高考生物复习专项练习：基因工程-基因工程基本操作程序-基因表达载体的构建(2)+Word版含答案
基因表达载体的构建课后练习(2)1．继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。
最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。
请回答：（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是_______________。
（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入_________________中。
（3）通常采用_____________________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组内。
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的_______________细胞中特异性表达。
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠细胞的细胞核转入去核的卵细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。
该技术称为_____________________。
2．基因工程中,切割目的基因和载体所用的限制酶及切口必备的特点是（）A．可用不同的限制性内切酶,露出的黏性末端必须相同B．必须用相同的限制性内切酶,露出的黏性末端可不相同C．必须用相同的限制性内切酶,露出的黏性末端必须相同D．可用不同的限制性内切酶,露出不同的黏性末端3．科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。
起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的卵裂中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。
然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花卵裂，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。
科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花卵裂，结果长成的植株有抗虫能力。
由以上过程推知，作为重组载体应具备的结构是（）A．目的基因、启动子B．目的基因、终止子C．目的基因、启动子、终止子D．目的基因、启动子、终止子、标记基因4．阅读如下资料：资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
资料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。
科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造，使其表达的T4溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。
资料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题：(1)资料甲属于基因工程的范畴。
将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用法。
构建基因表达载体常用的工具酶是____和____。
在培育有些转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是 ____。
(2)资料乙中的技术属于____工程的范畴，该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对____进行改造，或制造一种____的技术。
在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的____序列发生了改变。
(3)资料丙属于胚胎工程的范畴。
胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到____种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。
在资料丙的实例中，兔甲称为____体，兔乙称为____体。
5．已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。
因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。
回答下列问题：（1）为了获得丙中蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙中蛋白质的序列，据此可利用方法合成目的基因。
获得丙中蛋白质的基因还可用基因文库、方法。
（2）在利用上述基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用酶和。
（3）将含有的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗的危害。
（4）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子（填“含有”或“不含”）丙种蛋白质基因。
6．下列与基因工程载体有关的叙述正确的是（）A．质粒是最常用的载体，在细菌中以独立于拟核之外的方式存在B．质粒作为载体的原因之一是它为环状，便于切割后与目的基因连接C．载体中的标记基因可促进目的基因的表达D．当受体细胞为大肠杆菌时，多种噬菌体均可作为载体，如λ噬菌体和T2噬菌体7．科研人员将绿色荧光蛋白（GTP）基因导入金鱼的受精卵中进行有关研究，请回答：（1）上述过程中的 GTP 基因称为 , 该基因可由 mRNA 形成。
