红细胞凝集抑制试验
血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)
一、目的要求 掌握HA和HI试验的基本操作技术，了解其实用价值。 二、实验材料 1、禽流感毒 2、1%鸡红细胞 3、生理盐水 4、禽流感阳性血清 5、96孔“V”型微量反应板 三、实验内容 1、HA试验术式表： 2、HI试验术式表： 四、作业 1、病毒凝集红细胞是不是一种特异的抗原抗体反应？为什么？ 2、HI试验是不是特异的抗原抗体反应？为什么
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1： 2 1： 4 1： 8 ﹟ 以100%凝集病毒最大稀释孔为该病毒的凝集价
血凝抑制试验(HI)
一、概念： 1 、 HI 试验：病毒的红细胞凝集现象，可以被特异性免疫血清所抑制， 称HI试验。 2、抗体效价：出现红细胞凝集抑制现象的血清的最大稀释倍数叫抗体 效价。
病毒的红细胞凝集试验（HA）
一、 概念 病毒的红细胞凝集现象：许多病毒表面有血凝素，能与各种动物的红细胞 表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称为病毒的血凝现象。 二、应用 1 、当以被检动物的某一器官为病料，进行HA试验，结果为阳性者，证明 该被检材料中有能凝集红细胞的某种病毒。 2 、凝集价的测定：将被检病毒材料，稀释成不同的稀释倍数，进行 HA试 验，出现血凝现象的各稀释孔中，以100%能出现病毒的红细胞凝集现象的 病毒的最大稀释倍数者即定为凝集价(血凝价)
二、动物体内抗体存在情况 1、当动物感染某病毒而发病时，可在机体的相应器官查出病毒。
2、病毒相当于免疫效应物质中的抗原，病毒进入动物机体，将发生特异
性免疫反应，即产生免疫物质——抗体（ 90%抗体都存在于动物的血清 中），抗原和抗体发生特异性结合反应 3、病畜体内，因受病毒抗原刺激，产生大量相应抗体，故体内抗体效价 较高 4、健康动物，免疫接种后，因受疫苗（抗原）刺激，而发生免疫应答反 应，体内抗体效价较高
红细胞凝集实验报告
红细胞凝集实验报告
实验目的：
通过红细胞凝集实验的方法，检测实验样本中是否存在抗体-抗原反应。
实验原理：
红细胞凝集实验是一种常见的检测血清中抗体反应的试验方法。
该方法是通过在搅拌下，将患者血清和红细胞混合在一起，观察
是否发生凝集反应，从而判断是否存在抗体-抗原反应。
实验步骤：
1.将待检血清和已知类型抗原分别加入两个试管中。
2.分别向两个试管中加入相同数量的红细胞。
3.稍微摇晃试管，混合均匀。
4.将两个试管分别标记为阳性和阴性对照。
5.观察抗体-抗原反应是否发生，根据红细胞凝集度评分。
实验结果：
本次实验中，样本为患者血清。
经过对比阳性和阴性对照的反应，观察到样本与已知类型抗原之间出现凝集现象。
根据红细胞凝集度评分，得出本次实验的凝集度为2+。
实验结论：
本次红细胞凝集实验结果显示，样本中存在抗体-抗原反应。
凝集度为2+，提示患者血清中可能存在病毒或细菌等病原体感染。
建议进行进一步检测并针对性治疗。
附注：由于红细胞凝集实验存在一定假阳性或假阴性数据，建议在诊断前综合考虑患者症状、体征以及其它检测指标等综合分析。
血凝及血凝抑制实验
1、在稀释移取混匀的操作过程中动作要慢，以免损坏红细胞（表现为分离是上清液为淡红色，正常情况第一次分离后上清液为淡黄色，之后直至清亮为清洗干净）。 2、在吸取过程中一定要将中间的白细胞层吸取干净。
血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验
一、实验目的 二、实验内容 三、实验原理 四、实验材料 五、实验方法与结果判定 六、注意事项 七、红细胞制备
一、实验目的
1、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操 作方法和结果判定方法 2、了解新城疫有关背景知识
二、实验内容
1、血凝试验(HA)检测新城疫抗原的效价 2、血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体（疫苗注射后的抗体检测）
