Genome-wide mapping of conserved microRNAs and their host transcripts in Tribolium castaneum
棉花PAL_基因家族的全基因组鉴定及其在逆境胁迫下的表达分析
山西农业科学 2023，51（9）：961-973Journal of Shanxi Agricultural Sciences棉花PAL 基因家族的全基因组鉴定及其在逆境胁迫下的表达分析王梓钰，古丽斯坦·赛米，刘隋赟昊，黄耿青，张经博，郭彦君（新疆师范大学 生命科学学院/新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室，新疆 乌鲁木齐 830054）摘要：苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanine ammonia lyase ，PAL ）是苯丙烷代谢的关键酶和限速酶，在植物的生长发育、抗病虫害和抗逆等方面发挥着重要作用。
研究在全基因组水平上对棉花PAL 基因家族进行了鉴定和分析，以了解棉花中PAL 的功能，为后续深入研究棉花PAL 功能提供一定参考。
结果表明，在陆地棉（Gossypium hir⁃sutum ）、海岛棉（Gossypium barbadense ）、草棉（Gossypium herbaceum ）和雷蒙德氏棉（Gossypium raimondii ）中分别鉴定出15、13、7、8个PAL 基因。
进化分析结果显示，棉花PAL 基因家族可分为3个亚组。
保守基序和基因结构分析显示，亲缘关系近的PAL 基因之间的保守基序组成和基因结构也十分相似。
启动子分析显示，GhPAL 基因的启动子上存在多个与非生物和生物胁迫应答以及激素信号转导相关的顺式作用元件。
组织表达模式分析表明，GhPAL 基因主要在根、茎、花丝和胚珠中高表达。
转录组和qPCR 分析显示，部分GhPAL 基因的表达量在PEG 、盐、高温、低温和碱胁迫下显著提高，其中一些GhPAL 基因能够对多种非生物胁迫作出响应。
生物胁迫转录组数据显示，GhPAL1/GhPAL5/GhPAL13的表达在大丽轮枝菌处理条件下发生显著上调。
GhPAL 基因在逆境胁迫下的表达分析结果说明，PAL 基因可能在棉花应答逆境胁迫的过程中发挥一定的功能。
谷子TGA_转录因子家族全基因组鉴定与分析
山西农业科学 2023，51（5）：469-477Journal of Shanxi Agricultural Sciences谷子TGA 转录因子家族全基因组鉴定与分析高倩 1，秦迎迎 2，杨致荣1（1.山西农业大学 基础部，山西 太谷 030801；2.山西农业大学 生命科学学院，山西 太谷 030801）摘要：TGA 转录因子在植物器官发育和抗病反应中发挥着重要作用。
为了探究C 4模式植物谷子TGA 基因家族成员的结构和功能，为进一步探索TGA 转录因子的生物学功能提供理论基础，以拟南芥TGA 基因家族的氨基酸序列为参考序列，从xiaomi 基因组中鉴定出16个TGA 基因，命名为SiTGA1~SiTGA16，并利用生物信息学软件对其结构和表达模式进行分析。
结果表明，SiTGAs 在9条染色体上均有分布，其中在2号和5号染色体上均含有3个基因；在3、4号和6号染色体分别分布有2个基因；在1、7、8号和9号染色体上分别仅有1个基因。
理化性质分析结果显示，SiTGAs 的二级结构主要为α-螺旋，无规卷曲次之；SiTGAs 亚细胞主要定位在细胞核。
进化关系结果显示，16个SiTGAs 分属6个亚类，这些亚家族分别含有4、4、1、5、1、1个基因，与高粱的亲缘关系最近，其中亲缘关系近的SiTGAs 的基因结构、保守基序、保守结构域具有保守性。
TGA 基因家族成员的进化关系及SiTGAs 在谷子中的表达模式结果显示，谷子TGA 基因家族在谷子的抗逆反应、抗病反应、花器官发育以及茎尖、芽尖分生组织调控和根尖干细胞群维持中起着重要作用。
关键词：谷子；xiaomi ；TGA 转录因子；基因家族；生物信息学中图分类号：S515 文献标识码：A 文章编号：1002‒2481（2023）05‒0469‒09Genome-wide Identification and Analysis of the TGA Family ofTranscription Factors in Setaria italicaGAO Qian 1，QIN Yingying 2，YANG Zhirong 1（1.Department of Basic Sciences ，Shanxi Agricultural University ，Taigu 030801，China ；2.College of Life Sciences ，Shanxi Agricultural University ，Taigu 030801，China ）Abstract ：TGA transcription factors play an important role in plant organ development and disease resistant response. In order to explore the structure and function of members of the TGA gene family of Setaria italica of C4 model plants and provide a theoretical foundation for further exploring the biological functions of TGA transcription factors, in this study, 16 TGA genes were identified from the xiaomi genome and named SiTGA1-16 using the amino acid sequence of the Arabidopsis TGA gene family as the reference sequence, and their structure and expression patterns were analyzed by bioinformatics software. The results showed that SiTGAs were distributed on all 9 chromosomes, including 3 genes on chromosomes 2 and 5. Chromosomes 3, 4, and 6 were distributed with 2 genes. There was only 1 gene on chromosomes 1, 7, 8, and 9. The results of physical and chemical property analysis showed that the secondary structure of SiTGAs was mainly α-helix, followed by random curling. Subcellular localization of SiTGAs were primarily in the nucleus. Evolutionary relationship results showed that the 16 SiTGAs belonged to six subclasses, which contained 4, 4, 1, 5, 1, and 1 genes respectively, with the closest phylogenetic relationship to sorghum. The gene structure, conserved motif and domain of SiTGAs with close phylogenetic