QIAquick-PCR-Purification-Kit中文版
核酸纯化
Code No. 27104 D6943-01 U0588A DP103-02 9760
Price/Kit (RMB) 964 224 676 152 350
Price/rxn (RMB) 19.28 2.24 13.52 3.04 7
RNaseA 冻干粉/室温 液态/室温 冻干粉/室温 液态/室温 液态/-20℃
Y Y Y Y N
Recovery 70~80% 50~80% 70~90% 70~85% 70-90%
Price/reac (RMB)
18.88 4.48 9.6 4.32 7
Fragment Size
70bp~10k 50bp~40k 50bp~20k 100bp~10k 50bp~50k
TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0 (50)
收率
Conclusion：
1.DNA回收率优于或与其它公司相当。
2.与其它公司相比较，价格合理。
DNA片段长度
11
9762市场竞争情况
Product QIAquick Gel Exteaction Kit (50) Gel Extraction Kit(50) NucleoSpin® Gel and PCR clean up TIANgel Mini Purification Kit(50) Company Qiagen Omega MN Tiangen Takara
8
片段回收纯化-9761、9762
片段直接纯化 切胶回收纯化 回收率计算： 9761 9762 TaKaRa MiniBEST DNA Fragment Purification Kit Ver.4.0 TaKaRa MiniBEST Agarose Gel DNA Extraction Kit Ver.4.0
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒大比对
3. 评估方法 • 使用Nanodrop 2000测量OD值
图： 取2ul纯化的质粒DNA上样于1.0%琼脂糖凝胶电泳 分析结果。M: DL5000 DNA Marker. 结果表明，Magen的HiPure Plasmid Micro Kit与其它品 牌对应的产品效果相当，质粒条带完整，超螺旋质粒含量 高。
2. 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒大比对
1. 选择品牌： • Qiagen, QIAquick Gel Extraction Kit , 28704 • Tiagen, 超薄琼脂糖凝胶回收试剂盒,DP208 4. 电泳结果
• Omega, E.Z.N.A. Gel Extraction Kit, D2500-02
1. 选择品牌： • Qiagen, QIAamp DNA Blood Mini Kit, D51104 • Tiagen, 血液基因组提取试剂盒(DP318) 4. 电泳结果
试剂盒回收DNA，然后电泳检测DNA回收效率。结果表明，
Magen的HiPure Gel Pure DNA Micro Kit在小片段和大片段上 有更高的回收率，其余片段则相差不大。
3. 评估方法
•
用1琼脂糖电泳分析DNA回收效率
Magen HiPure Gel Pure DNA Micro Kit(D2110)的优势：
3. 评估方法
•
用1琼脂糖电泳分析DNA回收效率
Magen HiPure PCR Pure DNA Micro Kit(D2120)的优势： 1. 高效去除引物二聚体。 2. 低洗脱体积，可低至7-10ul洗脱。 3. 长时间稳定的结合柱，无需平衡液处理 4. 更高的回收率
4.பைடு நூலகம்柱法血液DNA提取试剂盒大比对
QIAGEN Plasmid Kits(德国凯杰质粒提取试剂盒说明书中文翻译)
QIAGEN Plasmid Mini,Midi,and Maxi Kits（说明书中文翻译版）Plasmid Midi Kit(cat.Nos.12143and12145)The kit can be stored at room temperature(15~25℃)for up to2years.使用前的注意事项：（1）将Rnase A solution加入Buffer P1中，混匀，2~8℃储存。
（2）可选步骤：按1:1000的比例将LyseBlue试剂加入到Buffer P1中。
（3）使用前在4℃预冷Buffer P3，检查Buffer P2是否出现SDS沉淀。
（4）需准备好异丙醇和70%酒精。
（5）标志：圆形代表小提试剂盒；三角形代表中提试剂盒；正方形代表大提取试剂盒。
表1推荐LB培养物体积试剂盒高考倍质粒低拷贝质粒小提3mL不推荐中提25mL100mL大提100mL500mL具体操作步骤：1.收取过夜培养的细菌培养物，在4℃条件下6000×g离心15min。
2.（弃去上清液）使用4mL Buffer P1重悬菌体沉淀。
3.加入4mL Buffer P2，颠倒4~6次使彻底混匀，室温（15~25℃）孵育5min。
注：如果使用了LyseBlue试剂，溶液会变蓝。
4.加入4mL预冷过的Buffer P3，颠倒4~6次使彻底混匀，冰上孵育15min。
注：如果使用了LyseBlue试剂，溶液混匀后直至蓝色消失。
5.在4℃条件下≥20000×g（14000×g）离心30min。
6.平衡柱子QIAGEN-tip100：加入4mL Buffer QBT，通过重力流使液体过柱。