三、实验原理
1、血凝试验（HA）原理：某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物地红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的现象称为血凝（HA）,也称直接血凝反应。
病毒颗粒
红细胞
2、血凝抑制试验（HI）原理：当病毒的悬液中加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制（HI）反应，也称血凝抑制反应。
结果判定标准
1、＋＋＋＋：红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100％凝集； 2、＋＋＋：红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75％凝集； 3、 ＋＋ ：红细胞形成一个环状，四周有凝集块，即50％凝集； 4、 ＋ ：红细胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25％凝集； 5、－ ：红细胞于孔底形成圆团，边缘光滑整齐，即无凝集；
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红细胞凝集试验(HA)与红细胞凝集抑制试验(HI)
红细胞凝集试验(HA)与红细胞凝集抑制试验(HI)
红细胞凝集试验(HA)和红细胞凝集抑制试验(HI)是两种常见的检验手段，用于检测血液中是否存在抗体，从而诊断某些疾病或病原体感染。
红细胞凝集试验(HA)
红细胞凝集试验(HA)是一种检测抗体与抗原反应的常规方法。
在这个测试中，医生或实验室技术人员将被测血浆放入红细胞凝集剂中，然后与已知抗原混合，比如病毒、细菌或其他病原体。
如果血浆中含有与已知抗原相应的抗体，那么红细胞就会和抗原结合在一起形成凝集。
如果血浆中没有抗体，红细胞就会分散在凝集剂中。
HA 可以检测出许多病原体的抗体，包括流感病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒和风疹病毒等。
红细胞凝集抑制试验(HI)
红细胞凝集抑制试验(HI)也是一种检测抗体和抗原反应的常规方法。
在这个测试中，被测血液中的抗体与已知抗原结合，形成抗原-抗体复合物。
然后，在复合物中加入未和抗原混合的红细胞，如果血浆中含有抗体，它们会与复合物结合，使得红细胞不会凝集。
如果血液中没有相应的抗体，红细胞就会在复合物中凝集。
与HA相比，HI适用于检测一些病原体，比如肝炎病毒和流感病毒等，但不是所有病原体都适合使用HI进行检测。
红细胞凝集试验（HA）和红细胞凝集抑制试验（HI）是检测抗体和抗原反应的两种常见方法。
这两种技术可用于诊断许多疾病和病原体感染，但需要在临床实验室或医疗机构进行，由专业人员执行。
尽管这些测试非常有用和重要，但仍需要与其他诊断工具和检查方法相结合，以确保诊断的准确性和病人的治疗。
[最新]ha、hi试验方法
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红细胞凝集试验及红细胞凝集抑制试验1．红细胞凝集试验 采用50孔板或试管法按表1，若采用96孔微量板法按表2进行，用生理盐水将待检抗原按术式稀释成不同倍数，加入1%鸡红细胞悬液。
将50孔板或试管前后左右摇匀；将96孔微量板在振荡器上摇匀，置于20～30℃，20～40分钟后（微量板法时间短, 15～30分钟）判定结果，使50%红细胞凝集的最高稀释度，作为判定终点。
