免疫学应用

❖ 5.疫苗使用的注意事项： ❖ ①疫苗的质量：正规厂家生产、不过期，封口完整。 ❖ ②疫苗的保存与运输：按规定条件保存与运输。 ❖ ③疫苗的稀释与及时使用：器械消毒、按标准稀释、
及时使用。 ❖ ④选择适当的免疫途径： ❖ ⑤制定合理的免疫程序： ❖ ⑥免疫剂量、接种次数及时间间隔： ❖ ⑦疫苗的型别与疫病型别的一致性： ❖ ⑧药物的干扰： ❖ ⑨防止不良反应的发生。
第一节 免疫诊断与检测 免疫学在兽医学的应用主要在病原微生物及其 相关产物的检测与疾病防治多个方面。 一、免疫血清学技术的应用 1. 疾病诊断 用免疫血清学技术通过检测相应抗 原、抗体对动物传染病、寄生虫病等进行诊断。 2. 生物活性物质的超微定量 动物激素、维生素 等，在体内含量极微，但在调节机体的生理活动 中起重要作用，可通过分析测定这些微量物质含 量及变化，研究机体各种生理功能(如生长、生殖 等)。
一、天然被动免疫 新生动物通过母体胎盘、初乳或卵黄从母体获得
某种特异性抗体，从而获得对某种病原体的免疫力 称为天然被动免疫。天然被动免疫在免疫防治中具 有重要意义。由于动物在生长发育的早期(如胎儿 和幼龄动物)，免疫系统还不够健全，对病原体感 染的抵抗力较弱，此时可通过获得母源抗体增强免 疫力，以保证早期的健康生长发育。
由于这些物质含量极低，常规方法不能准确测出。 用放射免疫测定和酶免疫技术已能精确测出ng(109g)或pg(10-12g)/mL水平的物质，已成为测定动植 物、昆虫体中微量激素及其他活性物质，研究动 物生殖、植物生理和生物防治的重要手段。 3. 物种鉴定 各种生物之间的差异都可表现在抗原 性不同，物种种源越远，抗原性差异越大，可用 区分抗原性的血清学反应，进行包括微生物在内 的物种鉴定、物种的分类等。
（3）代谢产物和亚单位疫苗 代谢产物疫苗，如毒素、酶等都可制成疫苗，破 伤风毒素、白喉毒素、肉毒毒素、致病性大肠杆 菌肠毒素，经甲醛灭活后制成的类毒素有好的免 疫原性，可作为主动免疫制剂。 亚单位疫苗是将病毒的衣壳蛋白与核酸分开、除 去核酸用提纯的蛋白质衣壳制成的疫苗。此类苗 保含有病毒的抗原成分，无核酸，因而无不良反 应，使用安全，效果较好。猪口蹄疫、伪狂犬病、 狂犬病等亚单位疫苗已有成功的试验报道。亚单 位疫苗由于制备困难，价格昂贵。
天然被动免疫既可保护胎儿免受病原体的感染， 又可抵御幼龄动物传染病。
在初乳中的IgG、IgM可抵抗败血性感染，IgA可抵 抗肠道病原体的感染。然而母源抗体可干扰弱毒疫 苗对幼龄动物的免疫效果。 二、天然主动免疫
天然主动免疫是指动物在感染某种病原微生物耐 过后产生的对该病原体再次侵入的不感染状态（免 疫力、抵抗力）。
免 疫 学 基 础 七
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免疫学的应用
第一节 免疫诊断与检测 第二节 免疫防治 兽医生物制品指用于动物传染病预防、诊断、
治疗的生物制剂。包括疫苗、诊断液、免疫血清。 （一）疫苗 用于人工自动免疫预防动物传染病 的生物制剂。包括弱毒活疫苗、灭活疫苗、类毒 素和新型疫苗等。 （二）诊断液 用于动物传染病免疫学诊断的生 物制剂。包括诊断抗原、诊断抗体、冻干补体等。 （三）免疫血清 用于动物传染病免疫防治的含 有高效价抗体的动物血清制剂。包括抗菌血清、 抗病毒血清、抗毒素、康复血清、高免蛋黄抗体 等。