7.将第5步的上清液转移至QIAGEN-tip中，使其依靠重力流通过柱中的树脂。
8.使用10mL Buffer QC洗涤QIAGEN-tip，使Buffer QC依靠重力流通过柱中的树脂。
洗涤2次。
病毒宏基因组学方法鉴定出小熊猫粪便中一株新型指环状病毒
病毒宏基因组学方法鉴定出小熊猫粪便中一株新型指环状病毒郭靓骅;吴孔菊;华修国;崔立;张文;齐敦武【摘要】A novel anellovirus strain named AV-Chengdu1 was identified in feces from two red pandas.Sequence analysis showed that the 2 900 nt genome with a G+C content of 49.8％ (GenBank KX611132)contained three open reading frames (ORFs) encoding peptides of 581,131 and 133 aa in length.The homology between the largest peptide and the counterpart of pine marten torque teno virus (TTV)(JN704611) was56.4％.Phylogenetic analysis indicated that AV-Chengdu1 was a close relative of pine marten TTV.%研究从2份小熊猫粪便样品中检测到了一种新型的指环状病毒,命名为AV-Chengdu1(GenBank KX611132).全基因组测序结果表明,其基因组全长约2 900 nt,GC含量为49.8％;基因组结构分析表明其含3个开放阅读框(ORF1:1 743 nt,ORE2:393 nt,ORF3:399 nt),其中ORF1编码产物的氨基酸序列与一株来自松貂的指环状病毒的氨基酸序列(JN704611)同源性为56.4％.系统进化分析表明其与来自松貂的指环状病(JN704611)紧密聚类.【期刊名称】《上海交通大学学报（农业科学版）》【年(卷),期】2018(036)001【总页数】7页(P14-19,35)【关键词】小熊猫;病毒宏基因组学;指环状病毒;基因组结构分析;系统进化分析【作者】郭靓骅;吴孔菊;华修国;崔立;张文;齐敦武【作者单位】上海交通大学农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240;四川成都大熊猫繁育研究基地,四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室,成都610081;上海交通大学农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240;上海交通大学农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240;江苏大学医学院,江苏镇江212013;四川成都大熊猫繁育研究基地,四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室,成都610081【正文语种】中文【中图分类】S852.65指环状病毒(anelloviruses)[1-2]是一种小型单股负链环状DNA病毒,并被进一步细分为细环病毒(TTV),细小环病毒(TTMV),torque teno midi virus (TTMDV)和small anellovirus (SAV)[3]。
QIAquick_PCR_Purification_Kit
QIAquick® PCR Purification KitThe QIAquick PCR Purification Kit (cat. nos. 28104 and 28106) can be stored at room temperature (15–25°C) for up to 12 months.For more information, please refer to the QIAquick Spin Handbook, March 2008, which can be found at: /handbooks.For technical assistance, please call toll-free 00800-22-44-6000, or find regional phone numbers at /contact.Notes before startingAdd ethanol (96–100%) to Buffer PE before use (see bottle label for volume).All centrifugation steps are carried out at 17,900 x g (13,000 rpm) in a conventional table-top microcentrifuge at room temperature.Add 1:250 volume pH indicator I to Buffer PB. The yellow color of Buffer PB with pH indicator I indicates a pH of ≤7.5. If the purified PCR product is to be used in sensitive microarray applications, it may be