（2）已知 GTP 基因的 DNA 两端分别有EcoR I、Sma I切割位点，切割下来的 GTP 基因含有末端和末端。
（3）质粒用EcoR I、Sma I 切割之后，需用将 GTP 基因与其连接形成重组质粒。
（4）GTP 基因重组质粒导入受精卵通常用法，受精卵经过卵裂、桑椹胚、、原肠胚等阶段发育为胚胎。
紫外光下观察，可以看到转基因鱼发光部位存在差异，其原因是。
（5）构建重组质粒时，可用 GTP 代替抗氨苄青霉素基因作为。
8．科学家在某种农杆菌中找到了抗枯萎的基因，并以质粒为载体，采用转基因方法培育出了抗枯萎病的金花茶新品种。
下列有关说法正确的是（）A．质粒是一种能够自我复制的小型细胞器B．通过该方法获得的抗枯萎病金花茶，将来产生的花粉中不一定含有抗病基因C．质粒都含有抗性基因，该基因常常作为标记基因D．为保证金花茶植株抗枯萎病，只能以受精卵细胞作为基因工程的受体细胞9．关于基因工程的叙述，正确的是（）A．DNA连接酶只将两个黏性末端连接起来B．常使用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等C．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞内D．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变10．不属于基因工程方法生产的药物是（）A．干扰素 B．白细胞介素 C．人参皂甙干粉 D．乙肝疫苗参考答案：1．答案：（1）显微注射法（2）受精卵（3）DNA分子杂交（4）膀胱上皮（5）核移植（或克隆）解析：本题以膀胱生物反应器为依托考查基因工程中目的基因的导入、表达和检测等问题。
（1）将目的基因导入不同的受体细胞采用的方法不同，如将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法，将目的基因导入动物细胞常采用显微注射法。
（2）动物细胞的受精卵具有全能性，受精卵形成的生物体的每一个体细胞都有目的基因。
（3）基因工程中检测目的基因是否导入受体细胞主要利用DNA分子杂交技术，检测目的基因是否表达可用抗原—抗体杂交法，或进行个体生物学水平的鉴定。
（4）解答本小题的关键是明确题干提供的信息，即膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，因此在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的膀胱上皮细胞中特异性表达。
（5）将转基因小鼠细胞的细胞核转入去核的卵细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体，该技术称为克隆。
2．答案： A解析：黏性末端之间,只要切口处伸出的核苷酸间存在互补关系,就能在DNA连接酶的作用下连接起来。
虽然不同限制性内切酶识别的序列和切点是不同的,但是形成的黏性末端却可能是相同的,存在着互补关系,因此在DNA连接酶的作用下是可以连接起来的。
3．答案： D解析：基因表达载体的构建是基因工程的基本步骤也是核心，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。
重组载体组成应有：目的基因、启动子、终止子和标记基因。
4．答案： (1)显微注射限制性内切酶 DNA连接酶农杆菌可感染植物，将目的基因转移到受体细胞中(2)蛋白质现有的蛋白质新蛋白质氨基酸(3)同供受解析： (1)将目的基因导入动物细胞常用显微注射法；构建基因表达载体需要限制性内切酶对目的基因所在的DNA和载体进行切割，还需要DNA连接酶将目的基因与载体结合；农杆菌中的Ti 质粒上的T－DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，故可用农杆菌感染植物，将目的基因导入植物细胞。
(2)资料乙中的技术属于蛋白质工程的范畴，通过改造基因，对T4溶菌酶这种蛋白质进行了改造，使组成该酶的氨基酸序列发生了改变，从而提高了T4溶菌酶的耐热性。
(3)由于同一物种的生理特性相同，因此进行胚胎移植时，受体与供体物种相同，易于成功；兔甲是供胚胎的个体，称为供体，兔乙是接受胚胎的个体，称为受体。
5．答案：（1）基因化学 PCR（2）丙中蛋白质限制 DNA连接（3）重组质粒乙种昆虫（4）不含6．答案： A解析：质粒是细菌细胞质中的环状DNA，通常作为基因工程载体，故A正确。
质粒作为载体的原因：能自我复制，具有一个至多个限制酶切割位点，有特定标记基因，故B错。
载体中的标记基因能够表达特定性状，供重组DNA的鉴定和选择，故D错。
7．答案：（1）目的基因反转录（2）黏性平（3）DNA 连接酶（4）显微注射囊胚基因选择性表达（5）标记基因解析：（1）科研人员将绿色荧光蛋白（GTP）基因导入金鱼的受精卵中进行有关研究，那么GTP 基因就是目的基因，可以通过以mRNA为模板逆转录获得DNA。
（2）EcoR I酶切割后露出黏性末端，Sma I限制酶切割后露出平末端。
（3）用DNA连接酶可以把目的基因和运载体连接起来。
（4）把目的基因导入动物细胞的受精卵常常采用显微注射法，胚胎发育包括受精卵→卵裂→桑椹胚→囊胚→原肠胚等阶段发育成胚胎；紫外光下，金鱼体内发光部位有差异，说明该基因表达的部位不同，即基因的选择性表达。
（5）构建基因表达载体时，常常采用抗生素抗性基因作标记基因。
8．答案： B解析：质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用；并非两者基因结构相同，而是因为二者的遗传物质都是DNA，并且表达方式相同；植物体细胞也可作为受体使用。
花粉是减数分裂后的产物，因此有的花粉是不带有抗性基因的。
所以B选项正确。
9．答案： B10．答案：C。
高考生物三轮复习回归教材 ：选择性必修3之基因工程
高考生物三轮复习回归教材：选择性必修3之基因工程基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。