（2）灭活疫苗 病原微生物经理化方法灭活后，仍 然保持免疫原性，接种后使动物产生特异性抵抗力， 这种疫苗称为灭活疫苗（死苗）。由于死苗接种后 不能在动物体内繁殖，因此使用接种剂量较大，免 疫期较短，需加入适当的佐剂以增强免疫效果延长 免疫期。
优点是研制周期短、使用安全和易于保存。目前 所使用的有组织灭活苗、油佐剂灭活苗和氢氧化铝 胶灭活苗等。
刺种与注射也是常用的免疫方法，适于某些弱毒苗如 鸡痘与马立克病免疫。另外灭活苗的免疫也必须用注 射的方法进行。刺种与注射方法免疫确实，效果好。 气雾免疫分为喷雾免疫和气溶胶免疫两种方式。喷雾 免疫的雾粒大小为10-100um，在新城疫免疫中，气雾 免疫效果较好，不仅可诱导产生循环抗体，而且也可 产生局部免疫力，但气雾免疫会造成一定程度的应激 反应，容易引起呼吸道感染。
DNA疫苗 这是一种最新的分子水平的生物技术 疫苗，将编码保护性抗原的基因与能在真核细胞 中表达的载体DNA重组，重组的DNA可直接注射 (接种)到动物(如小鼠)体内，目的基因可在动物 体内表达，刺激机体产生体液免疫和细胞免疫。 （5）多价苗与联苗 多价苗是指将同一种细菌 (或病毒)的不同血清型混合制成的疫苗。如巴氏 杆菌多价苗、大肠杆菌多价苗等。联苗是指由两 种以上的细菌(或病毒)联合制成的疫苗，一次免 疫可达到预防几种疾病的目的。
4. 生物性状免疫标记与选择育种 通过分析动物、 植物一些优良性状(如高产、优质、抗逆性等)的特 异性抗原，用血清学方法进行标记选择育种，是 很有前途的方向。 5. 免疫增强药物和疫苗研究 疫苗研究中需用血清 学反应和细胞免疫技术测定免疫效果，研究免疫 增强药物，尤其研究抗肿瘤药物时还需用细胞免 疫技术分析测定对机体细胞免疫功能的增强作用。
自然环境中的致病微生物可通过呼吸道、消化道、 皮肤或黏膜侵入动物机体，在体内不断增殖，与此 同时刺激动物机体的免疫系统产生免疫应答。
三、人工被动免疫 将免疫血清或自然发病动物的康复血清等抗体
制剂人工输入动物体内，使其获得某种特异抵抗 力，称为人工被动免疫。 特点 1. 免疫力产生快（30min)。2. 免疫力维持时 间短，一般1-4周。 免疫血清可用同种动物或异种动物制备，用同种 动物制备的血清称为同种血清，用异种动物制备 的血清称为异种血清。
抗细菌血清和抗毒素通常用大动物(马、牛等)制备， 如用马制备破物风抗毒素，用牛制备猪丹毒血清均为 异种血清。抗病毒血清常用同种动物制备，同种动物 血清的产量有限，但免疫后不引起应答反应，因而比 异种血清免疫期长。
在家禽还常用卵黄抗体制剂进行人工接种，如鸡 群发生IBD时，用高效价IBD卵黄抗体进行紧急接种， 可起到良好的防治效果。
四、人工主动免疫 人工主动免疫是给动物接种疫苗等生物制品，刺 激机体免疫系统发生应答反应，产生特异性免疫 力。 1.与人工被动免疫比较 所接种的物质不是免疫 血清或卵黄抗体，而是刺激免疫应答的各种疫苗、 类毒素等；需要一定的诱导期。如病毒抗原需34d，细菌抗原需5-7d，毒素抗原需2-3周；但人工 主动免疫产生的免疫力持续时间长，免疫期可达 数月甚至数年，而且有回忆反应，某些疫苗免疫 后，可产生终生免疫。
二、细胞免疫检测技术 细胞免疫检测主要包括：T细胞及亚群的计数(玫
瑰花环试验、细胞表面分化抗原分析)、T细胞活性 测定(淋巴细胞转化试验、致敏T细胞毒试验、白细 胞移动抑制试验)、各种淋巴因子的检测以及K细胞、 NK细胞活性试验。
细胞免疫检测技术通常用于四个方面： ①测定机体细胞免疫状态 疾病个体的细胞免疫状 态及水平，以分析其发病机制，对研究免疫缺陷、 自身免疫病、肿瘤免疫以及细胞内病原感染等疾病 过程中免疫功能的变化，尤其重要。
