MDA概述
丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA微板法)

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA微板法)丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 微板法)简介:动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时,会发生脂质氧化。
丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物,一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA 在内的复杂化合物,此时通过检测MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平,因此MDA 的测定被广泛用作脂质氧化的指标。
丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 微板法,MDA Assay Kit)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒,是采用一种基于MDA 和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应,特别适用于微量样本的检测。
丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA 发生反应,形成红色的MDA-TBA 加合物,MDA-TBA 加合物在535nm 处有最大吸收,据此可以通过比色法进行检测。
本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:操作步骤(仅供参考):1、样本处理:①血清、血浆、尿液、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。
②组织、细胞等样本:组织或细胞可以使用PBS 或Leagene Western 及IP 细胞裂解液等进行匀浆或裂解。
匀浆或裂解组织时,组织重量占匀浆液或裂解液的比例应为10%;对于细胞,每106个细胞使用0.1ml 裂解液或匀浆液。
匀浆或裂解后,取上清用于后续测定。
匀浆或裂解等样品制备步骤宜在冰浴或4℃进行操作。
样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的MDA 含量。
编号名称TO1011 100T Storage试剂(A): TBA 40mg RT 避光试剂(C): 抗氧化剂300μl RT 避光试剂(D): MDA 标准品(1mmol/L) 200μl -20℃ 避光试剂(E): MDA 检测液 100mlRT 避光使用说明书1份本试剂盒对于样品中的常见化学成分的兼容性参考下表:试剂类别化学成分是否干扰缓冲液HEPES (100mM) 否Borate (50mM) 否Phosphate (100mM) 否Tris (25mM) 否去垢剂CHAPS (≤1%) 否Triton X-100 (≤1%) 否Tween 20 (≤1%) 否抑制剂/螯合剂PMSF (≤200μM) 否EDTA (≤1mM) 否EGTA (≤1mM) 否Antipain (≤100μg/ml) 否Chymostatin (≤10μg/ml) 否Leupeptin (≤10μg/ml) 否Trypsin (≤10μg/ml) 否其他Glycerol (≤10%) 否Sucrose (250mM) 是2、TBA工作液的配制:BA工作液。
微型疾病评估(MDA)

微型疾病评估(MDA)微型疾病评估(MDA)微型疾病评估(MDA)是一种用于评估患者健康状况的工具。
它可以帮助医生和健康专业人士更好地了解患者的身体状况,并提供准确的诊断和治疗建议。
MDA的意义MDA的意义在于通过收集和分析患者的健康信息,准确评估患者的疾病风险和身体状况。
通过MDA,医生可以更好地了解患者的健康问题,并能给出个性化的治疗建议。
同时,MDA还可以帮助医疗机构实现健康数据的整合和分享,提高整体医疗服务的质量和效率。
MDA的流程MDA的流程包括以下几个步骤:1. 数据收集:医生或健康专业人士会收集患者的个人信息、病史、生活惯等数据。
2. 数据分析:通过对患者数据的分析和比对,评估患者的疾病风险和身体状况。
3. 诊断和治疗建议:基于数据分析的结果,医生可以给出准确的诊断和个性化的治疗建议。
4. 结果反馈:将诊断和治疗建议反馈给患者,让其了解自身的健康状况并采取相应的行动。
MDA的优势MDA相比传统的评估方法具有以下优势:- 高效性:通过自动化的数据收集和分析,MDA可以更快速地评估患者的健康状况,提高工作效率。