relationships were highly conserved. Evolutionary relationship of TGA gene family members and the expression pattern of SiTGAs in Setaria italica indicated that the TGA gene family in Setaria italica played a crucial role in stress resistant response, disease resistant response, floral organ development, stem tip and bud tip meristem regulation, and root tip stem cell maintenance.Key words ：Setaria italica ; xiaomi ; TGA transcriptional factor; gene family; bioinformatics谷子（Setaria italica ）起源于我国，是我国重要的杂粮作物之一，在漫长的中国北方旱地农耕文明doidoi:10.3969/j.issn.1002-2481.2023.05.01收稿日期：2022-08-24基金项目：山西省基础研究计划（自由探索类）项目（20210302124503）；山西省高等学校科技创新项目（2021L114）；山西省优秀博士来晋工作奖励资金科研项目（SXYBKY2020010）；山西农业大学科技创新基金项目（2020BQ58）作者简介：高 倩（1996-），女，山西方山人，在读硕士，研究方向：谷子分子遗传育种。
金鱼草WAK
南方农业学报 Journal of Southern Agriculture 2024，55（1）：24-36ISSN 2095-1191； CODEN NNXAABDOI：10.3969/j.issn.2095-1191.2024.01.003金鱼草WAK/WAKL基因家族鉴定及抗核盘菌候选基因挖掘杨冬梅，夏文念，宋佳怡，杨洁，严苍海，苏芸丽，汪仲毅，胡慧贞*（西南林业大学园林园艺学院/云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心，云南昆明650224）摘要：【目的】鉴定金鱼草细胞壁相关受体激酶（Wall-associated kinase，WAK）及类WAK蛋白（WAK-like kinases，WAKL）基因家族成员，并挖掘抗核盘菌的候选基因，为深入解析金鱼草抗核盘菌的WAK/WAKL分子调控机制提供理论参考。
【方法】以拟南芥WAK/WAKL家族蛋白为参考序列，利用生物信息学方法从金鱼草基因组数据库中鉴定出WAK/WAKL基因家族成员，并对其理化性质、系统发育、基因结构、保守基序、顺式作用元件及共线性关系等进行预测分析，并通过转录组测序和实时荧光定量PCR对该家族基因在金鱼草抗感核盘菌材料中的表达模式进行分析。
【结果】从金鱼草基因组中共鉴定出27个WAK/WAKL基因家族成员，其中WAK家族基因16个（AmWAK1~AmWAK16），WAKL家族基因11个（AmWAKL1~AmWAKL11），编码的氨基酸数量为615~1085个；理论等电点（pI）为4.94~8.69，绝大多数蛋白呈酸性；所有蛋白的总平均亲水性指数（GRA VY）值小于0，均为亲水性蛋白；大多数蛋白亚细胞定位于细胞质膜区域，少部分定位于细胞外、液泡、高尔基体和细胞核。
27个WAK/WAKL基因家族成员不均匀地分布在金鱼草的8条染色体上，且与拟南芥WAK/WAKL家族基因存在7对共线性同源基因；基因启动子区域含有与防御和胁迫响应、茉莉酸甲酯响应及水杨酸响应等顺式作用元件。
辣椒几丁质酶类基因家族的全基因组鉴定和表达特征分析
热带作物学报2021, 42(11): 3101 3110 Chinese Journal of Tropical Crops收稿日期 2020-12-15；修回日期 2021-04-09基金项目 福建省自然科学基金项目（No. 2017J01431）；福建农林大学校级创新训练项目（No. 202010389154）。
作者简介 刘卓毅（1995—），男，硕士，研究方向：花卉与景观园艺。
*通信作者（Corresponding author ）：吕美玲（LYU Meiling ），E-mail ：**************.cn 。
辣椒几丁质酶类基因家族的全基因组鉴定和表达特征分析刘卓毅，于文菲，蔡文丽，刘子珊，张 雨，袁 媛，伍炳华，吕美玲*福建农林大学园艺学院花卉与景观园艺实验室，福建福州 350002摘 要：几丁质酶（chitinase, EC 3.2.1.14）是一种降解几丁质的糖苷酶，在植物应对非生物和生物胁迫中起重要作用。
本研究对辣椒几丁质酶类（Capsicum annuum chitinase-like, CaCTL ）基因家族成员进行了全基因组注释、进化分析和基因表达模式分析。
从最新的辣椒基因组数据库中鉴定出31个CaCTL 成员。
根据系统发育进化树将这些成员分为GH18和GH19亚家族，并进一步分为5个亚类（Ⅰ~Ⅴ类）。
保守基序分析结果表明，每个亚类中的成员存在功能相关性。
对辣椒、矮牵牛以及番茄的CTL 基因家族成员同源性分析表明，在矮牵牛和番茄中分别有7个和11个辣椒CaCTL 的同源基因。
通过qRT-PCR 分析发现，在正常环境生长的辣椒植株中，64.2%的GH18亚家族的CaCTL 成员表达水平很低，有64.7%的GH19亚家族成员在不同组织中存在差异表达。
顺式作用元件分析表明，CaCTL 成员启动子区域存在许多激素反应以及生物和非生物应激相关元件。
当植物遭受不同的非生物胁迫时，qRT-PCR 结果显示，多数CaCTL 成员表达上调。
microRNA相关问题的计算分析- 附件1
附件2论文中英文摘要作者姓名：汪小我论文题目：microRNA相关问题的计算分析作者简介：汪小我，男，1980年6月出生，2003年9月师从于清华大学李衍达教授，2008年7月获博士学位。
中文摘要生物信息学是生命科学与信息科学、控制科学等多学科交叉的新兴学科。
近年来，人类基因组的测序完成和各类高通量生物实验技术的发展，使得生物学数据呈指数级增长，如何用生物信息技术挖掘和分析这些海量的信息成为研究的焦点。
同时，随着生物信息学研究的不断深入，它在解决重要的生物学问题、阐明新的生物学规律等方面发挥出巨大作用。
microRNA（miRNA，微小RNA）是近年来新发现的一类非编码RNA，它在诸多重要生命过程中起着关键的调控作用，人们对其在疾病的诊断和治疗等方面的应用前景寄予厚望，关于miRNA的研究是当前生命科学领域最前沿的方向之一。
生物信息学在miRNA的研究中起到了关键作用，极大地推动了该领域的迅速发展。
本论文的工作围绕miRNA这一重要生物学问题展开，运用统计、机器学习和模式识别等多种生物信息学方法，对miRNA的识别、转录调控、进化机制等重要问题进行了多方面的探索，取得了一些创新成果。
主要有以下四方面内容：（1）提出了高效的同源miRNA识别算法，可用于预测远同源的miRNA基因。
要研究miRNA的功能，首先必须找到miRNA。
在提出本课题时，用于发现新miRNA 基因的实验技术费时又费钱，而且很难找到那些表达量较低或者只在特定组织或发育阶段中表达的miRNA。
因此通过高通量的计算方法从基因组中筛选出可能的miRNA基因候选集合，可以对生物学实验提供指导和参考，对推动miRNA研究具有重要意义。
同源基因预测是一类重要的基因识别方法，其出发点是利用基因在物种间的保守性，寻找已知基因的同源基因。
这类方法可以将一个物种中找到的基因及其注释推广到其它物种中。
包括人类基因组在内的多个物种的基因组测序完成为开展同源基因预测创造了条件。
甘薯近缘二倍体野生种TPS_家族全基因组鉴定及表达分析