❖ 6.免疫血清：从反复多次注射同一种抗原物质后的 动物体中分离得到的血清（其中存在大量的抗体）。 又称为高免血清或抗血清。
❖ ⑴免疫血清的类型：抗菌血清、抗病毒血清、抗毒 素。
❖ ⑵免疫血清使用的注意事项：
❖ ①早期使用
❖ ②多次足量
❖ ③血清用量
❖ ④途径适当
❖ ⑤防止过敏。
第三节 佐剂与免疫增强剂 一、佐剂 一种物质先于抗原或与抗原混合同时注 入动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该 抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用，这类物 质统称为佐剂或免疫佐剂。 （一）佐剂的作用 可增强抗原物质的抗原性外， 还可通过加入佐剂减少抗原用量和接种次数，增 强抗原所激发的抗体应答，达到产生大量特异性 抗体的目的。
基因缺失疫苗是用基因工程技术将强毒株毒力相 关基因切除构建的活疫苗。该苗安全性好、不易 返祖、免疫力坚实、免疫期长、适于局部接种， 诱导产生黏膜免疫力，因而是较理想的疫苗。 重组活载体疫苗是用基因工程技术将保护性抗原 基因(目的基因)转移到载体中，使之表达。痘病 毒、腺病毒和疱疹病毒等可作载体。 非复制性疫苗又称活-死疫苗，与重组活载体疫 苗类似，但载体病毒接种后只产生顿挫感染，不 能完成复制过程，无排毒的隐患，同时又可表达 目的抗原，产生有效的免疫保护。
2.疫苗的种类 已有的疫苗概括起来分为活疫苗、 灭活疫苗、代谢产物和亚单位疫苗以及生物技术 疫苗，其中生物技术疫苗又分基因工程亚单位疫 苗、合成肽疫苗、抗独特型疫苗，基因工程活疫 苗以及DNA疫苗等。 （1）活疫苗 简称活苗，有强毒苗、弱毒苗和异 源苗三种。 强毒苗是应用最早的疫苗种类，使用强毒进行免 疫有较大的危险，非情况特殊不予使用。
②测定细胞免疫反应能力 抗原注射机体后的细胞 免疫反应，分析该抗原刺激T细胞免疫的表现及其 细胞免疫机制。 ③筛选药物 免疫增强剂或免疫抑制剂药物，或研
究化学药物、物理疗法对机体免疫功能的影响。
④研制淋巴因子 如干扰素、白细胞介素制剂过程
中，测定其活性及效价水平。
第二节 免疫防治 机体对病原微生物的免疫力分为先天性免疫和获 得性免疫两种，前者是动物体在种族进化进程中得 到的天然防御能力，后者是动物体在个体发育过程 中受到病原体及其产物刺激而产生的特异性免疫力。 特异性免疫 又分为主动免疫和被动免疫两种。 用疫苗对动物进行免疫接种经主动免疫方式使动物 获得免疫力，是预防和控制动物传染病的重要手段 和中心工作。 获得性免疫的类型：
（4）生物技术疫苗 生物技术疫苗是利用生物 技术制备的分子水平的疫苗，包括基因工程亚 单位疫苗、合成肽疫苗、抗独特型疫苗、基因 工程活疫苗以及DNA疫苗。
基因工程亚单位疫苗 基因工程亚单位疫苗 是用DNA重组技术，将编码病原微生物保护性抗 原的基因导人受体菌(如大肠杆菌)或细胞，使 其在受体细胞中高效表达，分泌保护性抗原肽 链。提取保护性抗原肽链，加入佐剂即制成基 因工程亚单位疫苗。
合成肽疫苗 合成肽疫苗是用化学合成法，人工合成 病原微生物的保护性多肽，并将其连接到大分子载 体上，再加入佐剂制成的疫苗。 抗独特型疫苗 抗独特型疫苗是免疫调节网络学说发 展到新阶段的产物。抗独特型抗体，可刺激机体产 生与抗原特异性抗体具有同等免疫效应的抗体。但 制备不易，成本较高。 基因工程活疫苗 基因工程活疫苗包括基因缺失疫苗 和重组活载体疫苗及非复制性疫苗三类。