- 准确性:MDA通过科学的算法和模型,能够更准确地评估患者的疾病风险和身体状况,避免主观判断带来的误差。
- 个性化:MDA可以根据患者的个人信息和数据分析结果,给出个性化的诊断和治疗建议,提高治疗效果。
- 数据整合:MDA可以将患者的健康数据整合到一个平台上,方便医生和健康专业人士进行综合分析和管理。
结论微型疾病评估(MDA)是一种高效、准确且个性化的健康评估工具。
通过MDA,医生和健康专业人士可以更好地了解患者的健康状况,并给出准确的诊断和治疗建议。
在未来的医疗服务中,MDA有望发挥更重要的作用,提升整体医疗服务的质量和效率。
人丙二醛(MDA)说明书

OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
3 酶标包被板
12 孔×8 条
9 标准品稀释液
1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液
6ml×1 瓶
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6 个月
生化理论10 丙二醛(MDA)的测定

测定管
0.1 0.1
测定空白管①
0.1 0.1
试剂B/ml 试剂C/ml
50%冰醋酸/ml
混匀 (摇动试管)
3.0 3.0
3.0
3.0
1.0 1.0
1.0
1.0
加入试剂后,用旋涡混匀器混匀,试管口用保鲜膜扎紧,刺一小孔, 95℃水浴40min③,取出后流水冷却,然后3500-4000r/min,离心10min。取 上清, 532nm处,1cm光径,用蒸馏水调零,比色测定各管吸光度值。
50%冰醋酸 无水乙醇
实验十 丙二醛(MDA)的测定
操作:
按指导做。
计算:
按指导做。
报告:
按常规。
实验十 丙二醛(MDA)的测定
操作:
取4支干净试管,按下表进行操作。
管号 标准管 标准空白管
试剂
10nmol/ml标准品/ml 0.1
无水乙醇/ml
0.1
血清(桨)②/ml
试剂A/ml
0.1 0.1
原理:
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸
(polyunsaturatedfattyacid,PUFA),引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化 物,如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新氧 自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解 产物,而且通过链式或链式支连反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能 导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞 代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸(PUFA)的 过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA的量常常可以反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。
MDA测定

膜脂过氧化水平(MDA)的测定植物器官衰老或在逆境下遭受伤害,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终分解产物。
丙二醛的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。
研究中常以MDA含量来反映植物膜脂过氧化的水平和对细胞膜的伤害程度。
1、实验原理丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在酸性和高温度条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮),其最大吸收波长在532nm。
但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰,其中最主要的是可溶性糖,糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm,但532nm 处也有吸收。
植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加,因此测定植物组织中MDA-TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。
低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值,所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子,通常植物组织中铁离子的含量为每克干重100~300μg/g,根据植物样品量和提取液的体积,加入Fe3+的终浓度为0.5μmol/L。
