样.若采样物体表面有消毒剂残留时,采样液应含相应中和剂.见表.含氯消毒剂硫代硫酸钠～复合含氯消毒剂硫代硫酸钠+吐温80+卵磷脂～++过氧乙酸硫代硫酸钠~过氧化氢硫代硫酸钠+吐温80+卵磷脂～++碘酊碘伏硫代硫酸钠+吐温80+甲醛双甲酮+马林+戊二醛甘氨酸+吐温80+乙醇吐温80+卵磷脂+氯已定吐温80+卵磷脂苯扎溴铵吐温80+卵磷脂注：配制各种中和剂均使用磷酸盐缓冲液PBS为基础溶剂.7. 检测方法将采样管充分振荡后,取不同稀释倍数的洗脱液接种平皿,将冷至40℃~45℃的熔化营养琼脂每皿倾注15ml~20ml；36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数,必要时分离致病性微生物.8.结果计算：规则物体表面物体表面菌落总数计算方法见式：物体表面菌落总数CFU/cm2=平均每皿菌落数×洗脱液稀释倍数.........采样面积cm2小型物体表面的结果计算,用cfu/件表示.9.结果判定I、II类环境：物体表面细菌菌落总数≤5 cfu/cm2.III、IV类环境：物体表面细菌菌落总数≤10 cfu/cm2.参考文献GB15982-2012 医院消毒卫生标准。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1.目的
规范物体表面采样及监测标准操作规程。
2．适用范围
2.1 医院感染监控重点科室，每月常规监测。
2.2 发生医院感染暴发流行时。
3. 职责
医院感染管理专职人员或兼职人员遵守本程序。
4程序
4.1 用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，要求采用面积≥100cm2，连续采样4个。
4.2用浸有无菌0.9%氯化钠（NaCl）采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返涂抹5次，并随之转动拭子，连续采样1～4规格面积。
4.3剪去手接触部分，将棉拭子放入装有5 mL采样液的试管中送检。
4.4门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体全部表面的方法采样。
4.5 计算方式
平板上菌落的平均数×采样液稀释倍数物体表面细菌菌落数（CFU/cm2）＝
采样面积（cm2）
平板上菌落的平均数×采样液稀释倍数物体表面细菌菌落数（CFU/件）＝
件
病菌指金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌。
母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌。
母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房医务人员手上，不得检出沙门菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌。
6.注意事项
6.1送检时间不得超过6h，若样品保存于0℃-4℃，则不得超过24h；被采样本面积＜100cm²取全部面积，被采样本面积＞100cm²，取100cm²；若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。
6.2实验结果的计算和判读：除强调认真仔细外，还应注意排除污染情况，当一个平皿计数大
于300 CFU/cm2且分布均匀时，如果要准确计数则需启用更高稀释度样本接种的培养皿，再进行计算。
若菌落大于300 CFU/cm2且集中于平皿边缘或分布极不均匀时，应考虑有污染，标本废弃，重新采样。
7.参考文献
7.1 中华人民共和国卫生部. 消毒技术规范（2002年版）.2002
7.2 杨华明，易滨. 现代医院消毒学.北京：人民军医出版社，2002
Welcome To Download !!!
欢迎您的下载，资料仅供参考！。