beneficial to use Buffer PB withoutthe addition of pH indicator I. Do not add pH indicator I to buffer aliquots.1.Add 5 volumes Buffer PB to 1 volume of the PCR reaction and mix. If the color ofthe mixture is orange or violet, add 10 μl 3 M sodium acetate, pH 5.0, and mix.The color of the mixture will turn yellow.2.Place a QIAquick column in S a provided 2 ml collection tube or intoz a vacuum manifold. For details on how to set up a vacuum manifold, refer to the QIAquick Spin Handbook.3.To bind DNA, apply the sample to the QIAquick column and S centrifuge for30–60 s or z apply vacuum to the manifold until all the samples have passedthrough the column. S Discard flow-through and place the QIAquick columnback in the same tube.October 20104.To wash, add 0.75 ml Buffer PE to the QIAquick column S centrifuge for30–60 s or z apply vacuum. S Discard flow-through and place the QIAquick column back in the same tube.5.Centrifuge the QIAquick column once more in the provided 2 ml collection tubefor 1 min to remove residual wash buffer.6.Place each QIAquick column in a clean 1.5 ml microcentrifuge tube.7.To elute DNA, add 50 μl Buffer EB (10 mM Tris·Cl, pH 8.5) or water (pH 7.0–8.5) to the center of the QIAquick membrane and centrifuge the column for1 min. For increased DNA concentration, add 30 μl elution buffer to the centerof the QIAquick membrane, let the column stand for 1 min, and then centrifuge.8.If the purified DNA is to be analyzed on a gel, add 1 volume of Loading Dye to5 volumes of purified DNA. Mix the solution by pipetting up and down beforeloading the gel.For up-to-date licensing information and product-specific Array disclaimers, see the respective QIAGEN kit handbook or usermanual.Trademarks: QIAGEN®, QIAquick® (QIAGEN Group). 1063920 10/2010© 2010 QIAGEN, all rights reserved.。
Qiagen基因组提取试剂盒中文操作说明
Qiagen基因组提取试剂盒中⽂操作说明QIAamp DNA Blood Mini Kit简介：QIAGEN公司出品的QIAamp DNA Blood Mini Kit适⽤于使⽤微型离⼼机或真空处理从全⾎、⾎浆、⾎清、⾎沉、淋巴细胞以及体液样品中提取总(基因、线粒体和病毒)DNA。
该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全⾎样本，样品量可达200µl。
整套基因组的操作时间约为20–40分钟，⼀般可从200µl健康全⾎中获得4–12 µg DNA，洗脱体积可在50–200µl范围。
抽提原理：样品中的DNA可以特异性结合到QIAamp的硅胶膜上，通过两次洗涤可以将PCR抑制剂，如：⼆价阳离⼦和蛋⽩完全去除，最后结合在离⼼柱上的纯核酸可⽤⽔或试剂盒中的缓冲液进⾏洗脱收集。
开始前的注意事项：1. 所以的离⼼步骤需要在室温（15-25℃）进⾏2. 如果样品中含有的基因组当量少于10000，请添加载体DNA（carrier DNA）3. 200µl全⾎样品可以得到约3-12µgDNA开始前的准备⼯作：1. 将样品平衡到室温（15-25℃）2. 将⽔浴或是⾦属浴加热到56℃，以备第4步使⽤3. 将Buffer AE或蒸馏⽔平衡到室温，⽤于第11步的洗脱4. 确保Buffer AW1、AW2以及QIAGEN蛋⽩酶已经按照说明配置完毕5. 如果在Buffer AL中出现沉淀物，请在56℃孵育使其溶解操作步骤：以下为整个基因组提取操作的流程图，由于真空装置并⾮所有的实验室都配置，所以这⾥介绍的是离⼼法（流程图左侧）。