双组分分光光度计法据朗伯一比尔定律:D=kCL,当液层厚度为1cm时,k=D/C,k称为该物质的比吸收系数。
当某一溶液中有数种吸光物质时,某一波长下的消光度值等于此混合液在该波长下各显色物质的消光度值之和。
已知蔗糖与TBA显色反应产物在450nm和532nm波长下的比吸收系数分别为85.40和7.40。
MDA在450nm波长下无吸收,故该波长的比吸收系数为0,532nm波长下的比吸收系数为155,根据双组分分光度计法建立方程组,求解方程得计算公式:C1=11.71D450 (①)C2=6.45(D532-D600)-0.56D450 (②)式中C1:可溶性糖的浓度(mmol/L);C2:MDA的浓度(μmol/L);D450、D532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。
孙宝发-使用多重置换扩增(MDA)技术对单细胞基因组进行测序p

单细胞测序与宏基因组的数据相结合,将成为一种将单细 胞测序指导结合多物种的鸟枪测序纳入到单个基因组中的 强大工具。
利用单细胞方法在人类的生物群落中发现新型微生物现 正被一些实验室提出。 对于传染病的研究,它将有可能用 来确定从临床标本中无选择性偏好的培养方法中遗传变异 的病原菌。从单细胞获得的遗传连锁的致病因素和其他基 因与从宏基因组数据获得的全基因组频率相对应。或许, 全环境基因组的方法的可能的最大挑战是巨大的遗传多样 性,即使在相同株的成员间也存在。 到此为止,单细胞测序将对揭示多样性的程度和性质, 种的本质核心或一致基因,自然演变中水平基因转移的作 用,环境因素与多样性关系等方面起重要作用。最后,为 实现更完整的有代表性的基因组的目标,MDA反应酶学的 改进还在继续进行。
Sanger测序:利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序 列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一 次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所 有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一种不同 的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需 要的3-OH基团,使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、 T或C处终止。终止点由反应中相应的ddNTP而定。 焦磷酸测序:焦磷酸测序技术是一种新的依靠生物发光进 行DNA序列分析的技术.在DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、 荧光素酶和双磷酸酶的协同作用下,将引物上每一个dNTP 聚合与一次荧光信号释放偶联起来,通过检测荧光的释放 和强度,达到实时测定DNA序列的目的.此技术不需要荧光 标记的引物或核酸探针,也无需进行电泳,具有分析结果快 速、准确、灵敏度高和自动化的特点。 鸟枪法测序:将基因组DNA打成小片段进行测序,然后 再将这些小的片段拼接起来,重新组装成一个完整的基因 组。
MDA的测定

实验26植物细胞膜脂过氧化产物MDA含量的测定一、目的植物器官衰老或在逆境下遭受伤害时,往往发生膜脂过氧化作用。
膜脂过氧化作用的产物比较复杂,包括一些醛类、烃类等。
其产物之一丙二醛(MDA)从膜上产生的位置释放出后,可以与蛋白质、核酸反应,改变这些大分子的构型,或使之产生交联反应,从而丧失功能,还可使纤维素分子间的桥键松驰,或抑制蛋白质的合成。
因此,研究中常以MDA含量来反映植物膜脂过氧化的水平和对细胞膜的伤害程度。
通过本实验,使学生加深对细胞膜脂过氧化作用的认识,掌握丙二醛测定的原理与技术。
二、原理丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在酸性和高温度条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮),其最大吸收波长在532nm。
但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰,其中最主要的是可溶性糖,糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm,但532nm处也有吸收。
植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加,因此测定植物组织中MDA-TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。