表1 50孔板或试管法测定凝集价 单位：ml孔或管号对照1 2 3 4 5 6 7 8…… 血凝素稀释倍数 10 20 40 80 160 320 640 1280…… 0.5生理盐水0.9 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5……} } } } } } } } 弃0.5待检抗原 0.1 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 1%鸡红细胞悬液0.50.50.50.50.50.50.50.50.5表2 96孔微量板法测定凝集价 单位：μl孔号对照1 2 3 4 5 6 7 8...... 稀释倍数 2 4 8 16 32 64 128 256 (25)生理盐水25 25 25 25 25 25 25 25…… } } } } } } } } 弃25 待检抗原 25 25 25 25 25 25 25 25 1%鸡红细胞悬液2525252525252525252．红细胞凝集抑制试验 2.1血凝素凝集价测定 50孔板或试管法按表3，若采用96孔微量板法按表4进行。
表3 50孔板或试管法测定凝集价 单位：ml孔或管号对照1 234567 8……血凝素稀释倍数5 10 20 40 80 160 320 640……0.25生理盐水0.4 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25……}} } } } } } } 弃0.25血凝素 0.1 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.251%鸡红细胞悬液 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.250.25 0.25 生理盐水0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.250.25 0.25表4 96孔微量板法测定凝集价 单位：μl孔号对照1 2 3 4 5 6 7 8…… 稀释倍数 2 4 8 16 32 64 128 256……25生理盐水25 25 25 25 25 25 25 25……血凝素 25 25 25 25 25 25 25 25 1%鸡红细胞悬液 25 25 25 25 25 25 25 25 25 生理盐水252525252525 2525252.2.1 4单位抗原工作液配制 选用上述2.1项抗原进行。
血凝抑制试验结果判断 [血凝血凝抑制试验说明书]
![血凝抑制试验结果判断 [血凝血凝抑制试验说明书]](https://img.taocdn.com/s3/m/18bab48a7f1922791688e8f0.png)
血凝抑制试验结果判断 [血凝血凝抑制试验说明书]鸡新城疫血凝与血凝抑制实验鸡新城疫血凝(ha)及血凝抑制(h1)试验基本原理:许多病毒表面具血凝素,具有凝集某些动物或人红细胞的特性,称为血凝现象,可用于鉴定病毒。
血凝现象可以被特异性抗体所抑制,称为血凝抑制现象,利用这种特性可进行血清学试验,称为血凝抑制试验。
器材及试剂:待检病毒:鸡新城疫病毒鸡胚尿囊液;待检血清:抗鸡新城疫病病毒阳性血清;生理盐水/pbs、1%鸡红细胞、96孔v形微量血凝板、加样器等。
实验步骤pbs的配制:1%鸡红细胞的配制:(一)血凝试验(ha)取96孔板,按以下步骤操作:1、第一排1-12孔各加生理盐水50ul,第二排1-12孔加生理盐水50ul为红细胞对照;2、吸50ul病毒液于第一排第1孔,混匀后取50ul至第2孔,依次稀释至第12孔,弃去50ul,各孔经倍比稀释后稀释度依次为2-1~2-12。
3、第一排1-12孔及第二排1-12孔各加1%鸡红细胞50ul,微型震荡器震荡2min混匀。
4、室温静置10-30分,观察结果(见下表)。
5、结果判定:红细胞对照组红细胞完全沉降,以试验排中能使等量红细胞发生完全凝集的病毒最高稀释倍数,作为病毒的血凝价,即hi效价,用2n表示。
(二)四单位检测:(三)血凝抑制试验(hi)取一96孔板,按以下步骤操作:1、4个单位抗原的制备:按ha试验测出的病毒血凝价除以4即为4个单位血凝素的稀释度。
2、待检血清的稀释:第一、二、三排1-12孔各加生理盐水50ul,于第一排第1孔中加入50ul待检血清,反复吹吸3-5次混匀后,取50ul至第2孔混匀,吸取50ul至第3孔,依次稀释至第12孔,弃去50ul,经倍比稀释,血清的稀释倍数为21~212。
3、第一、二排1-12孔各加4个单位血凝素50ul,微量震荡器震荡2min混匀;4、室温静置20min;5、第一、二、三排1-12孔各加1%鸡红细胞50ul,微量震荡器震荡2min混匀混匀。