第1节重组DNA技术的基本工具一、有关核酸的方向性问题①核苷酸：1’碳连碱基；2’碳（脱氧核糖连无氧；核糖有氧）；3’碳连羟基（-OH）；5’碳连磷酸②一条脱氧核苷酸链（DNA单链）:一端的3’碳上有游离的羟基（-OH），叫3’端；另一端的5’碳上有游离的磷酸基团，叫5’端。
一条核糖核苷酸链（RNA链）也是如此。
③DNA是由两条脱氧核苷酸链，按反向平行的方式构成④DNA聚合酶：总是从引物的3’端连接脱氧核苷酸（沿着模板链的5’-3’方向合成子链）⑤RNA聚合酶：总是从引物的3’端连接核糖核苷酸（沿着模板链的5’-3’方向合成子链）⑥tRNA的3’端结合氨基酸⑦翻译时核糖体的移动方向：沿着mRNA的5’-3’方向移动⑧限制性内切核酸酶识别的序列：沿5’-3’方向读取二、重组DNA技术的基本工具（一）限制性内切核酸酶——“分子手术刀”1、来源：主要是原核生物2、对原核生物的作用：防止外来病原物的侵害,将外源DNA切割保证自身安全3、作用：识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
结果：切割DNA成为两个DNA片段识别的序列：①沿5’-3’方向读取；②大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，少数4个、8个。
；③多数为回文序列（因此，切割形成的黏性末端碱基序列：既相同，又互补）黏性末端：当限制酶在它识别序列的中心轴线(图中虚线）两侧将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是黏性末端；平末端：当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端。
（二）DNA连接酶——“分子缝合针”1、E.coli DNA连接酶：①从大肠杆菌中分离得到；②只能连接黏性末端，不能连接平末端③恢复磷酸二酯键2、T4 DNA连接酶：①从T4噬菌体中分离出来；②既能连接黏性末端，又能连接平末端，但连接平末端的效率相对较低；③恢复磷酸二酯键（三）基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”1、最常用的载体：质粒质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。
2022届全国新高考生物精准复习基因工程的基本操作程序
Ca2+处理细胞→感受 态细胞→重组表达 载体与感受态细胞 混合→感受态细胞 吸收DNA分子
思考：受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗？
四、目的基因的检测与鉴定（P14）
1、检测与鉴定的目的
目的基因进入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性。
2、层次：
①分子水平的检测： 检测目的基因是否插入了转基因生物的染色体DNA上
检测目的基因是否转录出了mRNA
检测目的基因是否翻译成蛋白质
②个体生物学水平的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等
1、鉴定——分子水平的鉴定
（1）检测受体细胞是否含有目的基因
方法—— DNA分子杂交技术
： 基因探针 用荧光或放射性同位素标记的DNA分子
15N
变性
探针
15N
目的基
变性
因片基因呢？？？
目前来说，这还是一件比较复 杂的。事情，简单的说就是根据 目的基因的相关信息，如基因的 核苷酸序列、基因的功能、基因 的位置、基因的转录产物mRNA， 以及基因的表达产物蛋白质等特 性来获取目的基因
方法二：利用PCR技术扩增目的基因 ① 概念：PCR全称为多聚酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA 片段的核酸合成技术 ②原理： 利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与
2、将目的基因导入动物细胞
显微注射技术 方法:
操作程序:
“超级小鼠”就是用这种方法获 得
提纯含目 的基因的 表达载体
取受 精卵
显微 注射
早期胚胎
移植到子宫 或输卵管
新性状 动物
3、将目的基因导入微生物细胞
常用法：Ca2+处理
常用菌：大肠杆菌
高考生物二轮复习专题专练(31) 基因工程中限制酶的选取与基因表达载体的构建
高考生物二轮复习专题专练(31) 基因工程中限制酶的选取与基因表达载体的构建从“高度”上研究高考[典例](2021·福建高考)微生物吸附是重金属废水的处理方法之一。
金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在于动植物中的金属结合蛋白，具有吸附重金属的作用。
科研人员将枣树的MT基因导入大肠杆菌构建工程菌。
回答下列问题：(1)根据枣树的MT cDNA的核苷酸序列设计了相应的引物(图1甲)，通过PCR扩增MT基因。
已知A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应的基因位置。
选用的引物组合应为__________。
(2)本实验中，PCR所用的DNA聚合酶扩增出的MT基因的末端为平末端。
由于载体E只有能产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P将MT基因接入载体E。
载体P和载体E的酶切位点及相应的酶切序列如图1乙所示。
①选用____________酶将载体P切开，再用__________(填“T4 DNA”或“E.coli DNA”)连接酶将MT基因与载体P相连，构成重组载体P′。
②载体P′不具有表达MT基因的____________和______________。
选用____________酶组合对载体P′和载体E进行酶切，将切下的MT基因和载体E用DNA连接酶进行连接，将得到的混合物导入到用________离子处理的大肠杆菌，筛出MT工程菌。
(3)MT基因在工程菌的表达量如图2所示。
结果仍无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌，理由是_________________________________________________________________________。