低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值,所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子,通常植物组织中铁离子的含量为每克干重100~300μg·g1,根据植物样品量和提取液-的体积,加入Fe3的终浓度为0.5μmol·L-1。
+1.直线回归法MDA与TBA显色反应产物在450nm波长下的消光度值为零。
不同浓度的蔗糖(0~25mmol·L-1)与TBA显色反应产物在450nm的消光度值与532nm和600nm处的消光度值之差成正相关,配制一系列浓度的蔗糖与TBA显色反应后,测定上述三个波长的消光度值,求其直线方程,可求算糖分在532nm处的消光度值。
UV-120型紫外可见分光光度计的直线方程为:Y532=—0.00198+0.088D450(8.3-1)2.双组分分光光度计法据朗伯一比尔定律:D=kCL,当液层厚度为1cm时,k=D/C,k称为该物质的比吸收系数。
MDA概述

MDA的概述MDA的概念来自于OMG的规范,按照它的说法,MDA提供了一种开放的、供应商中立的方法以应对商业与技术变化的挑战。
实际上,在真正应用这种技术的时候,开发人员面临着更大的挑战,就是需要在面向对象(OO)开发的基础上加入以模型为中心的思想。
1 I.MDA概述1.1 定义MDA的概念来自于OMG的规范,按照它的说法,MDA提供了一种开放的、供应商中立的方法以应对商业与技术变化的挑战。
实际上,在真正应用这种技术的时候,开发人员面临着更大的挑战,就是需要在面向对象(OO)开发的基础上加入以模型为中心的思想。
MDA 是把建模语言作为编程语言来使用而不仅仅作为设计语言,用模型语言编程能够带来提升生产力,软件质量以及更长远的好处。
1.2 目标真正达到重用模型,实现以模型为中心的开发方式和使模型真正成为可复用资产。
对于厌倦了一遍遍在编码层解决在建模的抽象层中同样的问题提出彻底的解决办法。
最小成本适应不同平台间的迁移。
1.3 相关概念UML、MOF、XMI、JMI、XML、J2EE、EJB、.NET、PIM、PSM不一定每个概念都要非常熟悉,可是起码要知道是作什么用的1.4 关于MDA的误解1) MDA不是代码自动生成的规范,相反它的目标是尽量减少自动生成的代码。
2) MDA不是代替RUP,XP等软件工程的传统开发过程,而是对这些开发过程一个有益的补充,特别是直接将分析设计阶段所产生的模型应用于编写程序,并最终影响部署后的系统行为方式。
3) 你所说的这种MDA实现还没有达到开发企业级应用的阶段,换句话说,根本不实际。
其实,现在不仅仅有商业化的实现,也有很优秀的开源MDA平台,例如,openMDX1.5 其他介绍文章* An introduction to Model Driven Architecture (Part I)See document: 3100.html* An introduction to Model Driven Architecture (Part II)See document: index.html* An introduction to Model Driven Architecture (Part III)See document: index.html2 II.MDA开源产品比较对于MDA的实现来说,现在有两种不同的途径:I)使用模型驱动应用开发过程;II)直接利用模型驱动运行时应用系统的行为方式。
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MDA,可以理解为中国移动手机桌面助理软件,适用于很多手机玩家;也可以理解为模型驱动架构。
它是由OMG定义的一个软件开发框架。
. MDA(MAIL DELIVERY AGENT)从MTA取得邮件并传送至邮件接受者的邮箱。
常见的MDA通常和MUA合二为一.MDA(Mobile Desktop Assitant)是中国移动手机桌面助理的英文缩写,它是中国移动为提高用户服务而推出的一款集短信、彩信、联系人管理、话费查询等功能在内的软件工具。
中国移动手机桌面助理(简称MDA)是中国移动最新推出的一款集短信、彩信、联系人管理、话费查询等强大功能于一体的通讯软件。
提供安全稳定的短信、彩信服务;短信定时发送功能;强大的彩信编辑功能;创意无穷的彩信文字;简约快捷的通讯录管理;方便的用户话费查询等。
手机桌面助理通过个人电脑的优势将您从手机终端解脱出来,您不用费力在手机上一个一个的打字,不用担心手机里的图片无法编辑剪裁,不用再登录网站查话费,一切都由手机桌面助理帮您完成。
中国移动全球通、动感地带和神州行(不包括北京,北京神州行暂不能开通)用户均可注册使用MDA。
MDA客户端软件免费使用,无任何包月费用;·发送短信:按0.10 元/条收费;·接收短信:接收短信免费,该短信的回复方按照移动品牌的短信资费标准收费;·发送普通彩信:按0.50元/条收费(北京、山西、江苏、安徽地区按0.30元/条收费);·发送福娃彩信:按0.30/条收费。