以下译介⾃QIAGEN官⽅出品的说明部分，⿊粗体为实验操作的主体部分。
1. 吸取20µl QIAGEN蛋⽩酶（或者蛋⽩酶K）⾄1.5ml离⼼管的底部。
2. 加⼊200µl待提取基因组的样品⾄离⼼管中。
磁珠法试剂盒
产品名称
广州华峰生物科技有限公 司
RNA病毒核酸提取试剂盒（磁珠法）
磁珠法产品说明 广州华峰生物科技有限公
司病毒基因组RNA磁珠提取试剂 盒是利用超顺磁性核心与经表 面大量硅烷醇基团修饰的无机 氧化硅外壳组成的超顺磁性氧 化硅纳米微粒磁珠在两种不同 的溶液环境中特异吸附和解吸 附核酸的特性，针对性地选择
Dynabeads® mRNA Purification Kit
ห้องสมุดไป่ตู้
The Dynabeads® mRNA Purification Kit rapidly isolates the mRNA
This product is designed for rapid
Magnetic Bead-Based High Throughput Viral RNA Isolation for Molecular Diagnosis
Principle of Isolation
试剂盒组成 DP438-01 96 次(自动化)/ 48 次(手工) 缓冲液GB 30 ml
Magnetic mRNA Isolation Kit
The New England Biolabs Magnetic mRNA Isolation Kit is designed to isolate
Agilent life technology
mRNA Isolation with Dynabeads® in 15 minutes
Dynabeads® mRNA Purification Kit for mRNA Purification from Total RNA Preps Dynabeads® mRNA DIRECT™试剂盒 Dynabeads® mRNA DIRECT™试剂盒 Dynabeads® mRNA DIRECT™ Micro Kit
QIAGEN试剂盒提取RNA说明书中文翻译
QIAGEN试剂盒提取RNA说明书中⽂翻译1:细菌的溶菌酶破碎2:细菌的溶菌酶破碎和机械破碎3:细菌的机械破碎4:细菌的溶菌酶裂解和蛋⽩酶K的消化5:细菌的溶菌酶裂解、蛋⽩酶K的消化及机械破碎6:固体培养基细菌的裂解7:使⽤RNeasy Mini Kit从细菌溶解物中提纯总RNA。
8:使⽤RNeasy Midi Kit从细菌溶解物中提纯总RNA。
章节说明该⼿册含有两种不同类型⽅案。
我们提供了多种⽅案，其中⽅案1-6是针对制备细菌溶解物，⽅案7-8是针对如何从细菌溶解物中提取全RNA。
你需要在⽅案1-6中选择⼀种操作，⽽后在⽅案7-8中任选其⼀。
制备细菌溶解物的各个⽅案都介绍了破碎细菌时如何固定RNA。
如何选择不同的实验⽅案由细菌细胞壁的稳定性所决定。
细菌细胞壁的稳定性受多个因素影响，包括细菌种类、⽣长阶段和培养基的成分。
细菌必须完全破碎以确保RNA的有效提取。
制备细菌溶解物的各个⽅案都包含了不⽌⼀步。
■酶消化：细菌细胞壁可以被溶菌酶进⾏消化（例如溶菌酶、溶葡球菌酶）。
我们认为溶菌酶的作⽤对于所有的⾰兰⽒阳性、阴性细菌均是有效的。
■蛋⽩酶K消化：在复杂培养基上⽣长的细菌⼤部分蛋⽩质可以被蛋⽩酶K消化以提⾼RNA 的纯化率。
我们认为蛋⽩酶K对于可在复合培养基中⽣长的细菌均是有效的。
蛋⽩酶K常常⽤于提⾼⾰兰⽒阳性细菌RNA。
另外，若从⼤量原材料中提取RNA，蛋⽩酶K可以有效提⾼RNA产率。
■机械破碎：细菌细胞壁的机械破碎可以使⽤组织研磨机和玻璃微珠。
机械破碎法对于绝⼤多数的细菌来说都是适⽤的。
机械破碎法与酶消化法相结合可以极⼤程度的提⾼RNA产率。
尽管本⼿册中的机械破碎⽅案均为使⽤组织研磨机，但采⽤其他的破碎⽅法是完全可⾏的。
考虑到细菌种类的多样性以及培养条件的多样性，细菌溶解物的制备⽅案（⽅案1-6）必须谨慎选择。
在第10页中介绍了制备细菌溶解物的不同⽅案，第11页（表格⼀）则提供了这些⽅案概况以便于参考选择。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
用QIAquick PCR Purification Kit行酶切产物回收或PCR产物回收，具体步骤如下：
①30μl酶切后产物加入150μl Buffer PB中，混合后密切观察颜色变化，若为黄色，则继续下步操作。
②把QIAquick吸附柱（QIAquick column）放入2ml采集管（collection tub）。
③把①中的所得溶液放入QIAquick吸附柱中，13,000rpm 离心1min。
④0.75 ml Buffer PE加入QIAquick吸附柱中漂洗，
13,000rpm离心1min。
弃掉废液，并把QIAquick吸附柱放入2ml 收集管中。
⑤再次以13,000rpm离心1min，尽量除去漂洗液，并再次把QIAquick吸附柱放入2ml收集管中。
⑥取出QIAquick吸附柱，放入一个干净的1.5ml微量离心管中。
⑦在吸附柱的中间部位加50 μl Buffer EB (10 mMTris•Cl, pH
8.5)，温室放置1min，
⑧再次以13,000rpm离心1min后取上清液，-20度保存备用。