最新43酵母细胞的固定化

裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制
作成功。
二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，
如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备
的凝胶珠是成功的。
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这一阶段成功与否呢？怎样评价？
观察凝胶珠的颜色和形状:
如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白 色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固 定的酵母细胞数目较少；如果形成 的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说 明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败， 需要再作尝试。
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（二）．固定化酵母细胞的发酵 （6）冲洗：将固定的酵母细胞凝 胶珠用蒸馏水冲洗2～3次。
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（二）．固定化酵母细胞的发酵
（6）冲洗：将固定的酵母细胞凝 胶珠用蒸馏水冲洗2～3次。
（7）发酵：150mL10％葡萄糖＋ 固定化酵母细胞→200mL锥形瓶→ 密封→25℃发酵24h。
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〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要 密封？
常用的不溶于水的多孔性载体有哪些？
明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤 维素、聚丙烯酰胺等
海藻酸钠
聚丙烯酰胺20
1.酶的固定方法不包括( D )。 A.将酶吸附在固体表面上 B．将酶相互连接起来 C．将酶包埋在细微网格里 D．将酶制成固体酶制剂，如加 酶洗衣粉中的酶
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2、固定化细胞的优点是( B )。 A.能催化大分子物质的水解 B.可催化一系列化学反应 C.与反应物易接近 D.有利于酶在细胞外发挥作用
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酶和细胞固定方法的选择
（1）、方法
①酶适合采用化学结合和物理吸 附法固定 ②细胞适合采用包埋法固定 （2）、原因 ①细胞体积大，酶分子很小 ②个体大的细胞难以被吸附或结合而 个小的酶容易从包埋的材料中漏出16
固定化酶技术和固定化细胞 技术这两种方法
从操作角度来考虑， 你认为哪种方法更容易？
固定化细胞技术 • 哪一种方法对酶活性的影响更小？
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（3）配制火（或间断）加热，并不断搅拌， 使之溶化→蒸馏水定容到10mL。
〖思考3〗微火加热并不断搅拌的目 的是什么？
防止海藻酸钠焦糊。
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(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合： 将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室
温，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸 入到注射器中。
→200mL烧杯→溶解备用。
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（3）配制海藻酸钠溶液： 0.7g海藻酸钠＋10mL水→50mL烧杯
→酒精灯微火（或间断）加热，并不断 搅拌，使之溶化→蒸馏水定容到10mL。
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（3）配制海藻酸钠溶液： 0.7g海藻酸＋10mL水→50mL烧杯→酒 精灯微火（或间断）加热，并不断搅拌， 使之溶化→蒸馏水定容到10mL。 〖思考3〗微火加热并不断搅拌的目 的是什么？
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(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合： 将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室
温，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸 入到注射器中。
〖思考4〗为什么要海藻酸钠溶液冷 却后才能加入酵母细胞？
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(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合： 将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室
温，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸 入到注射器中。
〖思考4〗为什么要海藻酸钠溶液冷 却后才能加入酵母细胞？
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（二）、固定化细胞技术
1、概念：
利用物理或化学方法将细胞固 定在一定空间内的技术。
细胞中含有一系列酶，在细胞 正常生命活动的过程中，通过 代谢产生所需要的代谢产物。
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2.将酶或细胞固定化的方法
包埋法 化学结合法 物理吸附法
将酶（或细胞）包埋 在细微网格里
将酶（或细胞） 相互连接起来
将酶（或细胞）吸附 在载体表面上
固定化细胞技术 17
固定化细胞固定的是一种 酶还是一系列酶？
一系列酶
如果想将微生物的发酵过程变成连 续的酶反应，应该选择哪种方法？
固定化细胞技术
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如果反应底物是大分子 物质，能否用固定化细胞 技术? 不能
为什么？大分子物质难以通过细
胞膜
那应该采用何种技术?
固定化酶技术
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3、固定化细胞常用的载体
防止高温杀死酵母细胞。 32
（5）固定化酵母细胞： 以恒定速度缓慢地将注射器
中的溶液滴加到CaCl2溶液中， 形成凝胶珠状颗粒。
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刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中 浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。
检验凝胶珠的质量是否合格，可以
使用下列方法：
一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实
验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破
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2、生产高果糖浆需要什么酶？ 其作用是什么？这种酶有何特点？
生产高果糖浆需要葡萄糖异构 酶；其作用是将葡萄糖转化为果 糖；这种酶稳定性好，可持续发 挥作用。
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葡萄糖
果糖
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3、固定化酶技术生产高果糖浆的过程：
注意反应柱的各 部分名称。 你能说出这种方 法的优点吗？
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4、这种方法的优点是什么？
43酵母细胞的固定化
温故知新：
1、洗衣粉中添加_酶__制__剂___可以更 有效地清除顽渍。常用的酶制剂有 蛋_白__酶__、_脂__肪__酶_、__淀__粉_酶__和_纤__维__素_酶_ 四类。
2、影响酶活性的因素有__温__度___、 __酸_碱__度___和_酶__的__抑_制__剂__。
〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎 样形成的？
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2. 实验设计
1. 制备固定化酵母细胞 （1）酵母细胞的活化： 1g干酵母＋10mL蒸馏水→50mL烧杯 →搅拌均匀→放置1h，使之活化。
〖思考2〗活化是指什么？ 活化是指让处于休眠状态的微生
物重新恢复正常生活状态的过程。
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（2）配制CaCl2溶液： 0.83gCaCl2＋150mL蒸馏水
固定化酶技术的优点： （1）使酶既能与反应物接触，又 能与产物分离； （2）固定在载体上的酶可以被反 复利用。
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在生产实际中使用固定化酶技术 的不足：
一种酶只能催化某一种或某一 类的化学反应，而在生产实际中很 多产物的形成都通过一系列的酶促 反应才能进行，所以操作比较麻烦。
怎么办?
可采用固定化细胞技术。
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实验的过程包括哪些步骤？人教 版生物-探究实验视频-选修-酵母 细胞的固定化.flv
• 你认为实验最重要的步骤是 什么？
试验中应注意的问题是什么？
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二. 实验设计
1. 制备固定化酵母细胞 （1）酵母细胞的活化： 1g干酵母＋10mL蒸馏水→50mL烧杯 →搅拌均匀→放置1h，使之活化。
〖思考2〗活化是指什么？