山西农业科学2022，50（5）：605-612Journal of Shanxi Agricultural Sciences doi:10.3969/j.issn.1002-2481.2022.05.01doi甘薯近缘二倍体野生种TPS家族全基因组鉴定及表达分析梁璇，李鹏，杨哲，贾小云，王文斌（山西农业大学生命科学学院，山西太谷030801）摘要：为了解析六倍体甘薯的海藻糖-6-磷酸合成酶（Trehalose-6-phosphate synthase，TPS）基因家族的结构和功能，为甘薯的分子遗传改良提供候选基因，利用生物信息学方法对甘薯的2个近缘二倍体野生种三浅裂野牵牛（Ipomoea trifida）和三裂叶薯（Ipomoea triloba）进行TPS家族成员鉴定并构建系统进化树，后对其理化性质、结构域、染色体定位、组织表达模式及不同胁迫下的表达模式进行分析。
结果显示，全基因组鉴定得到了10个ItfTPS和10个ItbTPS，二者高度同源，聚类结果一致，其中TPSⅠ包含2个基因，TPSⅡ包含8个基因，除Itf/ ItbTPS3与水稻亲缘关系更近外，其余基因与拟南芥的亲缘关系更近；Itf/ItbTPS基因编码842~940个氨基酸，均为酸性蛋白，多位于细胞核和细胞质中。
结构分析发现，TPSI中Itf/ItbTPS1、Itf/ItbTPS2的motif数分别为7个和8个，外显子数分别为17个和18个；TPSII类均含有10个motif，且外显子数量多为3个；此外，所有Itf/ ItbTPS家族成员均含有PF00982和PF02358保守结构域，且染色体定位一致，说明TPS在进化过程中具有保守性。
表达模式分析显示，Itf/ItbTPS8无差异表达而Itf/ItbTPS7、ItbTPS1均不表达，Itf/ItbTPS3在根中特异高表达且低温胁迫后表达量升高；低温胁迫后ItfTPS5和高温胁迫后ItbTPS5的表达量降低，可能通过调控海藻糖合成来抵御温度胁迫。
长链非编码RNA核旁斑组装转录本1(NEAT1)在免疫相关性疾病中的研究进展
细胞与分子免疫学杂志(Chin J Cell Mol Immunol )2020, 36( 12)1141•综述• 文章编号：1007 -8738(2020)12 -1141 -04长链非编码RNA 核旁斑组装转录本1 ( NEAT1)在免疫相关性疾病中的 研究进展张鑫'，任启伟S 董冠军彳* ('潍坊医学院医学检验学院，潍坊医学院临床检验诊断学山东省“十二五”高校重点实验室， 山东潍坊261053； 2济宁医学院基础医学院病理生理学教研室，山东济宁272067；'济宁医学院基础医学院免疫学与分子医学 研究所，泰山学者实验室，山东济宁272067)收稿日期：2020-09 -20；接受日期：2020-11 -24基金项目：国家自然科学基金(81601426)；济宁医学院青年基金(JYQ2011KM015)作者简介：张鑫(1994-)，女，山东青岛人，硕士研究生Tel : 130****8582 ； E-mail : kaimenfanggou@ 126. com*通讯作者，董冠军，E-mail : guanjun0323@ mail. jnmc. edu. cn［摘要］严格调控免疫反应是有效清除病原体和防止过度炎症的基础。
核旁斑组装转录本l(NEATl)是近年来被广泛关注的参与调控免疫反应的长链非编码RNA 。
已证实，NEAT1在免疫相关性疾病中异常表达(多数是上调)，如脓毒症、炎症性肠病、 自身免疫性疾病及病毒感染。
然而，其在疾病发病进程的作用却错综复杂。
在机制上，主要作为微小RNA (miRNA)海绵来抑 制miRNA 与目标mRNA 之间的相互作用，也可以影响核旁斑介导的基因表达调控。
我们总结了 NEAT1在免疫相关性疾病中的表达变化及作用，重点分析其调控免疫细胞分化和功能的机制，为人们理解NEAT1在免疫相关性疾病中的作用提供理论依据。
［关键词］核旁斑组装转录本KNEAT1)；感染；炎症；自身免疫性疾病；综述［中图分类号］R392.9, R593.2, G353.ll ［文献标志码］A近年来，微小RNA(microRNA, miRNA)和长链非 编码 RNA(long non-coding RNA, IncRNA)在免疫系统应 答和癌症免疫治疗过程中发挥重要作用。
枣PAO基因的鉴定及在果实发育和贮藏过程中的表达分析
㊀山东农业科学㊀２０２３ꎬ５５(１２):９~１６ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ㊀ＤＯＩ:１０.１４０８３/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１－４９４２.２０２３.１２.００２收稿日期:２０２３－０１－３１基金项目:国家重点研发计划项目(２０２１ＹＦＤ１０００４０４)ꎻ现代农业产业技术体系专项(ＣＡＲＳ－３０)ꎻ中央引导地方科技发展专项 特色果树种质创新与育种能力提升 ꎻ新疆红枣产业技术体系专项(ＸＪＣＹＴＸ－０１)作者简介:李丽莉(１９９４ )ꎬ女ꎬ硕士ꎬ助理研究员ꎬ主要从事枣树遗传育种及采后贮藏相关研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:９５３２０１６９７＠ｑｑ.ｃｏｍ通信作者:郝庆(１９６９ )ꎬ男ꎬ硕士ꎬ研究员ꎬ长期从事枣树科研与推广工作ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｈａｏｑｉｎｇｘｊ＠ｓｏｈｕ.ｃｏｍ枣ＰＡＯ基因的鉴定及在果实发育和贮藏过程中的表达分析李丽莉ꎬ樊丁宇ꎬ杨磊ꎬ靳娟ꎬ郝庆(新疆农业科学院园艺作物研究所/新疆特色果蔬基因组研究与遗传改良重点实验室ꎬ新疆乌鲁木齐㊀８３００９１)㊀㊀摘要:多胺氧化酶(ＰＡＯ)是一种黄素腺嘌呤二核苷酸依赖酶ꎬ催化多胺(ＰＡ)分解代谢ꎬ在植物的生长发育和胁迫反应过程中起着关键作用ꎮ本研究对枣ＰＡＯ基因进行了全基因组筛选ꎬ共鉴定出３个ＺｊＰＡＯ基因(ＺｊＰＡＯ１㊁ＺｊＰＡＯ２㊁ＺｊＰＡＯ３)ꎬ并对它们的保守结构域㊁基因结构㊁染色体位置㊁进化关系㊁亚细胞定位㊁启动子顺式作用元件等进行预测和分析ꎮ结果表明ꎬＺｊＰＡＯ１㊁ＺｊＰＡＯ２㊁ＺｊＰＡＯ３基因分别分布在４㊁５㊁８号染色体上ꎬ结构特征较保守ꎬ都包含Ａｍｉｎｏ－ｏｘｉｄａｓｅ结构域ꎮ通过构建系统发育树ꎬ将拟南芥㊁番茄㊁桃和枣的ＰＡＯ蛋白分为４类ꎬ并发现ＺｊＰＡＯｓ蛋白与桃ＰＡＯｓ的亲缘关系较近ꎮＺｊＰＡＯｓ基因启动子含有激素响应㊁应激响应等多种顺式作用元件ꎬ预测在枣生长发育中发挥作用ꎮ此外ꎬ转录组数据分析表明ꎬＺｊＰＡＯ１和ＺｊＰＡＯ２基因在枣果实不同发育阶段均有表达ꎻ在外源水杨酸处理下ꎬＺｊＰＡＯ１基因被显著诱导表达ꎮ本研究结果有助于了解延缓鲜枣果实成熟和衰老的机制ꎮ关键词:枣ꎻ多胺氧化酶(ＰＡＯ)ꎻ基因鉴定ꎻ生物信息学分析ꎻ基因表达ꎻ果实发育ꎻ采后贮藏中图分类号:Ｓ６６５.１:Ｑ７８㊀㊀文献标识号:Ａ㊀㊀文章编号:１００１－４９４２(２０２３)１２－０００９－０８ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＰＡＯＧｅｎｅｄｕｒｉｎｇＦｒｕｉｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＳｔｏｒａｇｅｏｆＺｉｚｉｐｈｕｓｊｕｊｕｂａＬｉＬｉｌｉꎬＦａｎＤｉｎｇｙｕꎬＹａｎｇＬｅｉꎬＪｉｎＪｕａｎꎬＨａｏＱｉｎｇ(ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌＣｒｏｐｓꎬＸｉｎｊｉａｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ/ＸｉｎｊｉａｎｇＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＧｅｎｏｍｅＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆＳｐｅｃｉａｌＦｒｕｉｔｓａｎｄＶｅｇｅｔａｂｌｅｓꎬＵｒｕｍｑｉ８３００９１ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅ(ＰＡＯ)ｉｓａｆｌａｖｉｎａｄｅｎｉｎｅｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｅｎｚｙｍｅｔｈａｔｃａｔａｌｙｚｅｓｔｈｅｃａｔａｂｏｌｉｓｍｏｆｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ(ＰＡ)ａｎｄｐｌａｙｓａｃｒｕｃｉａｌｒｏｌｅｉｎｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈꎬｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｓｔｒｅｓｓｒｅｓｐｏｎｓｅ.