血凝与血凝抑制试验(附思考题及答案)
五、结果判定
• 血凝试验：根据血凝价稀释病毒悬液 • 血凝抑制试验：血凝抑制试验效价：出现完全血凝抑制时的最高
血清稀释度。
Байду номын сангаас
六、思考题
• 1、血凝价判定偏高或者偏低对血凝抑制价的判定结果有什么 影响？
• 若血凝价判定偏高，即稀释的倍数偏高，使得病毒浓度未达 到要求的4个血凝单位，则需要中和病毒的血清更少，即血清 的稀释倍数更大，因此结果会偏高。
将血浆、白细胞等充分洗去，用生理盐水配置成1%红细胞悬液备 用 • 0·85%生理盐水 • 鸡血清
四、实验步骤
• （一）血凝试验 • 1～12孔加入生理盐水 • 第一孔加入50ul病毒悬液，倍比稀释至第11孔 • 1～12孔加入1%的红细胞50ul • 震荡后置于37度恒温箱25～30min后，观察结果 • 病毒的血凝价？ • 病毒的血凝价：能使红细胞产生50%凝集的病毒最高稀释度。
血凝和血凝抑制试验
安尧o
一、实验目的
• 1、掌握病毒血凝与血凝抑制试验的原理。 • 2、掌握试验的设计、操作步骤和结果的判定。
二、实验原理
• 血凝试验（HA）：
• 血凝抑制试验（HI）：
• 某些病毒能够使动物的红细胞发 生凝集现象。
• 红细胞凝集的本质是抗原-抗体 反应，红细胞表面存在凝集原
• 在病毒悬液中加入特异性抗体
• 2、血凝和血凝抑制试验的应用？ • 血凝试验可以检测某种病毒是否具有凝集红细胞的能力，测
定病毒的血凝价、滴度，血凝抑制试验可以检测抗体是否有 效，抗体的效价。
请在此处添加标题
• （二）血凝抑制试验 • 1～11孔加入25ul生理盐水 • 第1孔加待检血清25ul，倍比稀释至第10孔 • 1～11孔加入25ul4个血凝单位的病毒悬液 • 1～12孔加入1%红细胞50ul • 震荡后置37度恒温箱25~30min观察结果。 • 红细胞凝集100%的抑制作为结果判定的终点
红细胞凝集试验(HA)与红细胞凝集抑制试验(HI)
红细胞凝集试验（HA）与红细胞凝集抑制试验（HI）用疫苗按一定免疫程序进行免疫接种是控制鸡病流行的主要途径之一，这种观点已被广大养殖户接受并引起足够重视。
但鸡群免疫抗体的产生及维持时间受到鸡群免疫应答能力、所用疫苗种类、免疫方法、免疫次数、疫病流行状况等方面的影响，良好的免疫接种不等于鸡群能够产生良好的保护力。
因而通过对鸡群进行抗体监测，及时检查鸡群的免疫状态、疫苗使用效果，为制定合理的免疫程序提供依据就显得非常重要。
通过对广大养殖户的大量调查发现，由于缺乏有效的监测手段，养殖户普遍存在盲目免疫的现象。
因此，建立合理的抗体监测制度，开展免疫抗体监测工作，已经成为我们当前养鸡生产中急需开展的一项重要工作。
下面将抗体监测所需设备及监测过程向大家做一说明。
一、实验用设备：1、离心机 1台*（3000转离心红细胞）2、冰箱 1台*（存放抗原）3、振荡器 1台*（振荡96孔V型板）4、抗原新城疫（ND）、减蛋（EDS）、流感（AI）抗原，从正规厂家进。
5、96孔V型板稀释血清清洗后可重复使用6、八道移液器 1把（5-50微升稀释血清）7、吸头和八道移液器配套使用，清洗后重复使用）8、积液槽配制4个单位抗原及盛放生理盐水加样用9、一次性采血管采血用10、2毫升注射器采血用11、红细胞非免疫鸡心脏采血或免疫鸡也可，但需离心5次后使用。
12、柠檬酸三钠配制3.8％抗凝剂用13、重铬酸钾配制清洁液用14、硫酸配制清洁液用15、吸管 1毫升、10毫升16、吸耳球和吸管配套使用17、针头 9*13（采雏鸡）、9*25（采大鸡）18、蒸馏水当地买。
清洗96孔V型板、吸头用19、10毫升离心管离心红细胞用（塑料制）20、生理盐水做血清稀释液用、配制4单位抗原二、实验前的准备：1.抗原：从指定厂家购买稳定浓缩抗原。
2.抗凝剂的配制：用天平称量3.8克柠檬酸三钠，溶入100ml生理盐水中，待溶解完全后即可使用。
3.1％红细胞悬液：由鸡心脏或翅静脉采血，放入加有抗凝剂的离心管内（按抗凝剂：全血＝1：2的比例），迅速混匀。
红细胞凝集试验(HA)