[解析](1)密码子位于mRNA上，是决定氨基酸的三个相邻碱基，起始密码子和终止密码子分别控制翻译的开始和结束，故为保证基因的正常表达，一对引物应分别位于A位点和B位点的外侧。
(2)①为得到平末端，可用Eco RⅤ或SmaⅠ切割载体P，但后续需进一步将重组载体P′中的MT基因接入载体E，此时需将MT基因插入XhoⅠ和PstⅠ两个酶切位点之间，故选Eco RⅤ将载入体P 切开；由于E.coli DNA连接酶只能连接黏性末端，而T4 DNA连接酶既可以连接黏性末端又可以连接平末端，结合题意可知，MT基因的末端为平末端，故需要用T4 DNA连接酶将MT基因与载体P相连，构成重组载体P′。
2022版高考生物一轮复习第十单元现代生物科技专题专题二十五基因工程2试题含解析
专题二十五基因工程考点1 基因工程的基本工具与操作程序1.[2021某某某某阶段训练,12分]超氧化物歧化酶(SOD)具有抗衰老作用。
研究人员培育了能合成SOD的转基因酵母菌。
结合下图回答下列问题。
注:Hin d Ⅲ和Apa LⅠ是两种限制酶,箭头表示酶的切割位置。
(1)将图中的重组DNA分子用Hin d Ⅲ和Apa L Ⅰ完全酶切后,可得到种DNA片段。
(2)作为受体细胞的酵母菌缺失URA3基因,必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活,为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌,所使用的培养基(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶,理由是。
(3)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为。
为了确定受体细胞中SOD基因是否转录,可用标记的作探针与从受体细胞中提取的RNA进行分子杂交检测,分子杂交的原理是。
(4)利用蛋白质工程获得活性更高的SOD时,需根据所设计蛋白质的结构推测其氨基酸序列,最终确定相对应的脱氧核苷酸序列并经获得所需的基因。
2.[2020某某示X高中联考,15分]南极某种鱼含有抗冻基因,如图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图。
请回答下列相关问题:(1)利用①过程的方法获取目的基因需要用到酶。
②过程中常需要用到的工具酶是。
(2)通过①、②过程成功构建的重组质粒,除目的基因外,还应该具备等。
(3)将目的基因导入番茄体细胞的方法是利用农杆菌的作用,其原理是。
(4)要确认抗冻基因是否在转基因番茄植株中表达出相应的蛋白质,可以采用方法,除进行分子检测外,有时还需要进行的鉴定。
考点2 基因工程的应用与蛋白质工程3.[2021某某某某质量检测,12分]植物基因工程技术的发展为人类更好地利用盐碱地提供了可能。
请回答下列问题:(1)欲培育转基因耐盐水稻,需要完成的基因工程的核心步骤是,一个基因表达载体的组成,除了目的基因和复制原点外,还必须有、以及标记基因。
(2)用PCR技术扩增耐盐基因的原理是,目前将耐盐基因导入双子叶植物最常用的方法是。
高考生物《基因工程》真题练习含答案
高考生物《基因工程》真题练习含答案1．[2024·山东卷]关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是()A．整个提取过程中可以不使用离心机B．研磨液在4 ℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中C．鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变D．仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰答案：A解析：研磨后，可以将研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液，可以不使用离心机，A正确，B错误。
鉴定过程中的沸水浴加热可使DNA双螺旋结构发生改变，C错误。
该实验中，为排除二苯胺加热后可能变蓝对实验结果造成干扰，可设置加二苯胺不加DNA的对照组，D错误。
2．[2023·新课标卷]某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。
限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是()A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接答案：C解析：只用一种限制酶切割质粒和目的基因，会使质粒和目的基因发生自身环化或者使目的基因在质粒中反向连接，A错误；用酶1切割目的基因，产生的是黏性末端，用酶3切割质粒，产生的是平末端，无法连接，B错误；质粒和目的基因都用酶1和酶2切割后，可使用T4 DNA连接酶连接，使目的基因定向插到质粒中，C正确；酶2和酶4切割后产生的黏性末端相同，易导致目的基因和质粒自身环化或者使目的基因在质粒中反向连接，并且用酶4切割会破坏标记基因，D错误。
3.[2023·浙江6月]某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因(GFP)整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。
2014高考生物考前回扣：现代生物科技专题
2014高考生物考前回扣---现代生物科技专题【网络构建】【基础回扣】专题1、基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。
2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。
人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
(完整版)高中生物基因工程的基本操作程序试题