Ｔｈｅｇｅｎｏｍｅ￣ｗｉｄｅｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆＰＡＯｇｅｎｅｓｉｎｊｕｊｕｂｅｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄꎬａｎｄｔｈｒｅｅＺｊＰＡＯｇｅｎｅｓ(ＺｊＰＡＯ１ꎬＺｊＰＡＯ２ꎬＺｊＰＡＯ３)ｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄꎬｔｈｅｎｔｈｅｉｒｃｏｎｓｅｒｖｅｄｄｏｍａｉｎｓꎬｇｅｎｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓꎬｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌｐｏｓｉｔｉｏｎｓꎬｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓꎬｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｒｃｉｓａｃｔｉｎｇｅｌｅｍｅｎｔｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｈｒｅｅＺｊＰＡＯｇｅｎｅｓｗｅｒｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄｏｎＣｈｒ４ꎬＣｈｒ５ａｎｄＣｈｒ８ꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬｗｉｔｈｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｔｈｅＡｍｉｎｏ￣ｏｘｉｄａｓｅｄｏｍａｉｎ.ＢｙｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｎｇｔｈｅｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅｓｏｆｔｈｅＰＡＯｇｅｎｅｓｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓꎬｔｏｍａｔｏꎬｐｅａｃｈａｎｄｊｕｊｕｂｅꎬｗｅｆｏｕｎｄｔｈａｔｔｈｅｙｃｏｕｌｄｂｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｏｕｒｃａｔｅｇｏ￣ｒｉｅｓꎬａｎｄｔｈｅＺｊＰＡＯｇｅｎｅｓｗｅｒｅｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅＰＡＯｇｅｎｅｓｉｎｐｅａｃｈ.ＴｈｅｐｒｏｍｏｔｅｒｏｆｔｈｅＺｊＰＡＯｇｅｎｅｓｃｏｎｔａｉｎｅｄｖａｒｉｏｕｓｃｉｓａｃｔｉｎｇｅｌｅｍｅｎｔｓｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｓｕｃｈａｓｈｏｒｍｏｎｅｓａｎｄｓｔｒｅｓｓｒｅｓｐｏｎｓｅｓꎬｗｈｉｃｈｗｅｒｅｐｒｅｄｉｃｔｅｄｔｏｐｌａｙｒｏｌｅｓｉｎｊｕｊｕｂｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ.ＩｎａｄｄｉｔｉｏｎꎬｔｈｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｄａｔａａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｂｏｔｈＺｊＰＡＯ１ａｎｄＺｊＰＡＯ２ｅｘｐｒｅｓｓｅｄａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｔａｇｅｓｏｆｊｕｊｕｂｅｆｒｕｉｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ.ＵｎｄｅｒｅｘｏｇｅｎｏｕｓｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｔｒｅａｔｍｅｎｔꎬｔｈｅＺｊＰＡＯ１ｇｅｎｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｄｕｃｅｄｔｏｅｘｐｒｅｓｓ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｃｏｕｌｄｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｔｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｄｅｌａｙｉｎｇｒｉｐｅｎｉｎｇａｎｄａｇｉｎｇｏｆｆｒｅｓｈｊｕｊｕｂｅｆｒｕｉｔｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀ＺｉｚｉｐｈｕｓｊｕｊｕｂａꎻＰｏｌｙａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅ(ＰＡＯ)ꎻＧｅｎｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎꎻＢｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓꎻＧｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎꎻＦｒｕｉｔｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎻＰｏｓｔ￣ｈａｒｖｅｓｔｓｔｏｒａｇｅ㊀㊀多胺(ｐｏｌｙａｍｉｎｅꎬＰＡ)是一种小的脂肪族胺ꎬ存在于细菌㊁植物和动物等各种生物体中ꎬ在植物中参与各种生理和发育过程ꎬ如植物生长㊁果实发育和成熟以及非生物和生物胁迫反应等[１－５]ꎮ植物中多胺的分解代谢主要依赖于两类胺氧化酶的催化作用 铜胺氧化酶(ＣｕＡＯｓ)和多胺氧化酶(ＰＡＯｓ)[６－７]ꎮＣｕＡＯｓ的功能是催化腐胺(ｐｕｔｒｅｓ￣ｃｉｎｅꎬＰｕｔ)和尸胺(ｃａｄａｖｅｒｉｎｅꎬＣａｄ)氧化为４－氨基丁醛㊁过氧化氢和氨[８]ꎮＰＡＯｓ根据ＰＡ末端分解代谢或ＰＡ反转化反应分为两组:第一组ＰＡＯｓ催化亚精胺(ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅꎬＳｐｄ)和精胺(ｓｐｅｒｍｉｎｅꎬＳｐｍ)的分解ꎬ生成４－氨基丁醇㊁１ꎬ３－二氨基丙烷(Ｄａｐ)和过氧化氢[９]ꎻ第二组ＰＡＯｓ催化Ｓｐｍ反转化为Ｓｐｄ或Ｓｐｄ到Ｐｕｔꎬ同时产生过氧化氢[８]ꎮ可见ꎬＰＡＯｓ在ＰＡ分解代谢中通过调节过氧化氢的动态平衡ꎬ在植物的生长发育和响应非生物胁迫中发挥重要作用ꎮ目前ꎬＰＡＯｓ基因已在拟南芥[１０]㊁水稻[１１]㊁甜橙[１２]㊁番茄[１３]等植物中被鉴定出ꎬ并主要参与ＰＡ反转化途径ꎮ有研究表明ꎬＰＡ可作为内源性的抗衰老剂ꎬ可能与乙烯㊁生长素和脱落酸等植物激素相互作用ꎬ调节果实的发育和成熟[４ꎬ１４－１５]ꎮ外源ＰＡ可以影响乙烯生物合成ꎬ从而影响桃果实的发育和成熟[２]ꎮ在葡萄成熟过程中ꎬＰＡ含量显著降低ꎬ而ＣｕＡＯ和ＰＡＯ转录水平显著上调ꎬ说明ＰＡＯ氧化作用的增强导致了ＰＡ水平的降低[１６]ꎮＰＡＯ抑制剂对ＰＡ分解代谢的干扰影响葡萄果实成熟过程中细胞的扩张和香气发育[１７]ꎮ参与ＰＡ生物合成和分解代谢的基因在番茄的快速生长和成熟阶段被发现高表达[１８]ꎮ但目前有关枣果实成熟过程中ＰＡＯ基因与植物激素信号相互作用的研究鲜有报道ꎮ枣(ＺｉｚｉｐｈｕｓｊｕｊｕｂａＭｉｌｌ.)