用户名: 密码: 登录注册畜牧兽医知识的天堂主页博客相册|个人档案|好友查看文章红细胞凝集试验（HA）与红细胞凝集抑制试验（HI）2007-12-07 11:42用疫苗按一定免疫程序进行免疫接种是控制鸡病流行的主要途径之一，这种观点已被广大养殖户接受并引起足够重视。
但鸡群免疫抗体的产生及维持时间受到鸡群免疫应答能力、所用疫苗种类、免疫方法、免疫次数、疫病流行状况等方面的影响，良好的免疫接种不等于鸡群能够产生良好的保护力。
因而通过对鸡群进行抗体监测，及时检查鸡群的免疫状态、疫苗使用效果，为制定合理的免疫程序提供依据就显得非常重要。
通过对广大养殖户的大量调查发现，由于缺乏有效的监测手段，养殖户普遍存在盲目免疫的现象。
因此，建立合理的抗体监测制度，开展免疫抗体监测工作，已经成为我们当前养鸡生产中急需开展的一项重要工作。
下面将抗体监测所需设备及监测过程向大家做一说明。
一、实验用设备：1、离心机1台*（3000转离心红细胞）2、冰箱1台*（存放抗原）3、振荡器1台*（振荡96孔V型板）4、抗原新城疫（ND）、减蛋（EDS）、流感（AI）抗原，从正规厂家进。
5、96孔V型板稀释血清清洗后可重复使用6、八道移液器1把（5-50微升稀释血清）7、吸头和八道移液器配套使用，清洗后重复使用）8、积液槽配制4个单位抗原及盛放生理盐水加样用9、一次性采血管采血用10、2毫升注射器采血用11、红细胞非免疫鸡心脏采血或免疫鸡也可，但需离心5次后使用。
12、柠檬酸三钠配制3.8％抗凝剂用13、重铬酸钾配制清洁液用14、硫酸配制清洁液用15、吸管1毫升、10毫升16、吸耳球和吸管配套使用17、针头9*13（采雏鸡）、9*25（采大鸡）18、蒸馏水当地买。
清洗96孔V型板、吸头用19、10毫升离心管离心红细胞用（塑料制）20、生理盐水做血清稀释液用、配制4单位抗原二、实验前的准备：1.抗原：从指定厂家购买稳定浓缩抗原。
2.抗凝剂的配制：用天平称量3.8克柠檬酸三钠，溶入100ml生理盐水中，待溶解完全后即可使用。
HA-HI试验
8、判定结果
（1）血清抗体效价的判断：
能够使4单位病毒凝集鸡红细 胞的作用完全被抑制的血清最 高稀释倍数，称为该血清的抗 体效价，以2的指数表示。
孔号： 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11ห้องสมุดไป่ตู้
12
上图，血清抗体效价依次为28、 27、28、29、28、27、27、26
2、判定标准：
（1）一般认为鸡的免疫临界水平 为25（成鸡）或26（雏鸡）。 （2）鸡血清的凝集抑制价，全部 高于26可适当推迟新城疫免疫时间， 全部低于24以下，应马上进行新城 疫疫苗接种。
血清稀释倍数
孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
血清 稀释 倍数
21
22
23
24
25
26
27
28
29
210
211 对 照
3、加4单位抗原
1~12孔各加25微
升。 4、置于振荡器上，振荡1分钟，室 温静置 20分钟。 5、加1%的鸡红细胞悬液 用微量 移液器向1~12孔各加1%红细胞悬 液25微升。 6、置于振荡器上，振荡1分钟。室 温静置20~25分钟后观察结果。
1%红细胞悬液制备
1、抗凝血的制备 采集3只非免疫成年健康鸡血液， 由翅静脉或心脏采血，按3.8%柠檬酸钠与血液1：4 混合制成。 2、1%红细胞悬液制备 将抗凝血加入离心管内， 用生理盐水洗涤5次，每次2000r/min离心5min ， 将血浆、白细胞充分弃去，最后一次离心时间为 10min，离心结束后，弃去上清液，根据剩下的红 细胞体积，用生理盐水配制成1%红细胞悬液。
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孔号
样品稀释倍 数 PBS
被检鸡样品
1234
5
6
7
2× 4× 8× 16× 32× 64× 64×
25 25 25 25 25 25
25
25 25 25 25 25 25
25
8
9
Hale Waihona Puke 256× 512×25
25
25
25
10
11
12
1024×
抗原对照 红细胞 对照