运行环境:中文Windows2000/Windows2003/WindowsXP2.Model Driven Architecture模型驱动架构自从2001年被OMG(Object Management Group 国际对象管理集团)提出以后,"随风潜入夜,润物细无声",未见轰轰烈烈宣传,各大厂商却惊人一致地争相跟进,关于MDA 的话题转眼之间在网络上也如火如荼地繁荣起来了。
为了实现MDA这一宏大构想,OMG制定了一系列的标准:UML:UML被MDA用来描述各种模型。
它并不是为MDA而生,但是作为目前最为风行的建模语言,UML已经占据了全球建模语言领域90%的市场份额,成为了建模语言事实上的标准,因此OMG将它作为MDA技术的基础是自然而然的明智选择。
它是MDA的基础,也是MDA最有力的武器。
MOF:MOF(Meta Object Facility 元对象机制)是比UML更高层次的抽象,它的目的是为了描述UML的扩展或者其它未来可能出现的类UML的建模语言。
由此我们可以看到OMG的"野心",虽然MOF也不是为MDA而生的,但是我们可以体味到OMG的工程师们良苦的用心和长远的目光。
XMI:XMI(XML-based metadata Interchange)是基于XML的元数据交换。
它通过标准化的XML文档格式和DTDs(Document Type Definitions)为各种模型定义了一种基于XML的数据交换格式。
这使得作为最终产品的模型可以在各种不同的工具中传递,这一点是非常重要的,它保证了MDA不会在打破了一种束缚之后再被加上一层新的束缚。
CWM:CWM(Common Warehouse Metamodel 公共仓库元模型)提供了一种数据格式变换的手段,在任意级别的模型上都可以使用CWM来描述两种数据模型之间的映射规则,比如将数据实体从关系数据库变换为XML格式。
在MOF的框架下,CWM使得通用的数据模型变换引擎成为可能。
在OMG的蓝图中,UML、MOF、XMI、CWM等一系列标准分别解决了MDA的模型建立、模型扩展、模型交换、模型变换这几个方面的问题。
OMG试图通过标准化的定义,扩大MDA的应用范围。
同时通过这样一个可扩展的建模语言环境,IT厂商可以自由实现自己的建模语言,以及语言到可执行代码的映射,然而不管怎么样,都必须处于OMG的标准化框架之下。
MDA源自于众所周知的把系统操作的规范从系统利用底层平台能力的方式细节中分离出来的思想,MDA提供了一种途径(通过相关的工具)来规范化一个平台独立的系统、规范化平台、为系统选择一个特定的实现平台,并且把系统规范转换到特定的实现平台。
MDA 的三个主要目标是:通过架构性的分离来实现轻便性、互操作性和可重用性。
在MDA中软件开发过程是由软件系统的建模行为驱动的。
MDA生命周期和传统生命周期没有大的不同,主要的区别在于开发过程创建的工件,包括PIM(Platform Independent Model,平台无关模型)、PSM(Platform specific Model,平台相关模型)和代码。
PIM是具有高抽象层次、独立任何实现技术的模型。
PIM被转换为一个或多个PSM。
PSM是为某种特定实现技术量身定做。
例如,EJB PSM是用EJB结构表达的系统模型。
开发的最后一步是把每个PSM变化为代码,PSM同应用技术密切相关。
传统的开发过程从模型到模型的变换,或者从模型到代码的变换是手工完成的。
但是MDA的变换都是由工具自动完成的。
从PIM到PSM,再从PSM到代码都可以由工具实现。
PIM, PSM,和Code 模型被作为软件开发生命周期中的设计工件,在传统的开发方式中是文档和图表。
重要的是,它们代表了对系统不同层次的抽象,从不同的视角来看待我们的系统,将高层次的PIM 转换到PSM 的能力提升了抽象的层次。
能够使得开发人员更加清晰地了解系统的整个架构,而不会被具体的实现技术所“污染”,同时对于复杂系统,也减少了开发人员的工作量。
MDA的出现,为提高软件开发效率,增强软件的可移植性、协同工作能力和可维护性,以及文档编制的便利性指明了解决之道。
MDA被面向对象技术界预言为未来两年里最重要的方法学。
当今建模的主要问题在于,对于很多企业来说它只是纸面上的练习。
这就造成了模型和代码不同步的问题,代码会被不断修改,而模型不会被更新,这样模型就失去了意义。
弥补建模和开发之间的鸿沟的关键就在于将建模变为开发的一个必不可少的部分。
MDA 是模型驱动开发的框架,MDA 的愿景是定义一种描述和创建系统的新的途径。
MDA 使得UML 的用途走得更远,而不仅仅是美丽的图画。
很多专家预言MDA 有可能会带领我们进入软件开发的另一个黄金时代。
3.Mobile Desktop Assitant中国移动手机桌面助理MDA(Mobile Desktop Assitant)是中国移动手机桌面助理的英文缩写,它是中国移动为提高用户服务而推出的一款集短信、彩信、联系人管理、话费查询等功能在内的软件工具。