是我国重要的特色果树之一ꎬ鲜食枣因口感清脆ꎬ汁液爽口ꎬ深受人们喜爱[１９]ꎬ然而果实采收后容易失水萎缩ꎬ从而降低其商业价值[２０]ꎮ延长鲜枣的贮藏期成为亟待解决的问题ꎮ植物激素对延长水果和蔬菜贮藏期有积极作用ꎬＰＡＯ作为激素ＰＡ的重要酶ꎬ是否在枣果实成熟和衰老过程中发挥作用值得探讨ꎮ本研究从枣基因组中系统鉴定出３个ＺｊＰＡＯ基因ꎬ并对其进行了生物信息学分析ꎬ同时分析了这３个基因在果实发育不同时期及贮藏期水杨酸处理下的表达模式ꎬ以期为今后提高鲜枣贮藏品质及延缓果实衰老提供理论基础ꎮ１㊀材料与方法１.１㊀枣ＰＡＯ基因的鉴定利用已鉴定拟南芥ＰＡＯ基因家族的５个成员(ＡｔＰＡＯ１ ＡｔＰＡＯ５)的氨基酸序列在ＮＣＢＩ枣基因组数据库中进行Ｂｌａｓｔｐ同源比对ꎮ从Ｐｆａｍ(ｈｔｔｐ://ｐｆａｍ.ｊａｎｅｌｉａ.ｏｒｇ/)网站下载ＰＡＯ蛋白的特征性结构域ꎬ即ＡＳＭＴ结构域的隐马尔可夫(ＨＭＭ)模型ꎬ利用ＨＭＭＥＲ３.０软件在枣的全基因组蛋白序列中进行ＨＭＭＥＲ搜索ꎬ采用默认参数ꎮ将以上两种方法得到的候选序列进行比较ꎬ去除冗余基因ꎮ利用ＣｏｎｓｅｒｖｅｄＤｏｍａｉｎＤａｔａｂａｓｅ(ｈｔｔｐ://ｂｌａｓｔ.ｎｃｂｉ.ｎｌｍ.ｎｉｈ.ｇｏｖ)以及ＳＭＡＲＴ(ｈｔ￣ｔｐ://ｓｍａｒｔ.ｅｍｂｌ￣ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ.ｄｅ/)对候选蛋白是否含有保守的ＰＡＯ结构域进行筛选ꎬ最终确定枣中的ＰＡＯ家族成员ꎮ另外ꎬ利用ＥｘＰＡＳｙ(ｈｔｔｐｓ://ｗｅｂ.ｅｘｐａｓｙ.ｏｒｇ/ｃｇｉ￣ｂｉｎ/ｐｒｏｔｐａｒａｍ/ｐｒｏｔｐａｒａｍ)对枣ＰＡＯ蛋白大小㊁等电点㊁总平均亲水性㊁不稳定系数进行预测ꎮ利用ＷｏＬＦＰＳＯＲＴ(ｈｔｔｐｓ://ｗｏｌｆｐ￣ｓｏｒｔ.ｈｇｃ.ｊｐ/)对枣ＰＡＯ基因的亚细胞定位进行预测ꎮ１.２㊀基因结构和蛋白保守基序分析利用ＳｔｒｕｃｔｕｒｅＤｉｓｐｌａｙＳｅｒｖｅｒ２.０(ｈｔｔｐ://ｇｓ￣ｄｓ.ｃｂｉ.ｐｋｕ.ｅｄｕ.ｃｎ)对枣ＰＡＯ基因的内含子－外显子结构进行预测分析ꎮ利用ＭＥＭＥ(ｈｔｔｐ://ｍｅｍｅ￣ｓｕｉｔｅ.ｏｒｇ/)对枣ＰＡＯ蛋白保守基序进行识０１山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀别和分析ꎮ１.３㊀蛋白二级结构分析和三级结构模型构建利用ＰＲＡＢＩ￣ＧＥＲＬＡＮＤ(ｈｔｔｐｓ://ｎｐｓａ￣ｐｒａｂｉ.ｉｂｃｐ.ｆｒ/ｃｇｉ￣ｂｉｎ/ｎｐｓａ＿ａｕｔｏｍａｔ.ｐｌ?ｐａｇｅ＝/ＮＰＳＡ/ｎｐｓａ＿ｓｏｐｍａ.ｈｔｍｌ)在线预测枣ＰＡＯ蛋白的二级结构ꎬ再利用Ｐｈｙｒｅ２(ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｓｂｇ.ｂｉｏ.ｉｃ.ａｃ.ｕｋ/ｐｈｙｒｅ２/ｈｔｍｌ)构建枣ＰＡＯ蛋白的三级结构模型ꎮ１.４㊀进化分析利用ＭＥＧＡ５.０软件对枣与拟南芥㊁番茄㊁桃的２３条ＰＡＯ蛋白序列进行多序列比对ꎬ并采用邻接法构建进化树ꎬ置信值为１０００ꎮ１.５㊀染色体定位利用枣ＰＡＯ基因的ＩＤ号从ＮＣＢＩ网站检索ꎬ提取基因的染色体位置信息和各染色体大小ꎬ利用ＭａｐＧｅｎｅ２Ｃｈｒｏｍｗｅｂｖ２.０(ｈｔｔｐ://ｍｇ２ｃ.ｉａｓｋ.ｉｎ/ｍｇ２ｃ＿ｖ２.０/)绘制其在枣染色体上的定位图ꎮ１.６㊀启动子顺式元件分析从ＮＣＢＩ网站上分离枣ＰＡＯ基因起始密码子上游２０００ｂｐ的启动子序列ꎬ并提交到在线网站ＰｌａｎｔＣＡＲＥ(ｈｔｔｐ://ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ.ｐｓｂ.ｕｇｅｎｔ.ｂｅ/ｗｅｂｔｏｏｌｓ/ｐｌａｎｔｃａｒｅ/ｈｔｍｌ/)ꎬ对启动子序列上的激素和逆境相关顺式作用元件进行预测分析ꎮ１.７㊀枣ＰＡＯ基因在枣果实发育不同时期的表达分析前期试验中ꎬ我们以种植于新疆农业科学院园艺作物研究所叶城县果树科学观测实验站枣资源圃的鲜食枣 赛蜜酥１号 为试验材料ꎬ分别在枣幼果期(开花后２０ｄ)㊁膨大期(开花后４５ｄ)㊁白熟期(开花后６０ｄ)㊁脆熟期(开花后７０ｄ)㊁完熟期(开花后８０ｄ)取样ꎬ构建转录组数据库ꎬＮＣ￣ＢＩ检索号为ＰＲＪＮＡ８７１１３１ꎮ基于该转录组数据ꎬ本研究采用ＦＰＫＭ法分析枣ＰＡＯ基因在果实发育不同时期的表达情况ꎬ并制作柱状图ꎮ１.８㊀枣ＰＡＯ基因在果实贮藏期及水杨酸处理下的表达特征分析基于枣转录组数据[２１]ꎬＮＣＢＩ检索号为ＰＲＪ￣ＮＡ７２８８８７ꎬ采用ＦＰＫＭ法分析ＰＡＯ基因在鲜枣 冬枣 中的表达ꎬ并对其在枣果实贮藏０㊁３０㊁５０ｄ和水杨酸处理３０㊁５０ｄ的表达情况制作柱状图ꎮ２㊀结果与分析２.１㊀枣ＰＡＯ基因的鉴定利用Ｂｌａｓｔｐ和ＨＭＭ两种方法对枣ＰＡＯ基因进行了全基因组分析ꎬ鉴定出３个ＰＡＯ基因ꎬ分别处于４㊁５㊁８号染色体上ꎬ分别命名为ＺｊＰＡＯ１㊁ＺｊＰＡＯ２㊁ＺｊＰＡＯ３ꎮ这３个ＺｊＰＡＯ蛋白的氨基酸长度在４９０~５５２个氨基酸之间ꎬ分子量在５４２２５.９０~６０４３９.０６Ｄａ之间ꎬ等电点在５.３８~５.６０之间ꎻ不稳定系数在３０.３５~４３.８７范围内ꎬＺｊＰＡＯ２的稳定性较好ꎻ总平均亲水性为－０.２９６~－０.０９３ꎬ均属亲水性蛋白ꎻ脂肪族指数７７.９３~９３.２９ꎮ亚细胞定位发现ＺｊＰＡＯ１㊁ＺｊＰＡＯ２㊁ＺｊＰＡＯ３分别定位在过氧化物酶体㊁叶绿体㊁细胞质上(表１)ꎮ㊀㊀表１㊀ＺｊＰＡＯｓ基因的基本信息基因名称ＩＤ号染色体位置氨基酸长度/个亚细胞定位蛋白分子量/Ｄａ等电点总平均亲水性不稳定系数脂肪族指数ＺｊＰＡＯ１ＸＰ＿０１５８８０６２６.２Ｃｈｒ４:ＮＣ＿０６３２９０.１(２５６００３９９..２５６０５２８１)４９０过氧化物酶体５４２２５.９０５.６０－０.０９３４０.０４９３.２９ＺｊＰＡＯ２ＸＰ＿０１５９０２１５７.２Ｃｈｒ５:ＮＣ＿０６３２９１.１(１６７３４１３..１６８０２９２)４９６叶绿体５５２２５.８５５.３８－０.２９６３０.３５８２.９４ＺｊＰＡＯ３ＸＰ＿０４８３３４４２５.１Ｃｈｒ８:ＮＣ＿０６３２９４.１(２８４８５０７..２８５０７５４)５５２细胞质６０４３９.０６５.５２－０.２３１４３.８７７７.９３２.２㊀ＺｊＰＡＯｓ蛋白结构域、保守基序和基因结构分析通过对ＺｊＰＡＯｓ蛋白的结构域进行分析ꎬ发现３个ＺｊＰＡＯ蛋白都具有ＰｆａｍＡｍｉｎｏ－ｏｘｉｄａｓｅ结构域ꎬ其中ＺｊＰＡＯ２有２个ＰｆａｍＡｍｉｎｏ－ｏｘｉｄａｓｅ结构域(图１)ꎮ利用ＺｊＰＡＯｓ蛋白的氨基酸序列进行进化分析ꎬ结果发现ＺｊＰＡＯ１与ＺｊＰＡＯ３的亲缘关系更近(图２Ａ)ꎮ利用ＭＥＭＥ在线软件对ＺｊＰＡＯｓ蛋白的保守基序进行分析ꎬ发现ＺｊＰＡＯ１含有８个保守基序ꎬＺｊＰＡＯ２和ＺｊＰＡＯ３均含有９个保守基序(图２Ｂ)ꎬ其中ｍｏｔｉｆ１㊁ｍｏｔｉｆ２㊁ｍｏｔｉｆ３最为保守(图２Ｃ)ꎮＺｊＰＡＯ２和ＺｊＰＡＯ３共有的保守基序为８个ꎬ推测可能发挥相似的生物学功能ꎮ利用在线网站ＧＳＤＳ对ＺｊＰＡＯｓ基因的内含子－外显子结构进行分析ꎬ结果发现ꎬＺｊＰＡＯ１和ＺｊＰＡＯ２基因都含有１０个外显子ꎬ而ＺｊＰＡＯ３只含有１个外显子(图２Ｄ)ꎮ１１㊀第１２期㊀㊀㊀㊀李丽莉ꎬ等:枣ＰＡＯ基因的鉴定及在果实发育和贮藏过程中的表达分析图１㊀ＺｊＰＡＯｓ蛋白结构域Ａ:ＺｊＰＡＯｓ蛋白进化分析ꎻＢ和Ｃ:ＺｊＰＡＯｓ蛋白保守基序分析ꎻＤ:ＺｊＰＡＯｓ基因结构ꎮ图２㊀ＺｊＰＡＯｓ蛋白进化、保守基序及基因结构分析２.３㊀ＺｊＰＡＯｓ蛋白二级和三级结构ＺｊＰＡＯｓ蛋白二级结构中均含有α－螺旋㊁延伸链㊁β－转角和无规则卷曲ꎬ其中ꎬ无规则卷曲和α－螺旋占比较大ꎬ分别为３６.