课时跟踪检测（二）基因工程的基本操作程序（满分：50分时间：25分钟）一、选择题（每小题2分，共20分）1.下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A. 目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B. 限制酶和DNA连接酶都能识别特定的碱基序列，是两类常用的工具酶C. 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原具有生物活性D. 载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达2•禾U用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。
下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是（）A. 棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B. 大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC. 山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D. 酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白3. 下列关于PCF技术的叙述，正确的是（）A. PCF技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上B. 该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶C. 该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的D. 该技术应用体内DNA双链复制原理，也需要模板、原料、能量、酶等条件4. 下列关于基因表达载体的叙述，不.正确的是（）A. 基因表达载体的构建是基因工程的核心B. 其上的启动子和终止子都是有特殊结构的DNA片段C. 一般用抗生素抗性基因作为标记基因D. 虽然基因工程中的受体细胞有所不同，但构建的基因表达载体都是一样的5•右图是基因工程中基因表达载体的模式图，若结构体所必X是表达载需的，则X最可能是（）A. 荧光蛋白基因B. 启动子C. 限制酶D. DNA连接酶6. 下列关于基因表达载体导入微生物细胞的叙述中，不正确的是（）A. 常用原核生物作为受体细胞，是因为原核生物繁殖快，且多为单细胞，遗传物质相对较少B. 受体细胞所处的一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态称为感受态C. 感受态细胞吸收 DNA 分子需要适宜的温度和酸碱度D.感受态细胞吸收重组表达载体 DNA 分子的液体只要调节为适宜的 pH 即可，没必要用缓冲液7. （广东高考）利用基因工程技术生 产羧酸酯酶（CarE ）制剂的流程如下图所示，下列叙 述正确的是（双选）（）临药耳律瞒审小彌]~丽施曲而潸-I '； U 1•:理闵 农站我体I 間~Tv ~I 舟解叮拟鸟煩践阐——|匚迎£制刑卜 帀丽严丙丽也論I 缺融常A 过程①需使用逆转录酶 B. 过程②需使用解旋酶和 PCR 获取目的基因C.过程③使用的感受态细胞可用 NaCI 溶液制备D. 过程④可利用 DNA 分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞&以下甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是 （ ） 卑如菌的1出A[iTniTiTrnnTrcirriimirTTT1」I L 」I L 」11. L I L 」L I 」1IH JI止f乙A. 甲方法可建立该细菌的基因组文库B.乙方法可建立该细菌的 cDNA 文库C. 甲方法要以脱氧核苷酸为原料D. 乙方法需要逆转录酶参与9•右图表示细胞膜上乙酰胆碱 （一种神经递质）受体基因的克 隆技术操作过程，下列相关分析中正确的是（ ）A. 获得该mRNA 勺最佳材料是受精卵B. 构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌C.完成过程①②必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA 聚合酶D.探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌，获得未被感染的细 菌10. 蓝藻拟核DNA 上有控制叶绿素合成的 ch1L 基因。
高考复习(生物)专项练习：细胞工程和基因工程【含答案及解析】
专题突破练12细胞工程和基因工程一、单项选择题1.(2021山东济南联考)芥酸会降低菜籽油的品质。
油菜有两对独立遗传的等位基因(H和h,G和g)控制菜籽的芥酸含量。
下图是获得低芥酸油菜新品种(HHGG)的技术路线,已知油菜单个花药由花药壁(2n)及大量花粉(n)等组分组成,这些组分的细胞都具有全能性。
据图分析,下列叙述错误的是()A.①②过程均需要植物激素来诱导细胞脱分化B.与④过程相比,③过程可能会产生二倍体再生植株C.图中3种途径中,利用花粉培养筛选低芥酸油菜新品种(HHGG)的效率最高D.F1植株的细胞进行减数分裂时,H基因所在的染色体会与G基因所在的染色体发生联会2.(2021山东济南针对性训练)NRP-1是人体血管内皮生长因子的受体,在肿瘤新生血管形成与肿瘤细胞迁移、黏附、侵袭等方面起重要调控作用。
为探究NRP-1MAb(NRP-1的单克隆抗体)对乳腺癌的治疗作用,研究人员以兔子为实验材料进行了相关实验,得到如下图所示的结果。
下列叙述错误的是()A.据图推测,NRP-1MAb能够有效降低肿瘤的体积,中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的更显著B.NRP-1MAb的制备过程中利用灭活病毒诱导两细胞融合,其原理是利用了病毒表面的糖蛋白和相关酶能够与细胞膜表面的糖蛋白发生作用C.反复给兔子注射NRP-1,提取已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,再经选择培养基筛选获得的杂交瘤细胞都能产生NRP-1MAbD.治疗机理可能为NRP-1MAb与NRP-1特异性结合,阻止了NRP-1与血管内皮生长因子的结合,从而抑制了肿瘤血管的生成以及肿瘤细胞的分散和转移3.(2021山东滨州二模)细胞融合不仅在自然条件下常见,在现代生物技术中也经常应用。
下图表示细胞融合的简要过程。
下列说法正确的是()A.细胞融合过程都涉及细胞膜的流动性,常用聚乙二醇融合法、电融合法等进行处理B.若细胞a、b分别取自优良奶牛,则采集的卵母细胞和精子可直接体外受精C.若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞,则完成融合的标志为细胞核的融合D.若细胞d是杂交瘤细胞,则在选择培养基中筛选后即可大规模培养生产单克隆抗体4.(2021山东聊城二模)单克隆抗体可抑制病毒对宿主细胞的侵染。
高考生物专题复习《基因工程》含答案
高考生物专题复习《基因工程》【考点梳理.逐个击破】一、基因工程的操作工具1．限制性核酸内切酶(简称限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)作用：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
(3)结果：产生黏性末端或平末端。
2．DNA 连接酶3．载体(1)作用：携带外源DNA 片段进入受体细胞。
(2)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
(3)条件⎩⎪⎨⎪⎧能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取(1)目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以是具有调控作用的因子。
(2)获取方法⎩⎪⎨⎪⎧从基因文库中获取利用PCR 技术扩增通过化学方法人工合成2．基因表达载体的构建 (1)构建基因表达载体的目的①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。
②使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子及标记基因等。
3．目的基因导入受体细胞微生物细胞感受态细胞法(Ca2＋处理法)4．目的基因的检测与鉴定检测目的检测方法判断标准目的基因是否插入转基因生物的DNA DNA分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交技术是否出现杂交带个体水平的检测如抗虫、抗病的接种实验是否表现出相应的特性三、基因工程的应用及蛋白质工程1．基因工程的应用(1)动物基因工程：提高动物生长速度从而提高产品产量；改善畜产品品质；用转基因动物生产药物；用转基因动物作器官移植的供体等。
(2)植物基因工程：培育抗虫转基因植物(如抗虫棉)、抗病转基因植物(如转基因烟草)和抗逆转基因植物(如抗寒番茄)；利用转基因改良植物的品质(如新花色矮牵牛)。
2．基因诊断与基因治疗(1)基因诊断：又称为DNA诊断，是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。
高考生物 试卷讲义 第10单元 第6课时 基因工程的基本工具和基本操作程序
第6课时基因工程的基本工具和基本操作程序课标要求 1.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具。
2.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定等步骤。
3.按照实验操作步骤，进行DNA的粗提取与鉴定实验。
4.利用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段并完成电泳鉴定，或运用软件进行虚拟PCR实验。
考点一重组DNA技术的基本工具1．基因工程的概念别名________技术操作环境生物体外操作对象操作水平________水平结果创造出更符合人们需要的新的________________和________________2.基因工程的诞生和发展(1)肺炎链球菌转化实验不仅证明DNA是遗传物质，还证明了DNA可在同种生物不同个体之间________。
(2)DNA双螺旋结构的提出和______________的证明。
(3)中心法则的确立。
(4)________________的破译。
(5)基因转移载体和________________________________的发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。
(6)________体外重组的实现。
(7)重组DNA表达实验的成功。
(8)DNA测序和合成技术的发明。
(9)________技术的发明。
(10)________________技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。
3．重组DNA技术的基本工具(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)(2)DNA连接酶(3)载体(1)源于选择性必修3 P71“旁栏思考”：①原核生物中存在限制酶的意义是什么？_______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ ②限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？_______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ (2)源于选择性必修3 P72“旁栏思考”：DNA连接酶和DNA聚合酶________(填“是”或“不是”)一回事。