25
25
25
25
4HAU血凝素 25 25 25 25 25 25
25
25
25
25
25
振荡器上振荡10s混匀，室温放置20min
弃25
1%红细胞
25 25 25 25 25 25
25
25
25
25
25
25
振荡10s混匀，室温作用 15min
结果观察
----
-
-
+
++
+++
++ ++
++ ++
-
注：-表示不凝集；++表示部分凝集；++++表示完全凝集。
血凝抑制效价：能使红细胞凝集全部被抑制的样品最高稀释倍数。
如果配制的4HAU准确，则1:4稀释度为凝集终点；
如果高于1:4，则说明血凝素浓度过高（抗体效价 低于正常值），
如果低于1:4，则说明血凝素浓度过低（抗体效价 高于正常值）。
根据检验结果进行调整，使工作液为4HAU。
四单位验证
2
34
5
67
1、在血凝板上每1－12孔内各加入25ulPBS；
2、在第一排第1孔内各加入被检样品25ul，然后倍 比稀释至第10孔，最后弃25ul；
3、第1－11孔内加入4单位抗原25ul（第11孔为抗 原对照第12孔为红细胞对照）；
4、轻轻振荡均匀，后放于室温或2~8℃中静置 30min
5、每孔加入1％鸡红细胞悬液25ul；
6、轻轻振荡10s均匀，室温15min。 7 、结果判定
【`病毒血凝抑制试验的操作方法（单位：L） 】
实验步骤
1、血凝素凝集价的测定 96孔微量板法，用PBS将血凝素稀释成不同倍数，加入与抑制试
验中的样品量等量的PBS，再加入1%鸡红细胞悬液，微量振荡器 震荡混匀（15s），置室温15min或，判定结果为1:256。
2、血凝素工作液配制及验证 2.1 4HAU血凝素的配制 如果血凝素凝集价测定结果为1:256，4HAU=256/4=64（即1:64），取
注意事项
1、红细胞的制备
（1）采血：采血前把注射器的抗凝剂往外推一下， 防止血液凝固阻塞针头，采完血后立即颠倒注射 器混匀2~4（3）只2~6月龄的SPF鸡的血液与等量 的阿氏液混合。
（2）1%红细胞血液制备 a 清洗过程中减少红细胞的破碎（拔掉注射器针头、
轻轻的混匀、缓慢吹打）
b 最好清洗3次，次数太多了红细胞变的脆弱。 c 2~8℃5d内用完。
血凝抑制效价：能完全抑制血球凝集的最高血 清稀释度即为该血清的血凝抑制效价。
实验材料
4个血凝单位血凝素
1%鸡红细胞
待测样品
PBS
NDV
AIV
IBV
浓度
0.1
（mol\L）
0.01
0.01
96孔U型微PH量反应板
微量移液器(20~100ul)、灭菌塑料吸头、微量 振荡器、西林瓶、吸管
2、血凝试验
（1）稀释抗原时控制好稀释的力度避免产生 气泡，每孔吹打混匀10次。
（2）红细胞用之前轻轻的颠倒混匀，避免产 生气泡。
（3）加红细胞时，枪头要悬空，不要碰触到 液面，避免交叉污染。
（4）设立标准抗原对照。
3、血凝抑制试验
（1）四单位血凝素配制
a 四单位血凝素配制过程中，尽量少更换移液工具， 多次更换移液工具或者多次吸取会增加误差；
100μL血凝素加PBS 6300μL，即成。 2.2 验证（检查4HAU血凝素是否准确） 应将配制的1:64的稀释液，分别以100μL的量加入PBS100μL、
200μL、300μL、400μL、500μL、600μL中混匀，然后从每一稀释度 中取25μL，加入25μLPBS中，再加入1%鸡红细胞悬液25μL，振荡10s 混匀。将血凝板置室温15min，倾斜45°判定结果（读结果的时间）。
红细胞凝集抑制试验
HI
实验原理 实验准备 操作过程 结果判定 注意事项
实验原理
当病毒悬液中加入特异性抗体时，这种红细胞凝 集的现象就被抑制，称红细胞凝集抑制试验，也叫
血凝抑制试验。
抗原
抗体
I am late！
HI试验的原理图
用途: 1·用已知病毒来检测被检血清中的相应抗体 2 ·也可以用已知血清来鉴定未知病毒。
b 四单位需验证准确，如果不准确重新配置或者进 行调整；
c操作前计算好所需四单位的量，避免浪费或者不足。
d 配制好的四单位血凝素室温4h内用完，现用现配， 不可反复冻融。
（2）添加四单位和红细胞时，枪头要悬空，不要碰 触到液面，避免交叉污染。
（3）设抗体的阳性对照组。
谢谢！