５３％~４５.８３％和３３.１５％~４０.２０％ꎬβ－转角占比最小(表２)ꎮＺｊＰＡＯｓ蛋白的三级结构预测模型见图３ꎬ显示三者的结构相似ꎬ推测它们具有类似的功能ꎮ２.４㊀ＺｊＰＡＯｓ基因的染色体分布ＺｊＰＡＯｓ基因分别分布在４㊁５㊁８号染色体上ꎬ且每条染色体上仅分布１个ＰＡＯ基因ꎬ其在染色体上的位置见图４ꎮ㊀㊀表２㊀㊀㊀ＺｊＰＡＯｓ蛋白二级结构预测蛋白名称氨基酸个数(占比/％)α－螺旋延伸链β－转角无规则卷曲ＺｊＰＡＯ１１９７(４０.２０)９２(１８.７８)２２(４.４９)１７９(３６.５３)ＺｊＰＡＯ２１７６(３５.４８)９０(１８.１５)２８(５.６５)２０２(４０.７３)ＺｊＰＡＯ３１８３(３３.１５)９３(１６.８５)２３(４.１７)２５３(４５.８３)２.５㊀ＺｊＰＡＯｓ蛋白的进化分析为了进一步分析ＰＡＯ蛋白的进化关系ꎬ本研究对２３条来自拟南芥(５条)㊁番茄(１１条)㊁桃(４条)和枣(３条)的ＰＡＯ蛋白氨基酸序列进行比对分析并构建进化树(图５)ꎬ结果发现ꎬ可将这２３２１山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀图３㊀ＺｊＰＡＯｓ蛋白的三级结构图４㊀三个ＺｊＰＡＯｓ基因在染色体上的定位个ＰＡＯ蛋白划分为４个亚族ꎬ其中Ⅳ亚族成员最多ꎬⅢ亚族成员最少ꎻＺｊＰＡＯｓ在Ⅰ㊁Ⅱ㊁Ⅳ亚族中各一个ꎬ均与桃ＰＡＯ蛋白的同源关系最近ꎮ２.６㊀ＺｊＰＡＯ基因的启动子区作用元件分析ＺｊＰＡＯｓ启动子区域存在多种激素和应激反应相关顺式作用元件(图６)ꎬ主要有茉莉酸甲酯㊁赤霉素㊁水杨酸㊁脱落酸㊁生长素等植物激素响应元件ꎬ以及厌氧诱导㊁防御应激㊁植物周期调节和分生组织表达等应激响应元件ꎮ表明ＺｊＰＡＯｓ基因可能参与了响应植物激素及胁迫应激等多种生物学过程ꎮＡｔ:拟南芥ꎻＰｐ:桃ꎻＳｌ:番茄ꎻＺｊ:枣ꎮ图５㊀利用拟南芥㊁番茄㊁桃和枣的ＰＡＯ蛋白构建的进化树３１㊀第１２期㊀㊀㊀㊀李丽莉ꎬ等:枣ＰＡＯ基因的鉴定及在果实发育和贮藏过程中的表达分析图６㊀ＺｊＰＡＯｓ基因启动子区的顺式作用元件２.７㊀ＺｊＰＡＯｓ基因在枣果实不同发育时期的表达特征分析基于前期试验获得的转录组测序数据ꎬ分析了ＺｊＰＡＯｓ基因在枣果实不同发育时期的表达情况ꎬ结果见图７ꎮ可以看出ꎬＺｊＰＡＯ１在枣果实不同发育时期的表达水平基本呈现先升高后下降的趋势ꎬ在果实脆熟期表达量最高ꎻＺｊＰＡＯ２在枣果实发育过程中呈现先下降后略升高的趋势ꎬ在幼∗∗表示各发育时期与幼果期相比ꎬＺｊＰＡＯｓ基因表达量差异显著(Ｐ<０.０１)ꎮ图７㊀ＺｊＰＡＯｓ基因在枣果实不同发育时期的相对表达量果期表达量最高ꎬ其他果实发育时期表达量明显降低ꎻＺｊＰＡＯ３在枣幼果期略有表达ꎬ其他果实发育时期表达量极低甚至不表达ꎮ２.８㊀ＺｊＰＡＯｓ基因在冬枣贮藏期及水杨酸处理下的表达特征分析水杨酸(ＳＡ)作为一种天然水果防腐剂ꎬ被广泛用于提高果实品质和延长果实贮藏寿命ꎮ本研究利用转录组数据分析了ＺｊＰＡＯｓ基因在冬枣０ħ贮藏０㊁３０㊁５０ｄ和２ｍｍｏｌ/ＬＳＡ处理后０ħ贮藏３０㊁５０ｄ的表达模式ꎮ结果(图８)显示ꎬ随着冬枣贮藏时间的延长ꎬＺｊＰＡＯ２基因的表达量明显增加ꎬＺｊＰＡＯ１基因则呈先升高后降低趋势ꎬ而ＺｊＰＡＯ３在冬枣贮藏期内不表达ꎮＳＡ处理后ꎬＺｊＰＡＯ１基因在冬枣贮藏期间的表达水平明显被诱导ꎬ贮藏３０ｄ较ＣＫ３０提高１７.２１％ꎬ贮藏５０ｄ的表达量更高ꎻ而ＺｊＰＡＯ２的表达受到一定程度的抑制ꎬ贮藏３０ｄ的表达量与ＣＫ３０相比降低３.２８％ꎬ贮藏５０ｄ则比ＣＫ５０降低３９.７１％ꎻＺｊＰＡＯ３虽也被诱导表达ꎬ但表达量远低于ＺｊＰＡＯ１和ＺｊＰＡＯ２ꎬ且随贮藏时间的延长表达量明显降低ꎮ说明ＺｊＰＡＯｓ基因在枣果实贮藏期间发挥着不同的功能ꎮ３㊀讨论与结论枣是一种世界范围内广泛种植的果树ꎬ按果实用途分为制干㊁鲜食㊁加工三类ꎮ鲜食枣因口感酥脆㊁营养价值高受到消费者喜爱ꎬ但鲜枣采后很难贮藏ꎬ极易失水皱缩甚至腐烂ꎬ造成巨大的经济损失ꎮ如何延长鲜枣的贮藏期成为研究难题ꎮ多４１山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀ＣＫ０㊁ＣＫ３０㊁ＣＫ５０分别指冬枣在０ħ贮藏０㊁３０㊁５０ｄꎻＳＡ３０㊁ＳＡ５０分别指冬枣在水杨酸处理后０ħ贮藏３０㊁５０ｄꎮ∗∗表示相同贮藏天数下ＳＡ处理与对照相比ＺｊＰＡＯｓ表达量差异显著(Ｐ<０.０１)ꎮ图８㊀ＺｊＰＡＯ基因在冬枣贮藏期及水杨酸㊀㊀处理下的相对表达量胺是一种可以延长果实成熟衰老的植物激素ꎬＰＡＯ是多胺分解代谢的关键酶ꎬ为了明确其是否在枣果实贮藏保鲜中发挥作用ꎬ本研究通过全基因组分析ꎬ从枣基因组中鉴定出３个ＺｊＰＡＯ基因ꎬ少于荔枝(１０个)[２２]㊁番茄(１１个)[２３]㊁苹果(８个)[２４]㊁辣椒(６个)[２５]㊁拟南芥(５个)[１０]㊁桃(４个)[２６]的ＰＡＯ基因数量ꎮＺｊＰＡＯ１㊁ＺｊＰＡＯ２㊁ＺｊＰＡＯ３分别分布在４㊁５㊁８号染色体上ꎬ蛋白分子量５７２２５.９０~６０４３９.０６Ｄａꎬ分别含４９０㊁４９６㊁５５２个氨基酸ꎬ等电点５.３８~５.６０ꎬ均为疏水蛋白ꎬ且除ＺｊＰＡＯ２外均为不稳定蛋白ꎮ３个ＺｊＰＡＯｓ中ꎬＺｊＰＡＯ１和ＺｊＰＡＯ３的亲缘关系更近ꎬ具有相似的保守基序ꎮ将ＺｊＰＡＯｓ与拟南芥㊁番茄㊁桃和枣的ＰＡＯ蛋白进行系统发育分析ꎬ发现ＺｊＰＡＯｓ都与桃的ＰＡＯ蛋白聚在一起ꎮ姚腾飞[２６]研究发现ꎬ桃ＰＡＯ基因在桃果实生长发育中发挥重要作用ꎬ并筛选出桃果实成熟过程中多胺分解关键基因ＰｐＰＡＯ１ꎮ本研究也发现ꎬ除ＺｊＰＡＯ３仅在幼果期低水平表达外ꎬＺｊＰＡＯ１和ＺｊＰＡＯ２在幼果期 完熟期均表达ꎬ分别在脆熟期和幼果期达到表达高峰ꎻ随生育进程推进ꎬＺｊＰＡＯ１整体呈先上调后下调表达趋势ꎬＺｊＰＡＯ２呈先下调后略上调的表达趋势ꎮ说明ＺｊＰＡＯｓ基因ꎬ尤其ＺｊＰＡＯ１和ＺｊＰＡＯ２可能在枣果实成熟过程中发挥着重要作用ꎮ研究表明ꎬ激素是一类内源性小分子物质ꎬ包括乙烯(ＥＴ)㊁水杨酸(ＳＡ)㊁茉莉酸(ＪＡ)和生长素(ａｕｘｉｎ)等ꎬ参与调控植物的多种生长发育过程ꎬ如细胞的分裂与伸长ꎬ组织与器官分化ꎬ开花与结实ꎬ成熟与衰老ꎬ以及应对外界多种生物和非生物胁迫[２７－２８]ꎮ外源ＳＡ处理能够延缓枣果实的衰老氧化并维持鲜枣贮藏品质[２１]ꎮ本研究对３个ＺｊＰＡＯ基因的启动子顺式作用元件进行分析ꎬ发现了水杨酸响应元件ꎬ推测可能在激素响应中发挥重要作用ꎻ进一步研究发现ꎬＳＡ处理能够诱导枣贮藏期间ＺｊＰＡＯ１基因上调表达ꎬ且贮藏期越长ꎬ对ＺｊＰＡＯ１的诱导效果越好ꎮＺｊＰＡＯｓ在枣果实成熟和贮藏过程中的确切作用还需使用转基因技术进一步研究ꎬ本研究结果可为ＺｊＰＡＯｓ的作用机理研究提供一定的基础ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[１]㊀ＢｒｅｇｏｌｉＡＭꎬＳｃａｒａｍａｇｌｉＳꎬＣｏｓｔａＧꎬｅｔａｌ.Ｐｅａｃｈ(Ｐｒｕｎｕｓｐｅｒｓｉｃａ)ｆｒｕｉｔｒｉｐｅｎｉｎｇ:ａｍｉｎｏｅｔｈｏｘｙｖｉｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅ(ＡＶＧ)ａｎｄｅｘｏｇｅｎｏｕｓｐｏｌｙａｍｉｎｅｓａｆｆｅｃｔｅｔｈｙｌｅｎｅｅｍｉｓｓｉｏｎａｎｄｆｌｅｓｈｆｉｒｍ￣ｎｅｓｓ[Ｊ].Ｐｈｙｓｉｏｌ.Ｐｌａｎｔꎬ２００２ꎬ１１４(３):４７２－４８１. [２]㊀ＴｏｒｒｉｇｉａｎｉＰꎬＢｒｅｓｓａｎｉｎＤꎬＲｕｉｚＫＢꎬｅｔａｌ.Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅａｐｐｌｉ￣ｃａｔｉｏｎｔｏｙｏｕｎｇｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｐｅａｃｈｆｒｕｉｔｓｌｅａｄｓｔｏａｓｌｏｗｉｎｇｄｏｗｎｏｆｒｉｐｅｎｉｎｇｂｙｉｍｐａｉｒｉｎｇｒｉｐｅｎｉｎｇ￣ｒｅｌａｔｅｄｅｔｈｙｌｅｎｅａｎｄａｕｘｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｓｉｇｎａｌｉｎｇ[Ｊ].