刺五加药材指纹图谱的分析方法研究
刺五加HPLC／UV／MS指纹图谱研究
７３Ｏ６ ， （ ．５ ）９ ３５ １ ，０ ４４６ ； 均 相 （ ．９ ）８ ３ １４ ， （ ．５ ） １（ ．７ ）平
ｔ ｉ ／ ｎ ａ ｒ
对 峰 面 积 分 别 为 ： （ ） ２（ ．９ ） ３（ ．８ ， １ １ ， ００８ ， ０２０） ４
（ ．１ ）５ Ｏ １５ ，（ ．４ ）７ １４ ５ ，（ ．Ｏ ） ９ ０ ２ １ ，（ ．７ ）６ Ｏ １５ ，（ ．１ ）８ Ｏ ６ ８ ， （ ．６ ） ｌ （ ．４ ） ０ ２ １ ，Ｏ Ｏ １３ 。
０ ２０ ｍｉ ｎ ４ ０ ６０
刺五 加 药 材 水 溶 性 成 分 和 脂 溶 性 成 分 的 Ｈ Ｌ ／ Ｖ及 Ｈ Ｌ ／ Ｓ ＰＣＵ Ｐ Ｃ Ｍ 指纹图谱分别见图 １ ６ ～。
ｒｇ ． Ｐ Ｃ Ｍ ｍｇｔ＇ｔ ｆｉｏａ ｌ ｌ Ｉ ｅＥ Ｉ ｉ５ Ｈ Ｌ ／ Ｓｆ ｅ ａ ｌ ｓｌ ｅ目ｂ ∞ｃ， Ｓ（一） ｉｉ ０ ｐ ｕ ｎ ｂ ｓ
测方 式 ：ｓ（ －； 描 范 围 ：０～１０ ； Ｅ Ｉ＋／）扫 ８ ００ 干燥 气 流 速 ：０Ｌ ｍｎ 雾 化 室 压 ：０ Ｐ ； 细 管 电压 ： ０ １ ／ ｉ； ４ ａ 毛 ４００ Ｖ； 裂解 电压 ：０ｅ 进 样 量 ：０ 。 ７ Ｖ； ２
Ｅｍｉｚｈｎ ９ ，． Ｉ －ａ：ｚ ｇ ＠ｍａｏ Ⅱ ｌ ｊａ ９ ０
【 日期 】 ２Ｏ— － 【 收稿 ０２１０ 通讯作者 】 Ｔｌ ２． ７ ５ ０９ ｅ０５ ２ｌ ４ ： ３ ４
ｍｎ ． ｌ， ａ ）流 动相 ： ０５ ｌ×４６ｍｎ５／ｎ ； Ａ：．％冰 醋酸 ， 含 Ｂ： ０５ ．％冰 醋酸 的 乙腈 ； 度洗 脱 ： ｉ： （０ ）１ 梯 ０ｍｎ Ｂ １％ ，０
刺 五 加 为 五 加 科 植 物 刺 五 加 Ａａａｏａ ｚ ｃｒｈｐ￣ｘ
刺五加药材指纹图谱研究
刺五加药材指纹图谱研究作者：王汝平卢宏丽魏志玲来源：《健康必读·下旬刊》2011年第09期【中图分类号】R282 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2011)09－0333－01【摘要】利用高效液相色谱法对刺五加注射液、刺五加药材相关性进行了指纹图谱的研究，初步建立了刺五加药材指纹图谱的标准。
色谱柱为Agilent的Zorbox Eclipse XDB-C18 250×4.6mm 5μ 液相色谱柱；流动相A：0.5%甲酸溶液，流动相B：乙腈-水（30：70），梯度洗脱；检测波长为270nm。
结果药材指纹图谱与标准图谱比对相似度大于0.90。
【关键词】刺五加指纹图谱高效液相相似度刺五加为五加科植物刺五加Acantho panax senticosus (Rupr.et Maxim.)Harms的干燥茎。
具有益气健脾，补肾安神之功效。
主要用于脾肺气虚，体虚乏力，食欲不振，肺肾两虚，久咳虚喘，肾虚腰膝酸痛，心脾不足，失眠多梦。
其主要成分有刺五加苷E，紫丁香苷、异嗪皮啶等。
本文主要采用高效液相色谱法利用药材与成品相关性建立药材指纹图谱。
1 仪器与试剂仪器： Agilent 1100 型高效液相色谱仪，配有四元梯度泵、在线脱气机、自动进样器、柱温箱、紫外检测器； Agilent的Zorbox Eclipse XDB-C18 250×4.6mm 5μ 液相色谱柱。
试剂：甲醇（色谱纯、Dikma 公司），乙腈（色谱纯、Dikma 公司），水（纯化水）样品来源：经中心化验室鉴别为五加科植物刺五加Acantho panax senticosus Rupr.etMaxim.)Harms的干燥茎。
2 试验方法与结果2.1 供试品溶液制备取刺五加粗粉5.0g，精密称定，加纯化水50ml加热回流1小时，放冷，滤过，收集滤液置50ml容量瓶中，用少量纯化水分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。
刺五加HPLC／UV指纹图谱研究
不 同产 地 、 同批 次 的 刺 五 加 药 材 的 乙醇 提 取 物 进 不 行 分 离 分 析 ， 到 了分 离 度 、 现性 均 较 好 的药 材 指 得 重 纹 图谱 ， 比较 了 其 差 异 ， 全 面 评 价 刺 五 加 药 材 的 并 为
Ｂ ， 速 ｌ ｄｍ ｎ 柱 温 ：５ ； 测 波 长 ：７ ｎ 进 样 ）流 ｒ／ ｉ； ｒ ２℃ 检 ２ ０ ｍ；
２． 供 试 品 溶 液 的 制 备 １
刺 五加 性 温 味 辛 微 苦 ， 有 益 气 健 脾 、 肾 安 神 、 具 补 益 精 壮 骨 之 功 效 。其 主 要 成 分 为 胡 萝 ｂ苷 （ 五 刺 加 苷 Ａ） 紫 丁 香 酚 苷 （ 五 加 苷 Ｂ） 异 秦 皮 素 葡 萄 、 刺 、 糖 苷 （ 五 加 苷 Ｂ ） 乙 基 一半 乳 糖 苷 （ 五 加 苷 刺 １ ， 刺 Ｃ ， 丁香 树脂 酚 的葡 萄糖 苷 的二种 不 同构 型 （ ）紫 刺 五 加 苷 Ｄ和 Ｅ） 刺 五 加 苷 ＩＫ、 、 和 异 皮 秦 定 、 一 ， 、 ＬＭ ｌ
５Ｏ ．ｇ刺 五 加 药 材 粉 末 （ ４ 过 Ｊ Ｄ目筛 ） 加 ６ ％ 乙 ， ５
醇 ３ｒ ， 浸 １ ０ｎ 冷 ｌ ２小 时 ， 回流 ２小 时 ， 热 过 滤 ， 热 趁 再 用 ０４ ｔ ．５ｔ ｍ微 孔 滤 膜 过 滤 ， 为 刺 五 加 药 材 供 试 品 作 溶液 。 ２． 液 相 色谱 条 件 及 分 析 方 法 ２
Ｂ ，０ ｎ：０ Ａ （ ０ Ｂ ，０—６ ｍ ｎ １ ％ Ａ （０ ） ４ ｍｉ ６ ％ ４ ％ ）６ ５ ｉ ：０ ９
芝麻素等 。中药 指纹 图谱 是 近年 提 出的 、 目前 国 际
上 公 认 的 控 制 中药 或 天 然 药 物 质 量 的 最 有 效 手 段 之
刺五加注射液及刺五加药材指纹图谱研究的开题报告
刺五加注射液及刺五加药材指纹图谱研究的开题报告一、研究背景中药刺五加是中国传统药材之一，广泛应用于治疗风湿病、骨病、神经系统疾病等。
刺五加的药效成分包括黄酮类、皂苷类、抗氧化剂等。
为了提高刺五加药效的稳定性和疗效，目前已经开发出了刺五加注射液。
然而，由于刺五加药材原材料品质的差异，不同品种和来源的刺五加注射液的药效可能存在差异。
因此，建立刺五加药材指纹图谱，并结合刺五加注射液的药效评价，可以为刺五加注射液的质量控制提供科学依据。
二、研究目的与意义本研究旨在建立刺五加药材指纹图谱，并以此为基础对刺五加注射液进行质量控制。
具体研究内容包括：1. 收集不同地区、不同品种、不同发源地的刺五加药材样品，并进行质量鉴定和指纹图谱分析。
2. 针对刺五加注射液中主要活性成分，建立高效液相色谱（HPLC）测定方法，并对不同来源的刺五加注射液进行定量分析。
3. 对不同来源的刺五加注射液进行药理学评价，比较不同样品的药效差异。
本研究的意义在于为刺五加注射液的质量控制提供科学依据。
另外，建立刺五加药材指纹图谱还有助于推广该药材的标准化种植和质量控制。
三、研究方法1. 刺五加药材样品的采集与预处理：收集不同地区、不同品种、不同发源地的刺五加样品，对其进行质量鉴定和分类。
对刺五加样品进行干燥、粉碎，制备成粉末状样品。
2. 利用高效液相色谱（HPLC）建立刺五加药材指纹图谱：以HPLC为分析平台，采用多波长检测方式，分别检测样品中不同波长的色素、成分和活性成分，并进行指纹图谱分析。
3. 建立刺五加注射液中活性成分的HPLC测定方法：以刺五加中主要的活性成分为分析对象，建立高效液相色谱测定方法。
4. 对不同来源的刺五加注射液进行药理学评价：以小鼠体内的繁殖道病毒及免疫指标变化为评价指标，对不同样品的药效差异进行比较。
四、预期成果1. 建立刺五加药材指纹图谱。
2. 建立刺五加注射液中活性成分的HPLC测定方法，并对不同来源的刺五加注射液进行定量分析。
刺五加标准草案
刺五加注射液质量标准草案刺五加注射液Ciwujia Zhusheye本品为刺五加经提取加工制成的灭菌水溶液。
【性状】本品为橙黄色至棕黄色的澄明液体。
【鉴别】取本品4ml（20ml规格）、7ml（100ml规格）或10ml（250ml规格），蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
另取刺五加对照药材2.5g，加乙醚50ml，加热回流提取1小时，滤过，弃去醚液，残渣蒸干，加甲醇30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5ml使溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1cm，柱高12cm），用水100ml洗脱，弃去水液，再用70%乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。
再取刺五加苷E对照品、紫丁香苷对照品、异嗪皮啶对照品，分别加甲醇制成每1ml含刺五加苷E0.5mg、紫丁香苷1mg、异嗪皮啶0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述供试品溶液1μl，对照药材溶液2μl，三种对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（60：13：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点，在与异嗪皮啶对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；在与刺五加苷E对照品及紫丁香苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】pH值应为4.5～6.0（中国药典2010年版一部附录Ⅶ G）。
颜色精密量取本品0.5ml（20ml规格）、1.0ml（100ml规格）或1.5ml（250ml 规格），置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，取10ml，置纳氏比色管中，与黄色8号标准比色液（中国药典2010年版一部附录Ⅺ A第一法）比较，不得更深。
中药指纹图谱研究技术要点
中药指纹图谱研究技术要点中药指纹图谱是指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段和仪器检测得到的，能够标示该中药及其制剂中的各种组分群体特性的共有峰的图谱。
通过指纹图谱整体特征峰的相对保留时间及含量或比例的制定和比对，可有效地控制中药材及中药产品质量，保证产品质量的相对稳定。
目前，指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。
实施中药指纹图谱难免会有一个提高、完善的过程。
从技术上说，中药指纹图谱的建立是完全可行的，但在实际应用中，还要解决诸多问题。
中药指纹图谱研究的技术要点主要有以下几个方面。
■中药材来源及样品处理对制作指纹图谱的动、植物药材必须做到固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法。
对矿物药应固定产地和炮制、加工方法，这是制定合格指纹图谱的先决条件。
对供试样品的取样应注意样品的代表性与均匀性，以保持实验室取样与实际生产应用药材一致。
除此之外，还必须做到组方和用量固定，生产工艺稳定。
■检测方法作为一张合格的指纹图谱必须具有特征明显、专属性强、重现性好的特点，而且要求做到操作和应用方便。
目前最常采用的制备中药指纹图谱的检测方法有光谱法和色谱法。
光谱方法如紫外光谱和红外光谱在实际应用中能提供识别的信息较少，往往当同类化合物其取代基团发生变化时，对应的光谱却难以体现出来，建议尽量不要采用。
色谱法最大特点在于可进行复杂组分的成分分离，特别是新的高效、通用检测器的发展和引入，使得采用色谱法检测可得到足够多的图谱识别信息，是目前制备指纹图谱的主流方法。
尤其是薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)和高效液相色谱(HPLC)技术已成为3种公认常用的指纹图谱分析手段。
其中特别又以HPLC分离效率高、分析速度快、样品适应性广、检测器种类多、灵敏度高、稳定性、重复性好而备受推崇，成为制备指纹图谱的首选方法。
参照物的选择：以色谱法制备得到的特征指纹图谱识别信息，主要是色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值。
论文
作者：高阳，赵云丽，毕开顺，于治国【关键词】刺五加；,,高效液相色谱；,,指纹图谱摘要：目的采用高效液相色谱（HPLC）法建立了刺五加药材指纹图谱。
方法色谱柱: Zorbax SBC18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相∶乙腈水（梯度洗脱），检测波长：203 nm，柱温：40℃，流速：1.0 ml/min，分析时间：90 min。
结果共标示出刺五加药材指纹图谱中24个共有峰。
利用指纹图谱相似度测试软件，以夹角余旋为测度，测得10批刺五加药材指纹图谱相似度结果均在0.90～1.00之间。
结论本实验所建立的刺五加药材指纹图谱分析方法准确、重复性好，为有效控制刺五加药材的质量提供了依据。
关键词：刺五加；高效液相色谱；指纹图谱Studies on the Analysis Methods of Chromatographic Fingerprints of Acanthopanax senticosus HarmsAbstract：ObjectiveTo establish chromatographic fingerprint of Acanthopanax senticosus Harms by HPLC. MethodsSeparation was performed on an Agilent ZORBAX SBC18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) analytical column with mobile phase consisting of acetonitrile and water with gradient elute at the flow rate of 1.0 ml/min and the column temperature 40℃. The UV wavelength used for detection was set at 203 nm and the analysis time was 90 min.Results24 copeaks on the HPLC fingerprints of Acanthopanax senticosus Harms were indicated. The similarities were determined by cosine. The results of similarity analysis were 0.90～1.00. ConclusionThe method can be used for the quality control of Acanthopanax senticosus Harms.Key words：Acanthopanax senticosus Harms; HPLC; Chromatographic fingerprint刺五加Acanthopanax senticosus Harms为五加科五加属植物刺五加的干燥根及根茎，具有益气健脾、补肾安神的功效。
刺五加药材指纹谱_HPLC_FP_省略_分析方法研究及不同产地药材谱比较_刘丽娟
[指纹图谱]刺五加药材指纹谱(HPLC -FPS)分析方法研究及不同产地药材谱比较刘丽娟, 张清波, 张树杰(黑龙江省药品检验所,150001)关键词:刺五加;HPL C -F PS;HPL C摘要:目的:对3种不同产地的刺五加药材进行指纹谱(HP LC -FPS)比较研究。
方法:以宁安刺五加药材为分析对象,选择适宜的条件,建立3个刺五加药材样品的指纹图谱。
结果:方法学考察表明,本研究建立的分析方法有比较好的重现性;不同产地的刺五加药材共有峰面积的比值有一定的差异。
结论:HPLC 指纹图谱分析法可简便快速鉴别区分不同来源的刺五加药材。
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2001)11-0781-03收稿日期:2001-06-10作者简介:刘丽娟(1972~),女,哈尔滨市人,医学硕士,主管药师.研究方向:中成药质量分析。
电话:(0451)3638792-8209.Study on HPLC -FPS Analysis of Radix Acanthopanacis Senticosi and Compara -tive S tudy on Its Different SourcesLIU L-i juan, ZHANG Qing -bo, ZHANG Shu -jie(H eilongjiang Prov incial I nstitute f or Dr ug Contr ol H eilongjang 150001,China )Key words :Radix A canthop anacis Senticosi ;HPLC -FPS;H PLC Abstract :Objective :To study comparatively H PLC -FPS of three kinds of Radix A canthop anacis Senticosi from different sources.Methods :HPLC fingerprint analysis method of Radix Acanthopanacis Senticosi from N ingan w as developed,and the HPlC -FPS of three samples w ere established.Results :T he methodolog ical eva-l uation show ed that this method had a good repeatability ,and the ratio of common peaks area of different sam -ples were different.Conclusion :This method can be used to differentiate R adix Acanthopanacis Senticosi from different sources conveniently.刺五加(Radix Acanthop anacis Senticosi )又称五加参,在民间很早就供药用,是中药五加皮的一种[1],具有扶正固本,益智安神,补肾健脾等功效,已载入 中华人民共和国药典 一部(1977~2000年版)。
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时珍 国 医 国药 ２ ０ ０ ６年第 ｌ 第 ９期 ７卷
关键词 ： 刺五加 ； 高效液相 色谱 ； 指纹图谱
中图分 类号 ：２ ４ ２ Ｒ ８ ．
文 献标 识码 ： Ａ
文章编 号 ：０ ８０ ０ （ ０ ６ ０ ．７ ７ ２ １０ －８ ５ ２ ０ ） ９１ １ － ０
Ｓ ｕｄ ｅ ｎ ｔ ｔ ｉｓ ｏ ｈｅ Ａｎａｙ ｉ ｅ ｏ ｆＣｈｒ ｍａ ｏ ｒ ｐ ｃ Ｆｉ ｇ ｒ ｒ ｎ ｓ ｏ ａ ｔ ｐ ａ ｓ ｎ ｉ ｌ ｓｓ Ｍ ｔ ｄｓｏ ｈ ｏ ｔ ｇ ａ ｈｉ ｎ ｅ ｐ ｉ ｔ ｆＡｃ ｎ ｈｏ ａｎ ｘ ｅ ｔ．
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刺 五 加 药 材 指 纹 图谱 的分 析 方 法研 究
高 阳， 赵云 丽， 毕开顺 ，于治 国
（ 阳药科 大学药 学 院药 物分 析教 研室 ，： 目的 采用高效液相色谱（ ＰＣ 法建立了刺五加药材指纹图谱。方法 色谱柱： ｏ ａ Ｓ —． ２０ｍ ＨＬ） Ｚｒ ｘ ＢＣ 柱（５ ｍ× ． ｂ ４６
ｍｎ５ ｍ） 流 动 相 ： 乙腈 一 （ 度 洗 脱 ） 检 测 波长 ：０ ｍ， 温 ：０Ｃ， 速 ：． ／ ｎ 分 析 时 间 ：０ｍｉ。 结 果 共 ｌ， ， 水 梯 ， ２ ３ｎ 柱 ４ｏ 流 １０ｍｌ ｍｉ， ９ ｎ 标示 出刺五加药材指 纹图谱 中２ ４个共有峰 。利用指 纹图谱相似度测试软 件 ， 以夹角余旋 为测度 ， 测得 ｌ ０批刺五 加 药材 指纹 图谱相似度结果均在 ０ ９ ，０～１０ ，０之 间。结论 本 实验所建立的刺 五加 药材指 纹 图谱分析 方法准确 、 重复性好 ， 为有 效控 制刺 五 加 药 材 的 质 量 提 供 了依 据 。
严 产 腹 大 小 由表 ５结果可知 ： 连续 服用 活血舒 筋散 ９ ， 鼠脏 器组织 疼 痛 ， 重 者 可 波 及 全 身 ， 生 淤 热 、 胀 、 便 秘 结 、 便 短 ０ｄ 大 赤 等一 系列创 伤 后 淤血 症 状 。 血舒 筋 散 由 红花 、 碎 补 、 活 骨 血 未见 异 常 变 化 。 竭 、 香 、 药等药组成 ， 方合理 、 效显著 ， 泛用于跌 、 乳 没 组 疗 广 ３ 讨 论 打、 、 、 等引 起 的筋 骨 及 软组织 损伤 ， 血作 痛 以 及颈椎 挤 压 撞 淤 损伤骨折后 ， 由于 骨 膜 、 皮 质 及 邻 近软 组 织 的 血 管 断 骨 裂 出血 ， 损 伤部 位 形 成 血 肿 ， 折 端 淤 血块 和损 伤 坏 死 组 病 、 椎 病 引 起 的 疼 痛 。 们通 过 以 上对 其 急 性 毒 性 、 期 在 骨 腰 我 长 织引起局部无菌性炎症反应 。 中医 理 论 认 为 ， 伤 骨 折 后 ， 毒性进行 的实验证实 ， 损 该制剂毒性 小 ， 久服安全 ， 有 良好的发 展 具 由于 经络 气血 受损 ， 血淤气 滞 ， 伤作 肿 ， 伤 作痛 ， 气 形 引起 肿胀 前 景 。
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｓ ｂｉ ｈｏ ａｏｒｐ ｉｆ ｇｒｒ ｔ ｆ ｃｎｈｐ ｎｘｓ ｃｓ Ｈ ｒ ｓ ｙＨ Ｌ ． ｅ ｏ ｓＳ ｐｒｔ ｎ ｓｒ ｃ ： ｊｃ ｖ ｏｅｔ ｌｈｃｒｍ ｔ ａｈｃ ｎｅｐｉ ａ ｔｏａ ａ ０ ｉ ａ ｓ ｇ ｉ ｎｏＡ ｅ ａｍ Ｐ Ｃ Ｍ ｔ ｄ ｅａａｉ ｂ ｈ ｏ ｗ ｓｐｒ ｒ ｄｏ ｎＡ ｉ ｎ Ｚ Ｒ Ａ ＢＣ８４ ６ｍ × ５ ｍ， ｍ）ａａ ｔ ａ ｃｌ ｉ ｏ ｉ ｈ ｓ ｏｓ ｔ ｇｏ ｅ ａ ｅｏ ｆ ｍｅ ｎａ ｇ ｅｔ Ｏ Ｂ ＸＳ — ｌ（ ． ｍ ２０ｍ ５ ｌ ｎ ｌ ｉ ｌ ｏ ｍｎｗｔ ｍ ｂｌ ｐ ａｅｃｎｉｉ ｆ ｃ． ｙｃ ｕ ｈ ｅ ｓｎ ａ