中国移动手机桌面助理(简称MDA)是中国移动最新推出的一款集短信、彩信、联系人管理、话费查询等强大功能于一体的通讯软件。
提供安全稳定的短信、彩信服务;短信定时发送功能;强大的彩信编辑功能;创意无穷的彩信文字;简约快捷的通讯录管理;方便的用户话费查询等。
手机桌面助理通过个人电脑的优势将您从手机终端解脱出来,您不用费力在手机上一个一个的打字,不用担心手机里的图片无法编辑剪裁,不用再登录网站查话费,一切都由手机桌面助理帮您完成。
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MDA客户端软件免费使用,无任何包月费用;·发送短信:按0.10 元/条收费;·接收短信:接收短信免费,该短信的回复方按照移动品牌的短信资费标准收费;·发送普通彩信:按0.50元/条收费(北京、山西、江苏、安徽地区按0.30元/条收费);·发送福娃彩信:按0.30/条收费。
运行环境:中文Windows2000/Windows2003/WindowsXP4.Monochrome Display Adapter单色显示适配器IBM于1981年使用于IBM PC的显示卡,是PC机最早使用的显示标准.采用9x14点阵的字符窗口,满屏显示80列x25行字符,对应最高分辨率为720x350个像素.5.Malondialdehyde丙二醛(MDA)分子式OHC-CH2-CHO ,分子量72.0634自由基作用于脂质发生过氧化反应,氧化终产物为丙二醛,会引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合,且具有细胞毒性。
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。
如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基。
脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的质类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。
因此,初始的一个活性氧能导致很多的质类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。
氧自由基不但通过生物膜中的多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过质氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤,因此测定MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接反映出细胞损伤的程度。
测定原理测定方法是丙二醛在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸(TBA)反应产生红棕色的产物3,5,5´-三甲基恶唑2,4-二酮(三甲川),该物质在532nm处有一吸收高峰,并且在660nm处有较小光吸收。
根据其532nm的消光值可计算出溶液中丙二醛的含量。
实验原理示意图实验方法1.实验试剂MDA试剂盒(50T)(南京建成生物工程研究所);无水乙醇(北京北化精细化学品有限责任公司,分析纯);冰醋酸(北京北化精细化学品有限责任公司,分析纯);EDTA(北京拜尔迪生物公司);Na2S2O5(北京拜尔迪生物公司);PCA(北京北化精细化学品有限责任公司,分析纯);实验用水为18.2MΩ三蒸水。
2.试剂盒组成试剂一:液体10mL,室温保存,直接适用;试剂二:液体6mL,加入170mL三蒸水混匀使用;试剂三:粉剂,将1支50T的MDA3号粉剂倒入烧杯内加入90~100℃热蒸馏水32mL,充分溶解(溶解过程中可适当加热),冷却后加冰醋酸30mL混匀,配成母液可于-4℃保存。
用时将上述配好的试剂用50%的冰醋酸按2:1进行稀释,现用现配;标准品:10nmol/mL四乙氧基丙烷5mL。
3.实验仪器分光光度计;精密电子天平;台式冷冻高速离心;超声细胞破碎仪;恒温水浴锅或电磁炉。
4.实验方法(1)取待测组织样品;(3)称量待测组织样品的重量,按1mg:5µL的比例加入0.4mol/L的PCA溶液;(4)再按组织重量1mg:14µL的比例加入0.86%的NaCl溶液;(5)将组织剪碎后超声匀浆,并用旋涡混匀器混匀;(6)按照表[1]加入试剂盒各反应试剂;(7)用涡漩混匀器混匀样品,并在离心管管盖上刺一个小孔,于沸水浴中煮沸1h;(8)反应过后,室温下放置冷却,在15,000g下离心10min,取上清液进行吸光度测定;(9)以蒸馏水为空白对照,在532nm下,光径1cm,测定各个样品的吸光度值,带入MDA含量计算公式中,算出各样品中的MDA的含量,从而间接反映出各样品氧化应激的程度(若测定管中蛋白含量不高,则可以使用标准空白管来代替测定空白管的吸光度值)。