Ｐｈｙｓｉｏｌ.Ｐｌａｎｔꎬ２０１２ꎬ１４６(１):８６－９８.[３]㊀ＧｕｏＪＸꎬＷａｎｇＳＦꎬＹｕＸＹꎬｅｔａｌ.ＰｏｌｙａｍｉｎｅｓｒｅｇｕｌａｔｅｓｔｒａｗｂｅｒｒｙｆｒｕｉｔｒｉｐｅｎｉｎｇｂｙＡＢＡꎬＩＡＡꎬａｎｄｅｔｈｙｌｅｎｅ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌ.ꎬ２０１８ꎬ１７７(１):３３９－３５１.[４]㊀ＡｌｃáｚａｒＲꎬＡｌｔａｂｅｌｌａＴꎬＭａｒｃｏＦꎬｅｔａｌ.Ｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ:ｍｏｌｅ￣５１㊀第１２期㊀㊀㊀㊀李丽莉ꎬ等:枣ＰＡＯ基因的鉴定及在果实发育和贮藏过程中的表达分析ｃｕｌｅｓｗｉｔｈｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｆｕｎｃｔｉｏｎｓｉｎｐｌａｎｔａｂｉｏｔｉｃｓｔｒｅｓｓｔｏｌｅｒａｎｃｅ[Ｊ].Ｐｌａｎｔａꎬ２０１０ꎬ２３１(６):１２３７－１２４９.[５]㊀ＨａｔｍｉＳꎬＴｒｏｔｅｌ￣ＡｚｉｚＰꎬＶｉｌｌａｕｍｅＳꎬｅｔａｌ.Ｏｓｍｏｔｉｃｓｔｒｅｓｓ￣ｉｎ￣ｄｕｃｅｄｐｏｌｙａｍｉｎｅｏｘｉｄａｔｉｏｎｍｅｄｉａｔｅｓｄｅｆｅｎｃｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓａｎｄｒｅ￣ｄｕｃｅｓｓｔｒｅｓｓ￣ｅｎｈａｎｃｅｄｇｒａｐｅｖｉｎｅｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｔｏＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅ￣ｒｅａ[Ｊ].Ｊ.Ｅｘｐ.Ｂｏｔ.ꎬ２０１３ꎬ６５(１):７５－８８. [６]㊀ＰｅｇｇＡＥꎬＣａｓｅｒｏＪｒＲＡ.Ｃｕｒｒｅｎｔｓｔａｔｕｓｏｆｔｈｅｐｏｌｙａｍｉｎｅｒｅ￣ｓｅａｒｃｈｆｉｅｌｄ[Ｊ].ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｌ.Ｂｉｏｌ.ꎬ２０１１ꎬ７２０:３－３５. [７]㊀Ｐｌａｎａｓ￣ＰｏｒｔｅｌｌＪꎬＧａｌｌａｒｔＭꎬＴｉｂｕｒｃｉｏＡＦꎬｅｔａｌ.Ｃｏｐｐｅｒ￣ｃｏｎ￣ｔａｉｎｉｎｇａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅｓｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｔｏｔｅｒｍｉｎａｌｐｏｌｙａｍｉｎｅｏｘｉｄａ￣ｔｉｏｎｉｎｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅｓａｎｄａｐｏｐｌａｓｔｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ[Ｊ].ＢＭＣＰｌａｎｔＢｉｏｌ.ꎬ２０１３ꎬ１３(１):１０９－１２１.[８]㊀ＭｏｓｃｈｏｕＰＮꎬＷｕＪꎬＣｏｎａＡꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｐｏｌｙａｍｉｎｅｓａｎｄｔｈｅｉｒｃａｔａｂｏｌｉｃｐｒｏｄｕｃｔｓａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｐｌａｙｅｒｓｉｎｔｈｅｔｕｒｎｏｖｅｒｏｆｎｉ￣ｔｒｏｇｅｎｏｕｓｍｏｌｅｃｕｌｅｓｉｎｐｌａｎｔｓ[Ｊ].Ｊ.Ｅｘｐ.Ｂｏｔ.ꎬ２０１２ꎬ６３(１４):５００３－５０１５.[９]㊀ＣｏｎａＡꎬＲｅａＧꎬＡｎｇｅｌｉｎｉＲꎬｅｔａｌ.Ｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅｓｉｎｐｌａｎｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｄｅｆｅｎｃｅ[Ｊ].ＴｒｅｎｄｓＰｌａｎｔＳｃｉ.ꎬ２００６ꎬ１１:８０－８８.[１０]ＦｉｎｃａｔｏＰꎬＭｏｓｃｈｏｕＰＮꎬＳｐｅｄａｌｅｔｔｉＶꎬｅｔａｌ.Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｄｉ￣ｖｅｒｓｉｔｙｉｎｓｉｄｅｔｈｅＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｐｏｌｙａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅｇｅｎｅｆａｍｉｌｙ[Ｊ].Ｊ.Ｅｘｐ.Ｂｏｔ.ꎬ２０１１ꎬ６２(３):１１５５－１１６８.[１１]ＳａｇｏｒＧＨＭꎬＫｕｓａｎｏＴꎬＢｅｒｂｅｒｉｃｈＴ.Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｃ￣ｔｕａｌｃｏｄｉｎｇｒｅｇｉｏｎｆｏｒｐｏｌｙａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅ６ｆｒｏｍｒｉｃｅ(ＯｓＰＡＯ６)ａｎｄｉｔｓｐａｒｔｉａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ[Ｊ].ＰｌａｎｔＳｉｇｎａｌＢｅｈａｖ.ꎬ２０１７ꎬ１２(８):ｅ１３５９４５６.[１２]ＷａｎｇＷꎬＬｉｕＪＨ.Ｇｅｎｏｍｅ￣ｗｉｄｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｐｏｌｙａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｉｎｓｗｅｅｔｏｒａｎｇｅ(Ｃｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓ)[Ｊ].Ｇｅｎｅꎬ２０１５ꎬ５５５(２):４２１－４２９. [１３]ＨａｏＹＷꎬＨｕａｎｇＢＢꎬＪｉａＤＹꎬｅｔａｌ.Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｅｖｅｎｐｏｌｙａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅｇｅｎｅｓｉｎｔｏｍａｔｏ(ＳｏｌａｎｕｍｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍＬ.)ａｎｄｔｈｅｉｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅｓｕｎｄｅｒｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｖａｒｉｏｕｓｓｔｒｅｓｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ[Ｊ].Ｊ.ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌ.ꎬ２０１８ꎬ２２８:１－１１. [１４]ＣｕｉＸꎬＧｅＣＭꎬＷａｎｇＲＸꎬｅｔａｌ.ＴｈｅＢＵＤ２ｍｕｔａｔｉｏｎａｆｆｅｃｔｓｐｌａｎｔａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅｔｈｒｏｕｇｈａｌｔｅｒｉｎｇｃｙｔｏｋｉｎｉｎａｎｄａｕｘｉｎｒｅｓｐｏｎ￣ｓｅｓｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＲｅｓ.ꎬ２０１０ꎬ２０:５７６－５８６. [１５]Ｐａｒｒａ￣ＬｏｂａｔｏＭＣꎬＧｏｍｅｚ￣ＪｉｍｅｎｅｚＭＣ.Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ￣ｉｎｄｕｃｅｄｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｅｔｈｙｌｅｎｅｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｓｉｇ￣ｎａｌｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓａｎｄｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇｏｌｉｖｅｍａｔｕｒｅｆｒｕｉｔａｂｓｃｉｓｓｉｏｎ[Ｊ].Ｊ.Ｅｘｐ.Ｂｏｔ.ꎬ２０１１ꎬ６２(１３):４４４７－４４６５. [１６]Ａｇｕｄｅｌｏ￣ＲｏｍｅｒｏＰꎬＢｏｒｔｏｌｌｏｔｉＣꎬＰａｉｓＭＳꎬｅｔａｌ.Ｓｔｕｄｙｏｆｐｏｌｙａｍｉｎｅｓｄｕｒｉｎｇｇｒａｐｅｒｉｐｅｎｉｎｇｉｎｄｉｃａｔｅａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｏｆｐｏｌｙａｍｉｎｅｃａｔａｂｏｌｉｓｍ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌ.Ｂｉｏｃｈｅｍ.ꎬ２０１３ꎬ６７:１０５－１１９.[１７]Ａｇｕｄｅｌｏ￣ＲｏｍｅｒｏＰꎬＡｌｉＫａｓｈｉｆꎬＣｈｏｉＹＨꎬｅｔａｌ.ＰｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙａｍｉｎｅｃａｔａｂｏｌｉｓｍａｆｆｅｃｔｓｇｒａｐｅｒｉｐｅｎｉｎｇｏｆＶｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａｃｖ.Ｔｒｉｎｃａｄｅｉｒａ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ＆Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０１４ꎬ７４:１４１－１５５.[１８]ＴｓａｎｉｋｌｉｄｉｓＧꎬＫｏｔｓｉｒａｓＡꎬＴｓａｆｏｕｒｏｓＡ.Ｓｐａｔｉａｌａｎｄｔｅｍｐｏｒａｌｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｐｏｌｙａｍｉｎｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｄｕｒｉｎｇｔｏｍａｔｏｆｒｕｉｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌ.Ｂｉｏｃｈｅｍ.ꎬ２０１６ꎬ１００:２７－３６.[１９]ＺｈａｏＹＴꎬＺｈｕＸꎬＨｏｕＹＹꎬｅｔａｌ.Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｈａｒｖｅｓｔｍａｔｕｒｉｔｙｓｔａｇｅｏｎｐｏｓｔｈａｒｖｅｓｔｑｕａｌｉｔｙｏｆｗｉｎｔｅｒｊｕｊｕｂｅ(ＺｉｚｙｐｈｕｓｊｕｊｕｂａＭｉｌｌ.ｃｖ.Ｄｏｎｇｚａｏ)ｆｒｕｉｔｄｕｒｉｎｇｃｏｌｄｓｔｏｒａｇｅ[Ｊ].Ｓｃｉ.Ｈｏｒｔｉｃ.ꎬ２０２１ꎬ２７７:１０９７７８.[２０]ＺｈａｏＹＴꎬＺｈｕＸꎬＨｏｕＹＹꎬｅｔａｌ.Ｐｏｓｔｈａｒｖｅｓｔｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｄｅｌａｙｓｔｈｅｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅｏｆｗｉｎｔｅｒｊｕｊｕｂｅ(Ｚｉｚｙｐｈｕｓｊｕｊｕ￣ｂａＭｉｌｌ.ｃｖ.Ｄｏｎｇｚａｏ)ｆｒｕｉｔｄｕｒｉｎｇｃｏｌｄｓｔｏｒａｇｅｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｒｅ￣ａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ[Ｊ].Ｓｃｉ.Ｈｏｒｔｉｃ.ꎬ２０２０ꎬ２６１:１０９００９.[２１]ＳａｎｇＹＹꎬＬｉｕＹＸꎬＴａｎｇＹＳꎬｅｔａｌ.Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｓｅｑｕｅｎ￣ｃｉｎｇｒｅｖｅａｌｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｉｍｐｒｏｖｅｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｃａｐａｃｉｔｙａｎｄｍａｉｎｔａｉｎｅｄｐｏｓｔｈａｒｖｅｓｔｑｕａｌｉｔｙｏｆｗｉｎｔｅｒｊｕｊｕｂｅｄｕｒｉｎｇｃｏｌｄｓｔｏｒ￣ａｇｅａｆｔｅｒｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｔｒｅａｔｍｅｎｔ[Ｊ].ＰｏｓｔｈａｒｖｅｓｔＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ２０２２ꎬ１８９:１１１９２９.[２２]唐丽雯ꎬ张月ꎬ岳晓琦ꎬ等.荔枝多胺氧化酶(ＰＡＯ)基因家族的全基因组鉴定与表达分析[Ｊ].分子植物育种ꎬ２０２３ꎬ２１(２２):７３６０－７３７１.[２３]李会ꎬ王超ꎬ黄思杰ꎬ等.番茄多胺氧化酶(ＰＡＯ)基因家族鉴定及表达分析[Ｊ].西北植物学报ꎬ２０１８ꎬ３８(４):６０７－６１４.[２４]秦玲ꎬ张鑫ꎬ荣春笑ꎬ等.苹果多胺氧化酶(ＰＡＯ)基因家族鉴定与表达分析[Ｊ].浙江农业学报ꎬ２０２０ꎬ３２(２):２６２－２７３.[２５]ＺｈａｎｇＪＷꎬＬｉａｎｇＬꎬＸｉａｏＪＣꎬｅｔａｌ.Ｇｅｎｏｍｅ￣ｗｉｄｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａ￣ｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙａｍｉｎｅｏｘｉｄａｓｅ(ＰＡＯ)ｆａｍｉｌｙｇｅｎｅｓ:ｒｏｌｅｓｏｆＣａ￣ＰＡＯ２ａｎｄＣａＰＡＯ４ｉｎｔｈｅｃｏｌｄｔｏｌｅｒａｎｃｅｏｆｐｅｐｐｅｒ(ＣａｐｓｉｃｕｍａｎｎｕｕｍＬ.)[Ｊ].ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０２２ꎬ２３(１７):９９９９.[２６]姚腾飞.桃ＰｐＣｕＰＡＯ和ＰｐＰＡＯ基因发掘及在果实发育和成熟过程中的表达分析[Ｄ].郑州:河南农业大学ꎬ２０１８. [２７]ＨａｂｉｂｉＦꎬＲａｍｅｚａｎｉａｎＡꎬＧｕｉｌｌｅｎＦꎬｅｔａｌ.Ｂｌｏｏｄｏｒａｎｇｅｓｍａｉｎｔａｉｎｂｉｏａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｎｄｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｑｕａｌｉｔｙｂｙｐｏｓｔ￣ｈａｒｖｅｓｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｗｉｔｈγ￣ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄꎬｍｅｔｈｙｌｊａｓｍｏｎａｔｅｏｒｍｅｔｈｙｌｓａｌｉｃｙｌａｔｅｄｕｒｉｎｇｃｏｌｄｓｔｏｒａｇｅ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍ.ꎬ２０２０ꎬ３０６:１２５６３４.[２８]ＷａｎｇＦꎬＺｈａｎｇＸＰꎬＹａｎｇＱＺꎬｅｔａｌ.Ｅｘｏｇｅｎｏｕｓｍｅｌａｔｏｎｉｎｄｅｌａｙｓｐｏｓｔｈａｒｖｅｓｔｆｒｕｉｔｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅａｎｄｍａｉｎｔａｉｎｓｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｓｗｅｅｔｃｈｅｒｒｉｅｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍ.ꎬ２０１９ꎬ３０１:１２５３１１.６１山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀。